RU2481121C2 - Anti-burn gel - Google Patents
Anti-burn gel Download PDFInfo
- Publication number
- RU2481121C2 RU2481121C2 RU2011114719/15A RU2011114719A RU2481121C2 RU 2481121 C2 RU2481121 C2 RU 2481121C2 RU 2011114719/15 A RU2011114719/15 A RU 2011114719/15A RU 2011114719 A RU2011114719 A RU 2011114719A RU 2481121 C2 RU2481121 C2 RU 2481121C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- burn
- bioregulator
- gel
- day
- wound
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к эмульсионным лечебно-профилактическим средствам наружного применения при термических ожогах.The invention relates to medicine and veterinary medicine, namely to emulsion therapeutic and prophylactic agents for external use in thermal burns.
Актуальность разработки таких препаратов обусловлена тем, что в настоящее время частота термических поражений имеет тенденцию к росту, но при этом, несмотря на широкий спектр противоожоговых препаратов, не существует препаратов, которые бы смогли полностью восстановить структуру поврежденного участка кожи или другой ткани. По данным Всемирной организации здравоохранения, ожоги занимают третье место среди других травм. Во всем мире от ожогов ежедневно погибают около 60000 человек. Проблема борьбы с термическими поражениями крайне важна как для гражданской, так и для военно-полевой медицины. Развитие сложных промышленных производств, наличие на вооружении большинства армий зажигательных смесей, всевозрастающее количество природных катаклизмов и техногенных катастроф требует повышение эффективности терапии ожогов и ожоговой болезни при большей доступности и оперативности применения лекарственных препаратов.The relevance of the development of such drugs is due to the fact that at present the frequency of thermal injuries has a tendency to increase, but at the same time, despite a wide range of anti-burn drugs, there are no drugs that could completely restore the structure of the damaged skin or other tissue. According to the World Health Organization, burns are third among other injuries. Around the world, about 60,000 people die every day from burns. The problem of combating thermal injuries is extremely important for both civilian and military field medicine. The development of complex industrial production, the availability of most armies of incendiary mixtures, the ever-increasing number of natural disasters and technological disasters requires an increase in the effectiveness of the treatment of burns and burn disease with greater accessibility and speed of use of drugs.
Ожоги различной степени тяжести сопровождаются нарушением кислотно-щелочного равновесия и синтеза белков, совокупностью ферментных реакций распада сложных высокомолекулярных и биоорганических соединений, что приводит к некрозу тканей, экссудативным реакциям, образованию грануляционной ткани, бактериальной осемененности ожоговой поверхности.Burns of varying severity are accompanied by a violation of acid-base balance and protein synthesis, a combination of enzymatic reactions of the decomposition of complex high molecular weight and bioorganic compounds, which leads to tissue necrosis, exudative reactions, the formation of granulation tissue, bacterial insemination of the burn surface.
В качестве противоожоговых препаратов в настоящее время используется большое количество лекарственных средств, среди которых особое место занимают препараты на основе неорганических и металлоорганических соединений, например следующие.A large number of drugs are currently used as anti-burn drugs, among which drugs based on inorganic and organometallic compounds occupy a special place, for example, the following.
Известным противоожоговым препаратом является метилурацил, относящийся к классу пиримидинов и оказывающий влияние на восстановление разрушенных клеток и снижение воспалительных процессов. Для лечения применяется метилурациловая мазь на вазелино-ланолиновой основе [Патент РФ №2135180 (1999)]. Однако такая основа препятствует нормальному газообмену, что снижает ранозаживляюшую активность препарата, особенно при вялотекущих процессах, и может вызвать аллергическую реакцию.A well-known anti-burn drug is methyluracil, which belongs to the class of pyrimidines and has an effect on the restoration of destroyed cells and the reduction of inflammatory processes. For treatment, vaseline-lanolin-based methyluracil ointment is used [RF Patent No. 21515180 (1999)]. However, such a basis interferes with normal gas exchange, which reduces the wound healing activity of the drug, especially during sluggish processes, and can cause an allergic reaction.
Наиболее эффективными являются противоожоговые средства, имеющие эмульсионную или гелеобразную консистенцию, так как они легко наносятся и впитываются. Характер консистенции обеспечивается технологией получения лекарственного средства.The most effective are anti-burn agents having an emulsion or gel-like consistency, since they are easily applied and absorbed. The nature of the consistency is provided by the technology for obtaining the drug.
Наиболее близким по технической сущности к заявленному средству является средство для наружного применения "Полимед" [Патент РФ №2140264, кл. A61К 31/00 (1999)], которое выбрано нами в качестве прототипа.The closest in technical essence to the claimed tool is a tool for external use "Polymed" [RF Patent No. 2140264, cl. A61K 31/00 (1999)], which we have chosen as a prototype.
Средство «Полимед» содержит фенол медицинский, резорцин, борную кислоту, дистиллированную воду, хитозан, диметилсульфоксид, йодистый калий, уксусную кислоту, глицерин и анестетик при следующем соотношении компонентов, мас.%:The tool "Polymed" contains medical phenol, resorcinol, boric acid, distilled water, chitosan, dimethyl sulfoxide, potassium iodide, acetic acid, glycerin and anesthetic in the following ratio, wt.%:
При ожоговых поражениях препарат может использоваться как средство доврачебной помощи, так как на поверхности пораженной кожи образует пленку, служащую защитным покрытием. "Полимед" представляет собой устойчивый гель и может храниться при комнатной температуре в течение двух лет без потери фармакологической активности и физико-химических свойств.In case of burn injuries, the drug can be used as a means of first aid, as it forms a film on the surface of the affected skin, which serves as a protective coating. "Polymed" is a stable gel and can be stored at room temperature for two years without loss of pharmacological activity and physico-chemical properties.
К недостаткам прототипа следует отнести наличие в его составе токсических и канцерогенных веществ, таких как фенол, борная кислота, диметилсульфоксид, которые могут вызывать аллергические реакции со стороны организма при попадании на кожу, кроме этого некоторые компоненты средства обладают токсическим действием при попадании в кровь. Препарат недостаточно эффективен, поскольку он не содержит активного морфогенетического вещества.The disadvantages of the prototype include the presence in its composition of toxic and carcinogenic substances, such as phenol, boric acid, dimethyl sulfoxide, which can cause allergic reactions from the body when it comes into contact with the skin, in addition, some components of the drug have a toxic effect if it enters the blood. The drug is not effective enough because it does not contain an active morphogenetic substance.
Задача настоящего изобретения, заключается создание эффективного противоожогового средства для наружного применения, обладающего широким спектром противоожогового действия. В заявляемом препарате отсутствуют токсические компоненты, а присутствующий биорегулятор, выделенный из сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС), стимулирует репаративные процессы, восстанавливая морфологически и биохимически нормальные структуры тканей. При этом данный биорегулятор добавляют в незначительном количестве, что сводит практически до нуля вероятность токсической или аллергической реакции на него со стороны организма.The objective of the present invention is to provide an effective anti-burn agent for external use with a wide range of anti-burn effects. In the claimed preparation there are no toxic components, and the present bioregulator isolated from the blood serum of cattle (cattle) stimulates reparative processes, restoring morphologically and biochemically normal tissue structures. At the same time, this bioregulator is added in a small amount, which reduces the probability of a toxic or allergic reaction to it from the body to almost zero.
