RU2582952C2 - Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием - Google Patents
Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием Download PDFInfo
- Publication number
- RU2582952C2 RU2582952C2 RU2012154647/15A RU2012154647A RU2582952C2 RU 2582952 C2 RU2582952 C2 RU 2582952C2 RU 2012154647/15 A RU2012154647/15 A RU 2012154647/15A RU 2012154647 A RU2012154647 A RU 2012154647A RU 2582952 C2 RU2582952 C2 RU 2582952C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- solution
- animals
- extractant
- drug
- minutes
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 230000009471 action Effects 0.000 title claims abstract description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 56
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 12
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 11
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 claims description 12
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 claims description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 9
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 7
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 7
- 241000045403 Astragalus propinquus Species 0.000 abstract description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 33
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 32
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 9
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 9
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- -1 Triterpene compounds Chemical class 0.000 description 8
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 8
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000141 anti-hypoxic effect Effects 0.000 description 5
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 241000772415 Neovison vison Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 4
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000490050 Eleutherococcus Species 0.000 description 3
- 231100000642 Histotoxic hypoxia Toxicity 0.000 description 3
- 206010020591 Hypercapnia Diseases 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 3
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 3
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 3
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 3
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 3
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 3
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002515 isoflavone derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical class C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000219830 Onobrychis Species 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 2
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- HKQYGTCOTHHOMP-UHFFFAOYSA-N formononetin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O HKQYGTCOTHHOMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003370 grooming effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLZVCIGGICSWIG-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethoxydiphenylborane Chemical compound C=1C=CC=CC=1B(OCCN)C1=CC=CC=C1 BLZVCIGGICSWIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N Anthron Natural products COc1cc2Cc3cc(C)cc(O)c3C(=O)c2c(O)c1C=CC(C)C FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N Astragaloside I Natural products CC(=O)OC1C(O)COC(OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C)(CCC6(O)C7(C)CCC(O7)C(C)(C)O)C5CC(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C4C2(C)C)C1OC(=O)C LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-II Chemical compound CC(=O)OC1C(C(COC1OC2CCC34CC35CCC6(C(C(CC6(C5CC(C4C2)OC7C(C(C(C(O7)CO)O)O)O)C)O)C8(CCC(O8)C(C)(C)O)C)C)O)O LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027534 Emotional disease Diseases 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910013684 LiClO 4 Inorganic materials 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 244000010922 Plantago major Species 0.000 description 1
- 235000015266 Plantago major Nutrition 0.000 description 1
- 244000272264 Saussurea lappa Species 0.000 description 1
- 235000006784 Saussurea lappa Nutrition 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 229930194930 Triterpen Natural products 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- FVFSMBDVZVUETN-BQAOMNQWSA-N astragaloside III Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O FVFSMBDVZVUETN-BQAOMNQWSA-N 0.000 description 1
- QMNWISYXSJWHRY-XZFBGSIGSA-N astragaloside a Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O[C@H]4C([C@@H](O)C(O)[C@@H](CO)O4)O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-XZFBGSIGSA-N 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000008918 emotional behaviour Effects 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.CCOC(C)=O INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- RIKPNWPEMPODJD-UHFFFAOYSA-N formononetin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC=CC=C2C1=O RIKPNWPEMPODJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000079 pharmacotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 125000003523 triterpene group Chemical group 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- 230000009723 vascular congestion Effects 0.000 description 1
- 208000008918 voyeurism Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу получения средства из корней астрагала перепончатого, обладающего адаптогенным действием. Указанный способ характеризуется тем, что проводят ультразвуковую экстракцию измельченного растительного материала 55-65% этиловым спиртом в соотношении сырье:экстрагент 1:(8-10) в течение 20-30 мин, далее растительный материал экстрагируют дважды тем же экстрагентом в соотношении сырье:экстрагент 1:(18-20) при температуре 85-90°С в течение 80-100 мин, затем спиртовые извлечения объединяют и концентрируют, сгущенный экстракт высушивают и измельчают. Изобретение обеспечивает получение средства с более выраженной адаптогенной активностью, чем у аналогов, за счет более высокого содержания действующих веществ. 4 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области фармации и касается способа получения средства из растительного сырья, обладающего адаптогенным действием.
