RU2650863C1 - Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining - Google Patents
Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining Download PDFInfo
- Publication number
- RU2650863C1 RU2650863C1 RU2017104519A RU2017104519A RU2650863C1 RU 2650863 C1 RU2650863 C1 RU 2650863C1 RU 2017104519 A RU2017104519 A RU 2017104519A RU 2017104519 A RU2017104519 A RU 2017104519A RU 2650863 C1 RU2650863 C1 RU 2650863C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- blood
- extract
- agar
- vials
- Prior art date
Links
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims description 9
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 title abstract description 3
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 title 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 35
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 30
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 28
- MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N Menadione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C)=CC(=O)C2=C1 MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 15
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000012711 vitamin K3 Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 239000011652 vitamin K3 Substances 0.000 claims abstract description 13
- 229940041603 vitamin k 3 Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims abstract description 12
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 11
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 claims abstract description 11
- GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M sodium thioglycolate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CS GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 11
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- VLSOAXRVHARBEQ-UHFFFAOYSA-N [4-fluoro-2-(hydroxymethyl)phenyl]methanol Chemical compound OCC1=CC=C(F)C=C1CO VLSOAXRVHARBEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 claims abstract description 9
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 claims abstract description 8
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims abstract description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 claims abstract 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 85
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- 229940046307 sodium thioglycolate Drugs 0.000 claims description 10
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 8
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 claims description 8
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 229960002668 sodium chloride Drugs 0.000 claims description 3
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 abstract description 17
- 244000052769 pathogen Species 0.000 abstract description 16
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 40
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 7
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 5
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 3
- 208000037815 bloodstream infection Diseases 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 238000002788 crimping Methods 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 201000007119 infective endocarditis Diseases 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 2
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 1
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- XKVYZLLWKHGKMT-BEJOYRPXSA-N Gemin D Natural products O([C@@H]([C@@H](O)C=O)[C@@H]1[C@@H](O)COC(=O)c2c(c(O)c(O)c(O)c2)-c2c(O)c(O)c(O)cc2C(=O)O1)C(=O)c1cc(O)c(O)c(O)c1 XKVYZLLWKHGKMT-BEJOYRPXSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000011203 antimicrobial therapy Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N argon Substances [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 206010014665 endocarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229930192479 gemin Natural products 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- KRTSDMXIXPKRQR-AATRIKPKSA-N monocrotophos Chemical compound CNC(=O)\C=C(/C)OP(=O)(OC)OC KRTSDMXIXPKRQR-AATRIKPKSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000004826 seaming Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L sodium dithionite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])=O JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 229940124024 weight reducing agent Drugs 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и клинической микробиологии и касается рецептуры питательной среды и способа ее приготовления, а также использования для микробиологического исследования крови с целью получения гемокультуры при диагностике инфекции кровотока, вызванной аэробными, микроаэрофильными и анаэробными микроорганизмами в клинико-диагностических лабораториях ЛПУ.The invention relates to biotechnology and clinical microbiology, and relates to the formulation of the nutrient medium and the method of its preparation, as well as the use for microbiological blood tests in order to obtain blood culture in the diagnosis of blood flow infection caused by aerobic, microaerophilic and anaerobic microorganisms in clinical diagnostic laboratories of hospitals.
Бактериологическое исследование крови с целью получения гемокультуры возбудителя инфекции кровотока проводят при многих заболеваниях инфекционной и неинфекционной этиологии. Большую трудность представляет собой выделение возбудителя из крови у терапевтических больных стационарных и амбулаторных учреждений с высокой температурой тела и субфебрилитетом.A bacteriological blood test in order to obtain blood culture of the pathogen of bloodstream infection is carried out in many diseases of infectious and non-infectious etiology. The great difficulty is the isolation of the pathogen from the blood in therapeutic patients of inpatient and outpatient facilities with high body temperature and subfebrile condition.
Исторически метод «Посев крови на стерильность» регламентирован приказом №535 от 1985 года [1] и до сегодняшнего дня приказ предлагает для этой цели применять пять сред.Historically, the method “Sowing blood for sterility” was regulated by order No. 535 of 1985 [1] and to this day the order proposes to use five media for this purpose.
1. «Двойная среда», состоящая из скошенного во флаконе питательного агара и полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне.1. "Double medium", consisting of a nutrient agar slanted in a vial and a semi-liquid medium prepared on a nutrient broth.
2. «Среда для контроля стерильности», которую следует обогатить дрожжевым экстрактом и добавить резазурин.2. "Environment for sterility control", which should be enriched with yeast extract and add resazurin.
3. «Среда со стаканчиком», которую готовят сложным образом.3. "Wednesday with a glass", which is prepared in a complex way.
4. »Полужидкая среда Тароцци».4. "Semi-fluid medium Tarozzi."
5. « Жидкая среда Сабуро».5. "Liquid environment Saburo."
«Двойная среда», состоящая из скошенного во флаконе 150 мл 1,7-2% питательного агара и 150 мл полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне с добавлением 15 г глюкозы и 0,15 г агара. «Среда для контроля стерильности», которую следует обогатить дрожжевым экстрактом (15-20 г на 1 литр), добавить 0,001 г резазурина. «Среда со стаканчиком», которую готовят следующим образом. Во флаконы с широким горлом (диаметр 30 мм) емкостью 250 мл наливают 50 мл дистиллированной воды, содержащей 0,1% агара. В этот флакон пинцетом опускают стеклянный стаканчик или пробирку длиной 70 мм и диаметром 20-22 мм, в которой находится 12 мл концентрированной питательной среды, состав которой следующий: на 100 мл перевара Хоттингера с остаточным азотом 750-800 мг %, 2 г глюкозы, 2 г хлористого натрия, рН 7,5-7,4. «Полужидкая среда Тароцци» с 0,5% глюкозы и 0,1% агара во флаконах по 300 или 150 мл. «Жидкая среда Сабуро», содержащая на 1 литр дистиллированной среды 10 г пептона, 25 г хлористого натрия, 40 г глюкозы, разлита во флаконы по 150-200 мл."Double medium", consisting of 150 ml of 1.7-2% nutrient agar and 150 ml of semi-liquid medium prepared in a nutrient broth with the addition of 15 g of glucose and 0.15 g of agar. "Environment for sterility control", which should be enriched with yeast extract (15-20 g per 1 liter), add 0.001 g of resazurin. "Wednesday with a glass", which is prepared as follows. In wide-necked vials (diameter 30 mm) with a capacity of 250 ml, 50 ml of distilled water containing 0.1% agar is poured. A glass cup or test tube 70 mm long and 20-22 mm in diameter is placed in this vial with tweezers, in which there is 12 ml of concentrated nutrient medium, the composition of which is as follows: per 100 ml of Hottinger digest with residual nitrogen 750-800 mg%, 2 g of glucose, 2 g of sodium chloride, pH 7.5-7.4. “Semi-liquid Tarozzi medium” with 0.5% glucose and 0.1% agar in 300 or 150 ml vials. "Saburo Liquid" containing 10 g peptone, 25 g sodium chloride, 40 g glucose per liter of distilled medium is poured into 150-200 ml bottles.
