RU2683228C2 - Усовершенствованный способ очистки лактоферрина молока и его продукты - Google Patents
Усовершенствованный способ очистки лактоферрина молока и его продукты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2683228C2 RU2683228C2 RU2015116933A RU2015116933A RU2683228C2 RU 2683228 C2 RU2683228 C2 RU 2683228C2 RU 2015116933 A RU2015116933 A RU 2015116933A RU 2015116933 A RU2015116933 A RU 2015116933A RU 2683228 C2 RU2683228 C2 RU 2683228C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactoferrin
- kda
- milk
- salt
- purification
- Prior art date
Links
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 title claims abstract description 149
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 title claims abstract description 149
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 title claims abstract description 148
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 title claims abstract description 148
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 title claims abstract description 148
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 56
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 51
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 51
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 119
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 69
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 60
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 50
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims abstract description 36
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 31
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 29
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 claims abstract description 16
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 79
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 58
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 58
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 56
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 32
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 15
- 239000002585 base Substances 0.000 description 14
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 13
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 12
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 7
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 4
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 4
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 3
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229920012266 Poly(ether sulfone) PES Polymers 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 2
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000012471 diafiltration solution Substances 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000010808 liquid waste Substances 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 238000004804 winding Methods 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 3',5'-di-O-methyltricetin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009206 Abruptio Placentae Diseases 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 238000012371 Aseptic Filling Methods 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 1
- 208000001362 Fetal Growth Retardation Diseases 0.000 description 1
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 1
- 206010070531 Foetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 244000148687 Glycosmis pentaphylla Species 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000008133 Iron-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010035210 Iron-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000015710 Iron-Deficiency Anemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 description 1
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 244000246386 Mentha pulegium Species 0.000 description 1
- 235000016257 Mentha pulegium Nutrition 0.000 description 1
- 235000004357 Mentha x piperita Nutrition 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 208000006816 Neonatal Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010048685 Oral infection Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- IDDMFNIRSJVBHE-UHFFFAOYSA-N Piscigenin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2)=O)=C1 IDDMFNIRSJVBHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 1
- 235000011034 Rubus glaucus Nutrition 0.000 description 1
- 244000235659 Rubus idaeus Species 0.000 description 1
- 235000009122 Rubus idaeus Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M Sodium oleate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC([O-])=O BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 208000035868 Vascular inflammations Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 235000012216 bentonite Nutrition 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940092782 bentonite Drugs 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000015496 breakfast cereal Nutrition 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 235000015155 buttermilk Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- 229940021722 caseins Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000023011 digestive tract development Effects 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMUKAEUGVCXPDF-UAIGNFCESA-L dilithium;(z)-but-2-enedioate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C(=O)\C=C/C([O-])=O PMUKAEUGVCXPDF-UAIGNFCESA-L 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000001614 effect on membrane Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 231100000479 fetal death Toxicity 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 208000030941 fetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 208000004104 gestational diabetes Diseases 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N glycerol 1,2-dioctadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003979 granulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000001050 hortel pimenta Nutrition 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000010438 iron metabolism Effects 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 208000018773 low birth weight Diseases 0.000 description 1
- 231100000533 low birth weight Toxicity 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 230000010874 maintenance of protein location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 1
- -1 olive oil Chemical compound 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 201000008532 placental abruption Diseases 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 239000000718 radiation-protective agent Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 1
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003885 sodium benzoate Drugs 0.000 description 1
- 229940001607 sodium bisulfite Drugs 0.000 description 1
- 229910001467 sodium calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N tricin Natural products COc1cc(OC)c(O)c(c1)C2=CC(=O)c3c(O)cc(O)cc3O2 BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Способ осуществляют следующим образом. Фильтруют молоко через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа для разделения его на фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, и фракцию фильтрата, содержащую факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа. Во время фильтрации через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа молоко подвергают обработке солью, по меньшей мере, в течение 4 ч, таким образом, что в фильтрат попадают факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа. При этом обработка солью включает поддержание молока или лактоферрина в течение фильтрации через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа при концентрации соли, составляющей по меньшей мере 0,2 М NaCl или эквивалента, или проводимости по меньшей мере 20 мСм. Собирают указанную фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин. Изобретение обеспечивает получение продукта в промышленном масштабе со степенью очистки лактоферрина 98,0%. 4 з.п. ф-лы, 14 ил., 1 табл., 9 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение в целом относится к способам очистки целевых белков молока.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
В течение многих лет молоко домашних животных использовалось в качестве источника белков и других продуктов для пищевой и фармацевтической отраслей промышленности. Известно множество методов выделения этих продуктов. Молоко –это коллоидная суспензия, состоящая в основном из жиров, лактозы и белков, распределенных в воде. Молоко жвачных и лабораторных животных содержит в среднем 30-140 грамм белка на литр, или около 4-17% массовой доли в зависимости от вида. Большую часть этих белков составляют казеины в комплексе с фосфатом кальция, образующие надмолекулярные структуры, известные как мицеллы. Другой важный класс белков молока – это белки сыворотки, состоящие преимущественно из бета-лактоглобулина и альфа-лактальбумина, но включающие также лактоферрин, иммуноглобулины и сывороточный альбумин.
Белки молока, как правило, выделяют с помощью сочетания способов, включая методы мембранной фильтрации и ионообменной адсорбции.
Лактоферрин – это железосвязывающий гликопротеин с молекулярной массой 80 кДа, содержащийся в биологических жидкостях, таких как слюна, желчь, бронхиальная слизь, желудочно-кишечные соки, шеечно-влагалищная слизь, семенная жидкость и молоко. Наиболее богатыми источниками лактоферрина являются молоко и молозиво млекопитающих. Концентрация лактоферрина в обезжиренном коровьем молоке обычно невелика, как правило, она находится в пределах 80-200 мг/мл в зависимости от условий предварительной обработки обезжиренного молока, в том числе пастеризации. После осаждения присутствующего в молоке казеина концентрация лактоферрина в сыворотке коровьего молока составляет, как правило, 10-100 мг/мл в зависимости от предварительной физической и химической обработки сыворотки.
Лактоферрин имеет множество предполагаемых биологических функций, включая регуляцию метаболизма железа, иммунную функцию и участие в эмбриональном развитии. Лактоферрин имеет антимикробную активность в отношении ряда патогенов, включая грамположительные и грамотрицательные бактерии и грибы, в том числе дрожжи. Антимикробный эффект лактоферрина основан на его способности связывать железо, необходимое для роста патогенных микроорганизмов. Лактоферрин также ингибирует репликацию некоторых вирусов и повышает чувствительность некоторых бактерий к антибиотикам и лизоциму путем связывания с липидом А - компонентом липополисахаридов на бактериальных мембранах.
Целью предпочтительного варианта реализации настоящего изобретения является обеспечение усовершенствованного способа очистки лактоферрина молока, в частности коровьего, для повышения степени очистки.
Все ссылки, в том числе патенты или патентные заявки, цитируемые в данном описании изобретения, включены в данный документ посредством ссылки. Очевидно, что хотя данное описание ссылается на определенное количество предшествующих публикаций, это не является признанием того, что любой из этих документов образует часть общего уровня знаний в данной области техники.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Первый аспект изобретения предлагает способ очистки лактоферрина молока, включающий фильтрацию молока с целью его разделения на фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, и фракцию фильтрата, содержащую факторы роста и/или РНКазы, причем перед и/или во время фильтрации молоко подвергают обработке солью, вследствие чего в фильтрат попадают факторы роста и/или РНКазы.
При очистке лактоферрина молока с помощью мембранной фильтрации с отсечением от 30 кДа до 50 кДа, авторы изобретения обнаружили, что ультраконцентрат лактоферрина был загрязнен факторами роста и РНКазами. Поскольку молекулярная масса этих факторов роста и РНКаз составляет менее чем 30 кДа, они должны были пройти через мембрану и попасть в фильтрат, таким образом, они не должны были присутствовать в виде примесей во фракции ультраконцентрата лактоферрина. Поэтому обнаружение факторов роста и РНКаз в ультраконцентрате было неожиданным. В процессе дальнейшей очистки фракции лактоферрина авторы изобретения обнаружили, что добавление большого количества соли в молоко перед фильтрацией удаляет факторы роста и РНКазы из ультраконцентрата, таким образом, дополнительно очищая лактоферрин. В присутствии соли факторы роста и РНКазы обнаруживались в фильтрате.
Не желая быть связанными с какой-либо теорией, авторы изобретения предполагают, что при обычных условиях РНКазы и факторы роста, присутствующие в молоке, агрегируют или другим путем обретают массу, большую, чем их отдельно взятые молекулярные массы. Предполагается, что обработка солью приводит к дезагрегации или диссоциации РНКаз и факторов роста.
