RU2535983C1 - PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR - Google Patents

PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR Download PDF

Info

Publication number
RU2535983C1
RU2535983C1 RU2013155925/10A RU2013155925A RU2535983C1 RU 2535983 C1 RU2535983 C1 RU 2535983C1 RU 2013155925/10 A RU2013155925/10 A RU 2013155925/10A RU 2013155925 A RU2013155925 A RU 2013155925A RU 2535983 C1 RU2535983 C1 RU 2535983C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
inhibitor
strain
producer
acidovorax citrulli
trichoderma harzianum
Prior art date
Application number
RU2013155925/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ирина Павловна Смирнова
Елена Владимировна Каримова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН)
Priority to RU2013155925/10A priority Critical patent/RU2535983C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2535983C1 publication Critical patent/RU2535983C1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: invention relates to biotechnology and can be used in agriculture. The Trichoderma harzianum Rifai strain is deposited in the Russian National Collection of Industrial Microorganisms under registration number VKPM F-180. The strain is capable of producing L-lysine-alpha-oxidase and can be used particularly as an inhibitor of cucurbit bacterial spot caused by Acidovorax citrulli bacteria.
EFFECT: invention reduces loss of cucurbit crop.

Description

Изобретение относится к биохимии и может найти применение в агробиотехнологии, микробиологии и растениеводстве.The invention relates to biochemistry and may find application in agrobiotechnology, microbiology and crop production.

Известен ингибитор вируса герпеса простого I-ого типа (Ингибитор вируса герпеса простого I-го типа. Патент РФ №2022012, 1994.), ингибитор вируса клещевого энцефалита (Ингибитор вируса клещевого энцефалита. Патент на изобретение №2473689, 2013), вируса некротической пятнистости бальзамина (Продуцент ингибитора вируса некротической пятнистости бальзамина. Патент на изобретение №24813923, 2013). В качестве ингибитора использовался метаболит штамма Trichoderma harzianum Rifai - экстракт культуральной жидкости продуцента фермента L-лизин-а-оксидаза.A known type I herpes simplex virus inhibitor (Type I herpes simplex virus inhibitor. RF patent No. 2022012, 1994.), tick-borne encephalitis virus inhibitor (Tick-borne encephalitis virus inhibitor. Patent for the invention No. 2473689, 2013), necrotic spotting virus balsamine (Producer of an inhibitor of the virus of necrotic spotting of balsamine. Patent for the invention No. 24813923, 2013). As an inhibitor, the metabolite of the strain Trichoderma harzianum Rifai, an extract of the culture fluid of the producer of the enzyme L-lysine-a oxidase, was used.

В последние годы фитосанитарные службы разных стран обеспокоены появлением и быстрым распространением опасного заболевания - бактериальной пятнистости тыквенных культур, вызываемого бактерией Acidovorax citrulli. Карантинный статус данного возбудителя для Российской Федерации не определен, но в связи с опасностью его завоза с семенным материалом, большими потерями урожая в странах распространения и широким кругом поражаемых культур, возделываемых на территории нашей страны, он представляет определенный интерес. Данный возбудитель приводит к значительным потерям урожая. При раннем заражении растений потери могут составлять до 100% (Feng, J.J., Li, J.Q., Walcott, R.R., Zhang, G.M., Luo, L.X., Kang, L., Zheng, Y. and Schaad, N.W. (2013). Seed Sci. & Technol., 41, 1-15).In recent years, phytosanitary services in different countries are concerned about the emergence and rapid spread of a dangerous disease - the bacterial spotting of pumpkin crops caused by the bacterium Acidovorax citrulli. The quarantine status of this pathogen for the Russian Federation is not defined, but due to the danger of its importation with seed, large crop losses in countries of distribution and a wide range of affected crops cultivated in our country, it is of certain interest. This pathogen leads to significant crop losses. With early infection of plants, losses can be up to 100% (Feng, JJ, Li, JQ, Walcott, RR, Zhang, GM, Luo, LX, Kang, L., Zheng, Y. and Schaad, NW (2013). Seed Sci . & Technol., 41, 1-15).

