RU2517211C2 - Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate - Google Patents

Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate Download PDF

Info

Publication number
RU2517211C2
RU2517211C2 RU2012128047/15A RU2012128047A RU2517211C2 RU 2517211 C2 RU2517211 C2 RU 2517211C2 RU 2012128047/15 A RU2012128047/15 A RU 2012128047/15A RU 2012128047 A RU2012128047 A RU 2012128047A RU 2517211 C2 RU2517211 C2 RU 2517211C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ammonium
composition
glycyrrhizic acid
dipotassium
salts
Prior art date
Application number
RU2012128047/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2012128047A (en
Inventor
Леонид Леонидович Клопотенко
Original Assignee
Леонид Леонидович Клопотенко
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Леонид Леонидович Клопотенко filed Critical Леонид Леонидович Клопотенко
Priority to RU2012128047/15A priority Critical patent/RU2517211C2/en
Publication of RU2012128047A publication Critical patent/RU2012128047A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2517211C2 publication Critical patent/RU2517211C2/en

Links

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.
SUBSTANCE: claimed invention relates to medicine, namely to pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease or glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate, which can be applied in medicine for treatment and prevention of viral infections, caused by DNA-containing viruses, such as herpes, shingles, human papilloma, adenoviruses, etc. In an invention claimed is a pharmaceutical composition, which includes as active ingredients - 0.001-0.5 wt % of deoxyribonuclease (DNA-ase) and 0.001-0.5 wt % of glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate, as carriers: β-cyclodextrins or lecithins 0.001-5.0 wt %, a polymer carrier 0.05-1.00 wt % and acceptable excipients.
EFFECT: obtaining the pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid.
3 cl, 7 ex, 2 tbl

Description

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической композиции, содержащей фермент дезоксирибонуклеазу и глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия, которая может быть использована в медицине для лечения и профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК-содержащими вирусами, такими как герпес, опоясывающий лишай, папиллома человека, аденовирусы и другие.The present invention relates to medicine, namely to a pharmaceutical composition containing a deoxyribonuclease enzyme and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate, which can be used in medicine for the treatment and prevention of viral infections caused by DNA-containing viruses, such as herpes, herpes zoster, human papilloma, adenoviruses and others.

Известны лекарственные средства для местного применения, используемое для лечения и профилактики герпесвирусных инфекций, содержащие противовирусные компоненты, не являющиеся ферментами, например крем Зови-ракс™ (ацикловир) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/zovirax~27174.htm); капсулы и лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения Фосфоглив™ (фосфолипиды и тринатриевая соль глицирризиновой кислоты) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/phosphogliv.htm); спрей Эпиген-интим™ (глицир-ризиновая кислота) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/epigen-intim.htm); мази: алпизарин (http://alpizarin.ru/), хелепин (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/helepin-d_20830.htm), флакозид (http://ru.wikipedia.org/wiki/%D4%EB%E0%EA%EE%E7%E8%E4), содержащие экстракты растений.There are known topical medicines used for the treatment and prevention of herpesvirus infections containing antiviral components that are not enzymes, for example, Zovirax ™ cream (acyclovir) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/zovirax~27174.htm ); capsules and lyophilisate for the preparation of a solution for intravenous administration of Phosphogliv ™ (phospholipids and trisodium salt of glycyrrhizic acid) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/phosphogliv.htm); Epigen-intim ™ spray (glycyrrhizic acid) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/epigen-intim.htm); ointments: alpizarin (http://alpizarin.ru/), helepin (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/helepin-d_20830.htm), flacoside (http://ru.wikipedia.org/wiki/% D4% EB% E0% EA% EE% E7% E8% E4) containing plant extracts.

Известен препарат Интерферон альфа-2а, идентичный человеческому лейкоцитарному интерферону альфа-2 и обладающий иммуномодулирующим, противовирусным и противоопухолевым действием. (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А.Клюева 2001 г.)Known drug Interferon alpha-2a, identical to human leukocyte interferon alpha-2 and having immunomodulating, antiviral and antitumor effects. (Reference "Medicines" edited by M.A. Klyuyev 2001)

Известно косметическое средство бальзам для губ Ла-Кри™, содержащее экстракт солодки и бисаболол, используемое для смягчения кожи губ. (http://vertex.spb.ru/catalog/68/34/la-kri_balyzam_dlya_gub.html)La-Cree ™ Lip Balm is a cosmetic product containing licorice extract and bisabolol, used to soften the skin of the lips. (http://vertex.spb.ru/catalog/68/34/la-kri_balyzam_dlya_gub.html)

Известен бальзам для губ Uriage Barierderm, содержащий масло каритэ, масло огуречника, неомыляемые фракции масла авокадо, стеарилглицирретинат, аскорбилпальмитат, токоферол, используемое для восстановления поврежденной кожи губ. (http://www.krason.ru/catalog-bariederm/1740-3620-balzam-dlya-gub.aspx?perf=1)Known lip balm Uriage Barierderm, containing shea butter, borage oil, unsaponifiable fractions of avocado oil, stearyl glycyrrhetinate, ascorbyl palmitate, tocopherol, used to repair damaged lip skin. (http://www.krason.ru/catalog-bariederm/1740-3620-balzam-dlya-gub.aspx?perf=1)

Известен препарат Глицирам (глициррризинат аммония), используемый в виде таблеток для лечения бронхиальной астмы и гипофункции надпочечников. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/glycyram-tablets-0.05_27575.htm)Known drug Glycyram (ammonium glycyrrrhizinate), used in the form of tablets for the treatment of bronchial asthma and adrenal hypofunction. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/glycyram-tablets-0.05_27575.htm)

Известен комбинированный препарат Гексализ, содержащий в качестве противомикробных компонентов - биклотимол и лизоцим, эноксолон, выделенный из глицирризиновой кислоты в качестве противовоспалительного компонента. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/hexalyse~22640.htm)Known combination drug Hexalysis, containing as antimicrobial components - biclotimol and lysozyme, enoxolone isolated from glycyrrhizic acid as an anti-inflammatory component. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/hexalyse~22640.htm)

Известны косметические средства для местного применения, используемые для профилактики герпеса, содержащие противовирусные компоненты, не являющиеся ферментами, например, экстракты лекарственных растений и германийорганические соединения (Помада профилактическая противогерпетическая "Антигерпес" (Р16 9158 915854 71.100.70) 292472. ТУ 9124-001-00358210-96), глицирризиновая кислота мазь «Герпинат» мазь; бан. 20 мл; №77.01.12.915.П.02970.02.00 от НИИ атеросклероза РАЕН (Россия), ИНАТ-ФАРМА (Россия) (http://www.biomedservice.ru/publish/pub16.htm)There are known topical cosmetics used for the prevention of herpes containing antiviral components that are not enzymes, for example, extracts of medicinal plants and germanium-organic compounds (Antiherpetic preventative lipstick (P16 9158 915854 71.100.70) 292472. TU 9124-001- 00358210-96), glycyrrhizic acid ointment "Herpinat" ointment; ban. 20 ml; No. 77.01.12.915.P.02970.02.00 from the Research Institute of Atherosclerosis of the Russian Academy of Natural Sciences (Russia), INAT-PHARMA (Russia) (http://www.biomedservice.ru/publish/pub16.htm)

Известна косметическая фермент-содержащая композиция, где фермент выбран из группы протеиназ, включающей в себя трипсин, химотрипсин, бромелаин, папаин и фицин, а также из лизоцима, эластазы, α-липазы и α-амилазы, которая применяется для лечения акне, ухода за кожей и очистки кожи (DE 4305460). Описанная композиция не содержит ферментов нуклеаз, обладающих прямой противовирусной активностью, и, следовательно, не может быть использована для профилактики вирусных инфекций.A cosmetic enzyme-containing composition is known where the enzyme is selected from the group of proteinases, including trypsin, chymotrypsin, bromelain, papain and ficin, as well as lysozyme, elastase, α-lipase and α-amylase, which is used to treat acne, care for skin and skin cleansing (DE 4305460). The described composition does not contain nuclease enzymes with direct antiviral activity, and therefore cannot be used to prevent viral infections.

