RU2581022C1 - Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer - Google Patents
Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer Download PDFInfo
- Publication number
- RU2581022C1 RU2581022C1 RU2015105301/15A RU2015105301A RU2581022C1 RU 2581022 C1 RU2581022 C1 RU 2581022C1 RU 2015105301/15 A RU2015105301/15 A RU 2015105301/15A RU 2015105301 A RU2015105301 A RU 2015105301A RU 2581022 C1 RU2581022 C1 RU 2581022C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- naphthoindoldione
- breast cancer
- treatment
- pharmaceutical compositions
- tumor
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения рака молочной железы, включая поздние стадии заболевания и случаи, характеризующиеся низкой восприимчивостью к традиционным химиотерапевтическим препаратам. Сущность заявляемого способа заключается в том, что нуждающемуся в лечении пациенту парентерально при однократном или многократном режиме применения вводят терапевтически эффективное количество (R)-4,11-дигидрокси-3-[(пирролидин-3-иламино)метил]-1H-нафто[2,3-f]индол-5,10-диона (соединение формулы I) или его фармацевтически приемлемой соли. Способ лечения основан на способности соединения I ингибировать в опухолевых клетках топоизомеразы 1 и 2, ферменты, нарушающие репликацию ДНК путем индукции одноцепочечных и двуцепочечных разрывов, что приводит к индукции апоптоза. Соединение формулы I может быть использовано самостоятельно или в качестве активного компонента противоопухолевых фармацевтических композиций.The invention relates to medicine, namely to oncology, and can be used to treat breast cancer, including advanced stages of the disease and cases characterized by low susceptibility to traditional chemotherapeutic drugs. The essence of the proposed method lies in the fact that in a patient in need of treatment, a therapeutically effective amount of (R) -4,11-dihydroxy-3 - [(pyrrolidin-3-ylamino) methyl] -1H-naphtho [parenteral] is administered parenterally in a single or multiple dosage regimen 2,3-f] indole-5,10-dione (compound of formula I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The method of treatment is based on the ability of compound I to inhibit topoisomerase 1 and 2 in tumor cells, enzymes that disrupt DNA replication by inducing single-stranded and double-stranded breaks, which leads to the induction of apoptosis. The compound of formula I can be used alone or as an active component of antitumor pharmaceutical compositions.
Известны способы лечения рака молочной железы с помощью химиотерапевтических средств, однако эффективность таких средств в монорежиме, особенно на поздних стадиях развития болезни, по-прежнему невысока, что требует, как правило, использования комбинаций, например, с таксотером или гемцитабином [Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний. Переводчикова Н.И. (ред.). 3-е изд. - М.: изд. Практическая медицина, 2011, 512; Семиглазов В.Ф. Неоадъювантное и адъювантное лечение рака молочной железы. - М.: изд. МИА, 2008, 288; С.А. Тюляндин. Практическая онкология, 2000, №2, 3; Н.И. Переводчикова, М.Б. Стенина. Лекарственная терапия рака молочной железы, изд. Практика, 2014, 284]. Наиболее близким к заявляемому является способ лечения рака молочной железы с помощью парентерального применения доксорубицина с известной лимитирующей кардиотоксичностью, который выбран в качестве прототипа. В соответствии с этим способом доксорубицин в дозе 6 мг/кг, близкой к максимально переносимой, вводили внутрибрюшинно мышам с ксенографтами гормонозависимого (аутокринный тип) эпителиального протокового рака молочной железы человека T47D (АТСС® НТВ-133™). Недостатком данного способа лечения является низкий недостоверный противоопухолевый эффект на фоне высокой токсичности.Known methods of treating breast cancer with chemotherapeutic agents, however, the effectiveness of such agents in mono mode, especially in the late stages of the disease, is still low, which usually requires the use of combinations, for example, with taxotere or gemcitabine [Guidelines for tumor chemotherapy diseases. Translatorova N.I. (ed.). 3rd ed. - M .: ed. Practical Medicine, 2011, 512; Semiglazov V.F. Neoadjuvant and adjuvant treatment for breast cancer. - M .: ed. MIA, 2008, 288; S.A. Tyulyandin. Practical Oncology, 2000, No. 2, 3; N.I. Translators, M. B. Stenin. Breast Cancer Drug Therapy, ed. Practice, 2014, 284]. Closest to the claimed is a method of treating breast cancer using the parenteral use of doxorubicin with known limiting cardiotoxicity, which is selected as a prototype. In accordance with this method, doxorubicin at a dose of 6 mg / kg, close to the maximum tolerated, was administered intraperitoneally to mice with xenografts of hormone-dependent (autocrine type) human T47D epithelial ductal breast cancer (ATCC® NTV-133 ™). The disadvantage of this method of treatment is the low unreliable antitumor effect against the background of high toxicity.
Задачей изобретения является разработка более эффективного способа лечения рака молочной железы с помощью менее токсичного агента, который можно применять в схемах традиционного лечения этой патологии. Поставленная задача решается тем, что в заявляемом способе для лечения применяется нафтоиндолдион формулы I. Указанный агент способен индуцировать апоптоз в опухолевых клетках, включая ряд линий с активированными механизмами множественной лекарственной устойчивости. Ранее было показано, что производные нафто[2,3-f]индол-5,10-диона, содержащие в боковой цепи циклические диамины (например, соединение I), способны блокировать пролиферацию различных типов опухолевых клеток in vitro [RU 2412166; А.Е. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797]. Кроме того, в скрининговых опытах на мышином перевитом внутрибрюшинно лейкозе Р388 было показано, что нафтоиндолдион I эффективен при парентеральном введении [RU 2412166].The objective of the invention is to develop a more effective method for the treatment of breast cancer using a less toxic agent that can be used in traditional treatment regimens for this pathology. The problem is solved in that in the claimed method for treatment, a naphthoindol dione of formula I is used. This agent is capable of inducing apoptosis in tumor cells, including a number of lines with activated mechanisms of multidrug resistance. It was previously shown that derivatives of naphtho [2,3-f] indole-5,10-dione containing cyclic diamines in the side chain (for example, compound I) are capable of blocking the proliferation of various types of tumor cells in vitro [RU 2412166; A.E. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797]. In addition, in screening experiments on mouse transplanted intraperitoneally leukemia P388, it was shown that naphthoindole dione I is effective for parenteral administration [RU 2412166].
Таким образом, описанные ранее свойства нафтоиндолдиона формулы I характеризуют его цитотоксические свойства и не имеют прогностической значимости для его применения при различных злокачественных новообразованиях человека, т.к. не релевантны для корреляции его биоэквивалентности у пациентов [Wagner J.G. Rate of dissolution in vitro and in vivo. Part VI. Correlation of in vivo with in vitro data - theoretical and practical consideration. // Drug Intell. Clin. Pharm. - 1970. - Vol. 4. - P. 60-63; FDA, Center for drug evaluation and research. Guidance for industry: Extended release oral dosage forms, development, evaluation and application of in vitro/in vivo correlations. September 1997; FDA, Electronic Orange Book. Approved Drug Products with Therapeutic Equivalence Evaluations, 23th Edition, 2003; Раменская Г.В., Шохин И.Е., Давыдова К.С., Савченко А.Ю. In vivo - in vitro корреляция (ivivc): современный инструмент для оценки поведения лекарственных форм в условиях in vivo // Медицинский альманах. - 2011. - №1(14). - Стр. 222-226]. Признанными в качестве прогностически значимых доклинических моделей являются подкожные ксенографты опухолей человека, трансплантированные иммунодефицитным мышам [Kerbel R.S1. Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved // Cancer Biol Ther. 2003 Jul-Aug; 2(4 Suppl 1):S134-9].Thus, the previously described properties of the naphthoindoldione of formula I characterize its cytotoxic properties and have no prognostic value for its use in various human malignancies, because not relevant for correlation of its bioequivalence in patients [Wagner JG Rate of dissolution in vitro and in vivo. Part vi. Correlation of in vivo with in vitro data - theoretical and practical consideration. // Drug Intell. Clin. Pharm. - 1970. - Vol. 4. - P. 60-63; FDA, Center for drug evaluation and research. Guidance for industry: Extended release oral dosage forms, development, evaluation and application of in vitro / in vivo correlations. September 1997; FDA, Electronic Orange Book. Approved Drug Products with Therapeutic Equivalence Evaluations, 23th Edition, 2003; Ramenskaya G.V., Shokhin I.E., Davydova K.S., Savchenko A.Yu. In vivo - in vitro correlation (ivivc): a modern tool for assessing the behavior of dosage forms in vivo // Medical almanac. - 2011. - No. 1 (14). - Page 222-226]. Recognized as prognostically significant preclinical models are subcutaneous xenografts of human tumors transplanted into immunodeficient mice [Kerbel RS 1 . Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved // Cancer Biol Ther. 2003 Jul-Aug; 2 (4 Suppl 1): S134-9].
