RU2615568C1 - Method for biological active additive production - Google Patents

Method for biological active additive production Download PDF

Info

Publication number
RU2615568C1
RU2615568C1 RU2016103231A RU2016103231A RU2615568C1 RU 2615568 C1 RU2615568 C1 RU 2615568C1 RU 2016103231 A RU2016103231 A RU 2016103231A RU 2016103231 A RU2016103231 A RU 2016103231A RU 2615568 C1 RU2615568 C1 RU 2615568C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
biomass
yeast
hydrolysis
temperature
enzymes
Prior art date
Application number
RU2016103231A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Елена Михайловна Серба
Марина Борисовна Оверченко
Любовь Вячеславовна Римарева
Кирилл Викторович Рачков
Вера Евгеньевна Давыдкина
Елена Николаевна Соколова
Наталия Сергеевна Погоржельская
Виктор Антонович Поляков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи" (ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи" (ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии") filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи" (ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии")
Priority to RU2016103231A priority Critical patent/RU2615568C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2615568C1 publication Critical patent/RU2615568C1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/18—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/14—Yeasts or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: invention can be used for production of biologically active additives (BAA) for food, nutrition and medical supplies. The method consists in two-step hydrolysis of the combined yeast and fungal biomass under the action of intracellular enzymes of Aspergillus oryzae RCAM 01134 fungus to provide the target product as a fermentative lysate. At the 1st stage, the temperature is maintained at 48-50°C for 1 hour and 45 minutes - 2 hours and 15 minutes. At the 2nd stage of hydrolysis, the temperature is lowered to 38-40°C and the process is continued for 3 hours and 45 minutes - 4 hours and 15 minutes.
EFFECT: invention reduces the process of BAA obtaining, provides increased depth of combined microbial biomass polymers hydrolysis with increased formation of low molecular weight peptides, free amino acids and oligosaccharides, reception of BAA with a wide range of functional properties.
4 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к биотехнологии, может быть использовано при производстве биологически активной добавки пищевого и кормового назначения.The invention relates to biotechnology, can be used in the production of biologically active additives for food and feed purposes.

Известны способы автолиза дрожжевой биомассы с получением автолизированных клеток дрожжей, белково-аминокислотных добавок, биологически активных добавок на основе деструкции внутриклеточных полимеров под действием эндоферментов дрожжевой клетки /1, 2/.Known methods for autolysis of yeast biomass with obtaining autolized yeast cells, protein-amino acid additives, dietary supplements based on the destruction of intracellular polymers under the action of yeast cell endoenzymes / 1, 2 /.

Недостатком данных способов является невысокая степень гидролиза белка протоплазмы дрожжевых клеток, полисахаридов клеточных стенок, низкий выход биологически активных веществ, необходимость дополнительного использования активаторов автолиза, а также длительный процесс гидролиза в результате невысокой активности внутриклеточных ферментов дрожжей. При этом результат автолиза и состав автолизатов полностью зависит от физиологического состояния клетки, от активности внутриклеточных ферментов, что обуславливает нестабильность качественных показателей получаемых препаратов.The disadvantage of these methods is the low degree of hydrolysis of the protoplasmic protein of yeast cells, polysaccharides of cell walls, the low yield of biologically active substances, the need for additional use of activators of autolysis, as well as the long hydrolysis process as a result of the low activity of intracellular yeast enzymes. In this case, the result of autolysis and the composition of autolysates completely depends on the physiological state of the cell, on the activity of intracellular enzymes, which leads to instability of the quality indicators of the preparations obtained.

Известен способ получения ферментолизата дрожжевой биомассы, предусматривающий обработку биомассы клеток дрожжей гидролитическими ферментами, продуцируемыми микромицетом Aspergillus oryzae F-683 /3/.A known method of producing a yeast biomass fermentolizate, comprising treating the biomass of yeast cells with hydrolytic enzymes produced by Aspergillus oryzae F-683/3 / micromycete.

Однако биологическая активность ферментолизата дрожжей, получаемого данным способом, недостаточно высокая, так как в качестве источника ферментов используется микромицет Aspergillus oryzae F-683, синтезирующий гидролитические ферменты с низким уровнем активности /4/.However, the biological activity of the yeast fermentolysate obtained by this method is not high enough, since Aspergillus oryzae F-683 micromycete, synthesizing hydrolytic enzymes with a low level of activity / 4 /, is used as a source of enzymes.

Известен способ получения ферментолизата биомассы гриба Aspergillus oryzae для получения биологически активных веществ /5/.A known method of producing a fermentolizate biomass of the fungus Aspergillus oryzae to obtain biologically active substances / 5 /.

Однако в известном способе не описаны условия обработки мицелиальной биомассы гидролитическими ферментами, температура и продолжительность гидролиза, не указаны дозировки ферментов, входящих в комплекс, что не позволяет воспроизвести этот известный способ в части осуществления процесса ферментолиза или автолиза мицелиальной биомассы для получения биологически активной добавки. Кроме того, в работе используется штамм Aspergillus oryzae РОМ-156 (ВКПМ F-931) - продуцент экзопротеаз, синтезирующий сопутствующие ферменты: α-амилазу, ксиланазу, не участвующие в конверсии полимеров микробной биомассы /6, 7/.However, in the known method, the conditions for treating mycelial biomass with hydrolytic enzymes, the temperature and duration of hydrolysis are not described, the dosages of the enzymes included in the complex are not indicated, which does not allow reproducing this known method in terms of the process of fermentolysis or autolysis of mycelial biomass to obtain a biologically active additive. In addition, the strain Aspergillus oryzae ROM-156 (VKPM F-931) is used - an exoprotease producer synthesizing the accompanying enzymes: α-amylase, xylanase, which are not involved in the conversion of microbial biomass polymers / 6, 7 /.

