RU2650587C1 - Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain - Google Patents
Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain Download PDFInfo
- Publication number
- RU2650587C1 RU2650587C1 RU2017114818A RU2017114818A RU2650587C1 RU 2650587 C1 RU2650587 C1 RU 2650587C1 RU 2017114818 A RU2017114818 A RU 2017114818A RU 2017114818 A RU2017114818 A RU 2017114818A RU 2650587 C1 RU2650587 C1 RU 2650587C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- melanoma
- mice
- tumor
- chronic pain
- pain
- Prior art date
Links
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 title claims abstract description 48
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 title claims abstract description 35
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 title claims abstract description 24
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000012986 modification Methods 0.000 title claims abstract description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 title claims abstract description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 35
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000003497 sciatic nerve Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 6
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 abstract description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 4
- 230000005584 early death Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 28
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000007568 Proto-Oncogene Proteins c-fos Human genes 0.000 description 2
- 108010071563 Proto-Oncogene Proteins c-fos Proteins 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 208000022371 chronic pain syndrome Diseases 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 230000005741 malignant process Effects 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 210000000929 nociceptor Anatomy 0.000 description 2
- 108091008700 nociceptors Proteins 0.000 description 2
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003126 Anuria Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 206010058019 Cancer Pain Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 102100024304 Protachykinin-1 Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 210000003557 bones of lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 210000003372 endocrine gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003447 ipsilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000036403 neuro physiology Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000003040 nociceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000008289 pathophysiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 230000008786 sensory perception of smell Effects 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Mathematical Analysis (AREA)
- Mathematical Physics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Algebra (AREA)
- Computational Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Mathematical Optimization (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Pure & Applied Mathematics (AREA)
- Business, Economics & Management (AREA)
- Educational Administration (AREA)
- Educational Technology (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для модификации злокачественного процесса мышиной меланомы В16 путем создания более агрессивной модели опухолевого роста и метастазирования меланомы в эксперименте.The invention relates to medicine, namely to experimental oncology, and can be used to modify the malignant process of murine B 16 melanoma by creating a more aggressive model of tumor growth and metastasis of melanoma in the experiment.
Хроническая боль является распространенным состоянием, которое оказывает существенное влияние на работоспособность, функциональную активность и качество повседневной жизни и одновременно поводом для огромных расходов на здравоохранение. Она связана с ограничением трудоспособности, снижением качества жизни, финансовой несостоятельностью, семейными проблемами. Столь высокая распространенность острых и хронических болевых синдромов, их тяжелое гуманитарное, социальное и экономическое бремя заставило значительно активизировать за рубежом фундаментальные и клинические исследования, оптимизировать организацию медицинской помощи (созданы специализированные центры и клиники боли), вынести рассмотрение проблемы на правительственный уровень. В результате в медицине сформировалось новое направление - медицина боли. Наряду с этим в нашей стране наблюдается значительное отставание как в активности научных исследований, так и в медицинской помощи больным с различными болевыми синдромами. Несмотря на значительный прогресс в понимании нейрофизиологии и психологии боли, фундаментальные и клинические аспекты проблемы хронической боли остаются во многом нерешенными (см. Яхно Н.Н., Кукушкин М.Л. Хроническая боль: медико-биологические и социально-экономические аспекты. Вестник РАМН. 2012; 9: 54-58).Chronic pain is a common condition that has a significant impact on the performance, functional activity and quality of everyday life and at the same time is a reason for huge health care costs. It is associated with limited ability to work, reduced quality of life, financial insolvency, family problems. Such a high prevalence of acute and chronic pain syndromes, their heavy humanitarian, social and economic burden forced to significantly intensify fundamental and clinical research abroad, optimize the organization of medical care (specialized pain centers and clinics have been created), and bring the problem to a government level. As a result, a new direction has formed in medicine - the medicine of pain. Along with this, in our country there is a significant lag both in the activity of scientific research and in medical care for patients with various pain syndromes. Despite significant progress in understanding the neurophysiology and psychology of pain, the fundamental and clinical aspects of the problem of chronic pain remain largely unresolved (see Yakhno N.N., Kukushkin M.L. Chronic pain: biomedical and socio-economic aspects. Vestnik RAMS . 2012; 9: 54-58).