Техническим результатом решения поставленной задачи является создание эффективного противоожогового средства, которое представляет собой гель для наружного применения, содержащий в качестве активных ингредиентов хитозан, салициловую кислоту и биорегулятор, выделенный из сыворотки крови крупного рогатого скота при следующем соотношении компонентов, (мас.%):The technical result of solving the problem is to create an effective anti-burn agent, which is a gel for external use containing chitosan, salicylic acid and a bioregulator isolated from the blood serum of cattle as active ingredients in the following ratio of components (wt.%):
Заявляемая композиция содержит следующие действующие компоненты:The inventive composition contains the following active components:
Хитозан - катионный полимер, обычно получаемый из панцирей крабов, обладает бактериостатическими, ранозаживляющими и иммуностимулирующими свойствами, подавляет развитие фиброза, стимулирует макрофаги, способствует нормальному восстановлению кожного покрова. Образуя пленку на поверхности раны, он препятствует попаданию токсических компонентов, обладает хорошим осмотическим эффектом. Хитозан практически не токсичен для организма млекопитающих, его LD50 находится на уровне LD50 сахара и поваренной соли.Chitosan - a cationic polymer, usually obtained from crab shells, has bacteriostatic, wound healing and immunostimulating properties, inhibits the development of fibrosis, stimulates macrophages, and contributes to the normal restoration of the skin. Forming a film on the surface of the wound, it prevents the ingress of toxic components, has a good osmotic effect. Chitosan is practically non-toxic to mammals, its LD 50 is at the level of LD 50 sugar and sodium chloride.
Салициловая кислота (о-оксибензойная кислота) - простейшая ароматическая оксикислота, представляющая собой бесцветные кристаллы, плохо растворимые в воде, хорошо растворимые в органических растворителях; широко распространена в природе, главным образом в виде гликозида ее метилового эфира (метилсалицилата). В промышленности ее обычно получают карбоксилированием фенола. Салициловая кислота обладает слабыми антисептическими, раздражающими и кератолитическими (в больших концентрациях) свойствами. Применяют наружно в мазях, пастах, присыпках и растворах при лечении кожных заболеваний; натриевую соль салициловой кислоты (салицилат натрия), ее амид (салициламид) и ацетилсалициловую кислоту (аспирин) используют как жаропонижающие, противоревматические, противовоспалительные и болеутоляющие средства; благодаря антисептическому действию ее употребляют при консервировании пищевых продуктов. Салициловая кислота токсична в больших дозах, для человека предполагаемая LD50 составляет 1.75 г/кг.Salicylic acid (o-hydroxybenzoic acid) - the simplest aromatic hydroxy acid, which is colorless crystals, poorly soluble in water, well soluble in organic solvents; widely distributed in nature, mainly in the form of a glycoside of its methyl ester (methyl salicylate). In industry, it is usually obtained by carboxylation of phenol. Salicylic acid has weak antiseptic, irritating and keratolytic (in high concentrations) properties. Applied externally in ointments, pastes, powders and solutions in the treatment of skin diseases; the sodium salt of salicylic acid (sodium salicylate), its amide (salicylamide) and acetylsalicylic acid (aspirin) are used as antipyretic, anti-rheumatic, anti-inflammatory and painkillers; due to its antiseptic effect, it is used in canning foods. Salicylic acid is toxic in large doses; for humans, the estimated LD 50 is 1.75 g / kg.
Биорегулятор выделяли из сыворотки крови крупного рогатого скота - стерильного, инактивированного коммерческого препарата, используемого в качестве добавки в ростовую среду клеточных культур, производства ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН».The bioregulator was isolated from the blood serum of cattle - a sterile, inactivated commercial preparation used as an additive to the growth medium of cell cultures, manufactured by the Federal State Unitary Enterprise “Enterprise for the Production of Bacterial and Viral Preparations of the Institute of Poliomyelitis and Viral Encephalitis named after MP Chumakova RAMS ".
Выделение биорегулятора из сыворотки крови осуществляли путем высаливания в насыщенном растворе сернокислого аммония. Для этого к охлажденному раствору тканевого экстракта или сыворотки крови постепенно добавляли сухой сернокислый аммоний при постоянном перемешивании до образования насыщенного раствора соли (на 1000 мл раствора 780 г соли). Суспензию белков оставляли на 7 суток при температуре +4°С, после чего центрифугировали для осаждения примесных белков при 12000g в течение 30 минут с помощью центрифуги Т 32А Janetzki (Германия). Собирали фракцию супернатанта и осадка. Фракцию супернатанта диализовали против дистиллированной воды, а фракцию осадка - против физиологического раствора для удаления низкомолекулярных примесей и сульфата аммония в течение 14 дней. Присутствие в растворе ионов аммония определяли реакцией с реактивом Несслера. Полученные фракции супернатантов далее концентрировали, используя роторный вакуумный испаритель, при температуре +37°С. Фракции осадков хранили при температуре -70°С.The bioregulator was isolated from blood serum by salting out in a saturated solution of ammonium sulfate. To do this, dry ammonium sulfate was gradually added to a cooled solution of tissue extract or blood serum with constant stirring until a saturated salt solution was formed (per 1000 ml of a solution of 780 g of salt). The protein suspension was left for 7 days at a temperature of + 4 ° C, after which it was centrifuged to precipitate impurity proteins at 12000g for 30 minutes using a Janetzki T 32A centrifuge (Germany). The supernatant fraction and sediment were collected. The supernatant fraction was dialyzed against distilled water, and the sediment fraction was dialyzed against saline to remove low molecular weight impurities and ammonium sulfate for 14 days. The presence of ammonium ions in the solution was determined by reaction with the Nessler reagent. The obtained supernatant fractions were further concentrated using a rotary vacuum evaporator at a temperature of + 37 ° C. Precipitation fractions were stored at a temperature of -70 ° C.
Изоэлектрофокусирование фракций супернатантов. Для проведения изоэлектрофокусирования (ИЭФ) приготавливали следующие растворы:Isoelectrofocusing of supernatant fractions. The following solutions were prepared for isoelectric focusing (IEF):
Тяжелый электродный раствор - 60% сахарозы, 1% H3PO4.Heavy electrode solution - 60% sucrose, 1% H 3 PO 4 .
Легкий электродный раствор - 0,1% NaOH.Light electrode solution - 0.1% NaOH.
Тяжелый градиентный раствор - 75 г сахарозы, до 200 мл дистиллированной воды.A heavy gradient solution is 75 g of sucrose, up to 200 ml of distilled water.
Легкий градиентный раствор - 15 г сахарозы, до 200 мл дистиллированной воды.Light gradient solution - 15 g of sucrose, up to 200 ml of distilled water.
Фракции супернатантов сыворотки крови и экстракта костной ткани (общим объемом 100 мл каждая) разделяли с помощью метода ИЭФ в градиенте плотности сахарозы на колонке LKB-440 («LKB», Швеция), используя амфолины диапазона рН 3,5-10,0 (Serva, Германия) (Остерман, 1983). В колонку наслаивали растворы в следующем порядке: тяжелый электродный раствор, тяжелый и легкий градиентные растворы, которые подавали из градиентного смесителя, легкий электродный раствор. Исследуемую фракцию (не более 100 мг белка) в виде раствора вводили в тяжелый градиентный раствор. ИЭФ проводили при +4°С в течение 96 часов при напряжении 500-1500 В. Собирали фракции объемом 10 мл. Детекцию белков осуществляли на спектрофотометре Ultrospec 1100 pro (Biochrom Ltd., Великобритания) при 280 нм, для каждой фракции определяли значение рН с помощью рН-метра Oakton 2100 series (EUTECH Instruments, Сингапур). Согласно полученной картине разделения собирали фракцию кислых белков в интервале значений рН<3,0, которую далее длительно диализовали против дистиллированной воды и концентрировали. Данную фракцию далее разбавляли до соответствующей концентрации 10-8-10-10 мг белка/мл.Fractions of serum supernatants and bone tissue extract (total volume 100 ml each) were separated using the IEF in the sucrose density gradient column LKB-440 (LKB, Sweden) using ampholines in the pH range 3.5–10.0 (Serva , Germany) (Osterman, 1983). Solutions were layered in the column in the following order: heavy electrode solution, heavy and light gradient solutions, which were supplied from a gradient mixer, light electrode solution. The studied fraction (not more than 100 mg of protein) in the form of a solution was introduced into a heavy gradient solution. The IEF was carried out at + 4 ° C for 96 hours at a voltage of 500-1500 V. Fractions of 10 ml were collected. Proteins were detected using an Ultrospec 1100 pro spectrophotometer (Biochrom Ltd., United Kingdom) at 280 nm; the pH value was determined for each fraction using an Oakton 2100 series pH meter (EUTECH Instruments, Singapore). According to the obtained separation pattern, a fraction of acidic proteins was collected in the range of pH <3.0, which was further dialyzed for a long time against distilled water and concentrated. This fraction was further diluted to an appropriate concentration of 10 -8 -10 -10 mg protein / ml.