Из известных способов наиболее близким аналогом предлагаемого способа является способ получения биологически активной добавки /8/, предусматривающий предварительную термическую обработку дрожжевой биомассы с целью инактивации внутриклеточных ферментов для устранения процессов брожения, вызывающих резкое вспенивание и увеличение объема дрожжевой суспензии, и проведение дальнейшего гидролиза полимеров биомассы дрожжей комплексом экзогенных гидролитических ферментов.Of the known methods, the closest analogue of the proposed method is a method for producing a biologically active additive / 8 /, which involves preliminary heat treatment of yeast biomass in order to inactivate intracellular enzymes to eliminate fermentation processes that cause sharp foaming and increase the volume of yeast suspension, and further hydrolysis of yeast biomass polymers a complex of exogenous hydrolytic enzymes.

При этом в известном способе в качестве субстрата используется дрожжевая биомасса, обработанная ферментной композицией, содержащей комплекс экзогенных β-глюканаз, маннаназы, хитиназы, а также используется культуральная жидкость мицелиального гриба Aspergillus oryzae F-931 - продуцента экзопротеаз, β-глюканазы, α-амилазы, ксиланазы 161 и практически не используются нуклеазы, необходимые для гидролиза нуклеиновых кислот. Недостатком этого способа является высокий расход ферментов из-за низкой активности внутриклеточных (эндогенных) ферментов дрожжей и отсутствия ферментов нуклеазного действия, катализирующих гидролиз нуклеиновых кислот, наличия в культуральной жидкости мицелиального гриба ферментов α-амилазы и ксиланазы, не нужных для гидролиза полимеров микробной биомассы ввиду отсутствия в ней крахмала и ксиланов, а также ограниченный аминокислотный состав белков и низкое содержание хитино-глюканового комплекса в дрожжевой биомассе, что не обеспечивает создание биологически активной белково-аминокислотной добавки с широким спектром функциональных свойств.Moreover, in the known method, a yeast biomass is used as a substrate, treated with an enzyme composition containing a complex of exogenous β-glucanases, mannanase, chitinase, and also the culture fluid of the mycelial fungus Aspergillus oryzae F-931 - producer of exoprotease, β-glucanase, α-amyl , xylanases 161 and practically no nucleases necessary for hydrolysis of nucleic acids are used. The disadvantage of this method is the high consumption of enzymes due to the low activity of intracellular (endogenous) yeast enzymes and the absence of nuclease enzymes that catalyze the hydrolysis of nucleic acids, the presence of α-amylase and xylanase enzymes in the culture fluid of the mycelial fungus, which are not necessary for hydrolysis of microbial biomass polymers due to the absence of starch and xylans in it, as well as the limited amino acid composition of proteins and the low content of chitin-glucan complex in yeast biomass, which does not provide Chiva creating biologically active protein and amino acid additives with a wide range of functional properties.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является повышение эффективности процесса гидролиза полимеров микробной биомассы, сокращение продолжительности процесса, исключение или существенное снижение расхода экзогенных ферментов в результате действия внутриклеточных ферментов используемого гриба Aspergillus oryzae 12-84 (RCAM 01134), а также повышение качества и биологической ценности целевого продукта за счет обогащения гидролизата дрожжевой биомассы низкомолекулярными биологически активными продуктами глубокого ферментативного гидролиза внутриклеточных белковых и углеводных полимеров грибной биомассы.The technical result achieved by the present invention is to increase the efficiency of the process of hydrolysis of polymers of microbial biomass, reduce the duration of the process, eliminate or significantly reduce the consumption of exogenous enzymes as a result of the action of intracellular enzymes of the used Aspergillus oryzae 12-84 fungus (RCAM 01134), as well as increase the quality and biological the value of the target product due to the enrichment of the yeast biomass hydrolyzate with low molecular weight biologically active products of a deep enzyme ivnogo intracellular hydrolysis of protein and carbohydrate polymers fungal biomass.

