RU2674237C1 - Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea - Google Patents
Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea Download PDFInfo
- Publication number
- RU2674237C1 RU2674237C1 RU2017127350A RU2017127350A RU2674237C1 RU 2674237 C1 RU2674237 C1 RU 2674237C1 RU 2017127350 A RU2017127350 A RU 2017127350A RU 2017127350 A RU2017127350 A RU 2017127350A RU 2674237 C1 RU2674237 C1 RU 2674237C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cornea
- endothelial
- treatment
- corneal
- patients
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 title abstract description 44
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 210000003683 corneal stroma Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 14
- 208000003923 Hereditary Corneal Dystrophies Diseases 0.000 claims description 2
- 206010011005 corneal dystrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002433 mononuclear leukocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 6
- 210000002555 descemet membrane Anatomy 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 208000032984 Intraoperative Complications Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000035965 Postoperative Complications Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010057765 Procedural complication Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 abstract 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 35
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 18
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 17
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 11
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 11
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 11
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 10
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 10
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 9
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 7
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 7
- 206010034960 Photophobia Diseases 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 206010010996 Corneal degeneration Diseases 0.000 description 5
- 201000004781 bullous keratopathy Diseases 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 3
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 206010011033 Corneal oedema Diseases 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 201000004778 corneal edema Diseases 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 2
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 2
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 2
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000002864 mononuclear phagocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002577 ophthalmoscopy Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 206010011026 Corneal lesion Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 208000031354 Hyphema Diseases 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 210000000399 corneal endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 108010037721 cytase Proteins 0.000 description 1
- 230000004452 decreased vision Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 230000004298 light response Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000011470 radical surgery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000008458 response to injury Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- XZNXVSDNACTASG-RZNNTOFGSA-M sodium;3,5-diacetamido-2,4,6-triiodobenzoate;3,5-diacetamido-2,4,6-triiodobenzoic acid;(2r,3r,4r,5s)-6-(methylamino)hexane-1,2,3,4,5-pentol Chemical compound [Na+].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CC(=O)NC1=C(I)C(NC(C)=O)=C(I)C(C(O)=O)=C1I.CC(=O)NC1=C(I)C(NC(C)=O)=C(I)C(C([O-])=O)=C1I XZNXVSDNACTASG-RZNNTOFGSA-M 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004382 visual function Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F9/00—Methods or devices for treatment of the eyes; Devices for putting-in contact lenses; Devices to correct squinting; Apparatus to guide the blind; Protective devices for the eyes, carried on the body or in the hand
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Hematology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано для лечения эндотелиально-эпителиальной дистрофии (ЭЭД) роговицы.The invention relates to medicine, in particular to ophthalmology, and can be used to treat endothelial-epithelial dystrophy (EED) of the cornea.
ЭЭД роговицы в настоящее время рассматривается как хроническое воспалительно-дистрофическое заболевание роговой оболочки, сопровождающееся выраженным болевым синдромом и приводящее к резкому снижению зрения [14]. В основе патологии лежит развитие хронического отека ткани роговой оболочки, сопровождающееся значительным снижением остроты зрения и выраженным болевым синдромом [14, 17]. Многие аспекты патогенеза данного заболевания до настоящего времени остаются мало изученными, однако ведущим патогенетическим фактором считается прогрессирующее и необратимое уменьшение численности клеток эндотелия роговицы и, как следствие, утрата им барьерной и насосной функций [7, 13, 14, 17].Corneal EED is currently regarded as a chronic inflammatory-dystrophic disease of the cornea, accompanied by severe pain and leading to a sharp decrease in vision [14]. The pathology is based on the development of chronic edema of the corneal tissue, accompanied by a significant decrease in visual acuity and severe pain [14, 17]. Many aspects of the pathogenesis of this disease remain poorly understood, however, the leading pathogenetic factor is the progressive and irreversible decrease in the number of corneal endothelial cells and, as a result, their loss of barrier and pumping functions [7, 13, 14, 17].
В дальнейшем наблюдается увеличение гидратации стромы роговицы, снижение количества кератоцитов и гликозаминогликанов стромы, что, в совокупности, обусловливает развитие прогрессирующего отека стромы, и появление отека эпителиального слоя роговой оболочки. Вследствие просачивания водянистой влаги через роговичную ткань в поверхностном слое роговицы формируются эпителиальные пузырьки, заполненные жидкостью - буллы, самопроизвольное вскрытие которых сопровождается развитием болевого синдрома разной степени выраженности, выраженной светобоязнью и слезотечением.In the future, there is an increase in hydration of the stroma of the cornea, a decrease in the number of keratocytes and glycosaminoglycans of the stroma, which, together, leads to the development of progressive edema of the stroma, and the appearance of edema of the epithelial layer of the cornea. Due to seepage of aqueous humor through the corneal tissue in the surface layer of the cornea, epithelial vesicles filled with fluid are formed - bullae, spontaneous opening of which is accompanied by the development of a pain syndrome of varying severity, expressed by photophobia and lacrimation.
Патогенетически ориентированным и радикальным способом лечения ЭЭД роговицы является кератопластика в различных модификациях (интраламеллярная кератопластика, задняя послойная кератопластика или эндотелиальная кератопластика, интраламеллярная имплантация кератопротезов) с заменой эндотелиального слоя, позволяющая достичь как лечебного, так и оптического эффекта [12, 13, 15, 20].Keratoplasty in various modifications (intralamellar keratoplasty, posterior layer-by-layer keratoplasty or endothelial keratoplasty, intralamellar implantation of keratoprostheses) with replacement of the endothelial layer, which allows to achieve 15, 15 ].
Однако, как и при всяком хирургическом вмешательстве, в послеоперационном периоде высок риск развития гнойных осложнений и отторжения трансплантата [16, 18, 19].However, as with any surgical intervention, in the postoperative period, the risk of developing purulent complications and transplant rejection is high [16, 18, 19].
Использование клеточной терапии, на наш взгляд, является альтернативой радикальной хирургии [1]. В клинической офтальмологии на протяжении последних десятилетий с целью коррекции репаративных процессов в тканях глазного яблока при различной патологии органа зрения активно используются цитокины - иммунопептиды, вырабатываемые клетками лимфоидной и нелимфоидной природы и участвующие в воспалительно-репаративных реакциях [5, 6].The use of cell therapy, in our opinion, is an alternative to radical surgery [1]. In clinical ophthalmology over the past decades, in order to correct reparative processes in the tissues of the eyeball for various pathologies of the organ of vision, cytokines are actively used - immunopeptides produced by cells of a lymphoid and non-lymphoid nature and participating in inflammatory-reparative reactions [5, 6].
