RU2646109C1 - Food stuff preserving agent production method - Google Patents

Food stuff preserving agent production method Download PDF

Info

Publication number
RU2646109C1
RU2646109C1 RU2017108895A RU2017108895A RU2646109C1 RU 2646109 C1 RU2646109 C1 RU 2646109C1 RU 2017108895 A RU2017108895 A RU 2017108895A RU 2017108895 A RU2017108895 A RU 2017108895A RU 2646109 C1 RU2646109 C1 RU 2646109C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
vkpm
lactobacillus
temperature
strain
fermenter
Prior art date
Application number
RU2017108895A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Денис Львович Черников
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Зеленые линии"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Зеленые линии" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Зеленые линии"
Priority to RU2017108895A priority Critical patent/RU2646109C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2646109C1 publication Critical patent/RU2646109C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B4/00General methods for preserving meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/14Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12
    • A23B4/18Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12 in the form of liquids or solids
    • A23B4/20Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23B4/22Microorganisms; Enzymes; Antibiotics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/02Acetobacter
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)

Abstract

FIELD: food industry; biotechnology.
SUBSTANCE: invention refers to the field of biotechnology and food industry. Method of producing a food stuff preserving agent is proposed. Method involves obtaining a glucose-digestion product using lactobacillus Lactobacillus helveticus VKPM B-10475, Lactobacillus helveticus VKPM B-10713, Lactobacillus fermentum VKPM B-11711, Lactobacillus rhamnosus VKPM B-11710 and acetic acid bacteria Acetobacter aceti VKPM B-1276 in a fermenter at a bacterial ratio 2:2:2:1:3 at 33–37 °C for 24–30 hours at pH = 6.0–6.5. Resulting culture liquid is separated from the bacteria, purified, followed by spray drying at 180–220 °C or pasteurization at 72–78 °C for 5–10 minutes.
EFFECT: invention provides a biological preservative that prevents food spoilage.
3 cl, 2 ex, 1 tbl

Description

Настоящее изобретение относится к области пищевой промышленности, в частности принадлежит к способам производства биологических консервантов, предназначенных для изготовления хлебобулочных продуктов массового назначения.The present invention relates to the field of food industry, in particular, relates to methods for the production of biological preservatives intended for the manufacture of bakery products for mass purposes.

Консервирование - один из самых совершенных способов сохранения пищевых продуктов, позволяющих предотвратить их порчу и потерю питательной ценности.Preservation is one of the most perfect ways to preserve food products, which helps prevent their spoilage and loss of nutritional value.

Известные способы консервирования продукции предусматривают помещение консервируемых продуктов в соответствующую тару, ее заливку консервирующим раствором, последующие герметизацию и тепловую обработку.Known methods for preserving products include placing canned products in an appropriate container, pouring it with a preserving solution, subsequent sealing and heat treatment.

В подавляющем большинстве случаев консервирующий раствор, помимо вкусовых добавок, ароматических добавок и специй, содержит консервант, препятствующий развитию микрофлоры, вызывающей порчу продуктов. Из "Уровня техники" известен способ производства консерванта продуктов питания, который готовят смешиванием в определенной пропорции товарных низина и молочной кислоты, дополняют их концентратами внеклеточных и внутриклеточных метаболитов молочнокислых бактерий. В качестве источников молочной кислоты, низина, выделяемых в культуральную среду метаболитов молочнокислых бактерий, используют непосредственно культуральные жидкости молочнокислых бактерий или их фильтраты. Одним из вариантов известного консерванта является консервант, представляющий собой концентрированный или разбавленный фильтрат культуральной жидкости молочнокислых бактерий, образующих одновременно низин и молочную кислоту, дополненный внеклеточными и внутриклеточными метаболитами молочнокислых бактерий, обладающими антимикробной активностью. Консервант может включать фильтрат культуральной жидкости молочнокислых бактерий, содержащий одновременно низин, молочную кислоту, внеклеточные выделяемые в культуральную среду метаболиты и суммарный препарат внутриклеточных не выделяемых в культуральную среду метаболитов, обладающих антимикробной активностью. В равной мере можно использовать для приготовления консерванта отдельные фильтраты культуральной жидкости разных молочнокислых бактерий, содержащих разные количества и соотношения низина, молочной кислоты и внеклеточных метаболитов. Комбинируя такие фильтраты культуральных жидкостей, можно приготовить консервант требуемого для данных конкретных целей состава после дополнительного введения препарата внутриклеточных метаболитов, обладающих антимикробной активностью (см. патент РФ №2159553, кл. МПК А23В 7/14, опубл. 27.11.2000).In the vast majority of cases, the preservative solution, in addition to flavors, aromatic additives and spices, contains a preservative that prevents the development of microflora, causing spoilage of products. From the "prior art" is known a method of producing a food preservative, which is prepared by mixing in a certain proportion of marketed nisin and lactic acid, supplemented with concentrates of extracellular and intracellular metabolites of lactic acid bacteria. As sources of lactic acid, nisin, released into the culture medium of metabolites of lactic acid bacteria, directly use the culture fluid of lactic acid bacteria or their filtrates. One of the variants of the known preservative is a preservative, which is a concentrated or diluted filtrate of the culture liquid of lactic acid bacteria, which simultaneously form nisin and lactic acid, supplemented with extracellular and intracellular metabolites of lactic acid bacteria with antimicrobial activity. The preservative may include a filtrate of the culture fluid of lactic acid bacteria, containing simultaneously nisin, lactic acid, extracellular metabolites secreted into the culture medium and a total preparation of intracellular metabolites not secreted into the culture medium with antimicrobial activity. Equally, it is possible to use separate filtrates of the culture fluid of different lactic acid bacteria for the preparation of a preservative, containing different amounts and ratios of nisin, lactic acid and extracellular metabolites. By combining such filtrates of culture liquids, it is possible to prepare a preservative of the composition required for these specific purposes after additional administration of the preparation of intracellular metabolites with antimicrobial activity (see RF patent No. 2159553, class IPC A23B 7/14, publ. 11/27/2000).