Наиболее чувствительными к возбудителю бактериальной пятнистости являются арбуз (Citrullus lanatus) и дыня (Cucumis melo). Бактериоз также поражает огурцы (Cucumis sativus), разные виды тыкв (Cucurbita pepo, С. moschata), патиссоны (Cucurbita pepo var. patisoniana), кабачки (Cucurbita pepo var. giromontina), бетель (Piper betle - семейство перечные).The most sensitive to the causative agent of bacterial spotting are watermelon (Citrullus lanatus) and melon (Cucumis melo). Bacteriosis also affects cucumbers (Cucumis sativus), different types of pumpkins (Cucurbita pepo, C. moschata), squash (Cucurbita pepo var. Patisoniana), squash (Cucurbita pepo var. Giromontina), betel nut (Piper betle - pepper family).

Искусственно могли быть заражены растения семейства пасленовые: перец (Capsicum spp.), томаты (Lycopersicon esculentum), баклажан (Solanum melongena) (EPPO (2011a). Acidovorax citrulli- Bacterial fruit blotch of cucurbits. EPPO Alert list).Plants of the nightshade family could be artificially infected: peppers (Capsicum spp.), Tomatoes (Lycopersicon esculentum), eggplant (Solanum melongena) (EPPO (2011a). Acidovorax citrulli- Bacterial fruit blotch of cucurbits. EPPO Alert list).

Возбудитель заболевания попадает в поле с зараженными семенами, из которых получают рассаду с характерными повреждениями на семядольных листьях. В случае скрытой зараженности растения могут оставаться незамеченными в поле. Влажная и теплая погода, орошение дождеванием, травмирование растений, несоблюдение фитосанитарных условий в поле или теплице способствуют развитию болезни и переносу возбудителя на соседние здоровые растения. Бактерии Acidovorax citrulli с листьев попадают на формирующиеся плоды, которые могут поражаться на ранней стадии развития. Плоды наиболее чувствительны к возбудителю в возрасте 2-3 недель, до образования воскового слоя. Через несколько дней повреждения на плодах становятся видимыми и на их поверхности появляются трещины. Пораженные плоды гниют в поле, в результате чего их зараженные семена, которые являются источником заболевания, попадают в почву (Каримова Е.В. Новое бактериальное заболевание тыквенных культур - Защита и Карантин растений, 2012 №6, С.35-36).The causative agent of the disease enters the field with infected seeds, from which seedlings are obtained with characteristic damage to the cotyledon leaves. In case of latent infection, plants may go unnoticed in the field. Wet and warm weather, sprinkling irrigation, plant injury, non-compliance with phytosanitary conditions in a field or greenhouse contribute to the development of the disease and the transfer of the pathogen to neighboring healthy plants. Bacteria Acidovorax citrulli from the leaves fall on the forming fruit, which can be affected at an early stage of development. Fruits are most sensitive to the pathogen at the age of 2-3 weeks, before the formation of the wax layer. After a few days, damage to the fruits becomes visible and cracks appear on their surface. Affected fruits rot in the field, as a result of which their infected seeds, which are the source of the disease, fall into the soil (Karimova E.V. New bacterial disease of pumpkin crops - Plant Protection and Quarantine, 2012 No. 6, P.35-36).

Техническим результатом изобретения является снижение потерь тыквенных культур, вызванных возбудителем бактериальной пятнистости тыквенных культур Acidovorax citrulli.The technical result of the invention is to reduce the loss of pumpkin crops caused by the causative agent of bacterial spotting of pumpkin crops Acidovorax citrulli.

Технический результат достигается тем, что в качестве продуцента ингибитора возбудителя бактериальной пятнистости тыквенных культур Acidovorax citrulli используют штамм Trichoderma harzianum Rifai. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под № F-180 (Москва, Дорожный 1-й проезд, д.1 Институт генетики и селекции, 1987 г.).The technical result is achieved by the fact that the Trichoderma harzianum Rifai strain is used as a producer of the inhibitor of the causative agent of bacterial spotting of pumpkin cultures Acidovorax citrulli. The strain was deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms under the number F-180 (Moscow, Dorozhny 1-y passage, 1 Institute of Genetics and Selection, 1987).

