RU2823995C1 - Способ диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците - Google Patents
Способ диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците Download PDFInfo
- Publication number
- RU2823995C1 RU2823995C1 RU2023108478A RU2023108478A RU2823995C1 RU 2823995 C1 RU2823995 C1 RU 2823995C1 RU 2023108478 A RU2023108478 A RU 2023108478A RU 2023108478 A RU2023108478 A RU 2023108478A RU 2823995 C1 RU2823995 C1 RU 2823995C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacterial
- abdominal
- patients
- infection
- surgical infection
- Prior art date
Links
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 title claims abstract description 34
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 206010003011 Appendicitis Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 101800004361 Lactoferricin-B Proteins 0.000 claims abstract description 17
- CFFMZOZGXDAXHP-HOKBLYKWSA-N lactoferricin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CFFMZOZGXDAXHP-HOKBLYKWSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims abstract 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 abstract description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 2
- 238000012084 abdominal surgery Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 4
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 3
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 3
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 3
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 3
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 206010056519 Abdominal infection Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000036209 Intraabdominal Infections Diseases 0.000 description 2
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 238000011203 antimicrobial therapy Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 2
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 2
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 206010058040 Abdominal sepsis Diseases 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010059484 Haemodilution Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- 102000018568 alpha-Defensin Human genes 0.000 description 1
- 108050007802 alpha-defensin Proteins 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000007486 appendectomy Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 201000005008 bacterial sepsis Diseases 0.000 description 1
- 102000012265 beta-defensin Human genes 0.000 description 1
- 108050002883 beta-defensin Proteins 0.000 description 1
- 239000003150 biochemical marker Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 description 1
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 description 1
- POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N cathelicidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C1=CC=CC=C1 POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N 0.000 description 1
- VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N ceftriaxone Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC1=NC(=O)C(=O)NN1C VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N 0.000 description 1
- 229960004755 ceftriaxone Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 238000002297 emergency surgery Methods 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000009343 monoculture Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к абдоминальной хирургии, и может быть использовано для диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците путем биохимического исследования биологической жидкости человека. В сыворотке крови хирургических пациентов методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа определяют концентрацию антибактериального пептида лактоферрицина. При обнаружении его в концентрации не менее 40 нг/мл у пациентов диагностируют бактериальную абдоминальную хирургическую инфекцию. Способ обеспечивает возможность повышения чувствительности и точности процедуры диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции за счет определения концентрации антибактериального пептида лактоферрицина в сыворотке крови хирургических больных. 2 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к абдоминальной хирургии, и может быть использовано для диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците путем биохимического исследования сыворотки крови хирургических больных.
Анализ структуры летальности у больных с бактериальной абдоминальной хирургической патологией показывает, что основной причиной смерти у этих больных был и остается перитонит (Абдоминальная хирургическая инфекция: клиника, диагностика, антимикробная терапия. Практическое руководство / Под ред. B.C. Савельева, Б.Р. Гельфанда. - М.: Литтерра, 2006. - 168 с.), а летальность при перитоните колеблется в пределах 18-20%, а при распространенной форме она повышается до 60%. Такой большой процент летальности у этой категории больных связан с клинически важной особенностью интраабдоминальных инфекций, во многом определяющей неудовлетворительный прогноз, заключающейся в быстром развитии генерализованной реакции макроорганизма в ответ на инфекционный процесс, обусловленной действием бактериальных эндо- и экзотоксинов и различных медиаторов воспаления.
Исследования, проведенные в клиниках России, подтверждают полимикробный характер интраабдоминальных инфекций с участием широкого спектра аэробных и анаэробных грамотрицательных и грамположительных бактерий (Гельфанд Б.Р., Гологорский В.А., Бурневич С.З. Антибактериальная терапия при отдельных формах абдоминальной хирургической инфекции. // Consilium medicum. - 2000. - №4. С. 21-26; Савельев B.C., Гельфанд Б.Р. Абдоминальная хирургическая инфекция: клиника, диагностика. Антимикробная терапия: практическое руководство 2006. - 168 с; Чернов В.Н. Неотложная хирургия: диагностика и лечение острой хирургической патологии. М., 2007. - 350 с.).
Однако в 43,62% случаев при абдоминальной хирургической инфекции из перитонеального экссудата высеивается монокультуры патогенных бактерий (Волков А.Г., Заривчацкий М.Ф. Микробный пейзаж абдоминальных хирургических инфекций у больных многопрофильного стационара // Пермский медицинский журнал. - 2014. - Том XXXI, №1. - С. 53-57).
