RU2676311C1 - Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea - Google Patents
Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea Download PDFInfo
- Publication number
- RU2676311C1 RU2676311C1 RU2018105712A RU2018105712A RU2676311C1 RU 2676311 C1 RU2676311 C1 RU 2676311C1 RU 2018105712 A RU2018105712 A RU 2018105712A RU 2018105712 A RU2018105712 A RU 2018105712A RU 2676311 C1 RU2676311 C1 RU 2676311C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- preservation
- medium
- donor cornea
- chloride
- sulfate
- Prior art date
Links
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 title claims abstract description 24
- 238000004321 preservation Methods 0.000 title claims abstract description 21
- RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N (2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(1-aminoethyl)oxan-2-yl]oxy-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol;(2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(aminomethyl)oxan-2-yl]o Chemical compound OS(O)(=O)=O.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@@H](CN)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@H](O2)C(C)N)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N 0.000 claims abstract description 9
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims abstract description 9
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 claims abstract description 9
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 claims abstract description 8
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 229940119744 dextran 40 Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 abstract description 11
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000035899 viability Effects 0.000 abstract description 6
- 210000004020 intracellular membrane Anatomy 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 6
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 4
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N iron(3+);trinitrate Chemical compound [Fe+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 description 3
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 3
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 3
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 3
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L calcium D-pantothenic acid Chemical compound [Ca+2].OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O.OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 description 3
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000000399 corneal endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 3
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 3
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 3
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 3
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 3
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 3
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 3
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 3
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 3
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 3
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 3
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- MYVIATVLJGTBFV-UHFFFAOYSA-M thiamine(1+) chloride Chemical compound [Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N MYVIATVLJGTBFV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 3
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 3
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 3
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 3
- XIFBKBNGZUIAJW-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl chloride;hydrate Chemical compound O.ClC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 XIFBKBNGZUIAJW-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- LXWQKLVAJOMMSN-REOHCLBHSA-N (2s)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl chloride Chemical compound SC[C@H](N)C(Cl)=O LXWQKLVAJOMMSN-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- LOFGQZYYARWABM-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl chloride Chemical compound ClC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N LOFGQZYYARWABM-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ORFBXDLDXAFXNG-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-5-hydroxy-3-(hydroxymethyl)-6-methylpyridine-4-carbaldehyde Chemical compound Cc1nc(Cl)c(CO)c(C=O)c1O ORFBXDLDXAFXNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- ASIYFCYUCMQNGK-JZGIKJSDSA-L disodium L-tyrosinate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C([O-])C=C1 ASIYFCYUCMQNGK-JZGIKJSDSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- PLVPMKWGXOOSKL-RGVONZFCSA-L disodium;(2r)-2-amino-3-[[(2r)-2-amino-2-carboxylatoethyl]disulfanyl]propanoate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CSSC[C@H](N)C([O-])=O PLVPMKWGXOOSKL-RGVONZFCSA-L 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002406 microsurgery Methods 0.000 description 2
- 230000003562 morphometric effect Effects 0.000 description 2
