RU2593715C2 - Системы и способы доставки биоактивных средств с применением транспортных последовательностей, происходящих от бактериального токсина - Google Patents
Системы и способы доставки биоактивных средств с применением транспортных последовательностей, происходящих от бактериального токсина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2593715C2 RU2593715C2 RU2013116447/10A RU2013116447A RU2593715C2 RU 2593715 C2 RU2593715 C2 RU 2593715C2 RU 2013116447/10 A RU2013116447/10 A RU 2013116447/10A RU 2013116447 A RU2013116447 A RU 2013116447A RU 2593715 C2 RU2593715 C2 RU 2593715C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- delivery
- cholix
- construct
- cells
- administration
- Prior art date
Links
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 title claims abstract description 74
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 21
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 title description 2
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 title description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 title 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims abstract description 36
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 7
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 101710200247 Cholix toxin Proteins 0.000 claims description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 5
- 101001007348 Arachis hypogaea Galactose-binding lectin Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 claims 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 72
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 64
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 11
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 abstract description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 67
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 63
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 38
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 37
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 32
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 29
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 29
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 28
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 28
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 25
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 25
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 21
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- 230000031998 transcytosis Effects 0.000 description 19
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 15
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 14
- 230000026058 directional locomotion Effects 0.000 description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 13
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 12
- -1 nitrosoureas Chemical class 0.000 description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 11
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 11
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 8
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 8
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 8
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 7
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 6
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 6
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 6
- 101001043564 Homo sapiens Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Proteins 0.000 description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 6
- 102100021923 Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Human genes 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 6
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 6
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 6
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 6
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 6
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 5
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 5
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 4
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 4
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 4
- 102000009062 ADP Ribose Transferases Human genes 0.000 description 3
- 108010049290 ADP Ribose Transferases Proteins 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 3
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 3
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 3
- KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N (-)-ephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- YKFCISHFRZHKHY-NGQGLHOPSA-N (2s)-2-amino-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-methylpropanoic acid;trihydrate Chemical compound O.O.O.OC(=O)[C@](N)(C)CC1=CC=C(O)C(O)=C1.OC(=O)[C@](N)(C)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 YKFCISHFRZHKHY-NGQGLHOPSA-N 0.000 description 2
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 2
- 102100033312 Alpha-2-macroglobulin Human genes 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000620209 Escherichia coli DH5[alpha] Species 0.000 description 2
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010061306 Lipoprotein Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000011965 Lipoprotein Receptors Human genes 0.000 description 2
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010015078 Pregnancy-Associated alpha 2-Macroglobulins Proteins 0.000 description 2
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 210000004082 barrier epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 2
- 229940083181 centrally acting adntiadrenergic agent methyldopa Drugs 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 2
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 2
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 229960004198 guanidine Drugs 0.000 description 2
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000568 intoxicate Toxicity 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 2
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002151 serous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 230000018889 transepithelial transport Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N tyramine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C=C1 DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- JBFQOLHAGBKPTP-NZATWWQASA-N (2s)-2-[[(2s)-4-carboxy-2-[[3-carboxy-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]propanoyl]amino]butanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical group CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN JBFQOLHAGBKPTP-NZATWWQASA-N 0.000 description 1
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 1
- KPJZHOPZRAFDTN-ZRGWGRIASA-N (6aR,9R)-N-[(2S)-1-hydroxybutan-2-yl]-4,7-dimethyl-6,6a,8,9-tetrahydroindolo[4,3-fg]quinoline-9-carboxamide Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@H](CO)CC)C2)=C3C2=CN(C)C3=C1 KPJZHOPZRAFDTN-ZRGWGRIASA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- METKIMKYRPQLGS-GFCCVEGCSA-N (R)-atenolol Chemical compound CC(C)NC[C@@H](O)COC1=CC=C(CC(N)=O)C=C1 METKIMKYRPQLGS-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- QHGUCRYDKWKLMG-QMMMGPOBSA-N (R)-octopamine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C=C1 QHGUCRYDKWKLMG-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- CQYYGCVORGQMEQ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxopyrrolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1C(=O)CCC1=O CQYYGCVORGQMEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-5-{1-hydroxy-2-[(4-phenylbutan-2-yl)amino]ethyl}benzamide Chemical compound C=1C=C(O)C(C(N)=O)=CC=1C(O)CNC(C)CCC1=CC=CC=C1 SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PPWLAQVKIFDULF-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-pyrrolo[2,3-b]pyridine Chemical compound N1C2=NC=CC=C2C=C1C1=CC=CC=C1 PPWLAQVKIFDULF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXMYWVMXSWJFCV-UHFFFAOYSA-N 3-(4-imidazol-1-ylphenyl)-4,5-dihydro-1h-pyridazin-6-one Chemical compound N1C(=O)CCC(C=2C=CC(=CC=2)N2C=NC=C2)=N1 VXMYWVMXSWJFCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNBCGLZYLJMGKP-LUDZCAPTSA-N 4-[(1r)-2-amino-1-hydroxyethyl]benzene-1,2-diol;(2r,3r)-2,3-dihydroxybutanedioic acid;hydrate Chemical compound O.OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 LNBCGLZYLJMGKP-LUDZCAPTSA-N 0.000 description 1
- CYKYBWRSLLXBOW-GDYGHMJCSA-N 5-alpha-THDOC Chemical compound C1[C@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 CYKYBWRSLLXBOW-GDYGHMJCSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 1
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003347 Atropine Natural products 0.000 description 1
- KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N Baclofen Chemical compound OC(=O)CC(CN)C1=CC=C(Cl)C=C1 KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 1
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 102000003914 Cholinesterases Human genes 0.000 description 1
- 108090000322 Cholinesterases Proteins 0.000 description 1
- 102000005853 Clathrin Human genes 0.000 description 1
- 108010019874 Clathrin Proteins 0.000 description 1
- 241000909426 Clinidium Species 0.000 description 1
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- IROWCYIEJAOFOW-UHFFFAOYSA-N DL-Isoprenaline hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 IROWCYIEJAOFOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VWLHWLSRQJQWRG-UHFFFAOYSA-O Edrophonum Chemical compound CC[N+](C)(C)C1=CC=CC(O)=C1 VWLHWLSRQJQWRG-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108010049140 Endorphins Proteins 0.000 description 1
- 102000009025 Endorphins Human genes 0.000 description 1
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 description 1
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- VPNYRYCIDCJBOM-UHFFFAOYSA-M Glycopyrronium bromide Chemical compound [Br-].C1[N+](C)(C)CCC1OC(=O)C(O)(C=1C=CC=CC=1)C1CCCC1 VPNYRYCIDCJBOM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 101000897480 Homo sapiens C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 101001095266 Homo sapiens Prolyl endopeptidase Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N Hyosciamin-hydrochlorid Natural products CN1C(C2)CCC1CC2OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 108010042653 IgA receptor Proteins 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJAJPNHVVFWKKL-UHFFFAOYSA-N Methoxamine Chemical compound COC1=CC=C(OC)C(C(O)C(C)N)=C1 WJAJPNHVVFWKKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 description 1
- 101000606416 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Acyltransferase PE Proteins 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- QHGUCRYDKWKLMG-MRVPVSSYSA-N Octopamine Natural products NC[C@@H](O)C1=CC=C(O)C=C1 QHGUCRYDKWKLMG-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- CYLWJCABXYDINA-UHFFFAOYSA-N Polythiazide Polymers ClC1=C(S(N)(=O)=O)C=C2S(=O)(=O)N(C)C(CSCC(F)(F)F)NC2=C1 CYLWJCABXYDINA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102000056251 Prolyl Oligopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 1
- IDLSITKDRVDKRV-XHXSRVRCSA-N Ritodrine hydrochloride Chemical compound Cl.N([C@@H](C)[C@H](O)C=1C=CC(O)=CC=1)CCC1=CC=C(O)C=C1 IDLSITKDRVDKRV-XHXSRVRCSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000150 Sympathomimetic Substances 0.000 description 1
- 108010076818 TEV protease Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000007238 Transferrin Receptors Human genes 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 101001076308 Xenopus laevis Insulin-like growth factor III Proteins 0.000 description 1
- SWPYNTWPIAZGLT-UHFFFAOYSA-N [amino(ethoxy)phosphanyl]oxyethane Chemical compound CCOP(N)OCC SWPYNTWPIAZGLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002122 acebutolol Drugs 0.000 description 1
- GOEMGAFJFRBGGG-UHFFFAOYSA-N acebutolol Chemical compound CCCC(=O)NC1=CC=C(OCC(O)CNC(C)C)C(C(C)=O)=C1 GOEMGAFJFRBGGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 1
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 229960001456 adenosine triphosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000001800 adrenalinergic effect Effects 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical group 0.000 description 1
- 239000003282 amino acid receptor affecting agent Substances 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 229940124323 amoebicide Drugs 0.000 description 1
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960002105 amrinone Drugs 0.000 description 1
- RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N amrinone Chemical compound N1C(=O)C(N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1 RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001466 anti-adreneric effect Effects 0.000 description 1
- 239000004004 anti-anginal agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001022 anti-muscarinic effect Effects 0.000 description 1
- 229940035678 anti-parkinson drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003416 antiarrhythmic agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- 229940127088 antihypertensive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 1
- 229940033495 antimalarials Drugs 0.000 description 1
- 229940124433 antimigraine drug Drugs 0.000 description 1
- 229940045719 antineoplastic alkylating agent nitrosoureas Drugs 0.000 description 1
- 229940045984 antineoplastic methylhydrazine Drugs 0.000 description 1
- 239000003904 antiprotozoal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960002274 atenolol Drugs 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N atropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N 0.000 description 1
- 229960000396 atropine Drugs 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000794 baclofen Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229960003515 bendroflumethiazide Drugs 0.000 description 1
- HDWIHXWEUNVBIY-UHFFFAOYSA-N bendroflumethiazidum Chemical compound C1=C(C(F)(F)F)C(S(=O)(=O)N)=CC(S(N2)(=O)=O)=C1NC2CC1=CC=CC=C1 HDWIHXWEUNVBIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPFJLLXFNPCTDW-BWSPSPBFSA-N benzatropine mesylate Chemical compound CS([O-])(=O)=O.O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[NH+]2C)C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CPFJLLXFNPCTDW-BWSPSPBFSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004221 besilate Drugs 0.000 description 1
- 239000003781 beta lactamase inhibitor Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229940126813 beta-lactamase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960000585 bitolterol mesylate Drugs 0.000 description 1
- HODFCFXCOMKRCG-UHFFFAOYSA-N bitolterol mesylate Chemical compound CS([O-])(=O)=O.C1=CC(C)=CC=C1C(=O)OC1=CC=C(C(O)C[NH2+]C(C)(C)C)C=C1OC(=O)C1=CC=C(C)C=C1 HODFCFXCOMKRCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 210000004155 blood-retinal barrier Anatomy 0.000 description 1
- 230000004378 blood-retinal barrier Effects 0.000 description 1
- GJPICJJJRGTNOD-UHFFFAOYSA-N bosentan Chemical compound COC1=CC=CC=C1OC(C(=NC(=N1)C=2N=CC=CN=2)OCCO)=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(C(C)(C)C)C=C1 GJPICJJJRGTNOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003065 bosentan Drugs 0.000 description 1
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041011 carbapenems Drugs 0.000 description 1
- 229960004205 carbidopa Drugs 0.000 description 1
- TZFNLOMSOLWIDK-JTQLQIEISA-N carbidopa (anhydrous) Chemical compound NN[C@@](C(O)=O)(C)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 TZFNLOMSOLWIDK-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229960005296 carboprost tromethamine Drugs 0.000 description 1
- UMMADZJLZAPZAW-OVXHCKHTSA-N carboprost tromethamine Chemical compound OCC([NH3+])(CO)CO.CCCCC[C@](C)(O)\C=C\[C@H]1[C@@H](O)C[C@H](O)[C@@H]1C\C=C/CCCC([O-])=O UMMADZJLZAPZAW-OVXHCKHTSA-N 0.000 description 1
- 239000002368 cardiac glycoside Substances 0.000 description 1
- 229940097217 cardiac glycoside Drugs 0.000 description 1
- 239000000496 cardiotonic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002327 cardiovascular agent Substances 0.000 description 1
