RU2678203C2 - Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме - Google Patents
Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме Download PDFInfo
- Publication number
- RU2678203C2 RU2678203C2 RU2017118538A RU2017118538A RU2678203C2 RU 2678203 C2 RU2678203 C2 RU 2678203C2 RU 2017118538 A RU2017118538 A RU 2017118538A RU 2017118538 A RU2017118538 A RU 2017118538A RU 2678203 C2 RU2678203 C2 RU 2678203C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lysine
- monosuccinyl
- pharmaceutical composition
- bis
- glutamyl
- Prior art date
Links
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims abstract description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 9
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 9
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 9
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 9
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 6
- 229940057838 polyethylene glycol 4000 Drugs 0.000 claims description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940093430 polyethylene glycol 1500 Drugs 0.000 claims 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 39
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 23
- 238000007710 freezing Methods 0.000 abstract description 10
- 230000008014 freezing Effects 0.000 abstract description 10
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 abstract description 9
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 239000013538 functional additive Substances 0.000 abstract description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 47
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 40
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 29
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 26
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 23
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 18
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 14
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 14
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 13
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 13
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 11
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 9
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 9
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 9
- 102000015533 trkA Receptor Human genes 0.000 description 9
- 108010064884 trkA Receptor Proteins 0.000 description 9
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 8
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 8
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 8
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 7
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 7
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 7
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- IKMNOGHPKNFPTK-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-6-methylpyridin-1-ium-3-ol;4-hydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.CCC1=NC(C)=CC=C1O IKMNOGHPKNFPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 5
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 5
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 4
- 208000035154 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 4
- 230000004766 neurogenesis Effects 0.000 description 4
- 230000007971 neurological deficit Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150111783 NTRK1 gene Proteins 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 210000003657 middle cerebral artery Anatomy 0.000 description 3
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 2
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 2
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 2
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 2
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 2
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 2
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 230000000272 proprioceptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Chemical compound C1N(C)CCC(C=2C=CC=CC=2)=C1 PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIAGMCDKSXEBJQ-IBGZPJMESA-N 3-o-(2-methoxyethyl) 5-o-propan-2-yl (4s)-2,6-dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylate Chemical compound COCCOC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC(C)C)[C@H]1C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 UIAGMCDKSXEBJQ-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 102100022977 Antithrombin-III Human genes 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037597 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010008089 Cerebral artery occlusion Diseases 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 1
- -1 GK-2 compound Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 1
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 1
- 208000010496 Heart Arrest Diseases 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101001135571 Mus musculus Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000007339 Nerve Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010032605 Nerve Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000000114 Pain Threshold Diseases 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- 108700019404 Pro-Gly-Pro- ACTH (4-7) Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 101001079613 Rattus norvegicus Heme oxygenase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000674 adrenergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003496 anti-amnesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- HSWPZIDYAHLZDD-UHFFFAOYSA-N atipamezole Chemical compound C1C2=CC=CC=C2CC1(CC)C1=CN=CN1 HSWPZIDYAHLZDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003002 atipamezole Drugs 0.000 description 1
- 102000055102 bcl-2-Associated X Human genes 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 125000002618 bicyclic heterocycle group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000008247 brain infarction Diseases 0.000 description 1
- 229940077737 brain-derived neurotrophic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 description 1
- 230000009460 calcium influx Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- NIDRASOKXCQPKX-DFWYDOINSA-L calcium;(2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O NIDRASOKXCQPKX-DFWYDOINSA-L 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002041 carbon nanotube Substances 0.000 description 1
- 229910021393 carbon nanotube Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000001627 cerebral artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 102000009854 cortexin Human genes 0.000 description 1
- 108010034906 cortexin Proteins 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000959 cryoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 150000001923 cyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 1
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008519 endogenous mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000009477 glass transition Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000001259 mesencephalon Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 201000007309 middle cerebral artery infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 1
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000014511 neuron projection development Effects 0.000 description 1
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 description 1
- 230000000508 neurotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229960000715 nimodipine Drugs 0.000 description 1
- 125000004999 nitroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 210000000929 nociceptor Anatomy 0.000 description 1
- 239000002664 nootropic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001777 nootropic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000037040 pain threshold Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 230000008756 pathogenetic mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006919 peptide aggregation Effects 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000079 pharmacotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000036178 pleiotropy Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015284 positive regulation of neurogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960002635 potassium citrate Drugs 0.000 description 1
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K potassium citrate (anhydrous) Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011082 potassium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000011165 process development Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- AFEHBIGDWIGTEH-AQRCPPRCSA-N semax Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CNC=N1 AFEHBIGDWIGTEH-AQRCPPRCSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000005382 thermal cycling Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical group [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 231100000216 vascular lesion Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и фармации и касается фармацевтической композиции нейропротекторного действия в форме лиофилизата для изготовления инъекционной или инфузионной лекарственных форм, содержащей в качестве действующего вещества гексаметилендиамид бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) и функциональные добавки, в качестве которых используют лиопротекторы и криопротекторы в определенном количественном соотношении компонентов при использовании рекомендованных режимов сушки и замораживания. Осуществление изобретения позволяет создать стабильную лекарственную форму, оптимальную для хранения и применения, а также получить препарат, обеспечивающий увеличение длительности нахождения дипептида в системном кровотоке по сравнению с его субстанцией. 4 з.п. ф-лы, 4 табл., 11 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине и фармации и касается фармацевтической композиции в форме лиофилизата для изготовления инъекционной или инфузионной лекарственных форм, содержащей в качестве действующего вещества гексаметилендиамид бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) и функциональные добавки, в качестве которых используют лиопротекторы и криопротекторы в определенном количественном соотношении компонентов при использовании рекомендованных режимов сушки и замораживания, и обладающей нейропротекторной активностью.
Уровень техники
Острые нарушения мозгового кровообращения являются важнейшей медико-социальной проблемой, что обусловлено их высокой долей в структуре заболеваемости и смертности населения. Так, в России уровень заболеваемости и смертности от инсульта - один из самых высоких в мире: частота цереброваскулярных заболеваний достигает 450 человек на 100 тыс. населения, а показатели смертности - 280 человек на 100 тыс. Смертность от сосудистых заболеваний мозга в нашей стране занимает 2-е место, уступая лишь смертности от кардиоваскулярных заболеваний. Инвалидизация вследствие инсульта занимает ведущее место среди причин первичной инвалидности. Согласно мировой статистике более половины инсультов приходится на лиц старше 70 лет. В России инсульты все чаще встречаются у лиц молодого возраста, что выводит их в ранг заболеваний, имеющих медицинскую, социальную и экономическую значимость для общества [Спирин Н.Н., Корнеева Н.Н. Данные госпитального регистра инсульта в Костроме // Фундаментальные исследования. 2012; 4 (ч. 1): 123-128].
