RU2659958C2 - Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека - Google Patents
Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2659958C2 RU2659958C2 RU2016140786A RU2016140786A RU2659958C2 RU 2659958 C2 RU2659958 C2 RU 2659958C2 RU 2016140786 A RU2016140786 A RU 2016140786A RU 2016140786 A RU2016140786 A RU 2016140786A RU 2659958 C2 RU2659958 C2 RU 2659958C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tuberculosis
- drug
- medicinal
- sensitivity
- blood
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 54
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 title claims abstract description 44
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 title claims abstract 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 55
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims abstract description 30
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000009534 blood test Methods 0.000 claims abstract description 6
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 claims abstract description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 52
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 15
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 12
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 10
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 8
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 8
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 201000009671 multidrug-resistant tuberculosis Diseases 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 description 5
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 5
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 5
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 5
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 4
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 4
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 4
- 206010024378 leukocytosis Diseases 0.000 description 4
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 4
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 description 4
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 4
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000012549 training Methods 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- GSDSWSVVBLHKDQ-JTQLQIEISA-N Levofloxacin Chemical compound C([C@@H](N1C2=C(C(C(C(O)=O)=C1)=O)C=C1F)C)OC2=C1N1CCN(C)CC1 GSDSWSVVBLHKDQ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 3
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 3
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 3
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 229960003376 levofloxacin Drugs 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- VCOPTHOUUNAYKQ-WBTCAYNUSA-N (3s)-3,6-diamino-n-[[(2s,5s,8e,11s,15s)-15-amino-11-[(6r)-2-amino-1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-6-yl]-8-[(carbamoylamino)methylidene]-2-(hydroxymethyl)-3,6,9,12,16-pentaoxo-1,4,7,10,13-pentazacyclohexadec-5-yl]methyl]hexanamide;(3s)-3,6-diamino-n-[[(2s,5s,8 Chemical compound N1C(=O)\C(=C/NC(N)=O)NC(=O)[C@H](CNC(=O)C[C@@H](N)CCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CNC(=O)[C@@H]1[C@@H]1NC(N)=NCC1.N1C(=O)\C(=C/NC(N)=O)NC(=O)[C@H](CNC(=O)C[C@@H](N)CCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CNC(=O)[C@@H]1[C@@H]1NC(N)=NCC1 VCOPTHOUUNAYKQ-WBTCAYNUSA-N 0.000 description 2
- 108010065839 Capreomycin Proteins 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 2
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 2
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 2
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 2
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 2
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 229960004602 capreomycin Drugs 0.000 description 2
- 208000023652 chronic gastritis Diseases 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N ethionamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002001 ethionamide Drugs 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 2
- 201000003144 pneumothorax Diseases 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 2
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 9-fluoro-3-methyl-10-(4-methylpiperazin-1-yl)-7-oxo-2,3-dihydro-7H-[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinoline-6-carboxylic acid Chemical compound FC1=CC(C(C(C(O)=O)=C2)=O)=C3N2C(C)COC3=C1N1CCN(C)CC1 GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010008617 Cholecystitis chronic Diseases 0.000 description 1
- DYDCUQKUCUHJBH-UHFFFAOYSA-N D-Cycloserine Natural products NC1CONC1=O DYDCUQKUCUHJBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N D-Cycloserine Chemical compound N[C@@H]1CONC1=O DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 206010011891 Deafness neurosensory Diseases 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010018092 Generalised oedema Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 238000006595 Griess deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008454 Hyperhidrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 206010048723 Multiple-drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010030124 Oedema peripheral Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 201000009859 Osteochondrosis Diseases 0.000 description 1
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 1
- 208000005646 Pneumoperitoneum Diseases 0.000 description 1
- VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N Prothionamide Chemical compound CCCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 208000009966 Sensorineural Hearing Loss Diseases 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100026383 Vasopressin-neurophysin 2-copeptin Human genes 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 208000024783 anasarca Diseases 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 201000001352 cholecystitis Diseases 0.000 description 1
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N clofazimine Chemical compound C12=CC=CC=C2N=C2C=C(NC=3C=CC(Cl)=CC=3)C(=N/C(C)C)/C=C2N1C1=CC=C(Cl)C=C1 WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N 0.000 description 1
- 229960004287 clofazimine Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960003077 cycloserine Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 description 1
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 201000010064 diabetes insipidus Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 208000015355 drug-resistant tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 229960001699 ofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229960000918 protionamide Drugs 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 229940063639 rifadin Drugs 0.000 description 1
- 229940049413 rifampicin and isoniazid Drugs 0.000 description 1
- -1 salt compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 231100000879 sensorineural hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 208000023573 sensorineural hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки чувствительности Mycobacterium tuberculosis к лекарственным препаратам. Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacterium tuberculosus на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека включает исследование крови, при котором устанавливают абсолютное количество фагоцитирующих гранулоцитов и Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер поздней активации HLA-DR-Ag. Результаты подсчитывают по формуле Y=1,76-5,08X1-0,17X2, где X1 - CD3+HLA-DR+(109/литр), Х2 - количество фагоцитирующих гранулоцитов (109/литр). При значении Y<1 делают заключение о лекарственно чувствительных изолятах возбудителя туберкулеза, a Y≥1 - изолятов, не имеющих лекарственной чувствительности. Использование данного изобретения позволяет проводить оценку чувствительности Mycobacterium tuberculosis к лекарственным препаратам без проведения бактериологических тестов, что уменьшает вариабельность данных между исследуемыми образцами. 4 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки чувствительности 
к лекарственным препаратам без проведения длительных бактериологических тестов, основанных на изучении задержки роста культуры в присутствии тестируемых лекарственных средств или проведения молекулярно-генетических тестов, ограниченных узким кругом выявляемых мутаций, определяющих устойчивость патогена. Важность разработки способа определяется необходимостью скорейшего назначения стандартной схемы лекарственной терапии с учетом установленной чувствительности возбудителя для достижения оптимального результата лечения, что позволит экономить бюджетные деньги, выделяемые на восстановление здоровья у данной категории больных.