Исходя из этого, в альтернативном варианте способ по первому аспекту изобретения предлагает способ очистки лактоферрина молока, включающий фильтрацию молока с целью его разделения на фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, и фракцию фильтрата, содержащую факторы роста и/или РНКазы, причем перед и/или во время фильтрации молоко подвергают обработке солью, способствующей дезагрегации или диссоциации любой массы РНКаз или факторов роста, вследствие чего факторы роста и/или РНКазы попадают в фильтрат.
Не желая быть связанными с какой-либо теорией, авторы изобретения предполагают, что при условиях низкой ионной силы белковые агрегаты могут ассоциироваться с мембраной, тем самым образуя слой с меньшим видимым размером пор, чем у мембраны, что предотвращает прохождение РНКазы и факторов роста через мембрану при фильтровании молока. Предполагается, что обработка солью предотвращает образование белкового слоя или удаляет его, что позволяет любым РНКазам и факторам роста проходить через мембрану и попадать в фильтрат.
Исходя из этого, в альтернативном варианте способ по первому аспекту изобретения предлагает способ очистки лактоферрина молока, включающий фильтрацию молока с целью его разделения на фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, и фракцию фильтрата, содержащую факторы роста и/или РНКазы, причем перед и/или во время фильтрации молоко подвергают обработке солью, способствующей прохождению РНКазы или факторов роста через мембрану, вследствие чего факторы роста и/или РНКазы попадают в фильтрат.
Второй аспект изобретения предлагает лактоферрин, полученный с помощью способа по первому аспекту изобретения.
В одном варианте реализации изобретения лактоферрин подвергают дальнейшей очистке.
Третий аспект изобретения предлагает применение лактоферрина по второму аспекту изобретения в качестве противоракового, противовирусного, антимикробного или противовоспалительного агента, для лечения пролиферативных расстройств, таких как рак, особенно включающих твердые опухоли, для лечения злокачественных новообразований и гиперпролиферативных заболеваний, для лечения костных заболеваний путем стимуляции остеогенеза, для лечения вирусных или микробных инфекций, для лечения ран роговицы, для повышения иммунитета, для лечения В-клеточной неходжкинской лимфомы, для лечения септического шока, для улучшения здоровья кишечника путем повышения числа бифидобактерий при снижении количества E.coli, Streptococcus и Clostridium, для лечения воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК), для стимулирования иммунитета и сопротивляемости к болезням, для управления системными воспалениями, чтобы предотвратить отторжение трансплантата органа и реакцию "трансплантат против хозяина", для улучшения здоровья матери и плода, для улучшения здоровья нейронов и развития кишечника новорожденного, чтобы уменьшить вероятность ассоциированных с беременностью осложнений, таких как преэклампсия, преждевременные роды, гестационный диабет, выкидыш, внутриутробная гибель плода, невынашивание, низкий вес при рождении, отслойка плаценты и внутриутробная задержка роста, особенно у женщин с гипоферремией или железодефицитной анемией, для лечения дефицита железа и анемии, особенно у беременных женщин, для профилактики неонатального сепсиса у недоношенных новорожденных, для заживления ран, для облегчения формирования биопленки, для лечения инфекций полости рта, включая периодонтит, для лечения диабетических язв, при лечении муковисцидоза, для уменьшения боли, для лечения протеинурии, для стимуляции роста клеток кожи, в качестве радиопротекторного агента, при лечении инфекций мочевыводящих путей, при лечении дегенеративных заболеваний суставов, при лечении диабета, при лечении респираторных расстройств, для сокращения циркулирующего холестерина, при сосудистом воспалении, атеросклерозе и сердечно-сосудистых заболеваниях, а также все другие применения лактоферрина, известные специалистам в данной области техники.
В альтернативном варианте третий аспект изобретения предлагает лактоферрин, полученный с помощью способа по первому аспекту изобретения, для применения как предлагается в третьем аспекте изобретения или для использования при производстве лекарственных средств, предназначенных для применения как предлагается в третьем аспекте изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Фигура 1 иллюстрирует, как с увеличением проводимости повышается интенсивность потока фильтрата через мембрану с отсечением 50 кДа.
Фигура 2 иллюстрирует, как при ультрафильтрации в условиях возрастающей концентрации хлорида натрия повышается степень очистки удерживаемого лактоферрина благодаря лучшему проникновению низкомолекулярных загрязняющих веществ через мембрану (на примере РНКаз).
Фигура 3 иллюстрирует концентрацию лактоферрина (●), низкомолекулярных белков (на примере РНКаз, ♦) и белка (▲) в фильтрате, полученном с использованием УФ-мембраны с отсечением 50 кДа.
Фигуры 4 А, В, С и D иллюстрируют анализ лактоферрина методом эксклюзионной ВЭЖХ при возрастающих концентрациях хлорида натрия, указывающий на то, что увеличение концентрации соли приводит к дезагрегации крупных частиц. Концентрация хлорида натрия в течение первых 50 минут показывает важное различие между четырьмя хроматограммами: A, 0 М NaCl; В, 0,16 М NaCl; С, 0,32 М NaCl и D, 0,48 М NaCl.
Фигуры 5А и В иллюстрируют ультрафильтрацию раствора лактоферрина через мембрану с отсечением 50 кДа, проведенную в аппарате Vivacell в присутствии хлорида натрия (0, 1,5, 3, 4, 5, или 6% NaCl), и указывают на то, что в присутствии хлорида натрия мембрана с отсечением 50 кДа избирательно пропускает РНКазы и другие факторы роста. A: образцы фильтрата; B, образцы фильтрата.
Фигуры 6A и 6B иллюстрируют ультрафильтрацию раствора лактоферрина через мембрану с отсечением 50 кДа, проведенную в аппарате Vivacell в присутствии хлорида натрия (0, 1,5, 3, 4, 5, or 6% NaCl), и указывают на то, что в присутствии хлорида натрия мембрана с отсечением 50 кДа избирательно пропускает РНКазы и другие факторы роста. A: образцы фильтрата; B, образцы фильтрата.
Фигура 7 иллюстрирует, как при ультрафильтрации в условиях возрастающей проводимости повышается степень очистки удерживаемого лактоферрина.
Фигура 8 иллюстрирует, что наблюдаемая повышенная степень очистки лактоферрина связана с увеличением интенсивности переноса загрязняющих факторов роста, таких как РНКазы. Интенсивность переноса факторов роста быстро увеличивается от 0 мСм до 20 мСм.
Фигура 9 иллюстрирует степень очистки лактоферрина в исходном материале лактоферрина, основной пик катионнообменной хроматографии и материал, дополнительно очищенный с помощью УФ-мембраны с отсечением 50 кДа. Целевая степень очистки лактоферрина составляет 98%.
Фигура 10 иллюстрирует повышение степени очистки лактоферрина в процессе прохождения через мембраны с отсечением 50 кДа. Образцы, проанализированные с помощью катионообменной ВЭЖХ в жидкой форме, изображены серым цветом, образцы, проанализированные с помощью катионообменной ВЭЖХ в форме порошка, изображены черным цветом.
Фигура 11 иллюстрирует, что при ультрафильтрации растворов лактоферрина, содержащих хлорид натрия, увеличение номинального отсечения по молекулярной массе приводит к повышению количества белка, переходящего в фильтрат ( _ ▲ _), и улучшает удержание белка ( ... ● ...) и лактоферрина ( _ ■ _). Результаты были получены при экспериментальном отделении 2 мг/мл раствора лактоферрина, содержащего 6% хлорида натрия, с помощью УФ-мембран Sartorius Stedium Vivacell 250 с указанной пористостью.
Фигура 12 иллюстрирует, что проницаемость мембраны повышается с увеличением номинального отсечения по молекулярной массе (данные получены при пропускании воды через фильтр Synder при 25°С и 3,4 бар), но существенно не отличается в диапазоне от 30 до 50 кДа.
Фигура 13 иллюстрирует, что при ультрафильтрации растворов лактоферрина, содержащих хлорид натрия, увеличение номинального отсечения по молекулярной массе приводит к повышению степени очистки, пока пористость мембраны не достигнет 50 кДа. Результаты были получены при экспериментальном отделении 2 мг/мл раствора лактоферрина, содержащего 6% хлорида натрия, с помощью УФ-мембран Sartorius Stedium Vivacell 250 с указанной пористостью.
Фигура 14 иллюстрирует степень очистки лактоферрина на установке UF7 при оснащении ее традиционной мембраной с отсечением 5 кДа или новой мембраной с отсечением 50 кДа. Нанесенные значения являются средними и вертикальная черта указывает 95% доверительный интервал.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение предлагает усовершенствованные способы очистки лактоферрина молока или обогащения молока лактоферрином.