Применяющиеся в терапии инсульта препараты, такие как блокаторы кальциевых каналов (нимодипин), антиоксиданты (мексидол), препараты с нейротрофическим действием, получаемые из тканей животных (актовегин, церебролизин, кортексин), ноотропы с нейропротекторным компонентом действия (семакс), не достаточно эффективны, о чем свидетельствует неутешительная статистика инвалидизации и смертности.
Исходя из патогенетических механизмов инсульта и известных данных о процессах сохранения и восстановления жизнеспособности нервной ткани, особое внимание уделяется нейротрофинам как потенциальным средствам, обладающим нейропротекторными свойствами [Pollack S, Harper S // Drug News and Perspectives, 2002. 15 (5), 268-277; Aloe L. et al. Nerve growth factor: from the early discoveries to the potential clinical use // Journal of Translational Medicine, 2012; 10: 239-252].
Накоплено большое количество данных, свидетельствующих о патогенетическом значении эндогенного нейропротекторного белка -фактора роста нервов (NGF) и о перспективах разработки на его основе новых препаратов для фармакотерапии инсультов.
Известно, что NGF участвует в компенсаторных механизмах при ишемических повреждениях мозга. Так, в эксперименте было установлено, что в первые несколько часов после начала церебральной ишемии резко увеличивается как экспрессия мРНК NGF, так и самого белка, что рассматривается в качестве эндогенного механизма нейропротекции [Yang J, Liu HJ, Yang H, Fenq PY. Therapeutic time window for the neuroprotective effects of NGF when administered after focal cerebral ischemia // Neurol. Sci. 2011; 32 (3): 433-441; Guegan С, Onteniente В, Makiura Y. et al. Reduction of cortical infarction and impairment of apoptosis in NGF-transgenic mice subjected to permanent focal ischemia. Brain Res. Mol. Brain Res. 1998; 55 (1); 133-140]. Увеличение содержания NGF, вызванное ишемическим инсультом, наблюдалась и в клинике. Так, была установлена достоверная обратная зависимость между размерами сформированного к 5-7-м суткам инфаркта мозга и уровнем NGF в 1-е сутки: низкому содержанию NGF соответствует наибольший объем инфаркта при сопоставимых локализации сосудистого поражения и размерах ишемизированной зоны в 1-е сутки [Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М.: Медицина, 2001. 328 с]. Эти факты подтверждают участие NGF в компенсаторных механизмах, противодействующих гибели нейронов в условиях церебральной ишемии.
Эффективность NGF при внутримозговом и интраназальном введении зарегистрирована при использовании ряда экспериментальных моделей ишемии головного мозга, при этом активность установлена как в короткие (до нескольких часов) сроки начала введения, так и через 24 ч после формирования ишемии [Yang J, Liu HJ, Yang H, Fenq PY. Therapeutic time window for the neuroprotective effects of NGF when administered after focal cerebral ischemia // Neurol. Sci. 2011; 32 (3): 433-441; Zhu W, Cheng S, Xu G, et al. Intranasal nerve growth factor enhances striatal neurogenesis in adult rats with focal cerebral ischemia // Drug. Deliv. 2011; 5: 338-343].
Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что NGF оказывает влияние на все ключевые этапы повреждения нейронов при церебральной ишемии. На этапе индукции глутамат-кальциевого каскада NGF эффективно противодействует глутаматной токсичности, снижая внутриклеточное накопление ионов кальция [Jiang Н, Tian S, Zeng Y, Shi J. Nerve growth factor inhibits Gd(3+)-sensitive calcium influx and reduces chemical anoxic neuronal death // J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2008; 28 (4): 379-382]. NGF участвует в защите клеток от окислительного стресса, стимулируя экспрессию белков-антиоксидантов, таких как белок теплового шока HSP32 (гемоксигеназа 1), супероксиддисмутаза и глутатионпероксидаза [Hassanzadeh Р, Arbabi Е, Atyabi F, Dinarvand R. Nerve growth factor-carbon nanotube complex exerts prolonged protective effects in an in vitro model of ischemic stroke // Life Sci. 2016. pii: S0024-3205 (16) 30681-30686]. NGF проявляет выраженную анти-апоптотическую активность, снижая экспрессию про-апоптотических белков, таких как Вах и каспаза-3 и стимулируя экспрессию анти-апоптотических белков, таких как Bcl-2 [Park J.H., Kang SS, Kim JY, Tchah H. Nerve Growth Factor Attenuates Apoptosis and Inflammation in the Diabetic Cornea // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2016; 57 (15): 6767-6775; Yang J, Liu HJ, Yang H, Fenq PY. Therapeutic time window for the neuroprotective effects of NGF when administered after focal cerebral ischemia // Neurol. Sci. 2011; 32 (3): 433-441]. Таким образом, NGF действует также и на заключительном, апоптотическом, этапе, общем для разных механизмов повреждения нейронов. Кроме того, известно, что NGF участвует в стимуляции нейрогенеза, регулируя выживаемость, миграцию и дифференцировку нейрональных стволовых клеток [Oliveira SL, Pillat MM, Cheffer A, et al. Functions of neurotrophins and growth factors in neurogenesis and brain repair // Cytometry A. 2013; 83 (1): 76-89]. Была показана способность NGF стимулировать нейрогенез в условиях экспериментальной церебральной ишемии [Zhu W., Cheng S., Xu G., et al. Intranasal nerve growth factor enhances striatal neurogenesis in adult rats with focal cerebral ischemia // Drug. Deliv. 2011; 5: 338-343]. Эти данные свидетельствуют о наличии у NGF, помимо нейропротекторного, и регенеративного потенциала.
Однако, несмотря на высокий терапевтический потенциал, использование NGF в клинике ограничено из-за его низкой биодоступности при системном введении, а также наличия побочных эффектов, связанных с плейотропностью белка, таких как гиперальгезия и потеря веса [Jonhagen ME //Alzheimer. Dis. Assoc. Disord., 2000; 14 (1): 31-38].
В настоящее время для преодоления этих проблем разрабатывается ряд основанных на использовании нейротрофинов терапевтических подходов - генная терапия, введение NGF в форме назальных и глазных капель и др. Теоретически оптимальным подходом является создание низкомолекулярных миметиков нейротрофинов, реализующих при системном введении фармакотерапевтические эффекты целого белка и не обладающих их побочными эффектами.