Морфолого-биохимическая характеристика штаммMorphological and biochemical characteristics of the strain

Штамм Trichoderma harzianum Rifai на среде сусло-агар образует колонии быстрорастущие. Мицелий гриба бесцветный, септированный, распростертый. На 4-е - 5-е сутки роста появляются дерновинки с конидиеносцами, подушковидные, сначала белые, со временем желто- или темно-зеленого цвета. Фиалиды бутыльчатые /9-12µ/, расположены мутовками по 3 и более. На каждой фиалиде образуются конидии, склеенные в головку. Конидии гриба округлые, гладкие, мелкие /3-5µ/, в проходящем свете бледно-зеленые, а в массе - темные.The strain Trichoderma harzianum Rifai on wort-agar medium forms fast-growing colonies. The fungal mycelium is colorless, septate, prostrate. On the 4th - 5th day of growth, tufts with conidiophores appear, pillow-shaped, initially white, with a yellow or dark green color over time. Bottle phialides / 9-12µ /, located in whorls of 3 or more. Conidia glued into the head form on each phialid. The conidia of the fungus are round, smooth, small / 3-5µ /, in transmitted light pale green, and in the mass - dark.

На агаризованной среде Чапека колонии штамма-продуцента быстрорастущие, но слабо спороносящие. Штамм хорошо растет на среде Чапека, однако лучший рост наблюдается на среде сусло-агаре. Агар и желатину не разжижает, молоко не пептонизирует. Аэробный гриб. Температурный оптимум +28 - +29°С. На картофельно-декстрозном агаре наблюдается снижение интенсивности роста, образование воздушного мицелия и спороношения. Оптимальные условия роста гриба при pH 4-6, однако, может расти и при pH от 1,5 до 9.On Chapek’s agar medium, the colonies of the producer strain are rapidly growing, but slightly spore-bearing. The strain grows well in the environment of Czapek, but the best growth is observed in the environment of wort-agar. Agar does not dilute gelatin, milk does not peptone. Aerobic mushroom. Temperature optimum +28 - + 29 ° С. On potato-dextrose agar, a decrease in growth intensity, the formation of aerial mycelium and sporulation are observed. Optimum conditions for the growth of the fungus at pH 4-6, however, can grow at pH from 1.5 to 9.

Trichoderma harzianum Rifai в одинаковой степени усваивает как аммонийные, так и азотнокислые соли. Лучшим источником азота из органических соединений является пептон. Хорошо растет на средах с аспарагином и с глутаминовой кислотой. Лучшими источниками углерода являются ксилоза, глюкоза, сахароза, лактоза, галактоза, маннит, крахмал. На средах с этими сахарами наблюдается интенсивный рост. Слабо усваиваются спирты метиловый, этиловый, дульцит. Хорошо усваивает в качестве источника углерода пшеничные отруби. Инокулят гриба, выросший на среде с пшеничными отрубями, дает положительный результат при использовании его при ферментации на средах разного состава.Trichoderma harzianum Rifai equally assimilates both ammonium and nitric acid salts. The best source of nitrogen from organic compounds is peptone. It grows well on media with asparagine and with glutamic acid. The best sources of carbon are xylose, glucose, sucrose, lactose, galactose, mannitol, and starch. On media with these sugars, intense growth is observed. Alcohols are poorly absorbed methyl, ethyl, dulcite. It well assimilates wheat bran as a carbon source. The inoculum of the fungus grown on a medium with wheat bran gives a positive result when used in fermentation on media of different compositions.

Штамм Trichoderma harzianum Rifai обладает L-лизин-α-оксидазной активностью. Активность L-лизин-α-оксидазы в культуральной жидкости Trichoderma harzianum Rifai рассчитывали по приросту H2O2, количество которой определяли спектрофотометрическим ортодиазидиновым микрометодом. Сущность метода заключается во взаимодействии всей образующейся в реакции Н2О2 с O-дианизидингидрохлоридом. Инкубационная смесь содержала 20 мкг пероксидазы, 250 мкг O-дианизидингидрохлорида и 0,1-0,5 мг белка в 1 мл конечного объема. После 20 минут инкубирования в термостате при температуре +37°С пробы охлаждали до +4°С. Оптическую плотность окрашенных растворов опытной и контрольной (без субстрата) проб измеряли на спектрофотометре СФ-16 при 540 нм против второй контрольной пробы (без пероксидазы).The strain Trichoderma harzianum Rifai has L-lysine-α-oxidase activity. The activity of L-lysine-α-oxidase in the Trichoderma harzianum Rifai culture fluid was calculated by the growth of H 2 O 2 , the amount of which was determined by a spectrophotometric orthodiazidine micromethod. The essence of the method is the interaction of all formed in the reaction of H 2 About 2 with O-dianisidine hydrochloride. The incubation mixture contained 20 μg of peroxidase, 250 μg of O-dianisidine hydrochloride and 0.1-0.5 mg of protein in 1 ml of the final volume. After 20 minutes of incubation in a thermostat at a temperature of + 37 ° С, the samples were cooled to + 4 ° С. The optical density of the colored solutions of the experimental and control (without substrate) samples was measured on an SF-16 spectrophotometer at 540 nm against the second control sample (without peroxidase).

Удельную активность фермента выражали числом единиц активности на 1 мл культуральной жидкости.The specific activity of the enzyme was expressed by the number of units of activity per 1 ml of culture fluid.

Условия культивирования штамма Trichoderma harzianum RifaiThe cultivation conditions of the strain Trichoderma harzianum Rifai

Ферментация штамма производилась на оборудовании Опытной технологической установки ИБФМ РАН им. Г.К. Скрябина (г. Пущине).Fermentation of the strain was carried out on the equipment of the Experimental technological installation of IBPM RAS named after G.K. Scriabin (Pushchino town).

Использовали ферментер типа БИОР-01 производства ОКБ ТБМ, г. Кириши, объемом 100 л с коэффициентом заполнения 0,6. Ферментер оснащен магнитной мешалкой, фильтрами тонкой очистки воздуха, датчиками температуры и pH.Used a BIOR-01 type fermenter manufactured by OKB TBM, Kirishi, with a volume of 100 l with a fill factor of 0.6. The fermenter is equipped with a magnetic stirrer, fine filters, air, temperature and pH sensors.

Питательную среду готовили непосредственно в аппарате по технологии, разработанной ранее (Смирнова И.П., и др. Технология выделения и очистки L-лизин-α-оксидазы, Биотехнология, 2010, №6, с.52-60). Для этого в аппарат заливали 60 л водопроводной воды, вносили 1% пшеничных отрубей, стимулятор-0,1%, 1,3% сульфата аммония, значение pH 5.8-6,0 устанавливали 10%-ным раствором HCl. Пшеничные отруби и стимулятор предварительно замачивали в 10 литрах воды в течение 4-х часов, стерилизовали в автоклаве 1 час при t° +125°C. Затем подготовленный ферментер засевали посевным материалом из колб. Посевная доза не менее 5%. Культивирование проводили при температуре +26°С, расход воздуха на протяжении всей ферментации 30 л в минуту, скорость вращения мешалки 200 оборотов в минуту. Величину pH в процессе роста корректировали до 6,5. Продолжительность выращивания составила 94-98 часов, конечные значения pH от 5,3 до 7,5.The nutrient medium was prepared directly in the apparatus according to the technology developed previously (Smirnova I.P., et al. Technology for the isolation and purification of L-lysine-α-oxidase, Biotechnology, 2010, No. 6, p. 52-60). For this, 60 l of tap water was poured into the apparatus, 1% of wheat bran, a stimulant of 0.1%, 1.3% of ammonium sulfate were added, a pH value of 5.8-6.0 was set with a 10% HCl solution. Wheat bran and the stimulator were pre-soaked in 10 liters of water for 4 hours, sterilized in an autoclave for 1 hour at t ° + 125 ° C. Then the prepared fermenter was seeded with seed from flasks. Sowing dose of at least 5%. The cultivation was carried out at a temperature of + 26 ° C, air flow throughout the fermentation 30 l per minute, the speed of rotation of the mixer 200 rpm. The pH during the growth process was adjusted to 6.5. The duration of cultivation was 94-98 hours, the final pH values from 5.3 to 7.5.

По окончании ферментации культуральную жидкость направляли на участок предварительной очистки, где мицелий гриба отделяли фильтрованием под вакуумом на нутч-фильтре. Вес полученной биомассы составил 3,5 кг. Полученный нативный раствор подвергали дополнительному сепарированию на сепараторе типа ОСБ при 9000 об/мин. в течение часа при температуре +2 - +4°С. Затем нативный раствор в объеме 55 л, полученный после отделения биомассы, концентрировали до 1,5 л (концентрат).At the end of the fermentation, the culture fluid was sent to the pre-treatment section, where the mycelium of the fungus was separated by filtration under vacuum on a suction filter. The weight of the obtained biomass was 3.5 kg. The resulting native solution was subjected to additional separation on an OSB separator at 9000 rpm. within an hour at a temperature of +2 - + 4 ° С. Then the native solution in a volume of 55 l, obtained after separation of the biomass, was concentrated to 1.5 l (concentrate).