Авторы изобретения признают необходимость способа, позволяющего эффективное получение обогащенного лактоферрина.
Термины "очищенный" или "обогащенный" в отношении лактоферрина, как используется в данном документе, означают, что соотношение белок лактоферрин:суммарный белок в ультраконцентрате больше, чем соотношение в молоке до этапа фильтрации. Фракция, которая может считаться обогащенной или очищенной, должна содержать по меньшей мере на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 25, 27, 28 или 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98, 98, или 99% масс/масс больше лактоферрина, чем в молоке до этапа фильтрации.
Способ по первому варианту реализации изобретения нацелен на увеличение степени очистки ультраконцентрата лактоферрина до 100%.
Как используется в данном документе, термин "фракция" относится к частично очищенной части молока.
Термином "эффективный" обозначается недорогой и быстрый способ по сравнению со способами обогащения белков, которые используются в настоящее время.
Ссылка на молоко в данном документе подразумевает цельное молоко, обезжиренное молоко, пахту, сыворотку (например, кислую или сырную/сычужную сыворотку) или производное сыворотки (например, концентрат белка сыворотки или отфильтрованный изолят белка сыворотки) и молозиво. Ссылка на молоко также подразумевает фракции молока, например, фракции, подвергнутые этапам очистки, таким как катионообменная хроматография. К таким фракциям относятся основной белок молока и фракции обогащенного лактоферрина.
Специалистам в данной области техники очевидно, что молоко может быть получено от любых животных, способных к лактации, например, жвачных животных, таких как коровы, овцы, буйволы, козы и олени, нежвачных животных, включая приматов, в частности, человека, и животных с однокамерным желудком, таких как свиньи. Предпочтительно, чтобы в способе по настоящему изобретению использовалось обезжиренное молоко, полученное из цельного коровьего молока.
Фильтрация, применяемая в способе по первому аспекту изобретения, представляет собой мембранную фильтрацию. В одном варианте реализации изобретения мембрана имеет отсечение по размеру 25 кДа, 30 кДа, 35 кДа, 40 кДа, 45 кДа, 50 кДа, 55 кДа, 60 кДа, 65 кДа, 70 кДа и 75 кДа. Предпочтительный диапазон отсечения составляет 30 кДа или более и 50 кДа или менее.
Под фильтрацией может подразумеваться ультрафильтрация или диафильтрация, или то и другое.
Обработка молока солью, используемая в способе по первому аспекту изобретения, происходит путем добавления количества соли, достаточного для того, чтобы ионная сила молока составила по меньшей мере 0,2 М (1,1%) NaCl или эквивалента. В одном варианте реализации изобретения ионная сила поддерживается по меньшей мере на таком уровне в течение периода, необходимого для требуемого повышения степени очистки лактоферрина. Этот период может составлять по меньшей мере 10 минут, 15 минут, 20 минут, 30 минут, 45 минут, 1 час, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов, 12 часов или более в зависимости от исходного материала молока и желаемого повышения степени очистки.
В альтернативном варианте обработка солью, используемая в способе очистки по первому аспекту изобретения, происходит путем добавления количества соли, достаточного для того, чтобы проводимость молока составила по меньшей мере 20 мСм. В одном варианте реализации изобретения проводимость поддерживается по меньшей мере на таком уровне на протяжении всего этапа фильтрации.
Как правило, ионная сила молока значительно ниже, чем 0,2 М NaCl или эквивалента, или проводимость составляет менее 20 мСм, следовательно, обработка солью происходит путем добавления соли с целью увеличения ионной силы или проводимости молока до желаемого уровня. Тем не менее, в некоторых случаях, например, когда молоко является фракцией, которая была подвергнута катионному обмену, ионная сила молока составляет по меньшей мере 0,2 М NaCl или эквивалента или проводимость составляет 20 мСм или более. Обычно фракции после катионного обмена подвергают обработке для удаления соли (например, диафильтрации водой). Однако согласно способу по первому аспекту изобретения обработка солью производится таким образом, чтобы поддерживать ионную силу молока по меньшей мере на уровне 0,2 М (1,1%) NaCl или эквивалента или проводимость молока по меньшей мере на уровне 20 мСм во время этапа фильтрации.
Как используется в данном документе, термин "проводимость" обозначает способность материала проводить электрический ток. Проводимость обычно измеряется с помощью измерителя проводимости, такого как Hach Sension 5. Специалистам в данной области техники известны подходящие альтернативные средства измерения проводимости. Между концентрацией ионов натрия и проводимостью существует в целом линейная зависимость.
Для обработки солью могут использоваться соли помимо NaCl, альтернативы которому хорошо известны специалистам в данной области техники. Например, может использоваться любой растворимый нетоксичный буфер, такой как растворимые соли: хлорид, цитрат, фосфат, ацетат, сульфат, бикарбонат, гидроксид, имидазол или малеат натрия, калия, кальция, магния или лития. Также могут использоваться синтетические цвиттерионные буферы, такие как HEPES, Trizma или трицин.
Для отделения РНКазы и факторов роста от лактоферрина ионная сила молока перед этапом фильтрации должна быть больше или равна 0,2 М (1,1%) NaCl или эквивалента. В одном варианте реализации изобретения ионная сила молока увеличивается при добавлении 1,1% соли, 1,5% соли, 2% соли, 2,5% соли, 3% соли, 3,5% соли, 4% соли, 4,5% соли, 5% соли, 5,5% соли, 6% соли или более. В другом варианте реализации изобретения ионная сила молока увеличивается до 0,2М, 0,22M, 0,24М, 0,26М, 0,28М, 0,30М, 0,32М, 0,34M, 0,36M, 0,38М, 0,40M, 0,42M, 0,44M , 0,46M, 0,48M, 0,50М, 0,6М, 0,7М, 0,8М, 0,9М, 1,0М NaCl или эквивалента или более. В другом варианте реализации изобретения проводимость составляет 20 мСм, 30 мСм, 40 мСм, 50 мСм, 60 мСм, 70 мСм, 80 мСм, 90 мСм, 100 мСм, 110 мСм, 120 мСм или более.
В предпочтительном варианте реализации изобретения обработка солью происходит путем добавления 0,2-0,5 M NaCl или KCl в молоко перед этапом фильтрации.
В одном варианте реализации изобретения обработка солью проводится при 4-10 °С.
В одном варианте реализации изобретения обработка солью проводится при 10-30 °С.
В одном варианте реализации изобретения обработка солью проводится при 30-50 °С.
В одном варианте реализации изобретения обработка солью проводится при 50-70 °С.
В одном варианте реализации изобретения обработка солью проводится при менее чем 20 °С.
В другом варианте реализации изобретения обработка солью проводится при 50 °С или выше, так как при температурах выше 50 °С уменьшается интенсивность образования бактерий группы кишечной палочки. Однако, поскольку лактоферрин денатурирует примерно при 70 °С, проведение обработки солью при 60 °С и выше может привести к снижению выхода.
В одном варианте реализации изобретения этап фильтрации осуществляется при 4-10 °С.
В одном варианте реализации изобретения этап фильтрации осуществляется при 10-30 °С
В одном варианте реализации изобретения этап фильтрации осуществляется при 30-50 °С
В одном варианте реализации изобретения этап фильтрации осуществляется при 50-70 °С
В одном варианте реализации изобретения обработка солью осуществляется при атмосферном давлении.
В одном варианте реализации изобретения этап фильтрации осуществляется при трансмембранном давлении менее 2,5 бар на мембрану, более предпочтительно – менее 2,0 бар, еще более предпочтительно – менее 1,5 бар, но в идеальном варианте – 1,0-1,4 бар, хотя давление в 0,0-1,0 бар приемлемо, однако при нем снижается интенсивность трансмембранного потока.
"Лечение" или "терапия" относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, цель которых состоит в том, чтобы предотвратить, улучшить, уменьшить или замедлить (облегчить) или улучшить состояние, заболевание или расстройство.
"Лечение" или "терапия", как используется в данном документе, охватывает любое лечение или профилактику состояния у позвоночного животного, млекопитающего, в частности у человека.
"Предупреждение", "предотвращение", "превентивный" или "профилактический" относится к предотвращению возникновения или препятствованию или защите от возникновения состояния, заболевания, расстройства или фенотипа, включая аномалию или симптом. Субъект, нуждающийся в профилактике, может иметь склонность к развитию заболевания.