В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения нафтоиндолдион I может быть использован для приготовления противоопухолевых фармацевтических композиций, например, в виде жидкой или сухой парентеральных лекарственных форм.In accordance with another aspect of the present invention, naphthoindoldione I can be used to prepare antitumor pharmaceutical compositions, for example, in the form of liquid or dry parenteral dosage forms.
Фармацевтические композиции для парентерального введения обычно являются водными или неводными стерильными изотоническими растворами для инъекций, которые, помимо терапевтически эффективного количества лекарственного средства, содержат фармакологически приемлемый носитель (растворитель), а также различные эксципиенты (вспомогательные вещества). Фармацевтические композиции могут являться как жидкими готовыми растворами для инъекций, так и концентратами, суспензиями, стерильными порошками или лиофилизированными композициями, для применения которых необходимо добавление стерильного растворителя (например, воды для инъекций) непосредственно перед использованием. Методики получения парентеральных лекарственных композиций хорошо известны из уровня техники.Pharmaceutical compositions for parenteral administration are usually aqueous or non-aqueous sterile isotonic solutions for injection, which, in addition to a therapeutically effective amount of the drug, contain a pharmacologically acceptable carrier (solvent), as well as various excipients (excipients). The pharmaceutical compositions may be either liquid ready-made injectable solutions or concentrates, suspensions, sterile powders or lyophilized compositions, the use of which requires the addition of a sterile solvent (e.g., water for injection) immediately before use. Techniques for preparing parenteral drug compositions are well known in the art.
В качестве носителя (растворителя) для приготовления жидких фармацевтических композиций в настоящем изобретении может быть использован «физиологический раствор», или «раствор глюкозы», или другие менее предпочтительные носители, включая водные изотонические солевые растворы, растворы электролитов, а также неводные фармацевтически приемлемые полярные растворители, такие как масла, спирты, амиды, сложные эфиры, простые эфиры, кетоны, углеводороды и их смеси.As a carrier (solvent) for the preparation of liquid pharmaceutical compositions in the present invention, “physiological saline” or “glucose solution” or other less preferred carriers, including aqueous isotonic saline solutions, electrolyte solutions, and non-aqueous pharmaceutically acceptable polar solvents can be used such as oils, alcohols, amides, esters, ethers, ketones, hydrocarbons and mixtures thereof.
Помимо лекарственного средства и носителя, фармацевтические композиции могут необязательно содержать один или несколько известных из уровня техники фармацевтически приемлемых эксципиентов (вспомогательных компонентов). В частности, в настоящем изобретении эксципиенты могут быть выбраны из сорастворителей, наполнителей, солюбилизаторов, соединений, способствующих поддержанию рН и/или изотоничности, эмульгаторов, консервантов, антиоксидантов и других веществ. Эти хорошо известные компоненты фармацевтических композиций способствуют улучшению их потребительских или полезных свойств за счет облегчения применения, повышения стабильности, регулирования значения рН, изменения времени удерживания лекарственного соединения в месте введения. Так, в соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения стабильность фармацевтических композиций нафтоиндолдиона I и их эффективность могут быть повышены за счет одного или нескольких эксципиентов, выбранных независимо из группы сорастворителей, солюбилизаторов, наполнителей, эмульгаторов, консервантов, антиоксидантов, буферных солей и веществ для поддержания изотоничности. Количество нафтоиндолдиона I или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтической композиции не ограничивается, но предпочтительно составляет от 0,1% до 10% (мас./об.), более предпочтительно от 0,1% до 5% (мас./об.). Количество растворителя (наполнителя или разбавителя) не ограничивается, но может достигать до 99 мас. % в расчете на общую массу композиции, как хорошо известно в технологии приготовления лекарственных форм. Количество сорастворителя в композиции не ограничивается и может варьироваться, например, от 1% до 60%. Количество солюбилизирующего агента в композиции не ограничивается и может варьироваться, например, от 0,1% до 20%. Количество стабилизатора и антиоксиданта в композиции не ограничивается, но может достигать, например, от 0,1 до 1%. Количество агента для поддержания изотоничности в композиции не ограничивается, но может достигать, например, от 0,5 до 10%. Количество консерванта не ограничивается и может составлять, например, от 0,001 до 5%.In addition to the drug and carrier, the pharmaceutical compositions may optionally contain one or more pharmaceutically acceptable excipients (auxiliary components) known in the art. In particular, in the present invention, excipients can be selected from cosolvents, fillers, solubilizers, compounds that help maintain pH and / or isotonicity, emulsifiers, preservatives, antioxidants and other substances. These well-known components of pharmaceutical compositions contribute to the improvement of their consumer or beneficial properties by facilitating use, increasing stability, adjusting pH, changing the retention time of the drug compound at the injection site. Thus, in accordance with another aspect of the present invention, the stability of the pharmaceutical compositions of naphthoindoldione I and their effectiveness can be enhanced by one or more excipients selected independently from the group of cosolvents, solubilizers, fillers, emulsifiers, preservatives, antioxidants, buffer salts and substances to maintain isotonicity. The amount of naphthoindoldione I or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the pharmaceutical composition is not limited, but is preferably from 0.1% to 10% (w / v), more preferably from 0.1% to 5% (w / v) . The amount of solvent (filler or diluent) is not limited, but can reach up to 99 wt. % based on the total weight of the composition, as is well known in the technology for the preparation of dosage forms. The amount of cosolvent in the composition is not limited and may vary, for example, from 1% to 60%. The amount of solubilizing agent in the composition is not limited and may vary, for example, from 0.1% to 20%. The amount of stabilizer and antioxidant in the composition is not limited, but can reach, for example, from 0.1 to 1%. The amount of agent to maintain isotonicity in the composition is not limited, but can reach, for example, from 0.5 to 10%. The amount of preservative is not limited and may be, for example, from 0.001 to 5%.
В качестве сорастворителей фармацевтические композиции нафтоиндолдиона I могут содержать один или несколько фармакологически приемлемых растворителей, пригодных для приготовления жидких парентеральных форм. Такие сорастворители хорошо знакомы специалистам в области фармацевтики (без ограничения перечисленным): спирты или полиолы (например, этанол, 1,2-пропиленгликоль, глицерин, 1,3-бутиленгликоль), модифицированные полиоксиалкиленом алкиленоксиды или липиды (например, полиэтиленгликоль ПЭГ), сложные полиоксиэтиленсорбитановые эфиры жирных кислот, эфиры полиэтиленгликоля, сложные полиоксиэтиленовые эфиры жирных кислот, сополимеры этиленоксида и пропиленоксида (например, полоксамеры). Другие фармацевтически приемлемые сорастворители, которые могут быть использованы в настоящем изобретении, хорошо известны специалистам и описаны в литературе [например, в Modern Pharmaceutics (Fourth Edition). G. Banker et al. (eds.), 2002, 864; Remington′s Pharmaceutical Sciences (21th Edition) D B. Troy, P. Beringer (ed.), 2006, 2393, Spiegel A.J. et al. J. Pharm. Sci., 1963, 52 (10), 917-927]. Эти эксципиенты могут быть получены способами, хорошо известными в данной области техники, или от промышленных поставщиков.As cosolvents, the pharmaceutical compositions of naphthoindoldione I may contain one or more pharmacologically acceptable solvents suitable for the preparation of parenteral liquid forms. Such cosolvents are well known to those skilled in the pharmaceutical field (but not limited to): alcohols or polyols (e.g. ethanol, 1,2-propylene glycol, glycerin, 1,3-butylene glycol), polyoxyalkylene-modified alkylene oxides or lipids (e.g. PEG polyethylene glycol), complex polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyethylene glycol ethers, polyoxyethylene fatty acid esters, ethylene oxide and propylene oxide copolymers (e.g., poloxamers). Other pharmaceutically acceptable cosolvents that may be used in the present invention are well known in the art and are described in the literature [eg, Modern Pharmaceutics (Fourth Edition). G. Banker et al. (eds.), 2002, 864; Remington's Pharmaceutical Sciences (21th Edition) D B. Troy, P. Beringer (ed.), 2006, 2393, Spiegel A.J. et al. J. Pharm. Sci., 1963, 52 (10), 917-927]. These excipients can be obtained by methods well known in the art or from industrial suppliers.