Техническая проблема заключается в невозможности использования полученного известным способом консерванта для некоторых видов пищевых продуктов, в частности мясных и хлебобулочных изделий. Задачей настоящего изобретения является устранение вышеуказанных недостатков.The technical problem lies in the impossibility of using the preservative obtained in a known manner for certain types of food products, in particular meat and bakery products. The objective of the present invention is to remedy the above disadvantages.

Технический результат заключается в том, что при осуществлении способа получают биологический консервант, используемый для хлебобулочных изделиях для подавления роста нежелательных микроорганизмов. Технический результат обеспечивается тем, что способ производства консерванта продуктов питания, представляющего собой продукт сбраживания глюкозы с помощью лактобактерий и уксуснокислых бактерий, включает раздельное культивирование штаммов Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 при температуре 37-43°C, Acetobacter aceti B-1276 при температуре 28-30°C, инокулирование в ферментере при соотношении 2:2:2:1:3. Культивирование клеток бактерий осуществляют в ферментере на глюкозосодержащей питательной среде. Наращивают клетки лактобактерий и уксуснокислых бактерий в ферментере при температуре 33-37°С в течение 24-30 часов при рН=6,0-6,5. Концентрируют полученную жидкую биомассу. Отделяют клетки от среды в конце стационарной фазы роста, очищают культуральную жидкость от лактобактерий и уксуснокислых бактерий, осуществляют распылительную сушку очищенной культуральной жидкости или ее пастеризацию.The technical result consists in the fact that in the implementation of the method receive a biological preservative used for bakery products to inhibit the growth of undesirable microorganisms. The technical result is ensured by the fact that the method for producing a food preservative, which is a product of glucose fermentation using lactobacilli and acetic acid bacteria, involves the separate cultivation of strains of Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobosusus bham11 11710 at a temperature of 37-43 ° C, Acetobacter aceti B-1276 at a temperature of 28-30 ° C, inoculation in a fermenter at a ratio of 2: 2: 2: 1: 3. The cultivation of bacterial cells is carried out in a fermenter on a glucose-containing nutrient medium. The cells of lactobacilli and acetic acid bacteria are grown in a fermenter at a temperature of 33-37 ° C for 24-30 hours at pH = 6.0-6.5. Concentrate the resulting liquid biomass. Cells are separated from the medium at the end of the stationary growth phase, the culture fluid is cleaned of lactobacilli and acetic acid bacteria, spray drying of the purified culture fluid or its pasteurization is carried out.

В соответствии с частными случаями осуществления способ имеет следующие особенности.In accordance with particular cases of implementation, the method has the following features.

Распылительную сушку культуральной жидкости осуществляют при температуре 180-220°С.Spray drying of the culture fluid is carried out at a temperature of 180-220 ° C.

Пастеризацию культуральной жидкости осуществляют при температуре 72-78°С в течение 5-10 минут.Pasteurization of the culture fluid is carried out at a temperature of 72-78 ° C for 5-10 minutes.

Для получения консерванта для производства продуктов питания используют Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276. При этом все штаммы прошли национальное патентное депонирование во ФГУП ГосНИИгенетика - ВКПМ. Штаммы имеют следующую характеристику.To obtain a preservative for food production, Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 are used. Moreover, all strains passed the national patent deposit at the Federal State Unitary Enterprise GosNIIgenetika - VKPM. Strains have the following characteristic.