Известны способы получения жидких экстрактов из астрагала эспарцетолистного и астрагала серпоплодного, обладающих стимулирующим действием на ЦНС [1, 2]. Недостатками известных методов являются использование в качестве носителя фармакологических свойств малоконцентрированных лекарственных форм из растительных объектов (жидких экстрактов), что обуславливает значительно более низкую выраженность фармакологических эффектов. Более того, для производства жидких лекарственных форм характерна значительная длительность технологического процесса (5-14 дней), а применение жидких экстрактов не позволяет использовать их для создания комбинированных препаратов вследствие отсутствия возможности точного дозирования и хранения. Следует также отметить, что для указанных видов астрагала характерна более низкая концентрация действующих веществ (тритерпенов, аминокислот, флавоноидов), чем для широко распространенного в России астрагала перепончатого, что, в свою очередь, также оказывает влияние на активность конечных препаратов.
Задачей изобретения является повышение адаптогенного, стимулирующего действия средства за счет более высокого содержания действующих веществ (тритерпенов, аминокислот, флавоноидов).
Технический результат изобретения (получение сухого экстракта из корней астрагала перепончатого - Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge, семейство Бобовые) достигается за счет использования в ходе технологического процесса ультразвуковой экстракции растительного сырья.
Для достижения указанного технического результата измельченный растительный материал (корни астрагала перепончатого) заливают 60% этанолом в соотношении сырье : экстрагент 1:(8-10) и подвергают смесь ультразвуковой обработке частотой 50 кГц в течение 20-30 мин. Далее к смеси приливают 55-65% этанол до соотношения сырье : экстрагент 1:(18-20) и экстрагируют при температуре 85-90°C в течение 80-100 мин. Извлечение фильтруют в сборник. Экстракцию повторяют в тех же условиях еще один раз. Спиртовые извлечения объединяют и концентрируют до 1/40 от первоначального объема. Сгущенный экстракт высушивают в вакуум-сушильном шкафу и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Выход готового продукта (сухого экстракта) составляет 23-25% от массы растительного сырья.
Выявленные отличительные признаки позволяют сделать вывод о соответствии предлагаемого технологического решения критерию “новизна”.
Предложенный способ позволяет получить сухой экстракт (далее - средство) в виде рассыпчатого негигроскопичного порошка желтовато-коричневого цвета со сладковатым вкусом и специфическим приятным запахом. Потеря массы при высушивании - 6-7%.
Способ иллюстрируется нижеследующими примерами.
Пример 1. 1.1 кг корней астрагала перепончатого измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 1 кг измельченного сырья загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 10 л 60% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме в течение 15 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и загружают в аппарат еще 10 л 60% этанола. Экстрагируют при температуре 85-90°C и периодическом помешивании в течение 90 мин. Извлечение фильтруют в сборник. Проводят еще одну экстракцию в тех же условиях, подавая в экстрактор 60% этанол в количестве, равном объему слитого (1 слив - 17.2 л, 2 слив - 17.1 л). Объединенные спиртовые извлечения упаривают примерно до 1/40 от первоначального объема и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°C и давлении 0.1 атм в течение 5 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 0.253 кг готового продукта, что составляет 25.3% экстрактивных веществ от массы исходного сырья. Сухой экстракт представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, цвет от светло-коричневого до коричневого, запах специфический, приятный, вкус - сладковатый. Потеря массы при высушивании составляет 6.27%.
Пример 2. 1.1 кг корней астрагала перепончатого измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 1 кг измельченного сырья загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 9 л 65% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме в течение 20 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и загружают в аппарат еще 11 л 65% этанола. Экстрагируют при температуре 85-90°C и периодическом помешивании в течение 100 мин. Извлечение фильтруют в сборник. Проводят еще одну экстракцию в тех же условиях, подавая в экстрактор 65% этанол в количестве, равном объему слитого (1 слив - 17.0 л, 2 слив - 16.8 л). Объединенные спиртовые извлечения упаривают примерно до 1/40 от первоначального объема и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°C и давлении 0.1 атм в течение 5 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 0.231 кг готового продукта, что составляет 23.1% экстрактивных веществ от массы исходного сырья. Потеря массы при высушивании составляет 6.70%.