Известно, что NGF реализует свои основные эффекты, взаимодействуя со специфическими тирозинкиназными TrkA рецепторами. Проведение сигнала при активации TrkA рецепторов осуществляется в основном фосфатидилинозитол-3-киназным (PI3K/Akt) и митоген-активируемым протеинкиназным (MAPK/Erk) сигнальными путями, с первым из которых связана регуляция выживаемости, но не дифференцировки и образования нейритов [Kaplan DR, Miller FD. Neurotrophin signal transduction in the nervous system. Current Opinion in Neurobiology. 2000; 10 (3): 381-391]. В то же время МАР-киназный путь вовлечен как в нейропротекцию, так и в дифференцировку, а также, как полагают, необходим для индукции гиперальгезии [Obata K, Noguchi K. МАРК activation in nociceptive neurons and pain hypersensitivity. Life Sciences. 2004; 74 (21): 2643-5263].
В настоящее время ряд зарубежных фармацевтических компаний и научных групп ведут разработку низкомолекулярных миметиков NGF [Longo FM, Xie Y, Massa SM // Curr. Med. Chem., 2005; 5 29-41; Pollack J, Harper SJ. Small molecule Trk receptor agonists and other neurotrophic factor mimetics / Curr Drug Targets CNS Neurol Disord. 2002; 1 (1): 59-80; Colangelo AM, Bianco MR, Vitagliano L, et al. A new nerve growth factor-mimetic peptide active on neuropathic pain in rats. J Neurosci. 2008; 28 (11): 2698-2709; Scarpi D, Cirelli D, Matrone C, et al. Low molecular weight, non-peptidic agonists of TrkA receptor with NGF-mimetic activity. Cell Death Dis. 2012; 3 (7): 339-364; US 5958875, US 7723328, US 8686045, US 8916556; US 6017878; EP 0743955; US 20030211982; EP 1265605; US 8461110]. Так, в Университете МакГилла (Канада) на основе фармакофоров моноклональных мышиных антител к TrkA-рецепторам и пептидных миметиков NGF сконструировано и отобрано нитроарилсодержащее циклическое соединение D3, которое являлось селективным лигандом TrkA-рецепторов и обладало нейропротекторной и дифференцирующей активностью [Maliartchouk S, Feng Y, Ivanisevic L, et al. A designed peptidomimetic agonistic ligand of TrkA nerve growth factor receptors. Mol. Pharmacol. 2000; 57 (2): 385-391]. На старых крысах было показано, что D3 при внутримозговом введении оказывает нейропротекторное и антиамнестическое действие [Bruno MA, Clarke РВ, Seltzer A, et al. Long-lasting rescue of age-associated deficits in cognition and the CNS cholinergic phenotype by a partial agonist peptidomimetic ligand of TrkA. J. Neurosci. 2004; 24 (37): 8009-8018]. В лаборатории им. Риты Леви-Монтальчини (Рим, Италия) в 2008 году были созданы пептиды, содержащие последовательности 1-й и 4-й петли NGF с N-концевым фрагментом, NL1L4, и без него, LIL4 [Colangelo AM, Bianco MR, Vitagliano L. et al. A new nerve growth factor mimetic peptide active on neuropathic pain in rats. J. Neurosci. 2008; 28 (11): 2698-2709]. Эти пептиды вызывали фосфорилирование TrkA рецепторов и обладали NGF-подобной дифференцирующей активностью. Пептид L1L4 при центральном введении увеличивал сниженный болевой порог на модели периферической нейропатии у крыс. Данных об эффектах D3 и L1L4 при системном введении в литературе нет. В 2012 году на факультете химии Флорентийского университета было синтезировано соединение МТ2, представляющее собой бициклический гетероцикл [Scarpi D., Cirelli D., Matrone С. et al. Low molecular weight, non-peptidic agonists of TrkA receptor with NGF-mimetic activity. Cell Death Dis. 2012; 3 (7): 339-364]. MT2 взаимодействует с TrkA-рецепторами и активирует Akt- и МАР-киназный внутриклеточный каскад; обладает нейропротекторной и дифференцирующей активностью. На клеточной модели болезни Альцгеймера МТ2 противодействует амилоидогенезу и увеличивает жизнеспособность нейронов.
Отметим, что описанные на настоящий момент в литературе миметики NGF, преодолевая фармакокинетические недостатки, не определяют фармакологического решения, поскольку они, аналогично NGF, активируют не только Akt-, но и МАР-киназный сигнальный путь, вовлеченный в нежелательные эффекты полноразмерного белка, то есть неспособны к диссоциации терапевтических и побочных действий полноразмерного белка.
В ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» создан низкомолекулярный дипептидный миметик 4-й петли NGF - гексаметилендиамид бис-(моносукцинил-глутамил-лизина), получивший рабочий шифр ГК-2 [Патент РФ №2410392, 2009 г.; Патент CN №102365294 В, 2009]. Установлено, что ГК-2 вызывает фосфорилирование специфических для NGF тирозинкиназных TrkA рецепторов и избирательно включает Akt-киназный пострецепторный путь трансдукции сигнала, преимущественно вовлеченный в нейропротекцию и не активирует МАР-киназный путь, связанный с гиперальгезией [Гудашева Т.А., Антипова Т.А., Константинопольский М.А., Поварнина П.Ю., Середенин С.Б. Оригинальный дипептидный миметик фактора роста нервов ГК-2 избирательно активирует пострецепторные пути TrkA, не вызывая побочных действий полноразмерного неротрофина // ДАН 2014; 456 (1): 88-91]. ГК-2 проявляет нейропротекторную активность в микро-наномолярных концентрациях в условиях окислительного стресса, глутаматной и МФТП-токсичности как в иммортализованных, так и первичных клеточных культурах [Гудашева Т.А., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Новые низкомолекулярные миметики фактора роста нервов // ДАН. 2010; 4 (1): 549-552]. ГК-2 продемонстрировал выраженную нейропротекторную активность in vivo при системном введении на моделях как фокальной, так и глобальной церебральной ишемии у крыс (модели фототромбоза коры головного мозга, модели транзиторного перекрытия среднемозговой артерии, модели неполной глобальной хронической ишемии, индуцированной перманентной окклюзией сонных артерий, модели полной глобальной ишемии, индуцированной остановкой сердца) [Середенин С.Б., Гудашева Т.А. Создание фармакологически активной малой молекулы, обладающей свойствами фактора роста нервов // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2015; 6: 63-70]. Кроме того, ГК-2 был активен на моделях болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера и сахарного диабета в широком диапазоне доз: 0,01-5 мг/кг при внутрибрюшинном введении и 5-10 мг/кг при пероральном введении [Gudasheva ТА, Povarnina PYu, Antipova ТА, Seredenin SB. A Novel Dimeric Dipeptide Mimetic of the Nerve Growth Factor Exhibits Pharmacological Effects upon Systemic Administration and Has No Side Effects Accompanying the Neurotrophin Treatment // Neuroscience & Medicine. 2014; 5: 101-108]. При этом ГК-2 был лишен основных побочных эффектов, характерных для NGF, а именно не вызывал гиперальгезии и потери веса при введении в наиболее активных дозах [Gudasheva ТА, Povarnina Р, Logvinov IO, Antipova ТА, Seredenin SB. Mimetics of brain-derived neurotrophic factor loops 1 and 4 are active in a model of ischemic stroke in rats // Drug Des Devel Ther. 2016; 10: 3545-3553].
