RU2650782C1 - Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing - Google Patents

Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing Download PDF

Info

Publication number
RU2650782C1
RU2650782C1 RU2017110104A RU2017110104A RU2650782C1 RU 2650782 C1 RU2650782 C1 RU 2650782C1 RU 2017110104 A RU2017110104 A RU 2017110104A RU 2017110104 A RU2017110104 A RU 2017110104A RU 2650782 C1 RU2650782 C1 RU 2650782C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
enterococcus hirae
probiotic products
strain
wastes
component
Prior art date
Application number
RU2017110104A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Юлия Владимировна Соловьева
Original Assignee
Юлия Владимировна Соловьева
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юлия Владимировна Соловьева filed Critical Юлия Владимировна Соловьева
Priority to RU2017110104A priority Critical patent/RU2650782C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2650782C1 publication Critical patent/RU2650782C1/en

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/127Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: invention relates to biotechnology. Strain Enterococcus hirae F-ph (37), which has antagonistic activity with respect to the opportunistic and pathogenic microflora, deposited in the Russian National Collection of Industrial Microorganisms under the registration number VKPM B-12672. Strain Enterococcus hirae VKPM B-12672 can be used in the production of probiotic products.
EFFECT: invention allows to expand the assortment of starter cultures to produce probiotic products.
1 cl, 1 dwg, 1 ex

Description

Изобретение относится к биотехнологии, в частности может быть использовано в пищевой промышленности.The invention relates to biotechnology, in particular, can be used in the food industry.

Известен штамм Enterococcus hirae ВКПМ В-10088 (патент №2476591 от 27.02.2013 г.), полученный на доступных питательных средах и применяемый в качестве бактериальной закваски при приготовлении молочнокислых продуктов, характеризуемый высокой скоростью сквашивания молока.Known strain Enterococcus hirae VKPM B-10088 (patent No. 2476591 dated 02.27.2013), obtained on accessible nutrient media and used as bacterial starter culture in the preparation of lactic acid products, characterized by a high rate of milk fermentation.

Однако данный штамм обладает более низкой антагонистической активностью по сравнению с предлагаемым штаммом.However, this strain has a lower antagonistic activity compared to the proposed strain.

Техническое решение - выделение высокопродуктивного нового местного штамма лактобактерий путем селекции.The technical solution is the selection of a highly productive new local strain of lactobacilli by selection.

Технический результат - получение чистой культуры молочнокислого микроорганизма Enterococcus hirae, обладающего высокими технологическими и антагонистическими свойствами.EFFECT: obtaining a pure culture of the lactic acid microorganism Enterococcus hirae, which has high technological and antagonistic properties.

Для достижения данной цели использован штамм лактобактерий Enterococcus hirae ВКПМ В-12672, выделенный с поверхности травы клевера лугового, произрастающего в высокогорье над селением Фиагдон в РСО-Алания, путем многократных перевивок на питательных средах.To achieve this goal, we used a strain of lactobacilli Enterococcus hirae VKPM B-12672, isolated from the grass surface of clover meadow, growing in the highlands above the village of Fiagdon in North Ossetia-Alania, by repeated inoculations on nutrient media.

Идентификацию штамма проводили по методике Банниковой Л.А. и методом ПНР-диагностики.The identification of the strain was carried out according to the method of Bannikova L.A. and the method of PNR diagnostics.

Этапы и результаты генетических исследований:Stages and results of genetic research:

а. Секвенирование участков последовательности, кодирующей ген 16S рРНК.but. Sequencing portions of the sequence encoding the 16S rRNA gene.

б. Анализ последовательностей гена, кодирующего 16S рРНК, построение деревьев родства.b. Sequence analysis of the gene encoding 16S rRNA, the construction of trees of kinship.

Первичный скрининг по базе данных GenBank и RDP-II показал, что исследуемый штамм принадлежит к следующим систематическим группам: Bacteria; Firmicutes; Bacilli; Lactobacillales; Enterococcaceae; Enterococcus.Initial screening using the GenBank and RDP-II database showed that the studied strain belongs to the following systematic groups: Bacteria; Firmicutes Bacilli; Lactobacillales; Enterococcaceae; Enterococcus.

По данным анализа было построено филогенетическое дерево с гомологичными штаммами (фиг. 1).According to the analysis, a phylogenetic tree with homologous strains was constructed (Fig. 1).

Краткое описание чертежейBrief Description of the Drawings

На Фиг. 1 представлено филогенетическое дерево для тестируемого штамма Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 с гомологичными штаммами близкородственных бактерий.In FIG. 1 shows a phylogenetic tree for the test strain Enterococcus hirae VKPM B-12672 with homologous strains of closely related bacteria.