Однако за рубежом для данного исследования используют ручные или автоматизированные системы с сердечно-мозговой средой [2, 3, 4, 5]. Преимущество сердечно-мозговой среды заключается в возможности роста широкого спектра микроорганизмов, включая высоко требовательные к питательным веществам микроорганизмы. При диагностике лихорадочного состояния больного теоретически невозможно предположить вид возбудителя в крови, поэтому питательная среда для выделения должна быть максимально питательной и содержать все необходимые составляющие для роста аэробных, микроаэрофильных и строго анаэробных микроорганизмов. В России отсутствует промышленный выпуск сердечно-мозговой среды для микробиологического исследования крови. Практические лаборатории страны в большинстве случаев с этой целью используют тиогликолевую среду согласно прописи Приказа №535. Результаты получения гемокультур колеблются от 7 до 10% [6].However, abroad or for this study use manual or automated systems with a cardiac environment [2, 3, 4, 5]. The advantage of the cardio-cerebral environment is the possibility of the growth of a wide range of microorganisms, including microorganisms highly demanding on nutrients. When diagnosing a patient’s fever, it is theoretically impossible to predict the type of pathogen in the blood, therefore, the nutrient medium for isolation should be as nutritious as possible and contain all the necessary components for the growth of aerobic, microaerophilic and strictly anaerobic microorganisms. In Russia, there is no industrial release of the cardio-cerebral medium for microbiological blood testing. Practical laboratories of the country in most cases for this purpose use thioglycol medium according to the prescription of Order No. 535. The results of obtaining blood cultures range from 7 to 10% [6].
За последние несколько лет лаборатории крупных научно-исследовательских институтов и некоторые коммерческие медицинские центры были обеспечены импортными гемокультуральными установками с готовыми флаконами сердечно-мозговой среды. Результаты получения гемокультур стали достигать 40% случаев [7]. Согласно мировой статистике по производству питательных сред для посева крови с целью выделения возбудителя используется только сердечно-мозговая среда, как самая высокопитательная, обеспечивающая рост широкого спектра микроорганизмов, включая высоко требовательные аэробные и облигатно анаэробные микроорганизмы.Over the past few years, laboratories of large research institutes and some commercial medical centers have been provided with imported blood culture units with ready-made vials of the cerebral environment. The results of obtaining blood cultures began to reach 40% of cases [7]. According to world statistics on the production of culture media for blood culture, the only cerebral medium is used as the most nutritious, providing the growth of a wide range of microorganisms, including highly demanding aerobic and obligate anaerobic microorganisms.
«Двойная среда», регламентированная приказом МЗ СССР №535 от 1985 г., не предназначена для выделения трудно культивируемых микроорганизмов, облигатных анаэробов и микроаэрофилов, так как среда состоит из 2% скошенного агара и полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне (Дагестанский НИИПС, г. Махачкала) с добавлением глюкозы и агара. В среде отсутствуют необходимые питательные вещества, ростовые факторы и она не содержит сердечно-мозгового экстракта. Воздушное пространство над аэробной средой во флаконе и ватно-марлевые пробки обеспечивают рост только аэробных микроорганизмов.The “Double Environment”, regulated by order of the Ministry of Health of the USSR No. 535 of 1985, is not intended to isolate hard-to-cultivate microorganisms, obligate anaerobes and microaerophiles, as the medium consists of 2% mowed agar and semi-liquid medium prepared on nutrient broth (Dagestan NIIPS, Makhachkala) with the addition of glucose and agar. The environment lacks the necessary nutrients, growth factors, and it does not contain cardiac extract. The air space above the aerobic environment in the bottle and cotton-gauze plugs provide the growth of only aerobic microorganisms.
Известно также использование «Питательной среды для микробиологического исследования крови» (патент РФ №2267537, ФГУП «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «МИКРОГЕН» МЗ РФ). Среда состоит из 2-х составляющих: твердая и полужидкая. Твердая среда содержит агар, питательный бульон, панкреатический гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, глюкозу, трис (оксиметил) аминометан. Полужидкая среда содержит питательный бульон, панкреатический гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, глюкозу, трис (оксиметил) аминометан, натрия цитрат или натрия гепаринат, парааминобензойную кислоту, агар. Однако данная среда не обеспечивает максимально питательными веществами рост требовательных микроорганизмов, как, например, сердечно-мозговой экстракт. Воздушное пространство над средой не создает условий для обеспечения роста анаэробных бактерий. В состав среды не входят обязательные для трудно культивируемых аэробных и анаэробных возбудителей в крови ростовые факторы, как гемин, менадион.It is also known the use of "Nutrient medium for microbiological blood tests" (RF patent No. 2267537, Federal State Unitary Enterprise "Scientific and Production Association for Medical Immunobiological Preparations" MICROGEN "of the Ministry of Health of the Russian Federation). The medium consists of 2 components: solid and semi-liquid. The solid medium contains agar, nutrient broth, casein pancreatic hydrolyzate, yeast extract, glucose, tris (oxymethyl) aminomethane. The semi-liquid medium contains a nutrient broth, casein pancreatic hydrolyzate, yeast extract, glucose, tris (hydroxymethyl) aminomethane, sodium citrate or sodium heparin, para-aminobenzoic acid, agar. However, this medium does not provide the maximum nutrients for the growth of demanding microorganisms, such as cardiac extract. The air space above the environment does not create conditions for the growth of anaerobic bacteria. The composition of the medium does not include growth factors, such as hemin, menadione, which are mandatory for difficult to cultivate aerobic and anaerobic pathogens in the blood.
Наиболее близким техническим решением к заявляемому изобретению по совокупности признаков является среда фирмы HiMedia Laboratories (Индия), которую мы взяли в качества прототипа.The closest technical solution to the claimed invention in terms of features is the environment of the company HiMedia Laboratories (India), which we took as a prototype.
Система однофазная для гемокультур (бульон) с сердечно-мозговой вытяжкой для аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (ФСЗ 2009/03708), (HiMedia Laboratories), Индия.Single-phase system for hemocultures (broth) with a cardiac extract for aerobic and facultative anaerobic microorganisms (FSZ 2009/03708), (HiMedia Laboratories), India.
Состав:Structure:
Среда разливается по флаконам в количестве 70 мл во флакон для инокуляции цельной крови от 8 до 10 мл, т.е. соотношение кровь:среда составляет 1:7.The medium is dispensed into vials in an amount of 70 ml per vial for inoculation of whole blood from 8 to 10 ml, i.e. the ratio of blood: medium is 1: 7.