Указанный технический результат достигается за счет того, что в заявляемом способе в качестве субстрата используется объединенная микробная биомасса, представляющая собой смесь дрожжевой и грибной биомассы в соотношении 1:0,5, при этом грибная биомасса является источником биологически полноценных белков с высоким содержанием незаменимых аминокислот, ценных полиаминосахаридов, а также ферментов, синтезируемых высокопродуктивным штаммом Aspergillus oryzae RCAM 01134 - продуцентом комплекса протеиназ и пептидаз, нуклеаз, β-глюканазы, маннаназы, хитиназы, уровень активности которых превышает активность штамма Aspergillus oryzae F-931, используемого в известном способе: по нуклеазам в 24,0 раза, по хитиназе - в 3,0 раза, по β-глюканазе - в 1,7 раза, по маннаназе - в 1,4 (табл. 1), что позволяет повысить интенсивность и глубину гидролиза полимеров объединенной микробной биомассы.The specified technical result is achieved due to the fact that in the claimed method, the combined microbial biomass is used as a substrate, which is a mixture of yeast and mushroom biomass in a ratio of 1: 0.5, while the mushroom biomass is a source of biologically complete proteins with a high content of essential amino acids, valuable polyaminosaccharides, as well as enzymes synthesized by the highly productive strain Aspergillus oryzae RCAM 01134 - producer of a complex of proteinases and peptidases, nucleases, β-glucanases, mannanases, chitin basics whose activity level exceeds the activity of the Aspergillus oryzae F-931 strain used in the known method: 24.0 times for nucleases, 3.0 times for chitinase, 1.7 times for β-glucanase, and 1.7 times for mannanase 1.4 (table. 1), which allows to increase the intensity and depth of hydrolysis of polymers of the combined microbial biomass.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Кроме того, используемая в заявляемом способе грибная биомасса содержит более высокое количество полисахаридов (38,6%), хитина (18,5%), а также незаменимых аминокислот в составе белка - триптофана (20,7%) и метионина (9,6%), что в 1,4; 9,3; 12,2 и 3,7 раза соответственно превосходит аналогичные показатели дрожжевой биомассы, используемой в известном способе (табл. 2). В то же время в заявляемом способе аминокислотный состав грибных белков балансируется более высоким содержанием в дрожжевом белке лейцина (в 1,6 раза), фенилаланина с тирозином (в 1,4 раза) и валина (в 1,6 раза). Различия в аминокислотном составе белков дрожжевой и грибной биомассы позволяют получить биологически активную белково-аминокислотную добавку, обогащенную ценными полисахаридами и незаменимыми аминокислотами, что расширяет спектр функциональных свойств получаемых на их основе биопрепаратов.In addition, the fungal biomass used in the claimed method contains a higher amount of polysaccharides (38.6%), chitin (18.5%), as well as essential amino acids in the composition of the protein tryptophan (20.7%) and methionine (9.6 %), which is 1.4; 9.3; 12.2 and 3.7 times respectively superior to similar indicators of yeast biomass used in the known method (table. 2). At the same time, in the claimed method, the amino acid composition of mushroom proteins is balanced by a higher content of leucine (1.6 times), phenylalanine with tyrosine (1.4 times) and valine (1.6 times) in the yeast protein. Differences in the amino acid composition of proteins of yeast and fungal biomass make it possible to obtain a biologically active protein-amino acid supplement enriched with valuable polysaccharides and essential amino acids, which expands the range of functional properties of the biological products obtained on their basis.

Питательная ценность объединенной микробной биомассы определяется и ее богатым витаминным комплексом. В грибной биомассе, как и в дрожжевой, достаточно высокое содержание витаминов группы В, играющих важную роль в обменных процессах. При этом в дрожжевой биомассе отмечено более высокое содержание ниацина (В3) и пиридоксина (В6), а в грибной - тиамина (B1) и холина (В4), что также способствует получению белково-аминокислотной добавки со сбалансированным составом витаминов.The nutritional value of the combined microbial biomass is also determined by its rich vitamin complex. In mushroom biomass, as in yeast, there is a rather high content of B vitamins, which play an important role in metabolic processes. At the same time, a higher content of niacin (B 3 ) and pyridoxine (B 6 ) was noted in yeast biomass, and thiamine (B 1 ) and choline (B 4 ) were found in mushroom biomass, which also contributes to the production of a protein-amino acid supplement with a balanced composition of vitamins.

Повышенное содержание ценных полисахаридов в грибной биомассе, включающих β-глюканы, маннаны, хитин, сказывается на функциональных свойствах, получаемых по заявленному способу биологически активных добавок: на увеличении их иммуномодулирующей, противоопухолевой, сорбционной и антимикробной способности.The increased content of valuable polysaccharides in mushroom biomass, including β-glucans, mannans, chitin, affects the functional properties obtained by the claimed method of biologically active additives: an increase in their immunomodulating, antitumor, sorption and antimicrobial ability.

Наличие высокого количества триптофана в ферментолизатах микробной биомассы позволяет использовать их для создания натуральных продуктов - антидепрессантов, способствующих стабилизации настроения, снятию усталости, беспокойства и напряжения, нормализации сна. Триптофан, являясь предшественником ниацина (витамина В3), способствует сдерживанию первичного образования компонентов жира, что снижает риск ожирения, а также способствует стимуляции синтеза гормона роста. Присутствие в грибной биомассе большого количества метионина придает ферментолизатам антиоксидантные и антитоксические свойства, способствует образованию иммунных клеток и улучшению функционирования нервной системы организма.The presence of a high amount of tryptophan in the microbial biomass fermentolysates allows using them to create natural products - antidepressants that help stabilize mood, relieve fatigue, anxiety and tension, and normalize sleep. Tryptophan, being a precursor of niacin (vitamin B 3 ), helps to inhibit the primary formation of fat components, which reduces the risk of obesity, and also stimulates the synthesis of growth hormone. The presence of a large amount of methionine in the mushroom biomass gives antioxidant and antitoxic properties to fermentolizates, promotes the formation of immune cells and improves the functioning of the nervous system of the body.

Кроме того, предлагаемый способ позволяет использовать остаточную биомассу микромицета как отход ферментного производства, а остаточную дрожжевую биомассу как отход бродильных производств, что обеспечит снижение финансовых затрат на производство биологически активных белково-аминокислотных добавок за счет низкой стоимости субстрата, будет способствовать ресурсосбережению, снижению техногенного воздействия биотехнологических производств в результате переработки отходов.In addition, the proposed method allows the use of residual biomass of micromycete as a waste of enzyme production, and residual yeast biomass as a waste of fermentation, which will reduce the financial costs of producing biologically active protein-amino acid additives due to the low cost of the substrate, will contribute to resource saving, reduction of technological impact biotechnological industries as a result of waste processing.