Так, установлено, что боль вызывает анурию, влияет на работу сердечно-сосудистой системы, ЖКТ, селезенку, железы внутренней секреции и т.д. Длительная хроническая боль перестраивает деятельность всех отделов спинного и головного мозга, ухудшается зрение, притупляется слух и обоняние. Течение биохимических процессов в организме изменяется, одни ферменты усиливают свою активность, другие ослабляют ее. Даже способность лейкоцитов крови захватывать бактерии (фагоцитоз) резко снижается. А это говорит о том, что при боли страдают иммунные свойства организма, т.е. способность его бороться с инфекцией. Согласно исследованиям С.М. Дионесова боль снижает сопротивляемость организма к развитию злокачественных опухолей [Кассиль Т.Н. Наука о боли. (см. Академия Наук СССР. Серия «Проблемы науки и технического прогресса»). 2-е дополненное издание. М.: Наука. 1975. 400 с.).So, it was found that pain causes anuria, affects the work of the cardiovascular system, gastrointestinal tract, spleen, endocrine glands, etc. Long-term chronic pain rebuilds the activity of all parts of the spinal cord and brain, impaired vision, dull hearing and sense of smell. The course of biochemical processes in the body changes, some enzymes enhance their activity, others weaken it. Even the ability of white blood cells to capture bacteria (phagocytosis) is sharply reduced. And this suggests that with pain, the immune properties of the body suffer, i.e. his ability to fight infection. According to the research of S.M. Dionesian pain reduces the body's resistance to the development of malignant tumors [Kassil T.N. The science of pain. (see. Academy of Sciences of the USSR. Series "Problems of Science and Technical Progress"). 2nd supplemented edition. M .: Science. 1975.400 p.).
Боль является одним из самых распространенных симптомов у онкологических больных, с прогрессированием заболевания - ее частота увеличивается. Тип боли и ее интенсивность зависят от местоположения опухоли и стадии болезни. Боль присутствует у 30-50% больных при проведении противоопухолевой терапии и у 65-90% пациентов с прогрессированием онкопроцесса, 33% пациентов страдают от боли после окончания противоракового лечения (см. Foley KM., Van den Beuken-van Everdingen MH и др., 2007, Leppert W и др., 2016). Причины боли у онкологических больных, как правило - многофакторные: прямые и косвенные эффекты рака, побочное действие противоопухолевой терапии, сопутствующие заболевания, а патофизиологические механизмы сочетанные, включая как ноцицептивный (соматический и/или висцеральный), так и нейропатический (неврологический) компоненты (см. Leppert W. и др., 2016).Pain is one of the most common symptoms in cancer patients, with the progression of the disease - its frequency increases. The type of pain and its intensity depends on the location of the tumor and the stage of the disease. Pain is present in 30-50% of patients with antitumor therapy and in 65-90% of patients with cancer progression, 33% of patients suffer from pain after the end of anticancer treatment (see Foley KM., Van den Beuken-van Everdingen MH, etc. , 2007, Leppert W et al., 2016). The causes of pain in cancer patients are usually multifactorial: direct and indirect effects of cancer, side effects of antitumor therapy, concomitant diseases, and pathophysiological mechanisms combined, including both nociceptive (somatic and / or visceral) and neuropathic (neurological) components (see . Leppert W. et al., 2016).