С учетом пептидной природы лекарственного средства, для избегания эффектов пресистемного метаболизма и повышения биодоступности дипептида представляется рациональной создание фармацевтической композиции для парентерального применения.
При разработке композиций и способов получения пептидов для фармацевтического применения следует принимать во внимание несколько факторов. Первостепенное значение имеет стабильность пептида на всех стадиях его получения, транспортировки и на стадиях применения, которые могут включать изготовление композиции, замораживание, сушку, хранение, транспортировку, восстановление, циклы замораживания-оттаивания и хранение после восстановления конечным пользователем.
Другие возможные факторы включают простоту и экономичность изготовления, применения и распределения; состав конечного продукта для введения пациенту; и простоту применения конечным пользователем.
Жидкие лекарственные формы на водной и неводной основе могут обеспечить выполнение определенных задач, в том числе необходимую биодоступность, простоту и экономичность изготовления и удобство для конечного пользователя, но при их создании вещество пептидной природы подвергается большому количеству факторов влияющих на целость молекулы и вызывающих их агрегацию и деструкцию. Часто пептиды в растворе нестабильны при их хранении на протяжении длительных периодов времени [Manning МС, Chou DK, Murphy ВМ, et al. Stability of protein pharmaceuticals: an update. Pharm. Res. 1989; 6: 903-918]. Соответственно, были разработаны дополнительные стадии обработки, позволяющие увеличить срок хранения, включающие сушку, например лиофилизацию.
Лиофилизированные композиции могут также обеспечивать определенные преимущества. Потенциальные преимущества лиофилизации включают возможность создания стабильной лекарственной формы, удобной для хранения, транспортировки и применения, но при условии того, что будут учтены переменные величины, которые могут сказаться на сохранности фармацевтической субстанции (pH, ионная сила раствора, тип и количество вспомогательных веществ в композиции, тип криозащиты, температура, давление и время операций замораживания, сублимации и высушивания). Нестабильность пептида может быть обусловлена физической деградацией (например, денатурацией, агрегацией или преципитацией) или химической деградацией (например, дезаминированием, окислением или гидролизом), что делает композицию неприемлемой для парентерального введения. Оптимизация компонентов композиции и их концентраций основана исключительно на эмпирических исследованиях и/или разумных способах устранения причин нестабильности.
Иногда при длительном хранении фармацевтических композиций, содержащих пептиды, включая водные и лиофилизированные композиции, возможна утрата активных пептидов из-за агрегации и/или деградации. Соответственно, типичные способы повышения стабильности пептидов могут включать изменение концентрации элементов композиции или добавление эксципиентов для модификации композиции [US 5580856; US 6171586]. Тем не менее, среди множества возможных вариантов использования вспомогательных веществ при изготовления лиофилизированных форм прямого указания и понимания какие именно регидратационные стабилизаторы следует добавлять к конкретным пептидам нет. Соответственно, специалисту в данной области техники, при всем множестве знаний возможных вариантов использования стабилизаторов, придется выявлять наилучшие для его пептида условия самостоятельно. Известна стабильная лиофилизированная композиция антитела против Her-2, где стабилизатор представляет собой сахар, трегалозу или буфер [US 2003/0202972 A1]. Тем не менее, полезность этих стабилизаторов для антител нельзя экстраполировать на другие белки и пептиды. Известен стабильный раствор иммуноглобулиноподобного белка содержащего Fc-домен где стабилизатором может быть фосфат натрия, фосфат калия, цитрат натрия или калия, яблочная кислота, ацетат аммония, трис-буфер (буфер с трис(гидроксиметил) аминометаном), ацетат, диэтаноламин, гистидин, лизин или цистеин [US 2003/0180287]. Из этих химически различных стабилизаторов, которые могут быть выбраны специалистом в данной области техники, наиболее подходящим оказался лизин. Однако, данный конкретный стабилизатор подходит лишь для конкретного белка, в данном случае белка, содержащего Fc-домен, что само по себе нельзя экстраполировать на другой белок или пептид. Таким образом, применение добавок нельзя экстраполировать с одного конкретного белка на другой неродственный белок или пептид. Действительно, несмотря на то, что применение добавок способствует хранению, оно может также приводить к инактивации пептидов. Кроме того, в случае лиофилизации, условия, обусловленные стадией регидратации, могут приводить к инактивации пептида, например, посредством агрегации или денатурации [Hora MS, Rana RK, Smith FW. Lyophilized formulations of recombinant tumor necrosis factor. Pharm. Res. 1992; 9 (1): 33-36]. Действительно, агрегация пептидов нежелательна, поскольку она может приводить к иммуногенности [Cleland JL, Powell MF, Shire SJ. The development of stable protein formulations: a close look at protein aggregation, deamidation, and oxidation. Crit. Rev. Therapeutic Drug Carrier Systems. 1993; 10: 307-377].
Необходимо понимать, что вспомогательные вещества определяют физическое состояние лиофилизата: аморфное стеклообразное состояние, аморфное рыхлое состояние, кристаллическое состояние или комбинацию этих состояний. Так, например, для отдельных молекул показано, что потеря активности лиофилизированного протеина прямо связана со степенью кристалличности криозащищающей молекулы [RU 2136306, 10.09.1999]. Показано оседание лиофилизата при температурах выше температуры стеклоперехода в процессе замораживания фармацевтической композиции, и изменение скорости кинетики межфазовых переходов [RU 2136306, 10.09.1999]. Кроме того, необходимо учитывать явление «коллапса», часто возникающее в случае отсутствия индивидуального подбора технологических режимов. «Коллапс» определяется как процесс, при котором структуры, созданные в ходе сублимационной сушки, разрушаются при прохождении границы сублимационного раздела фаз. В случае увеличения температуры выше температуры коллапса наблюдается потеря пористой структуры материала, образующейся в результате сублимации кристаллов льда, что увеличивает время досушивания до заданной влажности и вызывает потерю качества сухого продукта (внешнего вида, растворимости и т.д.). Типичные значения температур коллапса для водных растворов углеводов составляют от минус 32°C до минус 50°C. Кроме того, возможно проявление различных нежелательных свойств в результате «коллапса» таблетки лиофилизата во время сублимационной сушки (например, путем забивания пути, по которому должна идти испаряющаяся влага, снижение скорости сублимации). В результате, конечный продукт может удерживать более высокое содержание влаги, чем продукт, высушенный без разрушения, а остаточная вода может быть распределена неравномерно [Блынская Е.В., Тишков С.В., Алексеев К.В. Технологические подходы к совершенствованию процесса лиофилизации белковых и пептидных лекарственных препаратов // Рос. Биотерапевт. Журн. 2017; 7 (1): 6-11. Chang В S, Patro SY. Freeze-drying process development for protein pharmaceuticals // Lyophilization of biopharmaceuticals. American Association of Pharmaceutical Scientists, Arlington, 2004: 113-38; Rey L. (ed.). Freeze-drying/lyophilization of pharmaceutical and biological products. CRC Press, 2016].