Известен фармацевтический препарат «Дезоксирибонуклеаза», выпускаемый в виде лиофилизированного порошка в герметично укупоренных флаконах и ампулах по 0,005; 0,01; 0,025 и 0,05 г. Этот препарат назначают при герпетических кератитах, аденовирусных конъюктивитах, для уменьшения вязкости и улучшения эвакуации мокроты и гноя при бронхоэктатической болезни и используют местно в виде 0,2% раствора на изотоническом растворе натрия хлорида (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А.Клюева 2001 г.).Known pharmaceutical preparation "Deoxyribonuclease", produced in the form of lyophilized powder in hermetically sealed vials and ampoules of 0.005; 0.01; 0.025 and 0.05 g. This drug is prescribed for herpetic keratitis, adenoviral conjunctivitis, to reduce viscosity and improve the evacuation of sputum and pus in bronchiectasis and is used topically in the form of a 0.2% solution on isotonic sodium chloride solution (Reference "Medicines" edited by M.A. Klyuyev 2001).

Известен фармацевтический препарат «Рибонуклеаза», выпускаемый в виде лиофилизированного порошка в герметично укупоренных флаконах по 0,01 г. Этот препарат назначают при заболеваниях дыхательных путей с трудно отделяемой мокротой, пародонтозе, гингивите, гнойных ранах, трофических язвах, клещевом энцефалите, тромбофлебите, при местном применении присыпают раневую поверхность в количестве 0,025-0,05 г. (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А.Клюева 2001 г.).Known pharmaceutical drug "Ribonuclease", produced in the form of lyophilized powder in hermetically sealed vials of 0.01 g. This drug is prescribed for diseases of the respiratory tract with difficult to separate sputum, periodontal disease, gingivitis, purulent wounds, trophic ulcers, tick-borne encephalitis, thrombophlebitis. topical application is sprinkled on the wound surface in the amount of 0.025-0.05 g (Reference "Medicines" edited by M.A. Klyuyev 2001).

Из RU 2410123 С2 известна композиция, содержащая 0,2-0,4 мас.% дезокси-рибонуклеазы (ДНК-азы) и приемлемые носители и эксципиенты.From RU 2410123 C2, a composition is known containing 0.2-0.4 wt.% Deoxy ribonuclease (DNase) and acceptable carriers and excipients.

Отличие заявленного изобретения от RU 2410123 С2 в том, что композиция содержит 0,001-0,5 мас.% глицирризиновой кислоты или ее солей: глицирризината аммония или дикалия или тринатрия и оказывает комплексное противовирусное действие, заключающееся в прерывании репликации вируса на ранних стадиях, стимуляции выхода вириона из капсида, гидролиз вирусной ДНК и индукция образования интерферона, а также подавление вторичной микрофлоры и воспаления в области поражения и ускорение эпителизации.The difference between the claimed invention and RU 2410123 C2 is that the composition contains 0.001-0.5 wt.% Glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate and has a complex antiviral effect, which consists in interrupting the replication of the virus in the early stages, stimulating output virion from the capsid, hydrolysis of viral DNA and the induction of interferon formation, as well as the suppression of secondary microflora and inflammation in the affected area and the acceleration of epithelization.

Из US 20090220440 А1 (lST FARMACOTERAPICO IT SPA), 03.09.2009, известна композиция, содержащая в качестве противовирусного ингредиента соль глицирризиновой кислоты, в частности, глицирризинат аммония 0,25-1 мас.% и приемлемые носители и эксципиенты.From US 20090220440 A1 (lST FARMACOTERAPICO IT SPA), 09/03/2009, there is known a composition containing as an antiviral ingredient a glycyrrhizic acid salt, in particular ammonium glycyrrhizinate 0.25-1 wt.% And acceptable carriers and excipients.

Отличие заявленного изобретения от US 20090220440 А1 (1ST FARMACOTERAPICO IT SPA), 03.09.2009 в том, что композиция содержит 0,001-0,5 мас.% дезоксирибонуклеазы (ДНК-азы) и оказывает комплексное противовирусное действие, заключающееся в прерывании репликации вируса на ранних стадиях, стимуляции выхода вириона из капсида, гидролиз вирусной ДНК и индукция образования интерферона, а также подавление вторичной микрофлоры и воспаления в области поражения и ускорение эпителизации.The difference between the claimed invention and US 20090220440 A1 (1ST FARMACOTERAPICO IT SPA), 09/03/2009 in that the composition contains 0.001-0.5 wt.% Deoxyribonuclease (DNase) and has a complex antiviral effect, which consists in interrupting the replication of the virus in the early stages, stimulation of the release of the virion from the capsid, hydrolysis of viral DNA and the induction of interferon formation, as well as the suppression of secondary microflora and inflammation in the affected area and the acceleration of epithelization.

Фармацевтические композиции, содержащие фермент ДНК-азу и глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия, используемые при профилактике вирусных инфекций не описаны.Pharmaceutical compositions containing the enzyme DNase and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium glycyrrhizinate or dipotassium or trisodium, used in the prevention of viral infections are not described.

Таким образом, задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить фармацевтическую композицию, содержащую фермент ДНК-азу и глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия, которая может быть использована для профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК-содержащими вирусами, такими как герпес, опоясывающий лишай, папиллома человека, аденовирусы и другие.Thus, it is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition comprising a DNAase enzyme and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate, which can be used to prevent viral infections caused by DNA-containing viruses, such like herpes, herpes zoster, human papilloma, adenoviruses and others.

Согласно настоящему изобретению предложена композиция, содержащая в качестве активного ингредиента 0,001-0,5 мас.% дезоксирибонуклеазы (ДНК-азы) 0,001-0,5 мас.% и глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия 0,001-0,5 мас.% и приемлемые носители и эксципиенты.The present invention provides a composition containing, as an active ingredient, 0.001-0.5 wt.% Deoxyribonuclease (DNase) 0.001-0.5 wt.% And glycyrrhizic acid or its salts: ammonium glycyrrhizinate or dipotassium or trisodium 0.001-0, 5 wt.% And acceptable carriers and excipients.