Активность полученного экстракта из культуры Trichoderma harzianum Rifai составляла 5,4 Ед/мл.The activity of the obtained extract from the Trichoderma harzianum Rifai culture was 5.4 U / ml.

Возбудитель бактериальной пятнистости тыквенных культур - бактерия Acidovorax citrulli, была получена в виде чистой культуры из бактериологической коллекции Института сельскохозяйственных исследований (Ivia), Испания, Валенсия. После чего для идентификации полученной культуры проводили секвенирование участка гена 16S рРНК длиной 500 п.н., амплифицируемого универсальными праймерами 8UA_519B.The causative agent of bacterial spotting of pumpkin crops - the bacterium Acidovorax citrulli, was obtained as a pure culture from the bacteriological collection of the Institute for Agricultural Research (Ivia), Spain, Valencia. After that, to identify the obtained culture, sequencing of a 16S rRNA gene section with a length of 500 bp was carried out amplified by universal primers 8UA_519B.

Для постановки опыта по определению ингибирующего действия экстракта штамма Trichoderma harzianum Rifai на бактерию Acidovorax citrulli использовали метод диффузии в агар. В качестве питательной среды использовали среду Кинг В.To test the determination of the inhibitory effect of the extract of the strain Trichoderma harzianum Rifai on the bacterium Acidovorax citrulli, the agar diffusion method was used. King B medium was used as the growth medium.

Среда Кинга В (по данным King et al., 1954)King B Wednesday (according to King et al., 1954)

ПептонPeptone 20 г20 g ГлицеринGlycerol 10 мл10 ml K2HPO4K2HPO4 1,5 г1.5 g MgSO4×7H2OMgSO4 × 7H2O 1,5 г1.5 g АгарAgar 15-20 г15-20 g Дистиллированная водаDistilled water До 1 лUp to 1 liter pH 7,0-7,2pH 7.0-7.2

Стерилизовали автоклавированием при температуре +121°С в течение 15 минут.Autoclaved at + 121 ° C for 15 minutes.

В чашки Петри наливали питательную агаровую среду в количестве 20-30 мл и давали ей застыть. Посев культур на чашки Петри проводили путем нанесения одной петли чистой культуры бактерий на питательную среду и равномерного ее распределения растиранием по поверхности агаровой среды с помощью стеклянного шпателя Дригальского.Nutrient agar medium in the amount of 20-30 ml was poured into Petri dishes and allowed to solidify. Sowing cultures on Petri dishes was carried out by applying one loop of a pure bacterial culture on a nutrient medium and distributing it evenly by rubbing it on the surface of the agar medium using a Drigalski glass spatula.

Для размещения экстракта штамма Trichoderma harzianum Rifai готовили лунки, для чего в застывшей среде с поверхностно нанесенной культурой стерильным сверлом диаметром 10 мм просверливали необходимое количество лунок глубиной около 5 мм, после чего вносили экстракт в лунки на 1 мм ниже уровня среды (по 200 мкл в лунку). В лунки контрольных чашек вносили стерильную дистиллированную воду.To place the extract of the Trichoderma harzianum Rifai strain, wells were prepared, for which a required number of holes with a depth of about 5 mm was drilled in a frozen medium with a surface-coated culture with a sterile drill with a diameter of 10 mm, after which the extract was added to the wells 1 mm below the medium level (200 μl per well). Sterile distilled water was added to the wells of the control plates.

Приготовленные чашки Петри с образцами и контрольные чашки Петри помещали в термостат (температура +37°С). Образцы выдерживали в термостате 1-3 суток, отмечая интенсивность роста бактерий на чашках, замеряя зоны угнетения их роста и делая записи в журнале.The prepared Petri dishes with samples and control Petri dishes were placed in a thermostat (temperature + 37 ° C). The samples were kept in the thermostat for 1-3 days, noting the growth rate of bacteria on the plates, measuring the zones of inhibition of their growth and making entries in the journal.

Ингибирующее действие экстракта штамма Trichoderma harzianum Rifai против Acidovorax citrulli определялась по степени подавления роста чистой культуры возбудителя на питательной среде.The inhibitory effect of the extract of the strain Trichoderma harzianum Rifai against Acidovorax citrulli was determined by the degree of inhibition of the growth of a pure culture of the pathogen on a nutrient medium.

Измерение зоны подавления роста культуры проводили через 24 часа после постановки опыта и далее наблюдали изменения в течение 3-х суток.The measurement of the zone of inhibition of growth of culture was carried out 24 hours after the setting of the experiment and then changes were observed for 3 days.

Ингибирующее действие экстракта штамма Trichoderma harzianum Rifai определяли по степени подавления роста чистой культуры возбудителя на питательной среде. Опыт проводили в трех повторениях: в опытные чашки в лунки вносили экстракт штамма Trichoderma harzianum Rifai. В контрольную чашку в лунки вносили стерильную дистиллированную воду. Через 24 часа после поверхностного посева культуры Acidovorax citrulli на питательную среду и внесения экстракта в лунки в опытных чашках наблюдали зоны подавления роста культуры возбудителя вокруг лунок. Радиус зон подавления составлял 5-8 мм. На остальной поверхности чашки наблюдался рост культуры возбудителя без признаков угнетения. На контрольной чашке, на всей поверхности среды наблюдался активный рост культуры возбудителя заболевания, без признаков подавления. Это указывает на то, что экстракт штамма Trichoderma harzianum Rifai оказывает ингибирующее действие на возбудителя бактериальной пятнистости тыквенных культур Acidovorax citrulli.The inhibitory effect of the extract of the strain Trichoderma harzianum Rifai was determined by the degree of inhibition of the growth of a pure culture of the pathogen on a nutrient medium. The experiment was carried out in three repetitions: an extract of the Trichoderma harzianum Rifai strain was added to the test plates in the wells. Sterile distilled water was added to the wells in the control plate. 24 hours after the surface plating of the Acidovorax citrulli culture on a nutrient medium and the extract was added to the wells in the test dishes, zones of growth inhibition of the pathogen culture around the wells were observed. The radius of the suppression zones was 5-8 mm. On the rest of the cup surface, an increase in the culture of the pathogen was observed without signs of inhibition. On the control plate, on the entire surface of the medium, an active growth of the pathogen culture was observed, with no signs of suppression. This indicates that the extract of the strain Trichoderma harzianum Rifai has an inhibitory effect on the causative agent of bacterial spotting of pumpkin cultures Acidovorax citrulli.

Claims (1)

Применение штамма Trichoderma harzianum Rifai, депонированного во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под № F-180, в качестве продуцента ингибитора возбудителя бактериальной пятнистости тыквенных культур (Acidovorax citrulli). The use of the strain Trichoderma harzianum Rifai, deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms under the number F-180, as a producer of an inhibitor of the pathogen of bacterial spotting of pumpkin cultures (Acidovorax citrulli).
RU2013155925/10A 2013-12-17 2013-12-17 PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR RU2535983C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013155925/10A RU2535983C1 (en) 2013-12-17 2013-12-17 PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013155925/10A RU2535983C1 (en) 2013-12-17 2013-12-17 PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2535983C1 true RU2535983C1 (en) 2014-12-20

Family

ID=53286201

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013155925/10A RU2535983C1 (en) 2013-12-17 2013-12-17 PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2535983C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2611040C1 (en) * 2016-02-18 2017-02-20 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Set of primers for detecting agent acidovorax citrulli and method of detecting agent acidovorax citrulli

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2010527C1 (en) * 1991-07-11 1994-04-15 Государственный аграрный университет Молдовы Strain of micromycet trichoderma harzianum rifai for producing preparation against causative agent of grapevine gray rot
RU2233171C2 (en) * 2002-04-03 2004-07-27 Смирнова Ирина Павловна POLYFUNCTIONAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION BASED ON L-LYSINE-α-OXIDASE FROM FUNGUS OF GENUS TRICHODERMA AND METHOD FOR PREPARING THIS ENZYME
RU2464307C1 (en) * 2011-05-31 2012-10-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Gluconacetobacter hansenii gh-1/2008 bacterial strain - bacterial cellulose producer
RU2481392C2 (en) * 2010-12-09 2013-05-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Producer of impatiens necrotic spot virus inhibitor
RU2493247C1 (en) * 2012-03-15 2013-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Inhibitor of stimulant of bacterial burn of fruit crops (erwinia amylovora)

