RU2648773C2 - Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС - Google Patents
Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС Download PDFInfo
- Publication number
- RU2648773C2 RU2648773C2 RU2016132731A RU2016132731A RU2648773C2 RU 2648773 C2 RU2648773 C2 RU 2648773C2 RU 2016132731 A RU2016132731 A RU 2016132731A RU 2016132731 A RU2016132731 A RU 2016132731A RU 2648773 C2 RU2648773 C2 RU 2648773C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cattle
- nodular
- virus
- nodular dermatitis
- infectious disease
- Prior art date
Links
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 20
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 20
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 18
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 3
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 claims description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 3
- 241000609846 Lumpy skin disease virus Species 0.000 description 3
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000589562 Brucella Species 0.000 description 1
- 206010006500 Brucellosis Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000700665 Sheeppox virus Species 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/533—Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способу экспресс-диагностики нодулярного дерматита крупного рогатого скота (КРС). Способ экспресс-диагностики вируса нодулярного дерматита КРС включает отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания от всех животных, находящихся в очаге инфекционного заболевания, и проведение экспресс-диагностики полученного патологического материала в течение суток методом ПЦР с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene для выявления животных-носителей вируса нодулярного дерматита на начальной стадии инфицирования, при этом учет результатов ПЦР проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, если наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают положительным - вирус нодулярного дерматита КРС присутствует, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы, если не наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают отрицательным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота отсутствует, и значения контрольных образцов также находятся в пределах нормы. 3 табл., 1 ил.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способу диагностики вируса нодулярного дерматита КРС.
Известен способ обнаружения специфических антител к вирусам оспы овец и коз методом ингибирования твердофазного иммуноферментного анализа, предусматривающий взаимодействие исследуемой сыворотки крови с антигеном вируса оспы овец и последующую детекцию иммобилизированного на твердой фазе комплекса антитело - специфический антиген поликлональным пероксидазным конъюгатом, где на первом этапе реакции происходит взаимодействие исследуемой сыворотки с культуральным антигеном вируса оспы овец, на втором этапе не вступивший в реакцию антиген взаимодействует с иммобилизированными на твердой фазе моноклональными антителами клона 08.3, обладающими специфичностью к антигенной детерминанте полипептида молекулярной массы 36-40 кД вируса оспы овец штамма "НИСХИ", а образовавшийся комплекс моноклональное антитело - антиген выявляют специфическим пероксидазным конъюгатом поликлональных антител, выделенных из гипериммунной сыворотки животных-реконвалесцентов (патент РФ №2202112, кл. A61K 39/275, G12Q 1/68).
Известен метод диагностики оспы коз и овец (Орлова Е.С. Совершенствование методов диагностики оспы овец и оспы коз: автореф. дис.канд. биол. наук / Е.С.Орлова. - Владимир, 2007 г. - 25 с.), включающий проведение ПЦР в реакционной смеси следующего состава: 2,5 мкл 10х буфера для Taq-полимеразы, 3 мМ Mg2+0,2 мМ dNTPs, 1,0 ед. Taq-полимеразы, по 10 пмоль праймеров, 3 мкл раствора вирусной ДНК и вода до конечного объема 25 мкл на ДНК-амплификаторе РТС-100 (MJ Research, США) при следующем температурном режиме: 2 мин предварительной денатурации при 94°С, 35 циклов амплификации (30 с денатурации при 94°С, 30 с отжига праймеров при 55°С, 30 с элонгации при 72°С) и 2 мин заключительной элонгации, с возможным (при необходимости) проведением второго этапа амплификации с внутренними праймерами в смеси аналогичного состава в течение 20-25 циклов, далее продукты реакции анализировали с помощью электорофореза в 2,0% агарозном геле, содержащем 0,001% бромистого этидия, при силе тока 50 мА.
Недостатком данного способа является то, что он дает только качественный результат.
Известно техническое решение (Касьян Ж.А. и др. «Разработка тест-системы для дифференциации видов бруцелл методом ПНР с учетом результатов в режиме реального времени. Проблемы особо опасных инфекций. 2016, вып. 3, с. 47-51. http://ioumal.microbe.ru/iour - прототип) отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания, экстракцию ДНК бактерий инфекционного заболевания из полученных проб, идентификацию видовой принадлежности возбудителя болезни методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией.