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CWPDRBAWZYJDEH-YFKPBYRVSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoyl chloride Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(Cl)=O CWPDRBAWZYJDEH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IBAOFQIOOBQLHE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3,9-dihydropurin-9-ium-6-one;chloride Chemical compound Cl.N1C(N)=NC(=O)C2=C1N=CN2 IBAOFQIOOBQLHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- MKPCNMXYTMQZBE-UHFFFAOYSA-N 7h-purin-6-amine;sulfuric acid;dihydrate Chemical compound O.O.OS(O)(=O)=O.NC1=NC=NC2=C1NC=N2.NC1=NC=NC2=C1NC=N2 MKPCNMXYTMQZBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001815 DL-alpha-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011627 DL-alpha-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FHNINJWBTRXEBC-UHFFFAOYSA-N Sudan III Chemical compound OC1=CC=C2C=CC=CC2=C1N=NC(C=C1)=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 FHNINJWBTRXEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N Vitamin D2 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TTWYZDPBDWHJOR-IDIVVRGQSA-L adenosine triphosphate disodium Chemical compound [Na+].[Na+].C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O TTWYZDPBDWHJOR-IDIVVRGQSA-L 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000035618 desquamation Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000871 endothelium corneal Anatomy 0.000 description 1
- 229960002061 ergocalciferol Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001408 fungistatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DKAGJZJALZXOOV-UHFFFAOYSA-N hydrate;hydrochloride Chemical compound O.Cl DKAGJZJALZXOOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000000936 membranestabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- PYOZTOXFQNWBIS-UHFFFAOYSA-N phenol;sodium Chemical compound [Na].OC1=CC=CC=C1 PYOZTOXFQNWBIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000012342 propidium iodide staining Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960000342 retinol acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019173 retinyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011770 retinyl acetate Substances 0.000 description 1
- QGNJRVVDBSJHIZ-QHLGVNSISA-N retinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C QGNJRVVDBSJHIZ-QHLGVNSISA-N 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- YODUIMCJDQUOPA-QRPNPIFTSA-M sodium;(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 YODUIMCJDQUOPA-QRPNPIFTSA-M 0.000 description 1
- WRZYGPIFICWRCG-OOFFSTKBSA-M sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4s,5s,6s)-2-[[(3s,4ar,6ar,6bs,8as,11s,12ar,14ar,14bs)-11-carboxylato-4,4,6a,6b,8a,11,14b-heptamethyl-14-oxo-2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14a-dodecahydro-1h-picen-3-yl]oxy]-6-carboxylato-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trih Chemical compound [Na+].O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C=C4[C@@H]5C[C@](C)(CC[C@@]5(CC[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2C1(C)C)C)C(O)=O)C([O-])=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WRZYGPIFICWRCG-OOFFSTKBSA-M 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 1
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для повышения жизнеспособности трансплантата роговицы и пролонгирования сроков консервации для задней послойной кератопластики.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used to increase the viability of a cornea graft and prolong the conservation time for the posterior layered keratoplasty.
Ближайшим аналогом является средство для консервации донорских роговиц глаза (Патент РФ №2450515), содержащее: среду 199, среду Хэма F-10, хондроитин-сульфат, декстран-40, гентамицин-сульфат, амфотеррицин В и среду Дюльбекко-Игла, дополнительно содержит препарат NeyDIL №37 St. III (Р/У ЛРС-008827/08-061108) при следующем соотношение компонентов, мас. %: Среда 199 25,0, Среда Хэма F-10 25,0, Хондроитин-сульфат А 0,5, Декстран-40 5,0, Гентамицин-сульфат 0,00014, Амфотерицин В 0,00015, NeyDIL №37 St. III 0,00015, Среда Дюльбекко-Игла остальное.The closest analogue is a means for the conservation of donor corneas of the eye (Patent RF №2450515), containing: Wednesday 199, Hema F-10 medium, chondroitin sulfate, dextran-40, gentamicin sulfate, amphoterricin B and Dulbecco-Igla medium, additionally contains the drug NeyDIL №37 St. III (R / U LSR-008827 / 08-061108) with the following ratio of components, wt. %: Medium 199 25.0, Medium Ham F-10 25.0, Chondroitin Sulfate A 0.5, Dextran 40 40.0, Gentamicin Sulfate 0.00014, Amphotericin B 0.00015, NeyDIL No. 37 St. III 0.00015, Wednesday Dulbecco-Needle the rest.
Недостатком этой среды является то, что использованные регуляторные пептиды NeyDIL №37 St. III не восстанавливают липидный слой клеток роговицы, не уменьшают внутриклеточный некроз эндотелия и кератоцитов.The disadvantage of this environment is that the used regulatory peptides NeyDIL No. 37 St. III do not restore the lipid layer of corneal cells, do not reduce intracellular necrosis of the endothelium and keratocytes.
Задачей изобретения является создание многокомпонентного средства для повышения жизнеспособности трансплантата роговицы и пролонгирования сроков консервации, как для сквозной, так и для задней послойной кератопластики.The objective of the invention is the creation of a multicomponent means for increasing the viability of a corneal transplant and prolonging the time of preservation, both for end-to-end and for the posterior layered keratoplasty.
Техническим результатом является повышение жизнеспособности трансплантата путем восстановления клеточных и внутриклеточных мембран, пролонгирование сроков консервации за счет сохранения плотности эндотелиальных клеток в режиме гипотермической (при температуре 4-8°C) консервации донорской роговицы.The technical result is to increase the viability of the graft by restoring cell and intracellular membranes, prolonging the conservation time by maintaining the density of endothelial cells in the hypothermic mode (at 4-8 ° C) preservation of the donor cornea.