Авторы среды характеризуют данную среду, как однофазная готовая среда на основе сердечно-мозгового настоя для эффективного, быстрого и простого получения гемокультур. Сердечно-мозговой бульон богат питательными веществами и хорошо буферизован, полезен для выращивания самых разнообразных микроорганизмов, предпочтителен при культивировании анаэробных бактерий, дрожжей и плесневых грибов. Протеаза пептон, настой из мозга теленка и говяжьего сердца служат в качестве источников углерода, азота, незаменимых факторов роста, аминокислот и витаминов, декстроза - энергии. Динатрийфосфат оказывает буферное действие, тогда как хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Для инактивации бактерицидных свойств крови и обеспечения роста бактерий в качестве нетоксичного антикоагулянта применяется натрия полианетолсульфонат (SPS).The authors of this medium characterize this medium as a single-phase ready-made medium based on a cardio-cerebral infusion for efficient, quick and easy production of blood cultures. Cardiac broth broth is rich in nutrients and well buffered, useful for growing a wide variety of microorganisms, it is preferable for the cultivation of anaerobic bacteria, yeast and molds. Protease peptone, an infusion from the brain of a calf and beef heart serve as sources of carbon, nitrogen, irreplaceable growth factors, amino acids and vitamins, dextrose - energy. Disodium phosphate has a buffering effect, while sodium chloride maintains the osmotic balance of the medium. To inactivate the bactericidal properties of blood and ensure bacterial growth, sodium polyanethol sulfonate (SPS) is used as a non-toxic anticoagulant.
К достоинству данной среды относится то факт, что среда приготовлена на основе сердечно-мозгового настоя, что способствует росту большинству микроорганизмов, требовательных к питательной среде, включая широкий спектр клинически значимых возбудителей кровотока. Применение антикоагулянта способствует росту микроорганизмов. Панкреатические пептоны (протеозопептон) представляют собой смесь продуктов более глубокого гидролиза - простых полипептидов, пептонов и большого количества свободных аминокислот с высоким содержанием аминного азота (до 1200 мг%).The advantage of this medium is the fact that the medium is prepared on the basis of a cardiac infusion, which contributes to the growth of most microorganisms that require a nutrient medium, including a wide range of clinically significant blood flow pathogens. The use of an anticoagulant promotes the growth of microorganisms. Pancreatic peptones (proteozopeptone) are a mixture of products of deeper hydrolysis - simple polypeptides, peptones and a large number of free amino acids with a high content of amine nitrogen (up to 1200 mg%).
Наряду с этим существуют определенные недостатки у этой среды.Along with this, there are certain disadvantages in this environment.
1. Сердечно-мозговой экстракт составляет 1,75% в среде, что не обеспечивает достаточного полноценного состава питательных веществ для роста высоко требовательных микроорганизмов1. Cardiac extract is 1.75% in the medium, which does not provide a sufficient complete nutrient composition for the growth of highly demanding microorganisms
2. Отсутствует система газозамещения воздуха на инертный газ во флаконе со средой, поэтому среда не пригодна для выделения облигатных (строгих) анаэробных возбудителей из крови и не подходит для адаптационных условий для аэробных и факультативно-анаэробных при переходе из кровеносного русла в искусственную среду, т.е. из условий отсутствия свободного кислорода в условия насыщенного кислородом воздуха. Система дыхания факультативно-анаэробных микроорганизмов, к числу которых относится наибольшее количество клинически значимых микроорганизмов, претерпела изменения за время длительного пребывания в кровотоке и перешла на анаэробный тип дыхания.2. There is no system for gas substitution of air for an inert gas in a vial of medium, therefore the medium is not suitable for the separation of obligate (strict) anaerobic pathogens from the blood and is not suitable for adaptive conditions for aerobic and facultative anaerobic ones when switching from a bloodstream to an artificial environment, t .e. from the conditions of the absence of free oxygen to the conditions of oxygen-saturated air. The respiratory system of facultative anaerobic microorganisms, which include the largest number of clinically significant microorganisms, underwent changes during a long stay in the bloodstream and switched to anaerobic type of respiration.
3. Отсутствуют ингредиенты для поддержания окислительно-восстановительного потенциала среды (Eh). От уровня окислительно-восстановительного потенциала зависит рост как аэробов, так и анаэробов. У аэробов эта зависимость менее заметна, так как уровень этого фактора в питательной среде без замещения воздуха на инертный газ полностью соответствует уровню, необходимому для их роста. Облигатные анаэробы проявляют повышенную чувствительность к окислительно-восстановительному потенциалу в среде и прекращают размножаться при Eh выше - 0,1В. Создание или поддержание Eh среды на заданном уровне представляет собой более сложную задачу, чем регуляция рН.3. There are no ingredients to maintain the redox potential of the medium (Eh). The growth of both aerobes and anaerobes depends on the level of redox potential. In aerobes, this dependence is less noticeable, since the level of this factor in the nutrient medium without replacing air with an inert gas fully corresponds to the level necessary for their growth. Obligatory anaerobes show increased sensitivity to the redox potential in the medium and cease to multiply when Eh is higher - 0.1V. Creating or maintaining an Eh medium at a given level is a more difficult task than regulating the pH.
Для снижения Eh питательной среды используют несколько приемов.To reduce the Eh of the nutrient medium, several methods are used.
1. Вытеснение из среды воздуха кипячением или инертными газами - аргоном, азотом, гелием.1. Displacement of air from the medium by boiling or inert gases - argon, nitrogen, helium.
2. Добавление к среде органических и неорганических восстановителей (редуцирующих веществ). Из органических восстановителей в основном используются цистеин, аскорбиновая кислота, тиогликолят натрия, L-тирозин, глютатион. Из неорганических восстановителей наиболее широкое применение нашли гидросульфит натрия (Na2S2O4), гексацианоферроат калия K4[Fe(CN)6], различные сульфиды.2. Addition to the environment of organic and inorganic reducing agents (reducing substances). Of the organic reducing agents, cysteine, ascorbic acid, sodium thioglycolate, L-tyrosine, and glutathione are mainly used. Of the inorganic reducing agents, sodium hydrosulfite (Na 2 S 2 O 4 ), potassium hexacyanoferroate K 4 [Fe (CN) 6 ], and various sulfides are most widely used.
Отсутствие ингредиентов для поддержания окислительно-восстановительного потенциала не позволяет расти облигатным анаэробным микроорганизмам.The lack of ingredients to maintain the redox potential does not allow the growth of obligate anaerobic microorganisms.
4. Не выдерживается принятое на практике соотношение количества инокулируемой цельной крови к жидкой питательной среде, как 1:10. В прототипе это соотношение составляет 1:7.4. The ratio of the amount of inoculated whole blood to liquid nutrient medium, as 1:10, accepted in practice, is not maintained. In the prototype, this ratio is 1: 7.
Задачей изобретения является разработка жидкой сердечно-мозговой среды, повышающей стабильность и скорость роста бактерий, позволяющей выявлять аэробные, микроаэрофильные и анаэробные микроорганизмы, относящиеся к клинически значимым возбудителям инфекции кровотока, а также способа ее приготовления.The objective of the invention is to develop a liquid cardiovascular environment that increases the stability and growth rate of bacteria, allowing to identify aerobic, microaerophilic and anaerobic microorganisms related to clinically significant pathogens of bloodstream infection, as well as a method for its preparation.
Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в повышении диагностической эффективности получения гемокультуры возбудителя из крови за счет обеспечения высокопитательной среды (сердечно-мозговой экстракт, ростовые факторы), создания анаэробных условий и расширения спектра выделяемых возбудителей (аэробных, микроаэрофильных и анаэробных) из крови. Предлагаемый способ приготовления жидкой питательной среды во флаконах позволяет гарантировать максимальное выделение жизнеспособных микроорганизмов, циркулирующих в кровотоке при патологическом инфекционном состоянии. Получение гемокультуры возбудителя из крови подтверждает диагноз заболевания и обеспечивает назначение целевой антимикробной терапии.The technical result achieved by the implementation of the invention is to increase the diagnostic efficiency of obtaining the blood culture of the pathogen from the blood by providing a highly nutritious environment (cardiac extract, growth factors), creating anaerobic conditions and expanding the spectrum of excreted pathogens (aerobic, microaerophilic and anaerobic) from the blood . The proposed method for the preparation of a liquid nutrient medium in vials allows you to guarantee the maximum allocation of viable microorganisms circulating in the bloodstream with a pathological infectious condition. Obtaining the blood culture of the pathogen from the blood confirms the diagnosis of the disease and ensures the appointment of targeted antimicrobial therapy.
Сущность изобретения заключается в том, что заявляемая среда включает мозговой экстракт крупного рогатого скота, сердечный экстракт крупного рогатого скота, ферментативный гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, натрия хлорид, глюкозу, натрия тиогликолят, L-цистеина гидрохлорид, гемин, менадион, твин-80, агар-агар, дистиллированную воду при следующем соотношении ингредиентов на 1 л среды:The essence of the invention lies in the fact that the claimed medium includes cerebral cattle extract, cardiac cattle extract, casein enzymatic hydrolyzate, yeast extract, sodium chloride, glucose, sodium thioglycolate, L-cysteine hydrochloride, hemin, menadione, tween-80, agar-agar, distilled water in the following ratio of ingredients per 1 liter of medium:
рН 7,4-7,6.pH 7.4-7.6.
Насыщение среды азотом для создания анаэробных условий.Saturation of the medium with nitrogen to create anaerobic conditions.
Среда обогащена инертным газом для создания анаэробных условий и расширения спектра выделяемых возбудителей (аэробных, микроаэрофильных и анаэробных) из крови. Предлагаемая среда проста в изготовлении, стабильна, имеет максимальный набор питательных веществ и пригодна для выделения аэробных, микроаэрофильных и анаэробных возбудителей из крови при диагностике инфекции кровотока. В предлагаемой прописи одновременное использование сердечного и мозгового экстрактов с ферментативным гидролизатом казеина и дрожжевым экстрактом обеспечивает наиболее полное содержание витаминов группы В, соединений азота и углерода, микроэлементов. Питательные среды на основе различных гидролизатов казеина используются в диагностике инфекционных заболеваний.The medium is enriched with an inert gas to create anaerobic conditions and expand the spectrum of excreted pathogens (aerobic, microaerophilic and anaerobic) from the blood. The proposed environment is simple to manufacture, stable, has a maximum set of nutrients and is suitable for the release of aerobic, microaerophilic and anaerobic pathogens from the blood in the diagnosis of blood flow infection. In the proposed recipe, the simultaneous use of cardiac and brain extracts with casein enzymatic hydrolyzate and yeast extract provides the most complete content of B vitamins, nitrogen and carbon compounds, trace elements. Nutrient media based on various casein hydrolysates are used in the diagnosis of infectious diseases.
В качестве источника углерода, азота и других компонентов для многих общеупотребительных и специальных питательных сред используются продукты, получаемые из дрожжей: дрожжевая вода, дрожжевой настой, дрожжевой автолизат, дрожжевой экстракт, кислотные и ферментативные гидролизаты дрожжей. Дрожжи содержат до 53% белка, 25-40% углеводов и являются богатым источником витаминов группы В, витамина Д, и других факторов роста - пуриновых и пиримидиновых оснований. Белок дрожжей сбалансирован по аминокислотному составу и по этому показателю близок к животному белку. Наиболее широко используемым в промышленных масштабах является дрожжевой экстракт. Содержание хлоридов (в пересчете на натрия хлорид) является относительным показателем уровня осмотического давления в среде, соответствия его уровню, необходимому для сохранения жизнедеятельности микроорганизмов. Среда должна быть изотоничной для микробной клетки, т.е. осмотическое давление в среде должно быть таким же, как внутри клетки. Для большинства микроорганизмов оптимальная среда соответствует 0,5% раствору натрия хлорида. L-цистеина гидрохлорид представляет собой аминокислоту и в сочетании с полужидкой средой создает анаэробные условия.Yeast products are used as a source of carbon, nitrogen, and other components for many common and special nutrient media: yeast water, yeast infusion, yeast autolysate, yeast extract, acid and enzymatic hydrolysates of yeast. Yeast contains up to 53% protein, 25-40% carbohydrates and is a rich source of B vitamins, vitamin D, and other growth factors - purine and pyrimidine bases. The yeast protein is balanced in amino acid composition and is close to animal protein in this indicator. The most widely used on an industrial scale is yeast extract. The content of chlorides (in terms of sodium chloride) is a relative indicator of the level of osmotic pressure in the medium, its correspondence to the level necessary to preserve the vital activity of microorganisms. The medium must be isotonic for the microbial cell, i.e. The osmotic pressure in the medium should be the same as inside the cell. For most microorganisms, the optimal environment corresponds to a 0.5% solution of sodium chloride. L-cysteine hydrochloride is an amino acid and, in combination with a semi-liquid medium, creates anaerobic conditions.
Факторы роста или ростовые вещества необходимы для роста и размножения некоторых микроорганизмов, кроме источников углерода, энергии и минеральных элементов. К ним относятся аминокислоты, витамины, пуриновые и пиримидиновые основания. Эти вещества необходимы всем микроорганизмам, однако многие (прототрофы) синтезируют их сами, другие (ауксотрофы) не способны к синтезу одного или нескольких факторов и для обеспечения их роста недостающее соединение должно быть внесено питательную среду. Гемин, менадион, твин-80, тиогликолят натрия являются ростовыми факторами для трудно культивируемых микроорганизмов. Кроме того, тиогликолят натрия снижает окислительно-восстановительный потенциал. Данный редокс-потенциал помогает поддерживать небольшое количество агара в среде.Growth factors or growth substances are necessary for the growth and reproduction of certain microorganisms, except for sources of carbon, energy and mineral elements. These include amino acids, vitamins, purine and pyrimidine bases. These substances are necessary for all microorganisms, however, many (prototrophs) synthesize them themselves, others (auxotrophs) are not capable of synthesizing one or several factors, and a nutrient medium must be introduced to ensure their growth. Gemin, menadione, tween-80, sodium thioglycolate are growth factors for difficult to cultivate microorganisms. In addition, sodium thioglycolate reduces the redox potential. This redox potential helps maintain a small amount of agar in the medium.
