RU2573381C2 - Method for simulating postoperative hypocalcemia - Google Patents
Method for simulating postoperative hypocalcemia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2573381C2 RU2573381C2 RU2014114131/15A RU2014114131A RU2573381C2 RU 2573381 C2 RU2573381 C2 RU 2573381C2 RU 2014114131/15 A RU2014114131/15 A RU 2014114131/15A RU 2014114131 A RU2014114131 A RU 2014114131A RU 2573381 C2 RU2573381 C2 RU 2573381C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hypocalcemia
- animals
- thyroid
- parathyroid
- experimental
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии, патофизиологии и эндокринологии, и может быть использовано для изучения механизмов нарушения обмена кальция, связанного с удалением околощитовидных желез.The present invention relates to medicine, namely to experimental surgery, pathophysiology and endocrinology, and can be used to study the mechanisms of impaired calcium metabolism associated with the removal of the parathyroid glands.
Известно, что послеоперационная гипокальциемия и гипопаратиреоз остаются самыми частыми осложнениями после хирургического лечения заболеваний щитовидной и околощитовидных желез (Аюшеева А.В., Ильичева Е.А., Лепехова С.А. Послеоперационный гипопаратиреоз, способы профилактики и коррекции / Бюллетень ВСНЦ СО РАМП - 2013 - №1 (89). - С.160-164).It is known that postoperative hypocalcemia and hypoparathyroidism remain the most common complications after surgical treatment of diseases of the thyroid and parathyroid glands (Ayusheeva A.V., Ilyicheva E.A., Lepekhova S.A. 2013 - No. 1 (89). - S.160-164).
Известны различные способы моделирования гипокальциемии.Various methods for modeling hypocalcemia are known.
Так известен способ моделирования гипокальциемии путем удаления околощитовидных желез у экспериментальных животных - собак (Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия // М.: Москва. - 1971. - С.266-268). Сущность известного способа заключается в следующем. Под общим обезболиванием проводят срединный разрез на шее от щитовидного хряща книзу, не доходя 2 см до яремной вырезки грудины. Продольные мышцы шеи разъединяют тупым путем и обнажают трахею. По бокам от трахеи, в толще сосудисто-нервного влагалища, пальпаторно находят щитовидную железу, которую выпрепаровывают из ложа и устанавливают локализацию околощитовидных желез. Артерию верхней наружной околощитовидной железы перевязывают и удаляют. Околощитовидные железы вылущивают из-под капсулы щитовидной железы с помощью пинцета. Если ткань щитовидной железы на месте удаления околощитовидных желез кровоточит, то через ее паренхиму накладывают отдельный шов, которым стягивают капсулу. После удаления околощитовидных желез на одной стороне щитовидную железу погружают на место и операцию продолжают на противоположной стороне.So there is a known method of modeling hypocalcemia by removing parathyroid glands in experimental animals - dogs (Lopukhin Yu.M. Experimental Surgery // Moscow: Moscow. - 1971. - P.266-268). The essence of the known method is as follows. Under general anesthesia, a midline incision is made in the neck from the thyroid cartilage downward, not reaching 2 cm to the jugular notch of the sternum. The longitudinal muscles of the neck are disconnected bluntly and the trachea is exposed. On the sides of the trachea, in the thickness of the neurovaginal vagina, the thyroid gland is palpated, which is dissected from the bed and localization of the parathyroid glands is established. The artery of the upper external parathyroid gland is ligated and removed. The parathyroid glands are peeled from under the capsule of the thyroid gland with tweezers. If the thyroid tissue at the site of removal of the parathyroid glands bleeds, then through its parenchyma a separate suture is applied, which tightens the capsule. After removal of the parathyroid glands on one side, the thyroid gland is immersed in place and surgery is continued on the opposite side.
К недостаткам данного способа следует отнести то, что известный способ может быть выполнен только на крупных животных, у которых артериальный сосуд околощитовидной железы проходит вне ткани щитовидной железы.The disadvantages of this method include the fact that the known method can only be performed on large animals in which the arterial vessel of the parathyroid gland passes outside the tissue of the thyroid gland.
Данный способ не может быть использован для экспериментального животного - крысы, что обусловлено как малым размером этого животного, так и топографо-анатомической особенностью расположения околощитовидных желез. У крыс щитовидная железа с околощитовидными железами представлена единым органокомплексом, что обусловливает сложность в выделении и лигировании питающих сосудов околощитовидных желез.This method cannot be used for an experimental animal - a rat, due to both the small size of this animal and the topographic and anatomical features of the location of the parathyroid glands. In rats, the thyroid gland with parathyroid glands is represented by a single organocomplex, which makes it difficult to isolate and ligate the feeding vessels of the parathyroid glands.
