RU2541458C1 - Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus) - Google Patents

Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus) Download PDF

Info

Publication number
RU2541458C1
RU2541458C1 RU2014150173/93A RU2014150173A RU2541458C1 RU 2541458 C1 RU2541458 C1 RU 2541458C1 RU 2014150173/93 A RU2014150173/93 A RU 2014150173/93A RU 2014150173 A RU2014150173 A RU 2014150173A RU 2541458 C1 RU2541458 C1 RU 2541458C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
calanus
euxinus
black sea
callanus
copepods
Prior art date
Application number
RU2014150173/93A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Антонина Михайловна Ханайченко
Original Assignee
Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского filed Critical Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского
Priority to RU2014150173/93A priority Critical patent/RU2541458C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2541458C1 publication Critical patent/RU2541458C1/en

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish

Landscapes

  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: method for culturing calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea calanus) refers to marine aquaculture and can be used for performing experiments in marine biology, physiology and biochemistry, and for biological tests in marine toxicology, as well as in useful larval sea fish growing. According to the method, calanus females caught from the natural environment are kept in a disinfectant solution at temperate 15°C for 1.5 hours with microalgae Exuviaella cordata added; that is followed by performing a preparation procedure for synchronising mass production of eggs used to produce synchronous hatching of nauplii and synchronous birth cohorts of calanus. The advantages of the method consist in the fact that optimal thermal, throphic and density environment are presented for the first time to synchronise and standardise the processes of egg production by calanus females, calanus egg development and hatching, young calanus development and growth until reaching the last life stages. The egg disinfection enables eliminating the pathogenic microorganisms affecting both calanus's ability to survive, and larval fish's ability of survive when using them as living feed.
EFFECT: method enables performing the pre-assessment of the quantity and quality of the produced material.

Description

Предполагаемое изобретение относится к области морской аквакультуры и может быть использовано для проведения экспериментальных работ по морской биологии, физиологии и биохимии и для биологического тестирования в области морской токсикологии, а также в качестве живых кормов при выращивании личинок ценных морских рыб.The alleged invention relates to the field of marine aquaculture and can be used for experimental work in marine biology, physiology and biochemistry and for biological testing in the field of marine toxicology, as well as live food for growing valuable marine fish larvae.

Каланоидные копеподы являются важным компонентом морской пищевой цепи и наиболее полноценным живым кормом как для личиночных, так и взрослых стадий морских рыб. Поэтому разработка способа их культивирования с целью получения массового количества однородных организмов, выращенных в заданных условиях среды, характеризующихся однородным возрастным и биохимическим составом, важна как для проведения достоверных экспериментальных работ в области морской биологии, экологии, физиологии, биохимии, биологического тестирования, так и для разработки методов выращивания полноценной здоровой молоди ценных пород морских рыб (например, камбалы калкана).Calanoid copepods are an important component of the marine food chain and the most complete live food for both larval and adult stages of marine fish. Therefore, the development of a method for their cultivation in order to obtain a mass number of homogeneous organisms grown under specified environmental conditions, characterized by a homogeneous age and biochemical composition, is important both for reliable experimental work in the field of marine biology, ecology, physiology, biochemistry, biological testing, and for development of methods for growing healthy healthy juveniles of valuable species of marine fish (for example, flounder kalkan).

До настоящего времени не разработан ни один способ массового культивирования черноморских каланоидных копепод Calanus euxinus из яйца до половозрелого организма.To date, not a single method has been developed for mass cultivation of the Black Sea calanoid copepods Calanus euxinus from an egg to a mature organism.

Известен способ выращивания близкородственного атлантического вида каланоидных копепод Calanus helgolandicus {см. Paffenhofer G.-A. Cultivation of Calanus helgolandicus under controlled conditions // Helg. wiss Meeresunters. - 1970. - 20. - P. 346-359). Способ предусматривает отлов из морских акваторий диких самок калянуса и одноразовое получение от них яиц при температуре 15°С. Для кормления науплиев калянуса в 1-2 л цилиндры вносят морские микроводоросли - диатомовые Lauderia borealis, Skeletonema costatum, Chaetoceros curvisteus, и динофлагелляты Gymnodinium splendens. Для минимального времени достижения половозрелости от яйца рекомендуется поддерживать концентрации микроводорослей около 100 мкг С/л. Плотность калянусов от выклева из яйца до копеподита С1 снижают от 0,33 до 0,023 экз/мл.A known method of growing a closely related Atlantic species of calanoid copepods Calanus helgolandicus {see Paffenhofer G.-A. Cultivation of Calanus helgolandicus under controlled conditions // Helg. wiss Meeresunters. - 1970. - 20. - P. 346-359). The method involves capturing wild female Calanus from marine water areas and one-time obtaining of eggs from them at a temperature of 15 ° C. For feeding calanus nauplii, marine microalgae - diatoms Lauderia borealis, Skeletonema costatum, Chaetoceros curvisteus, and dinoflagellates Gymnodinium splendens - are introduced into the 1-2 liter cylinders. For the minimum time to reach maturity from an egg, it is recommended to maintain microalgae concentrations of about 100 μg C / L. The density of calanuses from hatching from an egg to copepodite C1 is reduced from 0.33 to 0.023 ind./ml.