Поэтому единственным объективным и достоверным методом диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции является бактериологическое исследование, регламентированное на всех этапах официальными инструкциями. Данные микробиологических исследований играют решающую роль для рациональной антибиотикотерапии абдоминальной инфекции в хирургии. Окончательную идентификацию возбудителей и определение их чувствительности к антибактериальным препаратам проводят после получения чистой культуры. Результаты нативной бактериоскопии помогают в назначении первичной эмпирической антибактериальной терапии (Волков А.Г. Клинико-микробиологическая характеристика абдоминальной хирургической инфекции и ее этиотропная терапия: Автореф. дис.… канд. мед. наук.. 2016. - Пермь. - 20 с.).
Однако специфическая бактериологическая диагностика инфекции трудоемка, длительна и доступна не всем лечебным учреждениям: через 24-48 часов после посева культуральные и морфологические свойства выросших колоний оценивают визуально и, как правило, осуществляется пересев отдельных колоний на специализированные среды. Затем проводится идентификация штаммов на основе биохимического обнаружения специфических маркеров-ферментов или типовых метаболитов.
В стадии изучения клинической эффективности находятся высокотехнологичные способы диагностики доминирующих в микробной ассоциации возбудителей, независимо от их количественного содержания. К таким методам относится, к примеру, газовая хроматография, позволяющая распознать характерные метаболиты отдельных микробиотов, которые по своим микробиологическим свойствам способны выступить в качестве доминирующих патогенов (Патент РФ №2235325 от 26.08.2002 «Способ определения инфицированного выпота брюшной полости и способ лечения заболеваний, сопровождающихся выпотом в брюшную полость»).
Недостатками всех перечисленных специфических бактериологических методов идентификации возбудителя бактериальной абдоминальной хирургической инфекции являются:
- недоступность в обозримом будущем для большинства хирургических отделений из-за высокой стоимости аппаратуры, реагентов и квалифицированного персонала для обслуживания соответствующего оборудования;
- клиницистами подвергается сомнению целесообразность всеобъемлющего микробиологического мониторинга при ведении больных с абдоминальными инфекционными процессами.
Большинство исследователей ориентируется на изучение лабораторных тестов, таких, как количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу, уровень веществ средней молекулярной массы (ВСММ), лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ), осмолярность плазмы крови, эффективная концентрация альбумина (Грдчик И.Е., Закиров Д.Б., Пар В.И. К прогнозу течения абдоминального сепсиса // Вестник интенсивной терапии, 2004, №1, с. 32-36), определение уровня прокальцитонина и пр. (Савельев B.C., Гельфанд Б.Р., Филимонова М.И. Перитонит. - М., Литтера, 2005, с. 58). Однако ни один из выше перечисленных лабораторных показателей не диагностирует послеоперационную абдоминальную хирургическую инфекцию на ее ранней стадии. При вялотекущей форме перитонита все эти показания размыты или отсутствуют вообще.
Среди способов небактериологической диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции существуют способы биохимической диагностики бактериальной инфекции или сепсиса, заключающиеся в исследовании крови и определении в сыворотке крови больных повышенных уровней маркерных белков (Вельков В.В. Комплексная лабораторная диагностика системных инфекций и сепсиса: С-реактивный белок, прокальцитонин, пресепсин. 2015. - 117 с.; Чернов В.Н., Таранов И.П., Бабиев В.Ф. Способ диагностики анаэробной хирургической инфекции мягких тканей // Патент РФ № 2073245 от 10.02.1997).
Недостатками этих способов являются:
- неэффективность в отношении диагностики микробиологической структуры абдоминальной хирургической инфекции;
- диагностика основывается на определении в крови определенной пороговой величины биохимического аналита и не свободна от различного рода ошибок измерения (в том числе, связанных с гемодилюцией);
- для установления диагноза необходимо неоднократное исследование крови у одного и того же пациента ввиду чрезвычайно широкого интервала индивидуальных значений биохимических маркерных белков.
Доказано, что нейтрофилы плазмы крови и перитонеального экссудата секретируют лактоферрин, липокалин, кателицидин, α- и β-дефенсины и другие пептиды (Ihi Т., Nakazato М., Mukae Н., Matsukura S. / Elevated concentrations of human neutrophil peptides in plasma, blood, and body fluids from patients with infections // Clin. Infect. Dis. - 1997. - Vol. 25, №5. - P. 1134-1140).