Кроме этого, к недостаткам данного способа следует отнести отсутствие возможности стандартизации получаемых результатов и воспроизводимости модели, так как в эксперименте использованы нелинейные животные, а разные породы собак имеют разный вес, рост, иммунитет, сроки заживления и т.п.In addition, the disadvantages of this method include the lack of standardization of the results and reproducibility of the model, since non-linear animals were used in the experiment, and different breeds of dogs have different weights, height, immunity, healing time, etc.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ моделирования гипокальциемии, включающий разрез в области шеи экспериментального животного (крысы), выделение щитовидной железы и паращитовидных желез, проведение деструкции ткани околощитовидной и щитовидной желез, ушивание раны (Джиоев И.Г., Козаев А.В., Кабоева Б.Н., Козаев Р.Э. Функционально-морфологическая характеристика почек и состояние антиоксидантной системы у крыс с экспериментальной гипокальциемией // Фундаментальные исследования. - 2013. - №7. - С.301-304).The closest in technical essence to the proposed one is a method for modeling hypocalcemia, including an incision in the neck of an experimental animal (rat), isolation of the thyroid gland and parathyroid glands, tissue destruction of the parathyroid and thyroid glands, suturing of the wound (Dzhioev I.G., Kozaev A. V., Kaboeva B.N., Kozaev R.E. Functional and morphological characteristics of the kidneys and the state of the antioxidant system in rats with experimental hypocalcemia // Basic Research. - 2013. - No. 7. - S.301-304).
Известный способ осуществляют следующим образом: после обезболивания и фиксации экспериментального животного - крысы, проводят воротникообразный разрез в области шеи, выделяют щитовидную железу и в ее толще, по обе стороны, находят паращитовидные железы, которые выжигают термокаутером, после чего рану ушивают.The known method is as follows: after anesthesia and fixation of an experimental animal, a rat, a collar-shaped incision is made in the neck area, the thyroid gland is isolated and in its thickness, on the both sides, the parathyroid glands are found, which are burned out by a thermocauter, after which the wound is sutured.
К недостаткам известного способа следует отнести то, что он не обеспечивает возможности получения стабильной модели гипокальциемии, т.к. только у 75% животных уровень общего кальция крови после эксперимента составлял 1,78±0,18 ммоль/л, а у 25% животных общий кальций снижался несущественно (2,18±0,16 ммоль/л), что оставалось близким к уровню общего кальция интактных крыс (2,32±0,19), и таких животных исключали из эксперимента.The disadvantages of this method include the fact that it does not provide the possibility of obtaining a stable model of hypocalcemia, because only in 75% of the animals the level of total blood calcium after the experiment was 1.78 ± 0.18 mmol / l, and in 25% of the animals the total calcium decreased insignificantly (2.18 ± 0.16 mmol / l), which remained close to the level total calcium in intact rats (2.32 ± 0.19), and such animals were excluded from the experiment.
К недостаткам известного способа следует отнести и летальность животных, которая в первые сутки после операции составляла 10-20%. Такая летальность экспериментальных животных связана с повреждениями и вовлечением в воспалительный процесс щитовидной железы. Кроме этого, разрушение околощитовидных желез термокаутером снижает воспроизводимость и эффективность модели, т.к. выжигается плохо контролируемый объем ткани околощитовидных желез, а неразрушенные участки ткани способны регенерировать в различные сроки послеоперационного периода. Следовательно, известный способ не позволяет получить высоковоспроизводимую стандартизированную модель гипокальциемии.The disadvantages of this method include the mortality of animals, which in the first day after surgery was 10-20%. Such lethality of experimental animals is associated with damage and involvement in the inflammatory process of the thyroid gland. In addition, destruction of the parathyroid glands with a thermocauter reduces the reproducibility and effectiveness of the model, because poorly controlled tissue volume of the parathyroid glands is burned out, and non-destroyed tissue sections can regenerate at various times in the postoperative period. Therefore, the known method does not allow to obtain a highly reproducible standardized model of hypocalcemia.
Задачей заявляемого изобретения является разработка способа моделирования пострезекционной гипокальциемии при тотальной паратиреоидэктомии стандартного лабораторного животного.The task of the invention is to develop a method for modeling post-resection hypocalcemia with total parathyroidectomy in a standard laboratory animal.
Техническим результатом предлагаемого способа является обеспечение возможности получения стабильной, стандартизированной и высоковоспроизводимой модели гипокальциемии при снижении летальности экспериментальных животных.The technical result of the proposed method is to provide the possibility of obtaining a stable, standardized and highly reproducible model of hypocalcemia while reducing the mortality of experimental animals.