- 229940125692 cardiovascular agent Drugs 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 239000011797 cavity material Substances 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940048961 cholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 229930193282 clathrin Natural products 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000007931 coated granule Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 238000012926 crystallographic analysis Methods 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002999 depolarising effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229960005081 diclofenamide Drugs 0.000 description 1
- GJQPMPFPNINLKP-UHFFFAOYSA-N diclofenamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=CC(Cl)=C(Cl)C(S(N)(=O)=O)=C1 GJQPMPFPNINLKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DOBMPNYZJYQDGZ-UHFFFAOYSA-N dicoumarol Chemical compound C1=CC=CC2=C1OC(=O)C(CC=1C(OC3=CC=CC=C3C=1O)=O)=C2O DOBMPNYZJYQDGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001912 dicoumarol Drugs 0.000 description 1
- HIZKPJUTKKJDGA-UHFFFAOYSA-N dicumarol Natural products O=C1OC2=CC=CC=C2C(=O)C1CC1C(=O)C2=CC=CC=C2OC1=O HIZKPJUTKKJDGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116901 diethyldithiocarbamate Drugs 0.000 description 1
- LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N diethyldithiocarbamic acid Chemical compound CCN(CC)C(S)=S LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001089 dobutamine Drugs 0.000 description 1
- BQKADKWNRWCIJL-UHFFFAOYSA-N dobutamine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=1C=C(O)C(O)=CC=1CC[NH2+]C(C)CCC1=CC=C(O)C=C1 BQKADKWNRWCIJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 229960003748 edrophonium Drugs 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- 229960002179 ephedrine Drugs 0.000 description 1
- 210000004955 epithelial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229960003745 esmolol Drugs 0.000 description 1
- GEKNCWBANDDJJL-UHFFFAOYSA-N esmolol hydrochloride Chemical compound [Cl-].COC(=O)CCC1=CC=C(OCC(O)C[NH2+]C(C)C)C=C1 GEKNCWBANDDJJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002461 excitatory amino acid Effects 0.000 description 1
- 239000003257 excitatory amino acid Substances 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 229960001582 fenfluramine Drugs 0.000 description 1
- ZXKXJHAOUFHNAS-UHFFFAOYSA-N fenfluramine hydrochloride Chemical compound [Cl-].CC[NH2+]C(C)CC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZXKXJHAOUFHNAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 description 1
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002421 ganglioside group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004083 gastrointestinal agent Substances 0.000 description 1
- 229940127227 gastrointestinal drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229940015042 glycopyrrolate Drugs 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229940060251 hexafluorenium Drugs 0.000 description 1
- HDZAQYPYABGTCL-UHFFFAOYSA-N hexafluronium Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1[N+](C)(C)CCCCCC[N+](C)(C)C1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 HDZAQYPYABGTCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004716 idoxuridine Drugs 0.000 description 1
- 229950000254 imazodan Drugs 0.000 description 1
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 1
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N ipratropium Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[N@@+]2(C)C(C)C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N 0.000 description 1
- 229960001888 ipratropium Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960001632 labetalol Drugs 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 108010089256 lysyl-aspartyl-glutamyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- FLOSMHQXBMRNHR-DAXSKMNVSA-N methazolamide Chemical compound CC(=O)\N=C1/SC(S(N)(=O)=O)=NN1C FLOSMHQXBMRNHR-DAXSKMNVSA-N 0.000 description 1
- 229960004083 methazolamide Drugs 0.000 description 1
- 229960005192 methoxamine Drugs 0.000 description 1
- 229960002237 metoprolol Drugs 0.000 description 1
- IUBSYMUCCVWXPE-UHFFFAOYSA-N metoprolol Chemical compound COCCC1=CC=C(OCC(O)CNC(C)C)C=C1 IUBSYMUCCVWXPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 229960003574 milrinone Drugs 0.000 description 1
- PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N milrinone Chemical compound N1C(=O)C(C#N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1C PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229940041009 monobactams Drugs 0.000 description 1
- HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N monomethylhydrazine Chemical class CNN HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229940035363 muscle relaxants Drugs 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- 229960004255 nadolol Drugs 0.000 description 1
- VWPOSFSPZNDTMJ-UCWKZMIHSA-N nadolol Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)CC2=C1C=CC=C2OCC(O)CNC(C)(C)C VWPOSFSPZNDTMJ-UCWKZMIHSA-N 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001695 norepinephrine bitartrate Drugs 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229960001576 octopamine Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000000590 parasiticidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002297 parasiticide Substances 0.000 description 1
- 229940127242 parasympathomimetic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000810 peripheral vasodilating agent Substances 0.000 description 1
- 229960002116 peripheral vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229960001999 phentolamine Drugs 0.000 description 1
- MRBDMNSDAVCSSF-UHFFFAOYSA-N phentolamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1N(C=1C=C(O)C=CC=1)CC1=NCCN1 MRBDMNSDAVCSSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003056 phentolamine mesylate Drugs 0.000 description 1
- 229960001802 phenylephrine Drugs 0.000 description 1
- SONNWYBIRXJNDC-VIFPVBQESA-N phenylephrine Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=CC(O)=C1 SONNWYBIRXJNDC-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229960005483 polythiazide Drugs 0.000 description 1
- 229920000046 polythiazide Polymers 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 1
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940024790 prothrombin complex concentrate Drugs 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 229960000611 pyrimethamine Drugs 0.000 description 1
- WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N pyrimethamine Chemical compound CCC1=NC(N)=NC(N)=C1C1=CC=C(Cl)C=C1 WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N 0.000 description 1
- 229960000620 ranitidine Drugs 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 1
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 229960001634 ritodrine Drugs 0.000 description 1
- 229960002052 salbutamol Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 1
- LACQPOBCQQPVIT-SEYKEWMNSA-N scopolamine hydrobromide trihydrate Chemical compound O.O.O.Br.C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 LACQPOBCQQPVIT-SEYKEWMNSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- 210000005122 simple epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 1
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 1
- 229930002534 steroid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 150000008143 steroidal glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- AXOIZCJOOAYSMI-UHFFFAOYSA-N succinylcholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCOC(=O)CCC(=O)OCC[N+](C)(C)C AXOIZCJOOAYSMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940032712 succinylcholine Drugs 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- XMFCOYRWYYXZMY-UHFFFAOYSA-N sulmazole Chemical compound COC1=CC(S(C)=O)=CC=C1C1=NC2=NC=CC=C2N1 XMFCOYRWYYXZMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006153 sulmazole Drugs 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 229940127230 sympathomimetic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229940040944 tetracyclines Drugs 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 description 1
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229960003962 trifluridine Drugs 0.000 description 1
- VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N trifluridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(F)(F)F)=C1 VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 238000009966 trimming Methods 0.000 description 1
- JFJZZMVDLULRGK-URLMMPGGSA-O tubocurarine Chemical compound C([C@H]1[N+](C)(C)CCC=2C=C(C(=C(OC3=CC=C(C=C3)C[C@H]3C=4C=C(C(=CC=4CCN3C)OC)O3)C=21)O)OC)C1=CC=C(O)C3=C1 JFJZZMVDLULRGK-URLMMPGGSA-O 0.000 description 1
- 229960001844 tubocurarine Drugs 0.000 description 1
- 229960003732 tyramine Drugs 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- BGSZAXLLHYERSY-XQIGCQGXSA-N vecuronium Chemical compound N1([C@@H]2[C@@H](OC(C)=O)C[C@@H]3CC[C@H]4[C@@H]5C[C@@H]([C@@H]([C@]5(CC[C@@H]4[C@@]3(C)C2)C)OC(=O)C)[N+]2(C)CCCCC2)CCCCC1 BGSZAXLLHYERSY-XQIGCQGXSA-N 0.000 description 1
- 229960003819 vecuronium Drugs 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/28—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Vibrionaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
- A61K9/0056—Mouth soluble or dispersible forms; Suckable, eatable, chewable coherent forms; Forms rapidly disintegrating in the mouth; Lozenges; Lollipops; Bite capsules; Baked products; Baits or other oral forms for animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/711—Natural deoxyribonucleic acids, i.e. containing only 2'-deoxyriboses attached to adenine, guanine, cytosine or thymine and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/03—Peptides having up to 20 amino acids in an undefined or only partially defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/2066—IL-10
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/212—IFN-alpha
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/27—Growth hormone [GH] (Somatotropin)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/45—Transferases (2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
- A61K9/006—Oral mucosa, e.g. mucoadhesive forms, sublingual droplets; Buccal patches or films; Buccal sprays
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/5176—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
- A61K9/5184—Virus capsids or envelopes enclosing drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/06—Antiarrhythmics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1077—Pentosyltransferases (2.4.2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/02—Pentosyltransferases (2.4.2)
- C12Y204/02036—NAD(+)--diphthamide ADP-ribosyltransferase (2.4.2.36)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/50—Fusion polypeptide containing protease site
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/55—Fusion polypeptide containing a fusion with a toxin, e.g. diphteria toxin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/02—Pentosyltransferases (2.4.2)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению нетоксичной мутантной формы гена Cholix (ntCholix) Vibrio cholera, и может быть использовано в медицине. Получают вариант Cholix, усеченный по аминокислоте A386 (Cholix386) или с удаленным остатком Glu581. Полученный нетоксичный вариант Cholix связывают с терапевтическим грузом, который может представлять собой макромолекулу, малую молекулу, siRNA, PNA, miRNA, ДНК, плазмиду и антисмысловую молекулу. Изобретение позволяет осуществлять доставку терапевтического груза через поляризованные эпителиальные клетки, в том числе кишечника, в направлении от апикальной к базолатеральной поверхности монослоев клеток без инъекций. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Description
Родственные патентные заявки
Данная заявка притязает на приоритет предварительной заявки США №61/403394, поданной 15 сентября 2010 года, включенной во всей полноте в данный документ посредством ссылки.
Область техники
Область настоящего изобретения относится, отчасти, к стратегии новых фармацевтических применений. Более конкретно, настоящее изобретение относится к нетоксичной мутантной форме гена Cholix (ntCholix) Vibrio cholera, варианту Cholix, усеченному по аминокислоте A386 (Cholix386) и применению других различных полипептидных последовательностей, происходящих от Cholix, для улучшения доставки в кишечник биологически активных терапевтических средств. Важно, что системы и способы, описанные в данном документе, предусматривают следующее: возможность доставлять дозы макромолекул без инъекций; возможность доставлять груз, такой как (но без ограничений) siRNA или антисмысловые молекулы, во внутриклеточные компартменты, где требуется их активность; и доставку наночастиц и носителей на основе дендримеров через биологические мембраны, которая иначе была бы затруднена из-за барьерных свойств большинства таких мембран.
Предшествующий уровень техники
Большинство разрешенных в настоящее время низкомолекулярных лекарственных средств всасывается через слизистую оболочку тонкого кишечника для обеспечения доставки в системный кровоток. Фактически, низкомолекулярные лекарственные средства отбираются на основе их стабильности и эффективного всасывания через слизистую оболочку кишечника. Подобная пероральная доставка биологически активных полипептидов (означает полимер, состоящий из аминокислотных остатков; как правило, обозначается как белок или пептид) составляла долговременную цель фармацевтической промышленности. Поскольку желудочно-кишечный (GI) тракт приспособлен для переваривания белков и пептидов, поступающих с пищей, существуют многочисленные физические, физиологические и биологические барьеры, которые ограничивают применимость поглощения терапевтических белков и пептидов из кишечника способом, аналогичным таковому, достигаемому с малыми молекулами; Mahato, R.I., et al., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 20(2-3): p.153-214 (2003).
Был установлен ряд технологий, которые можно применять для защиты терапевтических белков и пептидов на протяжении желудка, позволяющих им достигать всасывающей поверхности эпителиальных клеток в тонком кишечнике и отделяющих их от условий желудка и кишечника, которые функционируют для разрушения белков и пептидов, поступающих с пищей. К сожалению, однако, эффективный транспорт через этот простой одинарный слой клеток остается существенным препятствием вследствие внутриклеточного направленного перемещения к деструктивным лизосомным компартментам после эндосомального поглощения полипептидов на поверхности просвета; Woodley, J.F., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 11(2-3): p.61-95 (1994). В действительности, этот барьер приспособлен для ингибирования поглощения белков и пептидов до тех пор, пока эти макромолекулы могут в достаточной степени разрушиться для всасывания посредством переносчиков аминокислот и ди- или трипептидов. В связи с этим был предпринят ряд попыток преодоления физических, физиологических и биологических барьеров слизистой оболочки кишечника.
Существуют два основных пути через простой эпителий, который образует клеточный барьер слизистой оболочки кишечника. Конкретно, после прохождения через покрывающий слой слизи молекула может двигаться между соседними эпителиальными клетками (околоклеточный путь) или двигаться через клетки (трансклеточный путь) с помощью серии везикул, которые направленно перемещаются внутри, но не сливаются содержимым с цитоплазмой; Т. Jung et al., Eur J Pharm Biopharm, 50: 147-160 (2000). Другими словами, в обоих путях транспортируемое белковое или пептидное терапевтическое средство не входит в клетку, а скорее остается в среде, внешней относительно цитоплазмы клетки.
Важнейшим барьером для случайного перемещения терапевтического белка и перемещения пептида через околоклеточный путь служит комплекс из белков на апикальной шейке этих клеток, известный как плотный контакт (TJ). Хотя временное открывание и закрывание структур TJ может облегчать транспорт пептидов через эпителий кишечника, данный подход имеет ключевые ограничения: например, он не вполне применим для молекул свыше ~5 кДа; имеется возможность для неселективного поступления материалов в организм из просвета кишечника; и он представляет собой путь, в который вовлекается только небольшая часть площади поверхности эпителия кишечника.