Известно, что лекарственная чувствительность - свойство, характеризующее микроорганизм. Определение лекарственной чувствительности - это выявление «возможности применения стандартной химиотерапии показанным препаратом для лечения заболевания, вызванного выделенным штаммом» [1]. Противоположное понятие - устойчивость - «предсказывает неудачу лечения тестируемым химиопрепаратом». Существующие в настоящее время способы определения лекарственной чувствительности основываются на непосредственном изучении особенностей возбудителя и делятся на 2 категории: культуральные и молекулярно-генетические [2].
Культуральные методы дифференцируются на виды прямого и непрямого определения. Прямое определение может осуществляться культивированием на плотных или жидких питательных средах. Возможны автоматизированные и неавтоматизированные способы проведения анализа.
При прямом определении исследуемый материал с 
высевают на среду, содержащую / не содержащую лекарственный препарат, инкубируют в изотермических условиях, результат фиксируют путем подсчета количества колоний 
с последующим расчетом лекарственной чувствительности. Недостатками способа являются: высокий риск контаминации, невозможность получения результата в случае отсутствия роста культуры, низкая воспроизводимость результатов, необходимость предварительной подготовки образца - гомогенизация, обеззараживание, недозированный посев (повышает риск инфицирования исследователя), длительность исследования (2-3 недели).
При непрямом определении (метод пропорций, метод коэффициента устойчивости, метод абсолютных концентраций) проводится предварительный этап культивирования образца на бульоне с последующим высевом на среды, как в прямом определении. Недостатками являются: значительное удлинение времени получения результата (в некоторых случаях до 40 суток), необходимость большего количества расходных материалов для выполнения исследования и вышеописанные ограничения.
Одним из примеров использования культуральных методов является способ определения чувствительности микроорганизмов с множественной лекарственной устойчивостью к сочетаниям антибактериальных препаратов (Пат. №2388827, авторы: Панина Т.А., Ефанова Л.И., Давыдова В.В.), включающий посев в пробирку с мясопептонным бульоном исследуемой культуры микроорганизмов, внесение антибактериальных препаратов, инкубирование в течение 12-18 ч в термостате при температуре 36±1°С, последующую визуальную оценку прозрачности содержимого пробирки, отличающийся тем, что для исследования используются пропитанные антибактериальным препаратом стандартные бумажные диски, для каждого сочетания берется одна пробирка с мясопептонным бульоном, после инкубирования при визуальном отсутствии мутности в исследуемой пробирке делают вывод о чувствительности микроорганизмов к сочетанию антибактериальных препаратов. Недостатком данного способа является применимость его для микроорганизмов с множественной лекарственной устойчивостью, не показана его применимость для микроорганизмов с неустановленной лекарственной чувствительностью.
Другим примером использования культурального метода определения лекарственной чувствительности является применение автоматизированных и полуавтоматизированных систем типа ВАСТЕС 460ТВ и др. Существенным недостатком их употребления являются высокая стоимость расходных материалов, необходимость контроля качества каждой серии пробирок, длительность исследования - до 2-3 недель, а также необходимость предварительной подготовки образцов (разведение, деконтаминация, концентрация).
Существует модификация культурального метода исследования для оценки лекарственной чувствительности с использованием реактива Грисса. Она заключается в определении нитратредуктазной активности 
, результатом которой становится изменение цвета реактива, содержащей питательную среду с патогеном. Недостатками метода являются длительность получения результатов (8-12 суток), необходимость большого количества реагентов, значительное количество манипуляций при выполнении исследования [3].