Существенные отличия предлагаемого технического решения.Significant differences of the proposed technical solution.
1. Возможность использования предлагаемой среды для ускорения получения гемокультуры при диагностике инфекции в кровотоке.1. The possibility of using the proposed environment to accelerate the production of blood culture in the diagnosis of infection in the bloodstream.
2. Замена дорогостоящей импортной питательной среды более дешевой легкодоступной питательной средой, приготовленной на основе сердечно-мозгового экстракта, что соответствует рецептуре импортных сред.2. Replacing the expensive imported nutrient medium with a cheaper, readily available nutrient medium prepared on the basis of the cardio-cerebral extract, which corresponds to the formulation of the imported medium.
3. Создание анаэробных условий позволит расширить круг выделяемых возбудителей при инфекции в крови.3. Creating anaerobic conditions will expand the range of pathogens released during infection in the blood.
4. Применение различных объемов питательной среды дает более широкую возможность использовать ее для детей и взрослых.4. The use of various volumes of the nutrient medium provides a wider opportunity to use it for children and adults.
5. Разные соотношения инокулируемой крови к питательной среде (от 1:10 до 1:20) способствуют повышению эффективности диагностики инфекции кровотока.5. Different ratios of inoculated blood to the nutrient medium (from 1:10 to 1:20) increase the efficiency of the diagnosis of blood flow infection.
В результате этого достигаетсяAs a result of this,
1) увеличение спектра выделяемых микроорганизмов за счет стабильности и скорости роста различных бактерий и грибов;1) an increase in the spectrum of allocated microorganisms due to the stability and growth rate of various bacteria and fungi;
2) удешевление питательной среды без потери ее питательной ценности.2) the reduction of the nutrient medium without losing its nutritional value.
Способ приготовления заявляемой питательной среды во флаконах включаетA method of preparing the claimed nutrient medium in vials includes
1) получение сердечно-мозгового экстракта;1) obtaining a cardiac cerebral extract;
2) получение 1% раствора гемина;2) obtaining 1% hemin solution;
3) получение 1% раствора менадиона;3) obtaining a 1% solution of menadione;
4) добавление питательных веществ с целью улучшения ростовых свойств среды и разлив питательной среды по флаконам4) the addition of nutrients in order to improve the growth properties of the medium and the spill of the nutrient medium into bottles
5) насыщение среды во флаконах инертным газом (азотом) для создания анаэробных условий, способствующих выделению анаэробных микроорганизмов и адаптации аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.5) saturation of the medium in vials with an inert gas (nitrogen) to create anaerobic conditions that promote the release of anaerobic microorganisms and the adaptation of aerobic and facultative anaerobic microorganisms.
1. Приготовление сердечно-мозгового экстракта1. Preparation of cardiac extract
Первый день.First day.
Сердце и мозги крупного рогатого скота очистить от пленок, сосудов, оболочек, жира. Измельчить при помощи мясорубки. Залить одинарным количеством водопроводной воды (на 1 кг ткани - 1 л воды). Оставить на ночь в холодильнике при t +4°С. Сердце и мозги обрабатывают и готовят экстракты отдельно.To clean the heart and brains of cattle from films, blood vessels, membranes, fat. Grind with a meat grinder. Pour with a single amount of tap water (per 1 kg of fabric - 1 liter of water). Leave overnight in the refrigerator at t + 4 ° С. The heart and brain process and prepare extracts separately.
Второй день:Second day:
Настой при помешивании довести до кипения и кипятить 5-10 минут. Горячие экстракты профильтровать вначале через 3 слоя марли и затем через ватно-марлевый фильтр. Разлить по флаконам емкостью: мозговой экстракт по 100 мл и сердечный по 150 мл. Закрыть резиновыми пробками и завальцевать металлическими колпачками. Автоклавировать 15 минут при 0,7 атмосфере. Готовые экстракты хранят при условии холодильника при t +4°C.When stirring, bring the infusion to a boil and boil for 5-10 minutes. Filter the hot extracts first through 3 layers of gauze and then through a cotton-gauze filter. Pour into vials with a capacity of: cerebral extract of 100 ml and cardiac extract of 150 ml. Close with rubber stoppers and roll with metal caps. Autoclave for 15 minutes at 0.7 atmosphere. Ready extracts are stored under refrigeration at t + 4 ° C.
2. Приготовление 1% раствора гемина2. Preparation of 1% hemin solution
1 грамм гемина растворяют в 10,0 мл 1N раствора едкого натрия и доводят дистиллированной водой до объема 100 мл. Хранят при t 4°C. Стерилизуют автоклавированием при 1 атм. в течение 15 минут.1 gram of hemin is dissolved in 10.0 ml of a 1N sodium hydroxide solution and adjusted to 100 ml with distilled water. Store at t 4 ° C. Sterilized by autoclaving at 1 atm. for 15 minutes.
3. Приготовление 1% раствора менадиона3. Preparation of 1% Menadione Solution
1 грамм менадиона растворяют в 100 мл 96% этилового спирта. Хранят в темном флаконе с притертой пробкой при t 4°C.1 gram of menadione is dissolved in 100 ml of 96% ethanol. Store in a dark bottle with a ground stopper at t 4 ° C.
4. Сухие ингредиенты (ферментативный гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, хлорид натрия, глюкоза, тиогликолят натрия, L-цистеина гидрохлорид, агар-агар) растворить в дистиллированной воде, довести до кипения и кипятить 2-3 минуты. Затем добавить стерильные мозговой и сердечный экстракты, раствор гемина и менадиона. Довести pH до 7,4-7,6 раствором 8N NaOH. Разлить по 50,0 мл по флаконам, закрыть резиновыми пробками.4. Dry ingredients (casein enzymatic hydrolyzate, yeast extract, sodium chloride, glucose, sodium thioglycolate, L-cysteine hydrochloride, agar-agar) dissolve in distilled water, bring to a boil and boil for 2-3 minutes. Then add sterile brain and cardiac extracts, a solution of hemin and menadione. Bring the pH to 7.4-7.6 with a solution of 8N NaOH. Pour 50.0 ml into vials, seal with rubber stoppers.
5. Заместить воздух во флаконах азотом, используя шланг с длинной широкого диаметра иглой, накрыть металлическими колпачками и завальцевать. Автоклавировать при 1 атмосфере в течение 15-20 минут. Хранить при t +4°C.5. Replace the air in the bottles with nitrogen, using a hose with a long wide diameter needle, cover with metal caps and roll. Autoclave at 1 atmosphere for 15-20 minutes. Store at t + 4 ° C.
Осуществление изобретения представлено на следующих примерах.The implementation of the invention is presented in the following examples.