Важнейшим барьером для случайной миграции белковых или пептидных терапевтических средств через клетки с помощью трансклеточного пути является стандартное направленное перемещение везикул, при помощи которого содержимое этих везикул доставляется в деструктивный (лизосомальный) путь. По сравнению с околоклеточным путем перемещение благодаря везикулярному трансклеточному пути может приспосабливаться для материалов диаметром до 100 нм, причем в него вовлекается по существу вся поверхность эпителиальной клетки, и оно может быть высокоселективным в отношении поглощения материалов благодаря применению взаимодействий рецептор-лиганд для поступления в везикулу. Таким образом, трансклеточный путь является очень привлекательным для эпителиального транспорта белковых или пептидных терапевтических средств, если при этом можно избежать деструктивного пути.
У некоторых патогенов решена проблема направленного перемещения через барьер, как показано при помощи эффективного трансцитоза секретируемых полипептидных факторов вирулентности, которые функционируют для содействия и/или стабилизации инфекции хозяина. Экзотоксины представляют собой класс белков, высвобождаемых множеством микроорганизмов, которые действуют как сильные факторы вирулентности. Экзотоксины воздействуют на многоклеточные организмы, а также обладают способностью действовать как сильные токсины у человека; Roszak, D.B., and Colwell, R.R., Microbiol Rev 51: 365-379 (1987). Эти белки обычно убивают или инактивируют клетки-хозяева посредством механизмов, которые включают селективное нарушение синтеза белка. В соответствии с этим всего несколько молекул требуется для того, чтобы убить, что согласуется с наблюдением, что бактериальные экзотоксины известны как одни из наиболее токсичных средств. Подкласс этих белков включает семейство белков, которое состоит из дифтерийного токсина (DT) из Corynebacterium diphtheria, экзотоксина A из Pseudomonas aeruginosa (PE) и недавно идентифицированного белка, названного Cholix из Vibrio cholera, функционирующего для интоксикации клеток-хозяев посредством ADP-рибозилирования фактора элонгации 2 (EF2); Yates, S.P., et al., Trends Biochem Sci, 31: 123-133 (2006). Эти экзотоксины синтезируются в виде одной цепи из аминокислот, которая сворачивается в отдельные домены, которые, как было установлено, имеют специфические функции в нацеливании, проникновении и интоксикации клеток-хозяев.
Недавно была описана биология экзотоксина A из Pseudomonas aeruginosa (PE); Mrsny, R.J., et al., Drug Discov Today, 7(4): p.247-58 (2002). РЕ состоит из одной цепи из 613 аминокислот с теоретическим молекулярным весом (MW) 66828,11 Да, изоэлектрической точкой (pl) 5,28, которая функционально сворачивается в три отдельных домена, обозначенные домен I (Ala1-Glu252), домен II (Gly253-Asn364), домен III (Gly405-Lys613, который содержит область с ADP-рибозилтрансферазной активностью), и короткую связанную дисульфидной связью петлю, связывающую домены II и III, которая известна как Ib-петля (Ala365-Gly404). Организация этих доменов при pH 8,0 была определена на основе дифракции на кристалле при разрешении ~1,5 Å; Wedekind, J.E. et al., J Mol Biol, 314: 823-837 (2001). Домен I (Ia+Ib) имеет сердцевину, образованную 13-нитчатым β-рулетом, домен II состоит из шести α-спиралей, и домен III имеет сложную α/β-упорядоченную структуру. При помощи исследований подтвердилась идея, что блочная природа PE обеспечивает функции отдельных доменов: домен I связывается с рецепторами клетки-хозяина, домен II вовлекается в перемещение через мембрану, и домен III функционирует как ADP-рибозилтрансфераза. По-видимому, PE секретируется Р. aeruginosa в непосредственной близости от апикальной поверхности эпителиальной клетки, возможно в ответ на стимулы среды и/или клеточные сигналы; Deng, Q. and J.T. Barbieri, Annu Rev Microbiol, 62: p.271-88 (2008). Сразу после секреции происходит интернализация внутрь клеток после того, как домен I PE связывается с мембранным белком α2-макроглобулином, белком, который также известен как белок 1, родственный рецептору липопротеинов низкой плотности (LRP1) или CD91; смотри, например, FitzGeraId, D.J., et al., J Cell Biol, 129(6): p.1533-41 (1995); Kounnas, M.Z., et al., J Biol Chem, 267(18); p.12420-3 (1992). После интернализации PE избегает направленного перемещения к лизосоме, а вместо этого эффективно доставляется к базолатеральной поверхности клетки, где он высвобождается в биологически активной форме; Mrsny, R.J., et al., Drug Discov Today, 7(4): p.247-58 (2002). После прохождения через эпителий PE функционирует как фактор вирулентности, проникая в CD91-положительные клетки в подслизистом пространстве (макрофаги и дендритные клетки), где он затем проходит через путь разворачивания, что приводит к доставке в цитоплазму домена III; смотри, например, Mattoo, S., Y.M. Lee, and J.E. Dixon, Curr Opin Immunol, 19(4): p.392-401 (2007); Spooner, R.A., et al., Virol J, 3: p.26 (2006).
Бактерия Vibrio cholerae наиболее известна благодаря своему одноименному средству вирулентности, холерному токсину (CT), который может вызывать острую опасную для жизни тяжелую водянистую диарею. CT представляет собой белковый комплекс, состоящий из одной субъединицы A, сгруппированной с пентамером из субъединиц B, который связывается с ганглиозидными структурами GM1 клеточной поверхности на апикальной поверхности эпителия. CT секретируется V. cholera после горизонтального переноса генов с вирулентными штаммами V. cholerae, несущими вариант лизогенного бактериофага, называемого CTXf или CTXφ. Последние вспышки холеры, однако, позволили предположить, что штаммы некоторых серогрупп (не-O1, не-O139) не экспрессируют CT, а скорее используют другие факторы вирулентности. Подробные анализы данных из окружающей среды и клинических данных применительно к не-O1, не-O139 позволили предположить наличие нового предполагаемого секретируемого экзотоксина с некоторым сходством с PE.
Jorgensen, R. et al., J Biol Chem, 283(16): 10671-10678 (2008) сообщили, что некоторые штаммы V. cholerae, в самом деле, действительно содержали белковый токсин, сходный с PE, который они назвали токсин Cholix (Cholix). По сравнению с PE Cholix имеет немного больший теоретический MW (70703,89 Да) и немного более кислую теоретическую pl (5,12). Кристаллическая структура белка Cholix из 634 аминокислот была проанализирована при ~2 Å. Было обнаружено, что доменная структура и организация в чем-то сходны с PE: домен I (Val1-Lys265), домен II (Glu266-Ala386), домен III (Arg426-Lys634) и Ib-петля (Ala387-Asn425). Дополнительное структурное сходство с PE включает: сайт для фуриновой протеазы для активации в клетке; C-концевую последовательность KDEL, которая может направлять токсин в эндоплазматический ретикулум клетки-хозяина; и область с ADP-рибозилтрансферазной активностью в пределах домена III.
Примечательно, что PE и Cholix не обладают значительным генетическим сходством и ограниченным сходством по аминокислотному выравниванию. Исследование генома V. cholera на РЕ-подобные нуклеотидные последовательности не приводит в результате к совпадению любого рода. Только на уровне белковой последовательности имеется намек на то, что PE-подобный белок может продуцироваться этой бактерией. Даже в этом случае, имеется только 32% гомологии между аминокислотными последовательностями PE и Cholix со сходством (42% гомологии), сосредоточенным в ADP-рибозилирующих элементах домена III, и с низкими уровнями аминокислотной гомологии (~15-25%) для большинства сегментов доменов I и II применительно к двум белкам. Более того, эта общая конфигурация Cholix по сравнению с PE даже более примечательна, поскольку эти два белка со сходными элементами произошли от двух различных направлений: Р. aeruginosa представляет собой GC-богатую бактерию, тогда как V. cholera является AT-богатой. То, что эти два токсина, возникшие в двух различных генетических направлениях, пришли к почти одинаковой структуре, но только с 32% аминокислотной гомологии, позволяет предположить, что структурное и функциональное сходство Cholix и PE, вероятно, основано на сходных прессах выживания, а не посредством сходных генетических основ. Очень низкая аминокислотная гомология доменов I и II применительно к этим двум белкам подчеркивает функциональную важность свернутых структур этих двух белков, а не их аминокислотных последовательностей.
По-видимому, C-концевой участок Cholix и PE функционирует при интоксикации клеток посредством ADP-рибозилирования EF2 сходным образом. Недавние исследования, в которых вторую половину Cholix (домен 1 разрушен) нацеливали на раковые клетки посредством конъюгации с антителом, направленным на трансферриновый рецептор, позволяют предположить, что C-концевые участки PE и Cholix, вовлеченные в ADP-рибозилирование EF2, действительно функционально подобны; Sarnovsky, R., et al., Cancer Immunol Immunother 59: 737-746 (2010). Хотя этот дистальный участок Cholix на 36% идентичен и на 50% сходен с PE, поликлональные иммунные сыворотки, вырабатывающиеся у животных, а также сыворотки от больных с нейтрализующими иммунными ответами на этот аналогичный дистальный участок PE, не дает перекрестной реакции с этим вторым участком Cholix. Аналогично, иммунная сыворотка, вырабатывающаяся на этот Cholix, не дает перекрестной реакции с PE. Эти данные позволяют предположить, что хотя как PE, так и Cholix имеют способность к интоксикации клеток посредством сходного механизма, и эти два белка имеют общую структуру сердцевины, имеются выраженные различия в их элементах, которые экспрессированы на поверхности этих белков.
Поскольку предыдущие исследования с применением PE показали, что этот токсин легко транспортируется через поляризованные монослои эпителиальных клеток in vitro и in vivo без интоксикации; Mrsny, R.J., et al., Drug Discov Today, 7(4): p.247-58 (2002), была начата исследовательская работа для дополнительной оценки свойств и биологии Cholix с особым вниманием в отношении функциональных аспектов проксимальных участков Cholix; конкретно, в отношении применения доменов I и II для облегчения транспорта через эпителиальные монослои кишечника. Поскольку домены I и IIa, по-видимому, являются единственными необходимыми элементами PE, которые требуются для эпителиального трансцитоза, особенно важным было исследовать эти аналогичные домены у Cholix. Как утверждалось ранее, существует только ~15%-25% аминокислотной гомологии на протяжении большинства областей, которые, как считается, составляют часть доменов I и IIa. Домены были изучены посредством серии исследований: отслеживанием биологического распределения Cholix после нанесения на эпителиальные поверхности in vivo, оценкой характеристик трансклеточного транспорта Cholix через монослои поляризованных эпителиальных клеток in vitro и доставкой биологически активного груза, генетически интегрированного в белок Cholix на его C-конце. Предварительные данные, полученные в результате генетического слияния первых двух доменов Cholix (аминокислоты 1-386) с зеленым флуоресцентным белком (GFP) или химического связывания этих экспрессированных доменов с латексными гранулами диаметром 100 нм, показали, что отмечался транспорт Cholix, присоединенного к 100 нм латексным гранулам, через эпителиальные монослои кишечника in vitro и in vivo. To, что груз GFP сохранял свой флуоресцентный характер во время и после процесса трансцитоза также поддерживает точку зрения, что Cholix использует недеструктивный (или привилегированный) путь направленного перемещения через поляризованные эпителиальные клетки. Этот результат служит хорошим предзнаменованием для его (повторного) применения в качестве инструмента для доставки биологически активных грузов через эпителиальные барьеры организма, например, таковые в дыхательных и желудочно-кишечных трактах.
Также важным примечанием из предварительных исследований является наблюдение, которое позволяет предположить явное различие между PE и Cholix в отношении взаимодействия с клеточными рецепторами. Как утверждалось ранее, PE поступает в эпителиальные клетки после того, как домен I PE связывается с мембранным белком α2-макроглобулином, белком, который также известен как белок 1, родственный рецептору липопротеинов низкой плотности (LRP1) или CD91. Несмотря на то, что точная природа поверхностного рецептора для Cholix не была установлена, предварительные исследования позволяют предположить, что Cholix не приводит к интоксикации некоторых клеточных линий, экспрессирующих CD91, но приводит к интоксикации некоторых клеточных линий, действительно экспрессирующих CD91. В настоящее время не ясно, какие другие рецепторы, кроме CD91, могут вовлекаться в эпителиальный трансцитоз PE. Тем не менее, Cholix и PE, по-видимому, характеризуются отличающимися взаимодействиями с клеточными рецепторами, демонстрирующими явные различия, которые являются достаточными для того, чтобы предположить очень различные и непредвиденные применения в отношении как пероральных биологических препаратов, так и внутриклеточной доставки биоактивных средств.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение основано на свойствах направленного перемещения через мембрану Cholix и обнаружении того, что Cholix эффективно транспортируется через поляризованные эпителиальные клетки воздухоносных путей и кишечника, что позволяет предположить, что полипептидные последовательности, происходящие от Cholix (в том числе проксимальные элементы белка) можно применять для эффективного трансцитоза белка и наночастиц, что представляет стратегию новых фармацевтических применений.
В связи с этим один аспект настоящего изобретения предполагает обеспечение выделенных конструктов для доставки (например, генетические слияния или химические конструкты), содержащих транспортный домен (например, полипептидная последовательность, происходящая от Cholix) и груз. Как транспортный домен, так и груз могут экспрессироваться/связываться в различных стехиометрических соотношениях и пространственной организации. Различные грузы могут также экспрессироваться/связываться на одном и том же конструкте. В предпочтительных вариантах осуществления такой груз может включать один или любой из белков, пептидов, малых молекул, siRNA, PNA, miRNA, ДНК, плазмиды и антисмысловых последовательностей.