Указанный технический результат достигается тем, что способ получения биологически активной добавки заключается в использовании в качестве субстрата объединенной микробной биомассы, представляющей собой смесь дрожжевой и грибной биомассы в соотношении 1:0,5, в осуществлении двухстадийного гидролиза высокомолекулярных полимеров дрожжевой и грибной биомассы под действием внутриклеточных ферментов гриба Aspergillus oryzae RCAM 01134, катализирующих глубокий гидролиз глюканов, маннанов и хитина клеточных стенок, а также внутриклеточных белковых веществ и нуклеиновых кислот, с получением целевого продукта в виде ферментолизата микробной биомассы (объединенной дрожжевой и грибной биомассы).The specified technical result is achieved in that the method for producing a biologically active additive consists in using a combined microbial biomass as a substrate, which is a mixture of yeast and mushroom biomass in a ratio of 1: 0.5, in the implementation of two-stage hydrolysis of high molecular weight polymers of yeast and fungal biomass under the action of intracellular enzymes of the fungus Aspergillus oryzae RCAM 01134, catalyzing the deep hydrolysis of glucans, mannans and chitin of the cell walls, as well as intracellular protein ves ETS and nucleic acids, to give the desired product as a fermentative microbial biomass (the combined yeast and fungal biomass).

Способ согласно изобретению предусматривает приготовление водной суспензии дрожжей Saccharomyces cerevisiae (дрожжевой биомассы), инактивирование внутриклеточных ферментов дрожжей путем их термической обработки при температуре 85-95°С в течение 15-20 мин, охлаждение до температуры 55-56°С и смешивание в соотношении 1:0,5 с грибной биомассой Aspergillus oryzae RCAM 01134, содержащей активные внутриклеточные ферменты. Далее осуществляют двухстадийный гидролиз высокомолекулярных полимеров объединенной микробной (дрожжевой и грибной) биомассы. При этом на 1-й стадии температура гидролиза поддерживается на уровне 48-50°С в течение 1 ч 45 мин - 2 ч 15 мин для осуществления деструкции белково-полисахаридных структур клеточных стенок. На 2-й стадии температуру снижают до 38-40°С во избежание инактивации эндогенных ферментов протеолитического действия и процесс продолжают в течение 3 ч 45 мин - 4 ч. 15 мин для гидролиза внутриклеточных белковых полимеров и нуклеиновых кислот.The method according to the invention involves the preparation of an aqueous suspension of Saccharomyces cerevisiae yeast (yeast biomass), inactivation of intracellular yeast enzymes by heat treatment at a temperature of 85-95 ° C for 15-20 minutes, cooling to a temperature of 55-56 ° C and mixing in the ratio of 1 : 0.5 with Aspergillus oryzae RCAM 01134 mushroom biomass containing active intracellular enzymes. Next, a two-stage hydrolysis of high molecular weight polymers of the combined microbial (yeast and fungal) biomass is carried out. Moreover, at the 1st stage, the hydrolysis temperature is maintained at 48-50 ° C for 1 h 45 min - 2 h 15 min for the destruction of protein-polysaccharide structures of cell walls. At the 2nd stage, the temperature is reduced to 38-40 ° C in order to avoid inactivation of endogenous proteolytic enzymes and the process is continued for 3 hours 45 minutes - 4 hours 15 minutes for the hydrolysis of intracellular protein polymers and nucleic acids.

В заявляемом способе исключается дополнительное введение экзогенных ферментов маннано-, хитинолитического, β-глюканазного и нуклеазного действия, так как используемый гриб Aspergillus oryzae RCAM 01134 обладает указанными активностями в необходимом количестве, и при этом достигается существенное снижение продолжительности процесса гидролиза (до 6 часов) по сравнению с известным способом, где продолжительность гидролиза составляет 12-18 часов.The claimed method excludes the additional introduction of exogenous enzymes of mannan, chitinolytic, β-glucanase and nuclease action, since the Aspergillus oryzae RCAM 01134 fungus has the indicated activities in the required amount, and at the same time a significant reduction in the duration of the hydrolysis process (up to 6 hours) is achieved by compared with the known method, where the duration of hydrolysis is 12-18 hours.

Способом согласно изобретению рекомендуется проведение при определенных режимных параметрах 2-стадийного ферментативного гидролиза объединенной в соотношении 1:0,5 биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae и гриба Aspergillus oryzae RCAM 01134 внутриклеточными ферментами гриба протеолитического, β-глюканазного, маннанолитического, хитинолитического и нуклеазного действия, что позволяет повысить качество и биологическую ценность гидролизатов за счет более глубокого ферментативного гидролиза основных субклеточных полимеров микробной биомассы с образованием биологически активных легкоусвояемых продуктов гидролиза с высоким содержанием свободных незаменимых аминокислот, редуцирующих углеводов, низкомолекулярных пептидов и нуклеотидов в результате действия собственной ферментативной системы грибной биомассы, что позволяет расширить спектр функциональных свойств биологически активных добавок, получаемых по заявляемому способу.By the method according to the invention, it is recommended that, under certain operating parameters, a 2-stage enzymatic hydrolysis of the biomass of Saccharomyces cerevisiae yeast and Aspergillus oryzae RCAM 01134 yeast biomass combined with intracellular enzymes of the proteolytic, β-glucanase, mannanolytic, chitinolytic and to increase the quality and biological value of hydrolysates due to deeper enzymatic hydrolysis of the main subcellular polymers of microbial biomass with the formation m bioactive digestible hydrolysis products with a high content of free essential amino acids, reducing carbohydrates, low molecular weight peptides and nucleotides by the action of its own enzymatic fungal biomass system, thus extending the range of functional properties of biologically active additives, obtained by the claimed method.