Эксперимент позволяет дать ответы на многие вопросы, в том числе и в отношении хронической боли при онкологической патологии. Так, путем инокуляции клеток саркомы Meth А в непосредственной близости от седалищного нерва у BALB / с мышей был создан болевой синдром нейропатического генеза: опухоль растет и постепенно сдавливает нерв, тем самым вызывая его повреждение. В данном эксперименте были выявлены термическоая гипералгезия и механическая аллодиния в ипсилатеральной задней лапке на начальном этапе. Дальнейший рост опухоли вызвал понижение механической чувствительности, в то время как тепловая гипералгезия и признаки спонтанной боли по-прежнему сохранялись (см. Shimoyama М., Tanaka К., Hasue F., Shimoyama N. A mouse model of neuropathic cancer pain. Pain. 2002 Sep; 99(1-2): 167-74). У мышей с опухолями костей конечностей было выявлено несколько вариантов изменения периферической чувствительности ноцицепторов. У нормальной мыши нейромедиаторы высвобождались в спинном мозге только в ответ на сильное болевое раздражение. У мыши с костным раком в ответ на обычную безболезненную пальпацию зоны, пораженной опухолью, происходило высвобождение вещества Р в центростремительных волокнах, с последующей активизацией рецепторов нейрокининовой системы особой субпопуляции нейронов спинного мозга, что сопровождалось повышением болевых ощущений (Hunt & Mantyh, 2001; Mantyh et al, 1995a, 1995b).The experiment allows us to give answers to many questions, including with respect to chronic pain in cancer pathology. So, by inoculating Meth A sarcoma cells in the immediate vicinity of the sciatic nerve in BALB / c mice, a pain syndrome of neuropathic origin was created: the tumor grows and gradually compresses the nerve, thereby causing damage to it. In this experiment, thermal hyperalgesia and mechanical allodynia in the ipsilateral hind paw at the initial stage were revealed. Further tumor growth caused a decrease in mechanical sensitivity, while thermal hyperalgesia and signs of spontaneous pain continued to persist (see Shimoyama M., Tanaka K., Hasue F., Shimoyama N. A mouse model of neuropathic cancer pain. Pain. 2002 Sep; 99 (1-2): 167-74). In mice with tumors of the limb bones, several variants of changes in the peripheral sensitivity of nociceptors were revealed. In a normal mouse, neurotransmitters were released in the spinal cord only in response to severe pain irritation. In a mouse with bone cancer, in response to the usual painless palpation of the tumor-affected area, substance P was released in centripetal fibers, followed by activation of the neurokinin system receptors of a special subpopulation of spinal cord neurons, which was accompanied by an increase in pain (Hunt & Mantyh, 2001; Mantyh et 2001 al, 1995a, 1995b).
Аналогичным образом, обычно безболезненная пальпация у мышей с опухолевым поражением конечностей вызывало также появление c-fos протеина в нейронах спинного мозга. У нормальных животных, не имеющих рака, только сильные болевые стимуляторы способны были вызывать появление c-fos протеина в спинном мозге. Таким образом, ноцицепторы под воздействием особых опухолевых алгогенов вовлекаются в процесс генерирования и поддержания костной раковой боли.Similarly, usually painless palpation in mice with tumor lesions of the limbs also caused the appearance of c-fos protein in spinal cord neurons. In normal animals without cancer, only strong pain stimulants were able to cause the appearance of c-fos protein in the spinal cord. Thus, nociceptors under the influence of special tumor algogens are involved in the process of generating and maintaining bone cancer pain.
Однако ответа на вопрос: участвует ли хроническая боль, в свою очередь, в прогрессировании экспериментальных опухолей и если - да, то каким образом, мы не нашли. Идеальной опухолевой моделью для решения этой задачи является меланома В16, спонтанно возникшая у основания уха мыши линии C57BL/6. Опухоль перевивается в 100% случаев, достаточно быстро растет и при стандартной подкожной перевивке (на 12-16 сутки роста, 0,5 мл взвеси опухолевой ткани в растворе Хенкса или среде 199 (1:10)) метастазирует преимущественно гематогенно в легкие (60-90%), реже - в печень и селезенку (см. Софьина З.П. и др. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. - М.: Медицина, 1980. - 296 с.; Dingemane К.Р. et al. В-16 Melanoma Metastasis in Mouse Liver and Lung I Urn. Metast. - 1985. - №5. - P. 50-60).However, the answer to the question: is chronic pain involved, in turn, in the progression of experimental tumors and, if so, in what way, we did not find. An ideal tumor model for solving this problem is B 16 melanoma, which spontaneously arises at the base of the ear of a C57BL / 6 mouse. The tumor is transplanted in 100% of cases, grows quite quickly and with standard subcutaneous inoculation (on 12-16 days of growth, 0.5 ml of suspension of tumor tissue in Hanks solution or medium 199 (1:10)) metastases mainly hematogenously to the lungs (60- 90%), less often - in the liver and spleen (see Sofina Z.P. et al. Experimental evaluation of antitumor drugs in the USSR and the USA. - M .: Medicine, 1980. - 296 p .; Dingemane K.R. et al B-16 Melanoma Metastasis in Mouse Liver and Lung I Urn. Metast. - 1985. - No. 5. - P. 50-60).