Недостатком данного способа является ограниченная применимость только к возбудителю бруцеллеза и отсутствие возможности диагностирования раннего развития заболевания.
Техническим результатом является расширение функциональных возможностей способа, предотвращение массового распространения заболевания и перехода его в тяжелую запущенную форму.
Технический результат достигается тем, что в способе экспресс-диагностики нодулярного дерматита крупного рогатого скота, включающем отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания, экстракцию ДНК бактерий инфекционного заболевания из полученных проб, идентификацию видовой принадлежности возбудителя болезни методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, согласно изобретению в качестве патологического материала используют пробы из очага инфекционного заболевания нодулярного дерматита, при этом отбор проб патологического материала осуществляют от всех животных, находящихся в очаге инфекционного заболевания, и проводят экспресс-диагностику полученного патологического материала в течение суток для выявления животных-носителей вируса нодулярного дерматита на начальной стадии инфицирования, при этом учет результатов полимеразной цепной реакции проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, если наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают положительным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота присутствует, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы, если не наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают отрицательным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота отсутствует и значения контрольных образцов также находятся в пределах нормы.
Новизна заявляемого способа экспресс-диагностики нодулярного дерматита крупного рогата скота состоит в идентификации вируса нодулярного дерматита в пробах патологического материала с помощью полимеразной цепной реакции (ПНР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, что в свою очередь позволяет выявить животных-носителей вируса заболевания на начальной стадии инфицирования животных.
Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».
Заявляемый способ экспресс-диагностики вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота рекомендовано использовать в специализированных ветеринарных, санитарно-эпидемиологических, животноводческих, сельскохозяйственных предприятиях, что соответствует критерию «промышленная применимость».
Сущность изобретения поясняется чертежом, где на рисунке 1 представлен график результатов экспресс-диагностики нодулярного дерматита.
Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита крупного рогатого скота осуществляют следующим образом.
В стаде овец или коз осуществляют отбор проб патологического материала от каждого животного из очага инфекционного заболевания нодулярного дерматита. При отборе проб и подготовке проб для исследования соблюдают меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды. Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.
Цельная кровь забирается в пробирку с 6% ЭДТА из расчета 50 мкл раствора ЭДГА на 1 мл крови, закрытую пробирку с кровью несколько раз переворачивают. Для получения сыворотки забирают кровь в пробирку без антикоагулянта. Помимо крови, в качестве исследуемого материала также используют фрагменты тканей и органов (нодулы, селезенка, лимфатические узлы), которые отбирают в стерильный контейнер. Для подготовки пробы к проведению полимеразной цепной реакции используют различные методики, с помощью которых осуществляют экстракцию ДНК из полученных образцов сыворотки крови животных и удалении или нейтрализации посторонних примесей для получения препарата ДНК с чистотой, пригодной для проведения полимеразной цепной реакции.
После подготовки исследуемого материала приступают к проведению анализа, состоящего из 3 этапов:
- экстракция ДНК;
- проведение полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени;
- учет результатов анализа.
ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени имеет ряд значительных преимуществ:
- объединение этапов амплификации и детекции результатов. Появляется возможность оценить кинетику процесса, которая зависит от начального количества исследуемого материала;
- существенное снижение риска контаминации и ошибок при анализе результатов;
- высокая специфичность реакции за счет использования высокоспецифичных флуоресцентных зондов;
- высокая производительность;
- упрощение требований к организации ПЦР-лаборатории;
- возможность количественной оценки исходной ДНК матрицы;
- регистрация и учет данных в электронном формате.
ПЦР в реальном времени характеризуется возможностью проведения качественного и количественного анализа. Регистрируемое в процессе амплификации нарастание сигнала от отделенного флуорофора прямо пропорционально увеличению концентрации синтезированных специфических продуктов и отражает концентрацию ДНК в исходной матрице.