Другой аспект настоящего изобретения предполагает обеспечение возможности доставлять груз, такой как макромолекулы, без инъекций.
Другой аспект настоящего изобретения предполагает обеспечение возможности доставлять груз, такой как (но без ограничений) макромолекулы, малые молекулы, siRNA, PNA, miRNA, ДНК, плазмида и антисмысловые молекулы, во внутриклеточные компартменты, где требуется их активность.
Другой аспект настоящего изобретения предполагает обеспечение транспорта груза путем доставки наночастиц и/или носителей на основе дендримеров через биологические мембраны.
Способы введения/доставки, предполагаемые для применения в настоящем изобретении, включают, например, пероральное введение, ингаляционное введение, интраназальное введение, буккальное введение, сублингвальное введение, глазное введение (в том числе, но без ограничений, доставка к стекловидному телу, роговице, конъюктиве, склере и задней и передней камерам глаза), местное нанесение, инъекцию (с иглой или без иглы), внутривенную инфузию, применение микроиглы, введение с помощью состава лекарственное депо, введение с помощью внутриоболочечного применения, введение с помощью внутрибрюшинного применения, введение с помощью внутрисуставного применения, доставку внутриклеточно, доставку через гематоэнцефалический барьер, доставку через гематоретинальный барьер, вводимые для локальной доставки и действия и/или доставляемые для системной доставки.
В еще одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую конструкты для доставки и фармацевтически приемлемый носитель.
Краткое описание графических материалов
На фигуре 1 изображен обзор стратегии, примененной для C-концевой модификации ntCholix для облегчения слияния с грузом, причем в данном случае груз представляет собой флуоресцентный краситель Alexa488.
На фигуре 2 изображен транспорт ntCholix-Alexa488® через поляризованные эпителиальные клетки кишечника in vitro. Монослои клеток Caco-2 подвергли воздействию тестируемых материалов в течение 4 часов. Процентную долю транспортированного материала определили посредством анализа стандартной кривой флуоресценции, присутствующей в образцах, и представили как среднюю величину (N=4). В качестве контроля применили BSA-Alexa488.
Вариант(ы) осуществления изобретения
Как будет понятно специалистам в данной области техники, вышеприведенное описание подробно описывает определенные предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения и, таким образом, является только образцом и не отображает действительный объем настоящего изобретения. Также будет понятно, что терминология, используемая в данном документе, служит только для цели описания конкретных вариантов осуществления и не предполагает ограничения объема настоящего изобретения, определяемого посредством прилагаемой формулы изобретения.
Если не определяется иначе, все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют значение, обычно понимаемое специалистом в данной области техники, к которой относится настоящее изобретение. Используемые в данном документе следующие термины имеют значение, приписываемое им, если не указывается иное.
Исследования, лежащие в основе настоящего изобретения, относятся к применению в качестве транспортного домена полипептидных последовательностей, происходящих от Cholix, которые будут применяться для получения выделенных конструктов для доставки для улучшения доставки в кишечник биологически активных терапевтических средств. Важно, что системы и способы, описанные в данном документе, предусматривают следующее: возможность доставлять дозы макромолекул без инъекций; возможность доставлять "груз" во внутриклеточные компартменты, где требуется их активность; и доставку наночастиц и/или носителей на основе дендримеров через биологические мембраны, которая иначе была бы затруднена из-за барьерных свойств большинства таких мембран.
Зрелый токсин Cholix ("Cholix") представляет собой чрезвычайно активный мономерный белок (молекулярный вес 70 кДа), секретируемый Vibrio cholerae, который состоит из трех выступающих глобулярных доменов (Ia, II и III) и одного небольшого субдомена (Ib), который соединяет домены II и III. Аминокислотная последовательность зрелого Cholix представлена в Jorgensen, R. et al., J Biol Chem, 283(16): 10671-10678 (2008) и ссылках, цитируемых там. Полипептидные последовательности, происходящие от Cholix, применяемые в получении выделенных конструктов для доставки по настоящему изобретению, будут происходить из описанной в литературе белковой последовательности из 634 аминокислот зрелого Cholix.
Таким образом, конструкты для доставки по настоящему изобретению содержат транспортный домен. Используемый в данном документе "транспортный домен" означает структурные домены, которые способны выполнять определенные функции, например, клеточное распознавание (т.е. включают рецептор-связывающий домен) и трансцитоз (т.е. включают домен для трансцитоза). В основном, транспортные домены, которые применяются в получении конструктов для доставки по настоящему изобретению, представляют собой полипептидные последовательности, происходящие от Cholix, имеющие структурные домены, соответствующие функциональным доменам, например, Ia и II, Cholix.
Наряду с участками молекулы, которые соответствуют функциональным доменам Cholix, конструкты для доставки по настоящему изобретению могут дополнительно включать макромолекулу для доставки в биологический компартмент субъекта. В определенных вариантах осуществления макромолекула выбирается из группы из нуклеиновой кислоты, пептида, полипептида, белка, полисахарида и липида. В дополнительных вариантах осуществления полипептид выбирается из группы, состоящей из полипептидных гормонов, цитокинов, хемокинов, факторов роста и факторов свертывания крови, которые обычно вводятся субъектам посредством инъекции. Последовательности всех этих макромолекул хорошо известны специалистам в данной области техники, а присоединение этих макромолекул к конструктам для доставки находится в пределах навыков специалиста в данной области техники при применении стандартных методик.
Макромолекула может вводиться в любой участок конструкта для доставки так, чтобы при этом не нарушить активность клеточного связывания или трансцитоза. Макромолекула соединяется с остальной частью конструкта для доставки через расщепляемый линкер. "Линкер" означает молекулу, которая соединяет две другие молекулы, либо ковалентно, либо посредством ионных, ван-дер-ваальсовых или водородных связей, например, молекула нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется с одной комплементарной последовательностью на 5'-конце и с другой комплементарной последовательностью на 3'-конце, тем самым соединяя две некомплементарные последовательности. "Расщепляемый линкер" означает линкер, который может распадаться или иным образом разъединяется с отделением двух компонентов, связанных расщепляемым линкером. Расщепляемые линкеры обычно расщепляются под действием ферментов, как правило, пептидаз, протеаз, нуклеаз, липаз и т.п. Расщепляемые линкеры могут также расщепляться под действием стимулов среды, таких как, к примеру, изменения температуры, pH, концентрации солей и т.д., если такое изменение происходит в среде после трансцитоза конструкта для доставки через поляризованную эпителиальную мембрану.
В определенных вариантах осуществления конструкты для доставки дополнительно содержат вторую макромолекулу, которая выбирается из группы, состоящей из нуклеиновой кислоты, пептида, полипептида, белка, липида и малой органической молекулы, и второй расщепляемый линкер, где расщепление в указанном втором расщепляемом линкере отделяет указанную вторую макромолекулу от остальной части указанного конструкта. В определенных вариантах осуществления первая макромолекула представляет собой первый полипептид, а указанная вторая макромолекула представляет собой второй полипептид. В определенных вариантах осуществления первый полипептид и второй полипептид ассоциируются с образованием мультимера. В определенных вариантах осуществления мультимер представляет собой димер, тетрамер или октамер. В дополнительных вариантах осуществления димер представляет собой антитело.
В определенных вариантах осуществления макромолекулу можно выбрать так, чтобы она не была расщепляемой ферментом, присутствующим на базально-латеральной мембране эпителиальной клетки. К примеру, анализы, описанные в примерах, можно применять для стандартного тестирования того, может ли такой расщепляющий фермент расщеплять макромолекулу, подлежащую доставке. Если да, то макромолекулу можно изменить стандартным образом для того, чтобы исключить непригодную аминокислотную последовательность, распознаваемую расщепляющим ферментом. Измененную макромолекулу затем можно протестировать для того, чтобы удостовериться, что она сохраняет активность, с применением стандартных в области техники способов.
В определенных вариантах осуществления первый и/или второй расщепляемый линкер расщепляется под действием фермента, который проявляет более высокую активность на базально-латеральной стороне поляризованной эпителиальной клетки, чем на апикальной стороне поляризованной эпителиальной клетки. В определенных вариантах осуществления первый и/или второй расщепляемый линкер расщепляется под действием фермента, который проявляет более высокую активность в плазме, чем на апикальной стороне поляризованной эпителиальной клетки.
В определенных вариантах осуществления расщепляемый линкер можно выбрать исходя из последовательности таким образом, чтобы в случае пептидной, полипептидной или белковой макромолекул для доставки избежать применения расщепляемых линкеров, которые содержат последовательности, присутствующие в макромолекуле, подлежащей доставке. К примеру, если макромолекула содержит AAL, то расщепляемый линкер можно выбрать таким образом, чтобы он расщеплялся под действием фермента, который не распознает данную последовательность.
Наряду с участками молекулы, которые соответствуют функциональным доменам Cholix, конструкты для доставки по настоящему изобретению могут дополнительно содержать "груз" для доставки во внутриклеточные компартменты, где требуется их активность. "Груз", используемый в данном документе, включает, но без ограничений: макромолекулы, малые молекулы, siRNA, PNA, miRNA, ДНК, плазмиду и антисмысловые молекулы. Другие примеры груза, который может доставляться в соответствии с настоящим изобретением, включают, но без ограничений, противоопухолевые соединения, такие как нитрозомочевины, например кармустин, ломустин, семустин, стрептозотоцин; метилгидразины, например прокарбазин, дакарбазин; стероидные гормоны, например глюкокортикоиды, эстрогены, прогестины, андрогены, тетрагидродезоксикортикостерон; иммуноактивные соединения, такие как иммуносупрессоры, например пириметамин, триметоптерин, пеницилламин, циклоспорин, азатиоприн; и иммуностимуляторы, например левамизол, диэтилдитиокарбамат, энкефалины, эндорфины; противомикробные соединения, такие как антибиотики, например бета-пактам, пенициллин, цефалоспорины, карбапенемы и монобактамы, ингибиторы бета-лактамазы, аминогликозиды, макролиды, тетрациклины, спектиномицин; противомалярийные средства, амебициды; противопротозойные средства; противогрибковые средства, например амфотерицин бета, противовирусные средства, например ацикловир, идоксуридин, рибавирин, трифлуридин, видарбин, ганцикловир; паразитициды; антигельминтики; радиофармацевтические средства; желудочно-кишечные лекарственные средства; гематологические соединения; иммуноглобулины; белки свертывания крови, например антигемофильный фактор, комплекс фактора IX; антикоагулянты, например дикумарол, гепарин Na; ингибиторы фибролизина, например транексамовая кислота; сердечно-сосудистые лекарственные средства; периферические антиадренергические лекарственные средства; гипотензивные лекарственные средства центрального действия, например метилдопа, метилдопа HCl; гипотензивные прямые вазодилататоры, например, диаксозид, гидразин HCl; лекарственные средства, воздействующие на ренин-ангиотензиновую систему; периферические вазодилататоры, например, фентоламин; антиангинальные лекарственные средства; сердечные гликозиды; кардиотонические средства, например амринон, милринон, эноксимон, феноксимон, имазодан, сульмазол; противоаритмические средства; блокаторы входа кальция; лекарственные средства, воздействующие на липиды крови, например ранитидин, бозентан, резулин; респираторные лекарственные средства; симпатомиметические лекарственные средства, например альбутерол, битолтерола мезилат, добутамин HCl, допамин HCl, эфедрин So, эпинефрин, фенфлурамин HCl, изопротеренол HCl, метоксамин HCl, норэпинефрина битартрат, фенилэфрин HCl, ритодрин HCl; холиномиметические лекарственные средства, например, ацетилхолин Cl; антихолинэстеразы, например эдрофоний Cl; реактиваторы холинэстеразы; адреноблокирующие лекарственные средства, например ацебутолол HCl, атенолол, эсмолол HCl, лабеталол HCl, метопролол, надолол, фентоламина мезилат, пропанолол HCl; антимускариновые лекарственные средства, например анизотропинметилбромид, атропин SO4, клинидиум Br, гликопирролат, ипратропий Br, скополамин HBr; нейромышечные блокирующие лекарственные средства; деполяризующие лекарственные средства, например атракурия безилат, гексафлуорения Br, метокурина иодид, сукцинилхолина Cl, тубокурарина Cl, векурония Br; мышечные релаксанты центрального действия, например баклофен; нейромедиаторы и нейромедиаторные средства, например ацетилхолин, аденозин, аденозинтрифосфат; аминокислотные нейромедиаторы, например, возбуждающие аминокислоты, GABA, глицин; нейромедиаторы биогенные амины, например допамин, эпинефрин, гистамин, норэпинефрин, октопамин, серотонин, тирамин; нейропептиды, оксид азота, токсины K+-каналов; антипаркинсонические лекарственные средства, например амальтидин HCl, бензатропина мезилат, карбидопа; диуретические лекарственные средства, например дихлорфенамид, метазоламид, бендрофлуметиазид, политиазид; противомигренозные лекарственные средства, например, карбопроста трометамина мезилат, метисергида малеат. Транспортные домены конструктов для доставки по настоящему изобретению обычно содержат рецептор-связывающий домен. Рецептор-связывающий домен может представлять собой любой рецептор-связывающий домен, известный специалисту в данной области техники, без ограничений для связывания с рецептором клеточной поверхности, который присутствует на апикальной мембране эпителиальной клетки. Предпочтительно, рецептор-связывающий домен специфично связывается с рецептором клеточной поверхности. Рецептор-связывающий домен должен связываться с рецептором клеточной поверхности с достаточным сродством, что делает возможным эндоцитоз конструкта для доставки.
