RU2539762C1 - ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. - Google Patents
ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. Download PDFInfo
- Publication number
- RU2539762C1 RU2539762C1 RU2013142897/10A RU2013142897A RU2539762C1 RU 2539762 C1 RU2539762 C1 RU 2539762C1 RU 2013142897/10 A RU2013142897/10 A RU 2013142897/10A RU 2013142897 A RU2013142897 A RU 2013142897A RU 2539762 C1 RU2539762 C1 RU 2539762C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- pathogenic
- bacillus subtilis
- subtilis
- fungi
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен штамм бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-11353, обладающий способностью к расщеплению широкого спектра моно- и дисахаров и широким спектром антагонистического действия в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий и грибов, вызывающих заболевания у растений и сельскохозяйственных животных. Также предложены варианты применения штамма Bacillus subtilis ВКПМ В-11353 в качестве бактериального консерванта для силоса для создания средств, нормализующих микрофлору кишечника сельскохозяйственных животных, а также для создания средств защиты растений от болезней. Группа изобретений позволяет повысить качество силоса, повысить сохранность поголовья сельскохозяйственных животных и повысить эффективность против патогенных и условно патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания пшеницы. 4 н.п. ф-лы, 8 табл., 4 пр.
Description
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и представляет собой новый штамм из бактерий рода Bacillus, способный к быстрому расщеплению широкого спектра моно- и дисахаров и являющийся антагонистом по отношению к плесневым грибам, патогенным и условно-патогенным бактериям.
В настоящее время препараты-пробиотики из бактерий рода Bacillus, подавляющие развитие патогенных микроорганизмов, находят широкое применение в сельском хозяйстве для подавления фитопатогенных бактерий и грибов (бациспецин-БМ, фитоспорин) (Вялых Л.К., Мелентьев Л.И. Индукция устойчивости к ржавчине у ячменя и пшеницы, вызываемая препаратом Бациспецин БМ / Микробиол. охрана биосферы в регионах Урала и Сев. Прикаспия: Тез. докл. Всес. симп. - Оренбург, 1991. - С. 23-24; RU 2099947, опубл 25.12.97, бюл. №12), в медицине (биоспорин, бактиспорин, споробактерин) (SU 1722502, опубл. 30.03.92; RU 2130316, опубл. 20.05.1999; WO 8909607, опубл. 19.10.1989), ветеринарии для лечения различных заболеваний птиц и сельскохозяйственных животных (БЦЛ - бактоцеллолактин, субалин, споролакт) (RU 2084233, опубл. 20.07.97, Бюл. №20; RU 2035185, опубл. 31.01.92, Бюл. №14; RU 2035186, опубл. 20.05.95, бюл. №14).
Здоровье животных зависит в большой степени от кормовой базы. Основным сочным кормом для скота в зимний период является силос, при заготовке которого еще допускаются большие потери питательных веществ, обусловливающие снижение его качества. Это приводит к существенному недобору животноводческой продукции, поэтому разработка новых эффективных технологий силосования зеленых растений в целях повышения сохранности и качества полученного из них корма по-прежнему остается актуальной (Зафрен С.Я. Как приготовить хороший силос, М., 1970).
Силосование является биологическим способом консервирования кормов, при котором используются процессы превращения растительных веществ, протекающие в природе спонтанно. Консервирующий эффект обусловлен быстрым снижением pH в силосуемом сырье за счет расщепления углеводов и накопления молочной кислоты, что препятствует размножению микроорганизмов, прежде всего патогенных бактерий и плесневых грибов, и потерь питательных веществ в силосе.
Известно большое количество биологических консервантов для силоса, созданных на основе осмотолерантных штаммов молочнокислых бактерий (Головач Т., Коваленко М. Микрофлора силоса амилолитических и молочнокислых бактерий. // Микробиол. ж.1994, Т.56, №2, С.3-7). В то же время указанные препараты имеют и ряд недостатков: они не обладают достаточной антагонистической активностью в отношении плесневых грибов и патогенных бактерий, мало- или совсем не эффективны при силосовании свежескошенных трав, а также кукурузы и других силосных культур с избыточным содержанием сахара, не дают желаемого результата при силосовании провяленных трав, относящихся к группе несилосующихся растений (Мамаев А.А. Эффективность консервирования трав культурой Bacillus subtilis и использование полученного корма в рационах крупного рогатого скота. Автореферат канд. дисс., 2005, 133 с.).