В целом, бактериальная диагностика имеет следующие недостатки [4]: необходимость использования для работы специализированного оборудования - шкафов биологической безопасности 2 класса, обеспечивающих защиту оператора и сохранность биообразца от контаминации, необходимость использования чистых субстанций противотуберкулезных препаратов (риск аллергических реакций у оператора), вариабельность активности лекарственного препарата в разных сериях производителя, зависимость результатов тестирования от качества питательной среды и стабильности растворов лекарственных препаратов, вероятность инактивации некоторых лекарственных препаратов под воздействием ряда компонентов сред, нестабильность лекарственных препаратов как соединений в результате стерилизации и хранения, необходимость перерасчета концентрации лекарственного вещества в соединениях солей, так как активные субстанции составляют только часть изучаемой массы (сульфаты, гидрохлориды), влияние на результат концентрации вносимых микроорганизмов (увеличение числа стимулирует лекарственную устойчивость), зависимость результата от возраста культуры, длительности инкубации, необходимость дополнительного пересева культуры в случае ее невыраженного роста.
Другая группа способов выявления лекарственной чувствительности основана на использовании молекулярно-генетических методов, которые дают возможность устанавливать субстрат изменений, приводящих к возникновению устойчивости, а именно определять мутации в геноме микроорганизма. Известны четыре основных типа вышеупомянутой технологии: использование картриджей, стриповый метод, применение биочипов и рутинная ПЦР (полимеразная цепная реакция). Недостатками данной группы методов являются отсутствие перечня всех известных существующих мутаций, что ограничивает применение технологии в клинике, необходимость организационно-пространственного оформления лаборатории для выполнения исследований такого вида, наличие обученного персонала, дорогостоящего оборудования, реагентов и одноразовых расходных материалов. Кроме того, эта группа методов не может быть использована при отсутствии у больного бактериовыделения, что в клинической практике не является редкостью. Такое состояние может встречаться, например, при снижении дренажа бронхов. Последнее может приводить к получению ложно-отрицательных результатов и необходимости хирургического или эндоскопического вмешательства для получения материала исследования.
Примером использования молекулярно-генетических методов является имеющаяся тест-система «ТБ-Биочип», позволяющая обнаруживать лекарственную устойчивость штаммов возбудителя туберкулеза к рифампицину и изониазиду менее, чем за сутки [5]. Недостатками данного метода являются необходимость наличия полного комплекса условий для проведения ПЦР-анализа.
Другим примером является метод Xpert MTB/RIF, представляющий автоматизированный молекулярный тест на определение рифампициновой устойчивости. Достоинства: скорость исследования - менее 2 часов, высокая чувствительность и специфичность. Недостатки метода: высокая стоимость анализов, «закрытая система» - невозможность использования расходных материалов другого производителя, невозможность определения множественной лекарственной устойчивости.
Существует способ, основанный на использовании рутинной ПЦР для выявления лекарственной устойчивости микроорганизма [6]. Исследуемый образец клинического материала при этом становится источником ДНК-мишени для реакции, а откопированный ПЦР-продукт подвергается анализу с целью выявления мутаций, связанных с антибиотикорезистентностъю. Достоинствами способа являются высокая скорость проведения анализа (1 сутки). Недостатки: необходимость специальных помещений, оборудования и материалов для проведения ПЦР-анализа, высокий риск заражения оператора туберкулезом.
Таким образом, в настоящее время ведущим в оценке лекарственной чувствительности остается культуральный метод исследования [7]. Однако, имея информацию о том, что лекарственная чувствительность является свойством микроорганизма и, опираясь на данные о длительном существовании патогена в организме человека после его проникновения внутрь, можно утверждать, что взаимоотношения возбудителя заболевания и макроорганизма имеют эволюционно-сформированный устойчивый характер. Результатом последнего становится факт ухода 
из-под контроля иммунной системы, в том числе, с отбором лекарственно устойчивых форм для пребывания внутри организма в течение значительного временного промежутка. Исходя из вышеизложенного, можно утверждать, что лекарственную чувствительность патогена можно оценить, изучая данные реакции иммунологической системы инфицированного человека.
В настоящее время существует достаточно сведений, характеризующих нарушения деятельности иммунной системы при наличии лекарственно устойчивых 
[8, 9], вместе с тем, технические решения, формулирующие способы оценки чувствительности возбудителя, полагающиеся на данные иммунологических исследований, ограничены.
Существует иммунологический метод оценки лекарственной чувствительности на основании определения уровня стимулированной продукции IL-2 (при лекарственно чувствительном туберкулезе легких уровень IL-2 выше), и IL-2-секретирующей реактивности лимфоцитов крови (повышается при лекарственно устойчивом туберкулезе) [10]. Недостатками метода является отсутствие четких критериев изменения показателей, необходимость культивирования лейкоцитов, необходимость работы с белковым и липидным антигеном, выделенным из 
, вакцинным штаммом БЦЖ, сложности стандартизации метода, трудности в использовании способа лабораториями лечебных учреждений (необходим квалифицированный персонал).