Цитокины представляют собой единую самостоятельную систему регуляции функций организма, обеспечивающую развитие защитных реакций и поддержание гомеостаза при внедрении патогенов и нарушении целостности тканей [2, 3, 6]. На местном уровне цитокины ответственны за все последовательные этапы развития адекватного ответа на повреждение и за восстановление структуры поврежденной ткани.Cytokines are a single independent system of regulation of body functions, providing the development of protective reactions and maintaining homeostasis during the introduction of pathogens and violation of tissue integrity [2, 3, 6]. At the local level, cytokines are responsible for all successive stages of the development of an adequate response to damage and for the restoration of the structure of damaged tissue.
Мононуклеары крови, являющиеся основным источником данных биологически активных веществ, изначально обладают высоким секреторным потенциалом и способностью адаптироваться к любому микроокружению [2, 3, 6].Blood mononuclear cells, which are the main source of these biologically active substances, initially have a high secretory potential and the ability to adapt to any microenvironment [2, 3, 6].
Наиболее близким к предлагаемому является способ лечения ЭЭД роговицы, разработанный в эксперименте in vivo и заключающийся в том, что свежевыделенную суспензию аутологичных мононуклеаров крови вводят в переднюю камеру больного глаза экспериментального животного и наслаивают на внутреннюю поверхность роговой оболочки (патент РФ №2601317).Closest to the proposed is a method of treating corneal EDF, developed in an in vivo experiment, namely, that a freshly isolated suspension of autologous blood mononuclear cells is introduced into the anterior chamber of the diseased eye of an experimental animal and layered on the inner surface of the cornea (RF patent No. 2601317).
Способ осуществляется следующим образом. Аутологичные мононуклеарные клетки из крови экспериментального животного выделяются методом фракционирования в градиенте плотности на разделяющем растворе фиколл-верографин. Кровь, взятая в количестве 4,0-5,0 мл, помещается в стерильную пробирку, содержащую 1,0 мл раствора гепарина. Гепаринизированная кровь разбавляется в 2 раза изотоническим раствором хлорида натрия. Полученная суспензия наслаивается на 3,0 мл смеси фиколла-верографина. Пробирка центрифугируется при комнатной температуре в течение 15 мин при 800 g (2000 об/мин). После центрифугирования интерфазный слой, содержащий мононуклеарные клетки и располагающийся между плазмой и градиентом, забирается пастеровской пипеткой. Добавляется 1,0 мл изотонического раствора хлорида натрия, и полученная суспензия вновь центрифугируется в течение 7 мин при 400 g (1500 об/мин). Чистота мононуклеаров, полученных на градиенте фиколл-верографин, составляет до 96-98%. Жизнеспособность клеточного материала оценивается в тесте с трипановым синим и составляет 97-98%. В условиях операционной после наркоза и обработки операционного поля с соблюдением правил асептики и антисептики, экспериментальным животным с предварительно индуцированной ЭЭД роговой оболочки, проводится оперативное вмешательство. В роговице вблизи лимба выполняют два парацентеза, на 7 и 11 часах, в один из которых устанавливают ирригационную систему с подачей стерильного воздуха в переднюю камеру под давлением до 0,2 атм. Через второй парацентез в переднюю камеру на границе между внутренней поверхностью роговицы и пузырем воздуха с помощью шприца вводят клеточную суспензию и наслаивают ее на заднюю поверхность роговой оболочки. Ирригационную систему удаляют, края парацентезов гидратируют.The method is as follows. Autologous mononuclear cells from the blood of an experimental animal are isolated by density gradient fractionation on a ficoll-verographin separating solution. Blood taken in an amount of 4.0-5.0 ml is placed in a sterile tube containing 1.0 ml of a heparin solution. Heparinized blood is diluted 2 times with isotonic sodium chloride solution. The resulting suspension is layered on 3.0 ml of a mixture of ficoll-verographin. The tube is centrifuged at room temperature for 15 min at 800 g (2000 rpm). After centrifugation, an interphase layer containing mononuclear cells located between the plasma and the gradient is collected by a Pasteur pipette. 1.0 ml of isotonic sodium chloride solution is added, and the resulting suspension is again centrifuged for 7 min at 400 g (1500 rpm). The purity of the mononuclear cells obtained on the ficoll-verographin gradient is up to 96-98%. The viability of the cellular material is evaluated in the test with trypan blue and is 97-98%. In the operating room after anesthesia and treatment of the surgical field in compliance with the rules of aseptic and antiseptic, an experimental intervention is performed in experimental animals with a pre-induced corneal hemorrhaging. In the cornea near the limb, two paracentesis are performed, at 7 and 11 hours, in one of which an irrigation system is installed with sterile air supplied to the anterior chamber under a pressure of up to 0.2 atm. Through a second paracentesis, a cell suspension is injected into the anterior chamber at the border between the inner surface of the cornea and the air bubble using a syringe and layered on the posterior surface of the cornea. The irrigation system is removed, the edges of the paracentesis are hydrated.
Недостатками данного метода лечения является необходимость выполнения манипуляций в передней камере, а также высокая вероятность недостаточной адгезии мононуклеарных клеток к внутренней поверхности роговицы, что, с одной стороны повышает риск развития интра- и послеоперационных осложнений (иридоциклит, повреждение капсулы хрусталика, гифема), с другой - существенно снижает эффективность лечения заболевания.The disadvantages of this treatment method are the need to perform manipulations in the anterior chamber, as well as the high probability of insufficient adhesion of mononuclear cells to the inner surface of the cornea, which, on the one hand, increases the risk of developing intra- and postoperative complications (iridocyclitis, damage to the lens capsule, hyphema), and on the other - significantly reduces the effectiveness of the treatment of the disease.
Новой технической задачей является модификация данного способа хирургического лечения ЭЭД роговицы, связанная с созданием депо аутологичных мононуклеаров крови в задней трети стромы роговой оболочки в непосредственной близости к патологическому измененному эндотелиальному слою.A new technical task is the modification of this method of surgical treatment of corneal EDF associated with the creation of a depot of autologous blood mononuclear cells in the posterior third of the stroma of the cornea in close proximity to the pathological altered endothelial layer.
Для решения поставленной задачи разработан новый метод хирургического лечения ЭЭД роговицы, включающий проведение пневмодесцеметоабляции с последующим введением в заднюю треть стромы роговой оболочки суспензии аутологичных мононуклеаров крови.To solve this problem, a new method has been developed for the surgical treatment of corneal EED, including pneumodescemetoablation followed by the introduction of a suspension of autologous blood mononuclear cells into the posterior third of the cornea stroma.