В определенных вариантах осуществления рецептор-связывающий домен может включать пептид, полипептид, белок, липид, углевод или малую органическую молекулу, или их комбинацию. Примеры каждой из данных молекул, которые связываются с рецепторами клеточной поверхности, присутствующими на апикальной мембране эпителиальных клеток, хорошо известны специалистам в данной области техники. Подходящие пептиды или полипептиды включают, но без ограничений, рецептор-связывающие домены бактериальных токсинов, такие как рецептор-связывающие домены из PE, холерного токсина, токсина Cholix, ботулотоксина, дифтерийного токсина, шига-токсина, шига-подобного токсина и т.д.; антитела, в том числе моноклональные, поликлональные и одноцепочечные антитела или их производные, факторы роста, такие как EGF, IGF-I, IGF-II, IGF-III и т.д.; цитокины, такие как IL-1, IL-2, IL-3, IL-6 и т.д.; хемокины, такие как MIP-1a, MIP-1b, MCAF, IL-8 и т.д.; и другие лиганды, такие как CD4, молекулы клеточной адгезии из суперсемейства иммуноглобулинов, интегрины, лиганды, специфичные к рецептору IgA и т.д. Специалист в области техники может выбрать подходящий рецептор-связывающий домен исходя из паттерна экспрессии рецептора, с которым связывается рецептор-связывающий домен.
Рецептор-связывающий домен можно присоединять к остальной части конструкта для доставки посредством любого способа или средств, известных специалисту в данной области техники, пригодных для присоединения таких молекул без ограничений. В определенных вариантах осуществления рецептор-связывающий домен экспрессируется вместе с остальной частью конструкта для доставки в виде белка слияния. Такие варианты осуществления особенно пригодны, когда рецептор-связывающий домен и остальная часть конструкта образованы из пептидов или полипептидов.
Транспортные домены конструктов для доставки по настоящему изобретению дополнительно содержат домен для трансцитоза. Домен для трансцитоза может представлять собой любой домен для трансцитоза, известный специалисту в данной области техники, осуществляющий трансцитоз химерных белков, которые прикрепились к рецептору клеточной поверхности, присутствующему на апикальной мембране эпителиальной клетки. В предпочтительных вариантах осуществления домен для трансцитоза представляет собой домен II Cholix.
Без намерения ограничиваться какой-либо конкретной теорией или механизмом действия полагают, что домен для трансцитоза обеспечивает направленное перемещение конструкта для доставки через поляризованную эпителиальную клетку после того, как конструкт связывается с рецептором, присутствующим на апикальной поверхности поляризованной эпителиальной клетки. Такое направленное перемещение через поляризованную эпителиальную клетку называется в данном документе "трансцитозом". Данное направленное перемещение обеспечивает высвобождение конструкта для доставки из базально-латеральной мембраны поляризованной эпителиальной клетки.
Для доставки груза, предназначенного для внутриклеточной активности, конструкт для доставки содержит домен для эндоцитоза для того, чтобы переместить груз в клетку, и также может содержать расщепляемый линкер. Подобное включает внутриклеточную доставку груза с применением наночастицы и/или носителей на основе дендримеров, нацеленных на рецептор клеточной поверхности, посредством декорирования поверхности носителя одной или несколькими копиями домена для эндоцитоза с или без применения линкеров.
Без намерения ограничиваться какой-либо конкретной теорией или механизмом действия полагают, что домен для эндоцитоза обеспечивает направленное перемещение конструкта для доставки в клетку после того, как конструкт связывается с рецептором, присутствующим на поверхности клетки. Такое направленное перемещение в клетку называется в данном документе "эндоцитозом". Данное направленное перемещение обеспечивает высвобождение конструкта для доставки в соответствующий внутриклеточный компартмент, в том числе (но без ограничений) ядро и ядерную оболочку, рибосомные везикулы, эндоплазматический ретикулум, митохондрии, аппарат Гольджи и цитозоль.
В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения будет оцениваться идентификация протеаз и пептидаз, которые осуществляют биологические процессы, происходящие на базолатеральной поверхности данных клеток. Данные протеазы и пептидазы будут попадать в несколько категорий, которые можно определить по их субстратам: 1) пре-про-гормоны и ферменты, которые секретируются из базолатеральных поверхностей эпителия и нуждаются в обрезке для их активации, 2) активные гормоны или ферменты, активность которых нейтрализуется при помощи события расщепления для регуляции их активности, и 3) системные ферменты или факторы роста, поведение которых на базолатеральной поверхности изменяется при помощи ферментативной модификации. Примеры нескольких потенциальных активностей, попадающих в эти различные категории и которые могут быть пригодны для расщепления на базолатеральной поверхности конструктов носитель-линкер-груз, включают членов подсемейства S9B пролилолигопептидаз, например, FAP и DDP IV, которые были описаны в уровне техники.
Последовательности нуклеиновой кислоты и полинуклеотиды по настоящему изобретению можно получить посредством любого подходящего способа, в том числе, к примеру, клонированном подходящих последовательностей или прямым химическим синтезом с помощью способов, таких как фосфотриэфирный способ из Narang, et al., Meth. Enzymol., 68: 90-99 (1979); фосфодиэфирный способ из Brown, et al., Meth. Enzymol., 68: 109-151 (1979); диэтилфосфорамидитный способ из Beaucage, et al., Tetra. Lett., 22: 1859-1862 (1981); твердофазный фосфорамидитный триэфирный способ, описанный в Beaucage & Caruthers, Tetra. Letts., 22(20): 1859-1862 (1981), например, с применением автоматических синтезирующих устройств, описываемых, к примеру, в Needham-VanDevanter, et al. Nucl. Acids Res. 12: 6159-6168 (1984); и способ твердой подложки из патента США №4458066. При химическом синтезе получают одноцепочечный олигонуклеотид. Его можно превратить в двуцепочечную ДНК с помощью гибридизации с комплементарной последовательностью или с помощью полимеризации с ДНК-полимеразой с применением одной цепи в качестве матрицы. Специалист будет учитывать, что хотя химический синтез ДНК ограничен последовательностями приблизительно 100 оснований, более длинные последовательности можно получить лигированием более коротких последовательностей.
В предпочтительном варианте осуществления последовательности нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению получают с помощью методик клонирования. Примеры подходящих методик клонирования и секвенирования, а также инструкций, достаточных для использования специалистами в качестве руководства в отношении множества процедур клонирования, находятся в Sambrook, et al., MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL (2ND ED.), Vols. 1-3, Cold Spring Harbor Laboratory (1989)), Berger and Kimmel (eds.), GUIDE TO MOLECULAR CLONING TECHNIQUES, Academic Press, Inc., San Diego Calif. (1987)) или Ausubel, et al. (eds.), CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, Greene Publishing and Wiley-lnterscience, NY (1987). Описание продукта от производителей биологических реагентов и оборудования для экспериментов также обеспечивает полезную информацию. Такие производители включают SIGMA chemical company (Сент-Луис, Миссури), R&D systems (Миннеаполис, Миннесота), Pharmacia LKB Biotechnology (Пискатауэй, Нью-Джерси), CLONTECH Laboratories, Inc. (Пало-Альто, Калифорния), Chem Genes Corp., Aldrich Chemical Company (Милуоки, Висконсин), Glen Research, Inc., GIBCO BRL Life Technologies, Inc. (Гейтерсберг, Мэриленд), Fluka Chemica-Biochemika Analytika (Fluka Chemie AG, Букс, Швейцария), Invitrogen, Сан Диего, Калифорния и Applied Biosystem (Фостер Сити, Калифорния), а также многие другие коммерческие источники, известные специалисту.
Клетки, подходящие для воспроизводства или для поддержки рекомбинантной экспрессии белка, хорошо известны в области техники. Такие клетки можно трансфицировать или трансдуцировать, в зависимости от конкретного случая, с помощью конкретного вектора экспрессии, а большие количества клеток, содержащих вектор, можно вырастить для засевания крупномасштабных ферментеров для получения достаточных количеств белка для клинических применений. Такие клетки могут включать прокариотические микроорганизмы, такие как E. coli; различные эукариотические клетки, такие как клетки яичников китайского хомячка (CHO), NSO, 292; дрожжи; клетки насекомых, а также трансгенных животных или трансгенных растений и т.п. В области техники известны стандартные методики для экспрессии чужеродных генов в этих системах.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению включают генетическое слияние или химический конструкт по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Используемый в данном документе "фармацевтически приемлемый носитель" означает любой и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и антигрибковые средства, изотонические средства и средства, замедляющие всасывание и т.п., которые являются физиологически совместимыми. Некоторые примеры фармацевтически приемлемых носителей представляют собой воду, физиологический раствор, фосфатно-солевой буфер, декстрозу, глицерин, этанол и т.п., а также их комбинации. Во многих случаях предпочтительным будет включение в композицию изотонических средств, к примеру, сахаров, полиспиртов, таких как маннит, сорбит, или хлорида натрия. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых веществ представляют собой смачивающие средства или минимальные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие средства, консерванты или буферы, которые увеличивают срок хранения или эффективность антитела. За исключением случаев, когда какой-либо традиционный наполнитель, носитель или среда несовместима с конструктами для доставки по настоящему изобретению, предусматривается их применение в фармацевтических препаратах по настоящему изобретению.
В определенных вариантах осуществления фармацевтические композиции активных соединений можно получить с носителем, который будет защищать композицию от быстрого высвобождения, например, составы с контролируемым высвобождением, в том числе имплантаты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Можно использовать биоразлагаемые биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевую кислоту, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочную кислоту. Многие способы получения таких составов запатентованы или в общем известны специалистам в данной области техники. Смотри, например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems (J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978).
В определенных вариантах осуществления конструкты для доставки по настоящему изобретению могут вводиться перорально, к примеру, с инертным разбавителем или усваиваемым съедобным носителем. Соединение (и другие ингредиенты, при желании) также можно заключать в желатиновую капсулу с твердой или мягкой оболочкой, прессовать в таблетки или вводить непосредственно в пищу субъекта. Для перорального терапевтического введения конструкты для доставки могут вводиться с наполнителями и применяться в форме проглатываемых таблеток, таблеток для медленного растворения в щечном кармане, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, капсул-пластинок и т.п. Для введения соединения по настоящему изобретению иным способом, чем парентеральное введение, может существовать необходимость покрыть соединение или вводить соединение совместно с материалом для предотвращения его инактивации.
Как правило, субъекту вводится фармацевтически эффективное количество конструкта для доставки по настоящему изобретению. Специалист может легко определить, достаточна ли дозировка конструкта для доставки для того, чтобы доставить эффективное количество макромолекулы, как описывается ниже. В определенных вариантах осуществления вводится от приблизительно 1 мкг до приблизительно 1 г конструкта для доставки. В других вариантах осуществления вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 500 мг конструкта для доставки. В еще одних вариантах осуществления вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 100 мг конструкта для доставки. В еще других вариантах осуществления вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 1000 мкг конструкта для доставки. В еще одних вариантах осуществления вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 250 мкг конструкта для доставки. В еще одних вариантах осуществления вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 100 мкг конструкта для доставки. Предпочтительно, вводится от приблизительно 10 мкг до приблизительно 50 мкг конструкта для доставки.
Конструкты для доставки по настоящему изобретению обеспечивают некоторые преимущества по сравнению с традиционными методиками локальной или системной доставки макромолекул субъекту. Главным среди таких преимуществ является возможность доставлять макромолекулу без применения иглы для прокалывания кожи субъекта. Многим субъектам требуются повторяющиеся регулярные дозы макромолекул. К примеру, диабетикам необходимо инъецировать инсулин несколько раз в день для контроля концентраций сахара в крови. Качество жизни таких субъектов могло бы значительно улучшиться, если бы доставку макромолекулы можно было осуществлять без инъекции, при этом избегая боли или потенциальных осложнений, связанных с ней.
Кроме того, многие варианты осуществления конструктов для доставки можно конструировать и экспрессировать в рекомбинантных системах. Рекомбинантная технология дает возможность получить конструкт для доставки с инсерционным сайтом, предназначенным для введения любой подходящей макромолекулы. Такие инсерционные сайты дают возможность специалисту быстро и легко получить конструкты для доставки для того, чтобы доставлять новые макромолекулы в случае возникновения потребности в этом.
Помимо этого, связь макромолекулы с остальной частью конструкта для доставки с помощью линкера, который расщепляется под действием фермента, присутствующего на базально-латеральной мембране эпителиальной клетки, обеспечивает освобождение макромолекулы из конструкта для доставки и высвобождение из остальной части конструкта для доставки вскоре после трансцитоза через эпителиальную мембрану. Такое освобождение снижает вероятность индукции иммунного ответа на макромолекулу. Это также обеспечивает взаимодействие макромолекулы, свободной от остальной части конструкта для доставки, с ее целью.