В качестве эксципиентов, повышающих стабильность фармацевтических композиций нафтоиндолдиона I или обеспечивающих удобство их практического применения, в их состав могут входить один или несколько фармакологически приемлемых наполнителей или солюбилизирующих агентов, хорошо знакомых специалистам в области фармацевтики, такие как (без ограничения перечисленным) лактоза, декстран, поливинилпирролидон (ПВП), полисорбат 80 (твин 80), кремофор ЕН, гидроксиалкилированые β-циклодекстрины и γ-циклодекстрины и т.п. В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения для приготовления стабильных фармацевтических композиций для парентерального применения нафтоиндолдиона I, являющихся предметом настоящего изобретения, используются лактоза, ПВП, полоксамеры, твин 80, гидроксипропильные производные β- или γ-циклодекстринов.As excipients that enhance the stability of the pharmaceutical compositions of naphthoindoldione I or ensure the convenience of their practical use, they may include one or more pharmacologically acceptable excipients or solubilizing agents well known to specialists in the field of pharmaceuticals, such as (but not limited to) lactose, dextran, polyvinylpyrrolidone (PVP), polysorbate 80 (tween 80), cremophor EN, hydroxyalkylated β-cyclodextrins and γ-cyclodextrins, etc. In preferred embodiments of the present invention, lactose, PVP, poloxamers, tween 80, hydroxypropyl derivatives of β- or γ-cyclodextrins are used to prepare stable pharmaceutical compositions for parenteral use of naphthoindoldione I, which are the subject of the present invention.
В качестве консервантов, предохраняющих композицию от воздействия микроорганизмов, в настоящем изобретении могут быть применены различные противомикробные вещества, хорошо знакомые специалистам в области фармацевтики, такие как (без ограничения перечисленным) сульфиты, бензиловый спирт, хлорбутанол, сорбит, ксилит, сорбиновая кислота, бензойная кислота, тимеросал, парабены и их различные соли.As preservatives protecting the composition from exposure to microorganisms, the present invention can use various antimicrobial agents well known to those skilled in the pharmaceutical field, such as (but not limited to) sulfites, benzyl alcohol, chlorobutanol, sorbitol, xylitol, sorbic acid, benzoic acid , thimerosal, parabens and their various salts.
В качестве вспомогательных буферных компонентов в фармацевтических композициях настоящего изобретения могут быть предпочтительно использованы кислоты (например, лимонная, уксусная, фосфорная и др.), или их соли с щелочными металлами (например, цитрат, ацетат или дигидрофосфат натрия и др.), или их сочетания (например, лимонная кислота и цитрат натрия). Ионная сила буферного раствора, используемого как компонент жидкой композиции в настоящем изобретении, не ограничивается и может быть, например, на уровне 0,01-0,6.As auxiliary buffer components in the pharmaceutical compositions of the present invention, acids (e.g., citric, acetic, phosphoric, etc.), or their salts with alkali metals (e.g., citrate, acetate or sodium dihydrogen phosphate, etc.), or their combinations (e.g. citric acid and sodium citrate). The ionic strength of the buffer solution used as a component of the liquid composition in the present invention is not limited and may be, for example, at a level of 0.01-0.6.
В качестве антиоксидантов могут быть использованы, например, глюкоза, аскорбиновая кислота, метабисульфит натрия, бисульфит натрия, сульфит натрия, фенолы и тиофенолы.As antioxidants, for example, glucose, ascorbic acid, sodium metabisulfite, sodium bisulfite, sodium sulfite, phenols and thiophenols can be used.
В одном из вариантов приготовления жидких фармацевтических композиций фармацевтически приемлемую соль нафтоиндолдиона I и необходимые эксципиенты (например, наполнители, солюбилизирующие или стабилизирующие агенты, буферы, антиоксиданты и т.п.) растворяют или суспендируют в подходящем фармакологически приемлемом носителе (например, в «воде для инъекций», или в «растворе глюкозы», или ПЭГ) с выдерживанием смеси до полного растворения всех ингредиентов при температуре от 20 до 100°С, предпочтительно при температуре от 20 до 25°С. При необходимости раствор разбавляют водой для инъекций для получения желаемой концентрации нафтоиндолдиона I (предпочтительно 0,1% до 5%). Полученная таким образом композиция может быть применена непосредственно после приготовления. В другом варианте полученной композицией заполняют герметизируемый стеклянный сосуд (ампулу или флакон), после чего стерилизуют, укупоривают и хранят в защищенном от света месте.In one embodiment of the preparation of liquid pharmaceutical compositions, the pharmaceutically acceptable salt of naphthoindoldione I and the necessary excipients (e.g., fillers, solubilizing or stabilizing agents, buffers, antioxidants, etc.) are dissolved or suspended in a suitable pharmacologically acceptable carrier (e.g., in "water for injection ", or in a" glucose solution ", or PEG) with maintaining the mixture until all the ingredients are completely dissolved at a temperature of from 20 to 100 ° C, preferably at a temperature of from 20 to 25 ° C. If necessary, the solution is diluted with water for injection to obtain the desired concentration of naphthoindoldione I (preferably 0.1% to 5%). Thus obtained composition can be applied immediately after preparation. In another embodiment, the sealed glass vessel (ampoule or vial) is filled with the resulting composition, then sterilized, sealed and stored in a dark place.
Таким образом, настоящее изобретение описывает готовые жидкие фармацевтические композиции для парентерального применения, содержащие нафтоиндолдион I. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления композиция является сухой (как, например, лиофилизированной), которая может быть восстановлена, ресуспендирована или регидратирована для получения стабильной жидкой композиции фармацевтического вещества. Так, авторы настоящего изобретения путем лиофилизации жидких композиций получили ряд лиофилизированных препаратов, обладающих превосходной лекарственной стабильностью в процессе приготовления и хранения и легко восстанавливающихся в жидкую композицию при добавлении водного растворителя. Соответственно, настоящее изобретение также включает лиофилизированные композиции нафтоиндолдиона I. В некоторых вариантах осуществления композиция может быть промежуточной жидкой (как, например, водной) композицией, которую можно высушить (как, например, лиофилизировать), или жидкой (как, например, водной) композицией, полученной посредством восстановления или ресуспендирования сухой композиции.Thus, the present invention describes ready-made parenteral liquid pharmaceutical compositions containing naphthoindole dione I. In addition, in some embodiments, the composition is dry (such as lyophilized) that can be reconstituted, resuspended or rehydrated to provide a stable liquid pharmaceutical composition substances. Thus, the authors of the present invention by lyophilization of liquid compositions obtained a number of lyophilized preparations that have excellent drug stability during preparation and storage and are easily restored to the liquid composition with the addition of an aqueous solvent. Accordingly, the present invention also includes lyophilized compositions of naphthoindole dione I. In some embodiments, the composition may be an intermediate liquid (such as, for example, aqueous) composition that can be dried (such as, for example, lyophilized), or a liquid (such as, for example, aqueous) composition obtained by reconstituting or resuspending the dry composition.
Для получения лиофилизированных композиций, являющихся предметом настоящего изобретения, жидкую композицию нафтоиндолдиона I, полученную, как описано выше, заливают в жесткий сосуд, такой как стерильная ампула, флакон или пузырек, и подвергают лиофилизации традиционным способом. Количество жидкого препарата, которым заполняют сосуд, составляет, например, от 5 до 50% (об./об.) от объема сосуда, особенно предпочтительно 10-25% (об./об.). Внешнюю температуру при лиофилизации предпочтительно поддерживают от -70 до 0°С, особенно предпочтительно от -60 до -40°С, и применяемое давление для сублимации растворителя предпочтительно составляет от 0,01 до 0,2 мм рт. ст., более предпочтительно от 0,01 до 0,1 мм рт. ст. Предпочтительно скорость лиофилизации регулируется таким образом, чтобы растворитель (в расчете на раствор) сублимировался со скоростью от 10 мкл до 100 мкл на 1 см2 площади поверхности, с которой сублимируется растворитель в течение 1 часа.To obtain lyophilized compositions of the present invention, the liquid naphthoindole dione I composition obtained as described above is poured into a hard vessel, such as a sterile ampoule, vial or vial, and lyophilized in a conventional manner. The amount of liquid preparation with which the vessel is filled is, for example, from 5 to 50% (v / v) of the volume of the vessel, particularly preferably 10-25% (v / v). The external temperature during lyophilization is preferably maintained from -70 to 0 ° C, particularly preferably from -60 to -40 ° C, and the pressure used for sublimation of the solvent is preferably from 0.01 to 0.2 mm Hg. Art., more preferably from 0.01 to 0.1 mm RT. Art. Preferably, the lyophilization rate is controlled so that the solvent (per solution) is sublimated at a rate of from 10 μl to 100 μl per 1 cm 2 of the surface area with which the solvent sublimates for 1 hour.