Пример 1.Example 1
Сухие ингредиенты: ферментативный гидролизат казеина 15 г, дрожжевой экстракт 5 г, натрия хлорид 2,5 г, глюкоза 5 г, тиогликолят натрия 0,5 г, L-цистеина гидрохлорид 0,75 г, агар-агар 0,75 г растворяют в 750 мл дистиллированной воды, доводят до кипения и кипятят 2-3 минуты. Затем добавляют стерильные растворы: мозговой экстракт крупного рогатого скота 100 мл, сердечный экстракт крупного рогатого скота 150 мл, 1% раствор гемина 1,0 мл, 1% раствор менадиона 1,0 мл, твин-80 1,0 мл. Доводят pH до 7,4-7,6 раствором 8N NaOH. Разливают разные объемы среды (50,0 мл, 100,0 мл и 200,0 мл) по флаконам разной вместимости (50 мл, 150 мл и 250 мл, соответственно). Закрывают флаконы резиновой пробкой. Замещают воздух во флаконах азотом в течение 20 секунд при помощи изогнутой иглы, соединенной со шлангом от газового баллона. Накрывают резиновую пробку алюминиевым колпачком и завальцовывают ручным способом при помощи приспособления ПОК-3, или машинным способом при помощи «Закаточного полуавтомата ПЭР-М". Стерилизуют автоклавированием при 1 атмосфере в течение 15-20 минут. Хранят в условиях холодильника при t 4°C в течение 3-4 месяцев.Dry ingredients: casein enzymatic hydrolyzate 15 g, yeast extract 5 g, sodium chloride 2.5 g, glucose 5 g, sodium thioglycolate 0.5 g, L-cysteine hydrochloride 0.75 g, agar-agar 0.75 g dissolved in 750 ml of distilled water, bring to a boil and boil for 2-3 minutes. Sterile solutions are then added: cerebral cattle extract 100 ml, cardiac cattle extract 150 ml, 1% hemin solution 1.0 ml, 1% menadione solution 1.0 ml, tween-80 1.0 ml. The pH was adjusted to 7.4-7.6 with a solution of 8N NaOH. Different volumes of medium (50.0 ml, 100.0 ml and 200.0 ml) are poured into bottles of different capacities (50 ml, 150 ml and 250 ml, respectively). Close the bottles with a rubber stopper. Replace the air in the bottles with nitrogen for 20 seconds using a curved needle connected to the hose from the gas cylinder. Cover the rubber stopper with an aluminum cap and roll it manually using the POK-3 tool, or machine using the PER-M Semi-Automatic Seaming Machine. Autoclave it at 1 atmosphere for 15-20 minutes. Store in a refrigerator at t 4 ° C within 3-4 months.
Приспособление ПОК-3 для обжима колпачков К-3. Приспособление предназначено для ручного обжима алюминиевых колпачков типа К-3 при укупорке стеклянных флаконов. Производитель: ООО-Медиформ.The POK-3 device for crimping K-3 caps. The device is intended for manual crimping of aluminum caps of type K-3 when corking glass bottles. Manufacturer: LLC-Mediform.
Полуавтомат закаточный ПЭР-М предназначен для укупоривания любого типа флаконов с гладким или винтовым горлом емкостью от 10 до 500 мл алюминиевыми колпачками К-1, К-2, К-3, К-4, К-5 для аптечного и фармацевтического производства. Относится к медицинскому оборудованию. По ОКП ОК 005-93 присвоен код 945240 "Оборудование лабораторное и аптечное" и соответствует требованиям GMP к фармацевтическому оборудованию. Производитель: ООО-ВИПС-мед фирма.Semi-automatic filling machine PER-M is designed for capping any type of bottle with a smooth or screw neck with a capacity of 10 to 500 ml with aluminum caps K-1, K-2, K-3, K-4, K-5 for pharmacy and pharmaceutical production. Refers to medical equipment. According to OKP OK 005-93, code 945240 "Laboratory and pharmacy equipment" is assigned and complies with GMP requirements for pharmaceutical equipment. Producer: LLC-VIPS-honey firm.
Контроль качества средыEnvironmental Quality Control
Готовая среда имеет темно-соломенную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. Кислотность среды: при t 25°С водный раствор среды (3,4% вес/объем) имеет рН 7,4±0,2The finished medium has a dark straw color, is transparent or slightly opalescent. Acidity of the medium: at t 25 ° C, an aqueous solution of the medium (3.4% w / v) has a pH of 7.4 ± 0.2
Культуральные свойстваCultural properties
Пример 2.Example 2
Были сопоставлены результаты выделения микроорганизмов из крови при инокуляции крови в две различные среды.The results of the isolation of microorganisms from the blood were compared by blood inoculation in two different environments.
Среда №1 - «Двойная среда», регламентированная Приказом №535 от 1985 года. Объем питательной среды во флаконе - 100,0 мл. Объем инокулируемой крови - 10,0 мл. Соотношение кровь:среда 1:10.Wednesday No. 1 - “Double Wednesday”, regulated by Order No. 535 of 1985. The volume of culture medium in the bottle is 100.0 ml. The volume of inoculated blood is 10.0 ml. The ratio of blood: Wednesday 1:10.
Среда №2 - Заявленная среда. Объем питательной среды во флаконе -100,0 мл. Объем инокулируемой крови - 10,0 мл. Соотношение кровь:среда 1:10.Wednesday No. 2 - Announced Wednesday. The volume of culture medium in the bottle is 100.0 ml. The volume of inoculated blood is 10.0 ml. The ratio of blood: Wednesday 1:10.
Исследование проводилось на пробах крови терапевтических пациентов кардиологического профиля с диагнозами: инфекционный эндокардит, ревматизм, врожденный порок сердца, ишемическая болезнь сердца и лихорадочное состояние. Пробы крови забирались при венопункции с соблюдением правил асептики.The study was conducted on blood samples of therapeutic patients with a cardiological profile with diagnoses: infective endocarditis, rheumatism, congenital heart disease, coronary heart disease and fever. Blood samples were taken during venipuncture in compliance with asepsis rules.
Среда №1 была разлита по флаконам и закрыта ватно-марлевыми пробками. Среда, приготовленная таким способом, потенциально обеспечивает рост только аэробных и минимального количества микроаэрофильных микроорганизмов.Wednesday No. 1 was bottled and covered with cotton-gauze plugs. The medium prepared in this way potentially ensures the growth of only aerobic and minimal microaerophilic microorganisms.
Среда №2 была также разлита по флаконам, насыщена азотом, закрыта резиновой пробкой и завальцована алюминиевым колпачком. Данная среда способна была обеспечить рост аэробных, микроаэрофильных и анаэробных микроорганизмов в полном объеме.Medium No. 2 was also bottled, saturated with nitrogen, covered with a rubber stopper, and rolled with an aluminum cap. This environment was able to ensure the growth of aerobic, microaerophilic and anaerobic microorganisms in full.
Всего было исследовано 260 проб крови.A total of 260 blood samples were examined.