Известен способ оценки лекарственной чувствительности, заключающийся в определении уровня липополисахарид (ЛПС) - стимулированной продукции NO у впервые выявленных больных распространенным деструктивным туберкулезом с последующим расчетом формулы прогноза по уравнению у = ехр (10,4271+(-96,495)*х)/(1+ехр(10,4271+(-96,495)*х)) [11], позволяющий прогнозировать вероятность наличия туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ). В частности, вероятность наличия туберкулеза с МЛУ, равная 80%, отмечается при ЛПС-стимулированной продукции NO-мононуклеарами крови ≤0,1 моль/мл, равная 100% - при ЛПС-активированной выработке радикала ≤0,05 моль/л.
Недостатками данного метода являются: необходимость предварительного выделения мононуклеаров крови на градиенте плотности, которое не гарантирует отсутствия тромбоцитов и нейтрофилов (являются значительными продуцентами NO, что может искажать результат исследования в зависимости от их количества в пробе, снижается точность исследования). Оксид азота быстро окисляется до нитритов/нитратов кислородом (период его полураспада составляет от менее 1 секунды в присутствии гемоглобина до 30 секунд [12], следовательно, его концентрация существенно зависит от времени выполнения анализа после взятия крови (снижает точность исследования); высокая вероятность расхождения в полученных результатах, так как реакция Грисса является двухступенчатой, сложности в стандартизации ЛПС разных серий производителя; необходимость самостоятельного приготовления реагентов, увеличивающая погрешность исследования (в частности, готовится питательная среда, содержащая RPMI-1640, инактивированную эмбриональную телячью сыворотку, L-глутамин, гентамицин, HEPES); невысокая диагностическая специфичность способа - 79%.
Наиболее близким аналогом, принятым за прототип, является способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacterium tuberculosus на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека, включающий исследование с определением уровня спонтанной продукции TNF-α in vitro. Величина более 165 пг/мл позволяет прогнозировать наличие МЛУ Mycobacterium tuberculosus (http://www.dissercat.com/content/faktorv-riska-assotsiirovannye-s-mnozhestvenno-lekarstvenno-ustoichivym-tuberkulezom).
Известный способ имеет следующие недостатки:
- длительность получения супернатанта для непосредственного определения TNF;
- трудоемкость преаналитического этапа (получения супернатанта);
- необходимость специального оборудования для культивирования (СО2-инкубатор);
- необходимость использования одноразовой посуды и расходных материалов;
- необходимость использования большого количества дополнительных реагентов (соли, среды, сыворотки);
- отсутствует информация о стандартизации супернатантов из разных образцов (в автореферате на стр. 30 упоминается о значительной вариабельности («показатель относительного риска развития МЛУ ТБ на фоне увеличения продукции TNF c выше 165 пг/мл был высоким, однако имел значительный разброс»).
Задачей и техническим результатом заявляемого изобретения является снижение времени на получение результата исследования при оценке чувствительности 
к лекарственным препаратам, снижение трудоемкости (упрощение способа), уменьшение вариабельности данных между образцами.
Для решения поставленной задачи в способе оценки лекарственной чувствительности Mycobacterium tuberculosus на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека, включающем исследование крови, согласно изобретению устанавливают абсолютное количество фагоцитирующих гранулоцитов и Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер поздней активации HLA-DR-Ag с подсчетом результата по формуле Y=1,76-5,08X1-0,17X2, где X1 - CD3+HLA-DR+(109/лист), Х2 - количество фагоцитирующих гранулоцитов (109/литр) и при значении Y<1 делают заключение о наличии лекарственно чувствительных изолятов возбудителя туберкулеза, a Y≥1 – изолятов, не имеющих лекарственной чувствительности (устойчивые изоляты).
Заявляемый способ осуществляют следующим образом. У пациента, имеющего 
, утром, натощак, до начала лечения и проведения физиотерапевтических процедур берут венозную кровь из локтевой вены в пробирку с антикоагулянтом (гепарин) с соблюдением правил асептики и антисептики. Достаточное для исследования количество биологической жидкости составляет 1 мл. Определение количества фагоцитирующих гранулоцитов проводят методом проточной цитофлюориметрии, применяя тест-систему любого производителя, например - Phagotest (Glycotope Biotechnology, Germany). Популяцию Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер поздней активации HLA-DR-Ag (CD3+HLA-DR+), используя проточный цитофлюориметр и моноклональные антитела любой доступной марки, например, Beckman Coulter (USA). Полученные значения количества CD3+HLA-DR+ и числа фагоцитирующих гранулоцитов включают в выражение Y=1,76-5,08X1-0,17X2, где X1 - CD3+HLA-DR+(109/л), Х2 - фагоцитирующие гранулоциты (109/л). Значение Y<1 свидетельствует о наличии лекарственно чувствительных изолятов возбудителя туберкулеза, а Y≥1 - не имеющих лекарственной чувствительности (устойчивые изоляты).