Термин "улучшить" или " улучшение" относится к уменьшению, снижению или устранению состояния, заболевания, расстройства или фенотипа, включая аномалию или симптом. Субъект, нуждающийся в лечении, может уже иметь состояние или может иметь склонность к развитию состояния или может быть тем, у кого необходимо предотвратить развитие состояния.
Термин "поддерживать", как используется в данном документе, относится к поддержанию состояния на уровне, предшествующем лечению.
Лактоферрин по второму варианту реализации изобретения может входить в состав фармацевтической, ветеринарной или нутрицевтической композиции, а также пищевых продуктов.
Фармацевтической называется композиция, подходящая для введения людям. Ветеринарной называется композиция, подходящая для введения животным. Как правило, в таких композициях содержится очищенный лактоферрин или по меньшей мере все компоненты композиции могут пройти проверку.
Фармацевтическая или ветеринарная композиция может содержать один или более носителей и, необязательно, другие терапевтические агенты. Каждый носитель, разбавитель, адъювант и/или вспомогательное вещество может быть "приемлемым".
Под "приемлемым" подразумевают материал, который не является биологически или в других отношениях непригодным, т.е. материал можно вводить индивидууму в сочетании с выбранным активным агентом, не вызывая каких-либо нежелательных биологических эффектов или вредных взаимодействий с любым из остальных компонентов в фармацевтической или ветеринарной композиции, в которой он содержится. Аналогично "приемлемая" соль или сложный эфир нового соединения, как используется в данном документе, – это соль или сложный эфир, которые не являются биологически или в других отношениях непригодными.
Как используется в данном документе, «носитель» подразумевает приемлемый растворитель, суспендирующее средство или основу для доставки агента субъекту. Носитель может быть жидким или твердым и выбирается в соответствии с предполагаемым способом введения. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в том смысле, что он не является биологически или в других отношениях непригодным, т.е. носитель может вводиться субъекту в сочетании с агентом, не вызывая какой-либо существенной нежелательной реакции.
Фармацевтическая или ветеринарная композиция может применяться перорально, местно или парентерально в составах, содержащих обычные нетоксичные приемлемые носители, адъюванты и основы.
Как используется в данном документе, термин "парентеральный" включает внутривенную, внутриартериальную, внутрибрюшинную, внутримышечную, подкожную, субконъюнктивальную, внутриполостную, трансдермальную и подкожную инъекции, аэрозоль для введения в легкие или носовую полость или введение путем инфузии, например, с помощью осмотического насоса.
Фармацевтическая или ветеринарная композиция может вводиться перорально в форме таблеток, водных или масляных суспензий, таблеток для рассасывания, пастилок, порошков, гранул, эмульсий, капсул, сиропов или эликсиров. В целях получения фармацевтически первоклассных приятных на вкус препаратов композиция для перорального применения может содержать одно или более веществ, выбранных из группы, включающей подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты. Подходящие подсластители включают сахарозу, лактозу, глюкозу, аспартам или сахарин. Подходящие разрыхлители включают кукурузный крахмал, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, ксантановую камедь, бентонит, альгиновую кислоту или агар. Подходящие ароматизаторы включают масла перечной мяты, грушанки и ароматизаторы вишни, апельсина или малины. Подходящие консерванты включают бензоат натрия, витамин Е, альфа-токоферол, аскорбиновую кислоту, метилпарабен, пропилпарабен или бисульфит натрия. Подходящие смазывающие вещества включают стеарат магния, стеариновую кислоту, олеат натрия, хлорид натрия или тальк. Подходящие вещества, замедляющие высвобождение активного агента, включают моностеарат или дистеарат глицерина. Таблетки могут содержать агент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, пригодными для изготовления таблеток.
Такими вспомогательными веществами могут быть, например, (1) инертные разбавители, такие как карбонат кальция, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; (2) гранулирующие веществаи разрыхлители, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; (3) связывающие вещества, такие как крахмал, желатин или гуммиарабик; и (4) смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Эти таблетки могут не иметь оболочки или покрываться оболочкой известными способами с целью замедления распадания и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, что обеспечивает пролонгированное действие препарата. Например, может быть использовано вещество, замедляющее высвобождение активного агента, такое как глицерил моностеарат или глицерил дистеарат.
Препараты для парентерального введения включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примеры неводных растворителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и инъекционные органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Водные носители включают воду, спиртовые/водные растворы, эмульсии или суспензии, в том числе солевые и буферные среды. Парентеральные основы включают раствор хлорида натрия, декстрозу Рингера, декстрозу и хлорид натрия, Рингер-лактатные внутривенные основы включают восполнители жидкости и питательных веществ, восполнители электролитов (например, на основе декстрозы Рингера) и т.п. Также могут присутствовать консерванты и другие добавки, такие как, например, противомикробные средства, антиоксиданты, хелатирующие вещества, факторы роста и инертные газы и т.п.
Фармацевтическая или ветеринарная композиция может также содержать другие активные соединения, обеспечивающие вспомогательные, дополнительные или усовершенствованные терапевтические функции. Также фармацевтическая или ветеринарная композиция может быть упакована в контейнер, пакет или дозатор вместе с инструкциями для введения.
Фармацевтическая или ветеринарная композиция может вводиться однократно или с периодичностью, такой как один раз в день, один раз в неделю и один раз в месяц.
Режим дозирования может корректироваться в зависимости от периода полувыведения активного агента или тяжести состояния пациента.
Как правило, фармацевтическую или ветеринарную композицию вводят в виде болюсной дозы, чтобы максимизировать уровни активного агента в крови в течение наибольшего периода времени после введения дозы. После болюсной дозы также может быть использована непрерывная инфузия.
Лактоферрин по второму аспекту изобретения может входить в состав нутрицевтических композиций или пищевых продуктов.
Термин "нутрицевтик", как используется в данном документе, относится к съедобному продукту, выделенному или очищенному из пищевого продукта, в данном случае из молочного продукта, который зарекомендовал себя как оказывающий благоприятное физиологическое действие или обеспечивающий защиту от острого или хронического заболевания или травмы или их облегчение при пероральном введении. Таким образом, нутрицевтик может быть представлен в форме биологически активной пищевой добавки или препарата, который применяется отдельно или в смеси с пищевыми продуктами или напитками.
Нутрицевтическая композиция может быть в форме растворимого порошка, жидкости или готового к употреблению препарата. Кроме того, биологически активная пищевая добавка может быть в твердой форме в виде пищевых продуктов; например, в виде готового к употреблению батончика или сухого завтрака. Также в ней могут присутствовать различные ароматизаторы, волокна, подсластители и другие добавки.
Предпочтительно, чтобы нутрицевтик имел приемлемые органолептические свойства (такие как приемлемые запах, вкус и вкусовые качества), также он может дополнительно содержать по меньшей мере один витамин и/или минерал, выбранный из ряда: А, В1, В2, В3, В5, В6, В11, В12, биотин, C, D, E, H и К и кальций, магний, калий, цинк и железо.
Нутрицевтические композиции могут производиться традиционными способами; например, композиция может быть произведена путем смешивания белка с другими добавками. Если используется эмульгатор, он также может войти в состав смеси. На этом этапе могут быть добавлены дополнительные витамины и минералы, однако обычно их добавляют позже во избежание термической деградации.
Если необходимо получить порошкообразную нутрицевтическую композицию, белок может быть смешан с дополнительными порошкообразными компонентами. Массовая доля влаги в порошке не должна превышать 5%. Для образования жидкой смеси порошок может быть смешан с водой, предпочтительно подвергнутой обратному осмосу.
Если готовая нутрицевтическая композиция должна быть представлена в жидкой форме, готовой к употреблению, ее можно нагреть, чтобы уменьшить бактериальную нагрузку. Если желательно произвести жидкую нутрицевтическую композицию, жидкой смесью предпочтительно заполняют подходящие контейнеры в асептических условиях. Заполнение контейнеров в асептических условиях может осуществляться с помощью методов, общедоступных в данной области техники. Подходящее устройство для осуществления асептического заполнения такого рода является коммерчески доступным.
Предпочтительно, чтобы нутрицевтическая композиция также содержала один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. Нутрицевтические композиции могут содержать буферы, такие как нейтральный забуференный физиологический раствор, забуференный фосфатом физиологический раствор и т.п.; углеводы, такие как глюкоза, манноза, сахароза или декстраны; маннит; белки; полипептиды или аминокислоты, такие как глицин; антиоксиданты; хелатирующие вещества, такие как ЭДТА; адъюванты и консерванты.
Нутрицевтической может быть молочная смесь, в частности адаптированная для человека молочная смесь, предназначенная для новорожденных.
Лактоферрин по второму аспекту изобретения, представленный в виде продукта питания, может принимать форму биологически активной пищевой добавки, спортивной биологически активной пищевой добавки или молочной смеси. В одном варианте реализации изобретения продукт питания представляет собой корм для животных.