Способ осуществляется следующим образом. Аутологичные мононуклеарные клетки из крови больного выделяют методом фракционирования в градиенте плотности на разделяющем растворе фиколл-верографин. Выделение аутологичных мононуклеаров осуществляют следующим образом: предварительно в условиях процедурного кабинета с соблюдением условий асептики и антисептики производится забор крови из локтевой вены пациента в количестве 4,0-5,0 мл, кровь помещают в стерильную пробирку, содержащую 1,0 мл раствора гепарина. Гепаринизированную кровь разводят в 2 раза изотоническим раствором хлорида натрия. Полученную суспензию наслаивают на 3,0 мл смеси фиколла-верографина (12 частей 9% фиколла и 5 частей 33,9% верографина с плотностью 1,067-1,077 г/мл). Соотношение объемов градиента и разделяемой суспензии составляет 1:3-1:4.The method is as follows. Autologous mononuclear cells from the patient’s blood are isolated by density gradient fractionation on a ficoll-verographin separation solution. The selection of autologous mononuclear cells is carried out as follows: preliminary, in the conditions of the treatment room, observing the conditions of aseptic and antiseptic, blood is taken from the patient's ulnar vein in an amount of 4.0-5.0 ml, the blood is placed in a sterile tube containing 1.0 ml of heparin solution. Heparinized blood is diluted 2 times with isotonic sodium chloride solution. The resulting suspension is layered on 3.0 ml of a mixture of ficoll-verographin (12 parts of 9% ficoll and 5 parts of 33.9% verographin with a density of 1.067-1.077 g / ml). The ratio of the volume of the gradient and the shared suspension is 1: 3-1: 4.
Пробирку центрифугируют при комнатной температуре в течение 15 мин при 800 g (2000 об/мин). После центрифугирования интерфазный слой, содержащий мононуклеары и располагающийся между плазмой и градиентом, забирают пастеровской пипеткой. Добавляют 1,0 мл изотонического раствора хлорида натрия и полученную суспензию вновь центрифугируют в течение 7 мин при 400 g (1500 об/мин) для отмывания клеточной взвеси.The tube is centrifuged at room temperature for 15 min at 800 g (2000 rpm). After centrifugation, an interphase layer containing mononuclear cells located between the plasma and the gradient is collected with a Pasteur pipette. Add 1.0 ml of isotonic sodium chloride solution and the resulting suspension is again centrifuged for 7 min at 400 g (1500 rpm) to wash the cell suspension.
Чистота мононуклеаров, полученных на градиенте фиколл-верографин, составляет 96-98%. Жизнеспособность клеточного материала оценивается в тесте с трипановым синим следующим способом: предварительно на основе раствора Рингера готовится 0,1% раствор эозина. Далее на основе дистиллированной воды готовится 0,1% раствор трипанового синего. После этого к капле клеточной суспензии добавляют 1-2 капли свежей смеси растворов, приготовленных ранее красителей, взятых в равных объемах. Полученную смесь помещают в камеру Горяева. При подсчете клеток процент окрашенных (погибших) элементов должен составлять 1,5-2%, что не превышало бы допустимое (не более 3%) количество. Жизнеспособность клеточного материала в тесте с трипановым синим составляла 97-98%.The purity of mononuclear cells obtained on a ficoll-verographin gradient is 96-98%. The viability of the cellular material is evaluated in the trypan blue test in the following way: first, a 0.1% eosin solution is prepared on the basis of Ringer's solution. Next, based on distilled water, a 0.1% trypan blue solution is prepared. After that, 1-2 drops of a fresh mixture of solutions of previously prepared dyes taken in equal volumes are added to a drop of cell suspension. The resulting mixture is placed in the camera Goryaeva. When counting cells, the percentage of stained (dead) elements should be 1.5-2%, which would not exceed the permissible (no more than 3%) amount. The viability of the cellular material in the trypan blue test was 97-98%.
В условиях операционной после анестезии с помощью инсталляций 1-2 капель 0,4% раствора инокаина и субтенонеальной инъекции 2,0 мл 2% раствора лидокаина прелимбально сверху в строму роговицы на уровне задней трети вводят иглу калибра 25G, надетую на 1,0 мл шприц со стерильным воздухом, и аккуратно продвигают ее в парацентральные отделы. После чего, надавливая на поршень шприца, вводят стерильный воздух, отслаивая десцеметовую мембрану. Далее в зону десцеметоабляции вводят полученную клеточную взвесь в объеме до 0,5-0,6 мл. Субконъюнктивально вводят раствор антибиотика, накладывают монокулярную повязку на 1 сутки. В послеоперационном периоде проводят инсталляции антибиотика по стандартной схеме.Under operating conditions, after anesthesia, with the help of installations, 1-2 drops of a 0.4% solution of inocaine and a subtenoneal injection of 2.0 ml of a 2% solution of lidocaine, a 25G gauge needle put on a 1.0 ml syringe is inserted prelimbally from above into the corneal stroma at the level of the posterior third with sterile air, and gently push it into the paracentral sections. Then, by pressing on the piston of the syringe, sterile air is introduced, exfoliating the descemet membrane. Next, the obtained cell suspension is introduced into the descemetoablation zone in a volume of up to 0.5-0.6 ml. Antibiotic solution is administered subconjunctively, a monocular dressing is applied for 1 day. In the postoperative period, antibiotic installations are carried out according to the standard scheme.
Клинические исследования проведены на базе офтальмологической клиники ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России (г. Томск) среди 20 пациентов (11 женщин и 9 мужчин) с ЭЭД роговицы, которые в зависимости от способа лечения были разделены на две группы: основную и сравнения.Clinical studies were conducted on the basis of the ophthalmology clinic of the FSBEI HE Siberian State Medical University of the Ministry of Health of Russia (Tomsk) among 20 patients (11 women and 9 men) with corneal EED, which, depending on the treatment method, were divided into two groups: the main group and the comparison.
Пациентам основной группы (11 пациентов, 11 глаз) проводили лечение предлагаемым методом.Patients of the main group (11 patients, 11 eyes) were treated with the proposed method.
Группа сравнения представлена 9 пациентами (9 глаз), которые получали консервативное лечение (метаболические средства, кортикостероиды, кератопротекторы).The comparison group is represented by 9 patients (9 eyes) who received conservative treatment (metabolic agents, corticosteroids, keratoprotectors).
Пациенты обеих групп сопоставимы по полу, возрасту и тяжести поражения роговой оболочки.Patients of both groups are comparable in sex, age and severity of corneal lesions.
Всем пациентам проводилось общеофтальмологическое обследование: визометрия, периметрия, биомикроскопия переднего отрезка глаза, обратная бинокулярная офтальмоскопия, транспальпебральное измерение внутриглазного давления, пахиметрия, фоторегистрация.All patients underwent a general phthalmological examination: visometry, perimetry, biomicroscopy of the anterior segment of the eye, reverse binocular ophthalmoscopy, transpalpebral measurement of intraocular pressure, pachymetry, photographic recording.