Другие преимущества конструктов для доставки по настоящему изобретению будут очевидны для специалистов в данной области техники.
Пример 1
Получили плазмидный конструкт, кодирующий зрелый Cholix Vibrio cholera, и применили его для экспрессии зрелого белка Cholix в системе экспрессии E. coli, как описано ранее; смотри, например, Jorgensen, R. et al., J Biol Chem, 283(16): 10671-10678 (2008). Нетоксичную мутантную форму гена Cholix (далее в данном документе именуемую "ntCholix") также получили посредством генетической делеции глутаминовой кислоты в аминокислотном положении 581 (ΔE581), которая аналогична делеции (ΔE553) в белке PE, что делает его нетоксичным без значительного изменения его конформации; Killeen, K.P. and Collier, R.J., Biochim Biophys Acta, 1138: 162-166 (1992). Успешно выполнили экспрессию белка с применением клеток DH5α E. coli (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) после трансформации соответствующей плазмидой с помощью теплового шока (1 мин при 42°C). Трансформированные клетки, отобранные на антибиотик-содержащих средах, выделили и вырастили в бульоне Луриа-Бертани (Difco). Экспрессию белка индуцировали добавлением 1 мМ изопропил-D-тиогалактопиранозида (IPTG). Через два часа после индукции при помощи IPTG клетки собрали с помощью центрифугирования при 5000 xg в течение 10 мин при 4°C. Тельца включения выделили после лизиса клеток и белки солюбилизировали в 6 M гуанидине-HCl и 2 мМ EDTA (pH 8,0) с 65 мМ дитиотреитолом. После рефолдинга и очистки белки хранили из расчета ~5 мл/мл в PBS (pH 7,4), не содержащем Ca2+ и Mg2+ при -80°C. На основании эксклюзионной хроматографии было подтверждено, что все белки, использованные в этих исследованиях, имеют >90% чистоту.
Затем форму ntCholix модифицировали на его С-конце для обеспечения прямого химического связывания через свободный сульфгидрильный остаток, расположенный вблизи C-конца белка. Стратегия C-концевой модификации показана на фигуре 1. C-концевая модификация включала цистеин-ограниченную петлю, содержащую консенсусную последовательность расщепления (ENLFQS) для высокоселективной протеазы из вируса гравировки табака (TEV), второй цистеин и гексагистидиновую (His6) метку. Второй Cys включили для образования дисульфидного мостика с Cys, который в конечном итоге применяется для связывания. Добавление His6-последовательности к белку упростило очистку, а с помощью последовательности расщепления для TEV обеспечили механизм для селективного удаления концевого остатка Cys, с последующим восстановлением в мягких условиях. Расщепление при помощи TEV и восстановление в мягких условиях 0,1 мМ дитиотреитолом после экспрессии и выделения конструктов ntCholix обеспечило прямое химическое связывание груза, флуоресцентного красителя Alexa Fluor® 488 путем реакции на основе малеимида как обобщенного механизма присоединения груза. Полученный в результате конструкт в данном документе обозначается ntCholix-Alexa488. После расщепления протеазой TEV, восстановления и связывания груза посредством реакции малеимида со свободным сульфгидрилом успешно выполнили удаление освобожденной C-концевой последовательности посредством второго этапа Ni2+ колоночной хроматографии.
Пример 2
Трансэпителиальный транспорт ntCholix-Alexa488 оценили in vitro с применением монослоев Caco-2. Вначале, клетки Caco-2 (количество пассажей 25-35) вырастили до конфлюэнтных монослоев, как описано ранее; Rubas, W. et al., Pharm Res, 10: 113-118 (1993). Вкратце, клетки поддерживали при 37°C в DMEM/среде для быстрого роста, обогащенной 2 мМ L-глутамином, 10% фетальной бычьей сывороткой и 100 единицами пенициллина/стрептомицина, в атмосфере 5% CO2 и 90% влажности. Клетки пассировали каждую неделю при индексе разведения 1:3 в 75 см2 флаконы и высевали на предварительно смоченные и покрытые коллагеном проницаемые (размер пор 0,4 мкм) поликарбонатные (Transwell™) фильтрующие подложки от Corning Costar (Кембридж, Массачусетс) при плотности 63000 клеток/см2. Среду для роста заменяли через день. Конфлюэнтные монослои, которые определялись по приобретению значительного трансэпителиального сопротивления (TEER), определяемого с применением вольтомметра (World Precision Instruments, Сарасота, Флорида), использовали через 20-26 дней после высевания.
Также получили два дополнительных материала для применения в качестве контролей для оценки in vitro транспорта Cholix. В качестве внутреннего контроля относительно повреждения фильтра в коммерческом источнике (Sigma) приобрели тетраметилродаминизотиоцианат (TRITC)-меченый 70 кДа декстран. В качестве контроля относительно неспецифического краситель-опосредованного транспорта осуществили реакцию некоторых свободных аминов на поверхности бычьего сывороточного альбумина (BSA; Sigma) с Alexa488 сукцинимидильный сложный эфир карбоновой кислоты (A488-CASE; Invitrogen). Реакцию связывания осуществляли при комнатной температуре, при нейтральном pH, при молярном соотношении 10:1 A488-CASE:BSA в течение 4 часов, по достижении этого времени добавили избыток глицина для остановки реакции. Полученный в результате очищенный продукт содержал ~3 молекулы Alexa488 на молекулу BSA. Тетраметилродаминизотиоцианат (TRITC)-меченый 70 кДа декстран (Sigma), применили в качестве внутреннего контроля относительно повреждения фильтра. Измерения флуоресценции провели с применением прибора BMG labtech FLUOstar Omega с настройками возбуждение при 540 нм и излучение при 610 нм для TRITC-декстрана (оптимальное Ex=547 и Em=572) и возбуждение при 480 нм и излучение при 520 нм для Alexa488 белков (оптимальное Ex=496 и Em=519).
Скорости потока трансэпителиального транспорта измерили in vitro в апикальном (Ap) - базолатеральном (Bl) и в Bl-Ap направлениях с применением поляризованных монослоев клеток Caco-2 для описания процессов потока слизистая оболочка - серозная оболочка и серозная оболочка - слизистая оболочка, соответственно. Непосредственно перед началом исследования транспорта измерили трансэпителиальное сопротивление (TEER) каждого фильтра; причем показатели TEER монослоев <200 Ω·см2 исключили из исследования. Ap и Bl среды удалили из включенных монослоев, и промыли эти поверхности однократно фосфатно-солевым буферным раствором (PBS). Затем один набор монослоев получил Ap (донорное) нанесение 100 мкл PBS, содержащего 10 мкг ntCholix-A488 и 10 мкг TRITC-декстрана или 10 мкг BSA-A488 и 10 мкг TRITC-декстрана. Приемные (Bl) компартменты затем получили 500 мкл PBS для того, чтобы задать Т0 для исследования транспорта. Образцы отобрали как из донорного, так и из приемного компартментов через 4 часа после инкубации при 37°C для определения количества материала, транспортированного через монослой, и количества, оставшегося на апикальной поверхности, соответственно.
После 4 часов воздействия наблюдали, что произошел транспорт ~5% материала, добавленного на апикальную поверхность этих монослоев (смотри фигуру 2). Любые фильтры, демонстрировавшие уровни 75 кДа TRITC-декстрана в базальном компартменте, исключали из анализа. Контрольный белок BSA-Alexa488 не показал каких-либо значительных уровней в базальном компартменте при таком же периоде 4 часа (смотри фигуру 2). Средние значения транспорта составили 5,025±1,13% для Cholix и 0,56±0,33 для BSA (N=4). Эти данные подтверждают, что генетически детоксифицированная форма Cholix может осуществлять эффективный транспорт in vitro через поляризованные монослои клеточной линии рака кишечника человека, Caco-2.
Пример 3
Также получили и экспрессировали в E. coli вариант Cholix, усеченный по аминокислоте A386 (Cholix386), а также генетическое лигирование зеленого флуоресцентного белка (GFP) на C-конце Cholix386 (Choli386GFP). Экспрессию белка успешно провели с применением клеток DH5α Е. coli (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) после трансформации с помощью соответствующей плазмиды посредством теплового шока (1 мин при 42°C). Трансформированные клетки, отобранные на антибиотик-содержащих средах, выделили и вырастили в бульоне Луриа-Бертани (Difco). Экспрессию белка индуцировали добавлением 1 мМ изопропил-D-тиогалактопиранозида (IPTG). Через два часа после индукции при помощи IPTG клетки собрали с помощью центрифугирования при 5000 xg в течение 10 мин при 4°C. Тельца включения выделили после лизиса клеток и белки солюбилизировали в 6 М гуанидин-HCl и 2 мМ EDTA (pH 8,0) с 65 мМ дитиотреитолом. После рефолдинга и очистки белки хранили из расчета ~5 мл/мл в PBS (pH 7,4), не содержащем Ca2+ и Mg2+, при -80°C. Рефолдинг Cholix386GFP отслеживали по приобретению и сохранению характерного признака флуоресценции, связанного с этим флуоресцентным белком; Sample et al., Chem Soc Rev, 38(10): p.2852-64 (2009). Зеленый флуоресцентный белок (GFP) приобрели у Upstate (Шарлоттсвилл, Виргиния). На основании эксклюзионной хроматографии было подтверждено, что все белки, использованные в этих исследованиях, имеют >90% чистоту.
Полистирольные гранулы (диаметр 10 нм), содержащие ковалентно интегрированный красный флуоресцентный краситель со свойствами возбуждения/излучения 468/508 нм и с альдегидными функциональными группами на поверхности (XPR-582), получили от Duke Scientific (Пало-Альто, Калифорния). Сто мкл гранул XPR-582 (при 2% твердых частиц) смешали с приблизительно 2,5 нмоль GFP или Cholix386GFP в конечном объеме 200 мкл нейтрального (pH 7,0) фосфатно-солевого буферного раствора (PBS). Через 2 часа легкого покачивания при комнатной температуре добавили 20 мкл 2 мг/мл раствора бычьего сывороточного альбумина (BSA; Sigma, Сент-Луис, Миссури) в PBS. Препараты затем диализировали с помощью трех циклов разведения PBS и концентрирования с применением фильтрующего устройства Microcon от Millipore (Бедфорд, Массачусетс) с порогом молекулярного веса 100000. Конечные препараты покрытых гранул содержали 1% твердых частиц.
Пример 4
Клетки A549 (ATCC CCL-185™), L929 (ATCC CRL-2148™) и Caco-2 (ATCC HTB-37™) содержали в 5% CO2 при 37°C на полных средах: среде Игла, модифицированной Дульбекко, F12 (DMEM F12), дополненными 10% фетальной бычьей сывороткой, 2,5 мМ глутамином, 100 единицами пенициллина/мл и 100 мкг стрептомицина/мл (Gibco BRL, Гранд Айленд, Нью-Йорк). Каждые 2-3 дня клетки снабжали этими средами (обозначенной полной средой) и пассировали каждые 5-7 дней. Для анализов клетки высеяли на 24- или 96-луночные планшеты и вырастили до конфлюэнтности.
Клетки Caco-2 вырастили в виде конфлюэнтных монослоев на покрытых коллагеном подложках трансвел с поликарбонатной мембраной с размером пор 0,4-мкм (Corning-Costar, Кембридж, Массачусетс) и использовали через 18-25 дней после достижения трансэпителиального электрического сопротивления (TEER)>250 Ω·см2, измеряемого с применением вольтметра чопстик Millicell-ERS® (Millipore). Апикальный-базолатеральный (A→B) и базолатеральный-апикальный (B→A) транспорт Cholix или Cholix386GFP через эти монослои определили посредством измерения количества транспортированного белка через 4 часа после нанесения 20 мкг при 37°C. Для проверки барьерных свойств монослоя в ходе исследования использовали измерения TEER и степень 10 кДа флуоресцентного декстрана (измеряли с применением протокола эксклюзионной ВЭЖХ). Степень транспорта Cholix определили титрацией собранных сред в анализе цитотоксичности на основе клеток. Транспортированный Cholix386GFP измерили с помощью ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA) с применением антитела к GFP для захвата и поликлональных сывороток к Cholix для обнаружения.
Скорости транспорта через монослои поляризованных клеток Caco-2 in vitro были сравнимы для Cholix, ntCholix и Cholix386GFP, как оценивается с помощью анализа в формате ELISA. В случае Cholix, поляризованные клетки Caco-2 не подверглись интоксикации белком, при проверке этого относительно TUNEL-обнаружения апоптоза или высвобождения лактатдегидрогеназы (LDH). Важно, был обнаружен эффективный транспорт Cholix и химерных белков на основе Cholix от апикальной до базолатеральной поверхности монослоев Caco-2, но не в базолатеральном-апикальном направлении. Данные скорости и направленность транспорта были сравнимыми с теми, которые наблюдали ранее для PE, тестируемыми в таком же формате. Дополнительно, наблюдалось, что добавление кроличьей иммунной сыворотки к Cholix не блокировало эффективный транспорт Cholix или Cholix-родственных белков через монослои Caco-2 in vitro.