Для сравнения качества биологически активной добавки, получаемой в результате реализации способа согласно изобретению, с качеством продукта, получаемого в результате осуществления процесса по наиболее близкому аналогу, приводим таблицы 3 и 4.To compare the quality of biologically active additives obtained as a result of the implementation of the method according to the invention, with the quality of the product obtained as a result of the process according to the closest analogue, we present tables 3 and 4.

Получаемый по заявленному способу препарат содержит биологически активные продукты глубокого ферментативного гидролиза полимеров дрожжевой и грибной биомассы: биологически активные пептиды, незаменимые и заменимые аминокислоты, биологически активные продукты гидролиза полисахаридов клеточных стенок и нуклеиновых кислот. Препарат рекомендуется к использованию как биологически активная добавка.Obtained by the claimed method, the preparation contains biologically active products of deep enzymatic hydrolysis of polymers of yeast and fungal biomass: biologically active peptides, essential and non-replaceable amino acids, biologically active products of hydrolysis of polysaccharides of cell walls and nucleic acids. The drug is recommended for use as a dietary supplement.

Figure 00000003
Figure 00000003

Figure 00000004
Figure 00000004

Медико-биологические исследования биологически активной добавки (БАД), получаемой по заявленному способу, показали, что испытанная добавка обладает антиоксидантными, иммуномодулирующими и антиканцерогенными свойствами. Клинические исследования эффективности ферментолизатов дрожжевой биомассы в процессе реабилитации больных с черепно-мозговой травмой (ЧМТ) показали, что испытанные препараты влияли на коррекцию здоровья, улучшая функциональное состояние организма у больных, перенесших ЧМТ. Кроме того, биологически активная добавка, получаемая по заявленному способу, обладает антимикробной способностью, антитоксическими свойствами, способствует улучшению функций нервной системы, а также стимулирует синтез ростовых факторов. Выявленные эффекты указывают на возможность создания на основе ферментолизата дрожжевой и грибной биомассы эффективных функциональных продуктов питания.Biomedical studies of biologically active additives (BAA) obtained by the claimed method showed that the tested additive has antioxidant, immunomodulatory and anticarcinogenic properties. Clinical studies of the effectiveness of yeast biomass fermentolysates in the rehabilitation of patients with traumatic brain injury (TBI) showed that the tested drugs influenced the correction of health, improving the functional state of the body in patients after TBI. In addition, the biologically active additive obtained by the claimed method has antimicrobial ability, antitoxic properties, improves the functions of the nervous system, and also stimulates the synthesis of growth factors. The revealed effects indicate the possibility of creating effective functional foods based on the fermentolizate of yeast and fungal biomass.

Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.The following are examples illustrating the invention.

Пример 1. Готовят водную суспензию из 100 г сухих пекарных дрожжей и 200 см3 воды. Смесь тщательно перемешивают. Для инактивации эндогенных ферментов дрожжевых клеток приготовленную суспензию нагревают до температуры 85-95°С и выдерживают при этой температуре в течение 15-20 мин, после чего смесь охлаждают до температуры 55-56°С. Далее готовят объединенную микробную биомассу.Example 1. An aqueous suspension of 100 g of dry baking yeast and 200 cm 3 of water is prepared. The mixture is thoroughly mixed. To inactivate endogenous enzymes of yeast cells, the prepared suspension is heated to a temperature of 85-95 ° C and maintained at this temperature for 15-20 minutes, after which the mixture is cooled to a temperature of 55-56 ° C. Next, prepare the combined microbial biomass.

Для этого к охлажденной дрожжевой суспензии, содержащей 100 г сухих дрожжей, добавляют в соотношении 1:0,5 грибную биомассу в количестве 50 г сухих веществ, полученной при культивировании штамма Aspergillus oryzae RCAM 01134 на питательной среде следующего состава, %: ячменная мука - 3,0; пшеничные отруби - 3,0; KH2PO4 - 1,5; остальное - водопроводная вода, рН - естественный. Штамм культивирован в аэробных условиях при температуре 32°С в течение 42 ч. Уровень активности ферментов, синтезируемых штаммом Aspergillus oryzae RCAM 01134, составил: по протеазе - 30,7 ед. ПС/см3, по β-глюканазе - 6,8 ед. β-ГкС/см3, по нуклеазам - 4,8⋅10-3 ед. НС/см3, по хитиназе - 0,21 ед. ХС/см3, по маннаназе - 0,82 ед. МС/см3. По окончании ферментации биомассу гриба, содержащую активные внутриклеточные ферменты, используют для получения ферментолизата объединенной микробной биомассы.To do this, to a cooled yeast suspension containing 100 g of dry yeast, add 1: 0.5 mushroom biomass in an amount of 50 g of dry matter obtained by cultivating Aspergillus oryzae RCAM 01134 strain on a nutrient medium of the following composition,%: barley flour - 3 0; wheat bran - 3.0; KH 2 PO 4 - 1.5; the rest is tap water, the pH is natural. The strain was cultured under aerobic conditions at a temperature of 32 ° C for 42 hours. The activity level of enzymes synthesized by the strain Aspergillus oryzae RCAM 01134 was: for the protease - 30.7 units. PS / cm 3 for β-glucanase - 6.8 units. β-GCS / cm 3 , for nucleases - 4.8⋅10 -3 units. NS / cm 3 for chitinase - 0.21 units. Cholesterol / cm 3 , for mannanase - 0.82 units. MS / cm 3 . After fermentation, the fungal biomass containing active intracellular enzymes is used to obtain the combined microbial biomass fermentolizate.