В случае лиофилизации жидкой композиции, особенно содержащей декстран, маннит и/или карбонат натрия и др., защита от разрушения сосуда, содержащего лиофилизируемый раствор, может быть обеспечена введением добавок, например сульфатов щелочных металлов (например, сульфата натрия, сульфата калия и др.) в указанный жидкий препарат. Кроме того, лиофилизируемые композиции могут содержать дополнительные криозащитные компоненты, предотвращающие осаждение лекарственного соединения, такие как поверхностно-активные вещества, смачивающие или эмульгирующие агенты (как, например, лецитин, полисорбат 80, полиоксиэтиленстеарат).In the case of lyophilization of a liquid composition, especially containing dextran, mannitol and / or sodium carbonate, etc., protection against destruction of the vessel containing the lyophilized solution can be achieved by the introduction of additives, for example, alkali metal sulfates (e.g. sodium sulfate, potassium sulfate, etc. ) to the specified liquid preparation. In addition, lyophilized compositions may contain additional cryoprotective components that prevent the deposition of the drug compound, such as surfactants, wetting or emulsifying agents (such as lecithin, polysorbate 80, polyoxyethylene stearate).
Содержание указанных эксципиентов может составлять 0,01-10% от веса лекарственного препарата.The content of these excipients may be 0.01-10% by weight of the drug.
Лиофилизированные композиции, являющиеся предметом настоящего изобретения, приготовленные, как указано выше, обладают отличными свойствами в отношении стабильности действующего вещества (нафтоиндолдиона I) в процессе приготовления или хранения. Вышеописанные лиофилизированные формы, как и жидкие композиции для парентерального применения нафтоиндолдиона I, могут быть упакованы в стерильные флаконы, ампулы или пакеты, пузырьки для однократного или многократного применения. Фармацевтические композиции в сухой (лиофилизированной) или жидкой концентрированной форме, как известно из уровня техники, перед использованием могут быть восстановлены или разбавлены посредством добавления стерильного фармацевтически приемлемого растворителя с получением необходимой концентрации терапевтического агента. Это дает возможность, при необходимости, легко приготовить стерильную жидкую композицию для парентерального применения нафтоиндолдиона I, которая может быть непосредственно введена пациенту.Lyophilized compositions of the present invention, prepared as described above, have excellent properties with respect to the stability of the active substance (naphthoindole dione I) during preparation or storage. The lyophilized forms described above, as well as liquid compositions for parenteral use of naphthoindole dione I, can be packaged in sterile vials, ampoules or bags, vials for single or multiple use. Pharmaceutical compositions in dry (lyophilized) or liquid concentrated form, as is known in the art, can be reconstituted or diluted before use by adding a sterile pharmaceutically acceptable solvent to obtain the desired concentration of therapeutic agent. This makes it possible, if necessary, to easily prepare a sterile liquid composition for parenteral use of naphthoindoldione I, which can be directly administered to the patient.
Нафтоиндолдион I и жидкие фармацевтические композиции, содержащие от 0,1 до 5% соединения формулы I или его соли, могут быть применены парентерально (например, внутривенно, внутриартериально, внутримышечно, подкожно, ректально, интраспинально, интраперитонеально, внутриполостно) для лечения рака молочной железы или других онкологических заболеваний, включая формы болезни, характеризующиеся резистентностью к другим лекарственным средствам.Naphthoindoldione I and liquid pharmaceutical compositions containing from 0.1 to 5% of a compound of formula I or a salt thereof can be administered parenterally (e.g., intravenously, intraarterially, intramuscularly, subcutaneously, rectally, intraspinally, intraperitoneally, intracavitary) for the treatment of breast cancer or other oncological diseases, including forms of the disease characterized by resistance to other drugs.
Термин "фармацевтическая композиция", использованный в настоящем описании, означает, например, смесь, содержащую определенное количество терапевтического агента, например, терапевтически эффективное количество лекарственного соединения, по меньшей мере, с одним фармацевтически приемлемым носителем, предназначенную для введения человеку.The term “pharmaceutical composition” as used herein means, for example, a mixture containing a certain amount of a therapeutic agent, for example, a therapeutically effective amount of a drug compound with at least one pharmaceutically acceptable carrier, for administration to humans.
Термин "фармацевтически приемлемый", использованный в настоящем описании, относится к соединениям, композициям и/или лекарственным формам, которые при контакте с тканями млекопитающих, прежде всего тканями человека, не вызывают аллергических реакций, раздражения, осложнений или других токсических проявлений, и указанные соединения характеризуются достаточно высоким соотношением польза/риск.The term "pharmaceutically acceptable", as used in the present description, refers to compounds, compositions and / or dosage forms that, when in contact with mammalian tissues, especially human tissues, do not cause allergic reactions, irritation, complications or other toxic manifestations, and said compounds characterized by a fairly high benefit / risk ratio.
"Фармацевтически приемлемая соль" в настоящем изобретении означает обычные соли, получаемые прибавлением кислоты к основанию, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства нафтоиндолдиона I и образуются из его свободного основания и подходящих органических или неорганических кислот. Примеры солей, образующихся при прибавлении кислоты, включают соли, полученные из органических кислот, например метансульфоновой, этансульфоновой, 2-гидроксиэтансульфоновой, п-толуолсульфоновой, или неорганических кислот, например хлористоводородной, бромистоводородной, йодистоводородной, серной, сульфаминовой и т.п. Кроме того, термин "фармацевтически приемлемая соль" также включает фармацевтически приемлемые сольваты, предпочтительно гидраты. Химическое превращение нафтоиндолдиона I в соль осуществляется способом, хорошо известным химикам-фармацевтам, обеспечивающим улучшенную физическую и химическую стабильность, гигроскопичность, сыпучесть и растворимость соединений [см., например, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Edition). Rowe R.C. (Ed.), 1995, 1456-1457]. Для демонстрации эффективности заявляемого способа лечения даны примеры использования дигидрохлорида (R)-4,11-дигидрокси-3-[(пирролидин-3-иламино)метил]-1H-нафто[2,3-f]индол-5,10-диона (I), синтезированного ранее описанным методом [А.Е. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797]."Pharmaceutically acceptable salt" in the present invention means ordinary salts, obtained by the addition of acid to the base, which retain the biological effectiveness and properties of naphthoindoldione I and are formed from its free base and suitable organic or inorganic acids. Examples of salts formed by the addition of acid include salts derived from organic acids, for example methanesulfonic, ethanesulfonic, 2-hydroxyethanesulfonic, p-toluenesulfonic, or inorganic acids, such as hydrochloric, hydrobromic, hydroiodic, sulfuric, sulfamic and the like. In addition, the term “pharmaceutically acceptable salt” also includes pharmaceutically acceptable solvates, preferably hydrates. The chemical conversion of naphthoindoldione I to salt is carried out by a method well known to pharmaceutical chemists, providing improved physical and chemical stability, hygroscopicity, flowability and solubility of the compounds [see, for example, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Edition). Rowe R.C. (Ed.), 1995, 1456-1457]. To demonstrate the effectiveness of the proposed method of treatment, examples are given of the use of (R) -4,11-dihydroxy-3 - [(pyrrolidin-3-ylamino) methyl] -1H-naphtho [2,3-f] indole-5,10-dione dihydrochloride (I) synthesized by the previously described method [A.E. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797].
Термин "фармакологически приемлемый носитель" в настоящем изобретении означает один или несколько совместимых жидких или твердых разбавителей или наполнителей, которые подходят для введения млекопитающему, предпочтительно человеку. Предпочтительно в качестве фармацевтически приемлемого носителя в композициях по изобретению используются протонсодержащие среды, более предпочтительно водные среды.The term "pharmacologically acceptable carrier" in the present invention means one or more compatible liquid or solid diluents or excipients that are suitable for administration to a mammal, preferably a human. Preferably, proton-containing media, more preferably aqueous media, are used as the pharmaceutically acceptable carrier in the compositions of the invention.
Концентрация терапевтического агента в фармацевтической композиции составляет определенное значение, обеспечивающее введение терапевтически эффективного количества лекарственного средства, которое зависит от скорости абсорбции, инактивации и выведения из организма препарата, а также от тяжести состояния пациента или от других факторов, известных специалистам в данной области техники.The concentration of the therapeutic agent in the pharmaceutical composition is a certain value, ensuring the introduction of a therapeutically effective amount of the drug, which depends on the rate of absorption, inactivation and excretion of the drug from the body, as well as on the severity of the patient's condition or other factors known to specialists in this field of technology.