Регистрационный номер коллекции ВКПМ: В-10475VKPM collection registration number: В-10475

Название штамма: Lactobacillus helveticus ЗЛ-008The name of the strain: Lactobacillus helveticus ZL-008

Происхождение штамма: выделен из самоквасной сметаныThe origin of the strain: isolated from sour cream

Культурально-морфологические признаки штамма:Cultural and morphological characteristics of the strain:

Колонии - круглые, белые, размером 1 мм. Клетки грамположительные палочки средней длины, расположенные одиночно, неподвижные.The colonies are round, white, 1 mm in size. Gram-positive cells of medium length, located singly, motionless.

Область промышленного применения штамма:Field of industrial use of the strain:

Используется в составе заквасок для получения кисломолочных продуктов и срыров. Продуцент молочной кислоты.It is used as part of starter cultures to produce fermented milk products and saryr. Lactic acid producer.

Условия культивирование штамма: MRS, 41°С.The cultivation conditions of the strain: MRS, 41 ° C.

Сведения о безопасности штамма:Strain safety information:

Lactobacillus helveticus ВКПМ В-10475 не является генетически модифицированным штаммом.Lactobacillus helveticus VKPM B-10475 is not a genetically modified strain.

Штамм Lactobacillus helveticus ВКПМ В-10475 относится к микроорганизмам, непатогенным для человека. Работа со штаммом Lactobacillus helveticus ВКПМ В-10475 не требует специальных мер предосторожности.The strain Lactobacillus helveticus VKPM B-10475 refers to microorganisms that are non-pathogenic to humans. Work with a strain of Lactobacillus helveticus VKPM B-10475 does not require special precautions.

Регистрационный номер коллекции ВКПМ: В-10713VKPM collection registration number: В-10713

Название штамма: Lactobacillus helveticus ЗЛ-056The name of the strain: Lactobacillus helveticus ZL-056

Происхождение штамма: выделен из домашней мацони.The origin of the strain: isolated from domestic yogurt.

Культурально-морфологические признаки штамма:Cultural and morphological characteristics of the strain:

Колонии - мелкие, круглые, белые, размером 0,5-1 мм. Клетки - грамположительные палочки короткие и средней длины, расположенные одиночно и попарно, неподвижные.Colonies are small, round, white, 0.5-1 mm in size. Cells - gram-positive sticks short and medium length, located singly and in pairs, motionless.

Область промышленного применения штамма:Field of industrial use of the strain:

Используется в составе заквасок для получения кисломолочных продуктов и сыров. Продуцент молочной кислоты.It is used as a part of starter cultures to produce fermented milk products and cheeses. Lactic acid producer.

Условия культивирование штамма: MRS, 41°С.The cultivation conditions of the strain: MRS, 41 ° C.

Сведения о безопасности штамма:Strain safety information:

Lactobacillus helveticus ЗЛ-056 ВКПМ В-10713 не является генетически модифицированным штаммом.Lactobacillus helveticus ZL-056 VKPM B-10713 is not a genetically modified strain.

Штамм Lactobacillus helveticus ЗЛ-056 ВКПМ В-10713 относится к микроорганизмам, непатогенным для человека. Работа со штаммом Lactobacillus helveticus ЗЛ-056 ВКПМ В-10713 не требует специальных мер предосторожности.The strain Lactobacillus helveticus ZL-056 VKPM B-10713 refers to microorganisms that are pathogenic to humans. Work with a strain of Lactobacillus helveticus ZL-056 VKPM B-10713 does not require special precautions.

Регистрационный номер коллекции ВКПМ: В-11711VKPM collection registration number: В-11711

Название штамма: Lactobacillus fermentum ЗЛ-114The name of the strain: Lactobacillus fermentum ZL-114

Происхождение штамма: выделен из силоса.The origin of the strain: isolated from silo.

Культурально-морфологические признаки штамма:Cultural and morphological characteristics of the strain:

Колонии - круглые, белые, размером 1-1,5 мм. Клетки - неподвижные, грамоположительные палочки, расположенные в цепочках.The colonies are round, white, 1-1.5 mm in size. Cells are motionless, gram-positive rods located in chains.

Область промышленного применения штамма:Field of industrial use of the strain:

Используется при производстве силосных заквасок и стартовых культур. Продуцент молочной кислоты.Used in the production of silage starter cultures and starter cultures. Lactic acid producer.