Figure 00000001
Figure 00000001

По результатам проведенного анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, и анализа филогенетического родства, построенного с использованием типовых штаммов близкородственных бактерий, тестируемый штамм наиболее близок к виду Enterococcus hirae (99%) и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ГосНИИГенетика под номером В-12672.According to the results of the analysis of sequencing of variable regions of genes encoding 16S rRNA and analysis of phylogenetic kinship constructed using typical strains of closely related bacteria, the test strain is closest to Enterococcus hirae (99%) and deposited at the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM) of the State Research Institute of Genetics and Genetics number B-12672.

Свойства штамма Enterococcus hirae ВКПМ В-12672:Properties of the strain Enterococcus hirae VKPM B-12672:

- факультативный анаэроб;- optional anaerobic;

- грамположительные неподвижные кокки, расположенные попарно и короткими цепочками;- gram-positive motionless cocci located in pairs and in short chains;

- эндоспоры не образуются;- endospores are not formed;

- на поверхности агаризованного гидролизата молока и MRS-arapa через 24 часа при температуре 37°C образуют точечные колонии;- point colonies form on the surface of the agarized milk hydrolyzate and MRS-arapa after 24 hours at a temperature of 37 ° C;

- скорость сквашивания молока - 7-8 часов;- milk fermentation rate - 7-8 hours;

- предел кислотообразования - 95°Т;- the limit of acid formation is 95 ° T;

- продукты, синтезируемые штаммом, - молочная кислота и антибиотические вещества;- products synthesized by the strain, - lactic acid and antibiotic substances;

- диаметр зоны подавления роста Staphylococcus aureus - 27 мм;- the diameter of the zone of inhibition of growth of Staphylococcus aureus - 27 mm;

- диаметр зоны подавления роста Escherichia coli - 29 мм.- the diameter of the zone of inhibition of growth of Escherichia coli is 29 mm.

Определение антибиотической активности штамма Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар.The antibiotic activity of the Enterococcus hirae strain VKPM B-12672 was determined on a solid nutrient medium (MPA) by agar diffusion.

Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма - лиофилизация; хранение при температуре 4-6°C; питательные среды: MRS; Rogosa et al.; молоко с мелом; молоко с дрожжевым автолизатом, глюкозой, лакмусом, печеночным экстрактом и СаСО3.The method, conditions and composition of the media for long-term storage of the strain - lyophilization; storage at a temperature of 4-6 ° C; culture media: MRS; Rogosa et al .; milk with chalk; milk with yeast autolysate, glucose, litmus, liver extract and CaCO 3 .

Способ, условия и состав сред для размножения штамма - при температуре 37°C - среды: MRS агар; обезжиренное молоко, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара.The method, conditions and composition of the media for the propagation of the strain - at a temperature of 37 ° C - environment: MRS agar; skim milk, unsalted cheese whey with a content of at least 4.0% sugar.

Оптимальные условия и состав среды для ферментации - температура 37°С; среды: MRS, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара; молоко сельскохозяйственных животных.Optimum conditions and composition of the medium for fermentation - temperature 37 ° C; Wednesday: MRS, unsalted cheese whey with a content of at least 4.0% sugar; milk of farm animals.

Предлагаемый новый штамм Enterococcus hirae ВКПМ В-12672, выделенный с поверхности клевера лугового, произрастающего в высокогорье над селением Фиагдон в РСО-Алания, хорошо приспособлен к местным условиям. Неприхотлив в культивировании и хранении, обладает низкой предельной кислотностью и высокой скоростью свертывания молока, что позволяет повысить экономическую эффективность при производстве (за счет ускорения свертывания молока и увеличения сроков хранения готовых кисломолочных продуктов).The proposed new strain Enterococcus hirae VKPM B-12672, isolated from the surface of clover meadow, growing in the highlands above the village of Fiagdon in North Ossetia-Alania, is well adapted to local conditions. It is unpretentious in cultivation and storage, has a low marginal acidity and a high speed of milk coagulation, which allows to increase economic efficiency in production (by accelerating milk coagulation and increasing the shelf life of finished fermented milk products).

Штамм проявляет высокую антагонистическую способность по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре.The strain exhibits a high antagonistic ability in relation to opportunistic and pathogenic microflora.

Предлагаемый новый штамм лактобактерий Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 обладает высокой биологической активностью и является основой для получения пробиотической закваски.The proposed new strain of lactobacilli Enterococcus hirae VKPM B-12672 has a high biological activity and is the basis for obtaining probiotic yeast.

Пример 1. Использование штамма Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 и Lactobacillus gallinarum ВКПМ-В 10131 при производстве пробиотического кисломолочного напиткаExample 1. The use of the strain Enterococcus hirae VKPM B-12672 and Lactobacillus gallinarum VKPM-B 10131 in the production of probiotic fermented milk drink

В пастеризованное молоко, охлажденное до 35°С, вносят комбинированную закваску, состоящую из Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 и Lactobacillus gallinarum ВКПМ-В 10131 (1:1). Общий объем вносимой закваски составляет 5% от объемов заквашиваемого молока.A combination starter consisting of Enterococcus hirae VKPM B-12672 and Lactobacillus gallinarum VKPM-B 10131 (1: 1) is added to pasteurized milk cooled to 35 ° C. The total amount of fermentation made up 5% of the volumes of fermented milk.

