Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к созданию фармакологических средств растительного происхождения в качестве средства, повышающего работоспособность в спортивной медицине при умственной и физической усталости.
В настоящее время в качестве общетонизирующих средств, повышающих работоспособность, применяются препараты растительного происхождения (адаптогены), такие как женьшень (Panax ginseng Mey.), элеутерококк (Eleutherococcus senticosus Maxim), родиола розовая (Rhodiola rosea L.) и другие препараты.
Известен экстракт элеутерококка на 40% этиловом спирте, который рекомендуется принимать по 20-30 капель за полчаса до еды в течение 20-30 дней (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Медицина, 1998. Ч.1. С.141).
Наиболее близким является жидкий экстракт родиолы на 40% этиловом спирте, который применяют как стимулирующее средство при астенических состояниях, повышенной утомляемости внутрь по 5-10 капель 2-3 раза в день в течение 10-20 дней (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Медицина, 1998, ч.1. С.140). Однако элеутерококк в естественных условиях произрастает только на юге Дальнего Востока, родиола розовая произрастает в основном на Алтае. Потребность в их сырье постоянно возрастает, тогда как ареалы и природные запасы ежегодно существенно сокращаются.
Техническим результатом при использовании изобретения является получение нового средства, повышающего работоспособность.
Новым в достижении технического результата является то, что в качестве средства используют водно-спиртовую настойку из надземных частей горноколосника колючего на 70%-ном спирте в соотношении 1:7, при этом содержание активного ингредиента не менее 0,007 г на дозу.
Известно применение горноколосника колючего (заячья капуста, колючая репка, живучка) в народной медицине как ранозаживляющее, противовоспалительное средство и как пищевая добавка (Телятьев В.В. Целебные клады. - Иркутск: Восточно-Сибир. книжное изд-во, 1991. - С.133). Природная сырьевая база весьма значительна и доступна, легкость вегетативного и семенного восстановления растения позволяет гарантировать заготовку сырья в необходимом количестве без подрыва естественных запасов. Данных о проявлении горноколосником колючим стимулирующей работоспособность активности в условиях экстремальных воздействий различной (химической, физической, биологической) природы на организм человека и животных авторами в доступной научно-медицинской и патентной литературе не выявлено. Экспериментально установлено, что средство, содержащее в качестве активного ингредиента экстрактивные вещества из надземной части горноколосника колючего, для проявления стимулирующего работоспособность действия должно содержать не менее 0,007 г экстрактивных веществ. При содержании экстрактивных веществ меньше 0,007 г средство не проявляет ярко выраженную активность. Авторы экспериментальным путем выявили, что предпочтительнее использовать водно-спиртовые извлечения из горноколосника колючего в соотношении 1:7 из надземных частей на 70%-ном этиловом спирте. В основе фармакологической активности извлечений из горноколосника колючего лежит химический состав растения: наличие флавоноидов, фенилпропаноидов, кверцетина, аскорбиновой кислоты и разнообразный микроэлементный состав.
Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что предлагаемое средство отличается тем, что содержит водно-спиртовую настойку из надземных частей горноколосника колючего на 70%-ном спирте в соотношении 1:7, при этом содержание активного ингредиента не менее 0,007 г на дозу, что соответствует критерию «новизна».
Новая совокупность признаков позволяет расширить сырьевую базу средств для снижения утомления и повышения работоспособности, средство может быть использовано в качестве пищевой добавки, а горноколосник колючий может быть рекомендован в качестве викарианта разрешенному Государственной фармакопеей (XI) к использованному лекарственному растению родиола розовая, что соответствует критерию «промышленная применимость».