В данном описании слово "содержать" или его вариации, такие как "содержит" или "содержащий", подразумевает включение определенного элемента или целого или группы элементов или целых, но не исключение любого другого элемента или целого или группы элементов или целых, если контекст не подразумевает иного.
Следует также отметить, что используемые в описании изобретения слова в единственном числе подразумевают также и множественное число, если из контекста явно не следует иное.
Специалисту в данной области техники должно быть очевидно, что хотя изобретение было описано довольно подробно в целях ясности и понимания, различные модификации и изменения в вариантах реализации изобретения и методах, приведенных в данном документе, могут быть сделаны без выхода за пределы раскрытого в данном описании изобретательского замысла.
Примеры:
Ниже приведено более подробное описание изобретения с использованием следующих примеров. Примеры приведены исключительно в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения, если не указано иное. Таким образом, данное изобретение охватывает любые и все варианты, которые очевидны, исходя из идеи настоящего изобретения.
Пример 1: Ультрафильтрация лактоферрина для удаления малых молекул и повышения степени очистки лактоферрина
Экспериментальная установка для ультрафильтрации APV была оснащена одной 6-дюймовой мембраной с отсечением 50 кДа (Synder), а затем стабилизирована таким образом, что базовое давление составило 3,2-3,4 бар, а трансмембранное давление составило 1,2-1,4 бар. Раствор лактоферрина (2 мг/мл) был разделен на шесть частей по 2 л. В шести экспериментах, которые отличались между собой только проводимостью (0, 20, 40, 60, 80 или 100 мСм), по 2 л раствора лактоферрина помещали в расходный резервуар установки для ультрафильтрации, доводили водой до 170 л и добавляли раствор хлорида натрия до достижения необходимой проводимости. Ультраконцентрат возвращали в расходный резервуар установки для ультрафильтрации, и собирали фильтрат. Удаленный фильтрат заменялся диафильтрационным раствором той же проводимости. Степень очистки оценивали с помощью катионообменной ВЭЖХ.
Было обнаружено, что увеличение концентрации соли повышает интенсивность потока фильтрата через мембрану (Фигура 1). При этом степень очистки лактоферрина увеличилась с 95% (0 мСм) до 98,4% (100 мСм) (Фигура 2). На Фигуре 3 представлены концентрации компонентов фильтрата, причем при 100 мСм количество лактоферрина и суммарного белка возрастает. Повышение степени очистки и увеличение интенсивности потока доказывают, что дополнительный хлорид натрия улучшает способ и для оптимального осуществления способа необходимая проводимость имеет значение по меньшей мере 40 мСм. Раствор элюированного из хроматографической установки лактоферрина и собранный в UF4 должен иметь 96 мСм. Поскольку оптимальное повышение степени очистки лактоферрина происходит в диапазоне между 80 мСм и 100 мСм, такой прибор совместим с существующим способом и не требует дополнительной обработки.
Пример 2: Соль приводит к дезагрегации лактоферрина
Лактоферрин (лактоферрин составляет 95% суммарного белка) был растворен в воде до концентрации 10 мг/мл. ВЭЖХ снабдили колонкой Superdex 200 10/300 GL (GE Healthcare) и уравновесили буфером А (Трис-HCl (рН 7,1 г/л)) при скорости потока 0,5 мл/мин. Буфер В – это Трис-HCl (1 г/л), содержащий 1М хлорида натрия (рН 7), и объем инъецированного образца был 100 мкл. Количество буфера В составляло 0% от 0 мин до 50 мин, возросло до 100% буфера В от 50 мин до 90 мин, а затем возросло до 16% буфера В от 90 мин до 150 мин. Во время каждого из последующих запусков соль от 0 мин до 50 мин и от 90 мин до 150 мин увеличилась на 16% В.
Как показано на Фигуре 4, элюции лактоферрина соответствует один основной пик приблизительно на 28 минуте, за которым следуют несколько меньших пиков, включающих фрагменты лактоферрина и белки кроме лактоферрина. На хроматограмме D показан типичный профиль лактоферрина в 0,48M растворе NaCl. На хроматограмме А, полученной при отсутствии NaCl, показан меньший пик лактоферрина и больший его пик на 94 минуте. Пик на 94 минуте соответствует лактоферрину, который находился в нерастворимой форме до тех пор, пока на 50 минуте повышенный уровень соли не начал диссоциировать агрегированный лактоферрин, обеспечивая его прохождение через слой содержащейся в колонке смолы.
Результаты, показанные на Фигуре 4, подтверждают, что соль диссоциирует белки, присутствующие в 95% порошке лактоферрина, при этом диссоциированными белками не обязательно являются только молекулы лактоферрина, и приводит к тому, что отдельные белки проходят через мембрану с отсечением 50 кДа. Результаты показывают, что для возникновения эффекта диссоциации требуется более 0,32 М NaCl.
При повторении описанного выше эксперимента с жидкими пробами наблюдались аналогичные результаты.
Пример 3: Ультрафильтрация лактоферрина с целью удаления малых молекул и повышения степени очистки лактоферрина
Шесть устройств Vivacell 250 (Sartorius) были оснащены мембранами с отсечением 50 кДа. Каждое устройство было заполнено раствором лактоферрина с концентрацией 1 мг/мл до отметки 250 мл, при этом концентрация хлорида натрия в каждом растворе различалась и составляла 0, 1,5, 3, 4, 5 или 6% NaCl. Давление в ячейках достигало 3 бар. Образцы ультраконцентрата и фильтрата были собраны и проанализированы с помощью катионообменной ВЭЖХ.
Было установлено, что повышение концентрации соли увеличивает интенсивность переноса факторов роста (представленных РНКазами), а также повышает степень очистки лактоферрина в ультраконцентрате (Фигуры 5 и 6).
Пример 4: Ультрафильтрация лактоферрина с целью удаления малых молекул и повышения степени очистки лактоферрина
Установка для ультрафильтрации была оснащена одной 6-дюймовой мембраной с отсечением 50 кДа (Synder), а затем стабилизирована таким образом, что базовое давление составило 3,2-3,4 бар, а трансмембранное давление составило 1,2-1,4 бар. Раствор лактоферрина (2 мг/мл) был разделен на шесть частей по 2 л. В шести экспериментах, которые отличались между собой только проводимостью (0, 20, 40 или 60 мСм), по 2 л раствора лактоферрина помещали в расходный резервуар установки для ультрафильтрации и доводили водой до 170 л и добавляли раствор хлорида натрия до достижения необходимой проводимости. Ультраконцентрат возвращали в расходный резервуар установки для ультрафильтрации, и собирали фильтрат. Удаленный фильтрат заменялся диафильтрационным раствором той же проводимости. Степень очистки оценивали с помощью катионообменной ВЭЖХ.
Степень очистки лактоферрина увеличилась с 90,9% (0 мСм) до 93,5% (60 мСм) (Фигура 7), в целом на 2,5%. Повышение степени очистки лактоферрина было достигнуто за счет селективного удаления факторов роста (на примере РНКаз, Фигура 8).
Пример 5: Использование вторичной катионообменной хроматографии с ультрафильтрацией или без нее с целью повышения степени очистки лактоферрина
Порошок лактоферрина (40 г, 95,2% лактоферрина) был растворен в воде (200 мл) с помощью Stomacher. Образец отбирали и анализировали с помощью катионообменной ВЭЖХ. Раствор лактоферрина наносили на колонку (50 ммД × 1000 ммл), заполненную смолой Fast Flow SP (GE Healthcare). Связанный лактоферрин элюировал из смолы по длине колонки в линейном градиенте 3 л, в пределах от 0% до 5,8% (1 М) хлорида натрия. Основной пик лактоферрина был обнаружен и проанализирован при помощи катионообменной ВЭЖХ.
Небольшое количество лактоферрина (5 мл), соответствующего основному пику, разместили в ультрафильтрационном устройстве с отсечением 50 кДа (Sartorius Stedim) с центрифужным приводом, исходный объем разбавили в три раза (до 15 мл) водой, и отцентрифугировали (8000 g х 20 мин) до 1,5 мл остатка лактоферрина, после чего образец проанализировали с помощью катионообменной ВЭЖХ.
Сочетание катионообменной хроматографии с ультрафильтрацией при отсечении 50 кДа позволило достигнуть 98,9% степени очистки, что превышает 98% требуемой степени очистки белка, которую невозможно получить с помощью только хроматографии (97,8%) (Фигура 9). Катионообменная хроматография увеличивает степень очистки лактоферрина на 2,7%, а последующий этап ультрафильтрации при отсечении 50 кДа дополнительно увеличивает степень очистки на 0,9%. Примечательно, что ультрафильтрация при отсечении 50 кДа повышает степень очистки даже в очень чистом веществе. Следовательно, ультрафильтрация при отсечении 50 кДа сама по себе должна быть тщательно изучена.