В качестве предпочтительного воплощения заявленного изобретения предложена композиция, указанная выше, дополнительно содержащая противомикробный или противовирусный ингредиент.As a preferred embodiment of the claimed invention, there is provided a composition as defined above, further comprising an antimicrobial or antiviral ingredient.

Наиболее предпочтительной является композиция, содержащая ДНК-азу и или глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия качестве активного ингредиента и приемлемые носители и эксципиенты, при следующем соотношении компонентов, мас.%:Most preferred is a composition containing DNAase and either glycyrrhizic acid or its salts: ammonium glycirrhizinate or dipotassium or trisodium as the active ingredient and acceptable carriers and excipients, in the following ratio, wt.%:

ДНК-азаDNAase 0,001-0,50.001-0.5

глицирризиновая кислотаglycyrrhizic acid

или ее соли: глицирризинат аммонияor its salts: ammonium glycyrrhizinate

или дикалия или тринатрияor dipotassium or trisodium 0,001-0,50.001-0.5 сангвиритрин или интерферон или лизоцимsanguirytrin or interferon or lysozyme 0,001-5,00.001-5.0 β-циклодекстрин или гидрогенизированный лецитинβ-cyclodextrin or hydrogenated lecithin 0,001-5,00.001-5.0 консервантpreservative 0,5-1,00.5-1.0 полимерный носительpolymer carrier 0,05-1,00.05-1.0 регулятор рНpH regulator 0,05-1,00.05-1.0 вода деминерализованнаяdemineralized water 1,00-5,001.00-5.00 гидрофильной основыhydrophilic base 86,00-98,39786.00-98.397

Активными ингредиентами заявленной фармацевтической композиции являются фермент: ДНК-аза и глицирризиновая кислота или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия. ДНК-аза обладает способностью задерживать развитие вирусов герпеса, аденовирусов и других ДНК-содержащих вирусов, не повреждая при этом ДНК клеток макроорганизма (Машковский М.Д. Лекарственные средства, Том 2, Москва, Новая Волна, 2000, стр.111-112). Глицирризиновая кислота и ее соли используются как противовирусное средство для наружного и местного применения. Глицирризиновая кислота активна в отношении ДНК- и РНК-содержащих вирусов, включая различные штаммы вирусов Herpes simplex, Varicella zoster, вирусов папилломы человека, цитомегаловирусов. Противовирусное действие связано, по-видимому, с индукцией образования интерферона. Прерывает репликацию вирусов на ранних стадиях, вызывает выход вириона из капсида, тем самым не допуская его проникновение в клетки. Это обусловлено селективным дозозависимым ингибированием фосфорилирующей киназы Р. Взаимодействует со структурами вируса, изменяя различные фазы вирусного цикла, что сопровождается необратимой инактивацией вирусных частиц (находящихся в свободном состоянии вне клеток), блокированием внедрения активных вирусных частиц через клеточную мембрану внутрь клетки, а также нарушением способности вирусов к синтезу новых структурных компонентов. Ингибирует вирусы в концентрациях, нетоксичных для нормально функционирующих клеток. Штаммы вирусов, резистентные к ацикловиру и йодоури-дину, высокочувствительны к глицирризиновой кислоте. Оказывает также противовоспалительное, анальгезирующее и улучшающее регенерацию тканей действие, как при ранних проявлениях вирусной инфекции, так и при язвенных формах. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/act_1347.htm).The active ingredients of the claimed pharmaceutical composition are the enzyme: DNAase and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium glycyrrhizinate or dipotassium or trisodium. DNAase has the ability to inhibit the development of herpes viruses, adenoviruses and other DNA-containing viruses without damaging the DNA of macroorganism cells (Mashkovsky M.D. Medicines, Volume 2, Moscow, New Wave, 2000, pp. 111-112) . Glycyrrhizic acid and its salts are used as an antiviral agent for external and local use. Glycyrrhizic acid is active against DNA and RNA-containing viruses, including various strains of Herpes simplex, Varicella zoster viruses, human papilloma viruses, cytomegaloviruses. The antiviral effect is apparently associated with the induction of the formation of interferon. Interrupts the replication of viruses in the early stages, causes the virion to exit the capsid, thereby preventing its penetration into the cells. This is due to selective dose-dependent inhibition of phosphorylating kinase P. It interacts with the structures of the virus, changing various phases of the viral cycle, which is accompanied by irreversible inactivation of viral particles (which are in a free state outside the cells), blocking the introduction of active viral particles through the cell membrane into the cell, as well as impaired ability viruses to the synthesis of new structural components. Inhibits viruses in concentrations that are non-toxic to normally functioning cells. Virus strains resistant to acyclovir and iodouridine are highly sensitive to glycyrrhizic acid. It also has anti-inflammatory, analgesic and tissue regeneration-enhancing effects both in the early manifestations of viral infection and in ulcer forms. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/act_1347.htm).

Интерферон. Представляет собой высокоочищенный стерильный белок, содержащий 165 аминокислот. Идентичен человеческому лейкоцитарному интерферону альфа-2а. Обладает противовирусной, противоопухолевой и иммуномодулирующей активностью. Возможно, что механизм противовирусного и противоопухолевого действия связан с изменением синтеза РНК, ДНК и белков. Ингибирует репликацию вирусов в инфицированных вирусами клетках. Повышает фагоцитарную активность макрофагов и усиливает специфическое цитотоксическое действие лимфоцитов на клетки-мишени, (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/act_549.htm)Interferon It is a highly purified sterile protein containing 165 amino acids. Identical to human leukocyte interferon alpha-2a. It has antiviral, antitumor and immunomodulating activity. It is possible that the mechanism of antiviral and antitumor activity is associated with a change in the synthesis of RNA, DNA and proteins. Inhibits virus replication in virus-infected cells. Increases the phagocytic activity of macrophages and enhances the specific cytotoxic effect of lymphocytes on target cells, (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/act_549.htm)

Сангвиритрин® обладает широким спектром противомикробной активности, действуя на грамположительные и грамотрицательные бактерии (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенные грибы рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобные грибы рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторые патогенные простейшие (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis). В основе механизма противомикробного действия сангвиритрина лежит подавление бактериальной нуклеазы, нарушение процессов проницаемости клеточных стенок, перегородок деления, строения нуклеоида. http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/sanguiritrin~21839. htm)Sanguiritrin® has a wide spectrum of antimicrobial activity, acting on gram-positive and gram-negative bacteria (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacterpppppppp. , Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), Pathogenic fungi of the genus Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, yeast-like fungi of the genus Candida (including polyresistant strains, Actince, and and some pathogenic protozoa (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis). The basis of the mechanism of the antimicrobial action of sanguirythrin is the suppression of bacterial nuclease, the violation of the processes of permeability of cell walls, division walls, nucleoid structure. http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/sanguiritrin~21839. htm)