Для гарантированного повышения сохранности и качества силоса практически из любого растительного сырья необходимо использование биологического препарата, обладающего наряду с бактерицидным и хорошо выраженным фунгицидным действием. Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о том, что эта цель может быть достигнута путем создания препарата на основе культуры рода Bacillus.
Наиболее близким к изобретению является штамм бактерий Bacillus subtilis 111 - основа консерванта для силоса «Биотроф - 111» (Мамаев А.А. Эффективность консервирования трав культурой Bacillus subtilis и использование полученного корма в рационах крупного рогатого скота. Автореф. канд. дисс., 2005, 133 с.). Эти бактерии очень хорошо адаптированы для консервации зеленой массы. Они мало требовательны к влажности сырья, могут консервировать трудносилосуемые растения. В процессе консервации ими выделяются особые вещества - бактероцины, которые непосредственно действуют на вредоносную микрофлору. Штамм В. subtilis 111 обладает выраженной фунгицидной активностью в отношении штаммов грибов: Torula - 5 мм задержки роста, Sacharomyces - 7 мм, Penicillium - 35 мм, Aspergillus -24 мм и Fusarium - 37 мм (Лаптев Г.Ю. Разработка биологических препаратов для повышения питательности и эффективности использования кормов. Автореф. докт. дисс., 2009).
Однако неизвестна способность штамма к расщеплению легкоусвояемых сахаров, чем достигается универсальность его применения в качестве консерванта для силоса и способность к быстрому снижению pH за счет накопления молочной кислоты. Неизвестна также антагонистическая активность штамма в отношении других патогенных бактерий кишечной группы, а также его влияние на микробиоценоз кишечника у животных. Все эти показатели имеют важное значение с точки зрения использования штамма Bacillus subtilis в качестве консерванта при силосовании кормов, поскольку споры штамма остаются в силосе при его хранении и при поедании силоса попадают в организм животных. Поэтому необходимо изучение свойств штамма с точки зрения его пробиотических характеристик.
Задачей настоящего изобретения является получение нового штамма рода Bacillus, обладающего способностью к быстрому расщеплению широкого спектра моно- и дисахаров и обладающего широким спектром антагонистического действия в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий и грибов, а также который можно использовать в качестве средства для нормализации микрофлоры кишечника животных или средства для борьбы с заболеваниями растений, и который можно применять в качестве консерванта при силосовании.
Результатом изобретения является новый штамм Bacillus subtilis 1K, выделенный из здорового растения пшеницы (прикорневой зоны) в Уфимском районе. Идентификацию штамма проводили по «Определителю бактерий Берджи».- М.: Мир, 1997.
Штамм Bacillus subtilis 1K депонирован во Всероссиской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП Гос.НИИ.Генетика, г. Москва, под № В-11353. Дата депонирования 23.11.2012 г.
Культура штамма характеризуется следующими свойствами: Bacillus subtilis 1K - грамположительные аэробные спорообразующие палочки, продуцирующие каталазу. На мясо-пептонном агаре (далее - МПА) образует серовато-белые плоские, мелкоморщинистые колонии с ровными краями, вязкой консистенции. Рост в жидкой среде сопровождается образованием пленки серовато-белого цвета и придонного осадка. Через 18 часов роста в мазках культуры обнаруживаются прямые палочковидные клетки, расположенные одиночно, попарно или цепочкой. При спорообразовании клетка не раздувается. Споры овальные, расположены в клетке центрально.
Культура ферментирует моно- и дисахара, в том числе глюкозу, лактозу, сахарозу, манит, мальтозу, арабинозу, галактозу, рамнозу, ксилозу, дульцит, без выделения газа в течение 18-24 часов, что сопровождается накоплением молочной кислоты. Расщепление широкого спектра сахаров создает возможность использования штамма для силосования кормов.