Пример 6: Первоначальный эксперимент, определяющий, достаточно ли ультрафильтрация лактоферрина может повысить его степень очистки
Порошок лактоферрина (1 кг, степень очистки белка 96,3 %) был растворен в 100 л воды. Раствор лактоферрина был помещен в установку для ультрафильтрации APV, снабженную одной мембраной Synder 6,3" 50 кДа (BX-5XB-6338). Объединенный объем раствора лактоферрина и воды в установке для ультрафильтрации составил 180 л, также был добавлен хлорид натрия, при этом проводимость раствора составила 58 мСм. Фильтрат (100 л) удалили через 10 мин. После этого добавили воду (100 л) и соль для достижения проводимости 121 мСм. Фильтрат (100 л) удалили через 10 мин. Затем проводимость ультраконцентрата лактоферина уменьшили диафильтрацией с водой (400 л фильтрата) до 1300 мкСм. Затем ультраконцентрат лактоферрина лиофилизировали (48 ч, 1 мбар, 40 °С). Жидкие образцы были проанализированы на MGC катионообменной ВЭЖХ, образцы порошка также были проанализированы с помощью катионообменной ВЭЖХ по внешним стандартам (такие образцы требуют более точного анализа).
Степень очистки лактоферрина может быть увеличена приблизительно на 2% (белковая основа) при условии эффективной диафильтрации в установке для ультрафильтрации, снабженной мембранами с отсечением 50 кДа. Окончательная степень очистки достигает 98,1% (белковая основа) (Фигура 10), следовательно, данный метод вполне успешен и его дальнейшее развитие оправдано.
Пример 7: Влияние номинального отсечения по молекулярной массе на производительность мембраны
Номинальное отсечение по молекулярной массе (НОММ) оказывает наиболее важное влияние на производительность мембраны. С увеличением размера пор мембраны обеспечивается прохождение более крупных белков (Фигура 11) и интенсивность потока повышается (Фигура 12). Мембраны обладают способностью разделять компоненты в смесях, но только при условии, что один или несколько компонентов меньше, чем НОММ мембраны и один или несколько компонентов больше, чем НОММ мембраны. В итоге, для идеального разделения компонентов смеси необходима разница в молекулярной массе компонентов по меньшей мере на два порядка (т.е. вода массой 28 Да и хлорид натрия массой 58 Да могут почти полностью отделиться от лактоферрина массой 78 кДа), однако возможно также некоторое разделение при отсутствии значительной дифференциации по размеру. По-видимому, если целью является повышение степени очистки раствора лактоферрина, то использованиие мембраны с отсечением 50 кДа является лучшим существующим способом достижения данной цели (Фигура 13).
Пример 8: Ультрафильтрационные мембраны
UF4
Тип: Спиральная полиэфирсульфоновая (ПЭС) навивка НОММ: 30 кДa
Марка: Synder Модель: MK2B-6338
Установка для ультрафильтрации, известная как UF4, применялась для:
1. концентрирования лактоферрина, элюированного из катионообменной колонки, и
2. рецикла соли после элюирования лактоферрина, которую возвращают обратно в емкость с 6% солевым раствором для повторного использования в процессе хроматографии.
Обоснование способа в рамках более обширного производства лактоферрина:
- используемый в способе выделения лактоферрина хлорид натрия (2000 кг на партию) имеет существенную стоимость ($ 1200 за партию), и возможность его рецикла резко снижает стоимость производства.
- благодаря рециклу хлорида натрия снижается наносимый производством вред экологии. После доочистки на устройстве Leongatha с целью удаления органических твердых веществ жидкие отходы, содержащие хлорид натрия, сбрасывают в океан. Поэтому должны быть предприняты все необходимые меры для уменьшения количества отходов производства. Повторное использование после переработки экономит до 80% соли, следовательно, попадающая в окружающую среду масса хлорида натрия уменьшается на 8000 кг за партию (благодаря использованию UF4 остаются две трети массы соли).
Обоснование типа мембраны:
- использование спиральных мембран является сравнительно дешевым способом получения большой площади мембраны, что обеспечивает более интенсивные потоки в устройствах с небольшой установочной поверхностью.
- PES по своей сути является гидрофильной мембраной, которая смачивается быстро и полностью, что обеспечивает быструю фильтрацию со исключительной скоростью потока и высокой производительностью. PES-мембрана также очень слабо связывается с белками, сводя к минимуму вероятность забивания пор молекулами белков, что обеспечивает высокую производительность, устойчивые трансмембранные потоки и подходящую видимую пористость мембраны.
Обоснование НОММ:
- мембраны с отсечением 30 КДа успешно удерживают собранный лактоферрин (перенос через мембрану составляет 0,6% доли присутствующего белка), повышая степень очистки, при этом позволяя пройти через мембрану ключевым загрязняющим компонентам (в частности РНКазам).
Хлорид натрия (58 Да) не удерживается в мембране с отсечением 30 кДа, в отличие от лактоферрина (80 кДа), молекулы которого значительно больше. Поэтому лактоферрин, элюированный из колонки при низкой концентрации (0,1% белка), может быть сконцентрирован до 3% белка без соответствующего увеличения концентрации соли или потери белка.
UF5
Спиральная навивка из полиэфирсульфона (PES) НОММ: 5 кДа
Марка: Synder Модель: MT2B-6338
Установка для ультрафильтрации UF5 применялась для:
1. концентрирования белков кроме лактоферрина, элюированных из катионообменной колонки, и
2. рецикла 2,5% раствора соли, которую возвращают обратно в емкость с 2,5% солевым раствором для повторного использования в процессе хроматографии.
Обоснование способа в рамках более обширного производства лактоферрина:
- используемый в способе выделения лактоферрина хлорид натрия (2000 кг на партию) имеет существенную стоимость ($ 1200 за партию), и возможность его рецикла резко снижает стоимость производства.
- благодаря рециклу хлорида натрия снижается наносимый производством вред экологии. После доочистки на устройстве Leongatha с целью удаления органических твердых веществ жидкие отходы, содержащие хлорид натрия, сбрасывают в океан. Поэтому должны быть предприняты все необходимые меры для уменьшения количества отходов производства. Повторное использование соли после ее переработки экономит до 80% соли, следовательно, попадающая в окружающую среду масса хлорида натрия уменьшается на 8000 кг за партию (благодаря использованию UF5 остается одна треть массы соли).
Обоснование типа мембраны:
- использование спиральных мембран является сравнительно дешевым способом получения большой площади мембраны, что обеспечивает более интенсивные потоки в устройствах с небольшой установочной поверхностью.
- PES по своей сути является гидрофильной мембраной, которая смачивается быстро и полностью, что обеспечивает быструю фильтрацию со исключительной скоростью потока и высокой производительностью. PES-мембрана также очень слабо связывается с белками, сводя к минимуму вероятность забивания пор молекулами белков, что обеспечивает высокую производительность, устойчивые трансмембранные потоки и подходящую видимую пористость мембраны.
Обоснование НОММ:
- мембраны с отсечением 5 кДа удерживают молекулы кроме лактоферрина, что предотвращает их возвращение в хроматографический процесс и загрязнение лактоферрина в ходе его последующего элюирования. Использование мембран с меньшей пористостью обусловлено наличием в смеси белков множества мелких молекул, многие из которых являются факторами роста.
Хлорид натрия (58 Да) не удерживается на мембране с отсечением 5 кДа, в отличие от лактопероксидазы (80 кДа), иммуноглобулинов (150 - 420 кДа) и факторов роста (5 - 17 кДа), и поэтому белки, элюированные из колонки при низкой концентрации (0,1% белка), могут быть сконцентрированы до 3% белка без соответствующего увеличения концентрации соли или потери белка.
MF6
Тип: Керамические трубки (оксид алюминия) НОММ: 0,8 мкм
Марка: Pall Модель: Membralox GP 19
Установка для микрофильтрации MF6 применялась для:
1. уменьшения количества микробов, присутствующих в растворе лактоферрина; и
2. удаления нерастворимого материала.
Обоснование типа мембраны:
- керамические мембраны имеют высокую устойчивость к агрессивным средам, поэтому их можно очищать химическими веществами с целью полного удаления микробов. Также они очень крепкие и не рвутся, поэтому загрязняющие компоненты не проходят через мембрану.