Известный способ имеет ряд существенных недостатков.The known method has several significant disadvantages.

Основными недостатком является невозможность предварительной оценки количества и качества получаемого материала - науплиев калянусов из яиц, полученных от самок калянусов, развивавшихся в естественных условиях. Во-первых, количество яиц, производимых самками калянуса из естественных условий, непредсказуемо, так как зависит от количества и качества их питания во внешней среде. Во-вторых, при использовании известного способа непредсказуем процент жизнеспособных яиц, и, следовательно, процент жизнеспособных науплиев, так как питание самок в естественных условиях неконтролируемо, а из литературных и собственных экспериментальных данных известно, что даже при высокой продуктивности яиц, процент жизнеспособных науплиев калянуса зависит от качественного состава пищи самок. В-третьих, при получении яиц от самок не производится дезинфекция яиц и, таким образом, из внешней среды переносятся патогенные микроорганизмы, влияющие как на выживаемость самих калянусов, так и, при использовании их в качестве живых кормов, на выживаемость личинок рыб.The main disadvantage is the impossibility of a preliminary assessment of the quantity and quality of the material obtained - nauplii of calanuses from eggs obtained from female calanuses that developed in natural conditions. Firstly, the number of eggs produced by female calanus from natural conditions is unpredictable, since it depends on the quantity and quality of their nutrition in the external environment. Secondly, when using the known method, the percentage of viable eggs is unpredictable, and, therefore, the percentage of viable nauplii, since the nutrition of females in vivo is uncontrolled, and from literature and our own experimental data it is known that even with high egg productivity, the percentage of viable calanus nauplii depends on the quality of the food of the females. Thirdly, when eggs are received from females, eggs are not disinfected and, therefore, pathogenic microorganisms are transferred from the external environment, affecting both the survival of calanuses themselves and, when used as live food, the survival of fish larvae.

В основу «Способа культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса)» поставлена задача путем разработки новой технологии культивирования, обеспечить получение синхронной массовой популяции калянуса, состоящей из особей однородного возрастного, размерного и биохимического состава за определенный срок.The “Method for the cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Calanus)” is based on the task, by developing a new cultivation technology, to provide a synchronous mass of Calanus populations consisting of individuals of uniform age, size and biochemical composition for a certain period of time.

Поставленная задача достигается тем, что отловленных самок выдерживают в дезинфекционном растворе при температуре 15°С в течение 1,5 часов с добавлением микроводорослей Exuviaella cordata, после чего осуществляют процедуру подготовки для синхронизации массового получения яиц, получают синхронную массу яиц, из которых производят синхронный выклев науплиев и получают синхронные возрастные когорты калянуса.The task is achieved by the fact that the captured females are kept in a disinfection solution at a temperature of 15 ° C for 1.5 hours with the addition of microalgae Exuviaella cordata, after which the preparation procedure is carried out to synchronize the mass production of eggs, they obtain a synchronous mass of eggs from which they produce a synchronous hatch nauplii and receive synchronous age cohorts of calanus.