Критерием эффективности лечения считали: устранение роговичного синдрома, уменьшение отека роговой оболочки, повышение остроты зрения.The criterion of treatment effectiveness was considered to be: elimination of the corneal syndrome, reduction of corneal edema, increased visual acuity.
Общий срок наблюдения составил 6 мес.The total follow-up period was 6 months.
Сравнительный анализ выявил значительную эффективность нового метода хирургического лечения ЭЭД роговицы.A comparative analysis revealed the significant effectiveness of the new method of surgical treatment of corneal EDF.
Так, например, через 5 дней после проведенного хирургического лечения у пациентов основной группы отмечалась положительная динамика биомикроскопической картины в виде уменьшения отека всех слоев роговицы, расправления складок десцеметовой оболочки.So, for example, 5 days after the surgical treatment, patients of the main group showed a positive dynamics of the biomicroscopic picture in the form of a decrease in edema of all layers of the cornea, smoothing of the folds of the descemet sheath.
Постепенное повышение прозрачности роговицы у пациентов основной группы наблюдалось к 10-му дню, что согласуется с данными пахиметрии и визометрии (табл. 1, 2). У пациентов группы сравнения к 10-му дню от начала лечения отмечалось лишь незначительное уменьшение отека роговой оболочки.A gradual increase in the transparency of the cornea in patients of the main group was observed by the 10th day, which is consistent with the data of pachymetry and visometry (table. 1, 2). In patients of the comparison group, by the 10th day from the start of treatment, there was only a slight decrease in corneal edema.
Согласно результатам клинического исследования, применение предложенного метода лечения позволило улучшить зрительные функции пациентам основной группы.According to the results of a clinical study, the application of the proposed method of treatment has improved the visual function of patients in the main group.
На момент госпитализации острота зрения у пациентов обеих групп составляла 0,04 (табл. 1). Через 5 дней после проведенного оперативного вмешательства данный показатель у пациентов основной группы увеличился на 75% от исходного уровня, в то время, как в группе сравнения - на 25%. Через 10 дней острота зрения у больных основной группы повысилась на 42,8% от достигнутого значения, а в группе сравнения - на 20%. Через 1 мес. после проведенного лечения острота зрения у пациентов основной группы составляла 0,2±0,01, через 3 мес. - данный показатель достиг максимального уровня - 0,3±0,01 и оставался стабильным в течение всего срока наблюдения (6 мес.). У пациентов группы сравнения наилучший показатель остроты зрения был достигнут через 1 мес. после курса консервативного лечения и составлял 0,07±0,01, через 3 мес. данный показатель оставался прежним, а к окончанию наблюдения (через 6 мес.) произошло его снижение на 14,2 % от достигнутого уровня.At the time of hospitalization, visual acuity in patients of both groups was 0.04 (Table 1). 5 days after surgery, this indicator in patients of the main group increased by 75% from the initial level, while in the comparison group - by 25%. After 10 days, visual acuity in patients of the main group increased by 42.8% of the achieved value, and in the comparison group - by 20%. After 1 month after the treatment, visual acuity in patients of the main group was 0.2 ± 0.01, after 3 months. - this indicator reached a maximum level of 0.3 ± 0.01 and remained stable throughout the observation period (6 months). In patients of the comparison group, the best indicator of visual acuity was achieved after 1 month. after a course of conservative treatment and amounted to 0.07 ± 0.01, after 3 months. this indicator remained the same, and by the end of the observation (after 6 months), it decreased by 14.2% of the achieved level.
Согласно результатам пахиметрии, восстановление толщины роговицы на фоне проведенного лечения было более существенным в основной группе (табл. 2). Так, например, на 5-й день после оперативного лечения показатель пахиметрии у пациентов основной группы уменьшился на 3% от исходного уровня, в то время, как у пациентов в группе сравнения - на 1,2%. Через 10 дней после проведенного лечения данный показатель у пациентов основной группы уменьшился еще на 5,4% от достигнутого уровня, у пациентов группы сравнения - на 0,62%. Через 1 мес. после проведенного лечения у пациентов основной группы показатель пахиметрии уменьшился на 13,9% от первоначального уровня, в то время как в группе сравнения - на 2,1%. Через 3 мес. толщина роговица у пациентов основной группы уменьшилась на 17,6% от исходного уровня и оставалась стабильной в течение всего срока наблюдения (6 мес.), у пациентов группы сравнения отмечена незначительная и нестабильная динамика показателя кератопахиметрии - уменьшение на 1,9% и 1,5% через 3 и 6 мес. соответственно.According to the results of pachymetry, the restoration of the thickness of the cornea against the background of the treatment was more significant in the main group (table. 2). So, for example, on the 5th day after surgical treatment, the pachymetry indicator in patients of the main group decreased by 3% from the initial level, while in patients in the comparison group - by 1.2%. 10 days after the treatment, this indicator in patients of the main group decreased by another 5.4% of the achieved level, in patients of the comparison group - by 0.62%. After 1 month after the treatment, in patients of the main group, the pachymetry indicator decreased by 13.9% from the initial level, while in the comparison group - by 2.1%. After 3 months the corneal thickness in patients of the main group decreased by 17.6% from the initial level and remained stable throughout the observation period (6 months), insignificant and unstable dynamics of keratopachymetry indicator was noted in patients of the comparison group - a decrease of 1.9% and 1, 5% after 3 and 6 months. respectively.
Средний период стационарного лечения пациентов основной группы составил 9±1 дней, пациентов группы сравнения - 12±2 дней (р<0,05).The average period of inpatient treatment of patients of the main group was 9 ± 1 days, patients of the comparison group - 12 ± 2 days (p <0.05).
Клинический пример на осуществление методаClinical example for the implementation of the method
Пациентка М., 76 лет, обратилась с жалобами на слезотечение, покраснение, снижение зрения, «туман» перед правым глазом.Patient M., 76 years old, complained of lacrimation, redness, decreased vision, “fog” in front of her right eye.