Штамм дает положительную реакцию Фогес-Проскауэра, гидролизует крахмал, желатину, гидролизует мочевину, не утилизирует цитрат натрия, не расщепляет тирозин. Не растет в анаэробных условиях. Продуцирует каталазу, протеазу, амилазу. Не образует лецитиназу и липазу. Редуцирует нитраты до нитритов, не образует газ на среде с нитратами в анаэробных условиях. Не образует индол.
Культура штамма была проверена на безвредность (вирулентность, токсичность и токсигенность).
Для исследования вирулентности штамм выращивали на МПА в течение 24 часов при температуре 37°C. Выросшую биомассу смывали 0,9%-ным раствором натрия хлорида и готовили бактериальные суспензии с концентрацией клеток от 0,5 до 5,0 млрд/в мл. Полученные суспензии вводили белым беспородным мышам массой (16±1) г двумя способами: однократно внутрибрюшинно и пятикратно перорально (по одной дозе ежедневно в течение 5 дней). Результаты испытаний представлены в табл.1.
Таблица 1 | ||||||
Изучение вирулентности культуры штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) | ||||||
Кол-во животных в опыте (штук) | Вводимая доза (×109 кл.мл) | Способ введения | Кратность введения (раз) | Кол-во заболевших мышей (штук) | Кол-во павших мышей (штук) | Кол-во выживших мышей |
Внутрибрюшинно | ||||||
10 | 0,5 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 1,0 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
Перорально | ||||||
10 | 1,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 3,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 5,0 | 5 | 0 | 0 | 10 |
С целью более полного изучения безопасности штамма при пероральном введении были испытаны высокие дозы штамма при разовом пероральном введении мышам (табл.2). Установлено, что разовое введение per os высоких доз штамма - (10-20)×109 кл/мл не приводит к снижению веса животных на первые сутки после введения, и в последующие дни вес животных увеличивается.
Таблица 2 | |
Изучение безопасности штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) при разовом пероральном введении |
№ | Вводимая доза, млрд. кл/мл | Количество животных, штук | Средняя масса животных, г | |||
Было | выжило | До введения | Через 1 сутки | Через 5 суток | ||
1 | 1 | 10 | 10 | 17,2±0,3 | 17,2±0,3 | 18,7±0,3 |
2 | 5 | 10 | 10 | 16,8±0,2 | 16,8±0,3 | 17,9±0,2 |
3 | 10 | 10 | 10 | 17,0±0,2 | 17,0±0,2 | 17,6±0,2 |
Для исследования токсичности (табл.3) штамм выращивали на МПА в течение 24 часов при 37°C, смывали 0,9%-ным раствором хлорида натрия, готовили суспензию, содержащую от 1,0 до 5,0 млрд клеток в 1 мл, которые затем инактивировали прогреванием при 100°C в течение 1 часа. Суспензии вводили способами, описанными при изучении вирулентности.
Таблица 3 | ||||||
Исследование токсичности штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) | ||||||
Кол-во животных в опыте, штук | Вводимая доза, млрд кл.мл | Способ введения | Кратность введения, раз | Кол-во заболевших мышей, штук | Кол-во павших мышей, штук | Кол-во выживших мышей, штук |
Внутрибрюшинно | ||||||
10 | 1,0 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 2,0 | |||||
10 | 3,0 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
Перорально | ||||||
10 | 1,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 2,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 5,0 | 5 | 0 | 0 | 10 |
Для изучения токсигенности (табл.4) штамм выращивали в течение 10 суток на мясо-пептонном бульоне (далее - МПБ) при температуре 37°C. По истечении срока культуральную жидкость центрифугировали при 8000 об/мин в течение 30 мин. Для введения мышам использовали надосадочную жидкость. Контролем служила группа мышей, получавших стерильный МПБ.