"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" соединения в настоящем изобретении означает количество нафтоиндолдиона I или его фармацевтически приемлемой соли, которое значительно подавляет пролиферацию опухолевых клеток и эффективно для предупреждения, ослабления или смягчения симптомов заболевания или увеличения продолжительности жизни субъекта, подвергающегося лечению. Определение терапевтически эффективного количества вещества относится к компетенции специалиста в данной области техники. Терапевтически эффективное количество или дозировка соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, может меняться в широких пределах и может определяться способом, известным в данной области техники.An "effective amount" or "therapeutically effective amount" of a compound of the present invention means an amount of naphthoindoldione I or a pharmaceutically acceptable salt thereof that significantly inhibits the proliferation of tumor cells and is effective in preventing, alleviating or alleviating the symptoms of the disease, or increasing the lifespan of the subject being treated. The determination of a therapeutically effective amount of a substance is within the competence of one skilled in the art. A therapeutically effective amount or dosage of a compound of the present invention can vary widely and can be determined by a method known in the art.
Для конкретного реципиента соответствующий курс лечения подбирается с учетом индивидуальной потребности и мнения врача, который вводит фармацевтические композиции пациенту или назначает введение фармацевтических композиций. Суточную дозу терапевтического агента можно вводить однократно в виде разовой дозы или многократно в виде разделенных доз, которые вводят через определенные периоды времени, или при парентеральном введении ее можно вводить путем непрерывного вливания. Таким образом, необходимое количество терапевтического агента, например необходимое терапевтически эффективное количество, определяет специалист в данной области медицины. Например, доза терапевтического агента может варьироваться в зависимости от возраста, веса тела или условий в интервале от приблизительно 1 мг до приблизительно 100 мг в расчете на нафтоиндолдион I или его фармацевтически приемлемую соль на килограмм массы тела реципиента в сутки.For a particular recipient, the appropriate course of treatment is selected taking into account the individual needs and opinions of the doctor who administers the pharmaceutical composition to the patient or prescribes the introduction of pharmaceutical compositions. The daily dose of the therapeutic agent can be administered once as a single dose or repeatedly as divided doses that are administered over certain periods of time, or when administered parenterally, it can be administered by continuous infusion. Thus, the required amount of a therapeutic agent, for example the necessary therapeutically effective amount, is determined by a person skilled in the art. For example, the dose of a therapeutic agent may vary depending on age, body weight, or conditions in the range of from about 1 mg to about 100 mg based on naphthoindoldione I or a pharmaceutically acceptable salt thereof per kilogram of recipient body weight per day.
Подтверждение эффективности заявляемого способа лечения получено на иммунодефицитных мышах-самках Balb/c nude с подкожными (п/к) ксенографтами перевиваемого рака молочной железы человека, которым однократно или многократно парентерально вводят фармацевтические композиции, содержащие нафтоиндолдион I. Для трансплантации был взята адаптированная к росту in vivo культура клеток рака молочной железы человека T47D из АТСС (номенклатурный номер № НТВ 133b-у). Опухоль представляет собой протоковый рак («ductal carcinoma»), клетки которого получены из плеврального выпота больной раком молочной железы с метастатическим плевритом. Клетки опухоли характеризуются положительной экспрессией рецепторов кальцитонина, андрогенов, эстрогенов, прогестеронов, глюкокортикоидов, пролактина. Методика трансплантации опухолей стандартная [Anticancer Drug Development Guide. Preclinical screening, clinical trials, and approval, edt. by Teicher B.A., Andrews P.A., Humana Press (Totowa-New Jersey), 2004, 450; Трещалина E.M., Жукова О.С., Герасимова Г.К., Андронова Н.В., Гарин A.M. Методические рекомендации по доклиническому изучению противоопухолевой активности лекарственных средств // В кн. «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая». - М.: изд. Гриф и К. - 2012. - Гл. 39. Стр. 642-657; Трещалина Е.М., Андронова Н.В., Гарин A.M. Доклиническое изучение противоопухолевых препаратов» // Глава в кн.: "Рациональная фармакотерапия в онкологии». - М., 2015. - Гл. 5. - Стр. 70-75]. В опыте использовали 10-18 пассажи опухоли in vivo. Имплантация 1-го пассажа выполнена 3,0×106 клеток на мышь.Confirmation of the effectiveness of the proposed method of treatment was obtained on immunodeficient female mice Balb / c nude with subcutaneous (sc) xenographs of transplantable human breast cancer, which were administered pharmaceutical compositions containing naphthindindione I once or repeatedly parenterally. vivo culture of human breast cancer cells T47D from ATCC (nomenclature number No. NTV 133b-y). A tumor is ductal carcinoma ("ductal carcinoma"), the cells of which are derived from a pleural effusion of a patient with breast cancer with metastatic pleurisy. Tumor cells are characterized by positive expression of calcitonin, androgen, estrogen, progesterone, glucocorticoids, prolactin receptors. Tumor transplantation standard [Anticancer Drug Development Guide. Preclinical screening, clinical trials, and approval, edt. by Teicher BA, Andrews PA, Humana Press (Totowa-New Jersey), 2004, 450; Treschalina EM, Zhukova OS, Gerasimova GK, Andronova NV, Garin AM Methodical recommendations for the preclinical study of the antitumor activity of drugs // In the book. “Guidelines for preclinical studies of drugs. Part one". - M .: ed. Grif and K. - 2012 .-- Ch. 39. Page 642-657; Treschalina EM, Andronova NV, Garin AM Preclinical study of anticancer drugs ”// Chapter in the book:“ Rational pharmacotherapy in oncology ”. - M., 2015. - Ch. 5. - Pages 70-75 ]. In the experiment 10-18 passages of the tumor were used in vivo. The implantation of the 1st passage was performed 3.0 × 10 6 cells per mouse.
Популяция жизнеспособных клеток составила 98% при окраске трипановым синим. Последующее многократное подкожное пассирование выполнено взвесью опухолевой ткани из предшествующих пассажей по 50 мг на мышь в среде 199.The viable cell population was 98% with trypan blue staining. Subsequent repeated subcutaneous passage was performed by suspension of tumor tissue from previous passages of 50 mg per mouse in medium 199.
Мышам фармацевтические композиции, содержащие 0,2% нафтоиндолдиона I, вводили в брюшную полость однократно в разовой дозе 80 мг/кг или 5-кратным курсом ежедневно в разовой дозе 30 мг/кг (суммарная доза 150 мг/кг) с началом лечения на 4 или 6 сутки после трансплантации ксенографтов. В качестве препарата сравнения использовали доксорубицин во флаконах по 10 мг (Эбеве, Австрия), который вводили мышам в разведении физиологическим раствором в 0,03%-ной концентрации внутрибрюшинно 5-дневным курсом в эффективной разовой дозе 3,0 мг/кг (суммарная доза 15 мг/кг). Мыши группы контроля получали в/б инъекции физиологического раствора (0,9% раствор натрия хлорида) в адекватном объеме в аналогичных схемах.In mice, pharmaceutical compositions containing 0.2% naphthoindoldione I were injected into the abdominal cavity once in a single dose of 80 mg / kg or in a 5-fold course daily in a single dose of 30 mg / kg (total dose of 150 mg / kg) with the start of treatment at 4 or 6 days after xenograft transplantation. As a comparison drug, doxorubicin was used in 10 mg vials (Ebeve, Austria), which was administered to mice diluted with physiological saline in a 0.03% concentration intraperitoneally in a 5-day course in an effective single dose of 3.0 mg / kg (total dose 15 mg / kg). Mice of the control group received iv injections of saline (0.9% sodium chloride solution) in an adequate volume in similar schemes.