Лизоцим (от греч. lysis - растворение, распад и zyme - закваска), мурамидаза, фермент класса гидролаз; разрушает стенку бактериальной клетки, в результате чего происходит ее растворение (лизис). В организме играет роль неспецифического антибактериального барьера, особенно в местах контакта с внешней средой (слезы, слюна, слизистая оболочка носа). Лизоцим открыт в 1922 А. Флемингом в слизи из полости носа и затем обнаружен во многих тканях и жидкостях человеческого организма (хрящи, селезенка, лейкоциты, слезы), в растениях (капуста, репа, редька, хрен), в некоторых бактериях и фагах и, в наибольшем количестве, в яичном белке. Лизоцимы из разных источников различаются по строению, но близки по действию. Лизоцим яичного белка - первый фермент, для которого методом рентгеноструктурного анализа установлена трехмерная структура и выявлена связь между строением и механизмом действия (1965); эти исследования - существенный вклад в представления о механизмах ферментативного катализа в целом.Lysozyme (from the Greek. Lysis - dissolution, decay and zyme - sourdough), muramidase, an enzyme of the hydrolase class; destroys the wall of the bacterial cell, resulting in its dissolution (lysis). In the body, it plays the role of a non-specific antibacterial barrier, especially in places of contact with the external environment (tears, saliva, nasal mucosa). Lysozyme was discovered in 1922 by A. Fleming in mucus from the nasal cavity and then found in many tissues and fluids of the human body (cartilage, spleen, white blood cells, tears), in plants (cabbage, turnip, radish, horseradish), in some bacteria and phages and , in the greatest quantity, in egg white. Lysozymes from different sources vary in structure, but are close in action. Egg protein lysozyme is the first enzyme for which a three-dimensional structure has been established by X-ray diffraction analysis and a relationship has been revealed between the structure and mechanism of action (1965); these studies are a significant contribution to the understanding of the mechanisms of enzymatic catalysis in general.

Лизоцим - белок с молекулярной массой около 14000; единственная полипептидная цепь состоит из 129 аминокислотных остатков и свернута в компактную глобулу (30'30'45 Å). Трехмерная конформация полипептидной цепи поддерживается 4 дисульфидными (-S-S-) связями. (В лизоциме молока человека их 3, яичного белка гуся - 2, в лизоциме фага Т4 их нет; чем больше дисульфидных групп, тем лизоцим более устойчив, но менее активен.) Глобула лизоцима состоит из двух частей, разделенных щелью; в одной части большинство аминокислот (лейцин, изолейцин, триптофан и др.) содержит гидрофобные группы, в др. преобладают аминокислоты (лизин, аргинин, аспарагиновая к-та и др.) с полярными группами. Полярность окружения влияет на ионизацию двух карбоксильных групп (-СООН), расположенных на поверхности щели молекулы с разных ее сторон. Лизоцим действует на один из основных компонентов бактериальной стенки - сложный полисахарид, состоящий из двух типов аминосахаров. Полисахарид сорбируется на молекуле лизоцима в щели на границе гидрофобной и гидрофильной ее частей таким образом, что с ферментом связывается 6 колец аминосахаров, а одна из соединяющих их гликозидных связей (между 4 и 5 кольцами) оказывается между карбоксилами. Благодаря взаимодействиям между карбоксилами лизоцима и атомами, образующими гликозидную связь, а также искажению валентных углов субстрата, происходит активация и разрыв связи. Это ведет к разрушению оболочки бактериальной клетки.Lysozyme - a protein with a molecular weight of about 14,000; the only polypeptide chain consists of 129 amino acid residues and is folded into a compact globule (30'30'45 Å). The three-dimensional conformation of the polypeptide chain is supported by 4 disulfide (-SS-) bonds. (There are 3 of them in human milk lysozyme, 2 goose egg protein, 2 in goat T 4 lysozyme; the more disulfide groups, the more stable but less active.) The lysozyme globule consists of two parts separated by a gap; in one part, most amino acids (leucine, isoleucine, tryptophan, etc.) contain hydrophobic groups, in others amino acids (lysine, arginine, aspartic acid, etc.) with polar groups predominate. The polarity of the environment affects the ionization of two carboxyl groups (-COOH) located on the surface of the gap of the molecule from different sides. Lysozyme acts on one of the main components of the bacterial wall - a complex polysaccharide consisting of two types of amino sugars. A polysaccharide is adsorbed on a lysozyme molecule in a gap on the border of its hydrophobic and hydrophilic parts in such a way that 6 amino sugar rings bind to the enzyme, and one of the glycosidic bonds connecting them (between 4 and 5 rings) is between the carboxyls. Due to the interactions between the carboxyls of lysozyme and the atoms forming the glycosidic bond, as well as the distortion of the bond angles of the substrate, the bond is activated and broken. This leads to destruction of the bacterial cell membrane.

(Филлипс Д., Трехмерная структура молекулы фермента, в сборнике: Молекулы и клетки, пер. с англ., в. 3, М., 1968; Химия белка, М., 1969; Бернхард С., Структура и функция ферментов, пер. с англ., М., 1971)(Phillips D., Three-dimensional structure of the enzyme molecule, in the collection: Molecules and cells, trans. From English, century 3, M., 1968; Protein chemistry, M., 1969; Bernhard S., Structure and function of enzymes, trans. . from English., M., 1971)

Таким образом, осуществляется комплексное противовирусное действие: прерывание репликации вируса на ранних стадиях, стимуляция выхода вириона из капсида, гидролиз вирусной ДНК и индукция образования интерферона, а также подавление вторичной микрофлоры и воспаления в области поражения и ускорение эпителизации.Thus, a complex antiviral effect is carried out: interruption of virus replication in the early stages, stimulation of the release of the virion from the capsid, hydrolysis of viral DNA and induction of interferon formation, as well as suppression of secondary microflora and inflammation in the affected area and acceleration of epithelization.

Для приготовления композиции используют лекарственный ферментный препарат «Дезоксирибонуклеаза». Препарат получен из поджелудочной железы крупного рогатого скота путем экстракции из измельченного сырья с последующей очисткой и лиофильной сушкой. Лиофильно высушенный порошок «Дезоксирибонуклеаза» используется при герпетических кератитах и кератоувеитах, остром катаральном воспалении верхних дыхательных путей аденовирусной природы и пневмонии.To prepare the composition, the enzyme preparation “Deoxyribonuclease” is used. The preparation was obtained from the pancreas of cattle by extraction from crushed raw materials, followed by purification and freeze drying. Lyophilized dried powder “Deoxyribonuclease” is used for herpetic keratitis and keratouveitis, acute catarrh of the upper respiratory tract of an adenovirus nature and pneumonia.

ДНК-азу в форме указанного препарата не применяют для лечения и профилактики вирусных инфекций вследствие его затрудненного всасывания через неповрежденную кожу и низкого уровня потребительских свойств, а также отсутствия стабильности при содержании влаги свыше 3% и в растворе, с потерей активности фермента в течение суток.DNA-ase in the form of this preparation is not used for the treatment and prevention of viral infections due to its difficult absorption through intact skin and low level of consumer properties, as well as the lack of stability when the moisture content is more than 3% and in solution, with the loss of enzyme activity during the day.