Существенным отличием заявляемого изобретения является то, что предлагаемое противоожоговое средство содержит биорегулятор, выделенный из сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС) в низких концентрациях, который обладает выраженным репарирующим действием, что приводит к восстановлению морфологически и биохимически нормальной ткани кожи.A significant difference of the claimed invention is that the proposed anti-burn agent contains a bioregulator isolated from serum of cattle (cattle) in low concentrations, which has a pronounced reparative effect, which leads to the restoration of morphologically and biochemically normal skin tissue.
Для приготовления заявляемой гелевой композиции растворяют 10-20 г хитозана в 1 л воды в присутствии 3-4 г салициловой кислоты при 50°С. Раствор стерилизуют при 120°С в течение 5 мин, при этом образуется гель, который охлаждают и фильтруют, затем в полученный гель добавляют 10 мл водного раствора биорегулятора из сыворотки крови КРС в концентрации 10-8-10-10 мг/мл. Тщательно перемешивают в течение 15-30 мин, и получают готовый для использования гель. Указанные выше количества хитозана (от 10 до 20 г) выбраны потому, что при таком содержании хитозана образуется гель с определенным размером пор, через которые наиболее эффективно происходит высвобождение биорегулятора на раневую поверхность, что обеспечивает максимальную эффективность действия противоожогового средства.To prepare the inventive gel composition, 10-20 g of chitosan is dissolved in 1 l of water in the presence of 3-4 g of salicylic acid at 50 ° C. The solution is sterilized at 120 ° C for 5 min, a gel is formed, which is cooled and filtered, then 10 ml of an aqueous solution of bioregulator from cattle blood serum in a concentration of 10 -8 -10 -10 -10 mg / ml is added to the resulting gel. Mix thoroughly for 15-30 minutes, and get ready-to-use gel. The above amounts of chitosan (from 10 to 20 g) were selected because at this chitosan content a gel with a certain pore size is formed, through which the bioregulator is most effectively released to the wound surface, which ensures maximum efficiency of the anti-burn agent.
При нанесении на ожоговую поверхность противоожогового геля тонким слоем образуется пленка, которая проницаема для воздуха, но при этом препятствует проникновению и размножению микроорганизмов на раневой поверхности за счет бактерицидного и бактериостатического действия салициловой кислоты и хитозана, соответственно. Кроме того, из образовавшейся пленки на раневую поверхность поступает вышеуказанный биорегулятор и оказывает регуляторное морфогенетическое действие, за счет этого достигается технический результат в виде эффективного противоожогового действия и восстановления повреждения. Было показано также, что существенно снижается болевой эффект немедленно после нанесения геля на ожоговую поверхность.When a thin layer is applied to the burn surface of the anti-burn gel, a film is formed that is permeable to air, but at the same time prevents the penetration and multiplication of microorganisms on the wound surface due to the bactericidal and bacteriostatic action of salicylic acid and chitosan, respectively. In addition, from the formed film, the aforementioned bioregulator enters the wound surface and exerts a regulatory morphogenetic effect, due to this a technical result is achieved in the form of an effective anti-burn effect and damage repair. It was also shown that the pain effect is significantly reduced immediately after applying the gel to the burn surface.
Изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами получения и примерами конкретных составов заявляемого противоожогового геля, а также фигурами 1-7, демонстрирующими противоожоговое действие предлагаемых гелеобразных составов.The invention is illustrated by the following production examples and examples of specific compositions of the inventive anti-burn gel, as well as figures 1-7, demonstrating the anti-burn effect of the proposed gel-like compositions.
Краткое описание чертежейBrief Description of the Drawings
Фиг.1. Заживление раны кожи крысы после ожога на 14 сутки: а) - контроль (рана не обрабатывалась); б) - обработка солкосерил-гелем; в) - обработка хитозановым гелем, не содержащим биорегулятор сыворотки крови; г) - обработка противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови. Цифрами обозначены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - волосяные фолликулы, 4 - струп, 5 - очаг воспаления.Figure 1. Wound healing of rat skin after a burn on day 14: a) control (the wound was not treated); b) - treatment with solcoseryl gel; c) - treatment with chitosan gel that does not contain a serum bioregulator; d) - treatment with an anti-burn gel containing a serum bioregulator. The numbers indicate: 1 - epithelium, 2 - dermis, 3 - hair follicles, 4 - scab, 5 - focus of inflammation.
Фиг.2. Заживление раны кожи крысы после ожога на 25 сутки: а) - контроль (рана не обрабатывалась); б) - обработка солкосерил-гелем; в) - обработка хитозановым гелем, не содержащим биорегулятор сыворотки крови; г) - обработка противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови. Цифрами обозначены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - волосяные фолликулы, 4 - струп, 5 - очаг воспаления.Figure 2. Wound healing of rat skin after a burn on day 25: a) control (the wound was not treated); b) - treatment with solcoseryl gel; c) - treatment with chitosan gel that does not contain a serum bioregulator; d) - treatment with an anti-burn gel containing a serum bioregulator. The numbers indicate: 1 - epithelium, 2 - dermis, 3 - hair follicles, 4 - scab, 5 - focus of inflammation.
Фиг.3. Заживление раны кожи крысы после ожога и обработки противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови: а) - на 14 сутки; б) - на 25 сутки. Цифрами обозначены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - волосяные фолликулы, 4 - струп, 5 - очаг воспаления.Figure 3. Wound healing of rat skin after a burn and treatment with an anti-burn gel containing a blood serum bioregulator: a) on day 14; b) - on the 25th day. The numbers indicate: 1 - epithelium, 2 - dermis, 3 - hair follicles, 4 - scab, 5 - focus of inflammation.
Фиг.4. Заживление раны кожи крысы после ожога и обработки противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови: а) - на 14 сутки; б) - на 25 сутки. Цифрами обозначены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - волосяные фолликулы, 4 - очаг воспаления.Figure 4. Wound healing of rat skin after a burn and treatment with an anti-burn gel containing a blood serum bioregulator: a) on day 14; b) - on the 25th day. The numbers indicate: 1 - epithelium, 2 - dermis, 3 - hair follicles, 4 - the focus of inflammation.
Фиг.5. Состояние кожи крысы после ожога в контрольной группе (обработки раны не проводили): а, б - на 6 сутки; в - на 12 сутки; г, д - на 18 сутки.Figure 5. The condition of the skin of the rat after a burn in the control group (wound treatment was not performed): a, b - on the 6th day; in - on the 12th day; g, d - on the 18th day.
а, в, г - макроскопическая картина; б, д - микроскопическая картина.a, c, d - macroscopic picture; b, e - microscopic picture.
Фиг.6. Состояние кожи крысы после ожога в группе, где обработку раны проводили хитозановым гелем, не содержащим биорегулятор сыворотки крови: а, б - на 6 сутки; в, г - на 12 сутки; д - на 18 сутки.6. The skin condition of the rat after a burn in the group where the wound was treated with chitosan gel that does not contain a blood serum bioregulator: a, b - on the 6th day; c, d - on the 12th day; d - on the 18th day.
а, в, д - макроскопическая картина; б, г - микроскопическая картина.a, c, d - macroscopic picture; b, d - microscopic picture.
Фиг.7. Состояние кожи крысы после ожога в группе, где обработку раны проводили противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови: а, б - на 6 сутки; в, г - на 12 сутки; д, е - на 18 сутки.7. The skin condition of the rat after a burn in the group where the wound was treated with an anti-burn gel containing a blood serum bioregulator: a, b - on the 6th day; c, d - on the 12th day; d, e - on the 18th day.