Пример 3. 1.1 кг корней астрагала перепончатого измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 1 кг измельченного сырья загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 10 л 55% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме в течение 20 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и загружают в аппарат еще 8 л 55% этанола. Экстрагируют при температуре 85-90°C и периодическом помешивании в течение 80 мин. Извлечение фильтруют в сборник. Проводят еще одну экстракцию в тех же условиях, подавая в экстрактор 55% этанол в количестве, равном объему слитого (1 слив - 15.5 л, 2 слив - 15.7 л). Объединенные спиртовые извлечения упаривают примерно до 1/40 от первоначального объема и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°C и давлении 0.1 атм в течение 5 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 0.245 кг готового продукта, что составляет 24.5% экстрактивных веществ от массы исходного сырья. Потеря массы при высушивании составляет 6.23%.
Химический состав средства
Для проведения качественного и количественного анализа средства был использован комплекс спектральных (спектрофотометрия) и хроматографических методов (ВЭЖХ, ВЭТСХ). Экспериментальные условия приведены ниже.
Тритерпеновые соединения. ВЭЖХ. 1 г средства переносили в пробирку с притертой пробкой, приливали по 5 мл воды и бутанола, сильно встряхивали смесь до полного распределения средства между фазами. Органический слой отбирали, концентрировали в вакууме досуха, сухой остаток растворяли в 3 мл метанола и выливали по каплям в 20 мл охлажденной (0°C) смеси диэтилового эфира и ацетона (1:1). Выпавший осадок центрифугировали, растворяли в 1 мл метанола, фильтровали через кварцевый фильтр Millipore (ø0.45 мкм) и использовали для анализа методом микроколоночной ВЭЖХ-УФ. Условия ВЭЖХ-УФ: жидкостный хроматограф Милихром А-02 (Эконова); колонка ProntoSIL-120-5-C18 AQ (2×75 мм, ø5 мкм; Metrohm AG); подвижная фаза: (4.1 М LiClO4 в 0.1 М HClO4):H2O 5:95 (A), MeCN (В); градиентный режим B в A: 10% (0-2.5 мин), 10-20% (2.5-7.5 мин), 20-25% (7.5-12.5 мин), 25-33% (12.5-17.5 мин), 33-35% (17.5-22.5 мин), 35-60% (22.5-30 мин); ν 100 мкл/мин; Тколонки 40°C; Vпробы 2 мкл; детектор при 210 нм. В качестве внешних стандартов использовали растворы индивидуальных соединений с известной концентрацией. Чистота соединений по данным ВЭЖХ составляла не менее 95%. Суммарная погрешность измерений не превышала 5%. ВЭТСХ. Использовали пластины Сорбфил ПТСХ-АФ-В (Имид Ltd.) размером 15×10 см. Исследуемый раствор и растворы стандартных образцов тритерпенов (2 мкл) наносили микрошприцем на стартовую линию полосами длиной 8 мм. Далее хроматограмму помещали в предварительно насыщенную в течение 20 мин в системе растворителей (этилацетат - метанол - вода 10:1.35:1) вертикальную хроматографическую камеру и хроматографировали при 20°C на высоту 60 мм, после чего пластины просушивали в потоке холодного воздуха в течение 10 мин. Полученные хроматограммы обрабатывали методом погружения 1% раствором ванилина в смеси 95% спирт этиловый - кислота серная (10:1) и высушивали на термостолике при 105°C в течение 10 мин.
Изофлавоны. ВЭЖХ. Условия ВЭЖХ аналогичны таковым для тритерпенов, кроме длины волны детектора - 270 нм. ВЭТСХ. 200 мг средства переносили в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, приливали 10 мл этилацетата, перемешивали и обрабатывали ультразвуком в импульсном режиме с частотой 50 кГц в течение 20 мин. После этого извлечение отфильтровывали и концентрировали в вакууме досуха. Сухой остаток растворяли в 300 мкл метанола и использовали для анализа. Общие условия анализа аналогичны таковым для тритерпенов, кроме системы растворителей - толуол - этилацетат - 85% кислота муравьиная (5:4:1), а также детектора - 0.5% раствор 2-аминоэтилдифенилборината в этилацетате и 5% раствор полиэтиленгликоля 400 в 1,2-дихлорэтане.