Сквашенное молоко выдерживают в термостате при 37°С до образования однородного плотного сгустка. Далее продукт охлаждают до 2±4°С и разливают в тару. Рекомендуемый срок хранения готового напитка не более 14 суток при температуре от 2 до 6°С. Готовый напиток обладает приятным вкусом и слегка тягучей консистенцией питьевого йогурта.Fermented milk is kept in a thermostat at 37 ° C until a uniform dense clot forms. Then the product is cooled to 2 ± 4 ° C and poured into a container. The recommended shelf life of the finished drink is not more than 14 days at a temperature of 2 to 6 ° C. The finished drink has a pleasant taste and slightly viscous consistency of drinking yogurt.

Claims (1)

Штамм лактобактерий Enterococcus hirae ВКПМ В-12672 - продуцент молочной кислоты и компонент закваски для производства пробиотических продуктов.The lactobacillus strain Enterococcus hirae VKPM B-12672 is a lactic acid producer and a starter component for the production of probiotic products.
RU2017110104A 2017-03-27 2017-03-27 Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing RU2650782C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017110104A RU2650782C1 (en) 2017-03-27 2017-03-27 Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017110104A RU2650782C1 (en) 2017-03-27 2017-03-27 Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2650782C1 true RU2650782C1 (en) 2018-04-17

Family

ID=61976647

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017110104A RU2650782C1 (en) 2017-03-27 2017-03-27 Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2650782C1 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2476591C1 (en) * 2011-08-19 2013-02-27 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Strain of enterococcus hirae used for production of fermented milk products
RU2567147C1 (en) * 2014-12-23 2015-11-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Enterococcus STRAIN hirae VKPM V-11173 USED FOR OBTAINING OF FERMENTED MILK PRODUCTS
RU2599429C1 (en) * 2015-07-23 2016-10-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599425C1 (en) * 2015-07-23 2016-10-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2476591C1 (en) * 2011-08-19 2013-02-27 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Strain of enterococcus hirae used for production of fermented milk products
RU2567147C1 (en) * 2014-12-23 2015-11-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Enterococcus STRAIN hirae VKPM V-11173 USED FOR OBTAINING OF FERMENTED MILK PRODUCTS
RU2599429C1 (en) * 2015-07-23 2016-10-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599425C1 (en) * 2015-07-23 2016-10-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4772131B2 (en) Method for producing fermented milk using novel lactic acid bacteria
RU2018124246A (en) LACTIC ACID BACTERIA FOR THE PRODUCTION OF FERMENTED FOOD PRODUCTS WITH A STRENGTHENED NATURAL SWEET TASTE AND GOOD TEXTURE
RU2599425C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2567150C1 (en) Streptococcus thermophilus STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS
RU2599432C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599430C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus mundtii - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2441910C1 (en) Streptococcus thermophilus strains used for fermented milk products preparation
RU2567149C1 (en) Lactobacillus plantarum STRAIN USED FOR OBTAINING OF FERMENTED MILK PRODUCTS AND PROBIOTIC PREPARATIONS
RU2599424C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus faecalis - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599429C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599431C1 (en) LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae VKPM V-11835 STRAIN - LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES PRODUCER
RU2698032C1 (en) Strain of lactobacilli streptococcus salivarius - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2599428C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus durans - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2650782C1 (en) Lactobacterium strains enterococcus hirae - bread acid producer and component for wastes for probiotic products manufacturing
RU2646109C1 (en) Food stuff preserving agent production method
RU2704857C1 (en) Strain of lactobacilli lactobacillus plantarum - producer of lactic acid, antibiotic substances and starter component for production of fermented milk products
RU2696083C1 (en) Enterococcus faecalis lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2567147C1 (en) Enterococcus STRAIN hirae VKPM V-11173 USED FOR OBTAINING OF FERMENTED MILK PRODUCTS
RU2705270C1 (en) Enterococcus hirae lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances and starter component for production of probiotic beverages
RU2689688C2 (en) Strain lactobacillus enterococcus mundtii vkpm-12673 - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2603087C1 (en) Strain of lactic bacteria enterococcus durans - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2689716C1 (en) Lactobacillus delbrueckii bp 1-2018 vkpm b-13108 lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2692011C1 (en) Enterococcus durans lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2689910C1 (en) Enterococcus canintestini lactobacillus strain kf n 37 12-2018 vkpm b-13053 - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2689524C1 (en) Enterococcus mundtii lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200328