Для выявления предлагаемой закономерности проводилось исследование крови у 12 больных инфильтративным туберкулезом легких с лекарственно устойчивыми изолятами 
и 17 больных, не имеющих лекарственной чувствительности (изоляты с множественной лекарственной устойчивостью). Средний возраст обследованных составил 35,6±2,0 года. Из них было 18(61,0%) мужчин и 11(39,0%) женщин. Контрольную группу составили 25 практически здоровых доноров со средним возрастом 36,0±2,8 лет. Из них было 15(60,0%) мужчин и 10(40,0%) женщин. Установлено, что при наличии лекарственной чувствительных изолятов 
фагоцитарная активность гранулоцитов увеличивается, на Т-лимфоцитах наблюдается повышение экспрессии маркеров активации (HLA-DR), туберкулез, вызванный изолятами 
, не имеющими лекарственной чувствительности (с множественной лекарственной устойчивостью), характеризуется снижением фагоцитарной активности гранулоцитов и экспрессии HLA-DR на Т-лимфоцитах. Используя регрессионный метод, было проведено статистическое исследование для поиска взаимосвязи иммунологических показателей с наличием лекарственной чувствительности возбудителя. Сравнение данных пациентов с лекарственно чувствительными изолятами 
и пациентов, у которых туберкулез был вызван 
с изолятами, не имеющими лекарственной чувствительности (с множественной лекарственной устойчивостью), было получено регрессионное уравнение Y=1,76-5,08X1-0,17X2, где X1 - CD3+HLA-DR+(109/л), Х2 - фагоцитирующие гранулоциты (109/л). Значение Y<1 ассоциировано с наличием лекарственной чувствительности изолятов возбудителя туберкулеза, a Y≥1 - изолятов в отсутствие лекарственной чувствительности (с множественной лекарственной устойчивостью). В частности, снижение на 5,08% количества CD3+HLA-DR+-лимфоцитов увеличивает на 1% вероятность обнаружения инфильтративного туберкулеза с возбудителем, не имеющим лекарственной чувствительности (с множественной лекарственной устойчивостью). Достоверность коэффициентов регрессии и свободного члена уравнения составила менее 0,05, коэффициент детерминации на обучающей выборке - 0,81 (R2=0,82), F(4, 23)=6,41, р<0,001. Для оценки возможности использования данного теста в клинической практике нами были рассчитаны стандартные статистические показатели диагностической чувствительности (82,6%) и диагностической специфичности (82,4%) по общепринятым формулам (http://pubhealth.spb.ru/EBM/Epid /EpidRusG04.htm). Способ апробирован в ФГБУ «Уральский НИИ фтизиопульмонологии» Минздрава России на 36 пациентах тестовой группы, имевших M.tuberculosis, распределение пациентов по лекарственной чувствительности и устойчивости возбудителя было сопоставимо с группой, позволившей выявить установленную закономерность.
В доступной научно-медицинской и патентной литературе авторами не обнаружено сведений об известности способа оценки лекарственной чувствительности 
представленными иммунологическими методами. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «новизна».
Исследованиями авторов впервые было доказано, что экспрессия HLA-DR-Ag+ на Т-лимфоцитах (маркер поздней активации клеточного звена иммунитета) и фагоцитарная активность гранулоцитов крови больных туберкулезом отражают лекарственную чувствительность 
Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».
Заявляемый способ может быть воспроизведен в условиях медицинского учреждения (поликлиника, стационар), имеющего среди лабораторного оборудования проточный цитофлюориметр. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «промышленная применимость».
Заявляемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.
1. Больной М., 1971 г. р., находился на лечении в ФГБУ «УНИИФ» Минздрава России в 2012 году. Ds: инфильтративный туберкулез легких, поражение трех долей, фаза рассасывания. Сопутствующая патология: хронический гастрит, хронический холецистит. Дата первичной постановки диагноза 01.12.2011 при появлении клинических признаков, подтвержденных рентгенологическим методом. С 2010 года выявлялась анасарка без лихорадки (плеврит, перикардит, асцит, периферические отеки), с 2011 года - снижение работоспособности, подъемы температуры, потливость, кашель с мокротой. Социально адаптирован: житель города, имеет жену, ребенка, занимаемая должность - директор, туберкулезный контакт отрицает, не курит. 
обнаружены 23.03.12 в мокроте и промывных водах бронхов методом люминесцентной микроскопии (26.12.13). В общем анализе крови (29.02.12): лейкоцитоз - 9,9*109/л, гранулоцитов - 6,99*109/л, базофилов - 0,10*109/л, эозинофилов - 2,87*109/л, лимфоцитов - 1,73*109/л, моноцитов - 1,18*109/л. Фагоцитирующих гранулофитов - 5,9*109/л, CD3+HLA-DR+ - 0,066*109/л, Y=0,4, сделано заключение о лекарственной чувствительности изолята 
Терапия: канамицин, рифампицин, пиразинамид, этамбутол, изониазид, левофлоксацин, режим терапии IA(-). Длительность лечения в стационаре составила 145 суток. Исход заболевания - выздоровление.