Аминокислоты. ВЭЖХ. Пробоподготовку проводили согласно аттестованной методике [3]. Условия ВЭЖХ-УФ: микроколоночный жидкостный хроматограф Милихром А-02 (Эконова); колонка ProntoSIL-120-5-C18 AQ (2×75 мм, ø5 мкм; Metrohm AG); подвижная фаза: (1 М CH3COONH4, pH 5.25):H2O 5:95 (А), (1 М CH3COONH4, pH 6.50):MeCN:H2O 1:7:12 (В); градиентный режим: 0-12 мин линейный градиент 0-6 мин 0-12% В, 6-21 мин 12-65% В, изократический режим 21-30 мин 100% В; ν 150 мкл/мин; Тколонки 60°C; Vпробы 2 мкл, λ 246 и 260 нм.
Углеводы. Состав свободных углеводов определяли методом микроколоночной ВЭЖХ [4], количественное содержание - антроновым методом [5].
Согласно данным ВЭЖХ и ВЭТСХ в составе средства обнаружено присутствие тритерпенов - астрагалозидов I, II, III и IV, изофлавонов - каликозина, каликозин-7-O-глюкозида и формононетина. Суммарное содержание тритерпенов в средстве составляет 52-98 мг %, изофлавонов - 28-49 мг %. Исследование состава аминокислот показало наличие 23 соединений, в т.ч. доминирующих аспарагина (5.67%), пролина (2.94%), глицина (1.22%), глутамина (1.04%), аргинина (0.95%), аланина (0.67%), и минорных (менее 0.2%) аспарагиновой кислоты, бетаина, цистеина, гамма-аминомасляной кислоты, глутаминовой кислоты, гистидина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, гидроксипролина, фенилаланина, серина, треонина, триптофана, тирозина и валина. Свободные углеводы средства представлены четырьмя доминирующими соединениями - сахарозой (27-32%), глюкозой (2-4%), фруктозой (0.5-0.7%) и галактозой (0.22-0.24%).
Количественный анализ и показатели качества средства
Для проведения количественного анализа средства разработана методика определения суммарного содержания аминокислот с применением спектрофотометрической методики, использующей модифицированный нингидриновый метод. Методика основана на способности ациклических аминокислот в нейтральной среде образовывать окрашенный комплекс с нингидрином (пурпурный Руэмана), обладающий максимумом поглощения в видимой области спектра при 568 нм. Для определения содержания гетероциклических аминокислот (пролин, гидроксипролин, триптофан, гистидин), дающих комплексы иного состава (максимумы поглощения 400-420 нм), предложено проведение реакции в кислой среде, в которой образование пурпурного Руэмана не происходит, что позволяет определять содержание только данной группы аминокислот. В качестве рабочих стандартных образцов (РСО) выбраны аспарагин и пролин - доминирующие компоненты в составе групп ациклических и гетероциклических аминокислот.
Методика. Около 0.1 г (точная навеска) средства помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, приливают 5 мл 95% этанола и 20 мл воды, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объем раствора до метки водой (раствор A). По 0.5 мл раствора A переносят в 2 пробирки вместимостью 25 мл, приливают 1 мл воды и 1 мл реактива. В первую пробирку вносят 0.2 мл воды, во вторую - 0.2 мл кислоты уксусной концентрированной. Обе пробирки нагревают на водяной бане при 90°C в течение 30 мин. После охлаждения реакционные смеси переносят в мерные колбы вместимостью 25 мл водой (первая пробирка) и 95% этанолом (вторая пробирка) и доводят до метки теми же растворителями (растворы Б1 и Б2). Оптическую плотность раствора Б1 измеряют при длине волны 568 нм, раствора Б2 - при 410 нм. В качестве раствора сравнения используют воду (первая пробирка) и 70% этанол (вторая пробирка).
Суммарное содержание ациклических аминокислот в пересчете на аспарагин в средстве в процентах (Х1) вычисляют по формуле:
где D - оптическая плотность раствора Б1; KV - коэффициент разбавления исследуемого раствора (1250); m - масса навески средства, г; DS - оптическая плотность раствора РСО аспарагина; 
- коэффициент разбавления раствора РСО аспарагина (625); mS - масса навески РСО аспарагина, г; W - потеря в массе при высушивании средства, %.