Неожиданно обнаружено, ДНК-аза и гидрогенизированный лецитин или бета-циклодекстрин могут быть включены в состав стабильной композиции с сохранением активности указанного фермента в течение длительного времени, несмотря на то, что такая композиция содержит значительное количество воды (до 5%).Surprisingly, DNAase and hydrogenated lecithin or beta-cyclodextrin can be included in a stable composition while maintaining the activity of the enzyme for a long time, despite the fact that such a composition contains a significant amount of water (up to 5%).

Композицию по настоящему изобретению обычно изготавливают общепринятыми способами, используя твердые или жидкие приемлемые носители или эксципиенты, выбранные из эмульгаторов, диспергирующих агентов, консервантов, ароматизаторов, регуляторов рН, полимерных носителей и других эксципиентов, которые целесообразны для приготовления композиций для местного применения. Композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена в форме помады, раствора для инъекций, глазных капель, суппозиториев, геля, крема, пасты, мази и тому подобного.The composition of the present invention is usually made by conventional methods using solid or liquid acceptable carriers or excipients selected from emulsifiers, dispersants, preservatives, flavorings, pH adjusters, polymer carriers and other excipients that are suitable for the preparation of compositions for topical use. The composition of the present invention can be prepared in the form of lipstick, injection, eye drops, suppositories, gel, cream, paste, ointment and the like.

Дополнительными преимуществами указанной композиции являются повышенная стабильность, потенцированное комплексное противовирусное действие, удобство применения, а также легкость дозирования.Additional advantages of this composition are increased stability, potentiated complex antiviral effect, ease of use, as well as ease of dosing.

Заявленная композиция обладает стабильностью в отношении активности ферментов, входящих в ее состав, при длительном хранении, которая достигается путем иммобилизации ферментов на носителях, содержащихся в указанной композиции. В качестве указанных носителей могут быть использованы любые лецитины, циклодекстрины и полимеры, способные связываться с ферментами с образованием комплексов фермент-носитель. Примерами таких полимерных носителей являются камеди, поливинилпирролидон, каррагинаны, натрия альгинат, полиэтиленгликолевый эфир хитозана, натрий карбоксиметилцеллюлоза, полиакрилат.The claimed composition has stability with respect to the activity of the enzymes included in its composition during long-term storage, which is achieved by immobilization of enzymes on carriers contained in the specified composition. As these carriers, any lecithins, cyclodextrins and polymers capable of binding to enzymes to form enzyme-carrier complexes can be used. Examples of such polymeric carriers are gums, polyvinylpyrrolidone, carrageenans, sodium alginate, chitosan polyethylene glycol ether, sodium carboxymethyl cellulose, polyacrylate.

Активность заявленной композиции обусловлена активностью входящего в ее состав фермента и глицирризиновой кислотой или ее солями: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия. Обнаружено, что композиция для местного применения, содержащая ДНК-азу 0,001-0,5 мас.%, обладает стабильностью в отношении активности фермента при ее длительном хранении, в то время как активность этого фермента, приготовленных в виде раствора, быстро падает. Глицирризиновая кислота или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия являются устойчивыми соединениями и стабилизации не требуют. Следовательно, заявленная композиция может быть использована для эффективной профилактики ДНК-содержащих вирусов, таких как вирус герпеса, опоясывающего лишая, папилломы человека, аденовирусов и других.The activity of the claimed composition is due to the activity of the enzyme included in its composition and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium glycyrrhizinate or dipotassium or trisodium. It was found that the composition for topical application, containing DNA ase 0.001-0.5 wt.%, Has stability with respect to the activity of the enzyme during its long-term storage, while the activity of this enzyme, prepared in the form of a solution, rapidly decreases. Glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate are stable compounds and do not require stabilization. Therefore, the claimed composition can be used for the effective prevention of DNA-containing viruses, such as herpes virus, herpes zoster, human papillomas, adenoviruses and others.

Настоящее изобретение иллюстрируется следующими примерами.The present invention is illustrated by the following examples.

ПРИМЕР 1EXAMPLE 1

Композиция в виде геля на основе ДНК-азы и глицирризината аммония имеет следующий состав:The composition in the form of a gel based on DNAase and ammonium glycyrrhizinate has the following composition:

ДНК-азаDNAase 0,50.5 Глицирризинат аммонияAmmonium Glycyrrhizinate 0,50.5 β-циклодекстринβ-cyclodextrin 5,05,0 эмульгаторemulsifier 0,50.5 консервантpreservative 1,01,0 лизоцимlysozyme 5,05,0 полимерный носительpolymer carrier 1,01,0 регулятор рНpH regulator 1,01,0 вода деминерализованнаяdemineralized water 85,5085.50

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют ДНК-азу, β-циклодекстрин, глицирризинат аммония, лизоцим, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, регулятор рН. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.The specified composition is prepared according to the following method. In demineralized water, DNase, β-cyclodextrin, ammonium glycyrrhizinate, lysozyme are dissolved, an emulsifier, a preservative, a polymeric carrier, and a pH regulator are added. The resulting gel is stirred, vacuum and homogenized.

ПРИМЕР 2EXAMPLE 2

Композиция в виде глазных капель на основе ДНК-азы и глицирризината дикалия имеет следующий состав.The composition in the form of eye drops based on DNAase and dipotassium glycyrrhizinate has the following composition.

ДНК-азаDNAase 0,0010.001 Глицирризинат дикалияDipotassium glycyrrhizinate 0,0010.001 Гидрогенизированный лецитинHydrogenated lecithin 0,0010.001 эмульгаторemulsifier 0,50.5 консервантpreservative 1,01,0 интерферонinterferon 0,0010.001 полимерный носительpolymer carrier 1,01,0 регулятор рНpH regulator 1,01,0 вода деминерализованнаяdemineralized water 96,49696,496

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют ДНК-азу, глицирризинат дикалия, интерферон, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, гидрогенизированный лецитин, регулятор рН. Полученный раствор фильтруют и стерилизуют.The specified composition is prepared according to the following method. In demineralized water, DNase, dipotassium glycyrrhizinate, interferon are dissolved, an emulsifier, a preservative, a polymeric carrier, hydrogenated lecithin, and a pH regulator are added. The resulting solution is filtered and sterilized.

ПРИМЕР 3EXAMPLE 3

Композиция в виде суппозиториев основе ДНК-азы и глицирризината тринатрия имеет следующий состав:The composition in the form of suppositories based on DNase and trisodium glycyrrhizinate has the following composition:

ДНК-азаDNAase 0,50.5 Глицирризинат тринатрияTrisodium Glycyrrhizinate 0,50.5 β-циклодекстринβ-cyclodextrin 2,02.0 эмульгаторemulsifier 0,50.5 консервантpreservative 1,01,0 сангвиритринsanguirythrin 2,52,5 полимерный носительpolymer carrier 1,01,0 суппозиторная основаsuppository base 86,086.0 регулятор рНpH regulator 1,01,0 вода деминерализованнаяdemineralized water 5,05,0

Указанную композицию готовят по следующей методике. Расплавляют суппозиторную основу при температуре 40°С, в деминерализованной воде растворяют ДНК-азу, β-циклодекстрин, глицирризинат тринатрия, сангвиритрин, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, регулятор рН. Полученную массу перемешивают, гомогенизируют и выливают в форму и охлаждают.The specified composition is prepared according to the following method. The suppository base is melted at a temperature of 40 ° C, DNAase, β-cyclodextrin, trisodium glycyrrhizinate, sanguirytrin are dissolved in demineralized water, an emulsifier, preservative, a polymeric carrier, and a pH regulator are added. The resulting mass is stirred, homogenized and poured into a mold and cooled.