Экстракция ДНК
Перед выделением ДНК осуществляют подготовку исследуемых проб с помощью набора реагентов «ПЦР-НОДУЛЯРНЫЙ ДЕРМАТИТ КРС-ФАКТОР», состоящий из 2 комплектов (таблица 1 и 2).
При подготовке образцов в отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию: 10 мкл ПЦР СМЕСЬ LSDV, 5 мкл смеси ПЦР БУФЕР LSDV, 0,5 мкл TAQ POLYMERASE, данную смесь перемешивают и сбрасывают капли кратковременным центрифугированием. Затем отбирают необходимое количество пробирок для амплификации ДНК исследуемых и контрольных проб, вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси. Используя наконечники с фильтром, в подготовленные пробирки добавляют:
1) отрицательный контроль ПЦР (К-) - вносят в пробирку по 10 мкл отрицательного контрольного образца;
2) по 10 мкл ДНК из исследуемых образцов (включая ОКО) в соответствующие пробирки;
3) положительный контроль ПЦР (К+) - вносят в пробирку 10 мкл положительного контрольного образца LSDV.
При этом не наносят маркировку на крышку пробирок, т.к. это затрудняет процесс считывания амплификатором.
Проведение полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени.
Устанавливают пробирки в реакционный модуль прибора «Rotor-Gene 3000/6000» (Q), в котором осуществляют полимеразную цепную реакцию с флуоресцентным детектором в режиме реального времени. В соответствии с протоколом анализа прибор программируют, устанавливают параметры температурно-временного режима амплификации, детекцию флуоресцентного сигнала назначают после стации отжига праймеров, после чего начинают процесс амплификации с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. В его основе лежит принцип флуоресцентной детекции продуктов полимеразной цепной реакции непосредственно в ходе амплификации. Детекция продуктов амплификации проводится прямо в реакционной среде через стенки или крышку закрытой пробирки.
Учет результатов полимеразной цепной реакции проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (рисунок 1). Образец считают положительным (вирус нодулярного дерматита крупного рогатого скота присутствует), если наблюдают рост специфического сигнала, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы (таблица 3). Образец считают отрицательным (вирус нодулярного дерматита крупного рогатого скота отсутствует), если не наблюдают рост специфического сигнала, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы.
Таким образом, результаты исследований показывают, что заявляемый способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС, состоящий из идентификации вируса нодулярного дерматита в пробах патологического материала с помощью полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени позволяет выявить животных-носителей вируса нодулярного дерматита на начальной стадии их инфицирования, что в свою очередь не позволит заболеванию массово распространиться, перейти в более тяжелую и запущенную форму.
Claims (1)
- Способ экспресс-диагностики вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота, включающий отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания, экстракцию ДНК бактерий инфекционного заболевания из полученных проб, идентификацию видовой принадлежности возбудителя болезни методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, отличающийся тем, что в качестве патологического материала используют пробы из очага инфекционного заболевания нодулярного дерматита крупного рогата скота, при этом отбор проб патологического материала осуществляют от всех животных, находящихся в очаге инфекционного заболевания, и проводят экспресс-диагностику полученного патологического материала в течение суток для выявления животных-носителей вируса нодулярного дерматита на начальной стадии инфицирования, при этом учет результатов полимеразной цепной реакции проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, если наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают положительным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота присутствует, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы, если не наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают отрицательным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота отсутствует, и значения контрольных образцов также находятся в пределах нормы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016132731A RU2648773C2 (ru) | 2016-08-08 | 2016-08-08 | Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016132731A RU2648773C2 (ru) | 2016-08-08 | 2016-08-08 | Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016132731A RU2016132731A (ru) | 2018-02-13 |
| RU2648773C2 true RU2648773C2 (ru) | 2018-03-28 |
Family
ID=61227459