Условия культивирование штамма: MRS (г/л): Бактопептон - 10,0; мясной экстракт - 10,0; дрожжевой экстракт - 5,0; глюкоза - 20,0; твин 80 - 1,0; аммоний лимоннокислый - 2,0; натрий уксуснокислый - 5,0; MgSO4×7H2O - 1,0; MnSO4×5H2O - 0,05; Na2HPO4 - 2,0; гар - 20,0, pH=6,5, T=37°C.The cultivation conditions of the strain: MRS (g / l): Bactopeptone - 10.0; meat extract - 10.0; yeast extract - 5.0; glucose - 20.0; tween 80 - 1.0; ammonium citrate - 2.0; sodium acetate - 5.0; MgSO4 × 7H2O - 1.0; MnSO4 × 5H2O - 0.05; Na2HPO4 2.0; Gar - 20.0, pH = 6.5, T = 37 ° C.

Сведения о безопасности штамма:Strain safety information:

Lactobacillus fermentum ЗЛ-114 ВКПМ В-11711 не является генетически модифицированным штаммом.Lactobacillus fermentum ZL-114 VKPM B-11711 is not a genetically modified strain.

Штамм Lactobacillus fermentum ЗЛ-114 ВКПМ В-11711 относится к микроорганизмам, непатогенным для человека. Работа со штаммом Lactobacillus fermentum ЗЛ-114 ВКПМ В-11711 не требует специальных мер предосторожности.The strain Lactobacillus fermentum ZL-114 VKPM B-11711 refers to microorganisms that are non-pathogenic to humans. Work with a strain of Lactobacillus fermentum ZL-114 VKPM B-11711 does not require special precautions.

Регистрационный номер коллекции ВКПМ: В-11710VKPM collection registration number: В-11710

Название штамма: Lactobacillus rhamnosus ЗЛ-112The name of the strain: Lactobacillus rhamnosus ZL-112

Происхождение штамма: выделен из домашнего овечьего сыра.The origin of the strain: isolated from homemade sheep cheese.

Культурально-морфологические признаки штамма:Cultural and morphological characteristics of the strain:

Колонии - круглые, белые, размером 0,5-1,5 мм. Клетки - неподвижные, грамположительные палочки, расположенные в цепочках.The colonies are round, white, 0.5-1.5 mm in size. Cells - motionless, gram-positive sticks located in chains.

Область промышленного применения штамма:Field of industrial use of the strain:

Используется в составе заквасок для получения кисломолочных продуктов и сыров. Продуцент молочной кислоты.It is used as a part of starter cultures to produce fermented milk products and cheeses. Lactic acid producer.

Условия культивирование штамма: MRS (г/л): Бактопептон -10,0; мясной экстракт - 10,0; дрожжевой экстракт - 5,0; глюкоза - 20,0; твин 80 - 1,0; аммоний лимоннокислый - 2,0; натрий уксуснокислый - 5,0; MgSO4×7H2O - 1,0; MnSO4×5H2O - 0,05; Na2HPO4 - 2,0; гар - 20,0, pH=6,5, T=37°C.The cultivation conditions of the strain: MRS (g / l): Bactopeptone -10.0; meat extract - 10.0; yeast extract - 5.0; glucose - 20.0; tween 80 - 1.0; ammonium citrate - 2.0; sodium acetate - 5.0; MgSO4 × 7H2O - 1.0; MnSO4 × 5H2O - 0.05; Na2HPO4 2.0; Gar - 20.0, pH = 6.5, T = 37 ° C.

Сведения о безопасности штамма:Strain safety information:

Lactobacillus rhamnosus ЗЛ-112 ВКПМ B-11710 не является генетически модифицированным штаммом.Lactobacillus rhamnosus ZL-112 VKPM B-11710 is not a genetically modified strain.

Штамм Lactobacillus rhamnosus ЗЛ-112 ВКПМ В-11710 относится к микроорганизмам, непатогенным для человека. Работа со штаммом Lactobacillus rhamnosus ЗЛ-112 ВКПМ В-11710 не требует специальных мер предосторожности.The strain Lactobacillus rhamnosus ZL-112 VKPM B-11710 refers to microorganisms that are non-pathogenic to humans. Work with a strain of Lactobacillus rhamnosus ZL-112 VKPM B-11710 does not require special precautions.