Синхронная культура калянусов необходима для получения массового количества калянусов (науплиальных или копеподитных стадий) заданного возраста (размера, биохимического состава). В течение жизненного цикла калянус проходит 6 науплиальных (личиночных, обозначаемых N1-N6), 5 - копеподитных стадий (C1-С5) и одну, последнюю, 12 жизненную стадию - взрослый калянус (самка или самец, обозначаемую С6♀ или С6♂). Переход от одной стадии к другой осуществляется в результате морфологических изменений, нарастания массы и размеров тела и смены покровов (линьки). После перехода (линьки) в стадию С6, калянус достигает терминальных размеров тела, и линек больше не происходит. В дальнейшем может происходить только прирост биомассы калянуса, например, за счет отложения запасных веществ и формирования генеративной продукции (яиц). Сроки достижения (прохождения очередной линьки) каждой последующей стадии калянуса обусловлены эндогенными (запрограммированными генетически) механизмами процессов и зависят от комплекса модифицирующих их температурных и трофических условий содержания организмов.A synchronous culture of calanuses is necessary to obtain a mass number of calanuses (nauplial or copepod stages) of a given age (size, biochemical composition). During the life cycle, the calanus undergoes 6 nauplial (larval, designated N1-N6), 5 - copepods stages (C1-C5) and one, last, 12 life stage - adult calanus (female or male, denoted C6♀ or C6♂). The transition from one stage to another is carried out as a result of morphological changes, an increase in body mass and size and a change of integument (molting). After the transition (molting) to stage C6, the calanus reaches the terminal size of the body, and the molting no longer occurs. In the future, only an increase in the calanus biomass can occur, for example, due to the deposition of reserve substances and the formation of generative products (eggs). The terms of achievement (passing of the next molt) of each subsequent stage of the calanus are determined by the endogenous (genetically programmed) mechanisms of the processes and depend on the complex of temperature and trophic conditions of organisms modifying them.

Способ реализуется следующим образом.The method is implemented as follows.

1) Получение самок калянуса1) Obtaining female calanus

2) Процедура подготовки самок калянуса для синхронизации массового получения яиц.2) The procedure for preparing female calanus to synchronize the mass production of eggs.

3) Процедура получения синхронной массы яиц калянуса.3) The procedure for obtaining synchronous mass of calanus eggs.

4) Процедура синхронного выклева науплиев из яиц.4) The procedure for synchronously hatching nauplii from eggs.

5) Получение синхронных возрастных когорт калянуса Пример реализации способа5) Obtaining synchronous age cohorts of Calanus Example of the implementation of the method

Получение самок калянуса. В ноябре 2003 г. производили траления зоопланктонной сетью на глубинах от 40 до 0 м. Полученные зоопланктонные пробы доставляли в лабораторные помещения. Половозрелых самок калянуса отделяли от основной массы планктона и помещали в дезинфекционный раствор, приготовленный на основе морской воды стандартной черноморской солености 17,5-18,5 ‰, стерилизованной путем механической фильтрации (через ряд последовательных картриджных фильтров 10, 5, 1 мкм) и обработки ультрафиолетом. Самок ыпри температуре 15°С выдерживали в дезинфекционном растворе с добавлением микроводорослей Exuviaella cordata (syn. Prorocentrum minimum) в течение 1,5 часов.Getting female calanus. In November 2003, trawling was carried out by the zooplankton network at depths from 40 to 0 m. The obtained zooplankton samples were delivered to laboratory premises. Mature calanus females were separated from the main mass of plankton and placed in a disinfection solution prepared on the basis of sea water of standard Black Sea salinity of 17.5-18.5 стери, sterilized by mechanical filtration (through a series of successive cartridge filters of 10, 5, 1 μm) and processing ultraviolet light. The females were kept at a temperature of 15 ° C in a disinfection solution with the addition of microalgae Exuviaella cordata (syn. Prorocentrum minimum) for 1.5 hours.

Подготовка самок калянуса для синхронизации получения яиц. Самок калянусов промывали стерильной морской водой и помещали в контейнеры со стерильной морской водой при минимальном объеме 10 мл на самку при температуре 7±1°С. В таких условиях самок содержали от 1 до 14 суток, при условии ежедневной подмены 0,1 объема воды. В процессе содержания при низкой температуре возрастной состав у самок калянусов, готовых к вымету гамет, синхронизировался.Preparing female calanus to synchronize egg production. Female calanuses were washed with sterile sea water and placed in containers with sterile sea water with a minimum volume of 10 ml per female at a temperature of 7 ± 1 ° C. Under such conditions, the females were kept from 1 to 14 days, provided that 0.1 volume of water was changed daily. In the process of keeping at low temperature, the age composition of female calanuses ready for gamete sweeping was synchronized.