При посеве на среду №1 получено 35 гемокультур, что составило 13,5% случаев лабораторной эффективности. На среде №2 получили 106 гемокультур, что составило 40,6% случаев эффективности выделения возбудителя из крови, что в 3 раза превышает показания эффективности среды №1. Необходимо отметить, что аэробные и микроаэрофильные микроорганизмы в большинстве случаев были получены при культивировании в анаэробных условиях (56,3% и 47,2%, соответственно). Анаэробные условия культивирования крови значительно повысили диагностическую эффективность при исследовании крови.When sowing on Wednesday No. 1 received 35 blood cultures, which amounted to 13.5% of cases of laboratory effectiveness. On Wednesday, No. 2 received 106 blood cultures, which accounted for 40.6% of cases of the efficiency of isolation of the pathogen from the blood, which is 3 times higher than the readings of the effectiveness of the medium No. 1. It should be noted that aerobic and microaerophilic microorganisms in most cases were obtained during cultivation under anaerobic conditions (56.3% and 47.2%, respectively). Anaerobic blood culture conditions significantly improved diagnostic efficacy in blood tests.
Разработанная нами жидкая сердечно-мозговая среда является оптимальной средой для микробиологического исследования крови при инфекции в кровотоке, так как она способна обеспечить рост аэробных, микроаэрофильных и анаэробных возбудителей, включая высоко требовательные к питанию микроорганизмы. Объем среды во флаконе в количестве 50,0 мл является минимальным, так как рассчитан на посев 5,0 мл цельной крови для соблюдения оптимального соотношения крови к среде как 1:10. Минимальный объем пробы крови (5,0 мл), взятый у больного, относится к щадящей технике взятия пробы крови для исследования.The developed liquid cardio-cerebral environment is the optimal medium for microbiological examination of blood during infection in the bloodstream, as it is able to ensure the growth of aerobic, microaerophilic and anaerobic pathogens, including highly nutritionally demanding microorganisms. The volume of medium in the bottle in the amount of 50.0 ml is minimal, as it is designed for sowing 5.0 ml of whole blood to maintain the optimal ratio of blood to medium as 1:10. The minimum volume of a blood sample (5.0 ml) taken from a patient refers to a gentle technique for taking a blood sample for research.
Пример 3.Example 3
Мы сравнили результаты выделения микроорганизмов из крови при инокуляции исследуемых образцов крови в две различные среды: прототип и заявляемая.We compared the results of the isolation of microorganisms from the blood upon inoculation of the studied blood samples in two different environments: prototype and claimed.
Среда №1 - прототип. Система однофазная для гемокультур (бульон) с сердечно-мозговой вытяжкой для аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (ФСЗ 2009/03708), (HiMedia Laboratories), Индия. Объем питательной среды во флаконе - 70 мл. Объем инокулированной крови - 10 мл. Соотношение кровь:среда 1:7.Wednesday No. 1 is a prototype. Single-phase system for hemocultures (broth) with a cardiac extract for aerobic and facultative anaerobic microorganisms (FSZ 2009/03708), (HiMedia Laboratories), India. The volume of culture medium in the bottle is 70 ml. The volume of inoculated blood is 10 ml. The ratio of blood: medium 1: 7.
Среда №2 - «Жидкая сердечно-мозговая среда» нашего приготовления. Объем питательной среды во флаконе - 100,0 мл. Объем инокулируемой крови - 10,0 мл. Соотношение кровь:среда 1:10.Wednesday No. 2 - “Liquid cardio-cerebral environment” of our preparation. The volume of culture medium in the bottle is 100.0 ml. The volume of inoculated blood is 10.0 ml. The ratio of blood: Wednesday 1:10.
Для исследования отбирали кровь терапевтических больных кардиологического профиля с разными кардиологическими заболеваниями: инфекционный эндокардит, ревматизм и лихорадочное состояние.For the study, blood was collected from therapeutic patients with a cardiological profile with various cardiac diseases: infectious endocarditis, rheumatism and fever.
Среда №1 - разлита по флаконам, закрыта герметично резиновыми пробками и завальцована колпачком. Данная среда предназначена для выращивания аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов и не предусматривает рост строгих анаэробов в виду отсутствия газозамещения для создания анаэробных газовых условий.Wednesday No. 1 - poured into bottles, sealed with rubber stoppers and sealed with a cap. This medium is intended for the cultivation of aerobic and facultative anaerobic microorganisms and does not provide for the growth of strict anaerobes due to the lack of gas substitution for creating anaerobic gas conditions.
Среда №2 - также разлита по флаконам, герметично закрыта резиновой пробкой и завальцована колпачком, но предварительно было проведено газозамещение для насыщения среды и пространства над средой азотом для обеспечения роста аэробных, факультативно-анаэробных, микроаэрофильных и строгих анаэробных микроорганизмов.Medium No. 2 is also filled into bottles, hermetically sealed with a rubber stopper and sealed with a cap, but gas was previously replaced to saturate the medium and the space above the medium with nitrogen to ensure the growth of aerobic, facultative anaerobic, microaerophilic and strict anaerobic microorganisms.
Всего было параллельно исследовано 150 проб крови.A total of 150 blood samples were examined in parallel.
При культивировании крови на среде №1 было получено 47 штаммов микроорганизмов, что составило 31,3% диагностической эффективности. Одновременно при посеве на среду №2 было выделено 82 штамма микроорганизмов, что соответствовало 54,7% диагностики инфекции в крови. Лабораторная эффективность общего выделения микроорганизмов из крови среды №2 превысила результаты на среде прототипа в 1,7 раза.When blood was cultured on medium No. 1, 47 strains of microorganisms were obtained, which amounted to 31.3% of diagnostic efficiency. At the same time, when sowing on Wednesday No. 2, 82 strains of microorganisms were isolated, which corresponded to 54.7% of the diagnosis of infection in the blood. The laboratory efficiency of the total isolation of microorganisms from the blood of medium No. 2 exceeded the results on the medium of the prototype 1.7 times.
Отмечается повышенная эффективность по выделению аэробных (в 1,4 раза) и микроаэрофильных (в 2,1 раза) микроорганизмов на среде №2 по отношению к среде №1. Строгие анаэробы были получены только на среде №2. Дополнительно была повышена эффективность на 9,8% случаев.There is an increased efficiency in the isolation of aerobic (1.4 times) and microaerophilic (2.1 times) microorganisms in medium No. 2 in relation to medium No. 1. Strict anaerobes were obtained only on medium No. 2. Additionally, efficiency was increased by 9.8% of cases.
ЛитератураLiterature
1. Приказ МЗ СССР №535 от 22.04.1985 г. приложение 1 к приказу «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений, Москва, стр. 5-10.1. Order of the Ministry of Health of the USSR No. 535 of 04/22/1985 Appendix 1 to the order “On the unification of microbiological (bacteriological) research methods used in clinical diagnostic laboratories of medical institutions, Moscow, p. 5-10.