Регистрационный номер коллекции ВКПМ: В-1276VKPM collection registration number: В-1276

Название штамма: Acetobacter aceti ВКМ В-1276The name of the strain: Acetobacter aceti VKM B-1276

Источник выделения: Ферментер уксусного заводаRelease Source: Acetic Plant Fermenter

Условия культивирования 26-28°С, 3 сутокCultivation conditions 26-28 ° C, 3 days

Среда культивирования: питательная среда следующего состава: дрожжевой экстракт 30 г, этанол 20 мл, агар-агар 20 г, вода дистиллированная 1000 мл, рН=5,0-6,0. Дополнительно стерильный этанол на поверхности агара 0,1 мл/пробирку.Cultivation medium: culture medium of the following composition: yeast extract 30 g, ethanol 20 ml, agar-agar 20 g, distilled water 1000 ml, pH = 5.0-6.0. Additionally, sterile ethanol on an agar surface of 0.1 ml / tube.

В классификации микроорганизмов по группам патогенности данный вид не значится.In the classification of microorganisms by pathogenicity groups, this species is not listed.

Способ производства консерванта продуктов питания, представляющего собой продукт сбраживания глюкозы с помощью лактобактерий и уксуснокислых бактерий, включает раздельное инокулирование штаммов Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-l1710, Acetobacter aceti B-l276. Культивируют Lactobacillus helveticus B-l0475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 при температуре 37-43°C, a Acetobacter aceti B-1276 при температуре 28-30°C. Все бактерии обладают антимикробной активностью и подавляют рост аэробных спор и плесени.A method of manufacturing a food preservative, which is a product of glucose fermentation using lactobacilli and acetic acid bacteria, involves separate inoculation of the strains of Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus Bhamnosus l276. Cultivate Lactobacillus helveticus B-l0475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 at a temperature of 37-43 ° C, and Acetobacter aceti B-1276 at a temperature of 28-30 ° C. All bacteria have antimicrobial activity and inhibit the growth of aerobic spores and mold.

По мере раздельного инокулирования проверяют активность кислотонакопления, концентрацию КОЕ/г, микроскопию и другие свойства.As the separate inoculation is checked, the activity of acid accumulation, the concentration of CFU / g, microscopy and other properties are checked.

Полученным инокулятом засевают ферментер, при этом Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 используют в следующем соотношении 2:2:2:1:3, осуществляют наращивание клеток лактобактерий и уксуснокислых бактерий в ферментере при температуре 33-37°С в течение 24-30 часов при рН=6,0-6,5.The fermenter is seeded with the obtained inoculum, while Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 are used in the following ratio: 2: 2: 2: carry out the growth of lactobacillus cells and acetic acid bacteria in the fermenter at a temperature of 33-37 ° C for 24-30 hours at pH = 6.0-6.5.

При этом средой для накопления бактериальных клеток служит глюкозосодержащая питательная среда с добавление дрожжевого экстракта и гидролизата казеина. Рецептура засеянной питательной среды представлена в таблице.In this case, the medium for the accumulation of bacterial cells is a glucose-containing nutrient medium with the addition of yeast extract and casein hydrolyzate. The recipe for seeded nutrient medium is presented in the table.

Figure 00000001
Figure 00000001

Концентрируют полученную жидкую биомассу, отделяют клетки от среды в конце стационарной фазы роста, когда в культуральной жидкости (в 1 см3) содержатся сотни миллионов - единицы миллиардов активных клеток и достигается максимальная концентрация органических кислот и бактериоцинов в питательной среде. Определяют КОЕ в режиме реального времени флуоресцентным и спектрофотометрическим измерением бактериальной суспензии на автоматизированной станции freedom evo. Для остановки процесса ферментации штаммов в стабильной фазе роста используется экспресс-методика контроля не только живых (КОЕ) микроорганизмов, но и общей концентрации бактериальных клеток во время культивирования. Данный метод позволяет оперативно отслеживать соотношение живых и мертвых клеток и своевременно останавливать процесс культивирования, обеспечивая получение бактериальной суспензии всегда в одинаковой фазе роста.The resulting liquid biomass is concentrated, the cells are separated from the medium at the end of the stationary growth phase, when the culture fluid (1 cm 3 ) contains hundreds of millions - several billion active cells and the maximum concentration of organic acids and bacteriocins in the nutrient medium is reached. CFU is determined in real time by fluorescence and spectrophotometric measurement of the bacterial suspension at the automated freedom evo station. To stop the fermentation of strains in a stable phase of growth, an express method is used to control not only live (CFU) microorganisms, but also the total concentration of bacterial cells during cultivation. This method allows you to quickly monitor the ratio of living and dead cells and timely stop the cultivation process, ensuring that the bacterial suspension is always in the same growth phase.