Основной сложностью сушки с использованием лиопротектора в аморфном состоянии является поддержание температуры материала на этапе сублимации не выше минус 30-минус 40°C для предотвращения коллапса. Однако, низкие температуры коллапса предъявляют специальные требования к используемому лиофильному оборудованию и удлиняют процесс сушки [RU 2111426, 20.05.1998], что может вызвать дестабилизацию пептидной структуры.
В результате использования различных составов и соотношений кристаллических и аморфных вспомогательных веществ можно добиться увеличения температуры разрушения материала и получения лиофилизата с жесткой макроскопической структурой. Известно, что при сочетании кристаллического маннита с аморфными лиопротекторами, температура, при которой может произойти «коллапс», возрастает в несколько раз, что дает возможность производить сушку лиофилизата быстрее и повышает надежность стабилизации пептидной субстанции. Известен способ получения очищенного антитромбина III (AT III) на примере которого можно проследить влияние кристаллизующего компонента на аморфный компонент фармацевтической субстанции. В частности, показано положительное влияние кристаллизованных вспомогательных веществ (маннит, натрия хлорид, глицин) на стабилизацию лиофилизата, на повышение температуры разрушения и снижения времени лиофильной сушки [RU 2540480, 23.11.2010]. Однако использование только кристаллических криопротекторов иногда может приводить к повреждению структуры молекулы фармацевтической субстанции во время замораживания и сублимационной сушки. Например, в исследованиях по влиянию кристаллических и аморфных вспомогательных веществ на активность лактатдегигрогеназы во время лиофилизации было выявлено, что при сублимации с кристаллическими веществами (маннитом и глицином) активность фермента падает в несколько раз, по сравнению с аморфными веществами при таких же режимах сушки, что указывает на повреждения пептидной структуры фермента кристаллическими веществами во время заморозки [Pyne А, Chatterjee К, Suryanarayanan R. Solute crystallization in mannitol-glycine systems-implications on protein stabilization in freeze-dried formulations // Journal of pharmaceutical sciences. 2003; 92 (11): 2272-2283].
Таким образом, анализ имеющих данных относительно создания фармацевтических композиций в лиофилизированной лекарственной форме позволяет сделать вывод о противоречивом характере влияния вспомогательных веществ и технологических режимов на стабилизацию протеинов, что делает разработку данной фармацевтической композиции на основе дипептида (гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина)) сложной многоступенчатой задачей имеющей много ограничивающих факторов и требующей оригинального подхода.
Раскрытие сущности изобретения
Задачей настоящего изобретения явилась разработка фармацевтической композиции на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) сохраняющей структурные особенности молекулы дипептида, обладающей стабильностью и высокой фармакологической эффективностью и пригодной для изготовления инъекционной или инфузионной лекарственных форм.
Данная цель достигается созданием фармацевтической композиции на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в форме лиофилизата, с использованием стабилизаторов и определенных диапазонов режимов сушки и замораживания, отличных от общепринятых подходов.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является расширение арсенала качественных доступных нейропротекторных лекарственных средств, пригодных для внутривенного введения. Также техническим результатом является увеличение длительности нахождения дипептида в системном кровотоке по сравнению с его субстанцией. Также, данное техническое решение обеспечивает создание стабильной лекарственной формы, оптимальной для хранения и применения.
Сущность изобретения заключается в разработке фармацевтической композиции содержащей терапевтически эффективное количество гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) и функциональные добавки, в качестве которых используют лиопротекторы и криопротекторы при следующем соотношении компонентов на один флакон, масс. %:
| Гексаметилендиамид бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) | 1-10% |
| Лиопротектор | 19-90% |
| Криопротектор | 9-80% |
В качестве лиопротектора в композиции данного изобретения может применяться одно или более соединений, способных обеспечить защиту лиофилизата в течение всего периода сушки, особенно во время первичной сушки. Желательно применять лиопротектор в количестве, близком к верхнему пределу интервала веса лиопротектора. Предпочтительными лиопротекторами являются сахара, такие как сахароза, трегалоза, декстроза, лактоза, мальтоза.
В качестве криопротектора в композиции данного изобретения может применяться одно или несколько соединений, которые защищают продукт преимущественно на этапе замораживания процесса лиофилизации от переохлаждения или снижают их физическую нестабильность при сушке и последующем хранении. Предпочтительными криопротекторами являются полиолы такие как маннит, сорбит, глицерол, полимеры, такие как декстран, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоли от 1500 до 8000 г/моль, аминокислоты такие как глицин.
Предпочтительно фармацевтическую композицию получают в форме лиофилизата с помощью сублимационного высушивания. Один из таких способов включает следующие стандартные стадии с включенными в них модификациями:
I. Получение раствора, содержащего лекарственное средство:
I.1 Отмеривание воды, гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина), лиопротектора и криопротектора.
I.2 Перемешивание;
I.3 Стерилизующая фильтрация (предпочтительно использовать фильтр с диаметром пор 0,2 мкм);
I.4 Разлив раствора во флаконы;
II Замораживание раствора гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина), полученного на стадии 1.4, при температуре минус 45°C;
II.1 Предпочтительно термоциклирование («отжиг») раствора предпочтительно при температуре минус 25°C, что является отличительной чертой для нашего способа приготовления лиофилизата;
III.1 Первичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от минус 45 до минус 28°C при давлении от 10 до 100 миллибар (выбранный интервал температур также является модификацией данного метода применительно к этой фармацевтической композиции);
III.2 Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар;
III Укупорка флаконов с лиофилизатом, полученным на стадии III.2.