Суммарное содержание гетероциклических аминокислот в пересчете на пролин в средстве в процентах (Х2) вычисляют по формуле:
где D - оптическая плотность раствора Б2; KV - коэффициент разбавления исследуемого раствора (1250); m - масса навески средства, г; DS - оптическая плотность раствора РСО пролина; 
- коэффициент разбавления раствора РСО пролина (625); mS - масса навески РСО пролина, г; W - потеря в массе при высушивании средства, %.
Суммарное содержание аминокислот в средстве в процентах (X) вычисляют по формуле: X=X1+X2.
Приготовление РСО аспарагина. 10 мг аспарагина (точная навеска) переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 10 мл воды и доводят объем раствора до метки тем же растворителем (раствор А). 1 мл раствора А переносят в пробирку вместимостью 10 мл, приливают 1 мл воды, 1 мл реактива и нагревают на водяной бане при 90°C в течение 30 мин. После охлаждения реакционную смесь переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл водой и доводят объем раствора до метки водой (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б измеряют при длине волны 568 нм.
Приготовление РСО пролина. 20 мг пролина (точная навеска) переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 10 мл воды и доводят объем раствора до метки тем же растворителем (раствор A). 1 мл раствора A переносят в пробирку вместимостью 10 мл, приливают 1 мл воды, 1 мл реактива, 100 мкл кислоты уксусной концентрированной и нагревают на водяной бане при 90°C в течение 30 мин. После охлаждения реакционную смесь переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл водой и доводят объем раствора до метки 70% этанолом (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б измеряют при длине волны 410 нм.
Приготовление реактива. 1 г нингидрина переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл 95% этанола и доводят объем раствора до метки тем же растворителем.
В таблице 1 приведены результаты метрологического анализа разработанной методики.
Исследования 10 серий средства показали, что содержание ациклических аминокислот может составлять 15.19-19.35%, гетероциклических аминокислот - 8.93-10.68%, суммарное содержание аминокислот - 22.98-28.54%. В таблице 2 приведены показатели качества средства.
Предлагаемый способ, по сравнению с известным, позволяет получить препарат постоянного состава с более выраженной активностью за счет более высокого содержания действующих веществ (тритерпенов, аминокислот, флавоноидов).
Рассчитать экономическую целесообразность предлагаемого способа в настоящее время не представляется возможным, однако вышеуказанные преимущества в сочетании с простой схемой получения способствуют рациональному использованию лекарственного растительного сырья и определяют перспективность внедрения данного способа в фармацевтическую промышленность.
Фармакотерапевтические свойства средства
Острая токсичность средства. Опыты проведены на крысах-самцах линии Wistar массой 180-190 г. Острую токсичность средства оценивали с использованием метода Кербера [6] при однократном внутрибрюшинном введении в дозах 500-5000 г/кг и внутрижелудочном введении в дозах 1000-6000 мг/кг. Все испытанные дозы доводили дистиллированной водой до конечного объема, составляющего 1.0 мл / 100 г массы животного. Наблюдение за общим состоянием подопытных крыс и их поведением осуществляли в течение 14 дней. При этом в первый день после введения указанных средств животные находились под постоянным наблюдением. Регистрировали наблюдаемые признаки интоксикации: общее состояние животных, поведение, двигательную активность, характер дыхательных движений, состояние волосяного и кожного покрова, окраску слизистых оболочек, потребление корма и воды, количество и консистенцию фекальных масс, частоту мочеиспускания и окраску мочи. Также регистрировали сроки развития интоксикации и гибели животных. На 14 сутки эксперимента осуществляли эвтаназию под эфирным наркозом и проводили макроскопический осмотр внутренних органов с помощью бинокулярной лупы, а также осуществляли патоморфологическое исследование жизненно важных органов.
Установлено, что при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении средства во всех исследованных дозах гибели животных в течение всего периода наблюдения не отмечалось. При внутрибрюшинном введении наиболее высоких доз испытуемого средства (2000-5000 мкг/кг) в течение 1-2 суток наблюдали видимые признаки интоксикации животных в виде гиподинамии, снижения аппетита, учащения дыхания. Вскрытие животных, осуществленное через 14 суток, показало, что визуально внутренние органы не отличались от таковых у интактных крыс; при патоморфологическом исследовании у животных, получавших средство в высоких дозах, отмечали нарушения гемодинамики в виде полнокровия сосудов, а также единичные мелкоточечные кровоизлияния в слизистой оболочке желудка.