Очищают культуральную жидкость от лактобактерий и уксуснокислых бактерий на ультрафильтрационной установке. Для этой цели можно использовать центрифугу или бактофугу. Степень очистки культуральной жидкости достигает до 10-500 КОЕ/см3, что позволяет направлять ее сразу на сушку без предварительной пастеризации, получая сразу сухой порошок консерванта.Purify the culture fluid from lactobacilli and acetic acid bacteria in an ultrafiltration unit. For this purpose, you can use a centrifuge or bactofuge. The degree of purification of the culture fluid reaches up to 10-500 CFU / cm 3 , which allows you to send it immediately to drying without prior pasteurization, getting immediately a dry preservative powder.

Для этого используют распылительную сушку при температуре 180-220°С. Данный вид сушки не влияет негативно на антимикробную эффективность добавки в продуктах питания.To do this, use spray drying at a temperature of 180-220 ° C. This type of drying does not negatively affect the antimicrobial effectiveness of the additive in food.

Если консервант выпускают в жидком виде, то после разделения бактериальной суспензии на фильтрат и концентрат, фильтрат подвергают пастеризации при температуре 72-78°С в течение 5-10 мин.If the preservative is released in liquid form, then after separation of the bacterial suspension into a filtrate and a concentrate, the filtrate is pasteurized at a temperature of 72-78 ° C for 5-10 minutes.

Пример использования закваски.An example of the use of leaven.

Пример 1Example 1

Осуществляют раздельное инокулирование штаммов Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276.Separate inoculation of strains of Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 is carried out.

Культивируют Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 при температуре 37°C, a Acetobacter aceti B-1276 при температуре 28°C.Cultivate Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 at 37 ° C, and Acetobacter aceti B-1276 at 28 ° C.

По мере раздельного культивирования проверяют активность кислотонакопления, концентрацию КОЕ/г, микроскопию и другие свойства.During separate cultivation, the acid accumulation activity, CFU / g concentration, microscopy and other properties are checked.

Полученным инокулятом засевают ферментер, при этом Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 используют в следующем соотношении 2:2:2:1:3, осуществляют наращивание клеток лактобактерий и уксуснокислых бактерий в ферментере при температуре 37°С в течение 30 часов при рН=6,5.The fermenter is seeded with the obtained inoculum, while Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 are used in the following ratio: 2: 2: 2: carry out the growth of lactobacillus cells and acetic acid bacteria in the fermenter at a temperature of 37 ° C for 30 hours at pH = 6.5.

При этом средой для накопления бактериальных клеток служит глюкозосодержащая питательная среда с добавление дрожжевого экстракта и гидролизата казеина. Рецептура засеянной питательной среды представлена в таблице.In this case, the medium for the accumulation of bacterial cells is a glucose-containing nutrient medium with the addition of yeast extract and casein hydrolyzate. The recipe for seeded nutrient medium is presented in the table.

Концентрируют полученную жидкую биомассу, отделяют клетки от среды в конце стационарной фазы роста. Очищают культуральную жидкость от лактобактерий и уксуснокислых бактерий на ультрафильтрационной установке. Степень очистки культуральной жидкости достигает до 300 КОЕ/см3, что позволяет направлять ее сразу на сушку без предварительной пастеризации, получая сразу сухой порошок консерванта.The resulting liquid biomass is concentrated, the cells are separated from the medium at the end of the stationary growth phase. Purify the culture fluid from lactobacilli and acetic acid bacteria in an ultrafiltration unit. The degree of purification of the culture fluid reaches up to 300 CFU / cm 3 , which allows you to send it immediately to drying without prior pasteurization, getting immediately a dry preservative powder.

Для этого используют распылительную сушку при температуре 200°С.To do this, use spray drying at a temperature of 200 ° C.

Пример 2Example 2

Осуществляют раздельное инокулирование штаммов Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276.Separate inoculation of strains of Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 is carried out.

Культивируют Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 при температуре 40°C, a Acetobacter aceti B-1276 при температуре 30°C.Cultivate Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710 at 40 ° C, and Acetobacter aceti B-1276 at 30 ° C.

По мере раздельного культивирования проверяют активность кислотонакопления, концентрацию КОЕ/г, микроскопию и другие свойства.During separate cultivation, the acid accumulation activity, CFU / g concentration, microscopy and other properties are checked.

Полученным инокулятом засевают ферментер, при этом Lactobacillus helveticus В-10475, Lactobacillus helveticus В-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 используют в следующем соотношении 2:2:2:1:3, осуществляют наращивание клеток лактобактерий и уксуснокислых бактерий в ферментере при температуре 35°С в течение 28 часов при рН=6,0.The fermenter is seeded with the obtained inoculum, while Lactobacillus helveticus B-10475, Lactobacillus helveticus B-10713, Lactobacillus fermentum B-11711, Lactobacillus rhamnosus B-11710, Acetobacter aceti B-1276 are used in the following ratio: 2: 2: 2: carry out the growth of lactobacillus cells and acetic acid bacteria in the fermenter at a temperature of 35 ° C for 28 hours at pH = 6.0.