Фармацевтическая композиция, полученная на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина), предпочтительно содержит (на флакон) от приблизительно 1 до приблизительно 10 мг гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина). Масса полученного лиофилизата предпочтительно составляет от приблизительно 0,101 г до приблизительно 1,01 г. Композиции данного изобретения могут использоваться также для получения раствора для инъекций и инфузий.
Осуществление изобретения
Изобретение проиллюстрировано следующими примерами его конкретного осуществления.
Пример 1. Способ получения лиофилизата для приготовления инъекций. 1 мг (1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 20 мг (19,85 масс. %) сахарозы и 80 мг (79,25 масс. %) полиэтиленгликоля 4000, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается выдерживанием колб при температуре ниже минус 45°C. Термоциклирование («отжиг») осуществляют при температуре минус 25°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 2. Фармацевтическую композицию получают по способу, описанному в примере 1 исходя из следующего количественного содержания: 5 мг (1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 5 мл воды и добавляют 100 мг (19,85 масс. %) сахарозы и 400 мг (79,25 масс. %) полиэтиленгликоля 4000, затем перемешивают до полного растворения. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 3. 1 мг (9,1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 10 мг (90,9 масс. %) маннита, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота.
Пример 4. 1 мг (10,0 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 9 мг (90,0 масс. %) полиэтиленгликоля 4000, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата - предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота.
Пример 5. 1 мг (1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 90 мг (89,1 масс. %) сахарозы и 10 мг (9,9 масс. %) маннита, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 6. 1 мг (1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 70 мг (69,3 масс. %) сахарозы и 30 мг (29,7 масс. %) маннита, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 7. 10 мг (10,0 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 63 мг (63,0 масс. %) сахарозы и 27 мг (27,0 масс. %) маннита, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 8. 1 мг (1 масс. %) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 70 мг (69,3 масс. %) сахарозы и 30 мг (29,7 масс. %) поливинилпирролидона 12000, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
Пример 9. 1 мг (1 масс. %)) гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) растворяют в 2 мл воды и добавляют 90 мг (89,1 масс. %) сахарозы и 10 мг (9,9 масс. %) глицина, затем перемешивают до полного растворения. Полученную таким способом смесь фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. После фильтрации раствор перекачивают в колбы для лиофилизации и обеспечивают соответствующими сублимационными пробками. Содержимое замораживается в результате выдерживания колб при температуре ниже минус 45°C. Первичная сушка процесса лиофилизации происходит при температуре от минус 45 до минус 28°C и давлении от 10 до 100 миллибар. Вторичная сушка лиофилизата предпочтительно при температуре от 0 до 10°C и при давлении 0,0001 миллибар. После сушки камеру лиофилизатора продувают инертным газом. Флаконы затем закрывают в атмосфере азота. Полученный лиофилизат соответствует всем требованиям ГФ XIII.
По представленным примерам были проведены исследования по нескольким технологическим характеристикам полученного продукта и другим параметрам в соответствии с ГФ XIII (Табл. 1).
Полученные данные, в особенности тест на прозрачность, доказывают необходимость применения наряду с криопротектором лиопротектора в качестве аморфной составляющей, повышающей устойчивость субстанции, и улучшающей технологические свойства субстанции. Мутность раствора говорит о нежелательных процессах, происходящих во время лиофилизации, в составах, представленных в примерах 3 и 4, которые содержат только кристаллизующий криопротектор. Составы, приведенные в примерах 3 и 4, не соответствуют требованиям ГФ XIII и не приемлемы для осуществления изобретения.
Пример 10. Изучение фармакокинетических показателей фармацевтической композиции гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) - ФК ГК-2 в дозе 1 мг/кг, полученной по способу, описанному в примере 1, и фармацевтической субстанцией гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) - ФС ГК-2 в дозе 1 мг/кг.
Эксперименты проведены на аутбредных белых крысах-самцах, полученных из питомника лабораторных животных «Столбовая» РАН в возрасте 10-недель, массой 180-220 г и половозрелых кроликов-самцов породы Шиншилла массой в среднем 3 кг. Животных содержали в стандартных условиях вивария при 12-часовом световом режиме, на стандартной диете, включающей гранулированный корм и воду в свободном доступе. При работе соблюдали требования, сформулированные в Директивах Совета Европейского сообщества 86/609/ЕЕС об использовании животных для экспериментальных исследований.
Количественное определение соединения ГК-2 в биоматериале осуществляли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС).
Изучение фармакокинетики субстанции ГК-2 в плазме крови после его однократного внутривенного (в/в) и внутрибрюшинного (в/б) введения проводили на крысах, которых за 18 ч до опыта лишали корма. Содержание действующего вещества определяли в плазме крови через 0,0; 5, 10, 20, 30 мин и 1,0, 1,5 и 2,0 ч после введения препарата. На каждую дискретную точку использовали по 5 крыс.
После в/б введения ФС ГК-2 животным вещество быстро попадает в системный кровоток и определяется в плазме крови на протяжении 2 ч (Табл. 2). Учитывая, что период полуэлиминации (t1/2el) составил 0,39 ч, соединение ГК-2 можно отнести к группе «короткоживущих» лекарственных веществ. Такие фармакокинетические параметры, как короткий t1/2el (в среднем 0,4 ч), небольшое среднее время удерживания вещества в организме (MRT - 0,54-0,64 ч) указывают на недолгое нахождение исследуемого вещества в системном кровотоке животных. Поэтому для поддержания эффективных концентраций в системном кровотоке требуется введение исследуемого вещества через короткие временные интервалы. После в/в введения ФС ГК-2 животным в дозе 150 мг/кг вещество так же, как после в/б введения определяется в плазме крови на протяжении 2 ч.
Примечание: данные представлены в виде средних арифметических значений ± стандартная ошибка средней (Mean ± SEM);
MRT (ч) - среднее время удерживания лекарственного вещества в организме;
t1/2 (ч) - период, за который выводится половина введенной дозы вещества.
При внутривенном введении инъекционной лекарственной формы ФК ГК-2 также отмечено быстрое обнаружение соединения в системном кровотоке - через 5 минут после введения, но при этом показана более длительная регистрации действующего вещества в плазме крови, определяемое на протяжении 4 часов. Так, период полувыведения ГК-2 из плазмы крови кроликов и среднее время удерживания лекарственного вещества в организме были в 2 раза больше, по сравнению с величиной, рассчитанной для крыс, и составило: t1/2=0,88±0,05 ч, MRT=1,27±0,06 ч (Табл. 2).
Таким образом, применение лекарственной формы фармацевтической композиции ГК-2 обеспечивает поддержание эффективных концентраций гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в системном кровотоке на протяжении более длительного времени, чем при введении субстанции ГК-2.