Было обнаружено, что структурным участком белка лактоферрина, ответственным за бактерицидные свойства, является короткий концевой пептид, называемый лактоферрицином (Серебряков А.А., Коханов А.В., Николаев А.А. Уропротеины с антибактериальными свойствами: клинико-диагностическое значение. // Астраханский медицинский журнал. - 2020. -Т. 15, №3. - С.:32-47; BellamyW., Takase М., Yamauchi K., Wakabayashi Н., Kawase K., Tomita М. / Identification of the bactericidal domain of lactoferrin // Biochim. Biophys. Acta. - 1992. - Vol. 1121, № 1-2. - P. 130-136).
Существуют способы биохимической диагностики отдельных видов абдоминальной хирургической инфекции, путем определения нескольких специфических для данной бактериальной абдоминальной хирургическую инфекции белков. Способ диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции (Патент РФ №2705385 от 10.01.2019, Зурнаджьянц В.А. и соавт.), способ диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции (Патент РФ №2705384 от 10.01.2019, Зурнаджьянц В.А. и соавт.), способ диагностики стафиллококковой абдоминальной хирургической инфекции (Патент РФ №2705415 от 10.01.2019, Зурнаджьянц В.А. и соавт.). Однако данные способы не позволяют определять сам факт наличия бактериальной абдоминальной хирургической инфекции независимо от вида бактериальной абдоминальной хирургической инфекции.
В качестве наиболее близкого аналога предлагается способ диагностики послеоперационного перитонита (Патент РФ №2456621 от 31.03.2011, Топчиев М.А. и соавт.) путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови и перитонеальном экссудате послеоперационных больных определяют уровень ферритина, 100 нг/мл которого принимают за 1 балл, затем баллы ферритина в экссудате и сыворотке суммируют, определяют суммарный индекс ферритина и при его повышении более 12 баллов диагностируют развитие послеоперационного перитонита.
Недостатками прототипа являются:
- неспецифичность полученных результатов анализа;
- неспецифичность используемого индикатора в отношении инфекционного агента;
- необходимость для обследования двух жидкостей пациента;
- большое число ложноположительных и ложноотрицательных результатов;
- используется субъективная оценка результата по сумме набранных баллов.
Изобретение направлено на повышение чувствительности и точности процедуры диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците путем биохимического исследования сыворотки крови хирургических больных.
Поставленная в изобретении цель достигается тем, что в сыворотке крови хирургических пациентов методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа определяют концентрацию антибактериального пептида лактоферрицина и при обнаружении его в концентрации не менее 40 нг/мл у пациентов диагностируют бактериальную абдоминальную хирургическую инфекцию.
Иммуноферментный метод регистрации антимикробного пептида лактоферрицина, основанный на реакции антиген-антитело, имеет ряд преимуществ перед спектрофотометрическими и другими методами регистрации результата измерения, к числу которых относятся универсальность, избирательность, специфичность, высокая чувствительность.
Для получения иммуногенных конъюгатов для неиммуногенного пептида лактоферрицина его связывают с молекулой бычьего сывороточного альбумина (БСА) как описано в работах Чехонина В.П. (Чехонин В.П., Дмитриева Т.Б., Жирков Ю.А. Иммунохимический анализ нейроспецифических антигенов. - М.: Медицина, 1999. - 416 c.).
Полученные конъюгаты далее используют для иммунизации кроликов по стандартным протоколам до получения гипериммунной поликлональной антисыворотки. После процедуры истощения (адсорбции) полученной антисыворотки препаратами БСА, получают моноспецифическую антисыворотку к лактоферрицину человека. Для различных иммунохимических методов определения лактоферрицина в пробах сыворотки крови хирургических больных в качестве тест-системы используют либо полученную антисыворотку, либо выделенную из нее иммуноглобулиновую фракцию, содержащую антитела против лактоферрицина человека.
Концентрацию лактоферрицина в сыворотках крови хирургических больных определяли методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа с помощью, разработанной в Астраханском государственном медицинском университете тест-системы с чувствительностью 1-5 нг/мл (Астрахань).
Предложенный способ внедрен в работу хирургического отделения ГБУЗ АО «ГБУЗ АО «ОДКБ им. Н.Н. Силищевой» и ГБУЗ АО «Городская клиническая больница №3» г. Астрахани и использован при обследовании 45 больных.
Ниже приводятся результаты апробации.