Технический результат достигается тем, что данное средство для консервации донорской роговицы, в режиме гипотермической консервации, содержащее среду 199, среду Хэма F-10, хондроитин-сульфат, декстран-40, Гентамицин-сульфат, амфотерицин В и среду Дюльбекко-Игла, дополнительно содержит препарат Фосфоглив при следующем соотношении компонентов, мас. %:The technical result is achieved by the fact that this tool for the preservation of donor cornea, in the mode of hypothermic preservation, containing medium 199, Ham's medium F-10, chondroitin sulfate, dextran-40, Gentamicin sulfate, amphotericin B and Dulbecco-Eagle medium, additionally contains drug Phosphogliv in the following ratio, wt. %:
При этом среда 199 имеет следующий состав, мг/л: Л-аланин 25; Л-аргинина хлорид 70; аспарагиновая кислота 30; Л-цистеина хлорид - 0,0987; Л-цистина двунатриевая соль; Л глютаминовая кислота 66,82; Л-глютамин 100; глютатион 0,05; глицин 50; Л гистидина хлорид одноводный 21,88; Л гидрооксипролин 10; Л-изолейцин 20; Л-лейцин 60; Л лизина хлорид 70; Л-метионин 15; Л-фенилаланин 25; Л-пролин 40; Л-серин 25; Л-треонин 30; Л-триптофан 10; Л-тирозина двунатриевая соль - 49,72; Л-валин 25; Л-аскорбиновая кислота 0,05; биотин 0,01; кальциферол 0,1; Д-кальция пантотенат 0,01; холина хлорид 0,5; фолиевая кислота - 0,01; и-инозитол 0,05; менафтона натрия бисульфат трехводный 0,019; никотиновая кислота 0,025; никотинамид 0,025; пара-амино-бензойная кислота 0,05; пиридоксальхлорид 0,025; пиридоксинхлорид 0,025; рибофлавин 0,01; тиамина хлорид 0,01; Д-Л-токоферола фосфата двунатриевая соль 0,01; витамина А-ацетат 0,1147; кальция хлорид двухводный 185,5; железа нитрат девятиводный 0,01; калия хлорид 400; калия дегидроортофосфат 60; магния сульфат семиводный 200; натрия хлорид 8000; натрия гидроортофосфат 47,5; аденина сульфат 10; 5-АМФ 0,2; АТФ двунатриевая соль 10; холестерол 0,2; 2-дезоксирибоза 0,5; Д-глюкоза 1000; гуанина хлорид - 0,3; гипоксантин 0,3; Д-рибоза 0,5; натрия ацетата 36,71; натриевая соль фенола красного 17; тимин 0,3; твин 80-5; урацил 0,3; ксантин 0,3.At the same time Wednesday 199 has the following composition, mg / l: L-alanine 25; L-arginine chloride 70; aspartic acid 30; L-cysteine chloride - 0.0987; L-cystine disodium salt; L glutamic acid 66,82; L-glutamine 100; glutathione 0.05; glycine 50; L histidine chloride monohydrate 21,88;
Среда Хэма F-10 имеет следующий состав, мг/л: Л-аланин 8,91; Л-аргинина хлорид 210,7; Л-аспарагин 1-водный - 15,01; Л-аспарагиновая кислота 13,31; Л-цистеина хлорид 31,53; Л-глютаминовая кислота 14,71; Л-глютамин 146,2; глицин 7,51; Л-гистидина хлорид одноводный 20,96; Л-изолейцин 2,62; Л-лейцин 13,12; Л-лизин 29,3; Л-метионин 4,48; Л-фенилаланин 4,96; Л-пролин 11,51; Л-серин 10,5; Л-треонин 3,57; Л-триптофан 0,61; Л-тирозина натриевая соль 2,25; Л-валин 3,51; биотин 0,024; Д-кальция пантотенат 0,715; хлорид холина 0,698; фолиевая кислота 1,32; и-инозитол 0,541; никотинамид 0,611; пиридоксин-хлорид 0,206; рибофлавин 0,376; тиамина хлорид 1,012; витамин В12 1,36; кальция хлорид двухводный 44,1; сульфат меди пятиводный 0,0025; сульфат железа семиводный 0,8346; хлорид калия - 285; калия дегидрофосфат 83; магния сульфат семиводный 152,7; натрия хлорид 7400; натрия гидроортофосфат 156,2; цинка сульфат семиводный 0,0288; Д-глюкоза 1100; гипоксантин 4,08; липоевая кислота 0,206; натриевая соль фенола красного 12; натрия пируват 110; тимидин 0,727.Ham's F-10 medium has the following composition, mg / l: L-alanine 8.91; L-arginine chloride 210.7; L-asparagine 1-water - 15.01; L-aspartic acid 13.31; L-cysteine chloride 31.53; L-glutamic acid 14.71; L-glutamine 146.2; glycine 7.51; L-histidine chloride monohydrate 20.96; L-isoleucine 2.62; L-leucine 13,12; L-lysine 29.3; L-methionine 4.48; L-phenylalanine 4.96; L-proline 11.51; L-serine 10.5; L-threonine 3.57; L-tryptophan 0.61; L-tyrosine sodium salt 2.25; L-valine 3.51; Biotin 0.024; D-calcium pantothenate 0.715; choline chloride 0.698; folic acid 1.32; i-inositol 0,541; Nicotinamide 0.611; pyridoxine chloride 0.206; Riboflavin 0.376; thiamine chloride 1,012; vitamin B12 1.36; calcium chloride two-water 44.1; five-water copper sulfate 0.0025; ferrous sulphate of semi -hydrous potassium chloride - 285; potassium dehydrophosphate 83; magnesium sulphate semivalent 152.7; sodium chloride 7400; sodium hydrogen phosphate 156.2; zinc sulfate hemihydrate 0.0288; D-glucose 1100; hypoxanthine 4.08; lipoic acid 0.206; sodium salt of phenol red 12; sodium pyruvate 110; Thymidine 0.727.
Среда Дюльбекко-Игла имеет следующий состав, мг/л: Л-аргинин 84; Л-цистина двунатриевая соль 56,78; Л-глютамин 584; глицин 30; Л-гистидина хлорид одноводный 42; Л-изолейцин 104,8; Л-лейцин 104,8; Л-лизина хлорид 146,2; Л-метионин 30; Л-фенилаланин - 66; Л-серии 42; Л-треонин 95,2; Л-триптофан 16; Л-тирозина двунатриевая соль 89,5; Л-валин 93,6; Д кальция пантотенат 4; холина хлорид 4; фолиевая кислота 4; и-инозитол 7; никотинамид 4; пиридоксаль-хлорид 4; рибофлавин 0,4; тиамина хлорид 4; кальция хлорид двухводный 264,9; нитрат железа девятиводный 0,1; калия хлорид 400; магния сульфат семиводный 200; натрия хлорид 6400; натрия бикарбонат 3700; натрия дигидроортофосфат двухводный 141,3; Д-глюкоза 4500; натриевая соль фенола красного 15; натрия пируват 110.Wednesday Dulbecco-Needle has the following composition, mg / l: L-arginine 84; L-cystine disodium salt 56.78; L-glutamine 584; glycine 30; L-histidine chloride monohydrate 42; L-isoleucine 104.8; L-leucine 104.8; L-lysine chloride 146.2; L-methionine 30; L-phenylalanine - 66; L-series 42; L-threonine 95.2; L-tryptophan 16; L-tyrosine disodium salt 89.5; L-valine 93.6;
Фосфоглив (рег. №: Р N002528/02), содержит фосфолипиды (липоид С100) 500 мг, натрия глицирризинат (тринатриевая соль глицирризиновой кислоты) 200 мг; Вспомогательное вещество: мальтоза - 1800 мг.Phosphogliv (reg. No.: P N002528 / 02), contains phospholipids (lipoid C100) 500 mg, sodium glycyrrhizinate (glycyrrhizinic acid trisodium salt) 200 mg; Auxiliary substance: maltose - 1800 mg.
Выбор сред объяснялся уязвимостью эндотелиальных клеток, относящихся к глиальной ткани. Наиболее оптимальным является выбор трех сред - среда 199, среда Хэма F-10 и среда Дюльбекко-Игла, в заявленных соотношениях, имитирующих аминокислотный и метаболический состав водянистой влаги передней камеры интактного глаза.The choice of media was explained by the vulnerability of glial tissue endothelial cells. The most optimal is the choice of three environments - Wednesday 199, Ham's environment F-10 and Dulbecco-Eagle medium, in the stated ratios that mimic the amino acid and metabolic composition of the aqueous humor of the anterior chamber of the intact eye.
Хондроитин-сульфат А относится к цитопротекторам - вискоэластикам, обладая соответствующим знаком и электронным зарядом, он образует поверхностную защитную пленку на клетках эндотелиального пласта роговицы. Тем самым предотвращается механическое повреждение и десквамация клеток эндотелия роговицы в процессе гипотермической консервации донорского материала.Chondroitin sulfate A belongs to cytoprotectors - viscoelastics, possessing a corresponding sign and an electronic charge, it forms a surface protective film on the cells of the cornea endothelial layer. This prevents mechanical damage and desquamation of the corneal endothelium cells in the process of hypothermic preservation of donor material.
Декстран с молекулярной массой 40000 D относится к высокомолекулярным онкотическим компонентам среды и, таким образом, подобранный в заявленной концентрации, создает в среде онкотическое давление равное 320 мосм/л, при котором предотвращается процесс набухания клеток и коллоидного вещества стромы донорской роговицы в процессе длительной гипотермической консервации.Dextran with a molecular weight of 40000 D refers to the high molecular weight oncotic components of the medium and, therefore, selected at the stated concentration, creates oncotic pressure in the medium equal to 320 mosm / l, which prevents the swelling of cells and the colloidal substance of the stroma of the donor cornea during prolonged hypothermic preservation .
Для предотвращения роста патогенной микрофлоры добавлены: гентамицин-сульфат, оказывающий бактерицидное действие в отношении широкого спектра грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, и амфотерицин В, обладающий фунгицидным и фунгистатическим действиями.To prevent the growth of pathogenic microflora, gentamicin sulfate has been added, which has a bactericidal effect against a wide range of gram-negative and gram-positive microorganisms, and amphotericin B, which has fungicidal and fungistatic actions.
Фосфоглив - комбинированное средство. Препарат оказывает мембраностабилизирующее действие и способен восстанавливать клеточные и внутриклеточные мембраны, их структуру и функции при повреждении, оказывать цитопротекторный эффект, нормализовать белковый и липидный обмены. Дополнительно обладает антиоксидантной и противовирусной активностью.Phosphogliv is a combined remedy. The drug has a membrane stabilizing effect and is able to restore cellular and intracellular membranes, their structure and functions when damaged, to have a cytoprotective effect, to normalize protein and lipid exchanges. Additionally, it has antioxidant and antiviral activity.
Заявленное средство для консервации донорской роговицы благодаря входящим в его состав компонентам в обозначенных концентрациях восстанавливает клеточные мембраны (мембрановостанавливающее действие) и обладает мембранопротективным действием.The claimed means for the preservation of the donor cornea due to its constituent components in designated concentrations restores the cell membrane (membrane-restoring action) and has a membrane-protective action.
В результате этого создаются условия для повышения жизнеспособности трансплантата роговицы и пролонгирования сроков консервации донорской роговицы для задней послойной кератопластики.As a result, conditions are created for increasing the viability of a corneal transplant and prolonging the periods of preservation of the donor cornea for posterior layered keratoplasty.
Это подтверждает морфометрическое и ультраструктурное исследование 32 роговиц от 16 доноров, полученных из Глазного банка МНТК «Микрохирургия глаза» им. С.Н. Федорова. Были сформированы три группы: опытная и две контрольные, при этом роговицы из опытной группы (правые) (n=16) от каждого донора подвергались консервации в заявленном средстве, а парные роговицы (левые) составляли контрольные группы: группа I - (n=8) помещалась в средство для консервации роговицы, полученное по патенту №2450515, остальные - группа II (n=8) - в среду, полученную по патенту №2069951. Все роговицы подвергались гипотермической консервации при 4-8°C в течение одних (n=4), двух (n=4), шести (n=4) и девяти (n=4) суток. Для оценки состояния мембран клетки и ее органелл использовалась трансмиссионная электронная микроскопия на электронном микроскопе (JEM 1200 EX II, Япония). Подсчет плотности эндотелиальных клеток проводился с помощью кератоанализатора для Глазных банков (модель 98, «Canon», Япония). Оценка на некроз проводилась с помощью окраски йодидом пропидия, с использованием конфокального лазерного сканирующего биологического микроскопа (FLUOVIEW FV10i, OLYMPUS Corporation, Япония).This confirms the morphometric and ultrastructural study of 32 corneas from 16 donors, obtained from the Eye Bank of the Irkutsk Eye Microsurgery Clinic. S.N. Fedorov. Three groups were formed: experimental and two control, while the corneas from the experimental group (right) (n = 16) from each donor were preserved in the claimed agent, and the paired corneas (left) were control groups: group I - (n = 8 ) was placed in the means for the preservation of the cornea, obtained by patent No. 2450515, the rest - group II (n = 8) - on Wednesday, obtained by patent No. 2069951. All corneas were subjected to hypothermic preservation at 4–8 ° C for one (n = 4), two (n = 4), six (n = 4), and nine (n = 4) days. To assess the state of cell membranes and its organelles, transmission electron microscopy was used on an electron microscope (JEM 1200 EX II, Japan). The counting of the density of endothelial cells was performed using a keratoanalyzer for Ocular banks (model 98, Canon, Japan). Necrosis assessment was performed using propidium iodide staining using a confocal laser scanning biological microscope (FLUOVIEW FV10i, OLYMPUS Corporation, Japan).
При трансмиссионной микроскопии эндотелиальных клеток донорских роговиц разница между опытной и контрольными группами была отмечена уже на первые сутки эксперимента: в опытной группе наблюдалось уплотнение не только наружных клеточных, но и внутриклеточных мембран, с усилением эффекта на вторые сутки и сохранением его до шести суток консервации. В образцах опытной группы на девятые сутки были обнаружены участки начального повреждения внутриклеточных, в частности митохондриальных мембран эндотелиальных клеток донорских роговиц. На Фигуре 1 и 2 представлена трансмиссионная электронная микроскопия ультраструктуры эндотелиальных клеток роговиц на девятые сутки гипотермической консервации опытной группы при увеличении 10000х и 20000х, соответственно.When transmission microscopy of donor cornea endothelial cells, the difference between the experimental and control groups was noted on the first day of the experiment: in the experimental group, not only the outer cell membranes, but also intracellular membranes were condensed, with the effect increasing on the second day and preserving it for six days of preservation. On the ninth day, samples of the initial intracellular damage, in particular, the mitochondrial membranes of the endothelial cells of donor corneas, were found in samples of the experimental group. Figure 1 and 2 show transmission electron microscopy of ultrastructure of corneal endothelial cells on the ninth day of the hypothermic preservation of the experimental group at 10,000x and 20,000x magnification, respectively.
При этом в контрольных группах наблюдалось постепенное истончение и повреждение клеточных мембран, начиная с первых суток, выявлены грубые ультраструктурные изменения с паренхиматозной дегенерацией, то есть осаждением клеточных белков в матриксе цитоплазмы эндотелиальной клетки роговицы, что является проявлением необратимых клеточных процессов. На фигуре 3 и 4 представлена трансмиссионная электронная микроскопия эндотелиальной клетки роговицы образца из контрольной группы II на девятые сутки консервации при увеличении 10000х и 20000х, соответственно.At the same time, in the control groups, gradual thinning and damage of cell membranes were observed, starting from the first day, gross ultrastructural changes with parenchymal degeneration, i.e., deposition of cellular proteins in the corneal endothelial cell matrix were observed, which is a manifestation of irreversible cellular processes. 3 and 4 show transmission electron microscopy of a corneal endothelial cell of a sample from control group II on the ninth day of conservation at 10,000x and 20,000x magnification, respectively.
При оценке морфометрических характеристик выявлено, что за 9 суток консервации потеря плотности эндотелиальных клеток донорских роговиц в опытной группе составила - 2,7%, в контрольной группе I - 5,1%, а контрольной группе II - 7,2%. На фигуре 5 представлена динамика изменения плотности эндотелиальных клеток в группах сравнения.When evaluating the morphometric characteristics, it was revealed that for 9 days of conservation, the loss of density of endothelial cells of donor corneas in the experimental group was 2.7%, in the control group I — 5.1%, and in the control group II — 7.2%. The figure 5 presents the dynamics of changes in the density of endothelial cells in the comparison groups.
При анализе потери эндотелиальных клеток в связи с развитием некроза обнаружено, что количество поврежденных клеток увеличивалось постепенно. К девяти суткам консервации в опытной группе достигало - 3,1%, в контрольной группе I - 6,4%, а в контрольной группе II - 9,8%. На фигуре 6 представлена динамика потери эндотелиальных клеток донорских роговиц в связи с развитием некроза в опытной и контрольных группах на 1, 2, 6 и 9 сутки консервации.When analyzing the loss of endothelial cells due to the development of necrosis, it was found that the number of damaged cells increased gradually. By nine days, mothballing in the experimental group reached 3.1%, in the control group I — 6.4%, and in the control group II — 9.8%. The figure 6 presents the dynamics of the loss of endothelial cells of donor corneas in connection with the development of necrosis in the experimental and control groups at 1, 2, 6 and 9 days of preservation.
Средство для консервации роговицы получают следующим образом: в условиях ламинарной комнаты в химически чистую и стерильную мерную колбу сливают вместе две среды: 25 мл среды 199 и 25 мл среды Хэма F-10. Далее последовательно вносят 0,00014 г гентамицин-сульфата, 0,00015 амфотерицина В. Состав разделяют на две равные части по 25 мл и растворяют в первой части 6-7 г декстрана-40, а во второй части 0,5 г хондроитин-сульфата А путем медленного нанесения сухого вещества на поверхность жидкой смеси. После внесения указанных компонентов растворы оставляют до полного набухания на 80-120 минут, после чего полностью растворяют. Затем оба раствора сливают вновь вместе в мерную колбу, и добавляют среду Дюльбекко-Игла до метки 100 мл. Затем средство подвергают префильтрации через фильтр «Миллипор» с диаметром пор 0,45 мкм, средство без добавления Фосфоглива разливают во флаконы, с одновременной «Глубинной стерилизацией» через систему миллипоровых фильтров с диаметром пор 0,22 мкм. Флаконы укупориваются стерильными крышками и помещаются в холодильник для хранения при температуре 4-8°C. Фосфоглив вносят непосредстенно перед использованием в соотношении 0,025-0,05 мас. %.The corneal preservation agent is prepared as follows: in a laminar room, two media are poured together into a chemically clean and sterile volumetric flask: 25 ml of medium 199 and 25 ml of Ham medium F-10. Next, 0.00014 g of gentamicin sulfate, 0.00015 amphotericin B are successively introduced. The composition is divided into two equal parts of 25 ml and dissolved in the first part of 6-7 g of dextran-40, and in the second part of 0.5 g of chondroitin sulfate And by slowly applying a dry substance to the surface of the liquid mixture. After the introduction of these components, the solutions are left to complete swelling for 80-120 minutes, then completely dissolved. Then both solutions are drained again into a volumetric flask, and Dulbecco-Eagle medium is added to the 100 ml mark. Then the tool is subjected to prefiltration through a Millipor filter with a pore diameter of 0.45 μm, the tool without the addition of Phosphogliv is poured into vials, with simultaneous “Depth sterilization” through a system of millipor filter with a pore diameter of 0.22 μm. The bottles are sealed with sterile caps and placed in a refrigerator for storage at 4-8 ° C. Phosphogliv contribute directly before use in the ratio of 0.025-0.05 wt. %
Использование предлагаемого средства для хранения донорской роговицы в Глазном банке ФГАУ МНТК «Микрохирургия глаза» позволило повысить жизнеспособность трансплантата роговицы путем восстановления клеточных и внутриклеточных мембран и пролонгировать сроки консервации за счет сохранения плотности эндотелиальных клеток, как для сквозной, так и для послойной кератопластики.The use of the proposed means for storing the donor cornea in the Eye Bank of FSAU MNTK "Eye Microsurgery" has increased the viability of a cornea transplant by restoring cell and intracellular membranes and prolonging the preservation time by maintaining the density of endothelial cells for both pass-through and layered keratoplasty.