При этом средой для накопления бактериальных клеток служит глюкозосодержащая питательная среда с добавление дрожжевого экстракта и гидролизата казеина. Рецептура засеянной питательной среды представлена в таблице.In this case, the medium for the accumulation of bacterial cells is a glucose-containing nutrient medium with the addition of yeast extract and casein hydrolyzate. The recipe for seeded nutrient medium is presented in the table.

Концентрируют полученную жидкую биомассу, отделяют клетки от среды в конце стационарной фазы роста. Определяют КОЕ в режиме реального времени флуоресцентным и спектрофотометрическим измерением бактериальной суспензии на автоматизированной станции freedom evo. Очищают культуральную жидкость от лактобактерий и уксуснокислых бактерий на бактофуге. Степень очистки культуральной жидкости достигает до 10 КОЕ/см3.The resulting liquid biomass is concentrated, the cells are separated from the medium at the end of the stationary growth phase. CFU is determined in real time by fluorescence and spectrophotometric measurement of the bacterial suspension at the automated freedom evo station. They purify the culture fluid from lactobacilli and acetic acid bacteria on a bactofuge. The degree of purification of the culture fluid reaches up to 10 CFU / cm 3 .

После разделения бактериальной суспензии на фильтрат и концентрат, фильтрат подвергают пастеризации при температуре 75°С в течение 5 мин. Полученный консервант используют для подавления роста аэробных спор, плесени и других нежелательных микроорганизмов в продуктах питания -хлебобулочных и мучных кондитерских изделиях с дозировкой 0,1-0,3% от массы муки.After separation of the bacterial suspension into a filtrate and a concentrate, the filtrate is pasteurized at a temperature of 75 ° C for 5 minutes. The obtained preservative is used to inhibit the growth of aerobic spores, molds and other undesirable microorganisms in food products - bakery and flour confectionery products with a dosage of 0.1-0.3% by weight of flour.

Claims (3)

1. Способ производства консерванта продуктов питания, представляющего собой продукт сбраживания глюкозы с помощью лактобактерий и уксуснокислых бактерий, включающий раздельное культивирование штаммов Lactobacillus helveticus ВКПМ В-10475, Lactobacillus helveticus ВКПМ В-10713, Lactobacillus fermentum ВКПМ B-11711, Lactobacillus rhamnosus ВКПМ B-11710 при температуре 37-43°C, Acetobacter aceti ВКПМ B-1276 при температуре 28-30°C, инокулирование в ферментер при соотношении 2:2:2:1:3, культивирование клеток бактерий осуществляют в ферментере на глюкозосодержащей питательной среде, наращивают клетки лактобактерий и уксуснокислых бактерий в ферментере при температуре 33-37°С в течение 24-30 часов при рН=6,0-6,5, концентрируют полученную жидкую биомассу, отделяют клетки от среды в конце стационарной фазы роста, очищают культуральную жидкость от лактобактерий и уксуснокислых бактерий, осуществляют распылительную сушку очищенной культуральной жидкости или ее пастеризацию.1. A method of producing a food preservative, which is a product of glucose fermentation using lactobacilli and acetic acid bacteria, including the separate cultivation of strains of Lactobacillus helveticus VKPM B-10475, Lactobacillus helveticus VKPM B-10713, Lactobacillus fermentum VKPM B-11711, Lactobus rhamobus Bhamobus rhamobus Rhamobus rhamobus Rhamobus bhamosumus 11710 at a temperature of 37-43 ° C, Acetobacter aceti VKPM B-1276 at a temperature of 28-30 ° C, inoculation into a fermenter at a ratio of 2: 2: 2: 1: 3, the cultivation of bacterial cells is carried out in a fermenter on a glucose-containing nutrient medium, increase lactobacillus cells and acetic acid bacteria in a fermenter at a temperature of 33-37 ° C for 24-30 hours at pH = 6.0-6.5, concentrate the obtained liquid biomass, separate the cells from the medium at the end of the stationary growth phase, and clear the culture liquid of lactobacilli and acetic acids bacteria, carry out spray drying of the purified culture fluid or its pasteurization. 2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что распылительную сушку культуральной жидкости осуществляют при температуре 180-220°С.2. The method according to p. 1, characterized in that the spray drying of the culture fluid is carried out at a temperature of 180-220 ° C. 3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что пастеризацию культуральной жидкости осуществляют при температуре 72-78°С в течение 5-10 минут.3. The method according to p. 1, characterized in that the pasteurization of the culture fluid is carried out at a temperature of 72-78 ° C for 5-10 minutes.
RU2017108895A 2017-03-17 2017-03-17 Food stuff preserving agent production method RU2646109C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017108895A RU2646109C1 (en) 2017-03-17 2017-03-17 Food stuff preserving agent production method