Таким образом, полученные данные позволяют отнести испытуемое средство к группе малотоксичных веществ по классификации К.К. Сидорова [7].
Влияние средства на поведенческую активность животных. Эксперименты проведены на крысах линии Wistar массой 160-180 г. Влияние средства на ориентировочно-исследовательскую реакцию и поведенческую активность исследовали с использованием метода «открытое поле» [8]. Животным опытных групп средство вводили внутрижелудочно в дозах 50, 100 и 150 мг/кг объеме 10 мл/кг в течение 7 дней до тестирования. Крысам контрольной группы вводили эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизированный раствор экстракта элеутерококка в объеме 5.0 мл/кг. С целью оценки ориентировочно-исследовательской активности и эмоционального поведения животных регистрировали горизонтальную активность (число пересеченных квадратов), вертикальную активность (число подъемов на задние лапки), норковый рефлекс (число заглядываний в норки), дефекацию (количество фекальных шариков), груминг (количество умывающих движений), количество выходов в центральную зону. Об общей двигательной активности судили по сумме вертикального, горизонтального компонентов и норковому рефлексу.
Установлено, что помещение животных в экспериментальную камеру «открытое поле» приводило к повышению общей двигательной активности с преимущественным увеличением горизонтального компонента и пребыванием в периферических квадратах, что свидетельствует о высоком уровне эмоциональной активности в новых незнакомых условиях (табл.3). По мере освоения животные начинали посещать центральные квадраты камеры, причем на 3-й минуте тестирования у животных существенно возрастала вертикальная активность и норковый рефлекс. Достаточно высокое число болюсов (фекальных шариков) указывает на высокую эмоциональную реакцию, выраженное чувство страха, переживаемого животным.
У животных, получавших средство в дозах 50 и 100 мг/кг, при помещении их в незнакомые условия отмечалось существенное повышение общей двигательной активности (почти в три раза по сравнению с контролем). При этом повышение двигательной активности у животных этих групп происходило, преимущественно, за счет увеличения вертикальной активности и норкового рефлекса (соответственно на 119 и 85%; 436 и 274% по сравнению с аналогичными показателями в контроле), что свидетельствует о том, что средство стимулирует ориентировочно-исследовательскую активность животных. На ускорение процесса адаптации под влиянием испытуемого средства и повышение исследовательской реакции указывает также существенное возрастание количества выходов животных в центральную зону камеры.
Наряду с этим, под влиянием средства в дозах 50 и 100 мг/кг отмечалось уменьшение числа болюсов (на 50 и 40%, соответственно), а также увеличение актов груминга (на 35 и 106%, соответственно), что указывает на ускорение периода адаптации к новым условиям, снижение уровня тревожности и возрастание приверженности к гигиеническим навыкам у животных опытной группы. При этом стимулирующая активность средства в дозе 50 мг/кг превышала действие экстракта элеутероккока, а использование его в дозе 100 мг/кг было аналогичным таковому у препарата сравнения. На фоне введения средства в дозе 150 мг/кг отмечалась несколько иная поведенческая картина: под его влиянием достоверно уменьшалось количество актов дефекации, тогда как все остальные показатели были на уровне данных животных контрольной группы.
Влияние средства на устойчивость животных к гипоксии. Эксперименты проведены на крысах линии Wistar массой 160-180 г. Антигипоксическую активность средства исследовали с использованием на моделях острой гемической, гистотоксической и нормобарической гипоксии с гиперкапнией. Модель гемической гипоксии воспроизводили путем однократного внутрибрюшинного введения нитрита натрия в дозе 70 мг/кг (LD50); гистотоксической гипоксии - однократным введением нитропруссида натрия 20 мг/кг (DL100); нормобарической гипоксии с гиперкапнией - путем помещения животных в герметически закрытые банки объемом 200 см3 [8]. Животным опытных групп средство вводили внутрижелудочно в дозах 50, 100 и 150 мг/кг в объеме 10 мл/кг профилактически в течение 7 дней до тестирования. Крысам контрольной группы вводили эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизированный раствор экстракта элеутерококка в объеме 5.0 мл/кг. С целью оценки антигипоксической активности регистрировали латентный период, резервное время жизни и количество выживших животных в условиях гипоксии. Общая продолжительность наблюдения за животными составила две недели; в первые сутки после введения гипоксантов животные находились под непрерывным наблюдением.