Техническим результатом настоящего изобретения является разработка способа модификации злокачественного роста меланомы В16 хронической болью у мышей.The technical result of the present invention is the development of a method for modifying the malignant growth of melanoma In 16 chronic pain in mice.
Технический результат достигается тем, что предварительно, за 2 недели до перевивки опухоли, создают модель хронической боли путем перевязки седалищных нервов с двух сторон, с последующей подкожной имплантацией суспензии опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в объеме 0,5 мл и в разведении 1:10 и оценкой результатов эксперимента через 1-4 недели после перевивки опухоли.The technical result is achieved by the fact that, 2 weeks before the tumor inoculation, a model of chronic pain is created by ligation of the sciatic nerves on both sides, followed by subcutaneous implantation of a suspension of tumor cells of murine melanoma B 16 in physiological solution in a volume of 0.5 ml and diluted 1:10 and evaluation of the results of the experiment 1-4 weeks after inoculation of the tumor.
Изобретение «Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы B16 у мышей» является новым, так как оно неизвестно в области экспериментальных исследований в онкологии о модификации роста меланомы В16 у мышей.The invention "A method for modifying chronic pain of malignant growth of melanoma B 16 in mice" is new, since it is not known in the field of experimental studies in oncology about modification of growth of melanoma B 16 in mice.
Новизна изобретения заключается в предваряющем подкожную перевивку меланомы B16 воссоздании модели хронической боли у мышей, что способствует более ранней гибели животных и развитию патогенеза меланомы B16 по иному «сценарию», чем при стандартном способе перевивки.The novelty of the invention lies in the pre-subcutaneous inoculation of melanoma B 16 with the reconstruction of a model of chronic pain in mice, which contributes to earlier death of animals and the development of the pathogenesis of melanoma B 16 in a different "scenario" than with the standard method of inoculation.
Изобретение «Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы В16 у мышей» является промышленно применимым, так как может быть использовано в научно-исследовательских учреждениях онкологического профиля для воспроизведения экспериментальной модели злокачественного процесса (меланомы В16) у мышей, протекающего на фоне хронического болевого синдрома, с целью изучения особенностей патогенеза этого процесса и дальнейшей разработки методов его экспериментальной коррекции.The invention "A method for modifying the chronic pain of malignant growth of melanoma B 16 in mice" is industrially applicable, as it can be used in cancer research institutions to reproduce an experimental model of the malignant process (melanoma B 16 ) in mice occurring against a background of chronic pain syndrome , in order to study the characteristics of the pathogenesis of this process and further develop methods for its experimental correction.
Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы В16 у мышей выполняется следующим образом.A method for modifying chronic pain of malignant growth of melanoma B 16 in mice is as follows.
Все манипуляции с животными производятся в боксе. Инструменты, посуду, руки дезинфицируют общепринятым способом. Каждому животному вводят ксилазолетиловый наркоз: за 10 минут до основного наркоза с целью премедикации животному внутримышечно вводят ксилазин (препарат Ксила) в дозе 0,05 мл/кг массы тела (по инструкции), затем - Золетил-50 в дозе 10 мг/100 г массы тела.All manipulations with animals are made in boxing. Tools, dishes, hands are sanitized in the usual way. Xylazoletil anesthesia is administered to each animal: 10 minutes before the main anesthesia, xylazine (Xyla preparation) is administered intramuscularly to the animal intramuscularly at a dose of 0.05 ml / kg body weight (according to instructions), then Zoetil-50 at a dose of 10 mg / 100 g body weight.