Обоснование НОММ:
- уменьшение количества нерастворимого вещества (повышенная прозрачность) и микробного загрязнения
- поры мембраны размером 0,8 мкм, в отличие от 0,22 мкм, позволяют белку проходить через мембрану при умеренном объеме и концентрации твердых веществ. Фильтр не предназначен для проведения полного этапа удаления микробов, так как основное сырье (обезжиренное молоко) подвергается предварительной пастеризации.
UF7
Тип: Спираль с навивкой из поливинилиденфторида (ПВДФ) MWCO: 50 кДа
Марка: Synder Модель: BN4B-6338
Установка для ультрафильтрации UF7 применялась для:
1. повышения степени очистки лактоферрина путем уменьшения количества белков кроме лактоферрина; и
2. увеличения доли отсутствия примесей в белке более чем до 95% путем удаления хлорида натрия и остатков лактозы.
Обоснование способа в рамках более обширного производства лактоферрина:
- лактоферрин может применяться для изготовления Ферритина ОВ, имеющего более высокую степень очистки лактоферрина, чем стандартный лактоферрин. Более высокую степень очистки получают путем замены обычно мембран с отсечением 5 кДа на мембраны с отсечением 50 кДа (Фигура 14).
Обоснование типа мембраны:
- использование спиральных мембран является сравнительно дешевым способом получения большой площади мембраны, что обеспечивает интенсивные потоки в устройствах с небольшой установочной поверхностью.
– гидрофильные поливинилиденфторидные (ПВДФ) мембраны имеют высокую проницаемость для трансмембранных потоков и низкое сродство к белкам. Поэтому загрязнение пор мембраны белками совсем незначительно и в течение всего процесса интенсивность потоков и производительность мембраны остаются высокими.
Обоснование НОММ:
- мембраны с отсечением 50 КДа более предпочтительны, чем мембраны с меньшим размером пор (обычные мембраны с отсечением 5 кДа), потому что они позволяют улучшенный перенос белков кроме лактоферрина (РНКаз, факторов роста), удерживая при этом лактоферрин. Повышение переноса молекул белка кроме лактоферрина приводит к повышению степени очистки лактоферрина (среднее увеличение степени очистки белка на 1,8%, P<0,001). Более подробное описание приводится в работе "Increasing Lactoferrin Purity by Diafiltration with Salt Solution in an Ultrafiltration Plant Fitted with 50 kDa Membranes" (JR0010).
Хлорид натрия (58 Да) не удерживается мембраной с отсечением 50 кДа в отличие от лактоферрина (80 кДа), поэтому лактоферрин, элюированный из колонки при низкой концентрации (3% белка) может быть сконцентрирован до > 20% белка, без соответствующего увеличения концентрации соли или потери белка.
- увеличение общего количества твердых веществ путем удаления воды приводит к максимальному увеличению пропускной способности твердых веществ после лиофилизации.
Пример 9: Испытание промышленного масштаба, подтверждающее, что степень очистки лактоферрина может быть повышена путем ультрафильтрации при отсечении 50 кДа
Чтобы обеспечить возможность сравнения эффективности изменений, партия материала для хроматографического процесса была разделена на две части. Первая половина материала была обработана на установке UF7, оснащенной мембранами с отсечением 5 кДа, без диафильтрации солью, другая половина материала была обработана на установке UF7, оснащенной мембранами с отсечением 50 кДа при диафильтрации солью.
Стандартное осуществление процесса в промышленном масштабе было изменено путем замены мембран с отсечением 5 кДа, установленных в UF7, на мембраны 50 кДа Synder, идентичные используемым в экспериментах 1 и 6. В промышленный процесс был также добавлен этап диафильтрации солью. Используемый в диафильтрации раствор соли был получен путем добавления 150 кг хлорида натрия в 3000 кг воды.
Результаты, представленные в Таблице 1, показывают, что ультрафильтрация через мембраны с отсечением 50 кДа и этап дополнительной диафильтрации хлоридом натрия могут увеличить степень очистки лактоферрина на 2,4% (белковая основа). Окончательная степень очистки лактоферрина достигает 97,8 % (белковая основа) и приближается к целевой степени очистки 98,0% (белковая основа). Состав белка в двух партиях был аналогичен, следовательно, можно предположить, что способ не имеет негативных эффектов.
Таблица 1. Сравнение состава лактоферрина, осуществленное на установке UF7 стандартным способом, и высокая степень очистки, выявленная на UF7, указывает на то, что порошки идентичны, за исключением повышения степени очистки лактоферрина.
Стандартный процесс | Процесс высокой степени очистки | |
LLL17FEB12B6 | LLL21FEB12B6 | |
Влага (% масс/масс) | 2,3 | 3,1 |
Жир (% масс/масс) | 0.3 | 0,4 |
Лактоферрин (% белка) | 95,4 | 97,8 |
Остатки примесей (% масс/масс) | <0,1 | <0,1 |
Белок (% масс/масс) | >97,3 | >96,4 |
Таким образом, при проведении испытания в промышленном масштабе был получен порошок со степенью очистки лактоферрина 98,0% (белковая основа), которая на 1,1% выше, чем степень очистки раствора UF4, из которого он был получен. Процесс был успешно проведен в промышленном масштабе.
Диафильтрация лактоферрина раствором соли в установке для ультрафильтрации, оснащенной мембранами с отсечением 50 кДа, успешно привела к повышению степени очистки лактоферрина в пределах от 1% до 2,4% (белковая основа) и поэтому может использоваться в производстве продукта со степенью очистки лактоферрина 98% (белковая основа). По-видимому, для оптимального осуществления процесса необходима концентрация хлорида натрия от 5% до 6% , что удобно, так как 6% раствор хлорида натрия используется для элюирования лактоферрина из катионообменной колонки.
Claims (5)
1. Способ очистки лактоферрина молока, включающий фильтрацию молока через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа с целью разделения его на фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, и фракцию фильтрата, содержащую факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа, причем во время фильтрации через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа молоко подвергают обработке солью таким образом, что в фильтрат попадают факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа, при этом обработка солью включает поддержание молока или лактоферрина в течение фильтрации через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа при концентрации соли, составляющей по меньшей мере 0,2 М NaCl или эквивалента, или проводимости по меньшей мере 20 мСм, причем указанную фракцию ультраконцентрата, содержащую лактоферрин, собирают.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработка солью длится по меньшей мере 4 часа.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что фильтрацию через фильтр с НОММ от 30 кДа до 50 кДа осуществляют при 50-70°C.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработка солью дезагрегирует или диссоциирует любую массу РНКаз или факторов роста таким образом, что факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа попадают в фильтрат.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработка солью отделяет любые РНКазы или факторы роста от фильтра, вследствие чего факторы роста и/или РНКазы с молекулярной массой менее чем 30 кДа попадают в фильтрат.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AU2012904391A AU2012904391A0 (en) | 2012-10-08 | Improved process for purifying milk proteins and products thereof | |
AU2012904391 | 2012-10-08 | ||
AU2013204858A AU2013204858B2 (en) | 2012-10-08 | 2013-04-12 | Improved process for purifying milk proteins and products thereof |
AU2013204858 | 2013-04-12 | ||
PCT/AU2013/001152 WO2014056025A1 (en) | 2012-10-08 | 2013-10-08 | Improved process for purifying lactoferrin from milk and products thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2015116933A RU2015116933A (ru) | 2016-11-27 |
RU2683228C2 true RU2683228C2 (ru) | 2019-03-26 |
Family
ID=50476773
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015116933A RU2683228C2 (ru) | 2012-10-08 | 2013-10-08 | Усовершенствованный способ очистки лактоферрина молока и его продукты |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10016487B2 (ru) |
EP (1) | EP2904006A4 (ru) |
JP (1) | JP6475163B2 (ru) |
KR (1) | KR20150068404A (ru) |
CN (1) | CN104768971B (ru) |
AU (1) | AU2013204858B2 (ru) |
BR (1) | BR112015007674A2 (ru) |
CA (1) | CA2886892A1 (ru) |
IN (1) | IN2015DN02971A (ru) |
NZ (1) | NZ631826A (ru) |
RU (1) | RU2683228C2 (ru) |
WO (1) | WO2014056025A1 (ru) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2013204858B2 (en) | 2012-10-08 | 2015-06-25 | Saputo Dairy Australia Pty Limited | Improved process for purifying milk proteins and products thereof |
CN106215174A (zh) * | 2016-08-04 | 2016-12-14 | 无锡科捷诺生物科技有限责任公司 | 一种人乳铁蛋白的制剂化制备方法 |
JP7370224B2 (ja) * | 2019-11-08 | 2023-10-27 | ライオン株式会社 | ラクトフェリン含有腸溶製剤 |
FR3115037A1 (fr) * | 2020-10-12 | 2022-04-15 | Compagnie Laitiere Europeenne | Procédé de purification de fraction de protéines cationiques et fraction ainsi obtenue |
CN113278063A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-08-20 | 上海仁统生物科技中心 | 一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110123514A1 (en) * | 2008-05-14 | 2011-05-26 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Angiogenin-enriched milk fractions |
US20110301077A1 (en) * | 2009-01-28 | 2011-12-08 | Jean-Paul Perraudin | Method for production of lactoferrin |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2584727B1 (fr) * | 1985-07-11 | 1988-06-17 | Roussel Uclaf | Procede d'extraction de proteines du lait, produits, application du procede, et compositions pharmaceutiques |
US5221734A (en) | 1987-10-01 | 1993-06-22 | Ciba-Geigy Corporation | Process for preparing a polypeptide growth factor for milk |
GB8729031D0 (en) * | 1987-12-11 | 1988-01-27 | Express Foods Group Ltd | Isolation of immunoglobulin rich fraction from whey |
JP2686831B2 (ja) | 1989-09-22 | 1997-12-08 | 雪印乳業株式会社 | 鉄結合性蛋白質を分離、精製し、採取する方法 |
ATE129125T1 (de) * | 1992-01-15 | 1995-11-15 | Campina Melkunie Bv | Verfahren zur isolierung von lactoferrin und lactoperoxidase aus milch und milchprodukten. |
JPH05202098A (ja) | 1992-01-29 | 1993-08-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳質原料から生理活性物質の製造法 |
US5756680A (en) * | 1994-01-05 | 1998-05-26 | Sepragen Corporation | Sequential separation of whey proteins and formulations thereof |
ATE209862T1 (de) * | 1994-02-16 | 2001-12-15 | Pharming Intellectual Pty Bv | Isolierung von lactoferrin aus milch |
NL1005677C2 (nl) * | 1997-03-27 | 1998-09-29 | Campina Melkunie Bv | Werkwijze voor het winnen van groeifactoren, of een samenstelling die één of meer groeifactoren bevat, uit melk of een derivaat daarvan. |
US20040219225A1 (en) * | 2001-07-20 | 2004-11-04 | Kivits Marinus Gerardus Cornel | Process for obtaining growth factor (tgf-beta and igf-1), lactoperoxidase and immunoglobulins preparations from milk products having low mutual cross-contamination |
US6875459B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-04-05 | Henry B. Kopf | Method and apparatus for separation of milk, colostrum, and whey |
DK1480524T3 (da) * | 2002-03-07 | 2013-07-15 | Upfront Chromatography As | Fremgangsmåde til isolering af lactoferrin |
FR2841747B1 (fr) * | 2002-07-02 | 2004-08-20 | Cie Laitiere Europeenne | Isolat de proteines de lait et procede pour sa preparation |
GB0313892D0 (en) * | 2003-06-16 | 2003-07-23 | Hannah Res Inst | Control of lactation |
US20050208638A1 (en) * | 2004-03-22 | 2005-09-22 | Chao Wu | Process for preparing bioactive protein-enriched whey products |
US8252341B2 (en) | 2004-09-14 | 2012-08-28 | Paul Brazeau | Isolation of growth and differentiating factors from colostrum |
NZ566691A (en) * | 2005-09-09 | 2011-06-30 | Murray Goulburn Coop Co Ltd | Composition of whey growth factor extract for reducing muscle inflammation |
FR2901796A1 (fr) | 2006-05-31 | 2007-12-07 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede d'extraction d'une ou de plusieurs proteines presentes dans du lait |
CN101626693B (zh) * | 2006-11-10 | 2014-05-14 | 墨累古尔本合作有限公司 | 用于制备血管生成素的方法 |
AU2011283472B2 (en) | 2010-07-30 | 2014-02-13 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Antimicrobial activity enhancing agent |
AU2013204858B2 (en) | 2012-10-08 | 2015-06-25 | Saputo Dairy Australia Pty Limited | Improved process for purifying milk proteins and products thereof |
-
2013
- 2013-04-12 AU AU2013204858A patent/AU2013204858B2/en active Active
- 2013-10-08 CA CA2886892A patent/CA2886892A1/en not_active Abandoned
- 2013-10-08 WO PCT/AU2013/001152 patent/WO2014056025A1/en active Application Filing
- 2013-10-08 KR KR1020157010356A patent/KR20150068404A/ko active IP Right Grant
- 2013-10-08 NZ NZ631826A patent/NZ631826A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-10-08 EP EP13844731.3A patent/EP2904006A4/en not_active Withdrawn
- 2013-10-08 US US14/434,324 patent/US10016487B2/en active Active
- 2013-10-08 BR BR112015007674A patent/BR112015007674A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-10-08 CN CN201380055328.7A patent/CN104768971B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-10-08 RU RU2015116933A patent/RU2683228C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-10-08 JP JP2015534883A patent/JP6475163B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2015
- 2015-04-09 IN IN2971DEN2015 patent/IN2015DN02971A/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110123514A1 (en) * | 2008-05-14 | 2011-05-26 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Angiogenin-enriched milk fractions |
US20110301077A1 (en) * | 2009-01-28 | 2011-12-08 | Jean-Paul Perraudin | Method for production of lactoferrin |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ПАТУТИНА О.А. и др. Противоопухолевое и антиметастатическое действие РНКазы А и ДНКазы I, Acta naturae, т.2, N 1 (4), 2010, с.95-100. * |
РУСТАМЬЯН ЮЛИЯ ЛЕОНИДОВНА Исследование биологических свойств антиогенина молока - полифункциональной рибонуклеазы, 2005, Москва, с.7. * |
РУСТАМЬЯН ЮЛИЯ ЛЕОНИДОВНА Исследование биологических свойств антиогенина молока - полифункциональной рибонуклеазы, 2005, Москва, с.7. ПАТУТИНА О.А. и др. Противоопухолевое и антиметастатическое действие РНКазы А и ДНКазы I, Acta naturae, т.2, N 1 (4), 2010, с.95-100. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20150315264A1 (en) | 2015-11-05 |
US10016487B2 (en) | 2018-07-10 |
AU2013204858A1 (en) | 2014-04-24 |
WO2014056025A1 (en) | 2014-04-17 |
NZ631826A (en) | 2017-08-25 |
BR112015007674A2 (pt) | 2017-07-04 |
WO2014056025A8 (en) | 2015-05-14 |
AU2013204858B2 (en) | 2015-06-25 |
RU2015116933A (ru) | 2016-11-27 |
EP2904006A1 (en) | 2015-08-12 |
JP2015536905A (ja) | 2015-12-24 |
JP6475163B2 (ja) | 2019-02-27 |
EP2904006A4 (en) | 2016-04-06 |
KR20150068404A (ko) | 2015-06-19 |
CN104768971A (zh) | 2015-07-08 |
IN2015DN02971A (ru) | 2015-09-18 |
CN104768971B (zh) | 2017-12-05 |
CA2886892A1 (en) | 2014-04-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2683228C2 (ru) | Усовершенствованный способ очистки лактоферрина молока и его продукты | |
US8669353B2 (en) | Process for producing milk fractions rich in secretory immunoglobulins | |
EP3454673B1 (en) | Whey preparation for improving brain development | |
EP1623717B1 (en) | Composition against rotavirus infection and process for producing the same | |
EP2484686A1 (en) | Method for separating sialyllactose material | |
JP5709353B2 (ja) | 新規な乳タンパク質画分及び慢性炎症性疾患の予防又は治療のためのその使用 | |
RU2400106C1 (ru) | Способ получения бад "л-пфи" из вторичного молочного сырья и полученная этим способом бад "л-пфи" | |
US20070212367A1 (en) | Novel immunologically active peptide fragments of a proline-rich polypeptide isolated from colostral mammalian fluids for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions | |
RU2416243C2 (ru) | Способ выделения низкомолекулярных пептидов | |
US7547770B2 (en) | Colostral fractionation process | |
AU2013204850B2 (en) | Improved process for purifying milk proteins and products thereof | |
CN101622267B (zh) | 免疫调节剂 | |
WO2010044095A2 (en) | Novel immunologically active peptide fragments of a proline- rich polypeptide isolated from mammalian colostrums for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions | |
RU2738745C1 (ru) | Бактериологически чистый протеиновый продукт с повышенным содержанием минорных белков | |
AU2006332821A1 (en) | Novel immunologically active peptide fragments of a Proline-Rich Polypeptide isolated from colostral mammalian fluids for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions | |
JPH08301776A (ja) | 上皮細胞の分化促進剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20200221 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201009 |