а, в, д - макроскопическая картина; б, г, е - микроскопическая картина.a, c, d - macroscopic picture; b, d, e - microscopic picture.
Пример 1.Example 1
Получение противоожогового геля.Obtaining anti-burn gel.
Хитозан, салициловую кислоту и биорегулятор сыворотки крови (КРС) используют при следующем соотношении компонентов, (мас.%):Chitosan, salicylic acid and a serum bioregulator (Bovine) are used in the following ratio of components (wt.%):
Хитозан - 1,0Chitosan - 1.0
Салициловая кислота - 0,3Salicylic acid - 0.3
Биорегулятор сыворотки крови крупного рогатого скота - 10-10 Cattle serum bioregulator - 10 -10
Вода - остальное (98,7).Water - the rest (98.7).
Растворяют 10 г хитозана в 1 л воды в присутствии 3 г салициловой кислоты при 50°С. Раствор стерилизуют при 120°С в течение 5 мин, охлаждают, фильтруют и прибавляют 10 мл водного раствора биорегулятора из сыворотки крови КРС в концентрации 10-9 мг/мл.Dissolve 10 g of chitosan in 1 l of water in the presence of 3 g of salicylic acid at 50 ° C. The solution is sterilized at 120 ° C for 5 min, cooled, filtered and 10 ml of an aqueous solution of bioregulator from cattle blood serum at a concentration of 10 -9 mg / ml are added.
Пример 2.Example 2
Хитозан, салициловую кислоту и биорегулятор сыворотки крови КРС используют при следующем соотношении компонентов, (мас.%):Chitosan, salicylic acid and serum bioregulator of cattle are used in the following ratio of components (wt.%):
Хитозан - 2,0Chitosan - 2.0
Салициловая кислота - 0,3Salicylic acid - 0.3
Биорегулятор сыворотки крови крупного рогатого скота - 10-11 Cattle serum bioregulator - 10 -11
Вода - остальное (97,7).Water - the rest (97.7).
Растворяют 20 г хитозана в 1 л воды в присутствии и 3 г салициловой кислоты при 50°С. Раствор стерилизуют при 120°С в течение 5 мин, охлаждают, фильтруют и прибавляют 10 мл водного раствора биорегулятора из сыворотки крови КРС в концентрации 10-10 мг/мл.Dissolve 20 g of chitosan in 1 l of water in the presence of and 3 g of salicylic acid at 50 ° C. The solution is sterilized at 120 ° C for 5 minutes, cooled, filtered and 10 ml of an aqueous solution of bioregulator from cattle blood serum at a concentration of 10 -10 mg / ml are added.
Пример 3.Example 3
Хитозан, салициловую кислоту и биорегулятор из сыворотки крови КРС используют при следующем соотношении компонентов, (мас.%):Chitosan, salicylic acid and a serum bioregulator from cattle are used in the following ratio of components (wt.%):
Хитозан - 1,0Chitosan - 1.0
Салициловая кислота - 0,4Salicylic acid - 0.4
Биорегулятор из сыворотки крови крупного рогатого скота - 10-9 Bovine serum bioregulator - 10 -9
Вода - остальное (98,6).Water - the rest (98.6).
Растворяют 10 г хитозана в 1 л воды в присутствии 4 г салициловой кислоты при 50°С. Раствор стерилизуют при 120°С в течение 5 мин, охлаждают, фильтруют и добавляют 10 мл водного раствора биорегулятора из сыворотки крови КРС в концентрации 10-8 мг/мл.Dissolve 10 g of chitosan in 1 l of water in the presence of 4 g of salicylic acid at 50 ° C. The solution is sterilized at 120 ° C for 5 minutes, cooled, filtered and 10 ml of an aqueous solution of bioregulator from cattle blood serum at a concentration of 10 -8 mg / ml are added.
Противоожоговое действие описываемой гелевой композиции было изучено на модели ожога кожи in vivo.The anti-burn effect of the described gel composition was studied in an in vivo model of a skin burn.
Исследование проводили на крысах (самцы F1 Cambell×Wistar) в течение 25 суток. Ожог вызывали на спине стеклянной пробиркой с кипящей водой (диаметр 2 см). Поврежденную поверхность кожи смазывали ежедневно:The study was performed on rats (F1 Cambell × Wistar males) for 25 days. The burn was caused on the back with a glass tube with boiling water (
1 группа - противоожоговый гель, содержащий биорегулятор из сыворотки крови КРС.Group 1 - anti-burn gel containing a bioregulator from cattle blood serum.
2 группа - препарат, содержащий хитозановый гель и все компоненты, кроме биорегулятора из сыворотки крови КРС.Group 2 - a drug containing chitosan gel and all components except the bioregulator from cattle blood serum.
3 группа - солкосерил-гель для глаз.Group 3 - solcoseryl gel for the eyes.
В контроле - ничем не смазывали.In control, they did not lubricate anything.
Фрагменты кожи выделяли на 14-е и 25-е сутки, далее их фиксировали в растворе Буэна. Гистологические срезы толщиной 11 мкм окрашивали гематоксилином-эозином по стандартной методике.Skin fragments were isolated on the 14th and 25th days, then they were fixed in Buen's solution. Histological sections 11 μm thick were stained with hematoxylin-eosin according to standard methods.
В опытных и контрольной группах, после предварительного удаления шерсти на спинке, вызывали ожог кипятком. Получали термические поражения II-IIIA степени площадью около 4 см2. На следующий день крысам смазывали поверхность ожога соответствующим гелем, в контроле - ничем не смазывали.In the experimental and control groups, after preliminary removal of wool on the back, a burn was caused by boiling water. Received thermal damage II-IIIA degree of an area of about 4 cm 2 . The next day, the rats were lubricated with the burn surface with the appropriate gel, in the control they were not lubricated with anything.
Пример 4.Example 4
В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный по способу, аналогичному описанному в примере 1.As an anti-burn gel used the drug obtained by the method similar to that described in example 1.
Состояние животных плохое, обожженная поверхность резко отечна. Кожа обожженной поверхности восковидная, горячая, гиперемирована, происходит выход экссудата. В контроле на следующие сутки отечность увеличивалась еще больше, появлялись изъязвления, заполненные некротическими массами. Во всех случаях в зоне раны отмечены признаки воспаления: расширение сосудов дермы под раневой поверхностью и ее клеточная инфильтрация, выраженные, однако не одинаково в различных группах. К концу 1-й недели у всех животных в контроле на поверхности ран формировался первичный струп, а в опыте гель застывал в виде плотной корки. На 12 день наблюдали в контроле влажную рану после ожога, которая плохо заживала. Картина заживления, после ожога под воздействием гелей проходила в случае без биорегулятора сыворотки крови незначительно. Наиболее благоприятную картину наблюдали в случае опыта в 1 и 3 группах. Лучшую картину наблюдали в случае противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС. К 25 суткам ожоги почти у всех крыс зажили. На гистологических срезах наблюдали следующую картину заживления раны после ожога. В случае контроля на 14 сутки после ожога наблюдали практически полную реэпителизацию, струп прилегал неплотно к коже. Наблюдали незначительное воспаление в дерме и мышечном слое. Некроз волосяных фолликулов. В мышечном слое наблюдались полости между волокнами, образовавшиеся в результате воспаления. Под эпителием видны скопления нейтрофилов. Грануляционная ткань волокнисто-клеточная (Фиг.1а). К 25 суткам образовался соединительно-тканный рубец на месте ожога с незначительным присутствием нейтрофилов, наблюдали некроз волосяных фолликулов. Струп практически полностью отслоился (Фиг.2а).The animals are in poor condition, the burned surface is sharply swollen. The skin of the burned surface is waxy, hot, hyperemic, exudate is released. In the control the next day, puffiness increased even more, ulceration appeared, filled with necrotic masses. In all cases, signs of inflammation were noted in the wound zone: expansion of the vessels of the dermis under the wound surface and its cellular infiltration, expressed, however, not the same in different groups. By the end of the 1st week, in all control animals, a primary scab formed on the surface of the wounds, and in the experiment the gel solidified in the form of a dense crust. On day 12, a wet wound was observed in the control after a burn, which did not heal well. The healing pattern, after a burn under the influence of gels, did not occur significantly in the case without a blood serum bioregulator. The most favorable picture was observed in the case of the experiment in
В случае солкосерил-геля (3 группа) наблюдали на 14 сутки некроз волосяных фолликулов, практически полную реэпителизацию, струп прилегает к поверхности эпителия не плотно. В коже наблюдается сильное воспаление с инфильтрацией нейтрофилов сразу под эпителием, в мышечном слое наблюдаются полости между волокнами в результате воспаления. Грануляционная ткань больше клеточная, чем волокнистая (Фиг.1б).In the case of solcoseryl gel (group 3), necrosis of hair follicles, almost complete re-epithelization, were observed on day 14, the scab is not tight on the surface of the epithelium. In the skin there is severe inflammation with neutrophil infiltration immediately below the epithelium, in the muscle layer there are cavities between the fibers as a result of inflammation. Granulation tissue is more cellular than fibrous (Fig.1b).