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016132731A RU2648773C2 (ru) | 2016-08-08 | 2016-08-08 | Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2648773C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2719719C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-04-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ выявления ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117987601A (zh) * | 2024-04-07 | 2024-05-07 | 山东农业大学 | 一种牛结节性皮肤病病毒的检测试剂盒及应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2202112C1 (ru) * | 2001-07-26 | 2003-04-10 | ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ обнаружения специфических антител к вирусам оспы овец и оспы коз методом двухфазного ингибирования твердофазного иммуноферментного анализа на основе моноклональных антител |
-
2016
- 2016-08-08 RU RU2016132731A patent/RU2648773C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2202112C1 (ru) * | 2001-07-26 | 2003-04-10 | ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ обнаружения специфических антител к вирусам оспы овец и оспы коз методом двухфазного ингибирования твердофазного иммуноферментного анализа на основе моноклональных антител |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Mohammed Body et al. Clinico-Histopathological Findings and PCR Based Diagnosis of Lumpy Skin Disease in the Sultanate of Oman. Pakistan Veterinary Journal, 2012, vol. 32(2), pages 206-210. * |
| Е.С.Орлова. Совершенствование методов диагностики оспы овец и оспы коз. Авто дис. на соиск. уч. степ. к.б.н, Владимир, 2007. * |
| Е.С.Орлова. Совершенствование методов диагностики оспы овец и оспы коз. Автореферат дис. на соиск. уч. степ. к.б.н, Владимир, 2007. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2719719C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-04-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ выявления ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016132731A (ru) | 2018-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sarasquete et al. | Minimal residual disease monitoring in multiple myeloma: a comparison between allelic-specific oligonucleotide real-time quantitative polymerase chain reaction and flow cytometry | |
| Gwida et al. | Comparison of diagnostic tests for the detection of Brucella spp. in camel sera | |
| Elfaki1ABCDEF et al. | Evaluation of culture, tube agglutination, and PCR methods for the diagnosis of brucellosis in humans | |
| JP2011508892A (ja) | 複合試料マトリクスからの細胞の単離および計数の方法 | |
| Çiftci et al. | Evaluation of PCR methods for detection of Brucella strains from culture and tissues | |
| JP2009507243A (ja) | 感染症を診断する方法 | |
| Carli et al. | Real-time polymerase chain reaction for detection of Mycoplasma gallisepticum in chicken trachea | |
| RU2648773C2 (ru) | Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита КРС | |
| CN110564880A (zh) | 检测布鲁氏菌减毒活疫苗株和野毒株的方法及应用 | |
| Chen et al. | Ultra-sensitive and point-of-care detection of Capripoxvirus (CaPV) based on loop-mediated amplification (LAMP) and trans-cleavage activity of CRISPR/Cpf1 | |
| CN104263839A (zh) | 布鲁氏杆菌 lamp-lfd检测试剂盒及其检测方法 | |
| CN112501323A (zh) | 基于raa-lf技术的金黄色葡萄球菌扩增引物及应用 | |
| WO2005106476A2 (en) | Method for diagnosing infectious diseases | |
| RU2648845C2 (ru) | Способ экспресс-диагностики оспы овец и коз | |
| Sabry et al. | A polymerase chain reaction and enzyme linked immunosorbent assay based approach for diagnosis and differentiation between vaccinated and infected cattle with Mycobacterium bovis | |
| Inzana et al. | Commercial methods in clinical veterinary microbiology | |
| CN111647690B (zh) | 用于检测covid-19病毒的rt-raa引物对和诊断试剂盒 | |
| Singh et al. | Current diagnostic techniques of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in domestic ruminants | |
| Kaya et al. | Comparison of tuberculin skin test, IFN-γ assay, Real Time PCR and Lateral Flow Rapid Test in diagnosis of field outbreaks of bovine tuberculosis | |
| Carmina et al. | Indirect Immunoperoxidase Test (IPT) for Detection of Antibodies Against African Swine Fever Virus (ASFV) on African Green Monkey Cell Lines (Vero, MS) | |
| Gupte et al. | Diagnostic approach to brucellosis | |
| Saushkin et al. | Strip-dried biofluids for the detection of specific antibodies in small, infected ruminants | |
| Singh et al. | Development and Standardization of Visual Loop Mediated Isothermal Amplification (LAMP) Assay for Specific Diagnosis of Johne's Disease | |
| Fenollar et al. | Diagnostic strategy of rickettsioses and ehrlichioses | |
| RU2728660C1 (ru) | Способ определения ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180809 |