Таблица 4 | ||||||
Исследование токсигенности штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) | ||||||
Кол-во животных в опыте, штук | Вводимая доза, мл | Способ введения | Кратность введения, раз | Кол-во заболевших мышей, штук | Кол-во павших мышей, штук | Кол-во выживших мышей, штук |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Внутрибрюшинно | ||||||
10 | 0,5 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 1,0 | 1 | 0 | 0 | 10 | |
Перорально | ||||||
10 | 1,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 2,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
10 | 3,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
Контроль - внутрибрюшинно | ||||||
10 | 1,0 | 5 | 0 | 0 | 10 | |
Контроль - перорально | ||||||
10 | 3,0 | 5 | 0 | 0 | 10 |
Наблюдения за животными проводили на протяжении 5 суток после окончания курса инъекций или перорального введения. В этот период все животные оставались активными, хорошо поедали пищевые рационы, прибавляли в весе, физиологические отправления и поведенческие реакции у них не изменялись. Полученные данные свидетельствуют о безопасности штамма.
Для определения специфической активности исследовали антагонистическую активность штамма в отношении тест культур патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания растений (табл.5) и животных (табл.6). Исследование осуществляли методом отсроченного антагонизма. Для этого культуру штамма высевали петлей в центре чашки Петри с агаризованной картофельно-глюкозной средой. Посевы инкубировали в термостате при 37°C в течение 72 часов. Затем к выросшей культуре подсевали штрихом тест-микроорганизмы (500-миллионные суспензии суточных культур в физиологическом растворе). Учет результатов проводили через 18 ч инкубирования при 37°C по величине зон отсутствия роста тест-культур. Контролем роста тест-культур служило параллельное выращивание их на чашках с агаризованной картофельно-глюкозной средой без культуры исследуемого штамма. Полученные данные результатов испытания представлены в табл.5 и 6.
Таблица 5 | ||
Спектр антагонистической активности штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) в отношении фитопатогенных штаммов, вызывающих заболевания растений | ||
№ | Тест-культуры | Зоны торможения роста, мм |
1 | 2 | 3 |
Грибов: | ||
1 | Fusarium avenaceum | 18-20 |
2 | Fusarium sporotrichiella | 12-15 |
3 | Fusarium oxysporum | 15-17 |
4 | Fusarium culmorum | 14-15 |
5 | Alternaria alternata | 16-18 |
6 | Alternaria brassicicola | 15-17 |
7 | Botrytis cinerea | 15-17 |
8 | Botrytis aclada F-81 | 15-18 |
9 | Penicillium lividum | 15-17 |
10 | Emericellopsis glabra F 1312 | 16-18 |
Бактерии: | ||
14 | Erwinia carotovora | 14-15 |
15 | Xanthomonas malvaceae | 15-17 |
Таблица 6 | ||
Спектр антагонистической активности штамма В. subtilis 1K (ВКПМ B-11353) в отношении патогенных штаммов, вызывающих заболевания у животных | ||
Тест-штаммы | Зона торможения роста, мм | |
1 | 2 | |
Бактерии | ||
Staphylococcus aureus (Никифоров) | 22-25 | |
Staphylococcus aureus (Филиппов) | 22-25 | |
1 | 2 | |
St. aureus 66 | 15-17 | |
St. aureus 67 | 20-22 | |
St. aureus 81 | 18-20 | |
Proteus vulgaris 177 | 15-20 | |
Proteus vulgaris 12 | 14-16 | |
Proteus vulgaris 48 | 12-14 | |
Proteus. vulgaris 41 | 12-15 | |
Proteus mirabilis 40 | 15-20 | |
Proteus mirabilis 36 | 15-17 | |
Proteus mirabilis 35 | 15-18 | |
Candida albicans | 28-30 | |
Escherihia coli 177 | 12-15 | |
Escherihia coli 154 | 12-15 | |
Escherihia coli 140 | 12-15 | |
Streptococcus 324 | 10-15 | |
Streptococcus 362 | 12-15 | |
Salmonella paratyphi 269 | 12-15 | |
Salmonella paratyphi 15 | 15-20 | |
Salmonella группа C infantis 155 | 15-18 | |
Salmonella группа D enteriditis 25 | 15-18 | |
Shigella flexneri II 1230 | 22-25 | |
Shigella sonnei 2290 | 18-20 | |
Грибы | ||
Trichophyton rubrum | 15-17 | |
Microsporum canis | 12-14 |
Из данных табл.5 и 6 следует, что штамм В. subtilis 1K обладает широким спектром антагонистической активности к патогенным бактериям и грибам, вызывающих заболевания растений и животных.