На 25 сутки произошла полная реэпителизация с выраженным многоклеточным эпителием, практически полное отслоение струпа. В дерме наблюдается незначительное воспаление и гранулы гемосидерина. Образуется фиброзный рубец, коллагеновые волокна не рыхлые. Волосяных фолликулов в области повреждения не наблюдается (Фиг.2б).On day 25, complete reepithelialization with pronounced multicellular epithelium, almost complete detachment of the scab occurred. In the dermis, slight inflammation and granules of hemosiderin are observed. A fibrous scar is formed, collagen fibers are not loose. Hair follicles in the area of damage is not observed (Fig.2b).
В случае с хитозановым гелем, не содержащим биорегулятор сыворотки крови КРС (группа 2), наблюдали на 14 сутки практически на всей поверхности раны плотное прилегание струпа, реэпителизация была не полной, в области раны под эпителием наблюдали воспаление с инфильтрацией нейтрофилов. Формировалась рубцовая ткань. Также воспаление наблюдали и в прилежащем мышечном слое. Волосяных фолликулов в области раны не наблюдали. Грануляционная ткань была клеточно-волокнистая (Фиг.1в).In the case of a chitosan gel that did not contain cattle bioregulator (group 2), a close fit of the scab was observed on day 14 on almost the entire surface of the wound, re-epithelialization was incomplete, inflammation with neutrophil infiltration was observed in the wound area under the epithelium. Scar tissue was formed. Inflammation was also observed in the adjacent muscle layer. No hair follicles were observed in the wound area. The granulation tissue was cell-fibrous (Fig. 1c).
На 25 сутки наблюдали полную эпителизацию, но сильное воспаление осталось в дерме с инфильтрацией лейкоцитов. Происходит образование волокнистой рубцовой ткани. Струп отслоился не во всех местах и плотно прилегает в некоторых участках к эпителию (Фиг.2в). В случае применения противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС (группа 1), на 14 сутки после ожога наблюдали практически полную реэпителизацию с хорошо развитым многослойным эпителием. Струп в некоторых местах отходит и прикреплен плотно лишь в месте неполной эпителизации. Эпителий, вновь образованный многослойный, хорошо развит, наблюдаются врастания тяжей в область дермы (предположительно формирование новых волосяных фолликулов). Воспаление в коже практически отсутствует, лишь незначительные участки инфильтрации нейтрофилов под эпителием. Мышечный слой хорошо развит и сохранен. Грануляционная ткань клеточно-волокнистая (Фиг.1г). На 25 сутки наблюдали практически полное отслоение струпа, полную эпителизацию. Незначительное воспаление в области дермы. Хорошо развита волокнистая и мышечная ткань. Видны скопления гемосидерина (Фиг.2г).On day 25, complete epithelization was observed, but severe inflammation remained in the dermis with leukocyte infiltration. The formation of fibrous scar tissue. The scab did not exfoliate in all places and fits snugly in some areas to the epithelium (Figv). In the case of using an anti-burn gel containing cattle bioregulator (group 1), on the 14th day after the burn, almost complete re-epithelization with a well-developed multilayer epithelium was observed. The scab in some places departs and is attached tightly only in the place of incomplete epithelization. The epithelium, the newly formed stratified, is well developed, growths of strands in the dermis are observed (presumably the formation of new hair follicles). Inflammation in the skin is practically absent, only minor areas of neutrophil infiltration under the epithelium. The muscle layer is well developed and preserved. Granulation tissue cell-fibrous (Fig.1g). On day 25, almost complete scab detachment, complete epithelization were observed. Slight inflammation in the dermis. Fibrous and muscle tissue is well developed. Accumulations of hemosiderin are visible (Fig. 2d).
Пример 5.Example 5
В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный по способу, аналогичному описанному в примере 2. В случае применения противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС (группа 1), на 14 сутки после ожога наблюдали практически полную реэпителизацию с хорошо развитым многослойным эпителием. Струп в некоторых местах отходит и прикреплен плотно лишь в месте неполной эпителизации. Эпителий, вновь образованный многослойный, хорошо развит, наблюдаются врастания тяжей в область дермы (предположительно формирование новых волосяных фолликулов). Воспаление в коже практически отсутствует, лишь незначительные участки инфильтрации нейтрофилов под эпителием. Мышечный слой хорошо развит и сохранен. Грануляционная ткань клеточно-волокнистая (Фиг.3а). На 25 сутки наблюдали практически полное отслоение струпа, полную эпителизацию. Незначительное воспаление в области дермы. Хорошо развита волокнистая и мышечная ткань. Видны скопления гемосидерина (Фиг.3б).As the anti-burn gel, we used the preparation obtained by the method similar to that described in Example 2. In the case of the use of the anti-burn gel containing cattle bioregulator (group 1), almost complete re-epithelization with a well-developed multilayer epithelium was observed on the 14th day after the burn. The scab in some places departs and is attached tightly only in the place of incomplete epithelization. The epithelium, the newly formed stratified, is well developed, growths of strands in the dermis are observed (presumably the formation of new hair follicles). Inflammation in the skin is practically absent, only minor areas of neutrophil infiltration under the epithelium. The muscle layer is well developed and preserved. Granulation tissue cell-fibrous (Figa). On day 25, almost complete scab detachment, complete epithelization were observed. Slight inflammation in the dermis. Fibrous and muscle tissue is well developed. Accumulations of hemosiderin are visible (Fig. 3b).
Пример 6.Example 6
В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный по способу, аналогичному описанному в примере 3.As an anti-burn gel used the drug obtained by the method similar to that described in example 3.
В случае применения противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС (группа 1), на 14 сутки после ожога наблюдали практически полную реэпителизацию с хорошо развитым многослойным эпителием. Эпителий, вновь образованный многослойный, хорошо развит, наблюдаются врастания тяжей в область дермы (предположительно формирование новых волосяных фолликулов). Воспаление в коже практически отсутствует, лишь незначительные участки инфильтрации нейтрофилов под эпителием. Мышечный слой хорошо развит и сохранен. Грануляционная ткань клеточно-волокнистая (Фиг.4а). На 25 сутки наблюдали практически полное отслоение струпа, полную эпителизацию. Незначительное воспаление в области дермы. Хорошо развита волокнистая и мышечная ткань. Видны скопления гемосидерина (Фиг.4б). По эффективности противоожогового действия изучаемый противоожоговый препарат, содержащий биорегулятор сыворотки крови КРС, превосходит примененные в качестве препарата сравнения Солкосерил-гель и действие препарата, не содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС.In the case of using an anti-burn gel containing cattle bioregulator (group 1), on the 14th day after the burn, almost complete re-epithelization with a well-developed multilayer epithelium was observed. The epithelium, the newly formed stratified, is well developed, growths of strands in the dermis are observed (presumably the formation of new hair follicles). Inflammation in the skin is practically absent, only minor areas of neutrophil infiltration under the epithelium. The muscle layer is well developed and preserved. Granulation tissue cell-fibrous (Figa). On day 25, almost complete scab detachment, complete epithelization were observed. Slight inflammation in the dermis. Fibrous and muscle tissue is well developed. Accumulations of hemosiderin are visible (Fig. 4b). According to the effectiveness of the anti-burn action, the studied anti-burn drug containing the cattle bioregulator is superior to Solcoseryl-gel used as the comparison drug and the effect of the drug that does not contain cattle bioregulator.
