RU2582985C1 - Способ получения биологического контейнера - Google Patents

Способ получения биологического контейнера Download PDF

Info

Publication number
RU2582985C1
RU2582985C1 RU2015112755/15A RU2015112755A RU2582985C1 RU 2582985 C1 RU2582985 C1 RU 2582985C1 RU 2015112755/15 A RU2015112755/15 A RU 2015112755/15A RU 2015112755 A RU2015112755 A RU 2015112755A RU 2582985 C1 RU2582985 C1 RU 2582985C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
fractions
biological
container
biocontainer
bio
Prior art date
Application number
RU2015112755/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Геннадий Васильевич Небогатиков
Ксения Алексеевна Баканова
Юлия Игоревна Кутузова
Ирина Михайловна Панферова
Александр Рэстэмович Халиков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ) filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ)
Priority to RU2015112755/15A priority Critical patent/RU2582985C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2582985C1 publication Critical patent/RU2582985C1/ru

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61JCONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
    • A61J1/00Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ получения биоконтейнера для длительного хранения биологических клеток и фракций в жидком азоте при температуре -196°C, отличающийся тем, что емкостью биоконтейнера является внутренняя прозрачная ткань плавательного пузыря рыб, состоящая из однослойного плоского эпителия, взятого от живых рыб. Осуществление изобретения обеспечивает создание благоприятных условий хранения биологических клеток в криогенных условиях. 5 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил.