Технический результат достигается тем, что способ моделирования пострезекционной гипокальциемии включает выполнение разреза в области шеи экспериментального животного - крысы, выделение щитовидной железы, удаление паращитовидных желез и ушивание раны.The technical result is achieved by the fact that the method for modeling post-resection hypocalcemia involves performing an incision in the neck of an experimental animal - a rat, isolating the thyroid gland, removing the parathyroid glands and suturing the wound.
Отличительные приемы предлагаемого способа заключаются в том, что в качестве экспериментальных животных используют самок крыс породы Wistar в возрасте не менее 10 месяцев. Экспериментальному животному в области шеи выполняют угловой разрез и проводят тотальную паратиреоидэктомию. При этом одномоментно резецируют ткань щитовидной железы вглубь на расстояние 0,1-0,2 мм от капсул околощитовидных желез. После чего на раневую поверхность щитовидной железы наносят медицинский клей «Сульфакрилат».Distinctive techniques of the proposed method are that as experimental animals, female Wistar rats are used at least 10 months old. An angular incision is made in the experimental animal in the neck and a total parathyroidectomy is performed. At the same time, thyroid tissue is immediately resected deep into the distance 0.1-0.2 mm from the capsules of the parathyroid glands. After that, Sulfacrylate medical glue is applied to the wound surface of the thyroid gland.
Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом показал, что предлагаемый способ отличается от известного вышеперечисленными приемами и, следовательно, соответствует критерию изобретения «новизна».A comparative analysis of the proposed technical solution with the prototype showed that the proposed method differs from the known above methods and, therefore, meets the criteria of the invention of "novelty."
Использование в качестве экспериментальных животных крыс породы Wistar обусловлено тем, что у крыс-самок десятимесячного возраста околощитовидные железы ограничены выраженной соединительно-тканной капсулой и лежат на капсуле щитовидной железы, приподнимаясь над ее поверхностью. Данная особенность была установлена авторами предлагаемого способа при исследовании топографической анатомии околощитовидных желез этих животных. Так авторами установлено, что у крыс в возрасте 6-ти месяцев околощитовидные железы располагаются под фиброзной капсулой щитовидной железы и полностью погружены в ее паренхиму и практически не дифференцируются. С увеличением возраста (10 месяцев) соединительно-тканная капсула становится выраженной, околощитовидная железа возвышается над латерокраниальной поверхностью ткани щитовидной железы. Эта особенность обеспечила возможность сохранения максимального объема интактной ткани щитовидной железы и упростила техническое исполнение паратиреоидэктомии.The use of Wistar rats as experimental animals is due to the fact that in female rats of ten months of age the parathyroid glands are limited by a pronounced connective tissue capsule and lie on the capsule of the thyroid gland, rising above its surface. This feature was established by the authors of the proposed method in the study of topographic anatomy of the parathyroid glands of these animals. So, the authors found that in rats at the age of 6 months, the parathyroid glands are located under the fibrous capsule of the thyroid gland and are completely immersed in its parenchyma and practically do not differentiate. With an increase in age (10 months), the connective tissue capsule becomes pronounced, the parathyroid gland rises above the laterocranial surface of the thyroid gland tissue. This feature made it possible to preserve the maximum volume of intact thyroid tissue and simplified the technical execution of parathyroidectomy.
Использование подбора животных по половому и возрастному критерию позволяет стандартизировать получаемые результаты, а также повысить воспроизводимость модели, вследствие максимального снижения вариабельности топографо-анатомического расположения околощитовидных желез по отношению к щитовидной железе.The use of selection of animals by sex and age criteria makes it possible to standardize the results obtained, as well as to increase the reproducibility of the model, due to the maximum reduction in the variability of the topographic and anatomical location of the parathyroid glands with respect to the thyroid gland.
Угловой разрез кожи при доступе к околощитовидным железам позволяет избежать размещения кожного шва непосредственно над зоной операции, что благоприятно сказывается на репаративных процессах и предотвращает вовлечение щитовидной железы в формирование рубца.An angular incision of the skin when accessing the parathyroid glands allows you to avoid placing the skin suture directly above the area of operation, which favorably affects reparative processes and prevents the involvement of the thyroid gland in scar formation.
Удаление околощитовидных желез с резекцией 0,1-0,2 мм прилежащей ткани щитовидной железы обеспечивает устойчивую гипопаратемию (отсутствие функции околощитовидных желез) и отсутствие возможности регенерации. За счет такого объема операции получаемая модель гипокальциемии устойчива, что позволяет использовать ее в хроническом эксперименте.Removal of the parathyroid glands with a resection of 0.1-0.2 mm of adjacent thyroid tissue provides stable hypoparatemia (lack of parathyroid function) and the lack of regeneration. Due to such a volume of operation, the resulting hypocalcemia model is stable, which makes it possible to use it in a chronic experiment.