ПРИМЕР 4EXAMPLE 4

Композиция в виде раствора для инъекций на основе ДНК-азы и глицирризината аммония имеет следующий состав.The composition in the form of a solution for injection based on DNase and ammonium glycyrrhizinate has the following composition.

ДНК-азаDNAase 0,0010.001 Глицирризинат аммонияAmmonium Glycyrrhizinate 0,0010.001 Гидрогенизированный лецитинHydrogenated lecithin 0,0010.001 эмульгаторemulsifier 0,50.5 консервантpreservative 1,01,0 интерферонinterferon 0,0010.001 полимерный носительpolymer carrier 1,01,0 регулятор рНpH regulator 1,01,0 вода деминерализованнаяdemineralized water 96,49696,496

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют ДНК-азу, глицирризинат аммония, интерферон, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, гидрогенизированный лецитин, регулятор рН. Полученный раствор фильтруют и стерилизуют.The specified composition is prepared according to the following method. In demineralized water, DNase, ammonium glycyrrhizinate, interferon are dissolved, an emulsifier, a preservative, a polymeric carrier, hydrogenated lecithin, and a pH regulator are added. The resulting solution is filtered and sterilized.

ПРИМЕР 5EXAMPLE 5

Композиция в виде раствора для инъекций на основе ДНК-азы и глицирризината аммония имеет следующий состав.The composition in the form of a solution for injection based on DNase and ammonium glycyrrhizinate has the following composition.

ДНК-азаDNAase 0,0010.001 Глицирризинат аммонияAmmonium Glycyrrhizinate 0,0010.001 Гидрогенизированный лецитинHydrogenated lecithin 0,0010.001 эмульгаторemulsifier 0,50.5 консервантpreservative 1,01,0 полимерный носительpolymer carrier 1,01,0 регулятор рНpH regulator 1,01,0 вода деминерализованнаяdemineralized water 96,49596,495

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют ДНК-азу, глицирризинат аммония, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, гидрогенизированный лецитин, регулятор рН. Полученный раствор фильтруют и стерилизуют.The specified composition is prepared according to the following method. In demineralized water, DNase, ammonium glycyrrhizinate are dissolved, an emulsifier, a preservative, a polymeric carrier, hydrogenated lecithin, and a pH regulator are added. The resulting solution is filtered and sterilized.

ПРИМЕР 6EXAMPLE 6

Оценка стабильности фермента.Assessment of the stability of the enzyme.

Поскольку главным недостатком ДНК-азы является ее нестабильность в присутствии воды от 3%, была проведена сравнительная оценка сохранения активности ферментов при хранении в виде раствора и в виде композиции для местного применения (на примере геля).Since the main disadvantage of DNAase is its instability in the presence of water from 3%, a comparative assessment was made of the conservation of enzyme activity during storage in the form of a solution and in the form of a composition for local use (for example, a gel).

Активность ДНК-азы определяли по следующей методике.DNAase activity was determined by the following procedure.

Определение активности ДНК-азы проводили по методу Кунитца. За единицу активности ДНК-азы принимают наименьшее количество фермента, которое при воздействии его на субстрат в условиях опыта освобождает такое количество кислорастворимых продуктов, которое приводит к возрастанию оптической плотности при длине волны 260 нм на одну единицу. В контрольную и две опытные пробирки вносят по 0,5 мл субстрата (ДНК) и по 0,3 мл 0,2М трис-буфера (рН=7). В опытные, предварительно прогретые пробирки, вносят 0,2 мл раствора фермента. Пробы термостатируют в течение 30 минут при температуре 37,5°С. Затем к пробам прибавляют 1 мл охлажденного в ледяной бане 1н раствора хлорной кислоты (HClO4), в контрольную - 0,2 мл раствора фермента. Пробирки встряхивают и выдерживают в ледяной бане 16-25 минут. Образовавшиеся осадки отделяют центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 минут. Из надосадочного слоя отбирают 0,5 мл раствора, добавляют 2,5 мл воды и измеряют оптическую плотность при λ=260 нм.Determination of DNAase activity was carried out according to the Kunitz method. For the unit of activity, DNA-basics take the smallest amount of the enzyme, which, when exposed to the substrate under the experimental conditions, releases such an amount of acid-soluble products that leads to an increase in optical density at a wavelength of 260 nm per unit. 0.5 ml of substrate (DNA) and 0.3 ml of 0.2 M Tris buffer (pH = 7) are added to the control and two test tubes. In experimental, pre-warmed tubes, add 0.2 ml of the enzyme solution. Samples are thermostated for 30 minutes at a temperature of 37.5 ° C. Then, 1 ml of a 1N solution of perchloric acid (HClO 4 ) cooled in an ice bath is added to the samples; 0.2 ml of the enzyme solution is added to the control. The tubes are shaken and kept in an ice bath for 16-25 minutes. The precipitates formed are separated by centrifugation at 4000 rpm for 10 minutes. 0.5 ml of solution was taken from the supernatant, 2.5 ml of water was added and the absorbance was measured at λ = 260 nm.

Результаты приведены в следующей таблице.The results are shown in the following table.

Таблица 1Table 1 Исследуемые образцыTest samples Основные ингредиентыMain ingredients Стабильность при храненииStorage stability 1one 22 33 Гель №1Gel number 1 Согласно Примеру 1According to Example 1 Активность ДНК-азы 90% в течение 5 лет наблюденияDNase activity 90% for 5 years of observation Глазные капли №2Eye drops No. 2 Согласно Примеру 2According to Example 2 Активность ДНК-азы 92% в течение 5 лет наблюденияDNase activity 92% for 5 years of observation Суппозитории №3Suppositories No. 3 Согласно Примеру 3According to Example 3 Активность ДНК-азы 92% в течение 5 лет наблюденияDNase activity 92% for 5 years of observation Раствор для инъекций №4Solution for injection No. 4 Согласно Примеру 4According to Example 4 Активность ДНК-азы 85% в течение 5 лет наблюденияDNAase activity 85% for 5 years of observation Раствор для инъекций №5Solution for injection No. 5 Согласно Примеру 5According to Example 5 Активность ДНК-азы 85% в течение 5 лет наблюденияDNAase activity 85% for 5 years of observation Раствор нативного фермента (без носителя)Native enzyme solution (without carrier) -- Активность 5% для РНК-азы в течение 1 суток5% activity for RNAase within 1 day

Как видно из представленной таблицы, использование полимерных носителей и стабилизаторов в композиции позволяет получить стабильные композиции с сохранением активности фермента.в течение 5-х лет наблюдения, благодаря созданию устойчивой конформации фермента β-циклодекстрином, гидрогенизированным лецитином и полимером-носителем.As can be seen from the table, the use of polymeric carriers and stabilizers in the composition makes it possible to obtain stable compositions while maintaining enzyme activity. During 5 years of observation, due to the creation of a stable conformation of the enzyme with β-cyclodextrin, hydrogenated lecithin and a carrier polymer.