2. Bouza Е., Perez-Molina J., Munoz P. Report of ESGNI-001 and ESGNI-002 studies. Bloodstream infections in Europe. Clin. Microbiol. Infect, 1999, 5, 2S1-2S12.2. Bouza E., Perez-Molina J., Munoz P. Report of ESGNI-001 and ESGNI-002 studies. Bloodstream infections in Europe. Clin. Microbiol. Infect, 1999, 5, 2S1-2S12.
3. Washington JA., 2nd Blood cultures: Principles and techniques. Mayo Clin Proc. 1975; 50:91-8.3. Washington JA., 2nd Blood cultures: Principles and techniques. Mayo Clin Proc. 1975; 50: 91-8.
4. D. Elantamilan, Valarie Wihiwot Lyngdoh, Annie B. Khyriem, Jyotismita Rajbongshi, Ishani Bora, Surbala Thingujam Devi, Prithwis Bhattacharyya, and Himesh Barman Comparative evaluation of the role of single and multiple blood specimens in the outcome of blood cultures using BacT/ALERT 3D (automated) blood culture system in a tertiary care hospital, Indian J. Crit. Care. Med., 2016, 20 (9), 530-533.4. D. Elantamilan, Valarie Wihiwot Lyngdoh, Annie B. Khyriem, Jyotismita Rajbongshi, Ishani Bora, Surbala Thingujam Devi, Prithwis Bhattacharyya, and Himesh Barman Comparative evaluation of the role of single and multiple blood specimens in the outcome of blood cultures using Bac / ALERT 3D (automated) blood culture system in a tertiary care hospital, Indian J. Crit. Care Med., 2016, 20 (9), 530-533.
5. Lee D.H., Kim S.C., Bae I.G., Koh, E.H., Kim. S. Клиническая оценка флаконов ВасТ/ALERT FA Plus и FN Plus в сравнении со стандартными флаконами, J. of Clinic. Microb., 2013, 51 (12), 4150-4155.5. Lee D.H., Kim S.C., Bae I.G., Koh, E.H., Kim. S. Clinical evaluation of VasT / ALERT FA Plus and FN Plus vials versus standard vials, J. of Clinic. Microb., 2013, 51 (12), 4150-4155.
6. Багирова Н.С. Диагностика бактериемии, Consilium Medicum, 2002, т. 4 (1).6. Bagirova N.S. Diagnosis of bacteremia, Consilium Medicum, 2002, v. 4 (1).
7. Cockerill F.R., Wilson J.W., Vetter T.A., Optimal testing parameters for blood cultures, Clin. Infec. Dis., vol.38, 12, p. 1724-30.7. Cockerill F.R., Wilson J.W., Vetter T.A., Optimal testing parameters for blood cultures, Clin. Infec Dis., Vol. 38, 12, p. 1724-30.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017104519A RU2650863C1 (en) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017104519A RU2650863C1 (en) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2650863C1 true RU2650863C1 (en) | 2018-04-17 |
Family
ID=61976657
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017104519A RU2650863C1 (en) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2650863C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2175671C1 (en) * | 2000-08-07 | 2001-11-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Nutrient medium for isolation of hemoculture in diagnosis of typhoid fever and paratyphoid fever |
| RU2265654C2 (en) * | 2003-06-26 | 2005-12-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген"", Министерства эдравоохранения Российской Федерации | Nutrient medium for isolation of hemoculture |
| RU2267537C2 (en) * | 2003-12-23 | 2006-01-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Broth for microbiological blood examination |
-
2017
- 2017-02-13 RU RU2017104519A patent/RU2650863C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2175671C1 (en) * | 2000-08-07 | 2001-11-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Nutrient medium for isolation of hemoculture in diagnosis of typhoid fever and paratyphoid fever |
| RU2265654C2 (en) * | 2003-06-26 | 2005-12-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген"", Министерства эдравоохранения Российской Федерации | Nutrient medium for isolation of hemoculture |
| RU2267537C2 (en) * | 2003-12-23 | 2006-01-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Broth for microbiological blood examination |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Под ред. Лабинской А.С., Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований, 2005, М., Медицина, с. 486-488. * |
| ШЕПЕЛИН А.П., Современное состояние и тенденции в разработке, производстве и применении питательных сред, Бактериология, 2016, Т.1, N 1, стр. 42-47. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Duthie | The production of penicillinase by organisms of the subtilis group | |
| WHO Expert Committee on Biological Standardization et al. | WHO Expert Committee on Biological Standardization [meeting held in Geneva from 30 September to 5 October 1963]: sixteenth report | |
| Gutierrez et al. | Interrelationship between certain bacteria and the rumen ciliate Dasytricha ruminantium | |
| CN106868094A (en) | The method for quick of antibiotic residue in a kind of raw milk | |
| RU2650863C1 (en) | Cardiovascular nutritive medium for diagnosis of infection in blood circular and method of its obtaining | |
| CN101177668A (en) | Novel neisseria gonorrhoeae culture medium and method for making same | |
| Rees et al. | Some immunologic aspects of leprosy | |
| CN109395099B (en) | Method for improving stability of tuberculin BCG-PPD skin test diagnostic reagent | |
| RU2549434C2 (en) | Method for making brucellosis diagnostic serum | |
| Adler et al. | Effect of dextrose in medium for the preparation of Mycoplasma gallisepticum plate antigens | |
| RU2455351C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of diphtheria bacteria | |
| CN112680499B (en) | In-vitro detection kit for anaerobic microorganisms | |
| RU2660708C1 (en) | Method for obtaining nutrient medium for isolation of blood culture in the diagnosis of a bloodstream infection | |
| Lortholary et al. | Corynebacterium diphtheriae endocarditis in France | |
| RU2361610C1 (en) | Way of reception of brucellous antigen from strain brucella abortus 19 for manufacturing of uniform brucellous antigen for aa (agglutination assay), cfr (complement fixation reaction) and lcfr (long-term complement fixation reaction), brucellous antigen for rose bengal assay (rba) and brucellous antigen for ring test (rt) with milk, way of manufacturing of brucellous diagnostic serum and diagnostic sets | |
| RU2388489C1 (en) | Method for preparing vaccine associated against pseudomonosis and enterococcus infection of nutrias | |
| Al-Rawazq et al. | Bacterial Isolates in Blood Culture of Children with Septicemia. | |
| CN106148179A (en) | Staphylococcus drug sensitive batten and preparation method thereof | |
| RU2580227C1 (en) | Medium for isolation of legionella pneumophila | |
| RU2738858C1 (en) | Method of extracting uncultivated forms of staphylococci | |
| RU2732222C1 (en) | Diagnostic method for bacteremia | |
| RU2820305C1 (en) | Staphylococcus aureus bacteria strain "sau-21l" for production of biopreparations for specific prevention of cow mastitis | |
| Scherp et al. | The growth of Neisseria meningitidis in simple chemically defined media | |
| CN101857893B (en) | Method and kit for synchronously cultivating bacterium group | |
| RU2550256C1 (en) | Method of production of nutrient medium for cultivation of lactobacilli |