Description

Биоконтейнер для объектов биологического происхождения, замороженных в форме гранул в жидком азоте (-196°С), относится к ветеринарной медицине, в частности к области акушерства, гинекологии, трансплантации эмбрионов и искусственного осеменения животных.
Известен способ использования биоконтейнера для хранения и адресной доставки антиоксидантов в «Митохондрии», состоящий из синтеза пластохинина и катиона родамина для восстановления дыхательного процесса в мембранах клеточных митохондрий «молекулы-электроды» в больном организме.
Недостатком этого способа является то, что биоконтейнер состоит из химических веществ несовместимых с клетками, с живыми тканями и биологическими лечебными фракциями (сперматозоидами, бластоцистами и фетоплацентарными фракциями), что при длительном хранении губительно влияет на лечебную эффективность, на живые тканевые клетки больного организма животных. Оболочка контейнера такого химического состава не способна выдержать лечебную структуру наполнителей, соединившись с химическими компонентами жидкого азота при его низкой температуре -196°С.
Известен «Контейнер для биологических объектов", состоящий из корпуса, крышки на двух петлях, двух замков. Внутренность выстлана теплоизоляционным материалом, внутри находиться охладитель из резины, наполняемый охлаждающим веществом. В качестве охладителя используется замороженная вода или другие водные растворы солей с температурой от 0 до 5°С. Устройство используют для сохранения биоматериалов на короткое время с места происшествия объекта биологического происхождения.
Недостатком этого устройства является их способность к непригодности в техническом и химикобиологическом отношении, неспособность работать от автономных источников электроэнергии. Теплоизоляционный материал, резина охлаждающий агент, и другие детали контейнера, с которыми биологические объекты будут соприкасаться, состоят из поролона, металла, также возможны нарушения постоянства температуры в контейнере. Устройство не позволяет длительно (30, 90, 100 дней) сохранять биологические объекты в анабиотическом состоянии.
Наиболее близким к настоящему изобретению, что является прототипом предлагаемого нами изобретения, это биоконтейнеры для длительного хранения замороженной спермы и эмбрионов сельскохозяйственных животных. Эти биоконтейнеры для хранения биологических объектов, использующих в повседневной практике в жидком азоте в одноразовых или стеклянных, полиэтиленовых ампулах, пробирках, капиллярах, пайетах, канистрах, мешочках (ситцевая, льняная, лавсановая ткань).
Недостатком этих биоконтейнеров является то, что эти емкости химического происхождения: полиэтилен, полистирол, полипропилен, которые не биологического происхождения. Они не совместимы с бластоцистами, сперматозоидами, эмбрионами, биофракциями, и являются токсичными не только по запаху (феромоны), но и, соединяясь с жидким азотом, образуют вредные вещества, губительно действующие на биологические клетки и лечебные фракции (сперматозоиды, эмбрионы), находящиеся в жидком азоте в анабиотическом состоянии. Поэтому хранящийся биоматериал приходится выбраковывать до 40-50%. Задачей данного изобретения является разработка способа получения биологического контейнера, состоящего из биологической ткани (однослойного, плоского эпителия, околоплодные клетки, эмбриональные ткани), обладающие лечебными фракциями.
Цель изобретения - создание благоприятных анабиотических условий в криогенных жидкостях (жидкий азот -196°С), позволяющих сохранять оплодотворяющую способность и лечебные свойства в половых клетках, жизнеспособность эмбрионов.
Поставленная цель достигается тем, что в качестве биоконтейнера используется плавательный рыбий пузырь.
Плавательный пузырь рыб выполняет гидростатическую функцию, изменяя вес рыбы, создавая нейтральную плавучесть. Плавательный пузырь в эмбриональном развитии возникает из пищеварительной трубки в области пищевода, как трубчатый вырост, сообщаясь с глоткой посредством воздушного хода. У рыб он имеет две камеры. Стенка плавательного пузыря состоит из двух оболочек, легко отделяющихся друг от друга.
Внутренняя прозрачная оболочка плавательного пузыря состоит из однослойных эпителиальных клеток, обладающих прочностью при растяжении и смене температур от +24°С до -196°С при загрузке в жидкий азот биологических объектов в форме замороженных гранул, в объеме от 0,2 до 0,5 мл. Наружная оболочка плавательного пузыря состоит из соединительной ткани и коллагеновых волокон (рис. 1). Плавательный пузырь состоит из: 1 - двух пузырей; 2 - протока; 3 - прозрачного однослойного эпителия; 4 - коллагеновой оболочки.
В качестве изобретения мы предлагаем использование в качестве биоконтейнера (рис. 2) внутреннюю оболочку плавательного пузыря, состоящую из однослойного прозрачного прочного эпителия, с целью хранения половых клеток, эмбрионов, биологических лечебных клеток и фракций вне организма, а также с целью увеличения сроков выживаемости и сохранности имплантационной, оплодотворяющей и лечебной способности в замороженном состоянии, что основано на снижении обменных процессов.
Предлагаемый нами биоконтейнер (рис. 2) состоит из: 1 - корпуса биоконтейнера; 2 - прозрачная оболочка из однослойного эпителия; 3 - воздушный проток; 4 - загрузка гранулоцитов или жидкой биологической фракции; 5 - шелковая хирургическая нить.
Анабиоз при низкой температуре в биоконтейнере, стенка которого состоит их природой созданных эпителиальных клеток, способствующих сохранности анабиотического состояния. Но этого не могут создать биоконтейнеры химического происхождения из пластмассы, полипропилена, макролона, поликарбоната, дакрила, лавсана, полистирола, из шелковой и ситцевой ткани, капилляры (пайеты).
Последовательность выполнения предлагаемого способа получения биоконтейнера состоит в следующем:
1. Извлекают из брюшной полости рыб плавательные пузыри;
2. Промывают плавательный пузырь раствором марганцево-кислого калия 1:5000 и орошают физиологическим раствором (0,85%) многократным погружением в емкость;
3. Обеззараживают плавательный пузырь в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной минуты;
4. Снимают с помощью стерильного пинцета с плавательного пузыря коллагеновую поверхностную оболочку;
5. Освобождают внутреннюю прозрачную, состоящую из однослойного эпителия оболочку, имеющую форму мешочка, промывают ее физиологическим раствором (0,85%);
6. Поверхность эпителиального мешка помещают, путем погружения, в раствор ланолина в течение одной минуты для придания ткани эластичности. После этого промывают, орошая физиологическим раствором;
7. Обеззараживают полученный биоконтейнер в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной минуты в подвешенном виде;
8. Через расширенный воздухоносный проток, соединяющий оба пузыря, после его разъединения на две емкости резекцией, загружают замороженными в форме гранул биологическими клетками, тканями, лечебными фракциями;
9. Перевязывают воздухоносный проток шелковой стерильной хирургической нитью;
10. Помещают биоконтейнер в сосуд Дьюара с жидким азотом при температуре -196°С для длительного хранения;
11. Перед использованием замороженные биологические гранулы с эмбриональными клетками извлекают из биоконтейнера, сохранившего эластичность;
12 Гранулы оттаивают в водяной бане при температуре 38-40°С, согласно Ветеринарному Законодательству России.
Практическое применение
Извлеченные из биоконтейнера, оттаянные биологические фракции в форме гранул, мы вводили в матку коровам с серозно-катаральным послеродовым эндометритом. Результаты лечения отображены в таблице 1.
Figure 00000001
Из таблицы 1 видно, что после лечения коров с болезнями половых органов, после патологических родов, когда коровам в полость матки вводили биологические лечебные фракции, ранее замороженные в биологическом контейнере, успешно выздоровели из 12 больных коров 9, что составляет 75%, а в контрольной группе, когда коров лечили общепринятыми способами, сохраняя фракции в мешочках из лавсановой ткани, выздоровело меньше на 3,6%. В опытной группе коровы после лечения пришли в половую охоту в среднем через 28-32 дня, а коровы контрольной группы пришли в охоту после отела на 40-45 день.
Библиографический список
1. Лямзаев К.Г., Антоненко А.В. и др. Произведение пластохинина, адресованное в митохондрии, как средство, прерывающее программу старения. Катионные производные пластохинина: синтез и исследование in vitro. Международный форум по нанотехнологиям, 6-8 октября. Сборник тезисов докладов участников Второго Международного форума по нанотехнологиям. Москва, 2009 г., стр. 519-520.
2. Патент на полезную модель РФ №42634 «Контейнер для биологических объектов». 10.12.2004. Авторы: Филипов А.И., Коршунов В.М., Филипова С.И.
3. Небогатиков Г.В. «Практикум по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных». Издательство Москва, Мир, 2005 г., стр. 225-228.