Получение яиц калянуса. Для перевода самок в режим размножения разбавляли среду, в которой находились самки, стерильной морской водой до 100 мл на особь, и переносили сосуды на рассеянный свет (оптимум 500 люкс) при температуре 15±1°С с добавлением оптимального для производства яиц и жизнеспособности науплиев корма - микроводоросли Exuviaellla cordata в концентрации 5·104 кл/мл.Getting calanus eggs. To transfer the females to the breeding mode, the medium in which the females were diluted with sterile sea water up to 100 ml per individual, and the vessels were transferred to scattered light (optimum 500 lux) at a temperature of 15 ± 1 ° С with the addition of optimal for egg production and nauplii viability feed - microalgae Exuviaellla cordata at a concentration of 5 · 10 4 cells / ml.

Через 24 часа получали до 10-30 яиц на самку в сутки, в зависимости от исходного состояния половозрелой самки. Яйца калянусов получали ежесуточно на протяжении от 14 до 30 суток (в зависимости от качества исходного материала), после чего самок калянусов заменяли новой партией.After 24 hours, up to 10-30 eggs were obtained per female per day, depending on the initial state of the mature female. Calanus eggs were obtained daily for 14 to 30 days (depending on the quality of the starting material), after which the female calanus was replaced with a new batch.

Выклев науплиев из яиц. Яйца, которые были отделены с помощью сита с размером ячей 70 мкм, обрабатывали дезинфицирующим раствором в течение 30 мин и переносили в инкубаторы со стерильной морской водой при плотности 10 экз/мл. При температуре 16±1°С через сутки из яиц происходил массовый выклев первых науплиальных стадий калянусов. Жизнеспособные науплии составляли до 95% от общей массы собранных яиц. При необходимости, выклев науплиев из собранных яиц задерживали на сутки путем временного перемещения яиц сразу после сбора в темноту при температуре 7±1°С.Hatching nauplii from eggs. The eggs, which were separated using a sieve with a mesh size of 70 μm, were treated with a disinfectant solution for 30 minutes and transferred to incubators with sterile sea water at a density of 10 ind./ml. At a temperature of 16 ± 1 ° С, a day after the eggs mass hatching of the first nauplial stages of calanus occurred. Viable nauplii accounted for up to 95% of the total mass of eggs collected. If necessary, hatching of nauplii from the collected eggs was delayed for a day by temporarily moving the eggs immediately after collection into the dark at a temperature of 7 ± 1 ° C.

Получение синхронных возрастных когорт калянуса. Из общей массы жизнеспособных науплиев отбирали необходимую для проведения экспериментов партию науплиев, которых переводили на подращивание до необходимой стадии развития (размерной группы). Науплиев при плотности 5 экз/мл помещали в стерильную морскую воду соленостью 18‰ при температуре 17±1°С и освещенности 1000 - 2000 люкс. Для стабилизации среды добавляли примнезиофитовые микроводоросли Isochrysis galbana (клон T-Iso) (экспоненциальная фаза роста), в концентрации 103 кл/мл. Через сутки науплии проходили первую линьку и переходили на вторую науплиальную стадию N2 (первую питающуюся стадию). В качестве корма науплиям добавляли 105 кл/мл (0.9 мкг С мл-1) T-Iso. Такую концентрацию корма поддерживали до четвертых суток после выклева.Obtaining synchronous age cohorts of calanus. From the total mass of viable nauplii, the batch of nauplii necessary for conducting experiments was selected, which were transferred to growing up to the necessary stage of development (size group). Nauplii at a density of 5 ind./ml were placed in sterile sea water with a salinity of 18 ‰ at a temperature of 17 ± 1 ° C and illumination of 1000–2000 lux. To stabilize the medium, primsoiophyte microalgae Isochrysis galbana (T-Iso clone) (exponential growth phase) was added at a concentration of 10 3 cells / ml. After a day, the nauplii passed the first molt and passed to the second nauplial stage N2 (the first feeding stage). As feed for nauplii, 10 5 cells / ml (0.9 μg C ml -1 ) T-Iso was added. This feed concentration was maintained until the fourth day after hatching.

В конце четвертых суток после выклева, когда 50% науплиев переходили на четвертую науплиальную стадию N4, состав корма модифицировали: к 4,5 104 кл/мл Т-Iso добавляли 0,5 104 кл/мл динофлагеллят Exuviaella cordata (Exu), т.е. в соотношении концентрации клеток 4:1. В совокупности эта концентрация клеток смеси кормовых микроводорослей составляла 5104 кл/мл. At the end of the fourth day after hatching, when 50% of nauplii transferred to the fourth nauplius stage N4, the feed composition was modified: 0.5 10 4 cells / ml of Exuviaella cordata dinoflagellate (Exu) was added to 4.5 10 4 cells / ml of T-Iso, those. in a ratio of cell concentration of 4: 1. Together, this concentration of cells of the mixture of feed microalgae was 510 4 cells / ml.