Конфокальную флуоресцентную микроскопию применили для изучения природы трансцитоза Cholix386GFP через монослои Caco-2 in vitro. В исследовании в зависимости от времени было показано, что Cholix386GFP поступает в эпителиальные клетки на протяжении 5 минут после его апикального нанесения и транспортируется через клетки к базолатеральной области клетки на протяжении 15 минут. У образцов, которые подвергли апикальному воздействию Cholix386GFP в течение 15 минут с последующим удалением избытка Cholix^GFP из апикальной камеры, наблюдали, что флуоресценции GFP продолжалась в направлении базолатеральной поверхности клетки, а не в обратном направлении к апикальной поверхности. Это однонаправленное перемещение Cholix386GFP подтверждалось измерением содержания Cholix386GFP в апикальных и базолатеральных компартментах на протяжении этого периода времени. При нанесении Cholix386GFP на базолатеральную поверхность монослоев Caco-2 не демонстрировалась какая-либо значительная флуоресценция, поступающая в клетки, что согласуется с исследованиями транспорта. Вестерн-блот анализ транспортированных Cholix, ntCholix и Cholix386GFP позволил предположить, что эти белки транспортируются без значительных изменений.
В in vitro исследованиях также было показано, что флуоресцентные латексные гранулы диаметром 100 нм, химически связанные с Cholix386GFP, эффективно транспортируются через монослои Caco-2 после апикального нанесения. При отборе латексных гранул с диаметром 100 нм обеспечили материал, который может легко поместиться в полости эндосомы диаметром 125 нм, происходящей из покрытой клатрином ямки. Таким образом, эти исследования позволяют предположить, что Cholix386GFP-латексные гранулы перемещаются через поляризованные клетки Caco-2 при помощи механизма, соответствующего захвату эндосом на апикальной поверхности клеток с последующим внутриклеточным направленным перемещением на основе эндосом. Предварительная инкубация Cholix386GFP-связанных флуоресцентных латексных гранул диаметром 100 нм с иммунной сывороткой к Cholix не изменила транспорт этих гранул. При применении сходного количество GFP, химически связанного с флуоресцентными латексными гранулами диаметром 100 нм, не происходило облегчение in vitro транспорта этих частиц через монослои Caco-2. Исследования при помощи конфокальной флуоресцентной микроскопии подтверждали различия, которые наблюдали для трансцитоза латексной гранулы, покрытой Cholix386GFP в сравнении с GFP.
Полученный результат, что Cholix может транспортироваться через поляризованные эпителиальные барьеры подобно PE, является непредвиденным. Хотя их структуры подобны, как следует из кристаллографического анализа, аминокислотный состав их поверхностей сильно отличается; действительно, способы выравнивания на основании аминокислотного сходства с трудом находят соответствие этих двух белков. Это важно тем, что способность происходящего от патогена белка, такого как эти два фактора вирулентности, взаимодействовать с рецепторами клетки-хозяина предполагает вовлечение аминокислотных компонентов, экспрессируемых на поверхности. Так как оба этих белка (с их существенно отличающимися аминокислотными последовательностями) эффективно транспортируются через поляризованные эпителии, весьма вероятно, что некий иной механизм образует основу этой способности к транспорту. С нашей точки зрения структурные взаимоотношения, общие для PE и Cholix, образуют основу специфической способности их эффективного трансцитоза. Несмотря на то, что оба белка PE и Cholix, вероятно, обладают способностью связываться с рецептором на апикальной поверхности для обеспечения доступа в эндосомальные компартменты, более вероятно, что это взаимодействие и возможность вовлечения других рецепторов во внутриклеточное направленное перемещение этих белков основываются на конформационных структурах, а не на конкретных аминокислотах на поверхности белка.
Все продукты и способы, раскрытые и заявленные в данном документе, можно получить и осуществить без чрезмерного экспериментирования в свете настоящего раскрытия. Несмотря на то, что продукты и способы данного изобретения были описаны в контексте предпочтительных вариантов осуществления, специалистам в области техники будет очевидно, что к продуктам и способам могут применяться вариации без отступления от сущности и объема настоящего изобретения. Все такие вариации и эквиваленты, очевидные для специалистов в области техники, будь то существующие в настоящее время или разработанные впоследствии, считаются находящимися в пределах сущности и объема настоящего изобретения, как определяется прилагаемой формулой изобретения. Все патенты, патентные заявки и публикации, упомянутые в описании, указывают на уровни квалификации специалистов в области техники, которым соответствует настоящее изобретение. Все патенты, патентные заявки и публикации включаются в данный документ посредством ссылки во всей их полноте для всех целей и в той же степени, как если бы конкретно и отдельно указывалось, что каждая отдельная публикация включается посредством ссылки во всей ее полноте для любой и всех целей. Настоящее изобретение, иллюстративно описанное в данном документе, можно надлежащим образом осуществить на практике в отсутствие любого(ых) элемента(ов), конкретно не раскрытого(ых) в данном документе. Таким образом, например, в каждом случае в данном документе любой из терминов "содержащий", "по существу состоящий из" и "состоящий из" можно заменить любым из двух остальных терминов. Термины и выражения, которые были использованы, применялись в качестве терминов для описания и не для ограничения, и применение таких терминов и выражений не предназначено для исключения каких-либо эквивалентов показанных и описанных признаков или их частей, но признается, что в пределах объема заявленного настоящего изобретения возможны различные модификации. Таким образом, следует понимать, что хотя настоящее изобретение конкретно раскрывается посредством предпочтительных вариантов осуществления и необязательных признаков, специалист в данной области техники может прибегнуть к модификации и вариации понятий, раскрытых в данном документе, и что такие модификации и вариации рассматриваются находящимися в пределах объема данного изобретения, как определяется прилагаемой формулой изобретения.
Claims (11)
1. Выделенный конструкт для доставки терапевтического груза через поляризованные эпителиальные клетки в направлении от апикальной к базолатеральной поверхности монослоев клеток, где конструкт содержит токсин Cholix, являющийся нетоксичным, состоящий из аминокислотных остатков Val1-Ala386; и связанный с ним терапевтический груз.
2. Выделенный конструкт для доставки по п. 1, где доставка происходит без инъекций.
3. Выделенный конструкт для доставки по п. 1, где указанный терапевтический груз выбран из группы, состоящей из макромолекул, малых молекул, siRNA, PNA, miRNA, ДНК, плазмиды и антисмысловых молекул.
4. Выделенный конструкт для доставки по п. 1, где терапевтический груз представляет собой цитокин.
5. Фармацевтическая композиция для доставки терапевтического груза через поляризованные эпителиальные клетки в направлении от апикальной к базолатеральной поверхности монослоев клеток, содержащая выделенный конструкт для доставки по п. 1 в терапевтически эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель.
6. Фармацевтическая композиция по п. 5, предназначенная для перорального введения, местного введения, ингаляционного введения, интраназального введения, буккального введения, сублингвального введения или глазного введения.
7. Фармацевтическая композиция по п. 6, предназначенная для перорального введения.
8. Фармацевтическая композиция по п. 5, приготовленная в виде капсулы или таблетки.
9. Фармацевтическая композиция по п. 5, содержащая от приблизительно 1 мкг до приблизительно 1 г выделенного конструкта для доставки.
10. Фармацевтическая композиция по п. 5, где выделенный конструкт для доставки составляет от приблизительно 10 мкг до приблизительно 100 мг.
11. Выделенный конструкт для доставки терапевтического груза через поляризованные эпителиальные клетки в направлении от апикальной к базолатеральной поверхности монослоев клеток, где конструкт представляет собой токсин Cholix, являющийся нетоксичным, у которого удален остаток Glu581, и связанный с ним терапевтический груз.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US40339410P | 2010-09-15 | 2010-09-15 | |
US61/403,394 | 2010-09-15 | ||
PCT/US2011/001602 WO2012036746A1 (en) | 2010-09-15 | 2011-09-15 | Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2013116447A RU2013116447A (ru) | 2014-10-20 |
RU2593715C2 true RU2593715C2 (ru) | 2016-08-10 |
Family
ID=45831897
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013116447/10A RU2593715C2 (ru) | 2010-09-15 | 2011-09-15 | Системы и способы доставки биоактивных средств с применением транспортных последовательностей, происходящих от бактериального токсина |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US9090691B2 (ru) |
EP (1) | EP2616045B1 (ru) |
JP (2) | JP6133208B2 (ru) |
KR (1) | KR101881176B1 (ru) |
CN (2) | CN103249401B (ru) |
AU (1) | AU2011302645B2 (ru) |
BR (1) | BR112013006088B1 (ru) |
CA (1) | CA2848656C (ru) |
ES (1) | ES2656943T3 (ru) |
IL (1) | IL225171B (ru) |
MX (1) | MX354016B (ru) |
NO (1) | NO2616045T3 (ru) |
RU (1) | RU2593715C2 (ru) |
WO (1) | WO2012036746A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201302658B (ru) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2011302645B2 (en) | 2010-09-15 | 2015-02-26 | Applied Molecular Transport, Llc | Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences |
US11246915B2 (en) | 2010-09-15 | 2022-02-15 | Applied Molecular Transport Inc. | Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo |
WO2013021374A2 (en) | 2011-08-05 | 2013-02-14 | Mitraltech Ltd. | Techniques for percutaneous mitral valve replacement and sealing |
RU2723178C2 (ru) * | 2014-05-07 | 2020-06-09 | ЭППЛАЙД МОЛЕКЬЮЛАР ТРАНСПОРТ ЭлЭлСи | Слитые молекулы, происходящие от Cholix-токсина, для пероральной доставки биологически активных нагрузок |
CA3093386A1 (en) * | 2018-03-08 | 2019-09-12 | Applied Molecular Transport Inc. | Toxin-derived delivery constructs for oral delivery |
HUE059330T2 (hu) * | 2018-03-08 | 2022-11-28 | Applied Molecular Transport Inc | Toxinból származó bejuttatási konstrukciók orális beadásra |
JP2022512976A (ja) * | 2018-11-07 | 2022-02-07 | アプライド モレキュラー トランスポート インコーポレイテッド | 異種ペイロードの経口送達のためのコリックス由来担体 |
JP2022506990A (ja) * | 2018-11-07 | 2022-01-17 | アプライド モレキュラー トランスポート インコーポレイテッド | トランスサイトーシスのための送達構築物および関連する方法 |
CN114555058A (zh) * | 2019-08-16 | 2022-05-27 | 应用分子转运公司 | 用于有效载荷递送的组合物和颗粒 |
EP3844169A4 (en) | 2019-08-16 | 2021-12-15 | Applied Molecular Transport Inc. | COMPOSITIONS, FORMULATIONS AND PRODUCTION AND PURIFICATION OF INTERLEUKINS |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2169010C2 (ru) * | 1995-09-21 | 2001-06-20 | Квадрант Хелткеар (Ю-Кей) Лимитед | Векторы и усилители трансцитоза для доставки лекарственных веществ |
Family Cites Families (79)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1014372A (en) | 1910-12-01 | 1912-01-09 | Bush Mfg Company | Hinge. |
US1013068A (en) | 1911-09-09 | 1911-12-26 | Frederick F Mcintosh | Single-trigger gun mechanism. |
US2643653A (en) * | 1951-07-19 | 1953-06-30 | Heidrich John | Pill injector |
US4458066A (en) | 1980-02-29 | 1984-07-03 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
FR2504010B1 (fr) | 1981-04-15 | 1985-10-25 | Sanofi Sa | Medicaments anticancereux contenant la chaine a de la ricine associee a un anticorps antimelanome et procede pour leur preparation |
US4671958A (en) | 1982-03-09 | 1987-06-09 | Cytogen Corporation | Antibody conjugates for the delivery of compounds to target sites |
US4589071A (en) | 1982-04-19 | 1986-05-13 | Nissan Motor Co., Ltd. | Method and apparatus for controlling reduction ratio of continuously variable transmission with acceleration compensation |
US5272065A (en) | 1983-10-20 | 1993-12-21 | Research Foundation Of State University Of New York | Regulation of gene expression by employing translational inhibition of MRNA utilizing interfering complementary MRNA |
US4542225A (en) | 1984-08-29 | 1985-09-17 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Acid-cleavable compound |
US4659839A (en) | 1984-10-10 | 1987-04-21 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for radiolabeled antibody fragments |