Эффективность лечения оценивали по стандартным критериям: по торможению роста опухоли (ТРО) и скорости роста опухоли. Торможение роста опухоли (Т/С, «treatment/control»), определенное по формуле T/C=(Vо/Vк)×100%, где Vo - средний объем опухоли в опытной группе животных, Vк - средний объем опухоли в контрольной группе. В контроле Т/С принимается за 100%. Минимальный критерий эффективности для п/к ксенографтов опухолей человека Т/С≤42% [Anticancer Drug Development Guide. Preclinical screening, clinical trials, and approval, edt. by Teicher B.A., Andrews P.A., Humana Press (Totowa-New Jersey), 2004, 450; Трещалина E.M., Жукова O.C., Герасимова Г.К., Андронова Н.В., Гарин A.M. Методические рекомендации по доклиническому изучению противоопухолевой активности лекарственных средств // В кн. «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая». - М.: изд. Гриф и К. - 2012. - Гл. 39. Стр. 642-657; Трещалина Е.М., Андронова Н.В., Гарин A.M. Доклиническое изучение противоопухолевых препаратов» // Глава в кн.: "Рациональная фармакотерапия в онкологии». - М., 2015. - Гл. 5. - Стр. 70-75]. Скорость роста опухоли вычисляли по формуле: Vt/V0, где V0 - средний объем опухоли до лечения, Vt - средний объем опухоли на сроки после лечения.Treatment efficacy was evaluated according to standard criteria: inhibition of tumor growth (SRW) and tumor growth rate. Inhibition of tumor growth (T / C, "treatment / control"), determined by the formula T / C = (Vо / Vк) × 100%, where Vo is the average volume of the tumor in the experimental group of animals, VK is the average volume of the tumor in the control group . In the control, T / C is taken as 100%. Minimum performance criterion for sc / xenographs of human tumors T / C≤42% [Anticancer Drug Development Guide. Preclinical screening, clinical trials, and approval, edt. by Teicher BA, Andrews PA, Humana Press (Totowa-New Jersey), 2004, 450; Treschalina EM, Zhukova OC, Gerasimova GK, Andronova NV, Garin AM Methodical recommendations for the preclinical study of the antitumor activity of drugs // In the book. “Guidelines for preclinical studies of drugs. Part one". - M .: ed. Grif and K. - 2012 .-- Ch. 39. Page 642-657; Treschalina EM, Andronova NV, Garin AM Preclinical study of anticancer drugs ”// Chapter in the book:“ Rational pharmacotherapy in oncology ”. - M., 2015. - Ch. 5. - Pages 70-75 The tumor growth rate was calculated by the formula: V t / V 0 , where V 0 is the average volume of the tumor before treatment, V t is the average volume of the tumor for periods after treatment.
О переносимости лечения судили по поведению и состоянию мышей во время проведения опыта, а также по результатам аутопсии умерщвленных после окончания наблюдения мышей.The tolerability of the treatment was judged by the behavior and condition of the mice during the experiment, as well as by the results of an autopsy of the mice killed after the end of the observation.
Начальные объемы опухолей на 4 сутки после трансплантации составили 32-57 мм3, что удовлетворяет условиям «раннего лечения». Для тестирования эффективности препарата на модели «позднего лечения» проведен эксперимент с однократным применением на опухолях больших размеров (Vcp~240 мм3), что достигнуто смещением начала лечения с 4 на 6 сутки после трансплантации опухоли в период экспоненциальной фазы роста.The initial volume of tumors on the 4th day after transplantation was 32-57 mm 3 , which meets the conditions of "early treatment". To test the effectiveness of the drug in the “late treatment” model, an experiment was carried out with a single use on large tumors (V cp ~ 240 mm 3 ), which was achieved by shifting the start of treatment from 4 to 6 days after tumor transplantation during the exponential growth phase.
Измерение объема опухолей проводили многократно, начиная от образования пальпируемых опухолей в контроле. Объем опухоли вычисляли по произведению 3-х взаимно перпендикулярных диаметров. Статистическая обработка результатов экспериментов проведена стандартным методом Фишера-Стьюдента в модификации Р.Б. Стрелкова, различия считали статистически достоверными при р≤0,05.Tumor volume was measured repeatedly, starting from the formation of palpable tumors in the control. Tumor volume was calculated by the product of 3 mutually perpendicular diameters. Statistical processing of the experimental results was carried out by the standard Fischer-student method in the modification of RB Strelkova, the differences were considered statistically significant at p≤0.05.
Следующие ниже неограничивающие примеры даны для демонстрации предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения.The following non-limiting examples are given to demonstrate preferred embodiments of the present invention.
Пример 1Example 1
Получение лиофилизированных фармацевтических композиций для парентерального применения нафтоиндолдиона IObtaining lyophilized pharmaceutical compositions for parenteral use of naphthoindoldione I
Растворы нафтоиндолдиона I для получения лиофилизированных фармацевтических композиций готовят в дистиллированной воде в стерильной посуде. В мерный сосуд наливают 3/4 от требуемого объема воды и растворяют в ней отвешенное количество дигидрохлорида нафтоиндолдиона I [А.Е. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797] при помешивании смеси. Полученные растворы нафтоиндолдиона I стерилизуют, удаляя бактериальную контаминацию и механические примеси фильтрованием раствора через микропористый фильтр в асептических условиях. Полученный раствор переносят в мерный сосуд и доводят стерильной водой до требуемого объема. После проверки содержания нафтоиндолдиона I методом ВЭЖХ (требуемая концентрация 10±0,05 мг/мл) растворы дозируют по 2 мл в стерильные флаконы из нейтрального стекла. Флаконы с растворами закрывают стерильными марлевыми тампонами и выдерживают при -70°С 12 ч. Флаконы с замороженным раствором вносят в установку для лиофильной сушки и выдерживают 12 ч при давлении 0,01 мм рт. ст. После извлечения из установки флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками.Solutions of naphthoindoldione I for preparing lyophilized pharmaceutical compositions are prepared in distilled water in a sterile container. 3/4 of the required volume of water is poured into a measuring vessel and a weighed amount of naphthoindoldione I dihydrochloride is dissolved in it [A.E. Shchekotikhin etal, Eur. J. Med. Chem., 2014, 30 (86), 797] while stirring the mixture. The resulting solutions of naphthoindoldione I are sterilized by removing bacterial contamination and mechanical impurities by filtering the solution through a microporous filter under aseptic conditions. The resulting solution is transferred into a measuring vessel and brought with sterile water to the required volume. After checking the content of naphthoindoldione I by HPLC (the required concentration is 10 ± 0.05 mg / ml), the solutions are metered in 2 ml in sterile neutral glass vials. Vials with solutions are closed with sterile gauze swabs and incubated at -70 ° C for 12 hours. Vials with frozen solution are introduced into the freeze-drying unit and incubated for 12 hours at a pressure of 0.01 mm Hg. Art. After removal from the installation, the vials are sealed with sterile rubber stoppers and wrapped in aluminum caps.
Иллюстративные рецептуры лиофилизированных фармацевтических композиций для приготовления растворов для парентерального применения нафтоиндолдиона I приведены ниже (представлен состав композиций нафтоиндолдиона I из расчета на один флакон объемом 10 мл).Illustrative formulations of lyophilized pharmaceutical compositions for the preparation of solutions for parenteral use of naphthoindoldione I are given below (the composition of naphthoindoldione I compositions is presented per 10 ml vial).
Состав 1: 20 мг дигидрохлорида нафтоиндолдиона I; 50 мг лактозы; 4 мг полоксамера 188, 1 мг сорбита.Composition 1: 20 mg naphthoindoldione I dihydrochloride; 50 mg of lactose; 4 mg poloxamer 188, 1 mg sorbitol.
Состав 2: 20 мг дигидрохлорида нафтоиндолдиона I; 60 мг маннита; 14 мг поливинилпирролидона, 2 мг полисорбата 80, 1 мг аскорбиновой кислоты.Composition 2: 20 mg of naphthoindoldione I dihydrochloride; 60 mg of mannitol; 14 mg of polyvinylpyrrolidone, 2 mg of polysorbate 80, 1 mg of ascorbic acid.
Состав 3: 20 мг дигидрохлорида нафтоиндолдиона I; 100 мг 3-гидроксипропил-β-циклодекстрина (степень замещения 5), 3 мг полоксамера 188, 1 мг цитрата натрия.Composition 3: 20 mg of naphthoindoldione I dihydrochloride; 100 mg of 3-hydroxypropyl-β-cyclodextrin (degree of substitution 5), 3 mg of poloxamer 188, 1 mg of sodium citrate.
Приготовленные составы стабильны при хранении как в естественных условиях (1 год, 25°С, в затемненном месте), так и в условиях ускоренного старения (64 дня при 60°С): снижение содержания нафтоиндолдиона I в композициях не превышает 2%. Лиофилизированные композиции составов 1-3 легко восстанавливаются в гомогенный раствор при комнатной температуре менее чем через 1 мин при добавлении 1-10 мл стерильной воды, «физиологического раствора» или «изотонического раствора глюкозы (5%) для внутривенных инъекций». Для приготовления 10 мл 0,2% раствора нафтоиндолдиона I к содержимому флакона прибавляют 10 мл «физиологического раствора» или «изотонического раствора глюкозы (5%) для внутривенных инъекций», периодически помешивая содержимое флакона до полного растворения композиции.The prepared compositions are stable under storage both in natural conditions (1 year, 25 ° C, in a darkened place), and in conditions of accelerated aging (64 days at 60 ° C): the decrease in the content of naphthoindoldione I in the compositions does not exceed 2%. Lyophilized compositions of compositions 1-3 are readily reconstituted in a homogeneous solution at room temperature in less than 1 minute with the addition of 1-10 ml of sterile water, “physiological saline” or “isotonic glucose solution (5%) for intravenous injection”. To prepare 10 ml of a 0.2% solution of naphthoindoldione I, 10 ml of “physiological solution” or “isotonic glucose solution (5%) for intravenous injection” are added to the contents of the vial, periodically stirring the contents of the vial until the composition is completely dissolved.