Кроме того, дополнительно было проведено исследование противоожоговой активности на модели, со значительно большей поверхностью повреждения.In addition, an additional study of anti-burn activity was carried out on a model with a significantly larger damage surface.
Объектом исследования явились 3 группы лабораторных животных (белых крыс потомков семейства Вистар, массой 200-280 г, мужского пола), с забоем на 6, 12 и 18 сутки после ожога. Контрольная группа (1 группа) составила 5 животных, 2-3 группы составили по 15 животных, всего 35 животных.The object of the study were 3 groups of laboratory animals (white rats of descendants of the Wistar family, weighing 200-280 g, male), with a slaughter on the 6th, 12th and 18th day after the burn. The control group (1 group) was 5 animals, 2-3 groups were 15 animals each, a total of 35 animals.
Соответственно:Respectively:
1 группа (контроль) 5 крыс - обработки раны не производилось,1 group (control) 5 rats - no wound treatment was performed,
2 группа 15 крыс - обработка препаратом, содержащим хитозановый гель и все компоненты кроме биорегулятора сыворотки крови КРС,
3 группа 15 крыс - обработка противоожоговым гелем, содержащим биорегулятор сыворотки крови КРС.3 group of 15 rats - treatment with an anti-burn gel containing cattle bioregulator.
Всем животным наносилась стандартная ожоговая рана кожи и мягких тканей спины с предварительным удалением волосяного покрова. С использованием специального устройства достигался ожог II - III А степени общей площадьюAll animals were inflicted with a standard burn wound of the skin and soft tissues of the back with preliminary removal of the hair. Using a special device, a burn of the II - III A degree with a total area of
10-12 см 2. В каждой группе моделировалась ожоговая травма на спинке крыс площадью 10% поверхности тела.10-12 cm 2 . In each group, a burn injury was simulated on the back of rats with an area of 10% of the body surface.
Во 2 и 3 группах в лечении ожоговой раны применялись гели, соответственно, не содержащий биорегулятор сыворотки крови КРС и содержащий последний в своем составе. Ожоговая рана оставалась открытой.In
На 6-е, 12-е и 18-е сутки после нанесения ожога производился вывод животных из эксперимента (по 5 крыс из 2 и 3 групп и по 1-2 крысы из группы контроля) с одновременной визуальной оценкой раны (площадь, наличие грануляций, отека краев раны, степень эпителизации, наличие гнойных выделений) и забором материала из раны для гистологического исследования.On the 6th, 12th and 18th day after applying the burn, the animals were withdrawn from the experiment (5 rats from 2 and 3 groups and 1-2 rats from the control group) with simultaneous visual assessment of the wound (area, granulation swelling of the edges of the wound, the degree of epithelization, the presence of purulent discharge) and the collection of material from the wound for histological examination.
Из спины лабораторных животных вырезался плоскостной лоскут ткани площадью 15-17 см и немедленно фиксировался в 10-12% растворе нейтрального (забуференного) формальдегида. Ч/з 1-2 суток после фиксации проводилась «вырезка» стандартных кусочков ткани объемом 1 см3 из центра и периферических отделов раны. Кусочки проводились ч/з батарею спиртов и заливались в фиксатор «Гистомикс». Из залитых в гистомикс кусочков на санном микротоме МС-5 приготавливались гистологические срезы толщиной 7 мкм. Которые впоследствии окрашивались гематоксилином Эрлиха и пикрофуксиновой взвесью по методу Ван-Гизона. Гистологические срезы микроскопировались со стандартным и иммерсионным увеличением (объектив ×90). Выявленные гистологические изменения с помощью цифровой окулярной вставки регистрировались и заносились в память персонального компьютера (с возможностью последующей «распечатки»).A flat tissue flap with an area of 15-17 cm was cut from the back of laboratory animals and immediately fixed in a 10-12% solution of neutral (buffered) formaldehyde. B / w 1-2 days after fixation was carried out "clipping" of standard pieces of tissue with a volume of 1 cm 3 from the center and peripheral sections of the wound. Pieces were carried out via a battery of alcohols and poured into the Histomix retainer. Histological sections with a thickness of 7 μm were prepared from pieces poured into the histomyx on the lignum microtome MS-5. Which were subsequently stained with Ehrlich hematoxylin and picrofuchsin suspension according to the Van Gieson method. Histological sections were microscopic with standard and immersion magnification (objective × 90). Identified histological changes using digital ocular insertion were recorded and entered into the memory of a personal computer (with the possibility of subsequent "listing").
Пример 7. В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный, как описано в примере 1.Example 7. As an anti-burn gel used the drug obtained as described in example 1.
Морфологическое изучение влияния противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, на течение репаративных процессов при ожогах II-III А степени на 6, 12, 18 сутки по окончании эксперимента.Morphological study of the effect of an anti-burn gel containing cattle bioregulator on the course of reparative processes in burns of the II-III A degree on
В 1-й контрольной группе выявлено:In the 1st control group revealed:
На 6 сутки - отмечено формирование «четкого» темного серо-коричневого струпа, плотно спаянного с окружающими тканями. Под ними резко выраженные альтернативные изменения: некроз плоского эпителия, волосяных фолликулов, в ряде случаев окруженный зоной геморрагического пропитывания, резкий межуточный отек (Фиг.5а).On the 6th day - the formation of a “clear” dark gray-brown scab, tightly bonded with the surrounding tissues, was noted. Under them, pronounced alternative changes: necrosis of squamous epithelium, hair follicles, in some cases surrounded by a zone of hemorrhagic impregnation, a sharp interstitial edema (Figa).
Выявлено начало формирования незрелой грануляционной ткани в краевых отделах плоскостной ожоговой раны. При этом в лимфо-плазмоклеточных инфильтратах определялись новообразованные сосуды, некротические фокусы выявлены в прилегающей к ране поперечнополосатой мускулатуре (Фиг.5б).The beginning of the formation of immature granulation tissue in the marginal sections of a flat burn wound was revealed. At the same time, newly formed vessels were determined in the lymph-plasma cell infiltrates, necrotic foci were revealed in the striated muscles adjacent to the wound (Fig.5b).
На 12 сутки - плотное прилегание струпа определялось не на всем протяжении ожоговой раны. Имелись единичные участки отторжения фибринозного струпа, фокусы образования одно- и многорядного эпителия в этих участках. Фокусы некроза заметно уменьшились в объеме (в плоском эпителии некроз отсутствовал вообще), единичные участки отмечены в поперечнополосатой мускулатуре. В инфильтратах заметно меньше определялось нейтрофильных лейкоцитов (гранулоцитов), плотность инфильтратов значительно уменьшилась (Фиг.5в).On the 12th day - the tight fit of the scab was not determined throughout the burn wound. There were single sites of rejection of the fibrinous scab, the foci of the formation of single and multi-row epithelium in these areas. The foci of necrosis markedly decreased in volume (in the squamous epithelium, there was no necrosis at all), single sites were noted in the striated muscles. In the infiltrates, neutrophilic leukocytes (granulocytes) were significantly less detected, the density of infiltrates decreased significantly (Fig. 5c).