После наступления медикаментозного сна ассистент фиксирует мышь в положении на животе, удаляет шерсть сзади в районе проекции седалищных нервов и смазывает кожу 70% спиртом. Экспериментатор в стерильных условиях выделяет седалищный нерв, накладывает на него лигатуру, ушивает рану послойно и обрабатывает шов 5% спиртовым раствором йода. Через 2 недели после заживления операционной раны подкожно вводят 0,5 мл взвеси опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в разведении 1:10. Для этого, соблюдая все условия асептики, описанные выше, ассистент фиксирует мышь спиной кверху, предварительно сбрив шерсть и обработав кожу 5% спиртовым раствором йода чуть ниже правой лопатки. Экспериментатор рукой в стерильной перчатке захватывает кожную складку, в центре которой прокалывает кожу и вводит опухолевую взвесь. Затем извлекает иглу, место введения плотно прижимает ватным тампоном, смоченным в 70% спирте с небольшим добавлением йода, на 1 минуту, чтобы исключить вытекание вводимой взвеси. Контролем служили животные с перевивкой меланомы B16 в той же дозе и объеме, что и в основной группе, но без воспроизведения модели хронической боли.After the onset of drug sleep, the assistant fixes the mouse in a position on the abdomen, removes hair from behind in the area of the projection of the sciatic nerves and lubricates the skin with 70% alcohol. Under sterile conditions, the experimenter isolates the sciatic nerve, ligates it, sutures the wound in layers and processes the suture with 5% iodine alcohol solution. 2 weeks after the healing of the surgical wound, 0.5 ml of suspension of tumor cells of murine melanoma B 16 is injected subcutaneously in physiological saline at a 1:10 dilution. To do this, observing all the aseptic conditions described above, the assistant fixes the mouse with its back upward, after shaving off the coat and treating the skin with 5% alcohol iodine solution just below the right shoulder blade. The experimenter with his hand in a sterile glove captures the skin fold, in the center of which pierces the skin and introduces a tumor suspension. Then it removes the needle, the injection site is tightly pressed with a cotton swab dipped in 70% alcohol with a small addition of iodine, for 1 minute, to prevent leakage of the introduced suspension. The control was animals with graft B 16 melanoma in the same dose and volume as in the main group, but without reproducing the model of chronic pain.
Через 15 дней мыши основной группы (14 штук) начали дохнуть. Средняя продолжительность их жизни составила 19,17±1,35 дней, максимальная - 24 дня. В контрольной группе (11 мышей) - первая смерть наступила на 24 сутки, средняя продолжительность их жизни составила 30,25±1,67 дня, максимальная - 36 дней.After 15 days, the mice of the main group (14 pieces) began to die. The average life expectancy was 19.17 ± 1.35 days, the maximum - 24 days. In the control group (11 mice) - the first death occurred on the 24th day, the average life expectancy was 30.25 ± 1.67 days, the maximum - 36 days.
Как видно из представленной таблицы подкожные опухоли появлялись у мышей основной группы уже через 1 неделю после перевивки, у группы сравнения - через 2 недели. Средний объем подкожных опухолей у мышей со временем увеличивался. Однако у группы сравнения подкожная опухоль росла более активно. Так ее средний размер со 2 по 3 неделю увеличился в 3,2 раза, а с 3 по 4 - в 1,7 раза, в то время как у мышей основной группы средний размер опухоли с 1 по 2 неделю увеличился в 2,3 раза, а со 2 по 3 неделю - в 1,5 раза. В результате, у мышей основной группы, средний размер опухоли на 2 неделе эксперимента был в 1,9 раза больше, чем у группы сравнения в это же время, а на 3 неделе - достоверно не отличался от нее. Минимальный размер впервые зафиксированных подкожных опухолей у мышей основной группы (на 1 неделе) был в 2 раза больше, чем у группы сравнения (на 2 неделе), в то время как максимальный размер опухоли на 3 неделе эксперимента у мышей из группы сравнения (без боли) был в 2,5 раза больше, чем у мышей с болью. При этом у большинства мышей с болью 3 неделя - предтерминальный период, а у мышей из группы сравнения - нет.As can be seen from the table, subcutaneous tumors appeared in mice of the main group 1 week after inoculation, in the comparison group - 2 weeks later. The average volume of subcutaneous tumors in mice increased over time. However, in the comparison group, the subcutaneous tumor grew more actively. So its average size from 2 to 3 weeks increased by 3.2 times, and from 3 to 4 - by 1.7 times, while in mice of the main group the average tumor size from 1 to 2 weeks increased by 2.3 times , and from 2 to 3 weeks - 1.5 times. As a result, in mice of the main group, the average tumor size at week 2 of the experiment was 1.9 times larger than that of the comparison group at the same time, and at week 3 it was not significantly different from it. The minimum size of the first recorded subcutaneous tumors in mice of the main group (at 1 week) was 2 times larger than that of the comparison group (at 2 weeks), while the maximum tumor size at 3 weeks of the experiment in mice from the comparison group (without pain) ) was 2.5 times greater than in mice with pain. Moreover, in most mice with pain, 3 weeks is the preterm period, but in mice from the comparison group they are not.
Несмотря на то, что у мышей с болью объем опухоли нарастал менее активно, у значительного количества мышей на разных этапах исследования, начиная уже с 1 недели, отмечался ее 2-х фокусный рост. Кроме того, поверхностный некроз опухоли появлялся на неделю раньше и у большего количества животных, чем в группе сравнения.Despite the fact that in mice with pain the tumor volume was growing less actively, in a significant number of mice at different stages of the study, starting from 1 week, its 2-focal growth was noted. In addition, superficial necrosis of the tumor appeared a week earlier in more animals than in the comparison group.
У мышей из основной группы меланома В16 вела себя более агрессивно, поскольку метастазировала чаще, иногда в несколько органов и имела нетипичные для себя зоны метастазирования. Метастазы у мышей с болью регистрировались уже через неделю после перевивки, а у мышей без боли - через 4 недели. У мышей с болью опухоль метастазировала кроме типичных мест: в печень, селезенку и легкие, еще и в нетипичные: сердце, матку.In mice from the main group, melanoma B 16 behaved more aggressively because it metastasized more often, sometimes to several organs and had atypical metastasis zones. Metastases in mice with pain were recorded within a week after inoculation, and in mice without pain, after 4 weeks. In mice with pain, the tumor metastasized except for typical places: to the liver, spleen and lungs, and also to atypical: heart, uterus.
У мышей из основной группы мыши в предтерминальном состоянии регистрировались уже на 1 неделе после перевивки, с развитием процесса их относительное количество увеличивалось. У группы сравнения - с 3 недели.In mice from the main group, mice in the preterm state were registered already 1 week after inoculation; with the development of the process, their relative amount increased. The comparison group - from 3 weeks.
Технико-экономическая эффективность «Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы В16 у мышей» заключается в том, что боль изменяет патогенез меланомы B16 у мышей, приводящей к раннему выходу подкожных опухолей, раннему метастазированию, метастазированию в нетипичные места и приводящей к ранней гибели животных. Разработанный способ может служить моделью для поиска путей медикаментозного лечения злокачественных опухолей с обширным метастазированием. Способ экономичен, доступен.Technical and economic efficiency "A method for modifying chronic pain of malignant growth of melanoma B 16 in mice" is that the pain modifies the pathogenesis of melanoma B 16 in mice, leading to early exit of subcutaneous tumors, early metastasis, metastasis to atypical places and leading to early death animals. The developed method can serve as a model for finding ways of drug treatment of malignant tumors with extensive metastasis. The method is economical, affordable.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017114818A RU2650587C1 (en) | 2017-04-26 | 2017-04-26 | Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017114818A RU2650587C1 (en) | 2017-04-26 | 2017-04-26 | Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2650587C1 true RU2650587C1 (en) | 2018-04-16 |
Family
ID=61977039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017114818A RU2650587C1 (en) | 2017-04-26 | 2017-04-26 | Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2650587C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2676641C1 (en) * | 2018-04-05 | 2019-01-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of stimulating chronic pain of malignant growth in lung rats |
| RU2718671C1 (en) * | 2019-08-01 | 2020-04-13 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for reversing genetically determined inhibition of growth of a malignant tumor in experiment |
| RU2779698C1 (en) * | 2022-02-10 | 2022-09-12 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for experimental biotherapy of b16/f10 melanoma |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA009873B1 (en) * | 2004-02-06 | 2008-04-28 | Элан Фармасьютикалз, Инк. | Method for inhibiting tumor growth and/or and metastatic progression |
| RU2012123633A (en) * | 2012-06-08 | 2013-12-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии им. А.Н. Баха Российской академии наук | CELL LINE B16-TR23K AND METHOD OF ITS USE FOR RESEARCHES IN EXPERIMENTAL ONCOLOGY |
| RU2615908C1 (en) * | 2016-05-16 | 2017-04-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for murine melanoma lymphatic and hematogenous metastasis b16 simulation for nonlinear white rats |