Claims (4)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018105712A RU2676311C1 (en) | 2018-02-15 | 2018-02-15 | Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018105712A RU2676311C1 (en) | 2018-02-15 | 2018-02-15 | Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2676311C1 true RU2676311C1 (en) | 2018-12-27 |
Family
ID=64753655
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018105712A RU2676311C1 (en) | 2018-02-15 | 2018-02-15 | Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2676311C1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2710167C1 (en) * | 2019-04-11 | 2019-12-24 | Сергей Анатольевич Борзенок | Universal remedy for hypothermic preservation of cornea graft |
US11154052B2 (en) | 2018-09-14 | 2021-10-26 | University Of Miami | Dual-chamber vial for corneal graft preservation |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU1109157A1 (en) * | 1981-03-27 | 1984-08-23 | Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Глазных Болезней | Method of treatment of herpetic phlebothrombosis |
RU2069951C1 (en) * | 1993-02-26 | 1996-12-10 | Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" | Medium for eye cornea conservation |
RU2450515C1 (en) * | 2010-12-01 | 2012-05-20 | Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Preserving agent for donor cornea |
EP3170391A1 (en) * | 2014-07-18 | 2017-05-24 | Youvision Biotech Co., Ltd. | Lamellar cornea preserving solution |
-
2018
- 2018-02-15 RU RU2018105712A patent/RU2676311C1/en active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU1109157A1 (en) * | 1981-03-27 | 1984-08-23 | Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Глазных Болезней | Method of treatment of herpetic phlebothrombosis |
RU2069951C1 (en) * | 1993-02-26 | 1996-12-10 | Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" | Medium for eye cornea conservation |
RU2450515C1 (en) * | 2010-12-01 | 2012-05-20 | Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Preserving agent for donor cornea |
EP3170391A1 (en) * | 2014-07-18 | 2017-05-24 | Youvision Biotech Co., Ltd. | Lamellar cornea preserving solution |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11154052B2 (en) | 2018-09-14 | 2021-10-26 | University Of Miami | Dual-chamber vial for corneal graft preservation |
RU2710167C1 (en) * | 2019-04-11 | 2019-12-24 | Сергей Анатольевич Борзенок | Universal remedy for hypothermic preservation of cornea graft |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0517972B1 (en) | Define serum-free medical solution and use thereof | |
US7824847B2 (en) | Tissue preservation method with polyoxyethylene/polyoxypropylene copolymer | |
Yang et al. | Exploring the potential of biocompatible osmoprotectants as highly efficient cryoprotectants | |
ES2217700T3 (en) | MEDICAL SOLUTION DEFINED FROM SERUM FOR OPHTHALMOLOGY. | |
US8691571B1 (en) | Extending tissue preservation | |
RU2676311C1 (en) | Means for preservation of the posterior layer transplant of the donor cornea | |
US8288084B2 (en) | Composition and method for flushing and cold/cryo preserving organs, tissues, and cells | |
WO2005084635A2 (en) | Pharmaceutical ocular preparations suitable for the treatment of the ocular surface and related disorders/diseases | |
CA2522941A1 (en) | Improved methods and solutions for storing donor organs | |
US20070129286A1 (en) | Treatment Solution and Method for Preventing Posterior Capsular Opacification by Selectively Inducing Detachment And/Or Death of Lens Epithelial Cells | |
RU2710167C1 (en) | Universal remedy for hypothermic preservation of cornea graft | |
RU2450515C1 (en) | Preserving agent for donor cornea | |
CN101569302A (en) | In-vitro liver perfusion preservation liquid | |
RU2674585C1 (en) | Agent for preservation of donor cornea | |
RU2069951C1 (en) | Medium for eye cornea conservation | |
RU2498570C1 (en) | Cornea storage solution | |
WO2022133247A2 (en) | Composition and method of preserving viability of cell in a low temperature environment | |
RU2745114C1 (en) | Means for organotypic preservation of donor cornea | |
US6162642A (en) | Agent for dehydrating corneas in organ culture | |
CA2257497A1 (en) | Compositions and methods for the preservation of living tissues | |
Steinhardt et al. | Poloxamer 188 enhances endothelial cell survival in bovine corneas in cold storage | |
WO2022251948A1 (en) | Compositions and methods for lung preservation | |
Chen et al. | THE EFFICACY OF NON-LACTATE-GENERATING METABOLITES AS SUBSTRATES FOR MAINTAINING DONOR TISSUES1 | |
Fowlks | Alteration of Lens Tonicity by Low Temperature and the Effect of Inhibitors on Osmotic Water Transport | |
CN1580248A (en) | Method for configurating feeder-layer-free corneal eipithelium for frost self-corneal limbus stem cell |