На 18 сутки - отмечалось лишь «фрагментарное» прилегание струпа не на всем протяжении ожоговой раны. Имеющаяся под струпом грануляционная ткань приобретала характер волокнисто-клеточной. В ней все же имелись «целлюлярные» фокусы некроза и зоны геморрагической инфильтрации. Единичные участки некротических изменений отмечены и в поперечнополосатой мускулатуре. Краевые зоны раны содержали уже многорядный плоский эпителий (Фиг.5г, д).On the 18th day - there was only a "fragmentary" fit of the scab not throughout the burn wound. The granulation tissue under the scab acquired the character of a fibrous cell. In it, nevertheless, there were “cellular” foci of necrosis and the hemorrhagic infiltration zone. Single sites of necrotic changes are noted in the striated muscles. The marginal zones of the wound already contained a multi-row squamous epithelium (Fig. 5d, d).
Во 2 группе на 6 сутки макроскопически выявлено достаточно однородное, плотное прикрепление фибриново-лейкоцитарной пленки струпа к поверхности ожоговой раны (Фиг.6а). Гистологически определялся коагуляционный некроз как плоского эпителия, волосяных фолликулов, так и большой площади поперечнополосатой мускулатуры спины. В гистологических срезах определялась четкая демаркационная линия из лимфо-лейкоцитарных инфильтратов (Фиг.6б).In
На 12 сутки после применения геля, не содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, в лечении ожоговой раны макроскопически струп был сохранен на значительных фрагментах плоскостной ожоговой раны.On the 12th day after the application of the gel, which did not contain cattle bioregulator, in the treatment of a burn wound, the scab was macroscopically stored on significant fragments of a flat burn wound.
Микроскопически определялись признаки выраженного некроза с воспалительной инфильтрацией межуточной ткани мышц. Густая воспалительная инфильтрация наблюдалась в области перимизия поверхностных слоях мышц (Фиг.6в, г).Signs of severe necrosis with inflammatory infiltration of the interstitial muscle tissue were determined microscopically. Dense inflammatory infiltration was observed in the perimizion region of the superficial muscle layers (Fig.6c, d).
На 18 сутки в ожоговой ране после применения геля, не содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, макроскопически выявлено, что струп сохраняется лишь на отдельных фрагментах плоскостной раны. Цвет струпа - темно-коричнево-серый.On the 18th day in a burn wound after application of a gel that does not contain cattle bioregulator, macroscopically revealed that the scab remains only on individual fragments of a planar wound. The color of the scab is dark brown-gray.
Микроскопически определено, что плоский эпителий не полностью покрывает ожоговый дефект. «Наметившаяся» эпителизация слаба - лишь в краевых отделах ожоговой раны имеются одно-двурядные полоски плоского эпителия, под которым и в центральных отделах раны отмечено разрастание незрелой грануляционной ткани клеточно-волокнистого строения. В последней отмечены «целлюлярные» фокусы некроза, масса нейтрофилов и многочисленные макрофагальные клеточные элементы. Отмечены и признаки очагового миолиза (Фиг.6д).Microscopically determined that the squamous epithelium does not completely cover the burn defect. The "outlined" epithelization is weak - only in the marginal divisions of the burn wound there are single-banded strips of squamous epithelium, under which in the central divisions of the wound the growth of immature granulation tissue of the cell-fibrous structure is noted. In the latter, “cellular” foci of necrosis, the mass of neutrophils, and numerous macrophage cell elements are noted. Marked signs of focal myolysis (Fig.6d).
В 3-й группе (с применением противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС) на 6 сутки макроскопически отмечено плотное прилегание корки струпа к ожоговой раневой поверхности, струп был сохранен почти на всей площади ожоговой раны. Однако появлялись единичные «фестончатые» окна в корке струпа (Фиг.7а). Микроскопически определялись фокусы некроза поверхностных слоев плоского эпителия, мышечных волокон, единичных волосяных фолликулов. Отмечался также отек и разволокнение коллагеновых волокон в глубоких слоях дермы. Имелись признаки напряженности иммунитета - густые внутриэпителиальные инфильтраты (Фиг.7б).In the 3rd group (using an anti-burn gel containing cattle bioregulator) on
На 12 сутки макроскопическая картина изменений заключалась в мозаичном плотном «прилегании» струпа с наличием «неполных» окон в фибриново-лейкоцитарной корке (Фиг.7в).On day 12, the macroscopic picture of the changes consisted in a mosaic tight “fit” of the scab with the presence of “incomplete” windows in the fibrin-leukocyte cortex (Fig. 7c).
Гистологически выявлены мозаичные очаги некроза под пленкой струпа как в фиброзной основе дермы, волосяных фолликулов, так и в поверхностных слоях поперечнополосатой мышце (Фиг.7г). На 18 сутки в ожоговой ране после применения геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, макроскопически отмечена множественная «фрагментация» в прилегании струпа к ожоговой поверхности. Очень многочисленны фестончатые окна (Фиг.7д).Histologically revealed mosaic foci of necrosis under the scab film both in the fibrous base of the dermis, hair follicles, and in the superficial layers of the striated muscle (Fig. 7g). On the 18th day in the burn wound after application of the gel containing the cattle bioregulator, multiple "fragmentation" was observed macroscopically in the scab adhering to the burn surface. Very numerous scalloped windows (Fig.7d).
Микроскопически некроза поверхностных и глубоких мышечных волокон нет. Отмечена эпителизация дефектов дермы и мышечной ткани за счет кератоакантотических тяжей плоского эпителия. Под слоем фибриново-лейкоцитарной пленки четко сформированная полоска (двух- трехрядного) плоского эпителия (Фиг.7е).Microscopically, there is no necrosis of the superficial and deep muscle fibers. Epithelialization of defects of the dermis and muscle tissue due to keratoacanthotic strands of squamous epithelium was noted. Under the layer of fibrin-leukocyte film, a clearly formed strip (two-three-row) squamous epithelium (Fig.7e).
Т.е. можно сделать заключение, что в эти сроки происходит законченная и полная эпителизация плоскостной ожоговой раны, что показывает на преимущества геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС в ее лечении.Those. we can conclude that during these periods there is complete and complete epithelization of the squamous burn wound, which indicates the advantages of a gel containing cattle bioregulator in its treatment.
Пример 8.Example 8
В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный по способу аналогичному в примере 2.As an anti-burn gel used the drug obtained by the method similar to in example 2.
В 3-й группе (с применением противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС) на 6 сутки макроскопически отмечено плотное прилегание корки струпа к ожоговой раневой поверхности, струп был сохранен почти на всей площади ожоговой раны.In the 3rd group (using an anti-burn gel containing cattle bioregulator) on
Микроскопически определялись фокусы некроза поверхностных слоев плоского эпителия, мышечных волокон, единичных волосяных фолликулов. Отмечался также отек коллагеновых волокон в глубоких слоях дермы. Имелись густые внутриэпителиальные инфильтраты.The foci of necrosis of the superficial layers of squamous epithelium, muscle fibers, single hair follicles were microscopically determined. Edema of collagen fibers in the deep layers of the dermis was also noted. There were thick intraepithelial infiltrates.
На 12 сутки макроскопическая картина изменений заключалась в мозаичном плотном «прилегании» струпа.On the 12th day, the macroscopic picture of the changes consisted in a mosaic tight “fit” of the scab.
Гистологически выявлены мозаичные очаги некроза под пленкой струпа как в фиброзной основе дермы, волосяных фолликулов, так и в поверхностных слоях поперечнополосатой мышце.Histologically revealed mosaic foci of necrosis under the scab film both in the fibrous base of the dermis, hair follicles, and in the superficial layers of the striated muscle.
На 18 сутки в ожоговой ране после применения геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, макроскопически отмечена множественная «фрагментация» в прилегании струпа к ожоговой поверхности.On the 18th day in the burn wound after application of the gel containing the cattle bioregulator, multiple "fragmentation" was observed macroscopically in the scab adhering to the burn surface.