Пример 1
Больной С., 11 лет, заболел 07.10.21 года, за медицинской помощью не обращался. Больной доставлен в ГБУЗ АО «ОДКБ им. Н.Н. Силищевой» машиной скорой медицинской помощи 08.10.22 года в тяжелом состоянии, в сознании, вялый, температура кожных покровов 39,4°С. Кожные покровы бледного цвета сухие на ощупь, выражен спазм периферических сосудов. ЧСС 128 уд. в 1 минуту, ЧДД 32 дыхания в 1 минуту. Живот вздут, болезнен при пальпации. Симптом Щеткина-Блюмберга - положительный. Перистальтика вялая единичными волнами.
Общий анализ крови: эритроциты 3,37 × 1012 /л; Hb - 118 г/л; Le - 15,4 × 10 9/ л. СОЭ - 6 мм/час. Лейкоцитарный индекс интоксикации по Я.Я. Кальф-Калифу (ЛИИ) - 7,4 у.е. Общий белок 58 г/л. Креатинин 14,2 ммоль/л, мочевина 2,6 ммоль/л. Аланинаминотрансфераза 0,5 ед. Глюкоза 6,4 г/л.
Биохимический анализ сыворотки крови на лактоферрицин при поступлении пациента: лактоферрицин - 118 нг/мл, что свидетельствовало о наличии у пациента бактериальной абдоминальной инфекции.
На операции: острый гангренозно-перфоративный аппендицит. Разлитой гнойный перитонит. Парез кишечника П-Ш степени.
Для лечения в послеоперационном периоде больной был переведен в реанимационное отделение. В первые послеоперационные сутки у больного сохранялась интоксикация тяжелой степени. Назначена антибактериальная терапия препаратами цефтриаксон по 4 г в сутки внутривенно капельно, метронидазол по 100 мл в сутки в/в 2 раза в сутки.
Анализ сыворотки крови на девятые сутки после операции: лактоферрицин - 15,6 нг/мл, что свидетельствовало об отсутствии на данный момент у пациента бактериальной абдоминальной хирургической инфекции.
Дальнейший послеоперационный период протекал гладко и 29 октября 2021 года больной был выписан из больницы.
Пример 2
Больной П. 28 лет, поступил 17.02.22 г. через двое суток от начала заболевания в приемное отделение ГБУЗ АО «Городская клиническая больница №3» г. Астрахани с жалобами на тошноту, боли в правой подвздошной области ноющего характера.
Общее состояние больного удовлетворительное. Температура тела 37,3°С, частота пульса 76 ударов в минуту, АД 125/75 мм рт.ст. Со стороны сердца и легких изменений нет.
Язык влажный, обложен белесоватым налетом. Живот правильной формы, участвует в дыхании, при пальпации напряжен и болезненен в правой подвздошной области. Симптом Щеткина-Блюмберга отрицателен.
Анализ крови: гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4,8 × 1012/л, гематокрит 0,4 л/л, СОЭ 5 мм/ч, лейкоциты - 8,8 × 109/л, эозинофилы - 2%, палочкоядерные нейтрофилы - 4% сегментоядерные - 69%, лимфоциты -22%, моноциты - 3%, ЛИИ - 1,7 у.е. Общий белок 62 г/л, креатинин 43 ммоль/л, общий билирубин - 13,3 мкмоль/л, мочевина 2,6 ммоль/л, глюкоза 4,4 ммоль/л. При исследовании мочи изменений не обнаружено.
Биохимический анализ сыворотки крови на лактоферрицин при поступлении пациента: лактоферрицин - 4,3 нг/мл, что свидетельствовало об отсутствии у пациента бактериальной абдоминальной хирургической инфекции.
Операция: Аппендэктомия. Гистологическим исследованием червеобразного отростка подтвержден диагноз флегмонозный аппендицит без признаков бактериальной абдоминальной хирургической инфекции.
Предлагаемым способом достигается повышение чувствительности и точности процедуры диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции, а именно:
- быстрота способа, достаточно только одного исследования, с затратой времени на исследование менее 1 часа;
- техническая простота, незначительные трудозатраты (для практического исполнения способа достаточно 1 специалиста);
- экономичность (способ не требует эксклюзивного и дорогостоящего оборудования и реактивов, вспомогательной аппаратуры и высококвалифицированного медперсонала);
- доступность реактивов необходимых для практической реализации данного способа;
- универсальность способа (возможность определения лактоферрицина в образце сыворотки крови хирургического больного любым доступным способом).
Предлагаемый способ может быть внедрен как экспресс-тест на наличие бактериальной абдоминальной хирургической инфекции у пациентов хирургических отделений больниц любого уровня.