DE3680924D1 (de) | 1985-01-14 | 1991-09-26 | Neorx Corp | Metall-radionuklid markiertes protein fuer diagnose und therapie. |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4680338A (en) | 1985-10-17 | 1987-07-14 | Immunomedics, Inc. | Bifunctional linker |
US4699784A (en) | 1986-02-25 | 1987-10-13 | Center For Molecular Medicine & Immunology | Tumoricidal methotrexate-antibody conjugate |
US5807832A (en) | 1987-06-09 | 1998-09-15 | Biotech Australia Pty Limited | Oral delivery of biologically active substances bound to vitamin B12 |
US5997856A (en) | 1988-10-05 | 1999-12-07 | Chiron Corporation | Method and compositions for solubilization and stabilization of polypeptides, especially proteins |
US6780613B1 (en) | 1988-10-28 | 2004-08-24 | Genentech, Inc. | Growth hormone variants |
JP2665827B2 (ja) | 1990-05-11 | 1997-10-22 | アメリカ合衆国 | 低―動物毒性と高殺細胞活性の改良シュードモナス外毒素 |
GB9112553D0 (en) | 1991-06-11 | 1991-07-31 | Wellcome Found | Fusion proteins |
JPH06508371A (ja) | 1991-06-21 | 1994-09-22 | ユニバーシティー オブ シンシナティ | 経口投与できる治療用タンパク質及びその製法 |
US6613332B1 (en) | 1991-06-21 | 2003-09-02 | The University Of Cincinnati | Oral administration of therapeutic proteins |
EP0646175B1 (en) | 1992-06-18 | 2005-12-28 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Recombinant pseudomonas exotoxin with increased activity |
CA2155005C (en) | 1993-02-02 | 1999-04-06 | Weldon Courtney Mcgregor | Pharmaceutical compositions containing bactericidal permeability increasing protein and a surfactant |
GB9320782D0 (en) | 1993-10-08 | 1993-12-01 | Univ Leeds Innovations Ltd | Stabilising of proteins on solution |
GB9420355D0 (en) | 1994-10-10 | 1994-11-23 | Univ Nottingham | Preparation of protein microspheres, films and coatings |
US5656730A (en) | 1995-04-07 | 1997-08-12 | Enzon, Inc. | Stabilized monomeric protein compositions |
US5912014A (en) | 1996-03-15 | 1999-06-15 | Unigene Laboratories, Inc. | Oral salmon calcitonin pharmaceutical products |
US5922680A (en) | 1996-10-23 | 1999-07-13 | Ferring, B.V. | Stabilized composition for oral administration of peptides |
WO1999006429A1 (fr) | 1997-08-01 | 1999-02-11 | Toray Industries, Inc. | Stabilisation de proteines utiles et compositions a base de proteines utiles |
US6342611B1 (en) | 1997-10-10 | 2002-01-29 | Cytovia, Inc. | Fluorogenic or fluorescent reporter molecules and their applications for whole-cell fluorescence screening assays for capsases and other enzymes and the use thereof |
US6592847B1 (en) | 1998-05-14 | 2003-07-15 | The General Hospital Corporation | Intramolecularly-quenched near infrared flourescent probes |
US7053200B1 (en) | 1999-06-01 | 2006-05-30 | Baylor College Of Medicine | Compositions and methods for the therapeutic use of an atonal-associated sequence for deafness, osteoarthritis, and abnormal cell proliferation |
NZ535205A (en) | 1999-10-04 | 2006-01-27 | Chiron Corp | Stabilized liquid interleukin-2 ( IL-2 ) containing pharmaceutical compositions |
US20030186386A1 (en) | 2000-02-11 | 2003-10-02 | Hansen Christian Karsten | Interleukin 10 |
CA2429708A1 (en) | 2000-11-27 | 2003-01-16 | Powerject Vaccines, Inc. | Nucleic acid adjuvants |
US6673574B2 (en) | 2000-11-30 | 2004-01-06 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides using enzyme-cleavable membrane translocators |
US6573237B2 (en) | 2001-03-16 | 2003-06-03 | Eli Lilly And Company | Protein formulations |
WO2002093998A2 (en) | 2001-05-23 | 2002-11-28 | Duotol Ab | Suppression of allergic reactions by transdermal administration of allergens in conjunction with or conjugated to toxin subunits or fragments thereof |
JP4623625B2 (ja) | 2003-07-24 | 2011-02-02 | 株式会社AMBiS | ヘテロ型5量体組換えワクチン |
EP1522585A1 (en) | 2003-10-09 | 2005-04-13 | Plant Research International B.V. | Chimeric carrier molecules for the production of mucosal vaccines |
WO2006073446A2 (en) | 2004-04-28 | 2006-07-13 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Peptide-mediated protein transduction into cells the hematopoietic lineage |
CA2583202A1 (en) * | 2004-10-04 | 2006-04-27 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods and compositions for needleless delivery of macromolecules |
WO2006135428A2 (en) | 2004-10-04 | 2006-12-21 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods and compositions for inducing an immune response against multiple antigens |
US7998930B2 (en) | 2004-11-04 | 2011-08-16 | Hanall Biopharma Co., Ltd. | Modified growth hormones |
PL3006457T3 (pl) | 2005-07-29 | 2018-05-30 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Health And Human Services | Zmutowane egzotoksyny Pseudomonas o zmniejszonej antygenowości |
US20070148131A1 (en) * | 2005-12-05 | 2007-06-28 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods and compositions for needleless delivery of binding partners |
US20090305978A1 (en) | 2006-03-16 | 2009-12-10 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods for increasing the size of animals using needleless delivery constructs |
WO2008011157A2 (en) | 2006-07-20 | 2008-01-24 | The General Hospital Corporation | Methods, compositions, and kits for the selective activation of protoxins through combinatorial targeting |
US20090092660A1 (en) | 2006-08-09 | 2009-04-09 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods and compositions for needleless delivery of particles |
US20100196277A1 (en) * | 2006-10-09 | 2010-08-05 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Nanoparticle compositions for controlled delivery of nucleic acids |
US9707299B2 (en) * | 2007-05-23 | 2017-07-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Targeted carriers for intracellular drug delivery |
JP2010534061A (ja) * | 2007-07-20 | 2010-11-04 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 組換えコレラ菌外毒素 |
CN101361968B (zh) | 2007-08-06 | 2011-08-03 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用 |
WO2009026328A2 (en) * | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Immune Disease Institute, Inc. | Methods of delivery of agents to leukocytes and endothelial cells |
JP5670875B2 (ja) * | 2008-03-17 | 2015-02-18 | ウニベルジテーツクリニクム ミュンスター | カーゴ分子の送達ビヒクルおよび炎症反応を免疫調節するための生物学的治療剤としてのYopM |
WO2009149281A1 (en) * | 2008-06-04 | 2009-12-10 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Immunotoxins and uses thereof |
EP2344540B1 (en) | 2008-10-02 | 2017-11-29 | Aptevo Research and Development LLC | Cd86 antagonist multi-target binding proteins |
WO2011009624A1 (en) | 2009-07-22 | 2011-01-27 | Cenix Bioscience Gmbh | Delivery system and conjugates for compound delivery via naturally occurring intracellular transport routes |
WO2011031441A1 (en) | 2009-08-28 | 2011-03-17 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Therapy with a chimeric molecule and a pro-apoptotic agent |
AU2011302645B2 (en) | 2010-09-15 | 2015-02-26 | Applied Molecular Transport, Llc | Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences |
WO2012101235A1 (en) | 2011-01-26 | 2012-08-02 | Cenix Bioscience Gmbh | Delivery system and conjugates for compound delivery via naturally occurring intracellular transport routes |
WO2012110596A1 (en) | 2011-02-16 | 2012-08-23 | Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg | Fusion protein for the treatment of immunologic or allergic reactions |
EP3653224A1 (en) | 2011-06-29 | 2020-05-20 | Rani Therapeutics, LLC | Therapeutic agent preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device |
AU2014257123A1 (en) | 2013-04-24 | 2015-10-15 | Armo Biosciences, Inc. | Interleukin-10 compositions and uses thereof |
CN104623637A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用 |
EP3065777B2 (en) | 2013-11-07 | 2023-07-12 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Il-22 for use in the treatment of gastrointestinal graft vs. host disease |
KR20230048153A (ko) | 2014-01-27 | 2023-04-10 | 몰레큘러 템플레이츠, 인코퍼레이션. | 폴리펩티드를 전달하는 mhc 클래스 i 항원결정기 |
RU2723178C2 (ru) | 2014-05-07 | 2020-06-09 | ЭППЛАЙД МОЛЕКЬЮЛАР ТРАНСПОРТ ЭлЭлСи | Слитые молекулы, происходящие от Cholix-токсина, для пероральной доставки биологически активных нагрузок |
CN107106655A (zh) | 2014-10-22 | 2017-08-29 | 阿尔莫生物科技股份有限公司 | 使用白细胞介素‑10治疗疾病和病症的方法 |
WO2016146833A1 (en) | 2015-03-19 | 2016-09-22 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance |
US20190255107A1 (en) | 2015-10-09 | 2019-08-22 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Modulation of novel immune checkpoint targets |
EP3400068A1 (en) | 2016-01-06 | 2018-11-14 | Yeda Research and Development Co., Ltd. | Compositions and methods for treating malignant, autoimmune and inflammatory diseases |
EP3192805A1 (en) | 2016-01-15 | 2017-07-19 | Humanitas Mirasole S.p.A. | Inhibitors of t cell activation or stimulation and uses thereof |
WO2017210684A1 (en) | 2016-06-03 | 2017-12-07 | New York University | Methods and reagents for modulating macrophage phenotype |
CA3026393C (en) | 2016-06-22 | 2023-03-14 | Alkermes, Inc. | Compositions and methods for modulating il-10 immunostimulatory and anti-inflammatory properties |
WO2018112255A1 (en) | 2016-12-14 | 2018-06-21 | Progenity Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immunosuppressant |
WO2018112264A1 (en) | 2016-12-14 | 2018-06-21 | Progenity Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a chemokine/chemokine receptor inhibitor |
US11596670B2 (en) | 2017-03-30 | 2023-03-07 | Biora Therapeutics, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with IL-10 or an IL-10 agonist |
CA3093386A1 (en) | 2018-03-08 | 2019-09-12 | Applied Molecular Transport Inc. | Toxin-derived delivery constructs for oral delivery |
-
2011
- 2011-09-15 AU AU2011302645A patent/AU2011302645B2/en active Active
- 2011-09-15 KR KR1020137009377A patent/KR101881176B1/ko active IP Right Grant
- 2011-09-15 CN CN201180053563.1A patent/CN103249401B/zh active Active
- 2011-09-15 ES ES11825567.8T patent/ES2656943T3/es active Active
- 2011-09-15 BR BR112013006088-3A patent/BR112013006088B1/pt active IP Right Grant
- 2011-09-15 NO NO11825567A patent/NO2616045T3/no unknown
- 2011-09-15 RU RU2013116447/10A patent/RU2593715C2/ru active
- 2011-09-15 MX MX2013002939A patent/MX354016B/es active IP Right Grant
- 2011-09-15 CN CN201510983178.7A patent/CN105541978B/zh active Active
- 2011-09-15 JP JP2013529128A patent/JP6133208B2/ja active Active
- 2011-09-15 EP EP11825567.8A patent/EP2616045B1/en active Active
- 2011-09-15 US US13/822,435 patent/US9090691B2/en active Active
- 2011-09-15 CA CA2848656A patent/CA2848656C/en active Active
- 2011-09-15 WO PCT/US2011/001602 patent/WO2012036746A1/en active Application Filing
-
2013
- 2013-03-12 IL IL225171A patent/IL225171B/en active IP Right Grant
- 2013-04-12 ZA ZA2013/02658A patent/ZA201302658B/en unknown
-
2015
- 2015-06-08 US US14/733,940 patent/US20150265718A1/en not_active Abandoned
- 2015-06-08 US US14/733,946 patent/US20150265719A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-12-26 JP JP2016250581A patent/JP6433970B2/ja active Active
-
2017
- 2017-12-11 US US15/837,256 patent/US20180353610A1/en active Pending
-
2019
- 2019-05-16 US US16/414,686 patent/US10617741B2/en active Active
- 2019-05-16 US US16/414,671 patent/US10617767B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2169010C2 (ru) * | 1995-09-21 | 2001-06-20 | Квадрант Хелткеар (Ю-Кей) Лимитед | Векторы и усилители трансцитоза для доставки лекарственных веществ |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JORGENSEN R. et al., Cholix toxin, a novel ADP-ribosylating factor from Vibrio cholerae, J Biol Chem., 2008, v.283, is.16, p.10671-10678. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2593715C2 (ru) | Системы и способы доставки биоактивных средств с применением транспортных последовательностей, происходящих от бактериального токсина | |
US10799565B2 (en) | Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo | |
JP5670875B2 (ja) | カーゴ分子の送達ビヒクルおよび炎症反応を免疫調節するための生物学的治療剤としてのYopM | |
Wolf et al. | Structural requirements for cellular uptake and antisense activity of peptide nucleic acids conjugated with various peptides | |
US20220226445A1 (en) | Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo | |
JP2003519668A (ja) | 熱ショックタンパク質融合タンパク質による、cd4+t細胞非依存性のインビボctl惹起による個別atp結合ドメインのマッピング | |
JP2012518417A (ja) | Pa−cardを用いて癌を予防及び/又は治療するための組成物及び方法 | |
US8440788B2 (en) | N-terminal VDAC variants and uses thereof | |
JP2013071904A (ja) | 抗インフルエンザウイルス活性を有するペプチド | |
US11241393B2 (en) | Organosilicon carriers for use in treating infections and/or diseases caused by SARS viruses | |
WO2010129710A1 (en) | Use of rankl to induce differentiation of microfold cells (m cells) |