2. Больной П., 1962 г. р. Ds: инфильтративный туберкулез, поражение 1 доли, фаза рассасывания, экссудативный плеврит. Дата первичной постановки диагноза 27.11.2011 при появлении клинических признаков, подтвержденных рентгенологическим методом. Сопутствующая патология: язва желудка, хронический пиелонефрит, хронический гастрит. Госпитализирован 01.2012, заболел остро, боль в лев. боку при дыхании, одышка при дыхании, t до 38°С. Социальный статус: женат, 2 детей, алкоголь не употребляет, инвалид 2 группы, житель города, туберкулезный контакт отрицает, не курит. 
обнаружены 11.01.12 в мокроте методом люминесцентной микроскопии, 20.01.12 в плевральном экссудате методом ПЦР. В общем анализе крови (29.02.12): лейкоцитоз - 6,1*109/л, гранулоцитов - 3,29*109/л, базофилов - 0,18*109/л, эозинофилов - 0,37*109/л, лимфоцитов - 2,26*109/л, моноцитов - 0,55*109/л. Фагоцитирующих гранулофитов - 5,9*109/л, CD3+HLA-DR+ - 0,066*109/л, Y=0,4, сделано заключение о лекарственной чувствительности изолята 
Терапия: канамицин, рифампицин, пиразинамид, этамбутол, изониазид, левофлоксацин, режим терапии IA(-). Длительность лечения в стационаре составила 145 суток. Исход заболевания - выздоровление.
3. Больная Ш., 1987 г. р., Ds: инфильтративный туберкулез легких, формирующаяся туберкулема с обсеменением. Впервые диагноз был установлен в 2012 году. Сопутствующая патология: остеохондроз позвоночника, нейросенсорная тугоухость. Клинические признаки заболевания: фебрильная температура, слабость, кашель с мокротой, снижение массы тела. Социальный статус: замужем, житель города, инвалид 2 группы, не работает, не курит, сын и мать умерли от туберкулеза. 
обнаружены неоднократно методом люминесцентной микроскопии, методом световой микроскопии по Циль-Нильсену, при посеве на плотные среды. В общем анализе крови (10.12.13): лейкоцитоз - 5,3*109/л, гранулоцитов - 3,3*109/л, базофилов - 0,05*109/л, эозинофилов - 0,16*109/л, лимфоцитов - 1,50*109/л, моноцитов - 0,47*109/л. Фагоцитирующих гранулофитов - 2,29*109/л, CD3+HLA-DR+ - 0,012*109/л, Y=1,3, сделано заключение об отсутствии лекарственной чувствительности изолята 
установлена множественная лекарственная устойчивость изолята. Резистентность выявлена в 2012: изониазид, рифампицин, этамбутол, канамицин, фторхинолоны, ПАСК в 2013: стрептомицин, изониазид, рифампицин, этионамид, циклосерин, канамицин, капреомицин, ПАСК, офлоксацин. Терапия: пиразинамид, левофлоксацин, амоксициллин, клофазимин, протионамид, режим терапии индивидуальный, пневмоперитонеум. Длительность лечения в стационаре составила 231 сутки. Исход заболевания - улучшение.
4. Больная С., 1986 г. р., Ds: инфильтративный туберкулез легких, фаза распада. Впервые диагноз был установлен в 2010 году. Сопутствующая патология несахарный диабет, эмфизема, аномалия Киари I. Клиническая картина: в 2010 году отмечалась боль в правой половине грудной клетки, одышка, спонтанный пневмоторакс справа, 2011 - повторный пневмоторакс. Социальный статус: житель города, продавец, туберкулезный контакт отрицает. 
обнаружены при посеве на плотные среды (11.02.14). В общем анализе крови (10.12.13): лейкоцитоз - 6,4*109/л, гранулоцитов - 4,52*109/л, лимфоцитов - 1,43*109/л, моноцитов - 0,45*109/л. Фагоцитирующих гранулофитов - 3,74*109/л, CD3+HLA-DR+ - 0,003*109/л, Y=1,1, сделано заключение об отсутствии лекарственной чувствительности изолята 
, установлена множественная лекарственная устойчивость. Резистентность: стрептомицин, рифампицин, канамицин, этионамид. 01.09.2011 выполнена атипичная краевая резекция легкого. Терапия: изониазид, капреомицин, пиразинамид, рифадин. Режим терапии: 2Б. Длительность лечения в стационаре составила 230 суток. Исход заболевания - улучшение.
Использованная литература
1. Фтизиатрия: нац. рук./ В.А. Аксенова, А.С. Апт, В.С. Баринов и др. / Под ред. М.И. Перельмана. - М.: ГОЭТАР-Медиа, 2010. - 521 с. (Серия «Национальные руководства»). - Гл. 5. - Стр. 87.
2. Культуральные методы диагностики туберкулеза: учебное пособие для проведения базового курса обучения специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы / Под ред. В.В. Ерохина. - М.: Триада. - 2008. - 208 с. - Стр. 125.
3. Культуральные методы диагностики туберкулеза: учебное пособие для проведения базового курса обучения специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы / Под ред. В.В. Ерохина. - М.: Триада. - 2008. - 208 с. - Стр. 135.
4. Культуральные методы диагностики туберкулеза: учебное пособие для проведения базового курса обучения специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы / Под ред. В.В. Ерохина. - М.: Триада. - 2008. - 208 с. - Стр. 123.
5. Патент РФ №2562866 Способ обнаружения ДНК возбудителя туберкулеза с одновременным установлением его генотипа и определением генетических детерминант множественной и широкой лекарственной устойчивости, олигонуклеотидный микрочип, набор праймеров и набор олигонуклеотидных зондов, используемые в способе / Д.А. Грядунов, Д.В. Зименков. - заявл. 11.11.2014, опубл. 10.09.2015.
6. Интернет-ресурс http://www.activestudy.info/dragie-metody-opredeleniya-chuvstvitelnosti-mikroorganizmov-k-antibiotikam/.
7. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению туберкулеза органов дыхания с МЛУ и ШЛУ возбудителем. - М., 2015. - С. 7.
8. Гариб Ф.Ю. Взаимодействия патогенных бактерий с врожденными иммунными реакциями хозяина / Ф.Ю. Гариб, А.П. Ризопулу // Инфекция и иммунитет. - СПб.: НИИЭМ имени Пастера. - 2012. - №3. - С. 581-596.
9. Писаренко М.С. Особенности секреции интерферона гамма при лекарственно-устойчивом туберкулезе легких / М.С. Писаренко // Фундаментальные исследования. - М.: Издательский Дом «Академия Естествознания». - 2013. - №9. - С. 444-447.
10. Хасанова P.P. Реактивность лимфоцитов крови при туберкулезе легких / Р.Р. Хасанова, О.В. Воронкова, О.И. Уразова, В.В. Новицкий, А.К. Стрелис, Ю.В. Стамбула, А.Е. Колосова, В.А. Серебрякова, И.О. Наследникова, О.В. Колоколова, Т.Е. Будкина, Н.П. Пирогова // Медицинская иммунология. - 2009. - Т. 11. - №1. - С. 35-40.
11. Земляная Н.А. Клинико-иммунологические особенности туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью [Текст]: автореф. дис. … канд. мед. наук / Наталия Александровна Земляная. - Томск, 2007. - 24 с.
12. Sun J. Measurement of Nitric Oxide Production in Biological Systems by Using Griess Reaction Assay / Jie Sun, Xueji Zhang, Mark Broderick, Harry Fein // Sensors. - 2003. - №3. - P. 276-284.
Claims (1)
- Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacterium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека, включающий исследование крови, отличающийся тем, что устанавливают абсолютное количество фагоцитирующих гранулоцитов и Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер поздней активации HLA-DR-Ag с подсчетом результата по формуле Y=1,76-5,08X1-0,17X2, где X1 - CD3+HLA-DR+(109/литр), X2 - количество фагоцитирующих гранулоцитов (109/литр), и при значении Y<1 делают заключение о лекарственно чувствительных изолятах возбудителя туберкулеза, a Y≥1 - изолятов, не имеющих лекарственной чувствительности.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016140786A RU2659958C2 (ru) | 2016-10-17 | 2016-10-17 | Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016140786A RU2659958C2 (ru) | 2016-10-17 | 2016-10-17 | Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016140786A RU2016140786A (ru) | 2018-04-17 |
| RU2659958C2 true RU2659958C2 (ru) | 2018-07-04 |
Family
ID=61974485
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016140786A RU2659958C2 (ru) | 2016-10-17 | 2016-10-17 | Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2659958C2 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0771360A1 (en) * | 1994-06-09 | 1997-05-07 | Innogenetics N.V. | Method for the detection of the antibiotic resistance spectrum of mycobacterium species |
| RU2297456C2 (ru) * | 2003-04-24 | 2007-04-20 | Московский городской научно-практический центр борьбы с туберкулезом (МНПЦ БТ) | Способ диагностики чувствительности штаммов mycobacterium tuberculosis к изониазиду |
| RU2315113C2 (ru) * | 2005-06-24 | 2008-01-20 | Светлана Григорьевна Сафонова | Способ диагностики чувствительности mycobacterium tuberculosis к противотуберкулезным препаратам |
-
2016
- 2016-10-17 RU RU2016140786A patent/RU2659958C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0771360A1 (en) * | 1994-06-09 | 1997-05-07 | Innogenetics N.V. | Method for the detection of the antibiotic resistance spectrum of mycobacterium species |