Пример 1.
Влияние штамма В. subtilis 1K на микробиоценоз кишечника изучалось на 10 белых опытных крысах, которых в течение 30 дней поили культурой штамма В. subtilis 1K в дозе 1×109 кл/мл. 10 контрольных животных получали адекватный объем физиологического раствора. Перед началом исследований и по окончанию опыта фекалии животных в виде разведений в соответствии с МУ (Методические указания по гигиенической оценке микробных средств защиты растений от насекомых и болезней на основе неспорообразующих микроорганизмов. №2620-82 от 22.09.82 г.) на селективные и дифференциально-диагностические среды для определения основных групп микроорганизмов, обитающих в кишечнике.
Данные по исследованию микробиоценоза кишечника представлены в табл.7.
Таблица 7 | ||||||||
Оценка влияния культуры штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) на состав кишечной микрофлоры крыс | ||||||||
Микрорганизмы | Фоновые данные | 1 месяц опыта | ||||||
опыт | контроль | Опыт | контроль | |||||
% случаев | Lg КОЕ/г | % случаев | Lg КОЕ/г | % случаев | Lg КОЕ/г | % случаев | Lg КОЕ/г | |
Бифидобактерии | 100 | 6,0±0,3 | 100 | 6,2±0,1 | 100 | 7,0±0,1 | 100 | 6,0±0,1 |
Лактобациллы | 100 | 5,0±0,2 | 100 | 5,8±0,2 | 100 | 6,0±0,2 | 100 | 5,0±0,2 |
Клостридии | 40 | 5,0±0,2 | 40 | 5,0±0,2 | 80 | 3,0±0,2 | 100 | 3,0±0,2 |
Кишечная палочка | 100 | 6,2±0,5 | 100 | 6,3±0,5 | 80 | 6,1±0,3 | 100 | 6,3±0,5 |
Условно-патогенные энтеробактерии | 70 | 3,8±0,5 | 75 | 3,6±0,2 | 70 | 2,4±0,5 | 75 | 3,5±0,5 |
Стафилококки: | ||||||||
Эпидермальный | 100 | 3,8±0,2 | 75 | 3,4±0,3 | 100 | 2,8±0,2 | 100 | 3,0±0,1 |
золотистый | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Протей | 90 | 3,0±0,2 | 90 | 3,0±0,2 | 90 | 3,0±0,2 | 90 | 4,0±0,2 |
Энтерококки | 80 | 3,8±0,2 | 80 | 3,6±0,2 | 100 | 2,0±0,2 | 80 | 4,0±0,2 |
Дрожжеподобные грибы | 100 | 4,0±0,2 | 100 | 3,0±0,2 | 75 | 2,0±0,2 | 75 | 4,0±0,2 |
Из данных табл.7 следует, что применение культуры штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) у животных вызывает нормализацию кишечной микрофлоры - у крыс опытной группы увеличивается на порядок содержание бифидо- и лактобактерий, снижается количество условно-патогенной микрофлоры, в том числе стафилококков, энтерококков и дрожжеподобных грибов.
Таким образом, можно заключить, что штамм В. subtilis 1K проявляет пробиотические свойства и на его основе можно создать как препараты для защиты растений от фитопатогенов, так и препараты-пробиотики ветеринарного назначения, способны лечить широкий круг заболеваний и быть использованными в ветеринарной и сельскохозяйственной практике. Широкий спектр расщепления сахаров, антагонистическая активность в отношении фитопатогенных грибов и бактерий позволяет использовать штамм в составе консерванта для силоса.