Нанесение клея «Сульфакрилат» обеспечивает надежный гемостаз раневой поверхности щитовидной железы. Кроме этого, клей «Сульфакрилат» обладает антисептическими свойствами, что также профилактирует инфекционные осложнения (Толстиков А.Г., Толстиков Г.А., Воробьева А.И., Марченко В.Т., Кривошапкин А.Л. Пат. РФ 2156140. «Клей медицинский». Опубл. 20.09.2000, бюл. №26).Application of Sulfacrylate glue provides reliable hemostasis of the wound surface of the thyroid gland. In addition, Sulfacrylate glue has antiseptic properties, which also prevents infectious complications (Tolstikov A.G., Tolstikov G.A., Vorobyova A.I., Marchenko V.T., Krivoshapkin A.L. Patent RF 2156140 "Medical glue." Publish. 09/20/2000, bull. No. 26).
В доступной литературе авторами не выявлено способа моделирования пострезекционной гипокальциемии по отличительным признакам заявляемого способа, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «изобретательский уровень».In the available literature, the authors have not identified a method for modeling post-resection hypocalcemia by the distinctive features of the proposed method, which allows us to conclude that the claimed technical solution meets the criterion of "inventive step".
Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в экспериментальной медицине. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами, следовательно, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «промышленная применимость».The method comprising the claimed invention is intended for use in experimental medicine. The possibility of its implementation is confirmed by the methods and means described in the application, therefore, the claimed invention meets the patentability criterion of "industrial applicability".
Заявляемый способ осуществляют следующим образом.The inventive method is as follows.
Экспериментальным животным - крысам, самкам породы Wistar, десятимесячного возраста с массой 200-300 г, после обезболивания и фиксации на столике А.И. Сеченова в положении на спине, на левой половине вентральной поверхности шеи ножницами выстригают шерсть, затем кожу обрабатывают антисептиком. С использованием ножниц производят угловой разрез кожи, с формированием лоскута косынкообразной формы, вершина которого обращена к боковой поверхности шеи, кожный лоскут отпрепаровывают, отводят на зажиме вправо. Попеременно тупым и острым путем, с использованием ножниц и пинцета, мобилизуют слюнные железы в бессосудистой зоне. Грудино-подъязычные мышцы тупым путем разделяют по срединной линии и отводят на держалках в верхней и нижней третях в противоположные стороны. Визуализируют гортань и трахею. Подводят операционный микроскоп, устанавливают увеличение ×12,5. При помощи микрохирургических инструментов (пинцет, ножницы) мобилизуют боковые поверхности обеих долей щитовидной железы от щитогрудинных мышц и сосудисто-нервных пучков шеи. После мобилизации боковых поверхностей щитовидной железы визуализируют околощитовидные железы с обеих сторон по дорсолатеральным поверхностям верхних третей боковых долей щитовидной железы (фиг.1 - 1). Подводят объектив микроскопа с увеличением ×25. Пинцетом за фиброзную капсулу подтягивают кверху околощитовидную железу, ножницами отсекают околощитовидную железу без нарушения целостности ее капсулы, резецируя при этом щитовидную железу вглубь на расстояние 0,1-0,2 мм от ее капсулы. После чего осуществляют гемостаз нанесением на поверхность дефекта ткани щитовидной железы 0,01 мл клея «Сульфакрилат», который равномерно тонкой пленкой распределяется по поверхности дефекта (фиг.2 - 2). Грудино-подъязычные мышцы сопоставляют узловым швом. Кожу ушивают непрерывным швом.Experimental animals - rats, females of the Wistar breed, ten months old with a mass of 200-300 g, after anesthesia and fixation on the table A.I. Sechenov in the supine position, on the left half of the ventral surface of the neck with a pair of scissors, cut the hair, then the skin is treated with an antiseptic. Using scissors, an angular incision is made of the skin, with the formation of a flap of a kerchief-like shape, the apex of which is facing the lateral surface of the neck, the skin flap is dissected, removed to the right to the clip. Alternately, blunt and sharp, using scissors and tweezers, mobilize the salivary glands in the avascular zone. The sternum-hyoid muscles are bluntly divided along the midline and retracted on the holders in the upper and lower thirds in opposite directions. Visualize the larynx and trachea. An operating microscope is brought down, an increase of × 12.5 is established. Using microsurgical instruments (tweezers, scissors) they mobilize the lateral surfaces of both lobes of the thyroid gland from the thyroid-sternum muscles and neurovascular bundles of the neck. After mobilization of the lateral surfaces of the thyroid gland, parathyroid glands are visualized on both sides along the dorsolateral surfaces of the upper third of the lateral thyroid glands (Figs. 1 - 1). The microscope lens is brought down with magnification × 25. The parathyroid gland is pulled upwards with tweezers for the fibrous capsule, the parathyroid gland is cut with scissors without violating the integrity of its capsule, while resecting the thyroid gland into the depth of 0.1-0.2 mm from its capsule. Then carry out hemostasis by applying to the surface of the thyroid tissue defect 0.01 ml of glue “Sulfacrylate”, which is evenly distributed with a thin film on the surface of the defect (figure 2 - 2). The sternum-hyoid muscles are compared with a nodal suture. The skin is sutured with a continuous suture.