ПРИМЕР 7EXAMPLE 7

Изучение противогерпетической активностиThe study of antiherpetic activity

Исследование выполнено на белых рандомбредных мышах-самцах массой 18-20 г. Всего в опытах использовано 120 животных.The study was performed on white random-bred male mice weighing 18-20 g. In total, 120 animals were used in the experiments.

Для инфицирования белых мышей использовали вирус простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2), вызывающий у людей инфекцию урогенитальной локализации. Терапию начинали проводить через 2 часа после заражения. Затем препараты вводили ежедневно 1 раз в сутки в течение 10 дней в дозах:Herpes simplex virus type 2 (HSV-2), which causes an infection of urogenital localization in humans, was used to infect white mice. Therapy was started 2 hours after infection. Then the drugs were administered daily 1 time per day for 10 days in doses:

- Композиция, согласно ПРИМЕРУ 4-5 мл/кг и 25 мл/кг внутрибрюшинно (0.1 мл и 0.5 мл на мышь соответственно).- The composition, according to EXAMPLE 4-5 ml / kg and 25 ml / kg intraperitoneally (0.1 ml and 0.5 ml per mouse, respectively).

- Композиция, согласно ПРИМЕРУ 2-100 мг/кг и 500 мг/кг ректально.- The composition according to EXAMPLE 2-100 mg / kg and 500 mg / kg rectally.

- Дезоксирибонуклеаза (ДНК-аза)(свежеприготовленный 0,001 мас.% раствор в воде для инъекций) - 5 мл/кг и 25 мл/кг внутрибрюшинно (0.1 мл и 0.5 мл на мышь соответственно).- Deoxyribonuclease (DNase) (freshly prepared 0.001 wt.% Solution in water for injection) - 5 ml / kg and 25 ml / kg intraperitoneally (0.1 ml and 0.5 ml per mouse, respectively).

- Изопринозин - 500 мг/кг в виде водной взвеси таблеток в расчете на содержание в них активного компонента. Эта доза экстраполирована на мышей с рекомендуемой суточной дозы для человека путем умножения на коэффициент межвидового переноса, равный 10.- Isoprinosine - 500 mg / kg in the form of an aqueous suspension of tablets, based on the content of the active component in them. This dose is extrapolated to mice with the recommended daily dose for humans by multiplying by an interspecific transfer coefficient of 10.

Контрольная группа получала дистиллированную воду (0.5 мл на мышь).The control group received distilled water (0.5 ml per mouse).

После 10-суточного карантина животные были взяты в эксперимент по оценке эффективности препаратов на модели генерализованной герпетической инфекции. С этой целью было сформировано 6 групп по 16 животных в каждой.After 10-day quarantine, the animals were taken into an experiment to evaluate the effectiveness of drugs on a model of generalized herpetic infection. For this purpose, 6 groups of 16 animals each were formed.

Для инфицирования животных использовали вирус герпеса 2-го типа (ВПГ-2), вызывающий у людей инфекцию урогенитальной локализации. Инфекционный материал (головной мозг мышей-сосунков, зараженных ВПГ-2) растирали в ступке на холоду, готовили 10% суспензию, центрифугировали при +40°С (2000 об/мин) в течение 20 минут и готовили 10-кратные разведения. Белых мышей заражали внутрибрюшинно.For infection of animals, a herpes type 2 virus (HSV-2) was used, which causes an infection of urogenital localization in humans. Infectious material (the brain of sucker mice infected with HSV-2) was ground in a mortar in the cold, a 10% suspension was prepared, centrifuged at + 40 ° C (2000 rpm) for 20 minutes, and 10-fold dilutions were prepared. White mice were intraperitoneally infected.

Оценку эффективности препаратов проводили по 3 показателям:Evaluation of the effectiveness of drugs was carried out according to 3 indicators:

а) уровню летальности;a) mortality rate;

б) проценту защиты (разница в уровне выживаемости в опыте и контроле вируса);b) the percentage of protection (the difference in the level of survival in the experience and control of the virus);

в) средней продолжительности жизни (СПЖ).c) average life expectancy (LSS).

Полученные результаты представлены в таблице 2.The results are presented in table 2.

Терапевтическая эффективность препаратов при генерализованной герпетической инфекции (ВПГ-2) у белых мышейTherapeutic efficacy of drugs for generalized herpetic infection (HSV-2) in white mice

Таблица 2table 2 №группыGroup No. ПрепаратыPreparations Доза, мг/кг (мл/кг)Dose, mg / kg (ml / kg) Пало/всего в группеPalo / total in group % гибели% death % защиты% protection СПЖ (сутки)SPG (day) 1.one. ИзопринозинIsoprinosine 500500 0/160/16 00 62.562.5

2.2. ДНК-азаDNAase 2525 6/166/16 37.537.5 2525 12.412.4 3.3. ДНК-азаDNAase 55 8/168/16 50.050.0 12.512.5 11.611.6 4.four. Композиция, согласно ПРИМЕРУ 5The composition according to EXAMPLE 5 2525 4/164/16 2525 37.537.5 43.443.4 5.5. Композиция, согласно ПРИМЕРУ 5The composition according to EXAMPLE 5 55 8/168/16 50fifty 12.512.5 14.614.6 6.6. Композиция, согласно ПРИМЕРУ 2The composition according to EXAMPLE 2 500500 0/160/16 00 62.562.5 7.7. Композиция, согласно ПРИМЕРУ 2The composition according to EXAMPLE 2 100one hundred 2/162/16 12.512.5 50fifty 30.330.3 8.8. Контроль (группа без лечения)Control (group without treatment) 10/1610/16 62.562.5 -- 9.259.25

Из данных таблицы 2 следует, что введение животным композиций из ПРИМЕРОВ 2 и 4 снижало процент летальности мышей и увеличивало процент защиты, что подтверждает противогерпетическое действие композиций.From the data of table 2 it follows that the administration to animals of the compositions of EXAMPLES 2 and 4 reduced the mortality rate of mice and increased the percentage of protection, which confirms the antiherpetic effect of the compositions.

Комплексное использование ДНК-азы с солью глицирризиновой кислоты показало большую противогерпетическую эффективность по сравнению с раствором ДНК-азы.The complex use of DNase with a glycyrrhizic acid salt showed greater antiherpetic efficacy compared to a DNAase solution.