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017108895A RU2646109C1 (en) 2017-03-17 2017-03-17 Food stuff preserving agent production method

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2646109C1 true RU2646109C1 (en) 2018-03-01

Family

ID=61568378

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017108895A RU2646109C1 (en) 2017-03-17 2017-03-17 Food stuff preserving agent production method

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2646109C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023061098A1 (en) * 2021-10-14 2023-04-20 命之源(杭州)生物科技有限公司 Bacteria combination of yeast and lactic acid bacteria, cultivation method therefor, and application thereof
CN116064301A (en) * 2022-09-22 2023-05-05 广西大学 Lactobacillus buchneri and application thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2157635C1 (en) * 2000-01-14 2000-10-20 Закрытое акционерное общество "ОБОРОНПРОДКОМПЛЕКТ" Agricultural product preserving method
RU2229231C1 (en) * 2003-04-22 2004-05-27 Федячева Татьяна Евгеньевна Vegetable-origin food preservative and a method for preservation using it
WO2004064545A1 (en) * 2003-01-23 2004-08-05 Kyowa Hakko Food Specialties Co., Ltd. Method of improving storage properties of foods and drinks

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2157635C1 (en) * 2000-01-14 2000-10-20 Закрытое акционерное общество "ОБОРОНПРОДКОМПЛЕКТ" Agricultural product preserving method
WO2004064545A1 (en) * 2003-01-23 2004-08-05 Kyowa Hakko Food Specialties Co., Ltd. Method of improving storage properties of foods and drinks
RU2229231C1 (en) * 2003-04-22 2004-05-27 Федячева Татьяна Евгеньевна Vegetable-origin food preservative and a method for preservation using it

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023061098A1 (en) * 2021-10-14 2023-04-20 命之源(杭州)生物科技有限公司 Bacteria combination of yeast and lactic acid bacteria, cultivation method therefor, and application thereof
CN116064301A (en) * 2022-09-22 2023-05-05 广西大学 Lactobacillus buchneri and application thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103596435B (en) synergistic antimicrobial effect
KR101363735B1 (en) Agent for enhancing growth and improving viability of lactic acid bacterium
RU2505600C2 (en) Starter material of pure growth of lactate microorganisms for preparation of cultured milk products
RU2646109C1 (en) Food stuff preserving agent production method
RU2599425C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599432C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599430C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus mundtii - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
KR20240011581A (en) Lactobacillus reuteri sy308, a probiotics, and feed additive comprising thereof
RU2599429C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599431C1 (en) LACTIC BACTERIA Enterococcus hirae VKPM V-11835 STRAIN - LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES PRODUCER
RU2599428C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus durans - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
RU2599424C1 (en) STRAIN OF LACTIC BACTERIA Enterococcus faecalis - PRODUCER OF LACTIC ACID AND ANTIBIOTIC SUBSTANCES
Anggraeni et al. Viability of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus pentosus isolated from solid waste of soy milk as candidate probiotic for poultry
RU2607023C1 (en) Dry bacterial starter for production of fermented milk products and production method thereof
RU2603087C1 (en) Strain of lactic bacteria enterococcus durans - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2567148C1 (en) Streptococcus salivarius VKPM V-11177 STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS AND PRO-BIOTIC PREPARATIONS
RU2567814C1 (en) Streptococcus salivarius STRAIN VKPM V-11174, OBTAINED ON AVAILABLE MEDIUM
RU2786437C1 (en) Lactobacillus strain lacticaseibacillus paracasei 14-2020 vkpm - b-13841 used for the production of fermented milk products
Anupama et al. Isolation, purification and characterisation of bacteriocin producing Lactobacillus species and its antimicrobial efficacy against food borne pathogens
Aprisal et al. Selection of lactic acid bacteria (LAB) origin of food fermentation probiotic mixed as candidate for broiler
RU2803266C1 (en) Lactococcus lactis 12/16/psh vkpm b-14320 strain used in the production of fermented milk products
RU2580052C1 (en) Strain lactobacillus helveticus vkpm v-11176 obtained in available nutrient mediums
RU2687454C1 (en) Enterococcus hirae lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2689716C1 (en) Lactobacillus delbrueckii bp 1-2018 vkpm b-13108 lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances
RU2689524C1 (en) Enterococcus mundtii lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances