RU2536235C1 - Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного - Google Patents
Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного Download PDFInfo
- Publication number
- RU2536235C1 RU2536235C1 RU2013140953/15A RU2013140953A RU2536235C1 RU 2536235 C1 RU2536235 C1 RU 2536235C1 RU 2013140953/15 A RU2013140953/15 A RU 2013140953/15A RU 2013140953 A RU2013140953 A RU 2013140953A RU 2536235 C1 RU2536235 C1 RU 2536235C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- newborn
- gestation
- cytomegalovirus infection
- peripheral blood
- methaemoglobin
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание метгемоглобина и оксигемоглобина в эритроцитах новорожденного. Для этого в периферической крови новорожденного при обострении у беременной в третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции определяют количество эритроцитов, предварительно окрашенных 0,1% раствором метиленового синего. При титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, повышении количества эритроцитов через 45 мин после окрашивания до 62,5±1,9%, увеличении метгемоглобина до 1,8±0,08%, снижении оксигемоглобина до 96,5±2,9% оценивают как нарушение восстановления метгемоглобина и снижение оксигенации гемоглобина, что приводит к формированию у новорожденного гемической анемии. Способ позволяет изучить характер оксигенации гемоглобина в эритроцитах периферической крови новорожденных, родившихся от матерей с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. 2 ил.
Description
1. Цель работы - показать отрицательное действие обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в эритроцитах новорожденного.
2. Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения увеличения при обострении цитомегаловирусной инфекции метгемоглобина в эритроцитах периферической крови новорожденного как фактор, приводящий к снижению оксигенации гемоглобина, что создает угрозу формирования у новорожденного гемической анемии.
3. Раскрытие изобретения
Поскольку в безъядерных эритроцитах утилизация глюкозы выполняется через пентозный цикл, в процессе которого одним из важных этапов является образование никотинамидадениннуклеотида (НАДФ) и переход его в восстановленную форму - НАДФ·Н [6], НАДФ·Н принимает участие в восстановлении метгемоглобина, в котором железо гема, окисленое до Fe3+++ , не способно переносить кислород. Вследствие подавления активности НАДФ·Н выключается из обменных процессов Fe2++ и снижается в крови содержание HbO2, а количество метгемоглобина увеличивается [1, 3]. В эритроцитах переносчиком водорода может быть метиленовый синий [5], который, выполнив свою функцию, обесцвечивается, переходя в бесцветную лейкоформу. При подавлении активности НАДФ·Н процесс переноса водорода резко снижается, поэтому эритроциты, окрашенные метиленовым синим, не будут обесцвечиваться, а количество метгемоглобина будет нарастать, препятствуя формированию оксигемоглобина.
В данной работе установлено, что обострение цитомегаловирусной инфекции подавляет формирование НАДФ·Н, так как задерживается обесцвечивание метиленового синего в эритроцитах, следовательно, нарушается перенос водорода и подавляется восстановление метгемоглобина, что и приводит к снижению процессов оксигенации гемоглобина с формированием в организме гемической анемии.
4. В доступной литературе аналогов по данному вопросу не отмечено.
5. Осуществление изобретения
5.1. Обследовано 25 беременных на сроке гестации 20-22 недели в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ЦМВИ) в стадии обострения (основная группа) и 15 беременных на тех же сроках гестации без патологии (контрольная группа), а также забиралась пуповинная кровь у 15 новорожденных от матерей, перенесших обострение ЦМВИ, и 15 новорожденных от матерей, не болевших ЦМВИ. У беременных симптоматически обострение ЦМВИ проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз обострения ЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности - более 65%, а также ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.
5.2. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск); выявление ДНК ЦМВ методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
5.3. Содержание метгемоглобина в эритроцитах периферической крови определяли спектрофотометрическим методом по Кушаковскому М.С. (1968) [2].
5.4. Активность метиленового синего в эритроцитах периферической крови определяли следующим образом: гепаринизированную кровь, взятую из пуповинной крови новорожденных в количестве 0,5 мл, помещали в 0,5 мл 0,1% раствора метиленового синего, приготовленного на фосфатном буфере с pH 7,4. Полученную взвесь эритроцитов в течение 5 мин содержали в термостате при температуре 37°C. Затем каплю взвеси помещали на предметное стекло и накрывали покровным стеклом, окатовав его парафином. Приготовленный препарат эритроцитов в 0,1% растворе метиленового синего помещали на микроскоп и изучали при увеличении 10×100 при комнатной температуре в течение 45 мин.
5.5. Содержание оксигемоглобина оценивали по прописи Эвелина и Мэллой [4].
6. В процессе исследования были получены следующие результаты
При обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации в периферической крови новорожденного отмечался высокий титр антител к цитомегаловирусу 1:1600. Количество окрашенных 0,1 раствором метиленового синего эритроцитов в начальном для исследования периоде насчитывалось 73,0±3,5% через 45 мин наблюдения количество окрашенных эритроцитов метиленовым синим на этом же препарате сохранялось до 62,5±1,9% (фигура 2). Параллельные исследования крови новорожденных от матерей, не болевших в период гестации показали (фигура 1), что на исходном отрезке времени на препарате было окрашено метиленовым синим 44,0±1,8% эритроцитов, а к 45 мин наблюдения их осталось только 8,8±0,6%. Количество метгемоглобина в крови новорожденных, родившихся от матерей, перенесших обострение цитомегаловирусной инфекции, составило 1,8±0,08%, у новорожденных, родившихся от здоровых беременных - 0,65±0,03%. Полученные показатели свидетельствуют, что при обострении цитомегаловирусной инфекции в период гестации подавляет активность НАДФ·Н, в результате чего задерживается обесцвечивание метиленового синего эритроцитов и увеличивается содержание метгемоглобина до 1,8±0,08%; в контроле - 0,65±0,03%. Это сказывается на оксигенации гемоглобина у новорожденных, родившихся от матерей с обострением цитомегаловирусной инфекции, в период гестации количество оксигемоглобина определялось в количестве 96,5±2,9% у новорожденных, родившихся от здоровых матерей - 99,0±1,8%, что создает угрозу развития у новорожденного при обострении ЦМВИ гемической анемии.
Пример 1.
Беременная А., 18 лет. Роды - в срок.
Обострение цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации с титром антител 1:1600 к цитомегаловирусу. Приводило к увеличению в крови новорожденного увеличение титра антител к цитомегаловирусу 1:1600. На мазках периферической крови новорожденного, окрашенных 0,1 раствором метиленового синего, через 45 мин наблюдения под микроскопом, сохранялось до 65,5% эритроцитов, окрашенных метиленовым синим. В периферической крови новорожденного количество метгемоглобина составило 1,8%, содержание оксигемоглобина снижалось до 96,5%. Это свидетельствовало, что плод при обострении во время беременности цитомегаловирусной инфекции с титром антител к цитомегаловирусу 1:1600 развивался в условиях гемической анемии, сохранившейся даже после рождения, что заставляет принимать для него коррегирующие лечебные мероприятия.
Пример 2.
Беременная Ш. 23 лет. Роды - в срок.
В течение гестации беременность протекала без осложнений. Признаков обострения цитомегаловирусной инфекции не отмечалось. В крови новорожденного признаков обострения цитомегаловирусной инфекции не отмечено. Проведенные исследования показали, что на окрашенном 0,1% раствором метиленового синего на мазке крови новорожденного первоначально было подсчитано 44,0% эритроцитов, окрашенных метиленовым синим. Через 45 мин наблюдения, под микроскопом окрашенных осталось только 8,8%. Следовательно, в крови было достаточно НАДФ·Н, чтобы выполнить восстановление метгемоглобина, что и подтверждается его низким содержанием - 0,65%. Оксигенация гемоглобина выполнялась в полном объеме, поскольку количество HbO2 насчитывалось 99,0%. Причин развития анемии не было.
Литература
1. Галоян А.А., Симонян М.А. и др. Влияние обогащенного пролином полипептида на восстановление метгемоглобина и образование супероксида под действием металлопротеинов-цитохрома b558111 и супрола in vitro // Нейрохимия. - 2007. - №1. - С.37-40.
2. Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина // Лен. отделение. - «Медицина». - 1968. - С.324.
3. Новицкий В.В., Сапрыкина Э.В. и др. Механизмы повреждения эритроцитов при токсическом действии метгемоглобинообразователей // Бюллетень Сибирской медицины. - 2006. - №1. - С.32-37.
4. Покровский А.А. Биохимические методы исследования // Справочник М.: «Медицина», 1969. - С.337.
5. Энгельгардт В.А., Саков Н.Е. О механизме пастеровского эффекта // «Биохимия». - 1943. - Т.8. - С.9-12.
6. Murphy J.R. Erythrocyte metabolism I The equilibration of giucose - C14 between serum and erythrocytes // J. Lab. Clin. Med. - 1960. - vol.55. - p.281-286.
На фигуре 1 изображена реакция окраски эритроцитов периферической крови новорожденного, родившегося от здоровой беременной. В периферической крови на исходный момент исследования насчитывалось 44,0±1,8% эритроцитов, окрашенных 0,1% раствором метиленовой сини. Через 45 мин наблюдения их число снизилось до 8,8±0,6%, поскольку путь для восстановления метгемоглобин - свободен, а в крови отмечается высокий уровень оксигемоглобина - 99,0±1.8%.
На фигуре 2 изображена реакция окраски эритроцитов периферической крови новорожденного, родившегося от матери, перенесшей в третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции с титром антител 1:1600. В силу ингибирования цитомегаловирусом процесса восстановления метгемоглобина число окрашенных эритроцитов остается высоким - 62,5±1,9%, исходное число - 73,0±3,5%, так как блокируется восстановление метгемоглобина - 1,8±0,08% (контроль - 0,65±0,03%) и снижается формирование оксигемоглобина до 96,5±2,9%, контроль - 99,0±1.8%.
Claims (1)
- Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции при ее обострении у беременных в третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигемоглобина в эритроцитах крови новорожденного, включающий определение антител к цитомегаловирусу и количественное содержание эритроцитов в периферической крови новорожденного, предварительно окрашенных 0,1% раствором метиленового синего, и при титре антител к цитомегаловиру 1:1600, повышении количества эритроцитов через 45 минут после окрашивания до 62,5±1,9%, увеличении метгемоглобина до 1,8±0,08%, снижении оксигемоглобина до 96,5±2,9% оценивают как нарушение восстановления метгемоглобина и снижение оксигенации гемоглобина, что приводит к формированию у новорожденного гемической анемии.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013140953/15A RU2536235C1 (ru) | 2013-09-05 | 2013-09-05 | Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013140953/15A RU2536235C1 (ru) | 2013-09-05 | 2013-09-05 | Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2536235C1 true RU2536235C1 (ru) | 2014-12-20 |
Family
ID=53286293
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013140953/15A RU2536235C1 (ru) | 2013-09-05 | 2013-09-05 | Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2536235C1 (ru) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2164417C2 (ru) * | 1998-11-11 | 2001-03-27 | Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии | Профилактика плацентарной недостаточности в условиях перинатального вирусно-бактериального инфицирования |
UA23634U (en) * | 2006-09-12 | 2007-06-11 | Halyna Bohdanivna Mateiko | Method for prognostication the complications of pregnancy and births in expectant mothers with herpetic and cytomegalovirus infections |
-
2013
- 2013-09-05 RU RU2013140953/15A patent/RU2536235C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2164417C2 (ru) * | 1998-11-11 | 2001-03-27 | Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии | Профилактика плацентарной недостаточности в условиях перинатального вирусно-бактериального инфицирования |
UA23634U (en) * | 2006-09-12 | 2007-06-11 | Halyna Bohdanivna Mateiko | Method for prognostication the complications of pregnancy and births in expectant mothers with herpetic and cytomegalovirus infections |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
НОВИЦКИЙ В.В. и др. "Механизмы повреждения эритроцитов при токсическом действии метгемоглобинобразователей"// Бюллетень Сибирской медицины, 206, N1, с.32-37 . MURPHY J.R. Erythrocyte metabolism. I. The equilibration of glucose-C14 between serum and erythrocytes// J Lab Clin Med. 1960 Feb;55:281-5 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Nejad et al. | Comparison of oxidative stress markers and serum cortisol between normal labor and selective cesarean section born neonates | |
Clark et al. | Chronic granulomatous disease: studies of a family with impaired neutrophil chemotactic, metabolic and bactericidal function | |
CN113041261B (zh) | 一种利用外泌体改善弱精症精子功能的方法 | |
RU2536235C1 (ru) | Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции у беременной на третьем триместре гестации на содержание метгемоглобина и оксигенацию гемоглобина в периферической крови новорожденного | |
Christensen et al. | Perinatal Hemolytic Disorders and Identification Using End Tidal Breath Carbon Monoxide | |
US8623659B2 (en) | Sickle confirm modified hemoglobin solubility test | |
Singh et al. | Study of serological parameters in thalassemic patients of GMC Jammu | |
RU2546531C1 (ru) | Способ определения пиридоксальфосфата в эритроцитах периферической крови | |
RU2535055C1 (ru) | Способ оценки нарушения оксигенации гемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции | |
RU2540425C1 (ru) | Способ оценки нарушения оксигенации гемоглобина при снижении микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации и обострении цитомегаловирусной инфекции | |
RU2499260C1 (ru) | Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание метгемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных на третьем триместре гестации | |
RU2612010C1 (ru) | Способ определения угрозы формирования гемической анемии у беременных на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность SH-групп в эритроцитах и приводящей к снижению оксигенации гемоглобина | |
Mohamed et al. | Can We Use Umbilical Cord Hydrogen Peroxide as an Early Predictor for Neonatal Hyperbilirubinemia? | |
RU2817215C2 (ru) | Способ диагностики аллоиммунной тромбоцитопении новорожденных | |
RU2602449C1 (ru) | Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на оксигенацию гемоглобина при повышении в эритроцитах содержания ионов магния | |
Shenta et al. | Evaluation of calcium, magnesium, vitamin D and some biomarker parameters levels in children with favsim disease in the Basrah Governorate-Iraq | |
Weiss et al. | Erythrocyte 2, 3-diphosphoglycerate in normal and hypertensive gravid women and their newborn infants | |
RU2577300C1 (ru) | Способ оценки подавления активности аденилатциклазы в мембранах эритроцитов при обострении цитомегаловирусной инфекции у беременных на третьем триместре гестации | |
Goossen | Pediatric and geriatric hematology and hemostasis | |
Kalaeva et al. | The Influence of Steroid Hormones of the Functional System Mother-Fetus on the Leukocyte Differential Count and on the Development of Predisposition to Bronchopneumonia in Calves During Neonatal Period | |
RU2542426C1 (ru) | Способ оценки действия цитомегаловирусной инфекции на подавление дыхательной активности эритроцитов беременных путем определения активности глутатионредуктазы в эритроцитах периферической крови и при нарастании в них перекисей жирный кислот | |
RU2537119C1 (ru) | Способ оценки нарушения микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации, при обострении цитомегаловирусной инфекции | |
RU2570742C2 (ru) | Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на формирование восстановленного глутатиона в эритроцитах беременной | |
RU2617534C1 (ru) | Способ оценки снижения оксигемоглобина при индуцирующем действии цитомегаловирусной инфекции на структуру гемоглобина эритроцитов, приводящем к формированию телец Гейнца | |
RU2538685C1 (ru) | Способ экспресс-определения холестерина в иммунных комплексах |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150906 |