Предлагаемый способ поясняется примером конкретного выполнения.The proposed method is illustrated by an example of a specific implementation.
Исследование проводилось на 30 белых крысах-самках породы «Wistar», 10-месячного возраста, с массой тела 200-250 г.The study was conducted on 30 white female rats of the breed "Wistar", 10 months of age, weighing 200-250 g.
Животных содержали в условиях вивария при свободном доступе к воде и пище, что соответствует нормативам ГОСТа «Содержание экспериментальных животных в питомниках НИИ» (виварий I категории, вет. удостоверение 238 №000360 от 30 апреля 2013 г., служба ветеринарии Иркутской области) по утвержденным СОП (Лепехова С.А. Программа стандартных операционных процедур: лабораторные животные (прием, содержание, уход и контроль здоровья животных в вивариях медицинского учреждения): учеб. пособие) / С.А. Лепехова. - Иркутск: НЦРВХ СО РАМН; ИГМУ, 2012. - 96 с.). Опыты на животных выполняли в соответствии с правилами гуманного обращения с животными, регламентированными «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными Приказом МЗ СССР №742 от 13.11.84 г. «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и №48 от 23.01.85 г. «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных».The animals were kept in a vivarium with free access to water and food, which corresponds to the standards of GOST "The content of experimental animals in the nurseries of the research institute" (vivarium category I, vet certificate 238 No. 000360 dated April 30, 2013, the veterinary service of the Irkutsk region) according to the approved SOP (Lepekhova SA The program of standard operating procedures: laboratory animals (reception, keeping, care and monitoring of animal health in vivariums of a medical institution): textbook) / S.A. Lepekhova. - Irkutsk: NTSRVH SB RAMS; ISMU, 2012 .-- 96 p.). Animal experiments were carried out in accordance with the rules for the humane treatment of animals, regulated by the "Rules for the use of experimental animals", approved by Order of the Ministry of Health of the USSR No. 742 of 11/13/84, "On the approval of the rules for working with experimental animals" and No. 48 from 01/23/85, "On the control of work using experimental animals."
В асептических условиях и под общей анестезией животное фиксировали на столике А.И. Сеченова в положении на спине. Обработка операционного поля: на левой половине поверхности шеи выстригали шерсть ножницами, кожу обрабатывали антисептиком «Бонадерм».Under aseptic conditions and under general anesthesia, the animal was fixed on the table of A.I. Sechenov in the supine position. Treatment of the surgical field: on the left half of the neck surface, the hair was cut with scissors, the skin was treated with the Bonaderm antiseptic.
С помощью методов рандомизации животные были распределены на группы следующим образом:Using randomization methods, animals were divided into groups as follows:
№1 (n=12) опытная группа с моделированием пострезекционной гипокальциемии по заявляемому способу;No. 1 (n = 12) experimental group with modeling of post-resection hypocalcemia by the present method;
№2 (n=12) контрольная группа животных с моделированием гипокальциемии разрушением околощитовидных желез при помощи электрокоагуляции (способ прототип);No. 2 (n = 12) control group of animals with modeling of hypocalcemia destruction of the parathyroid glands using electrocoagulation (prototype method);
№3 (n=6) группа здоровых животных, содержащихся в условиях, одинаковых с экспериментальными.No. 3 (n = 6) a group of healthy animals kept under conditions identical with experimental ones.
Животных выводили из эксперимента на 3 и 14 сутки, при этом исследовали: общий и иммунологический анализ крови, концентрацию ионизированного кальция, паратиреоидный гормон крови. Забор крови для лабораторного исследования проводили у всех крыс в утренние часы на голодный желудок. Ионизированный кальций определяли с использованием электродного метода (EasyLite), паратиреоидный гормон - с использованием радиоиммунологического метода (IRMA РТН Imunotech).Animals were taken out of the experiment on
При выведении животных из эксперимента выполняли гистологическое исследование органокомплекса в зоне операции (трахея, пищевод, гортань, щитовидная железа). Препараты окрашивали гематоксилином и эозином.When animals were removed from the experiment, a histological examination of the organocomplex in the area of the operation (trachea, esophagus, larynx, thyroid gland) was performed. The preparations were stained with hematoxylin and eosin.