Пример 2Example 2
Противоопухолевая активность нафтоиндолдиона I при однократном применении на модели «раннее лечение»Antitumor activity of naphthoindoldione I with a single application on the model of "early treatment"
В группе контроля у животных без лечения на 4 сутки после трансплантации средний объем опухоли составил V0=57[37÷77] мм3 (таблица 1). На 8 сутки средний объем опухоли составил Vt=239[171÷307] мм3. На 11 сутки средний объем Vt=822[587÷1057] мм3, на 15 сутки Vt=3717[2706÷4728] мм3. Видно, что без лечения ксенографт T47D растет достаточно быстро - латентный период 3-4 дня. Кривая роста в течение 15 дней после трансплантации имеет экспоненциальную зависимость, о чем свидетельствует достижение опухолью среднего объема ~4 см3 к этому сроку. Скорость роста к 15 дню после трансплантации опухоли описывается соотношением Vt/V0=3717/57=65 (таблица 2). Гибель мышей от опухоли без лечения начиналась на 17 сутки после трансплантации опухоли и продолжалась в течение последующих 10 дней.In the control group in animals without treatment, on the 4th day after transplantation, the average tumor volume was V 0 = 57 [37 ÷ 77] mm 3 (table 1). On day 8, the average tumor volume was V t = 239 [171 ÷ 307] mm 3 . On the 11th day, the average volume V t = 822 [587 ÷ 1057] mm 3 , on the 15th day V t = 3717 [2706 ÷ 4728] mm 3 . It can be seen that without treatment, the T47D xenograft grows quite quickly - the latent period is 3-4 days. The growth curve within 15 days after transplantation has an exponential dependence, as evidenced by the tumor reaching an average volume of ~ 4 cm 3 by this time. The growth rate by day 15 after tumor transplantation is described by the ratio V t / V 0 = 3717/57 = 65 (table 2). The death of mice from the tumor without treatment began on the 17th day after tumor transplantation and continued for the next 10 days.
В группе животных, получавших лечение нафтоиндолдионом в дозе 80 мг/кг, на 4 сутки после введения I средний объем опухоли (Vt) составил 88[66÷110] мм3, на 7 сутки - Vt=346[261÷431] мм3, на 11 сутки - Vt=1610[1072÷2148] мм3 (таблица 1). Скорость роста к последнему изменению описывается соотношением Vt/V0=1610/57=28,2 (таблица 2). Анализ роста опухоли после введения нафтоиндолдиона I показывает, что скорость роста опухоли в экспоненциальной фазе в 2,3 раза меньше, чем в контроле: Vt/V0=28,2 против Vt/V0=65 (таблица 2).In the group of animals treated with naphthindindione at a dose of 80 mg / kg, on the 4th day after administration of I, the average tumor volume (V t ) was 88 [66 ÷ 110] mm 3 , on the 7th day - V t = 346 [261 ÷ 431] mm 3 , for 11 days - V t = 1610 [1072 ÷ 2148] mm 3 (table 1). The growth rate to the last change is described by the ratio V t / V 0 = 1610/57 = 28.2 (table 2). Analysis of tumor growth after the administration of naphthoindoldione I shows that the tumor growth rate in the exponential phase is 2.3 times lower than in the control: V t / V 0 = 28.2 versus V t / V 0 = 65 (table 2).
Таким образом, при «раннем» лечении мышей с T47D нафтоиндолдионом I в однократной дозе 80 мг/кг достигнут значимый достоверный противоопухолевый эффект на уровне Т/С=37-42-43% (р<0,05), который в течение 8 дней удовлетворяет критерию эффективности, а на 10 сутки после лечения близок к нему (таблица 2).Thus, with the “early” treatment of mice with T47D naphthoindoldione I in a single dose of 80 mg / kg, a significant reliable antitumor effect was achieved at the T / C level of 37-42-43% (p <0.05), which is within 8 days meets the criterion of effectiveness, and 10 days after treatment is close to it (table 2).
Пример 3Example 3
Противоопухолевая активность нафтоиндолдиона I при однократном применении на модели «позднее лечение»Antitumor activity of naphthoindoldione I with a single application on the model of "late treatment"
В группе контроля без лечения на 6-е сутки после трансплантации средний объем опухоли у животных составил V0=242[92÷392] мм3, на 10 сутки - Vt=890[522÷1258] мм3, на 14 сутки - Vt=2671[1497÷3845] мм3, на 17 сутки - Vt=4764[2080÷7448] мм3 (таблица 3). Видно, что без лечения ксенографт T47D растет быстро - латентный период 3-4 дня, экспоненциальная фаза роста прослеживается до 17 суток, о чем свидетельствует достижение объема более чем 4 см3. Скорость роста описывается соотношением Vt/V0=4764/242=19,6 (таблица 3). Гибель мышей от опухоли без лечения начиналась на 18 сутки после трансплантации опухоли и продолжалась в течение последующих 12 дней.In the control group without treatment, on the 6th day after transplantation, the average tumor volume in animals was V 0 = 242 [92 ÷ 392] mm 3 , on day 10 - V t = 890 [522 ÷ 1258] mm 3 , on day 14 - V t = 2671 [1497 ÷ 3845] mm 3 , on day 17 - V t = 4764 [2080 ÷ 7448] mm 3 (table 3). It can be seen that without treatment, the T47D xenograft grows rapidly - the latent period is 3-4 days, the exponential growth phase can be traced to 17 days, as evidenced by the achievement of a volume of more than 4 cm 3 . The growth rate is described by the ratio V t / V 0 = 4764/242 = 19.6 (table 3). The death of mice from the tumor without treatment began on the 18th day after tumor transplantation and continued for the next 12 days.
В группе животных, получавших лечение, на 4 сутки после введения нафтоиндолдиона I в дозе 80 мг/кг объем опухоли Vt составил 495[339÷651] мм3, на 8 сутки - Vt=1085[791÷1397] мм3, на 11 сутки - Vt=1910[1486÷2334] мм3 (таблица 3). Анализ роста опухоли после введения нафтоиндолдиона I показывает, что скорость роста опухоли в экспоненциальной фазе в 2,5 раза меньше, чем в контроле: Vt/V0=7,8 против Vt/V0=19,6 (таблица 4).In the group of animals treated, on the 4th day after the administration of naphthoindoldione I at a dose of 80 mg / kg, the tumor volume V t was 495 [339 ÷ 651] mm 3 , on the 8th day - V t = 1085 [791 ÷ 1397] mm 3 , on the 11th day - V t = 1910 [1486 ÷ 2334] mm 3 (table 3). Analysis of tumor growth after the administration of naphthoindoldione I shows that the tumor growth rate in the exponential phase is 2.5 times lower than in the control: V t / V 0 = 7.8 versus V t / V 0 = 19.6 (table 4) .
Таким образом, при «позднем» лечении мышей с T47D нафтоиндолдионом I в однократной дозе 80 мг/кг показан значимый достоверный противоопухолевый эффект на уровне Т/С=55-41-43% (таблица 4), который удовлетворяет критерию эффективности и близок к результатам, полученным при раннем лечении опухоли. Достоверные отличия от контроля выявлены для Т/С на 11 сутки после лечения (р<0,05). Наблюдаемый отдаленный достоверный результат Т/С=43% подтверждает противоопухолевый эффект препарата.Thus, with the “late” treatment of mice with T47D naphthoindoldione I in a single dose of 80 mg / kg, a significant reliable antitumor effect was shown at the T / C level of 55-41-43% (table 4), which satisfies the efficiency criterion and is close to the results obtained by early treatment of a tumor. Significant differences from the control were revealed for T / C on the 11th day after treatment (p <0.05). The observed long-term reliable result T / C = 43% confirms the antitumor effect of the drug.
Пример 4Example 4
Противоопухолевая активность нафтоиндолдиона I при многократном применении на модели «раннее лечение»Antitumor activity of naphthoindoldione I with repeated use on the model of "early treatment"
В группе контроля у животных без лечения на 4-е сутки после трансплантации средний объем опухоли составил V0=32[18÷46] мм3, на 9 сутки - Vt=189[136÷242] мм3, на 12 сутки - Vt=489[348÷630] мм3, на 17 сутки - Vt=1261[869÷1653] мм3 (таблица 5). Экспоненциальная фаза роста прослеживается до 12 суток. Скорость роста описывается соотношением Vt/V0=1261/32=39,4. Гибель мышей от опухоли без лечения начиналась на 21 сутки после трансплантации опухоли и продолжалась в течение последующих 10 дней.In the control group in animals without treatment, on the 4th day after transplantation, the average tumor volume was V 0 = 32 [18 ÷ 46] mm 3 , on day 9 - V t = 189 [136 ÷ 242] mm 3 , on day 12 - V t = 489 [348 ÷ 630] mm 3 , on day 17 - V t = 1261 [869 ÷ 1653] mm 3 (table 5). The exponential growth phase can be traced up to 12 days. The growth rate is described by the ratio V t / V 0 = 1261/32 = 39.4. The death of mice from a tumor without treatment began on 21 days after tumor transplantation and continued for the next 10 days.
