RU2576841C2 - Состав для криоконсервации сперматозоидов - Google Patents
Состав для криоконсервации сперматозоидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2576841C2 RU2576841C2 RU2014129871/15A RU2014129871A RU2576841C2 RU 2576841 C2 RU2576841 C2 RU 2576841C2 RU 2014129871/15 A RU2014129871/15 A RU 2014129871/15A RU 2014129871 A RU2014129871 A RU 2014129871A RU 2576841 C2 RU2576841 C2 RU 2576841C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cryopreservation
- formulation
- composition
- fructose
- tris
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к андрологии, и предназначено для сохранения фертильности сперматозоидов после глубокого охлаждения. Сущность изобретения состоит в том, что предложенный состав для криоконсервации сперматозоидов содержит смешанные с дистиллированной водой: глицерин и альбумин человека, мексидол, полиген, глутатион восстановленный, яичный желток и трис-фруктозо-цитратную смесь, при этом в состав на 100 мл дистиллированной воды введено 590-660 мг глицерина, 2-3 г яичного желтка, 0,4-0,6 мг полигена, 1-10 мг альбумина человека, 0,1-0,4 мг глутатиона восстановленного, 0,04-0,06 мкг мексидола и 4,3-11,3 г трис-фруктозо-цитратной смеси, содержащей 2,5-6,0 г трис, 0,6-1,5 г фруктозы и 1,2-3,8 г цитрата. Техническим результатом использования изобретения является выраженный эффект сохранения подвижности значительного количества сперматозоидов при использовании предложенного состава для криоконсервации, а также существенное уменьшение себестоимости предложенного состава по сравнению с себестоимостью, например, состава среды для криоконсервации сперматозоидов фирмы COOK SYDNEY IVF. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к андрологии, и предназначено для сохранения фертильности сперматозоидов после глубокого охлаждения.
Известен состав Спермопреп для криоконсервации сперматозоидов методом витрификации, включающий варианты растворов с использованием непосредственно Спермопрепа и Спермопрепа с криопротекторами: раствор Спермопрепа, раствор Спермопрепа с глицином, раствор Спермопрепа с глицином и глицерином, а также раствор Спермопрепа с глицином и глицерином и с добавлением или сахарозы, или раффинозы, или трехалозы (см., например, В.В. Честков, Л.А. Беккерова, Ю.В. Щепкина, Л.В. Шилейко и Л.Ф. Курило. Выбор среды для витрификации сперматозоидов человека. Андрология и генитальная хирургия, №1, 2012, с. 46-49).
Известный состав обеспечивает возможность сохранения жизнестойкости серматозоидов при размораживании после витрификации, однако ограничением для использования является необходимость высокой скорости охлаждения (более 300°С/мин), что лимитирует объем среды и выбор материала емкостей (криопробирок) для помещения эякулята.
Наиболее близким аналогом-прототипом является используемый центрами репродукции в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВТР) при лечении бесплодных пар состав среды для криоконсервации сперматозоидов фирмы COOK SYDNEY IVF, содержащий D-глюкозу, гентамицин, глицин, кальция лактат, магния сульфат, хлориды калия, магния и натрия, натрия гидрокарбонат, дигидрофосфат, человеческий сывороточный альбумин, сахарозу и воду, а также HEPES кислый (см., например, Д.Т. Айбятов. Современные методы подготовки эякулята для использования в программах ВТР. М., 2012, с. 69).
Известный состав для криоконсервации обеспечивает возможность сохранения фертильности значительного количества сперматозоидов после их размораживания, однако высокая себестоимость этого состава создает определенные экономические сложности для его использования.
Задачей изобретения является разработка конкурентоспособного состава на рынке сред для криоконсервации сперматозоидов.
Сущность изобретения состоит в том, что предложенный состав для криоконсервации сперматозоидов содержит смешанные с дистиллированной водой: глицерин и альбумин человека, мексидол, полиген, глутатион восстановленный, яичный желток и трис-фруктозо-цитратную смесь, при этом в состав на 100 мл дистиллированной воды введено 590-660 мг глицерина, 2-3 г яичного желтка, 0,4-0,6 мг полигена, 1-10 мг альбумина человека, 0,1-0,4 мг глутатиона восстановленного, 0,04-0,06 мкг мексидола и 4,3-11,3 г трис-фруктозо-цитратной смеси, содержащей 2,5-6,0 г трис, 0,6-1,5 г фруктозы и 1,2-3,8 г цитрата.
Техническим результатом использования изобретения является выраженный эффект сохранения подвижности значительного количества сперматозоидов при использовании предложенного состава для криоконсервации, а также существенное уменьшение себестоимости предложенного состава по сравнению с себестоимостью, например, состава среды для криоконсервации сперматозоидов фирмы COOK SYDNEY IVF.