Пример 2
Использование штамма В. subtilis 1K (ВКПМ В-11353) в качестве консерванта для силоса.
Для изучения способности культуры штамма В. subtilis 1K к силосованию были поставлены модельные опыты по силосованию измельченной кукурузы в банках в сравнении с известным консервантом для силоса - Биотроф 111.
Исходное сырье для силосования сырье получено в Чишминском районе Башкирии. Зеленая масса была измельчена, разложена тонким слоем на бумаге. По технологии применения Биотрофа 111 производили предварительное разведение консервантов в 600 раз (0,1 мл+60 мл воды). Из раствора брали 5 мл разведенного консерванта и вносим в 45 мл воды. В распылитель наливали изучаемый консервант и опрыскивали из распылителя в дозе 0,1 мл на 1 кг зеленой массы (по технологии).
Зеленую массу закладывали в трехлитровые банки. Каждый вариант закладки опыта с препаратом проводили в 3-х повторностях. Банки закрывали полиэтиленовыми крышками и помещали в темное место без прямого солнечного света.
Через 1 месяц определяли основные показатели качества силоса из заложенных вариантов согласно ГОСТ 23638-90 «Силос из зеленых растений».
Как следует из полученных результатов, применение суспензии штамма В. subtilis 1 К в качестве консерванта для силоса не уступает по эффективности Биотрофу 111 и даже несколько превосходит его по показателям качества при использовании суспензии штамма В. subtilis 1 К с концентрацией микробных клеток 1×108 кл/мл.
Пример 3
Использование штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в качестве средства для нормализации микрофлоры кишечника поросят.
Поскольку штамм В. subtilis 1 К проявляет пробиотические свойства (улучшает состояние микробиоценоза кишечника у крыс), проведены испытания бактериальной суспензии штамма В. subtilis 1 К на поросятах с желудочно-кишечными заболеваниями с целью изучения лечебной эффективности в условиях свиноводческого комплекса Рощинского совхоза Стерлитамакского района.
Поросята были разделены на опытные и контрольные группы. Животные опытных и контрольных групп в каждой серии опытов находились в одинаковых условиях кормления и содержания. За ними постоянно вели наблюдение, учитывали падеж, вынужденный убой и изменение массы тела.
Массу тела животных во всех сериях определяли взвешиванием в начале и конце опыта.
С целью изучения лечебной эффективности суспензии штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) проведены испытания на поросятах, больных инфекционными и не инфекционными желудочно-кишечными заболеваниями. Желудочно-кишечные заболевания поросят развиваются в первые часы жизни животного, сопровождаются тяжелыми токсическими явлениями, характеризуются высоким падежом. Больным поросятам проводилось традиционное лечение, включающее антибиотикотерапию, коррекцию водно-солевого обмена, симптоматические средства. Опытной группе дополнительно применяли суспензию штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в количестве 1 мл на 10 кг веса 2 раза в день до снятия клинических симптомов заболевания. Результаты представлены в табл.8.
Как следует из полученных данных, введение суспензии штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в терапию желудочно-кишечных заболеваний у поросят повышает эффективность лечения и повышает сохранность поросят на 11%.
Поэтому можно рекомендовать использование суспензии штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в качестве ветеринарного препарата-пробиотика.
Пример 4
Использование штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) против патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания растений.
Для изучения эффективности использования суспензии штамма В. subtilis 1 К в качестве биофунгицида и биобактерицида использовали обработку семян пшеницы, зараженных комплексом фитопатогенов.
100 г семян помещали в чашку Петри и приливали 1 мл суспензии штамма В. subtilis 1 К в физиологическом растворе. Обработанные опытные семена хорошо встряхивали в течение 3-х минут. К контрольным семенам приливали 1 мл физиологического раствора и также встряхивали.
Через 16 ч проводили выращивание семян рулонным методом на увлажненной фильтровальной бумаге (ГОСТ 12038-84 «Семена сельскохозяйственых культур», с. 4-6).