-
2017
- 2017-04-26 RU RU2017114818A patent/RU2650587C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA009873B1 (en) * | 2004-02-06 | 2008-04-28 | Элан Фармасьютикалз, Инк. | Method for inhibiting tumor growth and/or and metastatic progression |
| RU2012123633A (en) * | 2012-06-08 | 2013-12-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии им. А.Н. Баха Российской академии наук | CELL LINE B16-TR23K AND METHOD OF ITS USE FOR RESEARCHES IN EXPERIMENTAL ONCOLOGY |
| RU2615908C1 (en) * | 2016-05-16 | 2017-04-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for murine melanoma lymphatic and hematogenous metastasis b16 simulation for nonlinear white rats |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LENTINI A. et al. Anti-invasive effects of theophylline on experimental B16-F10 melanoma lung metastasis, Cancer Journal 1997, 10(5), 274-278. * |
| КАССИЛЬ Г.Н. Наука о боли. Академия Наук СССР. Серия "Проблемы науки и технического прогресса", 2-е дополненное издание. Издательство "НАУКА" Москва, 1975. 400. * |
| КАССИЛЬ Г.Н. Наука о боли. Академия Наук СССР. Серия "Проблемы науки и технического прогресса", 2-е дополненное издание. Издательство "НАУКА" Москва, 1975. 400. LENTINI A. et al. Anti-invasive effects of theophylline on experimental B16-F10 melanoma lung metastasis, Cancer Journal 1997, 10(5), 274-278. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2676641C1 (en) * | 2018-04-05 | 2019-01-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of stimulating chronic pain of malignant growth in lung rats |
| RU2718671C1 (en) * | 2019-08-01 | 2020-04-13 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for reversing genetically determined inhibition of growth of a malignant tumor in experiment |
| RU2779698C1 (en) * | 2022-02-10 | 2022-09-12 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for experimental biotherapy of b16/f10 melanoma |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Venugopalan | Essentials of veterinary surgery | |
| Cann et al. | Spontaneous regression: a hidden treasure buried in time | |
| RU2650587C1 (en) | Method of the melanoma b16 malignant growth in mice modification with chronic pain | |
| RU2447864C1 (en) | Method of treating visual nerve and retinal diseases | |
| RU2388064C1 (en) | Method for simulation of malignant process in experiment | |
| RU2137484C1 (en) | Cellular suspension-base drug and method of treatment of acquired immunodeficiency syndrome (hiv-infection) using this preparation | |
| RU2238076C1 (en) | Method for treating and preventing diseases due to affecting biologically active points and areas | |
| RU2262941C2 (en) | Method for immunotherapy of cerebral malignant tumors | |
| Waisbren | Pyogenic Osteomyelitis and Arthritis of the Spine Treated with Combinations of Antibiotics and Gamma Globulin: A Preliminary Report | |
| RU2337704C1 (en) | Method of postsurgery rehabilitation of fishes | |
| RU2429032C1 (en) | Method of treating oropharyngeal squamous cell carcinoma | |
| RU2676641C1 (en) | Method of stimulating chronic pain of malignant growth in lung rats | |
| RU2716001C1 (en) | Method of treating acute keratoconjunctivitis of calves in field conditions | |
| Stasiowski et al. | Risk factors for occurrence of failed interscalene brachial plexus blocks for shoulder arthroscopy using 20 mL 0.5% ropivacaine: a randomised trial | |
| Sadek | THE STING THAT CURES: BEE VENOM AND ITS THERAPEUTIC FUTURE (Apis mellifera) | |
| RU2700986C1 (en) | Method for preparation of donor area for graft taking for free skin grafting | |
| RU2745236C1 (en) | Method of treatment and prevention of subclinical mastitis of cows | |
| EA004603B1 (en) | Method for preventing and treating diseases of an immune system and a remedy for carrying out said method | |
| RU2440155C1 (en) | Method of treating climacteric syndrome | |
| RU2692061C1 (en) | Method for treating chronic mastitis in cows using medical leeches | |
| RU2438676C1 (en) | Drug stimulating production of granulocyte-macrophage colony-forming factor in cells of mononuclear phagocyte system | |
| RU2452436C1 (en) | Method of treating optic nerve atrophy of vascular genesis | |
| RU2239445C1 (en) | Method for treating subclinical mastitis in lactating cows | |
| RU2517060C1 (en) | Method of treating diseases requiring stimulation of immunity and repair processes | |
| RU2435556C1 (en) | Method of treating dystrophic diseases of posterior eye pole |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190427 |