Пример 11. Изучение нейропротекторной активности фармацевтической композиции, полученной по способу, описанному в примере 1, на модели обратимой окклюзии средней мозговой артерии в дозах 0,5 и 1 мг/кг при внутривенном субхроническом введении (7 инъекций), в сравнении с фармацевтической субстанцией гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозе 1 мг/кг и Мексидолом в дозе 100 мг/кг.
Эксперименты проведены на 76 крысах-самцах линии Вистар (полученных из питомника лабораторных животных «Пущино») массой 230-280 г. Животные получали стандартный гранулированный корм и воду в свободном доступе. При работе соблюдали требования, сформулированные в Директивах Совета Европейского сообщества 86/609/ЕЕС об использовании животных для экспериментальных исследований.
Ишемический инсульт моделировали внутрисосудистым перекрытием среднемозговой артерии наркотизированных крыс нитью [Longa EZ, Weinstein PR, Carlson S, Cummins R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats // Stroke.1989; 20 (1): 84-91]. Ложнооперированные животные подвергались тем же процедурам, что и оперированные, за исключением перерезания сосудов и введения нити.
Фармацевтическую композицию ГК-2 (ФК ГК-2) в дозах 0,5 и 1 мг/кг (в/в) или субстанцию ГК-2 (ФС ГК-2) в дозе 1 мг/кг (в/в), разведенные в воде для инъекций, или Мексидол (раствор для внутривенного введения) (100 мг/кг, в/в), вводили животным через 6 ч после операции, и затем раз в сутки в течение последующих 6 дней (всего 7 инъекций). Крысы из групп «инсульт» и «ложная операция» получали в том же режиме воду для инъекций. Неврологический дефицит оценивали в тесте стимулирования конечностей на 3 и 6 сутки после операции. Тест стимулирования конечностей заключается в оценке ответа задних и передних конечностей животного на тактильную и проприоцептивную стимуляцию [Jolkkonen J, Puurunen К, 
S, et al. Behavioral effects of the alpha(2)-adrenoceptor antagonist, atipamezole, after focal cerebral ischemia in rats // Eur. J. Pharmacol. 2000; 400( 2-3): 211-219]. Тест включает из 7 испытаний для левой и правой стороны тела, оцениваемых в баллах: 2 балла присваивают, если крыса полностью выполнила испытание; 1 балл - испытание выполнено с задержкой в более чем 2 с и/или не полностью; 0 баллов - нет ответа на стимулирование конечности. Максимально возможное суммарное количество баллов равно 14 для каждой стороны тела.
Для оценки объема инфаркта мозга [Bederson JB, Pitts LH, Germano SM, et al. Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats // Stroke. 1986; 17 (6): 1304-1308] на 7-е сутки после операции животных декапитировали, головной мозг извлекали, замораживали и разрезали на 5 фронтальных срезов толщиной 1,7 мм. Срезы мозга помещали в чашку Петри с 2% раствором ТТХ в фосфатно-солевом буфере и инкубировали в течение 15 мин при 37°C. Затем срезы переворачивали и инкубировали еще 15 мин при 37°C, после чего фиксировали в 10%-ном формалине в течение 30 мин. Затем срезы помещали на предметные стекла и сканировали с двух сторон с помощью планшетного сканера с разрешением 2400 dpi в режиме цветного изображения. С помощью свободно распространяемой программы «Image J» (National Institutes of Health, США) измеряли площадь инфаркта (неокрашенная область) и площадь всего среза.
Объем ишемического инфаркта определяли по формуле:
V=d×Σ Ai/2, где Σ Ai - сумма площадей области повреждения на срезах мозга с каждой из сторон, d - толщина среза.
Статистическая обработка. Межгрупповые различия оценивали с помощью U-теста Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при p<0,05. Данные представлены в виде средних арифметических значений и стандартных ошибок среднего (Mean ± SEM).
У оперированных нелеченых животных (контроль, группа «Инсульт») в тесте стимулирования конечностей наблюдался выраженный неврологический дефицит, что проявлялось в статистически достоверном нарушении ответа на тактильную и проприоцептивную стимуляцию передней и задней левых конечностей (контралатеральных по отношению к повреждению) в сравнении с ложнооперированными животными на 3-й и 6-е сутки после операции.
Фармацевтическая композиция и субстанция гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) - ФК ГК-2 и ФС ГК-2 в дозах 1 мг/кг (в/в) статистически достоверно улучшали неврологический статус животных по данным теста стимулирования конечностей на 3-й и 6-е сутки после транзиторной окклюзии средней мозговой артерии (Табл. 3).
Так на фоне введения фармацевтической композиции гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозе 1 мг/кг на 3 и 6 сутки после операции крысам с инсультом отмечалось снижение неврологического дефицита на 40% и 39,5%, соответственно, в тесте стимулирования конечностей по сравнению с животными контрольной группы. Различий между эффективностью фармацевтической композиции и субстанции гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозе 1 мг/кг в тесте стимулирования конечностей не обнаружено (Табл. 3).
Статистически достоверного влияния фармацевтической композиции гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозе 0,5 мг/кг на снижение неврологической симптоматики в тесте стимулирования конечностей не обнаружено (Табл. 3).
Субстация ГК-2 и фармацевтическая композиция гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) значительно снижали объем инфаркта мозга. По результатам морфометрии срезов головного мозга у оперированных животных было выявлена выраженная зона инфаркта в правом полушарии, включающая кору и стриатум. Объем инфаркта в группе оперированных нелеченых животных составлял около 800 мм3 (Табл. 4).
* - p<0,05 по сравнению с группой «Инсульт» (U-тест Манна-Уитни).
Фармацевтическая композиция гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозах 0,5 и 1 мг/кг (в/в) и его субстанция в дозе 1 мг/кг (в/в) статистически значимо снижали объем повреждения на 60% в сравнении с группой без лечения (Табл. 4).
На фоне введения Мексидола в дозе 100 мг/кг в тесте стимулирования конечностей улучшения регистрируемых показателей по сравнению с контрольными животными не отмечалось (Табл. 3). При этом объем повреждения мозга в группе крыс с инсультом, получавших Мексидол, был меньше на 30%, чем у оперированных животных без терапии (Табл. 4).
* - P<0,05 по сравнению с группой «Инсульт»;
# - P<0,05 по сравнению с группой «Инсульт + ФК ГК-2 (1 мг/кг, в/в).
Таким образом, показана способность новой фармацевтической композиции ГК-2 снижать неврологический дефицит и уменьшать объем инфаркта мозга, вызванные экспериментальной окклюзией средней мозговой артерии с последующей реперфузией, сравнимой с активностью субстанции, что указывает на сохранение структуры и стабильности дипептида, и его эффективности в лиофилизированной лекарственной форме. Кроме того, показана более высокая эффективность фармацевтической композиции гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в дозе 1 мг/кг относительно инъекционной лекарственной формы Мексидола в дозе 100 мг/кг в условиях экспериментального ишемического инсульта.