Анамнез заболевания: считает себя больной около 3 мес. после оперативного лечения катаракты правого глаза - факоэмульсификация катаракты с имплантацией интраокулярной линзы (ИОЛ). Через месяц после проведенного лечения выставлен диагноз ЭЭД роговицы правого глаза, по поводу чего дважды проводилось лечение - кросслинкинг коллагена роговицы правого глаза, однако, на фоне проведенного лечения улучшения не отметила. Инсталлирует азаргу в правый глаз 2 раза в день.Anamnesis of the disease: considers himself ill for about 3 months. after surgical treatment of cataracts of the right eye - phacoemulsification of cataracts with implantation of an intraocular lens (IOL). A month after the treatment, a diagnosis was made of the EED of the cornea of the right eye, about which treatment was carried out twice - crosslinking of collagen of the cornea of the right eye, however, did not notice any improvement against the background of the treatment. Installs the aroma in the
Объективный осмотр:Objective inspection:
Visus OD=0,04 н/кVisus OD = 0.04 n / a
OS=0,8 н/кOS = 0.8 n / a
Биомикроскопия OD: легкая инъекция бульбарной конъюнктивы, пальпаторно тонус нормальный, роговица: диффузный отек эпителия, неравномерный отек стромы, складки десцеметовой оболочки, диффузный отек эндотелия, в нижне-наружном квадранте роговицы определяются 2 небольшие буллы до 2 мм в диаметре. Оптический срез роговицы неравномерно утолщен, передняя камера средней глубины, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована. Офтальмоскопия затруднена из-за помутнения роговицы (Фиг. 1)Biomicroscopy OD: easy injection of the bulbar conjunctiva, normal palpation, cornea: diffuse epithelial edema, uneven stromal edema, folds of the descemet sheath, diffuse endothelial edema, 2 small bullae up to 2 mm in diameter are detected in the lower outer quadrant of the cornea. The optical section of the cornea is unevenly thickened, the anterior chamber is of medium depth, the moisture is transparent, the pupil is of medium width, the reaction to light is live, artifact, IOL posterior chamber, centered. Ophthalmoscopy is difficult due to clouding of the cornea (Fig. 1)
Биомикроскопия OS: глаз спокоен, пальпаторно тонус нормальный, роговица прозрачная, артифакия.OS biomicroscopy: the eye is calm, palpation normal tone, the cornea is transparent, artifact.
Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Артифакия обоих глаз.Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Artifakia of both eyes.
Проведено лечение: пневмодесцеметоабляция правого глаза с последующим введением в заднюю треть стромы роговой оболочки суспензии аутологичных мононуклеаров крови. В послеоперационном периоде - инсталляции антибиотика по стандартной схеме.The treatment was carried out: pneumodescemetoablation of the right eye with the subsequent introduction into the posterior third of the stroma of the cornea of a suspension of autologous blood mononuclear cells. In the postoperative period - antibiotic installations according to the standard scheme.
На 2-й день после оперативного лечения (3-й день пребывания в стационаре):On the 2nd day after surgical treatment (3rd day of hospital stay):
Vis OD=0,03 н/кVis OD = 0.03 n / a
Status localis OD - глаз умеренно раздражен, отмечается незначительная светобоязнь, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий шероховат, отек стромы постепенно уменьшается, единичные тонкие складки десцеметовой оболочки, отек эндотелия сохраняется, определяется зона десцеметоабляции, пузырек воздуха в передней камере, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована.Status localis OD - the eye is moderately irritated, slight photophobia is observed, palpation is normal, the cornea is rough, the stromal edema gradually decreases, individual thin folds of the descemet shell, endothelial edema persist, the zone of descemetoablation, an air bubble in the anterior chamber, the moisture is clear, the pupil is transparent medium width, live light response, artifact, IOL posterior chamber, centered.
На 5-й день после проведенного лечения:On the 5th day after the treatment:
Vis OD=0,05 н/кVis OD = 0.05 n / a
Status localis OD - глаз спокойный, светобоязнь отсутствует, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий спокоен, отек стромы постепенно уменьшается, десцеметовая оболочка прилежит на всем протяжении, менее выражен отек эндотелия, пузырек воздуха в передней камере постепенно рассасывается, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая.Status localis OD - the eye is calm, photophobia is absent, palpation is normal, the cornea: the epithelium is calm, stromal edema gradually decreases, descemet sheath adheres throughout, less pronounced endothelial edema, the air bubble in the anterior chamber gradually dissolves, the moisture is clear, the pupil is of medium width , the reaction to light is alive.
На 7-й день после лечения:On the 7th day after treatment:
Vis OD=0,07 н/кVis OD = 0.07 n / a
Status localis OD - глаз спокойный, светобоязнь отсутствует, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий спокоен, отек стромы уменьшился, единичные складки десцеметовой оболочки, отек эндотелия значительно уменьшился, передняя камера средней глубины, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована.Status localis OD - the eye is calm, photophobia is normal, palpation is normal, the cornea: the epithelium is calm, the stromal edema has decreased, single folds of the descemet sheath, the endothelial edema has decreased significantly, the anterior chamber is of medium depth, the moisture is clear, the pupil is of medium width, the response to live light, artifact, IOL posterior chamber, centered.
На 10-й день после лечения:On the 10th day after treatment:
Vis OD=0,09 н/кVis OD = 0.09 n / a
Status localis OD - глаз спокойный, светобоязнь отсутствует, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий спокоен, отек стромы значительно уменьшился, единичные тонкие складки десцеметовой оболочки, умеренный отек эндотелия, передняя камера средней глубины, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована (Фиг. 2).Status localis OD - the eye is calm, photophobia is normal, palpation is normal, the cornea: the epithelium is calm, the stromal edema has significantly decreased, single thin folds of the descemet shell, moderate endothelial edema, the anterior chamber is of medium depth, the moisture is transparent, the pupil is of medium width, the response to light is live , artifakia, posterior chamber IOL, centered (Fig. 2).
Пациентка выписана из офтальмологической клиники СибГМУ в удовлетворительном состоянии под наблюдение окулиста по месту жительства. Общая продолжительность пребывания в стационаре составила 11 дней.The patient was discharged from the ophthalmological clinic of the Siberian State Medical University in satisfactory condition under the supervision of an ophthalmologist at the place of residence. The total length of hospital stay was 11 days.