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2010527C1 (en) * 1991-07-11 1994-04-15 Государственный аграрный университет Молдовы Strain of micromycet trichoderma harzianum rifai for producing preparation against causative agent of grapevine gray rot
RU2233171C2 (en) * 2002-04-03 2004-07-27 Смирнова Ирина Павловна POLYFUNCTIONAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION BASED ON L-LYSINE-α-OXIDASE FROM FUNGUS OF GENUS TRICHODERMA AND METHOD FOR PREPARING THIS ENZYME
RU2481392C2 (en) * 2010-12-09 2013-05-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Producer of impatiens necrotic spot virus inhibitor
RU2464307C1 (en) * 2011-05-31 2012-10-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Gluconacetobacter hansenii gh-1/2008 bacterial strain - bacterial cellulose producer
RU2493247C1 (en) * 2012-03-15 2013-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Inhibitor of stimulant of bacterial burn of fruit crops (erwinia amylovora)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2611040C1 (en) * 2016-02-18 2017-02-20 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Set of primers for detecting agent acidovorax citrulli and method of detecting agent acidovorax citrulli

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100535912B1 (en) The novel bacillus amyloliquefaciens ktgb0202 and control method of plant pathogenic fungi using that
CN111500501A (en) Streptomyces misonii strain and application thereof in preventing and treating wheat root rot and stem basal rot
CN109112069B (en) Biocontrol endophytic fungus and application thereof
RU2529958C1 (en) Strain of nitrogen-fixing bacteria pseudomonas sp for obtaining biological product against diseases of wheat caused by phytopathogenic fungi, and increase in productivity
RU2535983C1 (en) PRODUCER OF CUCURBIT BACTERIAL SPOT AGENT (Acidovorax citrulli) INHIBITOR
NL2033035B1 (en) Stachybotrys sp. hn17496 strain, microbial biocontrol agent, and preparation method and use thereof
KR20150056209A (en) New microorganism Bacillus amyloliquefaciens CC110 and Microbial agent biopesticide containing the same
KR20210055179A (en) Burkholderia spp. strain having antifungal activity against red pepper anthracnose and composition for controlling red pepper anthracnose
EP0374499B1 (en) Weed control compositions containing Drechslera spp. or a metabolite thereof and weed control methods using Drechslera spp. or a metabolite thereof
CN114032182B (en) Fungus with functions of antagonizing pathogenic bacteria of garlic root rot and promoting growth
RU2493247C1 (en) Inhibitor of stimulant of bacterial burn of fruit crops (erwinia amylovora)
KR101027082B1 (en) Streptomyces misonensis CJS-70 with antibacterial activity to plant pathogens and microbial agent for controlling plant pathogens using the same
CN111876363B (en) Bacillus firmus and preparation method and application thereof
CN108624514B (en) M5-2 helminthosporium Bipolaris peregianensis and application thereof
RU2675503C1 (en) Method of obtaining biological preparation for stimulation of growth and protection of plants against diseases
SU1717052A1 (en) Fungous strain trichoderma lignorum for production of trichodermin
KR20090105726A (en) Bacillus megaterium isolate 22-5 controlling bacterial spot and anthracnose of red-pepper
KR101771841B1 (en) Serratia glossinae GS2 strain having activities plant growth promotion and insecticide, and uses thereof
KR20020057463A (en) Differential Screening Methods for Antagonistic Microorganism against Plant Pathogenic fungi and Antagonists selected therefrom
RU2481392C2 (en) Producer of impatiens necrotic spot virus inhibitor
CN116769607B (en) Application of endophytic fungus A21-1-1 in preventing and controlling rice blast
CN117701476B (en) Bacillus bailii with antagonism to pathogenic fungi and application thereof
CN108676765A (en) One plant of nicotianae and its application in preventing wax gourd root-knot nematode
RU2475528C2 (en) STRAIN Trichoderma harzianum Rifai - PRODUCER OF INHIBITOR OF Tobacco ringspot virus
KR20050116297A (en) Pseudomonas sp. rrj228 helping the growth of crops and the microbial agent containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20181218