Установлено, что средство обладает выраженным антигипоксическим действием, повышая выживаемость животных при гипоксиях различного генеза. Так, при гемической гипоксии курсовое введение испытуемого средства в дозе 50 мг/кг сопровождалось 100% выживаемостью животных при 50% гибели в контроле; а при введении его в дозах 100 и 150 мг/кг количество выживших крыс увеличилось в среднем на 80% по сравнению с показателями у животных контрольной группы (табл.4).
При гистотоксической гипоксии у крыс, получавших средство в дозе 50 мг/кг, отмечали увеличение длительности латентного периода жизни и резервного времени соответственно на 60 и 35% по сравнению с аналогичными данными крыс контрольной группы. При этом введение средства в дозе 100 мг/кг не оказывало статистически значимого влияния на указанные показатели. При нормобарической гипоксии с гиперкапнией введение средства сопровождалось двукратным увеличением латентного периода и продолжительности жизни животных.
Таким образом, установлено, что курсовое введение средства значительно повышает устойчивость лабораторных животных к гемической, гистотоксической гипоксии. Наиболее выраженные антигипоксические свойства средство проявляет в дозе 50 мг/кг при гемической гипоксии. При этом антигипоксическая активность средства в указанной дозе значительно превышает таковую у препарата сравнения. Кроме того, полученное средство обладает стимулирующей активностью, превышающей или равной (в зависимости от дозы) таковой препарата сравнения, и ускоряет процессы адаптации у подопытных животных, выражающиеся в повышении исследовательской реакции, снижении уровня тревожности и возрастании приверженности к гигиеническим навыкам.
Источники информации
1. Пшуков Ю.Г., Гужва Н.Н. Способ получения экстракта астрагала эспарцетолистного жидкого по ресурсосберегающей технологии. RU 2189240 МПК 7 A61K 35/78, B01D 11/02. Опубл. 20.09.2002. Бюлл. №32. 2003 г. - прототип.
2. Гужва Н.Н. Технология жидкого экстракта астрагала серпоплодного // Фармация. 2008. №6. С.40-42. - прототип.
3. ГСИ. Массовая концентрация основных аминокислот в водном растворе. Методика выполнения измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МВИ №02-2002. Иркутск, 2002. 12 с.
4. Olennikov D.N., Tankhaeva L.M., Stolbikova A.V., Rokhin A.V. Glucofructanes from Saussurea lappa roots // Chemistry of Natural Compounds. 2011. Vol.47. №3. P.339-342.
5. Olennikov D.N., Tankhaeva L.M., Samuelsen A.B. Quantitative analysis of polysaccharides from Plantago major leaves using the Dreywood method // Chemistry of Natural Compounds. 2006. Vol.42. №3. P.265-268.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000. 678 с.
7. Требования по доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ. М., 1984. 49 с.
8. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. МЗ РФ. Департамент контроля качества, эффективности и безопасности фармакологических средств. Фармакологический комитет МЗ РФ. 2 изд. перераб. и доп. М., 2005. С.138-145.