Через 1 мес:After 1 month:
Vis OD=0,1 н/кVis OD = 0.1 n / a
Status localis OD - глаз спокойный, светобоязнь отсутствует, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий спокоен, незначительный отек отдельных слоев стромы, единичные тонкие складки десцеметовой оболочки, легкий отек эндотелия, передняя камера средней глубины, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована (Фиг. 3)Status localis OD - the eye is calm, photophobia is normal, palpation is normal, the cornea: epithelium is calm, slight swelling of the individual layers of the stroma, single thin folds of the descemet shell, slight endothelial edema, anterior chamber of medium depth, moisture transparent, pupil of medium width, reaction to light live, artifact, IOL posterior chamber, centered (Fig. 3)
Через 6 мес:After 6 months:
Vis OD=0,2 н/кVis OD = 0.2 n / a
Status localis OD - глаз спокойный, пальпаторно тонус нормальный, роговица: эпителий спокоен, незначительный и неравномерный отек стромы, единичные тонкие складки десцеметовой оболочки, эндотелий спокоен, передняя камера средней глубины, влага прозрачная, зрачок средней ширины, реакция на свет живая, артифакия, ИОЛ заднекамерная, центрирована (Фиг. 4). Положительная динамика клинической картины подтверждена данными визометрии и пахиметрии: на момент госпитализации острота зрения составляла 0,04 н/к, толщина роговицы - 810 мкм (Фиг. 5), через 10 дней после проведенного лечения острота зрения увеличилась до 0,09 н/к, показатель пахиметрии составлял 685 мкм (Фиг. 6), через 1 мес. - острота зрения повысилась до 0,1, показатель пахиметрии уменьшился до 665 мкм (Фиг. 7), к окончанию срока наблюдения достигнута максимально высокая острота зрения - 0,2 н/к, толщина роговицы уменьшилась до 585 мкм (Фиг. 8).Status localis OD - calm eye, palpation normal tone, cornea: the epithelium is calm, slight and uneven stromal edema, single thin folds of the descemet shell, the endothelium is calm, the anterior chamber is of medium depth, the moisture is clear, the pupil is of medium width, the reaction to live light, artifact, The IOL is posterior, centered (Fig. 4). The positive dynamics of the clinical picture is confirmed by the data of visometry and pachymetry: at the time of hospitalization, visual acuity was 0.04 n / k, the thickness of the cornea was 810 μm (Fig. 5), 10 days after treatment, visual acuity increased to 0.09 n / k , the pachymetry rate was 685 μm (Fig. 6), after 1 month. - visual acuity increased to 0.1, the pachymetry index decreased to 665 μm (Fig. 7), by the end of the observation period the maximum visual acuity was achieved - 0.2 n / k, the corneal thickness decreased to 585 μm (Fig. 8).
Современные представления о биологической роли мононуклеаров основываются на их функциональной гетерогенности, включающей фагоцитарные, регуляторные и эффекторные свойства [4]. Однако в последние годы, наряду с подробно изученными функциями миграции и хемотаксиса, эндоцитоза и внутриклеточного переваривания, большое внимание исследователей привлекает секреторная функция мононуклеарных фагоцитов. Учение И.И. Мечникова о макрофагальных ферментах - цитазах переросло в концепцию о монокинах - продуктах секреции моноцитов/макрофагов, которые вместе с лимфокинами получили название «цитокины». Современная трактовка мононуклеаров как секретирующих клеток основывается на их способности продуцировать и выделять более 75 различных видов молекул [10]. Посредством цитокинов мононуклеары влияют на миграцию и пролиферацию гранулоцитов, эндотелиальных клеток, индуцируют хемотаксис и пролиферацию фибробластов, влияют на продукцию коллагена [8].Modern ideas about the biological role of mononuclear cells are based on their functional heterogeneity, including phagocytic, regulatory, and effector properties [4]. However, in recent years, along with the extensively studied functions of migration and chemotaxis, endocytosis and intracellular digestion, the secretory function of mononuclear phagocytes has attracted great attention of researchers. Teaching I.I. Mechnikov about macrophage enzymes - cytases grew into the concept of monokines - the secretion products of monocytes / macrophages, which together with lymphokines are called "cytokines". The modern interpretation of mononuclear cells as secreting cells is based on their ability to produce and isolate more than 75 different types of molecules [10]. By means of cytokines, mononuclear cells affect the migration and proliferation of granulocytes and endothelial cells, induce chemotaxis and fibroblast proliferation, and affect the production of collagen [8].
Мононуклеары представляют собой источник многочисленных биорегуляторов - цитокинов, участвующих в формировании и регуляции защитных реакций организма [11]. Цитокины представляют сложную сеть иммуномедиаторов, которые регулируют и определяют природу иммунного ответа. Регуляторная роль цитокинов в организме ограничивается не только иммунным ответом: они принимают участие в процессах регенерации для восстановления поврежденных тканей [9].Mononuclear cells are a source of numerous bioregulators - cytokines involved in the formation and regulation of the body's defense reactions [11]. Cytokines represent a complex network of immuno-mediators that regulate and determine the nature of the immune response. The regulatory role of cytokines in the body is limited not only by the immune response: they take part in the regeneration processes to restore damaged tissues [9].
Экзогенное введение аутологичных мононуклеаров периферической крови в строму роговой оболочки, продуцирующих выше описанные цитокины, при ЭЭД роговицы позволяет создать локально высокую концентрацию клеток данной популяции в очаге деструкции и направленно воздействовать на патологический процесс.The exogenous introduction of autologous peripheral blood mononuclear cells into the stroma of the cornea producing the above-described cytokines in case of corneal EED allows to create a locally high concentration of cells of this population in the destruction center and to target the pathological process.
Таким образом, результаты проведенного клинического исследования свидетельствуют о значительной эффективности применения нового хирургического метода лечения ЭЭД роговицы, включающего пневмодесцеметоабляцию с интрастромальным введением суспензии аутологичных мононуклеаров крови.Thus, the results of a clinical study indicate the significant effectiveness of the use of a new surgical method for the treatment of corneal EED, including pneumodescemetoablation with intrastromal administration of a suspension of autologous blood mononuclear cells.
Способ хирургического лечения эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицыMethod for surgical treatment of endothelial-epithelial corneal dystrophy
Примечание: * - уровень значимости различий по сравнению с исходными р<0,05; М - выборочное среднее значение; m - ошибка среднего.Note: * - level of significance of differences compared with the initial p <0.05; M is a sample mean value; m is the error of the mean.
Примечание: * - уровень значимости различий по сравнению с исходными р<0,05; М - выборочное среднее значение; m - ошибка среднего.Note: * - level of significance of differences compared with the initial p <0.05; M is a sample mean value; m is the error of the mean.
Приложениеapplication
Таблица 1Table 1
Динамика остроты зрения у пациентов с ЭЭД роговицы в зависимости от метода лечения, М+/-mThe dynamics of visual acuity in patients with corneal EED, depending on the method of treatment, M +/- m
Таблица 2table 2
Динамика показателя пахиметрии у пациентов с ЭЭД роговицы в зависимости от метода лечения, М+/-mThe dynamics of the pachymetry indicator in patients with corneal EED, depending on the treatment method, M +/- m
Фиг. 1FIG. one
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Биомикроскопия переднего отрезка глаза до начала лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Biomicroscopy of the anterior segment of the eye before treatment.