Ферментативный гидролиз полученной объединенной микробной биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae и биомассы гриба Aspergillus oryzae RCAM 01134 осуществляют в две стадии при постоянном перемешивании.The enzymatic hydrolysis of the resulting combined microbial biomass of the yeast Saccharomyces cerevisiae and the biomass of the fungus Aspergillus oryzae RCAM 01134 is carried out in two stages with constant stirring.

На 1-й стадии проводят гидролиз полимеров микробных клеток под действием внутриклеточных ферментов грибной биомассы при температуре 50°С в течение 1 ч 45 мин и постоянном перемешивании. При этом на 1-й стадии в результате ферментативного гидролиза высокомолекулярных белковых и полисахаридных полимеров клеточных стенок под действием внутриклеточных ферментов микромицета происходит образование пептидов, олигосахаридов и аминосахаров, а также освободившихся β-глюкана, маннана и хитина. Деструкция полимеров клеточных стенок дрожжей и микромицета обеспечивает повышение степени доступности внутриклеточных белковых веществ протоплазмы и нуклеиновых кислот для дальнейшего действия ферментов на 2-й стадии гидролиза.At the 1st stage, hydrolysis of polymers of microbial cells is carried out under the action of intracellular enzymes of fungal biomass at a temperature of 50 ° C for 1 h 45 min with constant stirring. Moreover, at the 1st stage, as a result of enzymatic hydrolysis of high molecular weight protein and polysaccharide polymers of cell walls under the action of intracellular micromycete enzymes, peptides, oligosaccharides and amino sugars, as well as released β-glucan, mannan and chitin, are formed. The destruction of the polymers of the cell walls of yeast and micromycetes provides an increase in the degree of availability of intracellular protein substances of protoplasm and nucleic acids for the further action of enzymes at the 2nd stage of hydrolysis.

На 2-й стадии процесса ферментативного гидролиза частично разрушенную объединенную микробную биомассу, полученную на 1-й стадии, охлаждают до температуры 40°С для исключения термоинактивации ферментов и процесс продолжают в течение 3 ч 45 мин при постоянном перемешивании. Об окончании второй стадии ферментолиза судят по нарастанию концентрации растворимых редуцирующих углеводов, содержанию свободных аминокислот, низкомолекулярных пептидов и нуклеотидов, образующихся в результате гидролиза полисахаридов (хитина, глюканов и маннанов), белковых веществ и нуклеиновых кислот объединенной микробной биомассы.At the 2nd stage of the enzymatic hydrolysis process, the partially destroyed combined microbial biomass obtained at the 1st stage is cooled to a temperature of 40 ° C to exclude thermal inactivation of the enzymes and the process is continued for 3 hours 45 minutes with constant stirring. The end of the second stage of fermentolysis is judged by the increase in the concentration of soluble reducing carbohydrates, the content of free amino acids, low molecular weight peptides and nucleotides resulting from the hydrolysis of polysaccharides (chitin, glucans and mannans), protein substances and nucleic acids of the combined microbial biomass.

По окончании процесса гидролиза полученный ферментолизат нагревают до температуры 85°С и выдерживают при этой температуре в течение 15 мин для инактивации всех ферментов.At the end of the hydrolysis process, the obtained fermentolizate is heated to a temperature of 85 ° C and kept at this temperature for 15 minutes to inactivate all enzymes.

Полученный ферментолизат микробной биомассы содержит биологически активные продукты глубокого ферментативного гидролиза внутриклеточных полимеров объединенной дрожжевой и грибной биомассы: биологически активные пептиды с молекулярной массой от 500 до 700 Да - 14%, до 500 Да - 82%; свободные аминокислоты и низкомолекулярные пептиды до 300 Да - 72,4%, незаменимые аминокислоты в свободной форме - 39,2% от исходного количества белка, а также биологически активные продукты гидролиза полимеров клеточных стенок (β-глюкана, маннанов, хитина) - 29,7% РВ (редуцирующих веществ) и низкомолекулярные нуклеотиды - 67,2% от исходного содержания нуклеиновых кислот. Ферментолизат микробной биомассы рекомендуется к использованию как биологически активная добавка.The obtained microbial biomass fermentolizate contains biologically active products of deep enzymatic hydrolysis of intracellular polymers of combined yeast and fungal biomass: biologically active peptides with a molecular weight of 500 to 700 Da - 14%, up to 500 Da - 82%; free amino acids and low molecular weight peptides up to 300 Da - 72.4%, essential free-form amino acids - 39.2% of the initial amount of protein, as well as biologically active products of hydrolysis of cell wall polymers (β-glucan, mannans, chitin) - 29, 7% RV (reducing substances) and low molecular weight nucleotides - 67.2% of the initial content of nucleic acids. Microbial biomass fermentolizate is recommended for use as a dietary supplement.

Полученный ферментолизат по сравнению с известным аналогом характеризуется более высоким содержанием аминокислот в свободной форме, активных низкомолекулярных пептидов и легко усваиваемых биологически активных продуктов гидролиза (β-глюкана, маннанов, хитина и нуклеиновых кислот).The obtained fermentolizate, in comparison with the known analogue, is characterized by a higher content of free-form amino acids, active low molecular weight peptides and easily digestible biologically active hydrolysis products (β-glucan, mannans, chitin and nucleic acids).