Через 7 дней оценивали зараженность семян фитопатогенами. Эффективность суспензии штамма В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в опытах с семенами составила:
1) против гельминтоспориоза
По биологической эффективности против гельминтоспориоза (при уровне распространенности в контроле 10%) биологическая эффективность штамма В. subtilis 1 К составила 93,3%;
2) против фузариоза
По биологической эффективности против фузариоза (при уровне распространенности в контроле 4%) биологическая эффективность составила 94,4%;
3) против альтернариоза
По биологической эффективности против альтернариоза (при уровне распространенности в контроле 25,3%) биологическая эффективность составила 100%;
4) против бактериозов
По биологической эффективности против бактериозов (при уровне распространенности в контроле 28%) биологическая эффективность составила 52,1%;
5) против смешанной инфекции
По биологической эффективности против смешанной инфекции (при уровне распространенности в контроле 69%) биологическая эффективность составила - 69,3%.
Исходя из полученных данных можно использовать штамм В. subtilis 1 К (ВКПМ В-11353) в качестве биофунгицида и биобактерицида для защиты растений от грибных и бактериальных болезней.
Claims (4)
1. Штамм бактерий Bacillus subtilis ВКПМ B-11353, обладающий способностью к расщеплению широкого спектра моно- и дисахаров и широким спектром антагонистического действия в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий и грибов.
2. Применение штамма бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-11353 в качестве бактериального консерванта для силоса.
3. Применение штамма бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-11353 в качестве средства для нормализации микрофлоры кишечника животных.
4. Применение штамма бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-11353 в качестве средства против бактерий и грибов, вызывающих заболевания растений.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013142897/10A RU2539762C1 (ru) | 2013-09-19 | 2013-09-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013142897/10A RU2539762C1 (ru) | 2013-09-19 | 2013-09-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2539762C1 true RU2539762C1 (ru) | 2015-01-27 |
Family
ID=53286637
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013142897/10A RU2539762C1 (ru) | 2013-09-19 | 2013-09-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2539762C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2665547C1 (ru) * | 2017-05-17 | 2018-08-30 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческое предприятие "БашИнком" | Бесклеточная культуральная жидкость на основе штамма Bacillus subtilis, консервант для силоса и полифункциональное средство для растений с фунгицидными, бактерицидными и ростстимулирующими свойствами |
RU2751792C1 (ru) * | 2020-05-12 | 2021-07-16 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческое предприятие "БашИнком" | Наполнитель для домашних животных (варианты) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2035185C1 (ru) * | 1992-01-31 | 1995-05-20 | Институт микробиологии и вирусологии АН Украины | Профилактический биопрепарат субалин |
RU2130316C1 (ru) * | 1997-01-23 | 1999-05-20 | Государственное предприятие НПО. "Иммунопрепарат" | Лечебно-профилактический биопрепарат "бактиспорин" |
RU2241346C2 (ru) * | 2002-11-04 | 2004-12-10 | Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" | Способ консервирования кормов с использованием бактериального препарата |
RU2271123C2 (ru) * | 2003-11-13 | 2006-03-10 | Всероссийский научно-исследовательский институт кормов им. В.Р. Вильямса | Способ силосования трав |
RU2005129543A (ru) * | 2005-09-23 | 2007-03-27 | Алексей Владимирович Проскурин (RU) | Биопрепарат для сельскохозяйственных животных и птиц |
RU2415604C2 (ru) * | 2009-02-19 | 2011-04-10 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства РАСХН | Способ приготовления силоса |