Фиг. 2FIG. 2
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Биомикроскопия переднего отрезка глаза на 10-й день после проведенного лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Biomicroscopy of the anterior segment of the eye on the 10th day after the treatment.
Фиг. 3FIG. 3
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Биомикроскопия переднего отрезка глаза через 1 мес после проведенного лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Biomicroscopy of the anterior segment of the eye 1 month after the treatment.
Фиг. 4FIG. four
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Биомикроскопия переднего отрезка глаза через 6 мес после проведенного лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Biomicroscopy of the anterior segment of the eye 6 months after the treatment.
Фиг. 5FIG. 5
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Кератопахиметрия глаза до лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Keratopachymetry of the eye before treatment.
Фиг. 6FIG. 6
Пациентка М, 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Кератопахиметрия глаза на 10-й день после проведенного лечения.Patient M, 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Keratopachymetry of the eye on the 10th day after the treatment.
Фиг. 7FIG. 7
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Кератопахиметрия глаза через 1 мес. после проведенного лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Keratopachymetry of the eye after 1 month. after the treatment.
Фиг. 8FIG. 8
Пациентка М., 76 лет. Диагноз: эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы правого глаза. Кератопахиметрия глаза через 6 мес. после проведенного лечения.Patient M., 76 years old. Diagnosis: endothelial-epithelial dystrophy of the cornea of the right eye. Keratopachymetry of the eye after 6 months. after the treatment.
Список литературыBibliography
1. Беляковский П.В., Лобанок Е.С. Перспективы применения стволовых в офтальмологии // Офтальмология в Беларуси. - 2009. - №2. - С. 81-91.1. Belyakovsky P.V., Lobanok E.S. Prospects for the use of stem in ophthalmology // Ophthalmology in Belarus. - 2009. - No. 2. - S. 81-91.
2. Бикбов М.М., Шевчук Н.Е., Мальханов В.Б. Цитокины в офтальмологии. - Уфа, Уфимский полиграфкомбинат, 2008. - 152 с.2. Bikbov M.M., Shevchuk N.E., Malkhanov V.B. Cytokines in ophthalmology. - Ufa, Ufa Printing Plant, 2008 .-- 152 p.
3. Запускалов И.В., Кривошеина О.И. Современная фармакотерапия язвенных поражений роговицы: применение аутологичных мононуклеаров крови. - Саабрюкен, Lambert Academic Publishing, 2013. - 121 с.3. Zapuskalov IV, Krivosheina OI Modern pharmacotherapy of corneal ulcerative lesions: the use of autologous blood mononuclear cells. - Saabrucken, Lambert Academic Publishing, 2013 .-- 121 p.
4. Земсков В.М., Николаева Е.Н., Родионов С.В. Гетерогенность мононуклеарных фагоцитов // Успехи совр. биологии. - 1993. - Т. 113, №3. - С. 336-349.4. Zemskov V.M., Nikolaev E.N., Rodionov S.V. Heterogeneity of mononuclear phagocytes // Successes sovr. biology. - 1993. - T. 113, No. 3. - S. 336-349.
5. Каспаров, А.А., Павлюк А.С. Интракамеральное введение аутологичных мононуклеарных клеток периферической крови, активированных Полуданом с лечебной целью при послеоперационной ранней буллезной кератопатии // Современные методы диагностики и лечения заболеваний роговицы и склеры: Научно-практ. конф.: Сб. науч. ст. - М., 2007. - Т. 2. - С. 56-63.5. Kasparov, A.A., Pavlyuk A.S. Intracameral administration of autologous peripheral blood mononuclear cells activated by Poludan for therapeutic purposes in early postoperative bullous keratopathy // Modern methods for the diagnosis and treatment of diseases of the cornea and sclera: Scientific-practical. Conf .: Sat. scientific Art. - M., 2007. - T. 2. - S. 56-63.
6. Каспаров А.А., Каспарова Евг.А. Фадеева Л.Л. Персонализированная клеточная терапия ранней буллезной кератопатии (экспериментальное обоснование и клинические результаты) // Вестник офтальмологии. - 2013. - №5. - С. 53-61.6. Kasparov A.A., Kasparova Ev.A. Fadeeva L.L. Personalized cell therapy of early bullous keratopathy (experimental justification and clinical results) // Bulletin of Ophthalmology. - 2013. - No. 5. - S. 53-61.
7. Каспарова Евг.А., Суббот A.M. Пролиферативный потенциал заднего эпителия роговицы человека // Вестник офтальмологии. - 2013. - №3. - С. 82-88.7. Kasparova Ev.A., Saturday A.M. Proliferative potential of the posterior epithelium of the human cornea // Bulletin of Ophthalmology. - 2013. - No. 3. - S. 82-88.
8. Маянский А.Н., Пикуза О.И. Клинические аспекты фагоцитоза. - Казань: «Магариф», 1993. - С. 1928. Mayansky A.N., Pikuza O.I. Clinical aspects of phagocytosis. - Kazan: “Magarif”, 1993. - S. 192
9. Симбирцев А.С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. - 2002. - №1. - С. 9-169. Simbirtsev A.S. Cytokines - a new system for regulating the body's defenses // Cytokines and inflammation. - 2002. - No. 1. - S. 9-16
10. Фрейдлин И.С. Дефекты цитокиновой сети и принципы их коррекции // Иммунология. - 1998. - №6. - С. 23-2510. Freidlin I.S. Defects of the cytokine network and principles of their correction // Immunology. - 1998. - No. 6. - S. 23-25
11. Шубин М.Г., Авдеева М.Г. Медиаторные аспекты воспалительного процесса // Арх. патологии. - 1997. - Т. 59, №2. - С. 3-811. Shubin M.G., Avdeeva M.G. Mediator aspects of the inflammatory process // Arch. pathology. - 1997. - T. 59, No. 2. - S. 3-8
12. Acar В.Т., Akdemir М.О., Acar S. Visual acuity and endothelial cell density with respect to the graft thickness in 
13. Bredow L., Schwartzkopff J., Reinhard T. Regeneration of corneal endothelial cells following keratoplasty in rats with bullous keratopathy // Molecular Vision. - 2014. - Vol. 20. - P. 683-690.13. Bredow L., Schwartzkopff J., Reinhard T. Regeneration of corneal endothelial cells following keratoplasty in rats with bullous keratopathy // Molecular Vision. - 2014 .-- Vol. 20. - P. 683-690.
14. Heeren Т., HolzF.G., 
15. Heinzelmann S., 
16. Kobayashi A., Yokogawa H. The use of endoillumination probe-assisted descemet membrane endothelial keratoplasty for bullous keratopathy secondary to argon laser iridotomy // Clinical Ophthalmology. - 2015. - Vol. 9. - P. 91-93.16. Kobayashi A., Yokogawa H. The use of endoillumination probe-assisted descemet membrane endothelial keratoplasty for bullous keratopathy secondary to argon laser iridotomy // Clinical Ophthalmology. - 2015. - Vol. 9. - P. 91-93.