| RU2297456C2 (ru) * | 2003-04-24 | 2007-04-20 | Московский городской научно-практический центр борьбы с туберкулезом (МНПЦ БТ) | Способ диагностики чувствительности штаммов mycobacterium tuberculosis к изониазиду |
| RU2315113C2 (ru) * | 2005-06-24 | 2008-01-20 | Светлана Григорьевна Сафонова | Способ диагностики чувствительности mycobacterium tuberculosis к противотуберкулезным препаратам |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ИСАЕВА Ю.Д. КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS К ПРЕПАРАТАМ ГРУППЫ ФТОРХИНОЛОНОВ КУЛЬТУРАЛЬНЫМИ МЕТОДАМИ // Авто кбн, Москва, 2013, найдено он-лайн [04.10.2017]: http://earthpapers.net/kriterii-otsenki-lekarstvennoy-chuvstvitelnosti-mycobacterium-tuberculosis-k-preparatam-gruppy-ftorhinolonov-kulturalnymi. * |
| ИСАЕВА Ю.Д. КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS К ПРЕПАРАТАМ ГРУППЫ ФТОРХИНОЛОНОВ КУЛЬТУРАЛЬНЫМИ МЕТОДАМИ // Автореферат кбн, Москва, 2013, найдено он-лайн [04.10.2017]: http://earthpapers.net/kriterii-otsenki-lekarstvennoy-chuvstvitelnosti-mycobacterium-tuberculosis-k-preparatam-gruppy-ftorhinolonov-kulturalnymi. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016140786A (ru) | 2018-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Waddington et al. | An outpatient, ambulant-design, controlled human infection model using escalating doses of Salmonella Typhi challenge delivered in sodium bicarbonate solution | |
| Page et al. | Infections in children admitted with complicated severe acute malnutrition in Niger | |
| Melbye et al. | The course of C-reactive protein response in untreated upper respiratory tract infection | |
| CN103975241A (zh) | 用于提高a型链球菌免疫测定法的特异性的n-乙酰基-d-葡糖胺 | |
| Goh et al. | Think twice before prescribing antibiotics for that swollen knee: the influence of antibiotics on the diagnosis of periprosthetic joint infection | |
| Deniz et al. | Improved sensitivity of the skin pathergy test with polysaccharide pneumococcal vaccine antigens in the diagnosis of Behçet disease | |
| Alateah et al. | A retrospective study of tuberculosis prevalence amongst patients attending a tertiary hospital in Riyadh, Saudi Arabia | |
| Teferi et al. | Acute Febrile Illness Among Children in Butajira, South–Central Ethiopia During the Typhoid Fever Surveillance in Africa Program | |
| Alsaffar et al. | Study some immunological parameters for Salmonella Typhi patients in Hilla city | |
| RU2659958C2 (ru) | Способ оценки лекарственной чувствительности Mycobacnerium tuberculosis на основе результатов определения иммунологических показателей крови у больного туберкулезом легких человека | |
| RU2491551C1 (ru) | Способ видовой идентификации микобактерий туберкулеза у лиц, инфицированных микобактериями туберкулеза | |
| Amir et al. | Culturing, identification and drug resistance of Mycobacterium tuberculosis in sputum specimen | |
| Kahase et al. | Mycobacterium Tuberculosis and Nontuberculous Mycobacteria isolates from presumptive pulmonary tuberculosis patients attending a tertiary hospital in Addis Ababa, Ethiopia | |
| Gabus et al. | Tropheryma whipplei tricuspid endocarditis: a case report and review of the literature | |
| RU2687574C1 (ru) | Способ оценки уровня резистентности организма детей I-II группы здоровья по вирусному компоненту микробиоты полости рта | |
| Yang et al. | Discovery of the plague pathogen: lessons learned | |
| Nso et al. | Localized pulmonary Nocardia farcinica infection as the presenting symptom of acquired immunodeficiency syndrome | |
| RU2686732C2 (ru) | Способ проведения туберкулостатической пробы у больных туберкулёзом легких для лабораторного обоснования персонифицированного лечения | |
| RU2734570C1 (ru) | Способ оценки уровня резистентности у подростков 12-18 лет по состоянию бактериального и вирусного компонента микробиоты полости рта | |
| RU2823995C1 (ru) | Способ диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците | |
| Obayes et al. | Diagnosis of pulmonary and extra pulmonary tuberculosis from Babylon Iraq patient | |
| Mustafa et al. | Human Brucellosis in Khartoum State: A Commonly Underdiagnosed Disease. | |
| Maori et al. | Tuberculosis/HIV Co-infection among Internally Displaced Persons (IDP) in Gombe State, Nigeria | |
| Kouemo Motse et al. | Predictors of Urinary Tract Infection and Their Diagnostic Performances among Cameroonian Under-five. | |
| Selvam et al. | BipD of Burkholderia pseudomallei: Structure, Functions, and Detection Methods. Microorganisms 2021, 9, 711 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181018 |