Пример 2. Целевой продукт получают по методике примера 1 с соблюдением перечисленных далее режимных параметров. На первой стадии гидролиз мицелиальной биомассы под действием внутриклеточных ферментов проводят при температуре 48°С в течение 2 ч 15 мин. Гидролиз на второй стадии осуществляют при температуре 38°С в течение 4 ч 15 мин при постоянном перемешивании. Препарат содержит биологически активные продукты глубокого ферментативного гидролиза клеточных полимеров микромицета: биологически активные пептиды с молекулярной массой от 500 до 700 Да - 13,8%, до 500 Да - 82,2%, свободные аминокислоты и низкомолекулярные пептиды до 300 Да - 72,2%, незаменимые аминокислоты в свободной форме - 39,3% от исходного количества белка, а также биологически активные продукты гидролиза полимеров клеточных стенок (β-глюкана, маннанов, хитина) - 29,8% РВ (редуцирующих веществ) и низкомолекулярные нуклеотиды - 67,0% от исходного содержания нуклеиновых кислот. Ферментолизат мицелиальной биомассы рекомендуется к использованию как биологически активная добавка.Example 2. The target product is obtained according to the method of example 1 in compliance with the following operational parameters. In the first stage, the hydrolysis of mycelial biomass under the action of intracellular enzymes is carried out at a temperature of 48 ° C for 2 hours 15 minutes The hydrolysis in the second stage is carried out at a temperature of 38 ° C for 4 hours 15 minutes with constant stirring. The preparation contains biologically active products of deep enzymatic hydrolysis of micromycete cell polymers: biologically active peptides with a molecular weight of 500 to 700 Da - 13.8%, up to 500 Da - 82.2%, free amino acids and low molecular weight peptides up to 300 Da - 72.2 %, essential free-form amino acids - 39.3% of the initial amount of protein, as well as biologically active products of hydrolysis of cell wall polymers (β-glucan, mannans, chitin) - 29.8% of PB (reducing substances) and low molecular weight nucleotides - 67 , 0% of the initial content Iya nucleic acids. Mycelial biomass fermentolizate is recommended for use as a dietary supplement.

Полученный ферментолизат характеризуется высоким содержанием аминокислот в свободной форме, активных низкомолекулярных пептидов и легко усваиваемых биологически активных продуктов гидролиза β-глюкана, маннанов, хитина и нуклеиновых кислот.The obtained fermentolizate is characterized by a high content of free-form amino acids, active low molecular weight peptides and easily digestible biologically active products of the hydrolysis of β-glucan, mannans, chitin and nucleic acids.

Таким образом, способ согласно изобретению позволяет получать высококачественную пищевую добавку.Thus, the method according to the invention allows to obtain a high-quality nutritional supplement.

ЛитератураLiterature

1. Патент РФ №2065275, кл. A23J 1/18, опубл. 20.08.1996.1. RF patent No. 2065275, cl. A23J 1/18, publ. 08/20/1996.

2. Патент РФ №2084171, кл. A23J 1/18, опубл. 20.07.1997.2. RF patent No. 2084171, cl. A23J 1/18, publ. 07/20/1997.

3. Патент РФ №2104300, кл. C12N 1/06, A23L 1/28, опубл. 10.02.1998 г.3. RF patent №2104300, cl. C12N 1/06, A23L 1/28, publ. 02/10/1998

4. Патент РФ №2070921, кл. C12N 1/14, опубл. 27.12.1996 г.4. RF patent No. 2070921, cl. C12N 1/14, publ. 12/27/1996

5. Римарева Л.В. Использование биомассы гриба Aspergillus oryzae в качестве источника биологически активных веществ / Л.В. Римарева, Е.М. Серба, Оверченко М.Б., К.В. Рачков, И.М. Абрамова // Хранение и переработка сельхоз сырья. - 2012. - №9. - С. 46-49.5. Rimareva L.V. The use of biomass of the fungus Aspergillus oryzae as a source of biologically active substances / L.V. Rimareva, E.M. Serba, Overchenko M.B., K.V. Rachkov, I.M. Abramova // Storage and processing of agricultural raw materials. - 2012. - No. 9. - S. 46-49.

6. Патент РФ 2315096, кл. C12N 1/30, опубл. 2008 г.6. RF patent 2315096, cl. C12N 1/30, publ. 2008 year

7. Серба Е.М. Синтез и секреция гидролаз микромицетом Aspergillus oryzae - продуцентом ферментов, необходимых для биокатализа полимеров зернового сырья / Е.М. Серба, М.Б. Оверченко, Л.В. Римарева // Производство спирта и ликероводочных изделий. - 2011. - №2. - С. 18-20.7. Serba EM Synthesis and secretion of hydrolases by Aspergillus oryzae micromycete - a producer of enzymes necessary for biocatalysis of polymers of grain raw materials / Е.М. Serba, M.B. Overchenko, L.V. Rimareva // Production of alcohol and alcoholic beverages. - 2011. - No. 2. - S. 18-20.

8. Патент РФ 2374901, кл. A23L 1/00, опубл. 10.12.2009 г.8. RF patent 2374901, cl. A23L 1/00, publ. 12/10/2009

Claims (1)