Ежедневно на протяжении науплиального периода объем стерильной воды увеличивали вдвое для снижения плотности науплиев и корректировали концентрацию микроводорослей. На протяжении 7-8 сут после выклева из яиц происходило 5 последовательных науплиальных линек, приводящих к получению последней шестой науплиальной стадии N6.Daily during the nauplial period, the volume of sterile water was doubled to reduce the density of nauplii and the concentration of microalgae was adjusted. Within 7-8 days after hatching from eggs, 5 consecutive nauplial molts occurred, resulting in the last sixth nauplial stage N6.

Со второй недели культивирования (8-10 сут после выклева) происходил массовый переход от науплиальных к копеподитным стадиям калянуса. Морскую воду, в которой находились калянусы, меняли на 75% и доводили до объема, который соответствовал 20 мл на 1 копеподита С1. К началу копеподитного периода когорты калянуса плотность организмов в культуре составляла не более 0.05 экз/мл. Объем воды ежесуточно подменяли на 0.2 объема и производили постепенное разбавление плотности калянусов, таким образом, чтобы к 15 сут на 1 калянуса приходилось 80 мл среды. Концентрацию микроводорослей в культуре калянусов с 9 до 15 сут поддерживали на уровне 3104 кл/мл смеси микроводорослей T-Iso и Exu в соотношении концентрации клеток 2:1.From the second week of cultivation (8-10 days after hatching), there was a massive transition from nauplius to copepodic stages of calanus. Sea water, in which the calynuses were located, was changed by 75% and brought to a volume that corresponded to 20 ml per 1 copepodite C1. By the beginning of the copepodic period of the calanus cohort, the density of organisms in the culture was no more than 0.05 ind./ml. The volume of water was changed daily to 0.2 volumes and gradual dilution of the density of calanuses was performed, so that by 15 days per 1 calanus there was 80 ml of medium. The concentration of microalgae in the culture of calanuses from 9 to 15 days was maintained at a level of 310 4 cells / ml of a mixture of microalgae T-Iso and Exu in a ratio of cell concentration of 2: 1.

Начиная с 15 сут (копеподитной стадии СЗ) по 18 сут после выклева из яйца, калянусов кормили смесью динофлагеллят: 5.103 кл/мл Exu, и 103 кл/мл Prorocentrum micans (Pmc). Совокупная концентрация клеток этих видов микроводорослей в культуре калянуса составляла 6103 кл/мл смеси при соотношении видов 5:1.Starting from day 15 (the copepodic stage of SZ), 18 days after hatching from an egg, the calyans were fed with a mixture of dinoflagellates: 5.10 3 cells / ml Exu, and 10 3 cells / ml Prorocentrum micans (Pmc). The total concentration of cells of these types of microalgae in the culture of Calanus was 610 3 cells / ml of the mixture with a ratio of 5: 1.

С 18 сут после выклева из яйца (при переходе к четвертой копеподитной стадии С4) калянусов продолжали кормить смесью Exu и Pmc, но соотношение концентраций клеток смещали в сторону более крупных клеток (3:1), которая составила в совкупности 4103 кл/мл.From 18 days after hatching from the egg (when moving to the fourth copepod stage C4), the calanus continued to be fed with a mixture of Exu and Pmc, but the ratio of cell concentrations was shifted towards larger cells (3: 1), which amounted to 410 3 cells / ml.

С 21 сут после достижения пятой копеподитной стадии (С5), калянуса кормили исключительно Рте, концентрацию клеток которого поддерживали на уровне 2103 кл/мл до достижения стадии взрослого калянуса (С6), т.е. на 28-31 сутки выращивания калянуса от яйца.From 21 days after reaching the fifth copepod stage (C5), the calanus was fed exclusively with PTE, the cell concentration of which was maintained at 210 3 cells / ml until the stage of adult calanus (C6) was reached, i.e. on 28-31 days of growing calanus from an egg.

В результате получили следующие временные когорты калянуса (табл.1).As a result, the following temporary cohorts of calanus were obtained (Table 1).