Состав для криоконсервации сперматозоидов формируют следующим образом: в 100 мл дистиллированной воды последовательно, тщательно перемешивая, вносят 590-660 мг глицерина (химическая формула C3H5(OH)3) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%93%D0%BB%D0%B8%D1%86%D0%B5%D0%B5%D1%80%D0%B8%D0%BD), 2-3 г сырого яичного желтка, 0,4-0,6 мг сухого полигена (Polygenum siccum) (см., например, http://www.vettorg.net/pharmacy/25/787/), 1-10 мг альбумина человека (Albumin Human) (см., например, http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/albumin-human~27215.htm), 0,1-0,4 мг глутатиона восстановленного (химическая формула C10H17N3O6) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%93%D0%BB%D1%83%D1%82%D0%B0%D1%82%D0%B8%D0%BE%D0%BD), 0,04-0,06 мкг мексидола (2-этил-6-метил-3 гидроксипиридина сукцинат, химическая формула C8H11NO) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%AD%D1%82%D0%B8%D0%BB%D0%BC%D0%B5%D1%82%D0%B8%D0%BB%D0%B3%D0%B8%D0%B4%D1%80%D0%BE%D0%BA%D1%81%D0%B8%D0%BF%D0%B8%D1%80%D0%B8%D0%B4%D0%B8%D0%BD%D0%B0_%D1%81%D1%83%D0%BA%D1%86%D0%B8%D0%BD%D0%B0%D1%82), 4,3-11,3 г трис-фруктозо-цитратной смеси, содержащей 2,5-6,0 г триса (гидроксиметил-пропан-1,3-диол, химическая формула C4H11NO3) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A2%D1%80%D0%B8%D1%81), 0,6-1,5 г фруктозы (химическая формула C6H12O6) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A4%D1%80%D1%83%D0%BA%D1%82%D0%BE%D0%B7%D0%B0) и 1,2-3,8 г цитрата (лимонная кислота, химическая формула C6H8O7) (см., например, http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%9B%D0%B8%D0%BC%D0%BE%D0%BD%D0%BD%D0%B0%D1%8F_%D0%BA%D0%B8%D1%81%D0%BB%D0%BE%D1%82%D0%B0).
После приготовления состав смешивают с эякулятом в соответствующих равных объемах и замораживают в микропробирках.
Заявляемый состав был апробирован (см. таблицу 1) в лаборатории андрологии ФГБУ «НИИ урологии» Минздрава России.
Процедура криоконсервации состояла в следующем.
Образцы эякулята от пациентов с различными нарушениями репродуктивной функции после разжижения разливали в микропробирки по 300 мкл, причем каждый образец эякулята распределяли по парам микропробирок, в которые затем вносили одинаковые с количеством эякулята объемы состава для криоконсервации - в одну заявленного состава, а в другую соответственно состава фирмы COOK SYDNEY IVF.
При проведении процедуры криоконсервации микропробирки с составами вначале в течение 5-10 мин держали над кюветой, заполненной жидким азотом в 2-3 см от уровня криоагента, после чего их помещали в сосуд Дьюара и выдерживали при температуре - 196°С.
Оттаивание производили в режиме, обратном процедуре замораживания.
| Таблица 1 | |||
| Причины нарушения репродуктивной функции | Исходная (до криоконсервации) подвижность сперматозоидов (%) | Подвижность сперматозоидов (%) после оттаивания | |
| Заявленный состав для криоконсервации | Состав для криоконсервации фирмы COOK SYDNEY IVF | ||
| Варикоцеле | 37,2±5,6 | 12,5±3,0 | 38,7±6,1 |
| Бесплодный брак | 36,6±2,3 | 21,3±3,7 | 9±1,8 |
| Хронический простатит | 78,0±3,9 | 27,0±7,2 | 22,0±6,5 |
| Идиопатическая астенозооспермия | 44,0±2,9 | 27,6±3,5 | 10,0±5,2 |
В таблице 1 приведены результаты экспериментальных исследований использования заявленного состава для криоконсервации сперматозоидов и соответствующего состава фирмы COOK SYDNEY IVF.
Полученные результаты показали, что подвижность сперматозоидов после замораживания в заявленном составе для криоконсервации и размораживания по ряду показателей превосходила таковые после проведения соответствующей процедуры с использованием состава для криоконсервации фирмы COOK SYDNEY IVF.
При этом следует указать, что себестоимость заявленного состава для криоконсервации оказалась на порядок меньше себестоимости состава для криоконсервации фирмы COOK SYDNEY IVF, что подтверждает конкурентоспособность заявленного состава на рынке сред для криоконсервации.