Claims (1)
- Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием, из корней астрагала перепончатого путем экстрагирования растительного материала, отличающийся тем, что предварительно проводят ультразвуковую экстракцию измельченного растительного материала 55-65% этиловым спиртом в соотношении сырье:экстрагент 1:(8-10) в течение 20-30 мин, далее растительный материал экстрагируют дважды тем же экстрагентом в соотношении сырье:экстрагент 1:(18-20) при температуре 85-90°С в течение 80-100 мин, затем спиртовые извлечения объединяют и концентрируют до 1/40 от первоначального объема, сгущенный экстракт высушивают и измельчают.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012154647/15A RU2582952C2 (ru) | 2012-12-17 | 2012-12-17 | Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012154647/15A RU2582952C2 (ru) | 2012-12-17 | 2012-12-17 | Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012154647A RU2012154647A (ru) | 2014-08-20 |
| RU2582952C2 true RU2582952C2 (ru) | 2016-04-27 |
Family
ID=51384033
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012154647/15A RU2582952C2 (ru) | 2012-12-17 | 2012-12-17 | Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2582952C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2706697C1 (ru) * | 2018-12-28 | 2019-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "КОМИ научный центр Уральского отделения Российской академии наук" | Экстракт из корней астрагала |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2189240C2 (ru) * | 2000-06-07 | 2002-09-20 | Пятигорская государственная фармацевтическая академия | Способ получения экстракта астрагала экспарцетного жидкого по ресурсосберегающей технологии |
| RU2437674C1 (ru) * | 2010-06-18 | 2011-12-27 | Институт общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской Академии наук (ИОЭБ СО РАН) | Способ получения средства, обладающего адаптогенной активностью |
-
2012
- 2012-12-17 RU RU2012154647/15A patent/RU2582952C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2189240C2 (ru) * | 2000-06-07 | 2002-09-20 | Пятигорская государственная фармацевтическая академия | Способ получения экстракта астрагала экспарцетного жидкого по ресурсосберегающей технологии |
| RU2437674C1 (ru) * | 2010-06-18 | 2011-12-27 | Институт общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской Академии наук (ИОЭБ СО РАН) | Способ получения средства, обладающего адаптогенной активностью |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ХОБРАКОВА В. Б. "Сухой экстракт астрагала перепончатого - перспективное иммуномодулирующее средство", Российский аллергологический журнал, 2012, N.1, вып.1, стр.334-336. БАТОЦЫРЕНОВА Э. Т. "Психотропный и антигипоксический эффекты астрагала перепончатого", Здоровье и образование в XXI веке, 2011, N.1, т.13, стр.109-111. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2706697C1 (ru) * | 2018-12-28 | 2019-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "КОМИ научный центр Уральского отделения Российской академии наук" | Экстракт из корней астрагала |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012154647A (ru) | 2014-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5969738B2 (ja) | 抗糖化作用剤 | |
| CN102590433B (zh) | 一种肝畅制剂的质量检测方法 | |
| RU2766088C1 (ru) | Кристаллическая форма соединения, представляющего собой пролекарство ланостерина, и ее применение в изготовлении лекарственного препарата для лечения катаракты | |
| CN102093459B (zh) | 一种扯根菜提取物及其制备方法和用途 | |
| Liu et al. | Pilose antler (Cervus elaphus Linnaeus) polysaccharide and polypeptide extract inhibits bone resorption in high turnover type osteoporosis by stimulating the MAKP and MMP-9 signaling pathways | |
| CN116889583B (zh) | 一种富含稀有人参皂苷的人参提取物的制备方法及其应用 | |
| WO2015169121A1 (zh) | 槲皮素-o-糖苷衍生物在治疗脂质代谢紊乱疾病中的应用 | |
| CN103508919B (zh) | 生物碱类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN103508922B (zh) | 二肽类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| Shi et al. | Effect of structural changes of Rehmannia glutinosa polysaccharide before and after processing on anti-aging activity | |
| CN107496269A (zh) | 一种肉桂树皮提取物及其制备方法与在化妆品中的应用 | |
| RU2582952C2 (ru) | Способ получения средства, обладающего адаптогенным действием | |
| Liu et al. | Design and synthesis of matrine derivatives for anti myocardial ischemia–reperfusion injury by promoting angiogenesis | |
| CN105232600B (zh) | 一种人参籽提取物及其制备方法和应用 | |
| CN104151392A (zh) | 米氏海参皂苷a及制备和用途 | |
| CN112656734A (zh) | 一种蒲公英提取物的制备方法、其提取物及应用 | |
| RU2472519C1 (ru) | Способ увеличения степени извлечения экдистероидов из растительных объектов | |
| CN107513092B (zh) | 一种丙二酰基人参皂苷Rb1的制备方法及其医用用途 | |
| Chen et al. | Eriocitrin promotes browning of white adipose tissue and activates brown adipose tissue through regulating HSF1/PGC-1α pathways | |
| WO2024021876A1 (zh) | 杜仲雄花提取物在制备抗肌肉衰老的食品或药物中的应用 | |
| CN103664568B (zh) | 环草石斛二聚芪类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN104045682A (zh) | 米氏海参皂苷a及制备和用途 | |
| CN115671169A (zh) | 一种具有改善睡眠作用的组合物 | |
| CN111558007B (zh) | 一种玉米根提取物及其制备方法和应用 | |
| CN104173220B (zh) | 绿萼梅提取物用作抗羰基化反应有效成分的新用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20150616 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20151106 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161218 |