Таблица 1.Table 1.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Размерный состав культивируемых когорт черноморского калянуса, изменялся от 212.5±12.5 до 3100±300 цм соответственно стадиям развития (N1 до С6) в усредненные сроки получения их (от 1 до 28 - 31 сут) при приведенных стандартных трофических условиях и плотности культивирования, при стандартной температуре культивирования (17±1°С). Размер (в микронах) соответствует для яйца - его диаметру; для возрастных стадий калянуса - его общей длине.The size composition of cultivated cohorts of the Black Sea Callanus varied from 212.5 ± 12.5 to 3100 ± 300 cm, respectively, to the development stages (N1 to C6) in the averaged terms for their production (from 1 to 28 - 31 days) under the given standard trophic conditions and cultivation density, under standard cultivation temperature (17 ± 1 ° C). Size (in microns) corresponds for an egg - its diameter; for age stages of calianus - its total length.

Минимальное время генерации от выклева из яйца до достижения стадии С6 при оптимальном питании составило 30 сут (при среднесуточной температуре 17±1°С), максимальное - 60 сут (при среднесуточной температуре 9±1°С). Максимальная выживаемость от стадии яйца до взрослого калянуса при применении предлагаемого способа культивирования - 50%.The minimum generation time from hatching from an egg to reaching stage C6 at optimal nutrition was 30 days (at an average daily temperature of 17 ± 1 ° C), and the maximum was 60 days (at an average daily temperature of 9 ± 1 ° C). The maximum survival rate from the egg stage to adult calanus when applying the proposed cultivation method is 50%.

Заявляемый способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) обладает рядом преимуществ:The inventive method for the cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) has several advantages:

впервые предложены оптимальные температурные, трофические и плотностныеoptimal temperature, trophic, and density are proposed for the first time

условия для синхронизации и стандартизации процессов продуцирования яиц самками калянусов, развития и выклева яиц калянусов, развития и роста молоди калянусов до достижения последней жизненной стадии;conditions for synchronization and standardization of egg production by female calanus, development and hatching of calanus eggs, development and growth of young calanus until reaching the last life stage;

проведение дезинфекции яиц позволяет освободиться от патогенных микроорганизмов, влияющих как на выживаемость самих калянусов, так и при использовании их в качестве живых кормов на выживаемость личинок рыб; предлагаемый способ позволяет осуществлять предварительную оценку количества и качества получаемого материала.disinfection of eggs allows you to get rid of pathogenic microorganisms that affect both the survival of the calynus themselves and, when used as live food, the survival of fish larvae; the proposed method allows a preliminary assessment of the quantity and quality of the material obtained.

Claims (11)

1. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса), включающий отлов самок, получение от них яиц и науплиев в искусственных условиях, кормление морскими микроводорослями, отличающийся тем, что отловленных самок выдерживают в дезинфекционном растворе при температуре 15°С в течение 1,5 часов с добавлением микроводорослей Exuviaella cordata, после чего осуществляют процедуру подготовки для синхронизации массового получения яиц, получают синхронную массу яиц, из которых производят синхронный выклев науплиев и получают синхронные возрастные когорты калянуса.1. A method of cultivating calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus), including capturing females, obtaining eggs and nauplii from them under artificial conditions, feeding marine microalgae, characterized in that the captured females are kept in a disinfection solution at a temperature of 15 ° C for 1, 5 hours with the addition of microalgae Exuviaella cordata, after which a preparation procedure is carried out to synchronize the mass production of eggs, a synchronous mass of eggs is obtained, from which a synchronous hatching of nauplii is made and obtained from nhronnye Calanus age cohort. 2. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по п. 1, отличающийся тем, что процедуру подготовки для синхронизации массового получения яиц осуществляют путем помещения самок в контейнеры со стерильной морской водой с температурой 7±1°С и выдерживания от 1 до 14 суток при условии ежедневной подмены 0,1 объема воды.2. A method of cultivating calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to claim 1, characterized in that the preparation procedure for synchronizing the mass production of eggs is carried out by placing the females in containers with sterile sea water with a temperature of 7 ± 1 ° C and holding from 1 to 14 days subject to a daily change of 0.1 volume of water. 3. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по п. 1, отличающийся тем, что для получения синхронной массы яиц емкости с самками помещают на рассеянный свет при температуре 15±1°С и добавляют микроводоросли Exuviaellla cordata в концентрации 5∙104 кл/мл.3. A method of cultivating calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Calanus) according to claim 1, characterized in that, to obtain a synchronous egg mass, the containers with the females are placed in scattered light at a temperature of 15 ± 1 ° C and Exuviaellla cordata microalgae are added at a concentration of 5 ∙ 10 4 cells / ml. 4. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по п. 1, отличающийся тем, что для синхронного выклева науплиев яйца обрабатывают дезинфицирующим раствором и помещают в инкубаторы со стерильной морской водой с температурой 16±1°С при плотности 10 экз/мл.4. A method of cultivating calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to claim 1, characterized in that for synchronous hatching of nauplii, the eggs are treated with a disinfectant solution and placed in incubators with sterile sea water at a temperature of 16 ± 1 ° C at a density of 10 ind./ml . 5. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по п. 1, отличающийся тем, что синхронные возрастные когорты калянуса получают путем подращивания до необходимой стадии развития в течение 1-30 суток.5. A method of cultivating calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Calanus) according to claim 1, characterized in that synchronous age cohorts of Calanus are obtained by growing to the desired developmental stage within 1-30 days. 6. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что науплиев при плотности 5 экз/мл помещают в стерильную морскую воду соленостью 18‰ при температуре 17±1°С и освещенности 1000 - 2000 люкс и на 2-е сутки добавляют примнезиофитовые микроводоросли Isochrysis galbana (клон T-Iso) в концентрации 103 кл/мл, доводя до 105 кл/мл на 4-е сутки.6. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that nauplii at a density of 5 ind./ml are placed in sterile sea water with a salinity of 18 ‰ at a temperature of 17 ± 1 ° C and illumination of 1000 - 2000 lux and on the 2nd day add primosiophyte microalgae Isochrysis galbana (clone T -Iso) at a concentration of 10 3 cells / ml, bringing up to 10 5 cells / ml on the 4th day. 7. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что при подращивании до четвертой науплиальной стадии N4 корм состоит из T-Iso и динофлагеллят Exuviaella cordata (Exu) в соотношении 4:1.7. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that when growing to the fourth nauplial stage N4, the feed consists of T-Iso and dinoflagellates Exuviaella cordata (Exu) in a 4: 1 ratio. 8. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что на 8-10-е сутки производят замену морской воды на 75% и доводят до объема 20 мл на 1 копепо дита С1 при плотности не более 0.05 экз/мл, а к 15-м суткам разбавление плотности доводят до 80 мл среды на 1 экз., при этом корм состоит из смеси микроводорослей T-Iso и Exu в соотношении 2:1.8. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that on the 8-10th day, seawater is replaced by 75% and brought to a volume of 20 ml per 1 copepit Cl at a density of not more than 0.05 ind./ml, and by the 15th day the density is diluted adjusted to 80 ml of medium per 1 copy, while the feed consists of a mixture of microalgae T-Iso and Exu in a ratio of 2: 1. 9. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что с 15 по 18 сутки (копеподитная стадия СЗ) калянусов кормят смесью динофлагеллят Exu, и Prorocentrum micans (Pmc) при соотношении 5:1.9. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that from the 15th to the 18th day (copepod stage S3), the calanuses are fed with a mixture of dinoflagellates Exu, and Prorocentrum micans (Pmc) at a ratio of 5: 1. 10. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что с 18 суток (при переходе к четвертой копеподитной стадии С4) калянусов кормят смесью Exuviaella cordata и Prorocentrum micans при соотношении 3:1.10. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that from 18 days (when moving to the fourth copepod stage C4), the calanuses are fed with a mixture of Exuviaella cordata and Prorocentrum micans at a ratio of 3: 1. 11. Способ культивирования каланоидных копепод Calanus euxinus (черноморского калянуса) по пп. 1, 5, отличающийся тем, что с 21 по 30 сутки (копеподитная стадия С5-С6) калянуса кормят Prorocentrum micans при концентрации клеток 2·103 кл/мл. 11. The method of cultivation of calanoid copepods Calanus euxinus (Black Sea Callanus) according to paragraphs. 1, 5, characterized in that from 21 to 30 days (copepod stage C5-C6) of calanus are fed Prorocentrum micans at a cell concentration of 2 · 10 3 cells / ml.
RU2014150173/93A 2014-10-01 2014-10-01 Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus) RU2541458C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014150173/93A RU2541458C1 (en) 2014-10-01 2014-10-01 Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014150173/93A RU2541458C1 (en) 2014-10-01 2014-10-01 Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2541458C1 true RU2541458C1 (en) 2015-02-10

Family

ID=53287198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014150173/93A RU2541458C1 (en) 2014-10-01 2014-10-01 Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus)