Совокупность полученных данных свидетельствует о перспективности разработанной фармацевтической композиции нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме.
Claims (6)
1. Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия, включающая в качестве действующего вещества терапевтически эффективное количество гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина), а в качестве вспомогательных веществ - лиопротектор, криопротектор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, которая выполнена преимущественно в виде лиофилизата для получения инъекционных и инфузионных лекарственных форм.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, которая содержит в каждом флаконе 0,001-0,01 г гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина).
4. Фармацевтическая композиция по п. 1, которая в качестве лиопротектора содержит преимущественно сахарозу.
5. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой в качестве криопротектора используется преимущественно маннит, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль 1500, 4000 и/или 6000, глицин.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017118538A RU2678203C2 (ru) | 2017-05-30 | 2017-05-30 | Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017118538A RU2678203C2 (ru) | 2017-05-30 | 2017-05-30 | Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017118538A3 RU2017118538A3 (ru) | 2018-12-03 |
| RU2017118538A RU2017118538A (ru) | 2018-12-03 |
| RU2678203C2 true RU2678203C2 (ru) | 2019-01-24 |
Family
ID=64576985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017118538A RU2678203C2 (ru) | 2017-05-30 | 2017-05-30 | Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2678203C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697254C1 (ru) * | 2018-02-28 | 2019-08-13 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Фармацевтическая композиция на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-серил-L-лизина) (ГСБ-106) |
| RU2759023C2 (ru) * | 2020-04-29 | 2021-11-08 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Низкомолекулярный миметик мозгового нейротрофического фактора с анальгетическим, анксиолитическим и антиаддиктивным действием |
| RU2800369C1 (ru) * | 2022-04-05 | 2023-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Димерные дипептидные миметики нейротрофина-3 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010093284A1 (ru) * | 2009-02-16 | 2010-08-19 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-Исследовательский Институт Фармакологии Имени В.В.Закусова Рамн | Дипептидные миметики нейротрофинов ngf и bdnf |
| RU2559880C1 (ru) * | 2014-06-18 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Замещенный бисдипептид с нейропротективным и антидепрессивным эффектом |
-
2017
- 2017-05-30 RU RU2017118538A patent/RU2678203C2/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010093284A1 (ru) * | 2009-02-16 | 2010-08-19 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-Исследовательский Институт Фармакологии Имени В.В.Закусова Рамн | Дипептидные миметики нейротрофинов ngf и bdnf |
| RU2410392C2 (ru) * | 2009-02-16 | 2011-01-27 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова РАМН | Дипептидные миметики нейротрофинов ngf и bdnf |
| RU2559880C1 (ru) * | 2014-06-18 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Замещенный бисдипептид с нейропротективным и антидепрессивным эффектом |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697254C1 (ru) * | 2018-02-28 | 2019-08-13 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Фармацевтическая композиция на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-серил-L-лизина) (ГСБ-106) |
| RU2759023C2 (ru) * | 2020-04-29 | 2021-11-08 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Низкомолекулярный миметик мозгового нейротрофического фактора с анальгетическим, анксиолитическим и антиаддиктивным действием |
| RU2800369C1 (ru) * | 2022-04-05 | 2023-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Димерные дипептидные миметики нейротрофина-3 |
| RU2800369C9 (ru) * | 2022-04-05 | 2023-10-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Димерные дипептидные миметики нейротрофина-3 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017118538A3 (ru) | 2018-12-03 |
| RU2017118538A (ru) | 2018-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10857231B2 (en) | Formulations of VEG antagonist fusion proteins and method of manufacturing them | |
| EP0857060B1 (de) | Zubereitungen und verfahren zur stabilisierung biologischer materialien mittels trocknungsverfahren ohne einfrieren | |
| CA2037884C (en) | Stabilized gonadotropin containing preparations | |
| JP2022188075A (ja) | 液体医薬組成物 | |
| JP6522711B2 (ja) | Ｆｓｈの安定化 | |
| US20050226893A1 (en) | Lyophilization method to improve excipient crystallization | |
| CN103893744B (zh) | 一种治疗糖尿病的药物制剂及其制备方法 | |
| CN102670522B (zh) | 含有重组人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子融合蛋白的药物制剂及其制备 | |
| RU2678203C2 (ru) | Фармацевтическая композиция нейропротекторного действия для парентерального применения на основе гексаметилендиамида бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина) в лиофилизированной лекарственной форме | |
| EA036982B1 (ru) | Способ получения лиофилизированной фармацевтической композиции, содержащей митомицин с | |
| KR20050123356A (ko) | 동결건조된 알부민 비함유 재조합 사람 혈액응고 제 8인자 제제 | |
| CZ20023969A3 (cs) | Farmaceutická forma pro podávání peptidů, způsoby její výroby a použití | |
| JPH05331071A (ja) | カルシトニン遺伝子関連ペプチド類の凍結乾燥組成物および安定化法 | |
| CN101578106A (zh) | Hgf制剂 | |
| KR100807650B1 (ko) | Ｎ-[ｏ-(ｐ-피발로일옥시벤젠술포닐아미노)벤조일]글리신·모노나트륨염·4수화물의 동결 건조 제제 및 그 제조 방법 | |
| ES2341654T3 (es) | Un extracto seco de piel inflamatoria de conejo inoculada con virus vaccinia y un proceso para fabricar el producto. | |
| CN114306225A (zh) | 稳定的艾博韦泰组合物 | |
| TW201417825A (zh) | 含有抗真菌藥物和乳酸鹽緩衝劑的組成物 | |
| RU2594062C2 (ru) | Способ получения фармацевтического состава рокурония бромида в форме стабильного лиофилизата и фармацевтический состав, полученный этим способом | |
| US20230068866A1 (en) | Daptomycin formulation | |
| DE602005002742T2 (de) | Verfahren zur stabilisierung von ungeordnetem cefovecin-natriumsalz | |
| US20180161401A1 (en) | Novel Formulations of PTHrP Analogue | |
| US20240059768A1 (en) | A stable ophthalmic composition comprising tanfanercept, which is free of stabilizer or substantially free of stabilizer | |
| IL147413A (en) | Pharmaceutical preparations containing GRF | |
| KR20240134358A (ko) | 뉴로키닌-1 길항제 전구약물 화합물을 포함하는 약학 조성물 |