За норму приняты показатели, полученные у шести здоровых животных (группа №3).The indicators obtained from six healthy animals (group No. 3) were taken as the norm.
Статистический анализ проводили при помощи непараметрических тестов в программе Statistica 6.0, результаты представляли в форме медианы с интерквартильным размахом.Statistical analysis was performed using nonparametric tests in the Statistica 6.0 program, the results were presented in the form of a median with an interquartile range.
Результаты исследованияResearch results
В контрольной группе (способ прототип) двое животных (16,7%) умерли к исходу первых послеоперационных суток. Для изучения степени воспалительной реакции, процессов репарации, радикальности удаления околощитовидных желез было проведено гистологическое исследование зоны операции на 3-и и 14-е сутки послеоперационного периода.In the control group (prototype method), two animals (16.7%) died by the end of the first postoperative day. To study the degree of inflammatory reaction, repair processes, radical removal of the parathyroid glands, a histological examination of the operative zone was performed on the 3rd and 14th day of the postoperative period.
При гистологическом исследовании на 3-и сутки у животных контрольной группы (фиг.3) выявлен коагуляционный некроз ткани поверхностных отделов щитовидной железы (фиг.3 - 3) и прилежащих волокон скелетной мышцы с демаркационной зоной воспаления в виде экссудата из лейкоцитов (фиг.3 - 4) с сохранившимися участками ткани щитовидной железы (фиг.3 - 6) и прилежащих волокон скелетной мышцы (фиг.3 - 5).When histological examination on the 3rd day in animals of the control group (figure 3) revealed coagulation necrosis of the tissue of the superficial parts of the thyroid gland (Fig.3 - 3) and adjacent skeletal muscle fibers with a demarcation zone of inflammation in the form of exudate from leukocytes (Fig.3) - 4) with preserved areas of thyroid tissue (Figs. 3-6) and adjacent fibers of the skeletal muscle (Figs. 3-5).
На 14-е сутки эксперимента у животных этой группы при гистологическом исследовании выявлено наличие большого объема развивающейся соединительной ткани с проникновением фибробластов в строму щитовидной железы (фиг.5 - 8), коагуляционный некроз скелетной мышцы (фиг.5 - 9), диффузная инфильтрация лейкоцитами (фиг.5 - 10).On the 14th day of the experiment in animals of this group, histological examination revealed the presence of a large volume of developing connective tissue with the penetration of fibroblasts into the stroma of the thyroid gland (Figs. 5–8), coagulation necrosis of the skeletal muscle (Figs. 5–9), diffuse leukocyte infiltration (Figs. 5-10).
В опытной группе погибших животных не было. При гистологическом исследовании на 3-и сутки эксперимента у животных этой группы на светооптическом уровне выявлена щитовидная железа без признаков некроза (фиг.4 - 6), волокна скелетной мышцы без признаков некроза (фиг.4 - 5), полость, содержащая массы коралловидной формы (клей «Сульфакрилат») (фиг.4 - 7) с минимальной реакцией лейкоцитов по периферии.There were no dead animals in the experimental group. When histological examination on the 3rd day of the experiment, the thyroid gland without signs of necrosis (Figs. 4-6), skeletal muscle fibers without signs of necrosis (Figs. 4-5), a cavity containing coral-shaped masses were detected at the light-optical level in animals of this group (glue "Sulfacrylate") (figure 4 - 7) with a minimal reaction of leukocytes on the periphery.
При гистологическом исследовании на 14-е сутки эксперимента у животных опытной группы определены: щитовидная железа с сохраненными фолликулами (фиг.6 - 6) и формирующуюся «тонкую» соединительнотканную капсулу (фиг.6 - 11), волокна скелетной мышцы с сосудами (фиг.6 - 5), полость с небольшим количеством клея «Сульфакрилат» (фиг.6 - 7).Histological examination on the 14th day of the experiment in animals of the experimental group identified: the thyroid gland with preserved follicles (Fig.6 - 6) and the forming "thin" connective tissue capsule (Fig.6 - 11), skeletal muscle fibers with blood vessels (Fig. 6 - 5), a cavity with a small amount of sulfacrylate glue (Fig.6 - 7).
Полученные данные свидетельствовали, что клей «Сульфакрилат» не оказывает повреждающего влияния на ткань щитовидной железы, снижает воспалительную реакцию, обеспечивает надежный окончательный гемостаз и ведет к уменьшению рубцового процесса в области операции.The data obtained showed that Sulfacrylate glue does not have a damaging effect on the thyroid gland tissue, reduces the inflammatory response, provides reliable final hemostasis and leads to a decrease in the scar process in the operation area.