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2541458C1 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104855322A (en) * 2015-06-24 2015-08-26 鲁东大学 High-density aquaculture method for copepoda in indoor large pool
RU2614644C1 (en) * 2015-11-05 2017-03-28 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований им. А.О. Ковалевского РАН" Method of intensive cohort cultivation of acartia (sea calanoid copepods)
RU2663328C1 (en) * 2017-06-19 2018-08-03 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН" Method of cultivation of diatomic alkaline chaetoceros calcitrans - food for larvae of giant oysters crassostrea gigas
RU2670159C1 (en) * 2017-12-01 2018-10-18 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН" Method of long-term storage of eggs of calanidic copepods of acartias for receiving synchronous culture of same age nauplii
RU2788532C1 (en) * 2022-06-23 2023-01-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "Институт биологии южных морей имени А.О. Ковалевского РАН" (ФИЦ ИнБЮМ) Method for cultivation of oithona davisae marine cyclopoid copepods

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104855322A (en) * 2015-06-24 2015-08-26 鲁东大学 High-density aquaculture method for copepoda in indoor large pool
CN104855322B (en) * 2015-06-24 2017-02-15 鲁东大学 High-density aquaculture method for copepoda in indoor large pool
RU2614644C1 (en) * 2015-11-05 2017-03-28 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований им. А.О. Ковалевского РАН" Method of intensive cohort cultivation of acartia (sea calanoid copepods)
RU2663328C1 (en) * 2017-06-19 2018-08-03 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН" Method of cultivation of diatomic alkaline chaetoceros calcitrans - food for larvae of giant oysters crassostrea gigas
RU2670159C1 (en) * 2017-12-01 2018-10-18 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН" Method of long-term storage of eggs of calanidic copepods of acartias for receiving synchronous culture of same age nauplii
RU2788532C1 (en) * 2022-06-23 2023-01-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "Институт биологии южных морей имени А.О. Ковалевского РАН" (ФИЦ ИнБЮМ) Method for cultivation of oithona davisae marine cyclopoid copepods

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rakaj et al. Spawning and rearing of Holothuria tubulosa: A new candidate for aquaculture in the Mediterranean region
RU2541458C1 (en) Method for culturing calanoid copepods calanus euxinus (black sea calanus)
Page et al. Successes and pitfalls of the aquaculture of the sponge Mycale hentscheli
CN105875453A (en) Crossbreeding method for improving high-temperature tolerance of patinopecten yesoensis
CN103222439A (en) Grading farming method of specific pathogen free seed shrimp of penaeus vanmamei
Farhadian et al. Effects of salinity, temperature, light intensity and light regimes on production, growth and reproductive parameters of Apocyclops dengizicus
CN101422127A (en) Gulf-weed sexual propagating and seedling rearing method
CN102283153A (en) Batch production fry rearing technique for exopalaemon modestus
Capo et al. Larval growth, development, and survival of laboratory-reared Aplysia californica: Effects of diet and veliger density
Agudelo et al. Advances on spontaneous captive breeding and culture conditions of Caribbean Sea cucumber Stichopus sp
RU2614644C1 (en) Method of intensive cohort cultivation of acartia (sea calanoid copepods)
KR100692378B1 (en) Tintinnid, Undella sp. Chuuk-04 Available For Hatched Fry Feed And Culturing Method Thereof
Vasudevan et al. Intensive cultivation of the calanoid copepod Oithona rigida for mariculture purpose
CN101855999B (en) Method for selectively breeding bivalve shellfish
Lavajoo Influence of Different Algal Diets on Larval Growth Rates in the Marine Serpulidae Polychaete Worm
Aminur Rahman et al. Embryonic, larval and juvenile development of tropical sea urchin, Diadema setosum
CN108283163A (en) Continuous cultural method in a kind of big artemia room of obligate ovoviviparity breeding
JP6083760B2 (en) Improving the survival rate of isolated germ cells to the gonads of host fish
CN102511415A (en) Method for screening high-temperature resistant turbot individuals
UA79254C2 (en) Method for cultivation of copepods calanus euxinus (black sea calanus)
Niass et al. Reproduction and larval rearing of the fresh water prawn, Macrobrachium vollenhovenii in Senegal
RU2541459C1 (en) Method for growing giant oyster crassostrea gigas in black sea
Siddique et al. Freshwater pearl culture in Bangladesh: Current status and prospects
Selvaraj et al. First record on multiple spawning of pearl spot (Etroplus suratensis) reared in small FRP tanks
Schippers Sponge cell culture

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20160608