17. Morishige N, Sonoda KH. Bullous keratopathy as a progressive disease: evidence from clinical and laboratory imaging studies // Cornea. - 2013. - Vol. Nov; (32 Suppl 1). - P/ 77-83.17. Morishige N, Sonoda KH. Bullous keratopathy as a progressive disease: evidence from clinical and laboratory imaging studies // Cornea. - 2013 .-- Vol. Nov; (32 Suppl 1). - P / 77-83.
18. Patel S.V., Armitage W.J. Keratoplasty outcomes: Are we making advances? // Ophthalmology. - 2014. - Vol. 121. - P. 977-978.18. Patel S.V., Armitage W.J. Keratoplasty outcomes: Are we making advances? // Ophthalmology. - 2014 .-- Vol. 121. - P. 977-978.
19. Siu G.D.J.Y., Young A.L. Long-term symptomatic relief of bullous keratopathy with amniotic membrane transplant // International Ophthalmology. - 2015. - Vol. 35. - P. 777-783.19. Siu G. D. J. J., Young A. L. Long-term symptomatic relief of bullous keratopathy with amniotic membrane transplant // International Ophthalmology. - 2015. - Vol. 35. - P. 777-783.
20. Veldman P.B., Dye P.K., Holiman J.D. The S-stamp in Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty Safely Eliminates Upside-down Graft Implantation // Ophthalmology. - 2016. - Vol. 123. - P. 161-164.20. Veldman P.B., Dye P.K., Holiman J.D. The S-stamp in Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty Safely Eliminates Upside-down Graft Implantation // Ophthalmology. - 2016. - Vol. 123. - P. 161-164.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017127350A RU2674237C1 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017127350A RU2674237C1 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2674237C1 true RU2674237C1 (en) | 2018-12-05 |
Family
ID=64603880
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017127350A RU2674237C1 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2674237C1 (en) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2324488C1 (en) * | 2006-11-21 | 2008-05-20 | Игорь Викторович Запускалов | Method of treatment of corneal ulcers |
| RU2357743C1 (en) * | 2008-02-01 | 2009-06-10 | Аркадий Александрович Каспаров | Medication, method of obtaining medication, and method of treatment for cornea edema and other early bullous keratopathy manifestations |
| RU2440801C1 (en) * | 2010-11-25 | 2012-01-27 | Надежда Анатольевна Левченко | Method of treating deep stromal keratites |
| RU2601317C1 (en) * | 2015-07-30 | 2016-11-10 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России) | Method of treating endothelial epithelial corneal dystrophy |
-
2017
- 2017-07-31 RU RU2017127350A patent/RU2674237C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2324488C1 (en) * | 2006-11-21 | 2008-05-20 | Игорь Викторович Запускалов | Method of treatment of corneal ulcers |
| RU2357743C1 (en) * | 2008-02-01 | 2009-06-10 | Аркадий Александрович Каспаров | Medication, method of obtaining medication, and method of treatment for cornea edema and other early bullous keratopathy manifestations |
| RU2440801C1 (en) * | 2010-11-25 | 2012-01-27 | Надежда Анатольевна Левченко | Method of treating deep stromal keratites |
| RU2601317C1 (en) * | 2015-07-30 | 2016-11-10 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России) | Method of treating endothelial epithelial corneal dystrophy |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Левченко Н.А. и др. Влияние аутологичных мононуклеаров крови на регенераторные процессы при стромальных повреждениях роговицы в эксперименте. Бюллетень сибирской медицины, N 4, 2011, с.27-31. * |
| Филиппова Е.О и др. Локальное применение аутологичных мононуклеаров крови в лечении эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицы. Бюллетень сибирской медицины, 2016, том 15, N 2, с. 70-75. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chen et al. | Comparison of fresh corneal tissue versus glycerin-cryopreserved corneal tissue in deep anterior lamellar keratoplasty | |
| US10675294B2 (en) | Pharmaceutical composition containing 8 OXO-deoxyguanosine or pharmaceutically acceptable salt thereof as active ingredient for treating corneal disease | |
| Li et al. | Fish-scale collagen membrane seeded with corneal endothelial cells as alternative graft for endothelial keratoplasty transplantation | |
| RU2601317C1 (en) | Method of treating endothelial epithelial corneal dystrophy | |
| RU2581495C1 (en) | Method of treating dry eye syndrome | |
| Xu et al. | Frequency of retinal macroaneurysms in adult Chinese: the Beijing Eye Study | |
| Han et al. | Corneal stromal filler injection of gelatin-based photocurable hydrogels for maintaining the corneal thickness and reconstruction of corneal stroma | |
| RU2674237C1 (en) | Method of surgical treatment of endothelial-epithelial dystrophy of cornea | |
| RU2723135C1 (en) | Method of corneal graft preparation for layer-by-layer keratoplasty | |
| Kim et al. | Long-term evaluation of autologous lamellar corneal grafts for the treatment of deep corneal ulcer in four dogs: a case report. | |
| RU2357708C1 (en) | Method of cornea epithelium defect treatment by soft therapeutic contact lenses | |
| CN112891326B (en) | Natamycin-loaded alginic acid gel medicine film and preparation method thereof | |
| RU2730975C1 (en) | Method of treating endothelial-epithelial dystrophy of cornea | |
| RU2542799C1 (en) | Method of treating corneal keratoconus | |
| CN110859835B (en) | Application of butylphthalide in preparation of medicine for treating corneal injury | |
| Kaul et al. | An insight into ocular insert | |
| RU2780273C1 (en) | Method for surgical treatment of keratectasia of various origins | |
| RU2644701C1 (en) | Method of conservative treatment of adapted penetrating wounds of the cornea | |
| RU2440801C1 (en) | Method of treating deep stromal keratites | |
| WO2021022041A1 (en) | Corneal inlay design and methods of correcting vision | |
| RU2828627C1 (en) | Method for prevention of corneal transplant opacity and vascularization in animals after penetrating keratoplasty with underlying preexisting vascularized corneal leukoma due to eye burn injury | |
| CN111001010A (en) | External eye operation flushing fluid and preparation method thereof | |
| RU2306928C1 (en) | Method for stimulating eye cornea recovery | |
| RU2600428C1 (en) | Method for surgical treatment of corneal syndrome in advanced stage of endothelial-epithelial corneal dystrophy | |
| RU2549673C1 (en) | Method of treating early manifestations of age-related macular retinal degeneration |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190801 |