Claims (3)

1. Композиция для лечения и профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК-содержащими вирусами, такими как герпес, опоясывающий лишай, папиллома человека, аденовирусы, содержащая в качестве активного ингредиента 0,001-0,50 мас.% дезоксирибонуклеазы (ДНК-азы) и 0,001-0,50 мас.% глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония или дикалия или тринатрия, в качестве носителей: 0,05-1,00 мас.% полимерный носитель, 0,001-5,00 мас.% β-циклодекстрины или лецитины и приемлемые эксципиенты.1. Composition for the treatment and prevention of viral infections caused by DNA-containing viruses, such as herpes, shingles, human papilloma, adenoviruses, containing as an active ingredient 0.001-0.50 wt.% Deoxyribonuclease (DNase) and 0.001- 0.50 wt.% Glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate, as carriers: 0.05-1.00 wt.% Polymer carrier, 0.001-5.00 wt.% Β-cyclodextrins or lecithins and acceptable excipients. 2. Композиция по п.1, дополнительно содержащая сангвиритрин или интерферон или лизоцим и приемлемые эксципиенты при следующем соотношении компонентов, мас.%:
ДНК-аза 0,50 глицирризинат тринатрия 0,50 сангвиритрин 5,00 β-циклодекстрин 5,00 консервант 1,00 полимерный носитель 1,00 регулятор рН 1,00 вода деминерализованная 5,00 суппозиторная основа 80,50
2. The composition according to claim 1, additionally containing sanguiryrin or interferon or lysozyme and acceptable excipients in the following ratio of components, wt.%:
DNAase 0.50 trisodium glycyrrhizinate 0.50 sanguirythrin 5.00 β-cyclodextrin 5.00 preservative 1.00 polymer carrier 1.00 pH regulator 1.00 demineralized water 5.00 suppository base 80.50
3. Композиция по п.1, дополнительно содержащая 0,001-5,00 мас.% сангвиритрин или интерферон или лизоцим и приемлемые эксципиенты при следующем соотношении компонентов, мас.%:
ДНК-аза 0,001 глицирризинат аммония 0,001 интерферон 0,001 гидрогенизированный лецитин 0,001 консервант 1,00 эмульгатор 0,50 полимерный носитель 1,00 регулятор рН 1,00 вода деминерализованная 96,496
3. The composition according to claim 1, additionally containing 0.001-5.00 wt.% Sanguirytrin or interferon or lysozyme and acceptable excipients in the following ratio of components, wt.%:
DNAase 0.001 ammonium glycyrrhizinate 0.001 interferon 0.001 hydrogenated lecithin 0.001 preservative 1.00 emulsifier 0.50 polymer carrier 1.00 pH regulator 1.00 demineralized water 96,496
RU2012128047/15A 2012-07-03 2012-07-03 Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate RU2517211C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012128047/15A RU2517211C2 (en) 2012-07-03 2012-07-03 Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012128047/15A RU2517211C2 (en) 2012-07-03 2012-07-03 Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012128047A RU2012128047A (en) 2014-01-20
RU2517211C2 true RU2517211C2 (en) 2014-05-27

Family

ID=49944665

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012128047/15A RU2517211C2 (en) 2012-07-03 2012-07-03 Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2517211C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2736082C1 (en) * 2019-12-02 2020-11-11 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Pharmaceutical composition of antiallergic and anti-inflammatory action for intranasal application

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2559179C1 (en) * 2014-03-24 2015-08-10 Илья Александрович Марков Tabletted pharmaceutical composition for treating severe forms of viral infections

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090220440A1 (en) * 2006-03-24 2009-09-03 Istituto Farmacoterapico Italiano S.P.A. Spray Composition for Topical Use for Treating and/or Preventing Herpes Simplex Labial Infections
RU2410123C2 (en) * 2008-10-16 2011-01-27 Валерия Леонидовна Багирова Medical napkins, containing deoxyribonuclease and liposomes for external application
RU2411039C2 (en) * 2007-12-26 2011-02-10 Валентина Васильевна Малиновская Immunocorrective agent for treating diseases of viral aetiology

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090220440A1 (en) * 2006-03-24 2009-09-03 Istituto Farmacoterapico Italiano S.P.A. Spray Composition for Topical Use for Treating and/or Preventing Herpes Simplex Labial Infections
RU2411039C2 (en) * 2007-12-26 2011-02-10 Валентина Васильевна Малиновская Immunocorrective agent for treating diseases of viral aetiology
RU2410123C2 (en) * 2008-10-16 2011-01-27 Валерия Леонидовна Багирова Medical napkins, containing deoxyribonuclease and liposomes for external application

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2736082C1 (en) * 2019-12-02 2020-11-11 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Pharmaceutical composition of antiallergic and anti-inflammatory action for intranasal application

Also Published As

Publication number Publication date
RU2012128047A (en) 2014-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5945446A (en) Process for preparing synthetic soil-extract materials and medicaments based thereon
EP1076553B1 (en) Pharmaceutical, hygienic and/or cosmetic compositions containing sea water and uses
Sabina et al. An in vivo and in vitro potential of Indian ayurvedic herbal formulation Triphala on experimental gouty arthritis in mice
US9433637B2 (en) Method for inhibiting influenza virus infection
CN107405370B (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating inflammatory diseases comprising Lactococcus chungangensis as active ingredient
RU2517211C2 (en) Pharmaceutical composition, which contains enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or its salts: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
US20100233285A1 (en) Honey based compositions of a consistency that can be delivered to the respiratory system
KR100682979B1 (en) Composition for precaution treatment having synergism for antimicrobial infection and antiinflammatory action and treatment for athletes foot provided by using them
RU2494757C1 (en) Pharmaceutical composition containing enzyme deoxyribonuclease, alpha-fetoprotein and glycyrrhizic acid or salts thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
RU2673807C2 (en) Agent possessing biocidal action
KR101156082B1 (en) Composition for treating bovine mastitis
RU2504396C1 (en) Pharmaceutical composition containing enzyme ribonuclease and glycyrrhizic acid or salts thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
CN108136210B (en) Tannin-containing composition
RU2493852C1 (en) Composition containing enzyme deoxyribonuclease and/or stearyl glycyrrhetinate or glycyrrhetinic acid or salt thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
RU2504397C1 (en) Pharmaceutical composition containing enzyme ribonuclease and glycyrrhizic acid or salts thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
RU2481101C2 (en) Pharmaceutical composition containing enzymes: lisocyme, peroxidase, poviargol and liposomes, for local application
RU2233171C2 (en) POLYFUNCTIONAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION BASED ON L-LYSINE-α-OXIDASE FROM FUNGUS OF GENUS TRICHODERMA AND METHOD FOR PREPARING THIS ENZYME
KR101623553B1 (en) Chlorin e6 for the treatment, prevention or improvement of acne
RU2486915C1 (en) Pharmaceutical composition containing enzyme deoxyribonuclease and glycyrrhizic acid or salts thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
JP6039670B2 (en) Method for producing dry extract
RU2501560C1 (en) Composition containing enzyme ribonuclease and/or stearyl glycyrrhetinate or glycyrrhetinic acid or salt thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate
EP3284462B1 (en) Strontium based compositions and formulations for pain, pruritus, and inflammation
RU2504361C2 (en) Pharmaceutical composition, containing enzyme deoxyribonuclease and/or ribonuclease and liposomes, for local application
CN110974852A (en) Gel for inactivating cells, cell fragments and inclusions of lactic acid bacteria, and preparation method and application thereof
RU2780109C1 (en) Anti-inflammatory eye drops for pets and farm animals

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20170704