-
2013
- 2013-09-19 RU RU2013142897/10A patent/RU2539762C1/ru active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2035185C1 (ru) * | 1992-01-31 | 1995-05-20 | Институт микробиологии и вирусологии АН Украины | Профилактический биопрепарат субалин |
RU2130316C1 (ru) * | 1997-01-23 | 1999-05-20 | Государственное предприятие НПО. "Иммунопрепарат" | Лечебно-профилактический биопрепарат "бактиспорин" |
RU2241346C2 (ru) * | 2002-11-04 | 2004-12-10 | Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" | Способ консервирования кормов с использованием бактериального препарата |
RU2271123C2 (ru) * | 2003-11-13 | 2006-03-10 | Всероссийский научно-исследовательский институт кормов им. В.Р. Вильямса | Способ силосования трав |
RU2005129543A (ru) * | 2005-09-23 | 2007-03-27 | Алексей Владимирович Проскурин (RU) | Биопрепарат для сельскохозяйственных животных и птиц |
RU2415604C2 (ru) * | 2009-02-19 | 2011-04-10 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства РАСХН | Способ приготовления силоса |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
МАМАЕВ А.А., Эффективность консервирования трав культурой. Bacillus subtilis и использования полученного корма в рационах. крупного рогатого скота, автореф. дисс. на соискание ученой. степени кандидата сельскохозяйственных наук, М, 2005. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2665547C1 (ru) * | 2017-05-17 | 2018-08-30 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческое предприятие "БашИнком" | Бесклеточная культуральная жидкость на основе штамма Bacillus subtilis, консервант для силоса и полифункциональное средство для растений с фунгицидными, бактерицидными и ростстимулирующими свойствами |
RU2751792C1 (ru) * | 2020-05-12 | 2021-07-16 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческое предприятие "БашИнком" | Наполнитель для домашних животных (варианты) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20090257995A1 (en) | Harmful bacterium control agent containing bacillus thuringiensis | |
CN105087423A (zh) | 新型芽孢杆菌cjbv及含有其的抗菌组合物 | |
JP5502754B2 (ja) | 家畜のクロストリディウム属細菌による疾病の予防及び/又は治療用飼料、並びに抗クロストリディウム剤 | |
CN105994954B (zh) | 一种微囊化微生态制剂及其制备方法 | |
WO2007034627A1 (ja) | 動物用飼料添加剤 | |
KR101702499B1 (ko) | 신규한 유산균, 진균 및 세균을 포함하는 사료첨가용 조성물 | |
KR101819344B1 (ko) | 바실러스 사펜시스 균주 kacc 92124p 및 이를 포함하는 조성물 | |
CN101309696A (zh) | 含有苏云金芽孢杆菌的有害菌防除剂 | |
CN103289914A (zh) | 枯草芽孢杆菌a16的制备方法与应用 | |
RU2539762C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ К РАСЩЕПЛЕНИЮ САХАРОВ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И ГРИБОВ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ. | |
KR20180004533A (ko) | 슈도모나스 아조토포만스 균주 kacc 92125p 및 이를 포함하는 조성물 | |
RU2440413C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis (его варианты), обладающий бактерицидной и фунгицидной активностью, и препарат на основе этого штамма | |
JP2010136668A (ja) | 新規シュウドモナス属細菌 | |
CN206576056U (zh) | 玫瑰鸡自动喂养设备 | |
Bo et al. | Growth performance, gut and haemo-microbial study of finishing broilers fed African sweet basil (Ocimum gratissimum) leaf extract | |
RU2415604C2 (ru) | Способ приготовления силоса | |
RU2292156C1 (ru) | Способ выращивания бройлеров | |
KR101304073B1 (ko) | 꿀벌 병해충 방제용 조성물 | |
RU2665547C1 (ru) | Бесклеточная культуральная жидкость на основе штамма Bacillus subtilis, консервант для силоса и полифункциональное средство для растений с фунгицидными, бактерицидными и ростстимулирующими свойствами | |
RU2292132C2 (ru) | Способ биологической борьбы с плесневением сена | |
KR20150041285A (ko) | 제과, 제빵, 제면 부산물을 이용한 복합 미생물제 | |
RU2493723C1 (ru) | Биопрепарат с пробиотической активностью для оптимизации усвоения кормов, предназначенных для сельскохозяйственных животных и птицы | |
CN108041299B (zh) | 一种无抗仔猪配合饲料 | |
KR20170068694A (ko) | 생균제 기능을 지니는 신규 천연 소독제 | |
JP2007159563A (ja) | バチルス・チューリンゲンシスを含む飼料添加剤 |