Для подтверждения нарушений кальциевого обмена авторами заявляемого способа проведены лабораторные исследования уровней следующих показателей крови: паратиреоидного гормона, ионизированного кальция.To confirm violations of calcium metabolism, the authors of the proposed method conducted laboratory studies of the levels of the following blood parameters: parathyroid hormone, ionized calcium.
Так, в таблице 1 приведены результаты исследования показателей ионизированного кальция (Са2+) и паратиреоидного гормона крови (ПТГ) при сниженной функции околощитовидных желез, в динамике (медиана, квартили).So, table 1 shows the results of a study of indicators of ionized calcium (Ca 2+ ) and parathyroid hormone (PTH) with decreased function of the parathyroid glands, in dynamics (median, quartile).
Из приведенных данных следует, что при моделировании гипокальциемии по известному способу (группа №1, опытная) уровни ионизированного кальция колебались в пределах от 0,6 до 0,9 ммоль/л, уровни паратиреоидного гормона от 2 до 8 пг/мл. Тогда как в группе животных с моделированием гипокальциемии по заявляемому способу (группа №2, контрольная) уровень ионизированного кальция находился в узких пределах от 0,52 до 0,64 ммоль/л. Уровни паратиреоидного гормона составили от 1 до 3 пг/мл. Следовательно, в опытной группе уровни паратиреоидного гормона и ионизированного кальция были значимо ниже, чем в группе контроля, что свидетельствуют о развитии стойкой гипокальциемии у 100% животных.From the above data it follows that when modeling hypocalcemia by a known method (group No. 1, experimental), the levels of ionized calcium ranged from 0.6 to 0.9 mmol / l, the levels of parathyroid hormone from 2 to 8 pg / ml. Whereas in the group of animals with modeling of hypocalcemia according to the claimed method (group No. 2, control), the level of ionized calcium was in a narrow range from 0.52 to 0.64 mmol / L. Parathyroid hormone levels ranged from 1 to 3 pg / ml. Therefore, in the experimental group, the levels of parathyroid hormone and ionized calcium were significantly lower than in the control group, which indicates the development of persistent hypocalcemia in 100% of the animals.
Для оценки системной воспалительной реакции авторами предлагаемого способа также были проведены исследования лейкоцитарного профиля, фагоцитарной активности.To assess the systemic inflammatory reaction, the authors of the proposed method also conducted studies of the leukocyte profile, phagocytic activity.
Так, в таблице 2 приведены результаты сравнительного анализа количества лейкоцитов, изменений в лейкоцитарной формуле, фагоцитоза, фагоцитарного числа на 14-е сутки после моделирования гипокальциемии (медиана, квартили).So, table 2 shows the results of a comparative analysis of the number of leukocytes, changes in the leukocyte formula, phagocytosis, phagocytic number on the 14th day after modeling hypocalcemia (median, quartile).
У животных группы контроля к 14-м суткам выявлено повышение общего числа лейкоцитов, фагоцитарной активности, фагоцитарного числа.In animals of the control group, by the 14th day, an increase in the total number of leukocytes, phagocytic activity, and phagocytic number was revealed.
В опытной группе показатели количества лейкоцитов, фагоцитарной активности были достоверно ниже, что показывает меньшую воспалительную реакцию в основной группе.In the experimental group, indicators of the number of leukocytes and phagocytic activity were significantly lower, which shows a lower inflammatory response in the main group.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет моделировать стандартизированную, высоковоспроизводимую (100%) пострезекционную стойкую гипокальциемию, характеризующуюся низким уровнем ионизированного кальция и паратиреоидного гормона, начиная с третьих суток исследования, в условиях ограничения воспаления, сохранности иммунного ответа и при отсутствии летальности экспериментальных животных.Thus, the proposed method allows you to simulate a standardized, highly reproducible (100%) post-resection resistant hypocalcemia, characterized by low levels of ionized calcium and parathyroid hormone, starting from the third day of the study, under conditions of limiting inflammation, preserving the immune response and in the absence of lethality of experimental animals.