В группе животных, получавших лечение пятидневным курсом в разовой дозе нафтоиндолдиона I 30 мг/кг, на 1-е сутки после окончания введения препарата средний объем опухоли составил 68[50÷86] мм3, на 4 сутки - Vt=222[149÷295] мм3, на 9 сутки - Vt=593[391÷795] мм3 (таблица 6).In the group of animals treated with a five-day course in a single dose of naphthoindoldione I 30 mg / kg, on the 1st day after the end of the drug administration the average tumor volume was 68 [50 ÷ 86] mm 3 , on the 4th day - V t = 222 [149 ÷ 295] mm 3 , on the 9th day - V t = 593 [391 ÷ 795] mm 3 (table 6).
Таким образом, при лечении мышей с T47D пятидневным курсом в разовой дозе 30 мг/кг нафтоиндолдиона I достигнут значимый достоверный противоопухолевый эффект на уровне Т/С=36-45-47% (р<0,05) (таблица 6), который удовлетворяет критерию эффективности и воспроизводит результаты, полученные при однократном режиме применения. Скорость роста опухоли после лечения нафтоиндолдионом I описывается соотношением Vt/V0=593/32=18.5. Анализ роста опухоли после пятидневного курса лечения нафтоиндолдионом I показывает, что скорость роста опухоли в экспоненциальной фазе в 2.1 раза меньше, чем в контроле: Vt/V0=18,5 против Vt/V0=39,4 (таблица 6). Для препарата сравнения доксорубицина на 1 и 4 сутки после проведения лечения достоверных отличий от контроля по размерам опухолевых узлов не выявлено, ингибирование роста слабое и недостоверное, Т/С=67-68% (р>0,05). Более того, на 5-7 сутки доксорубицин вызвал гибель мышей от токсичности (таблица 6).Thus, when treating T47D mice with a five-day course in a single dose of 30 mg / kg naphthoindoldione I, a significant reliable antitumor effect was achieved at the T / C level of 36-45-47% (p <0.05) (table 6), which satisfies performance criterion and reproduces the results obtained with a single application. The tumor growth rate after treatment with naphthoindoldione I is described by the ratio V t / V 0 = 593/32 = 18.5. Analysis of tumor growth after a five-day course of treatment with naphthoindoldione I shows that the tumor growth rate in the exponential phase is 2.1 times lower than in the control: V t / V 0 = 18.5 versus V t / V 0 = 39.4 (table 6) . For comparison drug doxorubicin on days 1 and 4 after treatment, there were no significant differences from the control by the size of the tumor nodes, growth inhibition is weak and unreliable, T / C = 67-68% (p> 0.05). Moreover, on day 5-7, doxorubicin caused the death of mice from toxicity (table 6).
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015105301/15A RU2581022C1 (en) | 2015-02-18 | 2015-02-18 | Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015105301/15A RU2581022C1 (en) | 2015-02-18 | 2015-02-18 | Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2581022C1 true RU2581022C1 (en) | 2016-04-10 |
Family
ID=55794375
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015105301/15A RU2581022C1 (en) | 2015-02-18 | 2015-02-18 | Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2581022C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2631100C1 (en) * | 2016-11-24 | 2017-09-18 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | New heteroarenanthracene-2-carboxamide derivatives inhibiting tumour growth |
| RU2712191C1 (en) * | 2019-10-16 | 2020-01-24 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | Anti-tumor naphthoindole-3-carboxamide derivative |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2412166C1 (en) * | 2009-06-15 | 2011-02-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАМН | Cytotoxic linear heterocyclic derivatives of anthracenedione having in side chain cyclic diamines, active towards tumour cells with multidrug resistance |
| RU2527459C1 (en) * | 2013-03-27 | 2014-08-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИНА" РАМН) | Novel heteroarene anthracenedione-based g-quadruplex ligands inhibiting tumour cell growth |
-
2015
- 2015-02-18 RU RU2015105301/15A patent/RU2581022C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2412166C1 (en) * | 2009-06-15 | 2011-02-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАМН | Cytotoxic linear heterocyclic derivatives of anthracenedione having in side chain cyclic diamines, active towards tumour cells with multidrug resistance |
| RU2527459C1 (en) * | 2013-03-27 | 2014-08-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИНА" РАМН) | Novel heteroarene anthracenedione-based g-quadruplex ligands inhibiting tumour cell growth |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SHCHEKOTIKHIN A.E. et al. 3-Aminomethyl derivatives of 4,11-dihydroxynaphtho[2,3-f]indole-5,10-dione for circumvention of anticancer drug resistance. Bioorg. Med. Chem. 2005, Mar 15, 13, 6, pp.2285-2291. DEZHENKOVA L.G. et al. Naphtho[2,3-f]indole-5,10-dione aminoalkyl derivatives: a new class of topoisomerase I inhibitors. Bull. Exp. Biol. Med. 2008 Mar, 145, 3, PP.334-337. SHCHEKOTIKHIN A.E. et al. Naphthoindole-based analogues of tryptophan and tryptamine: synthesis and cytotoxic properties. Bioorg. Med. Chem. 2007, Apr 1, 15, 7, PP.2651-2659. * |
| SHCHEKOTIKHIN A.E. et al. Synthesis and structure-activity relationship studies of 4,11-diaminonaphtho[2,3-f]indole-5,10-diones. Bioorg. Med. Chem. 2006. Aug 1, 14, 15, PP. 5241-5251, РР.5243-5245. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2631100C1 (en) * | 2016-11-24 | 2017-09-18 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | New heteroarenanthracene-2-carboxamide derivatives inhibiting tumour growth |
| RU2712191C1 (en) * | 2019-10-16 | 2020-01-24 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | Anti-tumor naphthoindole-3-carboxamide derivative |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9572887B2 (en) | Formulations of bendamustine | |
| JP2013535422A5 (en) | ||
| PT2127652E (en) | Method for treating cancer using anticancer agent in combination | |
| US10278954B2 (en) | Method of treating a CNS disorder using a water-soluble histone deacetylase inhibitor | |
| PT1615640E (en) | Antineoplastic combinations | |
| US8168224B2 (en) | Sodium alginate microsphere vascular embolus containing water-soluble drug and preparation and application thereof | |
| KR20180103039A (en) | Preparations for the treatment of bladder cancer | |
| WO2011017809A1 (en) | Autophagy inhibitor compounds, compositions and methods for the use thereof in the treatment of cancer | |
| CN111346081B (en) | New use of pharmaceutical composition comprising n-pentanoic acid, indolpropanic acid and sodium n-butyrate | |
| RU2398578C2 (en) | Pharmaceutical composition containing taxan derivative and used for preparation of infusion solution, method for preparation and application | |
| RU2581022C1 (en) | Anticancer pharmaceutical compositions and method of treating breast cancer | |
| US10945986B2 (en) | Treatment for ischemic stroke | |
| WO2015172712A1 (en) | Pharmaceutical composition for injection with synergistic effect of vitamin c and antitumour drugs | |
| ES2702578T3 (en) | Treatment of chronic dermal inflammation with norketotifen | |
| KR20210078505A (en) | Intratumoral Injection Formulation | |
| AU2016295357A1 (en) | Therapeutic combinations of orally administered paclitaxel and a P-gp inhibitor for the treatment of cancer | |
| KR101544222B1 (en) | Anti-tumor activity of temsirolimus in papillary renal cell cancer | |
| AU2013377404B2 (en) | Composition of cabazitaxel and sulfobutylether beta-cyclodextrin | |
| JP6489517B2 (en) | Differentiation-promoting agents and brain tumor therapeutic agents for cancer stem cells | |
| ES2850498T3 (en) | Use of Z-butylidenephthalide in activating the autoimmune system | |
| US20230372378A1 (en) | Compositions and methods for alleviating conditions caused by abnormal subcutaneous deposit of adipose tissue or fat | |
| TW201800091A (en) | Injectable anticancer composition for local administration containing suspension of quinine salt | |
| US20220409611A1 (en) | Methods of treating, ameliorating, and/or preventing cancer using pyrvinium compositions | |
| JP4020256B2 (en) | Local treatment for prostate cancer | |
| EA012561B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising taksan derivatives and method for preparing thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200219 |