Claims (6)

1. Способ получения биоконтейнера для длительного хранения биологических клеток и фракций в жидком азоте при температуре -196°C, отличающийся тем, что емкостью биоконтейнера является внутренняя прозрачная ткань плавательного пузыря рыб, состоящая из однослойного плоского эпителия, взятого от живых рыб.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что корпус биоконтейнера перед использованием освобождают стерильным пинцетом, снимая коллагеновую поверхностную оболочку с плавательного пузыря рыб.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что прозрачный корпус биоконтейнера, состоящий из однослойного плоского эпителия, обеззараживают в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной мин.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что через расширенный воздухоносный проток, соединяющий оба пузыря после его разделения на две емкости резекцией, загружают замороженные в форме гранул биологические клетки, ткани, лечебные фракции, бластоцисты, сперматозоиды.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что помещают перевязанный стерильной нитью биоконтейнер, заполненный гранулированными фракциями, в сосуд Дьюара (Т-196°C).
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед практическим использованием биологических фракций биоконтейнеры извлекают из сосуда Дьюара, а гранулы извлекают и оттаивают в водяной бане при температуре 38-40°C.
RU2015112755/15A 2015-04-07 2015-04-07 Способ получения биологического контейнера RU2582985C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015112755/15A RU2582985C1 (ru) 2015-04-07 2015-04-07 Способ получения биологического контейнера

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015112755/15A RU2582985C1 (ru) 2015-04-07 2015-04-07 Способ получения биологического контейнера

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2582985C1 true RU2582985C1 (ru) 2016-04-27

Family

ID=55794789

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015112755/15A RU2582985C1 (ru) 2015-04-07 2015-04-07 Способ получения биологического контейнера

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2582985C1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1326215A1 (ru) * 1985-03-01 1987-07-30 Украинский Научно-Исследовательский Институт Экспериментальной Ветеринарии Устройство дл хранени биологических объектов в жидком азоте
US7759115B2 (en) * 2003-02-10 2010-07-20 Bio X Cell, Inc. Incubation and/or storage container system and method

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1326215A1 (ru) * 1985-03-01 1987-07-30 Украинский Научно-Исследовательский Институт Экспериментальной Ветеринарии Устройство дл хранени биологических объектов в жидком азоте
US7759115B2 (en) * 2003-02-10 2010-07-20 Bio X Cell, Inc. Incubation and/or storage container system and method

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2969987T3 (es) Dispositivo de criopreservación
Wan et al. Preservation of rat hearts in subfreezing temperature isochoric conditions to–8 C and 78 MPa
Rajan et al. Development and application of cryoprotectants
RU2428997C1 (ru) Способ получения лечебных препаратов из пуповины плода
BRPI0708411A2 (pt) hidratantes e lubricantes aquasos e usos dos mesmos
JP6095689B2 (ja) 細胞、組織および器官の凍結保存
CN105163579A (zh) 一种生物样本玻璃化冷冻载体及其用途
JP6242001B2 (ja) 生体材料の保存方法、生体材料の生産方法、生体材料、移植材料、移植方法および生体材料の保存装置
FR2569105A1 (fr) Procede de reproduction des corps cellulaires
RU2582985C1 (ru) Способ получения биологического контейнера
WO2000066028A1 (en) Compositions for freezing dog sperm, method of freezing the dog sperm utilizing the compositions and artificial insemination method employing the frozen dog sperm
US10245075B2 (en) Nondestructive means of ectopic pregnancy management
JP2010540478A (ja) 透明な冷却ゲル
BRPI0610997A2 (pt) cámaras criogênicas hiperbáricas
Kennedy et al. The encapsular developmental sequence of the mesogastropod Turritella communis (Gastropoda: Turritellidae)
JP6427649B2 (ja) 生体材料の保存方法、生体材料の生産方法、生体材料、移植材料、移植方法および生体材料の保存装置
WO2018094541A1 (es) Método y sistema de cosecha de peces vivos de bajo estrés, bioseguro y sin sufrimiento animal. mejorando la textura y calidad de la carne
Karim et al. Fact findings about the frozen buck semen characters freezing with EYC and Tris extender and productivity of Black Bengal does as the potential genetic resource in Bangladesh
CN109549739A (zh) 一种用于构建新型磁微粒集聚脑缺血动物模型的试剂盒
RU2022109075A (ru) Способ криоконсервации клеток, органов, тканей и организмов
RU2694577C1 (ru) Биоконтейнер для адресной доставки фармакологических средств при лечении и послеродовой профилактики цервицита у коров
CN115191401B (zh) 一种复合感染模型支架及其使用方法
RU2692917C1 (ru) Способ фиксации и хранения биоматериала с использованием высокоэффективного и нетоксичного реагента
Hredzak et al. Survival of mouse embryos after vitrification depending on the cooling rate of the cryoprotectant solution
Momozawa et al. Vitrification of bovine blastocysts on a membrane filter absorbing extracellular vitrification solution

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20170408