В качестве сырья используют надземную часть горноколосника колючего. Извлечения горноколосника колючего готовят методом перколяции 70% этанолом. Соотношение сырья: экстрагент 1:10, в качестве экстрагента используют 70% этиловый спирт. Сырье измельчают, смачивают 7%-ным спиртом этиловым и оставляют на 4 часа, после чего набухший материал плотно укладывают в перколятор и заливают экстрагент до образования «зеркала» - слоя жидкости на поверхности сырья. Сырье настаивают 24 часа, а затем растительный материал медленно перколируют до получения необходимого количества водно-спиртового раствора. Сверху в перколятор подают свежий экстрагент. Время перколяции 48 часов. Затем водно-спиртовый раствор отстаивают в течение двух суток, фильтруют, деалкоголизируют и доводят объем раствора до первоначального. Сухой остаток (экстрактивные вещества) составляет 2,6%. Полученное водно-спиртовое извлечение имеет светло-коричневую окраску, без осадка, без запаха. В течение 1 месяца хранения цвет и запах не изменяется, появляется незначительное помутнение раствора. Далее определяют пороговые, терапевтические и оптимальные дозы полученного средства. Для определения величины оптимальной дозы используют методику истощающих мышечных нагрузок как наиболее интегральную при оценке действия препаратов стимулирующего и тонизирующего типов действия (Ю.Г.Бобков и соав. Фармакологическая коррекция утомления. М.: Медицина, 1984. - С.40-44). Для выявления влияния фармакологических средств на физическую выносливость экспериментальных животных используют методический прием, позволяющий оценить способность животных выполнять работу с физической нагрузкой «до отказа». Для этого используют плавательную пробу на мышах и крысах (Авакян О.М., Ширинян Э.А. Новая модель динамической работы мелких лабораторных животных // Бюлл. экспер. биол., 1977. - №4 - С.375-376). В эксперименте по моделированию беспрерывной мышечной работы используют крыс массой 160-190 г, которым внутрибрюшинно вводят водные растворы извлечений из горноколосника колючего в концентрациях 1:1, 1:7, 1:10, 1:15, 1:20. Контрольным животным вводят по 0,5 мл физиологического раствора внутрибрюшинно. Данные по определению оптимальной дозы представлены в табл.1. Наиболее оптимальным разведением препарата по максимальному времени беспрерывной мышечной работы было выбрано соотношение 1:7 водного раствора извлечения горноколосника колючего (3,8 мг/кг). Биологическую оценку извлечений из горноколосника колючего на работоспособность проводят совместно с препаратами сравнения в экспериментах на белых крысах и мышах на модифицированной установке по регистрации времени беспрерывной мышечной работы. В качестве стандартных препаратов сравнения выбирают средства с заведомо известными тонизирующими и стимулирующими (повышающими работоспособность) свойствами - экстракт элеутерококка жидкий заводского изготовления ОАО «Дальхимфарм» (Р №0015101 от 18.01.2008 г., серия 150309, годен до 01.04.2013 г.) и экстракт родиолы жидкий (серия 020309, годен до 04.2014 г.), которые деалкоголизировались методом выпаривания, и проводилось восстановление объема дистиллированной водой, растворы готовились ex tempore. Препараты вводят за 40 минут до опыта внутрибрюшинно, в контроле вводят 0,5 мл физиологического раствора. В эксперименте водные растворы препаратов вводят в разведении 1:7 в дозировке 1,0 мл на 1 кг веса животного, которые соответствуют по соотношению сырья и экстрагента полученным препаратам горноколосника колючего. Полученные результаты обрабатывают статистически с использованием t-критерия Стьюдента при доверительной вероятности Р=95%. Моделирование мышечной работы на модифицированной установке проводят в стабильных экспериментальных условиях, что дает возможность точной дозированности мышечной нагрузки и позволяет использовать метод для оценки времени предельной работоспособности для исследуемого препарата. В каждой группе используют по 7 лабораторных животных. Данные экспериментов представлены в табл.2 и 3. По данным таблиц видно, что водная вытяжка их экстракта элеутерококка, соответствующего стандартному фармакопейному препарату, показала увеличение времени работоспособности у крыс на 44,3% и у мышей на 52,5% по сравнению с контролем, а введение извлечений из горноколосника колючего увеличило время работы крыс на 62% и у мышей на 60% по сравнению с контролем. Таким образом, извлечение из горноколосника колючего могут успешно применяться в качестве лечебного препарата для повышения физической работоспособности. Эффективная доза для животных - разведение 1:7 (3,8 мг/кг). Известно, что переносимые дозы лекарственных веществ для человека в 7-10 и более раз меньше, чем для лабораторных животных (Саксонов П.П., Шашков В.С., Сергеев П.П. Радиационная фармакология. М.: Медицина, 1976. С.59). Поэтому минимальной разовой эффективной дозой для человека следует считать 0,007 г, суточной дозой - 0,02 г. Средство может быть изготовлено в виде следующих лекарственных форм: настойка (1:7 на 70% водно-спиртовом растворе), а также таблетки (драже) или порошок, содержащий не менее 0,007 г экстрактивных веществ.