Claims (1)
- Состав для криоконсервации сперматозоидов, включающий глицерин и альбумин человека, характеризующийся тем, что состав для криоконсервации содержит смешанные с дистиллированной водой: глицерин и альбумин человека, а также мексидол, полиген, глутатион восстановленный, яичный желток и трис-фруктозо-цитратную смесь, при этом в состав на 100 мл воды введено 590-660 мг глицерина, 2-3 г яичного желтка, 0,4-0,6 мг полигена, 1-10 мг альбумина человека, 0,1-0,4 мг глутатиона восстановленного, 0,04-0,06 мкг мексидола и 4,3-11,3 г трис-фруктозо-цитратной смеси, содержащей 2,5-6,0 г трис, 0,6-1,5 г фруктозы и 1,2-3,8 г цитрата.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014129871/15A RU2576841C2 (ru) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | Состав для криоконсервации сперматозоидов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014129871/15A RU2576841C2 (ru) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | Состав для криоконсервации сперматозоидов |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014129871A RU2014129871A (ru) | 2016-02-10 |
| RU2576841C2 true RU2576841C2 (ru) | 2016-03-10 |
Family
ID=55313175
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014129871/15A RU2576841C2 (ru) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | Состав для криоконсервации сперматозоидов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2576841C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111436421A (zh) * | 2020-05-21 | 2020-07-24 | 新乡医学院三全学院 | 一种人类精子冷冻保存方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117256604B (zh) * | 2023-11-23 | 2024-03-01 | 中国海洋大学三亚海洋研究院 | 一种宽吻海豚精液冷冻保存剂及精液冷冻保存方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2115386C1 (ru) * | 1997-03-24 | 1998-07-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт овцеводства и козоводства | Среда сан-лакт для замораживания спермы барана |
-
2014
- 2014-07-21 RU RU2014129871/15A patent/RU2576841C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2115386C1 (ru) * | 1997-03-24 | 1998-07-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт овцеводства и козоводства | Среда сан-лакт для замораживания спермы барана |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| В.В. Честков и др. "Выбор среды для витрификации сперматозоидов человека"; Андрология и генитальная хирургия,2012, с. 46-49. Д.Т. Айбятов "Современные методы подготовки эякулята для использования в программах ВТР". М., 2012, с. 69. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111436421A (zh) * | 2020-05-21 | 2020-07-24 | 新乡医学院三全学院 | 一种人类精子冷冻保存方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014129871A (ru) | 2016-02-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Blanco et al. | Comparative cryopreservation of avian spermatozoa: Benefits of non-permeating osmoprotectants and ATP on turkey and crane sperm cryosurvival | |
| Gutiérrez-Pérez et al. | Boar spermatozoa cryopreservation in low glycerol/trehalose enriched freezing media improves cellular integrity | |
| JP6879949B2 (ja) | 治療目的のための細胞の凍結保存方法 | |
| Nynca et al. | Standardization of spermatozoa concentration for cryopreservation of rainbow trout semen using a glucose-methanol extender | |
| Jha et al. | Cryopreservation of Bangladeshi ram semen using different diluents and manual freezing techniques | |
| Mochizuki et al. | Cardioprotective effect of therapeutic hypothermia at 34° C against ischaemia/reperfusion injury mediated by PI3K and nitric oxide in a rat isolated heart model | |
| Ahmad et al. | Trehalose as a cryoprotective agent for the sperm cells: A Mini Review | |
| RU2576841C2 (ru) | Состав для криоконсервации сперматозоидов | |
| BR112019006765B1 (pt) | Método para congelar células e tecidos | |
| El-Badry et al. | The effect of trehalose supplementation of INRA-82 extender on quality and fertility of cooled and frozen-thawed stallion spermatozoa | |
| US3579999A (en) | Method and apparatus for the preservation of biological substances | |
| Aramli et al. | Effectiveness of glucose–methanol extender for cryopreservation of Huso huso spermatozoa | |
| CN109329272B (zh) | 一种精子冻存液及其制备方法和应用 | |
| RU2017142903A (ru) | Инъецируемая консервирующая среда для консервации клеток плацентарной крови, костного мозга и периферической крови | |
| JP5920787B2 (ja) | ヒトの体外受精用精液又は人工授精用精液の調整方法 | |
| CN115777696B (zh) | 一种玻璃化冷冻解冻液套装 | |
| Lopez‐Andujar et al. | Comparative prospective study of two liver graft preservation solutions: University of Wisconsin and Celsior | |
| ES2716674T3 (es) | Célula congelada lista para ensayo y método para minimizar variabilidad en el rendimiento de la misma | |
| Silva et al. | Histological study of rat ovaries cryopreserved by vitrification or slow freezing and reimplanted in the early or late postmenopausal stage | |
| Suksai et al. | Effects of trehalose and sucrose on human sperm motility, vitality and morphology after cryopreservation | |
| TWI766137B (zh) | 冷凍保存劑與使用其的粒線體冷凍保存方法 | |
| Grigorieva et al. | Human gametes cryopreservation with cryoprotectant modified by egg yolk | |
| Hu et al. | Current status of Male fertility preservation in humans | |
| RU2257710C2 (ru) | Способ криоконсервации спермы человека | |
| Dogliero et al. | Comparison of different methods of semen cryopreservation in Melopsittacus undulatus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160722 |