Claims (1)
- Способ диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците путем биохимического исследования биологической жидкости человека, отличающийся тем, что в сыворотке крови хирургических пациентов методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа определяют концентрацию антибактериального пептида лактоферрицина и при обнаружении его в концентрации не менее 40 нг/мл у пациентов диагностируют бактериальную абдоминальную хирургическую инфекцию.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2823995C1 true RU2823995C1 (ru) | 2024-07-31 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456621C1 (ru) * | 2011-03-31 | 2012-07-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России) | Способ диагностики послеоперационного перитонита |
| RU2705384C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2705385C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2705415C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики стафилококковой абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2795322C1 (ru) * | 2022-11-21 | 2023-05-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ получения моноспецифических антител к лактоферрицину человека |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456621C1 (ru) * | 2011-03-31 | 2012-07-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России) | Способ диагностики послеоперационного перитонита |
| RU2705384C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2705385C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2705415C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2019-11-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ диагностики стафилококковой абдоминальной хирургической инфекции |
| RU2795322C1 (ru) * | 2022-11-21 | 2023-05-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ получения моноспецифических антител к лактоферрицину человека |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ЗУРНАДЖЪЯНЦ В.А. и др. Антимикробный белок лактоферрин и пептид лактоферрицин в сыворотке крови и перитонеальном экссудате у больных с перитонитом. Инфекции в хирургии. 2022, 2, стр. 73-77. * |
| САВЕЛЬЕВ В.С. и др. Абдоминальная хирургическая инфекция. Российские национальные рекомендации. Москва 2011, стр. 1-100. MOTIE M.R. et al. Serum procalcitonin and lactoferrin in detection of acute appendicitis; a diagnostic accuracy study. Emerg (Tehran). 2018, 6(1):e51. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sierra et al. | C-reactive protein used as an early indicator of infection in patients with systemic inflammatory response syndrome | |
| Lofstedt et al. | Model to predict septicemia in diarrheic calves | |
| Tugrul et al. | Reliability of procalcitonin as a severity marker in critically ill patients with inflammatory response | |
| Corley et al. | Bacteraemia in neonatal foals: clinicopathological differences between Gram‐positive and Gram‐negative infections, and single organism and mixed infections | |
| PT1977244E (pt) | Distinção entre meningites bacterianas e virais | |
| Mellor et al. | Serum neutrophil gelatinase–associated lipocalin in ballistic injuries: A comparison between blast injuries and gunshot wounds | |
| RU2823995C1 (ru) | Способ диагностики бактериальной абдоминальной хирургической инфекции при аппендиците | |
| RU2738012C1 (ru) | Способ прогнозирования риска рецидивирования мочекаменной болезни на стадии первичного кальций-оксалатного нефролитиаза | |
| RU2382362C1 (ru) | Способ ранней диагностики бактериальной пневмонии у недоношенных новорожденных детей с респираторным дистресс-синдромом | |
| RU2823997C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики пиелонефрита и мочекаменной болезни | |
| Peretz et al. | BACTEC™ FX system as a tool for culturing gastric biopsies and Helicobacter pylori diagnosis | |
| RU2705384C1 (ru) | Способ диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции | |
| RU2705415C1 (ru) | Способ диагностики стафилококковой абдоминальной хирургической инфекции | |
| RU2705385C1 (ru) | Способ диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции | |
| RU2110070C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики туберкулеза легких и пневмонии | |
| RU2734670C1 (ru) | Способ диагностики осложнений вирусной и бактериальной этиологии у больных хроническим лимфолейкозом | |
| RU2734570C1 (ru) | Способ оценки уровня резистентности у подростков 12-18 лет по состоянию бактериального и вирусного компонента микробиоты полости рта | |
| RU2391664C2 (ru) | Способ диагностики инфекций влагалища | |
| RU2614723C1 (ru) | Способ ранней дифференциальной диагностики острого аппендицита и острой кишечной инфекции | |
| EP3431988B1 (en) | Method to determine the state of the humoral immune system in a patient | |
| CN108241054B (zh) | 检测g蛋白偶联受体18的试剂在制备败血症诊断及病程监测和预后判断试剂中表达的应用 | |
| RU2791489C1 (ru) | Способ определения референтных значений показателей микроорганизмов в предстательной железе, исследуемых методом хромато-масс-спектрометрии | |
| Resnick et al. | Mass detection of significant bacteriuria: An improved triphenyltetrazolium chloride (TTC) technique | |
| RU2117295C1 (ru) | Способ диагностики септических состояний | |
| RU2684904C1 (ru) | Способ оценки тяжести течения сепсиса |