При воспроизведении предложенной модели течение пострезекционной гипокальциемии в раннем послеоперационном периоде соответствует таковому в клинической практике, что дает возможность изучения как механизмов развития метаболических нарушений, так и их коррекции.When reproducing the proposed model, the course of post-resection hypocalcemia in the early postoperative period corresponds to that in clinical practice, which makes it possible to study both the mechanisms of development of metabolic disorders and their correction.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014114131/15A RU2573381C2 (en) | 2014-04-09 | 2014-04-09 | Method for simulating postoperative hypocalcemia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014114131/15A RU2573381C2 (en) | 2014-04-09 | 2014-04-09 | Method for simulating postoperative hypocalcemia |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014114131A RU2014114131A (en) | 2015-11-10 |
| RU2573381C2 true RU2573381C2 (en) | 2016-01-20 |
Family
ID=54536122
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014114131/15A RU2573381C2 (en) | 2014-04-09 | 2014-04-09 | Method for simulating postoperative hypocalcemia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2573381C2 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA27821U (en) * | 2007-07-30 | 2007-11-12 | Univ Oo Bohomolets Nat Medical | Method for simulating hypothyroidism in rats |
| RU2447861C1 (en) * | 2011-03-09 | 2012-04-20 | Лариса Вячеславовна Медведева | Method for incisional bladder wound closing in cats and dogs |
-
2014
- 2014-04-09 RU RU2014114131/15A patent/RU2573381C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA27821U (en) * | 2007-07-30 | 2007-11-12 | Univ Oo Bohomolets Nat Medical | Method for simulating hypothyroidism in rats |
| RU2447861C1 (en) * | 2011-03-09 | 2012-04-20 | Лариса Вячеславовна Медведева | Method for incisional bladder wound closing in cats and dogs |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ДЖИОЕВ И.Г. И ДР. Функционально-морфологическая характеристика почек и состояние антиоксидантной системы у крыс с экспериментальной гипокальциемией// Фундаментальные исследования. 2013, N7, с.301-304. КОРЛЭТЯНУ А.Н. Модификация опреации удаления щитовидной железы у крыс// Проблемы эндокринологии у крыс. 1987, N1, с.51-53. YAMAGUCHI M, ET AL. Zinc-induced hypocalcemia and bone resorption in rats// Toxicol Appl Pharmacol.1983 Feb;67(2):224-8. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014114131A (en) | 2015-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gardner et al. | Differential fracture healing resulting from fixation stiffness variability: a mouse model | |
| Adams et al. | Acute in-vivo evaluation of bleeding with Gelfoam TM plus saline and Gelfoam plus human thrombin using a liver square lesion model in swine | |
| RU2573381C2 (en) | Method for simulating postoperative hypocalcemia | |
| RU2431890C1 (en) | Method of modelling infected skin wound | |
| RU183477U1 (en) | Scalpel for incision in the skin and subcutaneous muscles in cattle | |
| Sohal et al. | Effects of optic primordium removal on the development of the isthmo-optic nucleus in the duck (Anas platyrhynchos) | |
| RU2668201C1 (en) | Method for mimicking acute destructive pancreatitis in pigs | |
| RU2524128C1 (en) | Method for simulating osteoresorption under osteogenesis conditions | |
| RU2703709C1 (en) | Method for simulating an experimental soft tissue wound in rats for developing a therapeutic approach | |
| RU2523622C1 (en) | Method for simulation of false joint in shin fractures and device for implementing it | |
| Fernandes et al. | Free omental graft without vascular microanastomosis in the cutaneous wound healing of rabbits | |
| RU2463668C1 (en) | Method for experimental simulation of delayed distraction osteogenesis accompanying shortening of extremity bones | |
| McGee-Lawrence et al. | Induction of fully stabilized cortical bone defects to study intramembranous bone regeneration | |
| RU2757081C1 (en) | Method for stimulating reparative regeneration in tendopathies | |
| RU2720838C1 (en) | Method for simulating chronic osteomyelitis | |
| CN109394741A (en) | Application of the sphingol in the drug of preparation treatment spinal cord injury | |
| RU2729370C1 (en) | Method of closing defect of fertilized egg when creating experimental model | |
| Jacoberger-Foissac et al. | Assessing the efficacy of immune checkpoint inhibitors in preclinical tumor models | |
| Lu et al. | Preparation of animal model of chicken for lymphatic anastomosis technique training | |
| UA123282C2 (en) | METHOD FOR SIMULATION OF INFLUENCE OF SURGICAL INSTRUMENTS ON MUCOPERIOSIS OF CIRCULAR SINUS | |
| Dostal et al. | Comparison of the Microvascular Anastomosis Maturation in Continuous and Interrupted Suture Technique. | |
| Aksamitiene et al. | Novel, standardized pre-clinical surgical animal model to investigate the cellular and molecular mechanisms of ischemic flap healing | |
| RU2627463C1 (en) | Method for simulation of lesser circulation hypertension | |
| RU2642270C1 (en) | Method for diagnostics of endogenous intoxication of cryoprotective genesis | |
| RU2610361C2 (en) | Method for experimental modelling of autotransplantation of splenic tissue into liver |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160410 |