Способ получения биологически активной добавки, предусматривающий приготовление водной суспензии клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae (дрожжевой биомассы), инактивирование внутриклеточных ферментов дрожжей путем их термической обработки при температуре 85-95°С в течение 15-20 мин, охлаждение до температуры 55-56°С, заключается во введении биомассы гриба Aspergillus oryzae RCAM 01134 в подготовленную суспензию клеток дрожжевой биомассы в соотношении 1:0,5, в осуществлении двухстадийного гидролиза высокомолекулярных полимеров объединенной дрожжевой и грибной биомассы под действием внутриклеточных ферментов гриба Aspergillus oryzae, катализирующих гидролиз глюканов, маннанов и хитина клеточных стенок, а также внутриклеточных белковых веществ и нуклеиновых кислот, с получением целевого продукта в виде ферментолизата микробной биомассы (объединенной дрожжевой и грибной биомассы), при этом на 1-й стадии поддерживают температуру 48-50°С в течение 1 ч 45 мин - 2 ч 15 мин, на 2-й стадии температуру снижают до 38-40°С и процесс продолжают в течение 3 ч 45 мин - 4 ч 15 мин.A method of obtaining a biologically active additive, comprising the preparation of an aqueous suspension of Saccharomyces cerevisiae yeast cells (yeast biomass), inactivation of intracellular yeast enzymes by heat treatment at a temperature of 85-95 ° C for 15-20 minutes, cooling to a temperature of 55-56 ° C, consists in introducing the biomass of the fungus Aspergillus oryzae RCAM 01134 into the prepared suspension of yeast biomass cells in a ratio of 1: 0.5, in the implementation of a two-stage hydrolysis of high molecular weight polymers of combined yeast and fungal bio mass under the action of intracellular enzymes of the fungus Aspergillus oryzae, catalyzing the hydrolysis of glucans, mannans and chitin of the cell walls, as well as intracellular protein substances and nucleic acids, to obtain the target product in the form of a microbial biomass fermentolizate (combined yeast and fungal biomass), the first stage maintain the temperature of 48-50 ° C for 1 h 45 min - 2 h 15 min, at the second stage the temperature is reduced to 38-40 ° C and the process is continued for 3 h 45 min - 4 h 15 min.
RU2016103231A 2016-02-02 2016-02-02 Method for biological active additive production RU2615568C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016103231A RU2615568C1 (en) 2016-02-02 2016-02-02 Method for biological active additive production

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016103231A RU2615568C1 (en) 2016-02-02 2016-02-02 Method for biological active additive production

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2615568C1 true RU2615568C1 (en) 2017-04-05

Family

ID=58506550

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016103231A RU2615568C1 (en) 2016-02-02 2016-02-02 Method for biological active additive production

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2615568C1 (en)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2104300C1 (en) * 1996-01-25 1998-02-10 Римарева Любовь Вячеславовна Method of preparing the yeast biomass protein hydrolyzate
RU2355190C1 (en) * 2007-09-20 2009-05-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method of biological active additive production
RU2370526C2 (en) * 2007-09-11 2009-10-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method of yeast cell enzymolysate obtainment
RU2374901C2 (en) * 2007-09-20 2009-12-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method for production of biologically active additive
RU2557300C1 (en) * 2014-04-11 2015-07-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии" (ФГБНУ ВНИИПБТ) FUNGAL STRAIN Aspergillus oryzae - PRODUCER OF COMPLEX OF PROTEINASES AND PEPTIDASES, NUCLEASES, CHITINASE, BETA-GLUCANASE, MANNANASE AND ALPHA-AMYLASE

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2104300C1 (en) * 1996-01-25 1998-02-10 Римарева Любовь Вячеславовна Method of preparing the yeast biomass protein hydrolyzate
RU2370526C2 (en) * 2007-09-11 2009-10-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method of yeast cell enzymolysate obtainment
RU2355190C1 (en) * 2007-09-20 2009-05-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method of biological active additive production
RU2374901C2 (en) * 2007-09-20 2009-12-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии Российской сельскохозяйственной академии Method for production of biologically active additive
RU2557300C1 (en) * 2014-04-11 2015-07-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии" (ФГБНУ ВНИИПБТ) FUNGAL STRAIN Aspergillus oryzae - PRODUCER OF COMPLEX OF PROTEINASES AND PEPTIDASES, NUCLEASES, CHITINASE, BETA-GLUCANASE, MANNANASE AND ALPHA-AMYLASE

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2616802C2 (en) Liquid oat base
CN104886523B (en) A kind of preparation method with the flavouring for proposing fresh effect
CN105685826B (en) Probiotic grain powder and production method and application thereof
US3212902A (en) Recovery of edible products from spent grains and yeasts
JPS5843750A (en) Production of dog food having improved taste
CN102845711B (en) Production technology for producing nutrient seasoning paste by enzymatic method using avian skeleton
CN109295146B (en) Enzymatic abalone extract and preparation method thereof
ES2385423T3 (en) Nutritious drink
Reed et al. Yeast-derived products
CN103719742A (en) Technique for preparing Aspergillus fermented black beans by metabolism regulation process and product thereof
RU2355190C1 (en) Method of biological active additive production
RU2615568C1 (en) Method for biological active additive production
Wang et al. A critical review of fungal proteins: Emerging preparation technology, active efficacy and food application
US6544791B2 (en) Nitrogenous composition resulting from the hydrolysis of maize gluten and a process for the preparation thereof
JP4923084B2 (en) Soybean fermentation broth
CN107960629B (en) Seafood and shrimp-flavor soup jelly and preparation method thereof
CN103320419A (en) Co-immobilized gel particles applied to high osmotic pressure environment food and application of co-immobilized gel particles
JP4083194B2 (en) Method for producing liquid cake
RU2580050C1 (en) Method of producing biologically active additive
JP2007074911A (en) Method for producing soy sauce using liquid rice malt
CN104207089A (en) Fermentation technology for increasing content of glutamic acid
CN101050427A (en) Method for preparing autolysate of candida utilis
JP4414837B2 (en) Method for producing self-digesting yeast extract
Dhingra et al. Enzymes in Food Industry and Their Regulatory Oversight
CN110897088A (en) Preparation method of wheat germ polypeptide instant powder