Использование в качестве сырья надземной части горноколосника колючего позволяет расширить сырьевую базу средств для снижения утомления и повышения работоспособности.
| Таблица 2 |
| Результаты изучения влияния извлечений из горноколосника, экстракта элеутерококка на предельное время работоспособности мышей |
| исследуемый препарат |
вес, г |
время работы (мин) |
среднее время работы (мин) |
метрологическая характеристика |
| ст. ошибка ст. отклонен |
| физиологический раствор по 0,5 мл внутрибрюшинно |
17 |
69 |
|
|
|
| 18 |
80 |
83,8 |
2,84 |
7,51 |
| 17 |
85 |
|
|
|
| 19 |
90 |
|
|
|
| 18 |
89 |
|
|
|
| 18 |
84 |
|
|
|
| 17 |
90 |
|
|
|
| препарат горноколосника колючего (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
19 |
115 |
|
|
|
| 19 |
134 |
134,2 |
5,58 |
14,76 |
| 18 |
150 |
|
|
|
| 19 |
152 |
|
|
|
| 19 |
120 |
|
|
|
| 17 |
134 |
|
|
|
| 19 |
120 |
|
|
|
| препарат элеутерококка (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
19 |
101 |
|
|
|
| 20 |
158 |
|
|
|
| 18 |
140 |
127,8 |
6,74 |
17,83 |
| 18 |
120 |
|
|
|
| 19 |
120 |
|
|
|
| 18 |
131 |
|
|
|
| 18 |
128 |
|
|
|
| препарат родиолы розовой (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
20 |
122 |
|
|
|
| 17 |
137 |
|
|
|
| 18 |
144 |
135,6 |
5,62 |
14,88 |
| 19 |
160 |
|
|
|
| 17 |
118 |
|
|
|
| 20 |
143 |
|
|
|
| 18 |
125 |
|
|
|
| Примечание: полученные результаты обрабатывали статистически с использованием описательной статистики Excel 2003, при Р=95%, t=2,447 |
| Таблица 3 |
| Результаты изучения влияния извлечений из горноколосника, экстракта элеутерококка на предельное время работоспособности крыс |
| исследуемый препарат |
вес, г |
время работы (мин) |
среднее время работы (мин) |
метрологическая характеристика |
| ст. ошибка |
ст. отклонен |
| физиологический раствор по 0,5 мл внутрибрюшинно |
200 |
83 |
|
|
|
| 220 |
102 |
92,8 |
2,30 |
6,10 |
| 210 |
92 |
|
|
|
| 200 |
89 |
|
|
|
| 205 |
98 |
|
|
|
| 210 |
92 |
|
|
|
| 200 |
93 |
|
|
|
| препарат горноколосника колючего (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
200 |
112 |
|
|
|
| 210 |
179 |
149,6 |
7,52 |
19,90 |
| 200 |
145 |
|
|
|
| 205 |
155 |
|
|
|
| 200 |
156 |
|
|
|
| 210 |
148 |
|
|
|
| 200 |
152 |
|
|
|
| препарат элеутерококка (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
215 |
120 |
|
|
|
| 210 |
130 |
|
|
|
| 210 |
165 |
134,0 |
5,50 |
14,56 |
| 200 |
130 |
|
|
|
| 210 |
125 |
|
|
|
| 215 |
135 |
|
|
|
| 200 |
133 |
|
|
|
| препарат родиолы розовой (1:7) по 1 мл внутрибрюшинно |
200 |
125 |
|
|
|
| 195 |
170 |
|
|
|
| 205 |
152 |
147,7 |
5,43 |
14,36 |
| 190 |
148 |
|
|
|
| 210 |
154 |
|
|
|
| 215 |
135 |
|
|
|
| 200 |
150 |
|
|
|
| Примечание: полученные результаты обрабатывали статистически с использованием описательной статистики Excel 2003, при Р=95%, t=2,447 |