Микроскопически некроза поверхностных и глубоких мышечных волокон нет. Отмечена эпителизация дефектов дермы и мышечной ткани за счет кератоакантотических тяжей плоского эпителия. Под слоем фибриново-лейкоцитарной пленки четко сформированная полоска (двух- трехрядного) плоского эпителия.Microscopically, there is no necrosis of the superficial and deep muscle fibers. Epithelialization of defects of the dermis and muscle tissue due to keratoacanthotic strands of squamous epithelium was noted. Under the layer of fibrin-leukocyte film, a clearly formed strip of (two-three-row) squamous epithelium is formed.
Т.е. можно сделать заключение, что в эти сроки происходит законченная и полная эпителизация плоскостной ожоговой раны, что показывает на преимущества геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, в ее лечении.Those. we can conclude that within these periods complete and complete epithelization of the squamous burn wound occurs, which indicates the advantages of the gel containing cattle bioregulator in its treatment.
Пример 9.Example 9
В качестве противоожогового геля использовали препарат, полученный по способу аналогичному в примере 3.As an anti-burn gel used the drug obtained by the method similar to in example 3.
В 3-й группе (с применением противоожогового геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС) на 6 сутки макроскопически струп был сохранен почти на всей площади ожоговой раны. Однако появлялись единичные «фестончатые» окна в корке струпа.In the 3rd group (using an anti-burn gel containing a cattle bioregulator) for 6 days, the scab was macroscopically preserved over almost the entire area of the burn wound. However, single “scalloped” windows appeared in the scab crust.
Микроскопически определялись фокусы некроза плоского эпителия, мышечных волокон, волосяных фолликулов. Отмечалось также разволокнение коллагеновых волокон в глубоких слоях дермы.The focuses of necrosis of squamous epithelium, muscle fibers, and hair follicles were microscopically determined. Collagen fibers in the deeper layers of the dermis were also observed to be loose.
На 12 сутки макроскопическая картина изменений заключалась в наличии «неполных» окон в фибриново-лейкоцитарной корке.On the 12th day, the macroscopic picture of the changes consisted of the presence of “incomplete” windows in the fibrin-leukocyte cortex.
Гистологически выявлены очаги некроза как в дерме, волосяных фолликулах, так и в поверхностных слоях поперечнополосатой мышцы.Foci of necrosis were histologically revealed both in the dermis, hair follicles, and in the superficial layers of the striated muscle.
На 18 сутки в ожоговой ране после применения геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС макроскопически отмечена множественная «фрагментация» в прилегании струпа к ожоговой поверхности. Очень многочисленны фестончатые окна.On the 18th day in the burn wound after applying the gel containing the cattle bioregulator, cattle macroscopically showed multiple “fragmentation” in the scab adhering to the burn surface. Scalloped windows are very numerous.
Микроскопически некроза поверхностных и глубоких мышечных волокон нет. Отмечена эпителизация дефектов дермы и мышечной ткани за счет кератоакантотических тяжей плоского эпителия. Под слоем фибриново-лейкоцитарной пленки четко сформированная полоска (двух- трехрядного) плоского эпителия.Microscopically, there is no necrosis of the superficial and deep muscle fibers. Epithelialization of defects of the dermis and muscle tissue due to keratoacanthotic strands of squamous epithelium was noted. Under the layer of fibrin-leukocyte film, a clearly formed strip of (two-three-row) squamous epithelium is formed.
Т.е. можно сделать заключение, что в эти сроки происходит законченная и полная эпителизация плоскостной ожоговой раны, что показывает на преимущества геля, содержащего биорегулятор сыворотки крови КРС, в ее лечении.Those. we can conclude that within these periods complete and complete epithelization of the squamous burn wound occurs, which indicates the advantages of the gel containing cattle bioregulator in its treatment.
В результате проведенных исследований установлено, что заявляемая гелевая композиция обладает выраженным противоожоговым действием. На 12-е и особенно на 18-е сутки происходит законченная и полная эпителизация плоскостной ожоговой раны, полное созревание грануляционной ткани, отсутствие некротических изменений поперечнополосатой мускулатуры.As a result of the studies, it was found that the inventive gel composition has a pronounced anti-burn effect. On the 12th and especially on the 18th day, the complete and complete epithelization of the flat burn wound, the complete maturation of granulation tissue, the absence of necrotic changes in the striated muscles occurs.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011114719/15A RU2481121C2 (en) | 2011-04-15 | 2011-04-15 | Anti-burn gel |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011114719/15A RU2481121C2 (en) | 2011-04-15 | 2011-04-15 | Anti-burn gel |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2481121C2 true RU2481121C2 (en) | 2013-05-10 |
Family
ID=48789647
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011114719/15A RU2481121C2 (en) | 2011-04-15 | 2011-04-15 | Anti-burn gel |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2481121C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2545798C1 (en) * | 2014-03-24 | 2015-04-10 | Закрытое акционерное общество "ФИРН М" (ЗАО "ФИРН М") | Pharmaceutical composition for immediate treatment of burns of various origins, area and depth in form of spray, gel and aerosol |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2136695C1 (en) * | 1998-03-18 | 1999-09-10 | ЗАОПП "Эндо-Фарм-А" | Serum glycoprotein showing biological activity at superlow doses |
| RU2223781C2 (en) * | 2000-07-13 | 2004-02-20 | Закрытое Акционерное Общество Производственное Предприятие "Эндо-Фарм-А" | New class of physiologically active glycoproteins |
| RU2366408C1 (en) * | 2008-07-21 | 2009-09-10 | Тихоокеанский Институт Биоорганической Химии Дальневосточного Отделения Российской Академии Наук (Тибох Дво Ран) | Gel composition of wound healing, burntreating, antiinflammatory, hepatoprotective, antidiabetic and antineoplastic action |
| RU2372922C1 (en) * | 2008-06-18 | 2009-11-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярская государственная медицинская академия имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Therapy of deep burn of skin |
-
2011
- 2011-04-15 RU RU2011114719/15A patent/RU2481121C2/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2136695C1 (en) * | 1998-03-18 | 1999-09-10 | ЗАОПП "Эндо-Фарм-А" | Serum glycoprotein showing biological activity at superlow doses |
| RU2223781C2 (en) * | 2000-07-13 | 2004-02-20 | Закрытое Акционерное Общество Производственное Предприятие "Эндо-Фарм-А" | New class of physiologically active glycoproteins |
| RU2372922C1 (en) * | 2008-06-18 | 2009-11-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярская государственная медицинская академия имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Therapy of deep burn of skin |
| RU2366408C1 (en) * | 2008-07-21 | 2009-09-10 | Тихоокеанский Институт Биоорганической Химии Дальневосточного Отделения Российской Академии Наук (Тибох Дво Ран) | Gel composition of wound healing, burntreating, antiinflammatory, hepatoprotective, antidiabetic and antineoplastic action |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2545798C1 (en) * | 2014-03-24 | 2015-04-10 | Закрытое акционерное общество "ФИРН М" (ЗАО "ФИРН М") | Pharmaceutical composition for immediate treatment of burns of various origins, area and depth in form of spray, gel and aerosol |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khorasani et al. | Aloe versus silver sulfadiazine creams for second-degree burns: a randomized controlled study | |
| CA2538093C (en) | Porifera-based therapeutic compositions for treating and preventing skin diseases | |
| US20090274769A1 (en) | Healing composition | |
| JP2018525348A (en) | Mussel adhesion protein product that suppresses skin inflammation and its application | |
| Thomas | Medicinal use of terrestrial molluscs (slugs and snails) with particular reference to their role in the treatment of wounds and other skin lesions | |
| CA2322199A1 (en) | Inorganic nitrite and organic acid in combination as topical antiviral composition | |
| EA014391B1 (en) | Pharmaceutical composition for treating burns and a method for the production thereof | |
| EP2895209B1 (en) | Improved wound healing compositions comprising microspheres | |
| US7737130B2 (en) | Pharmaceutical compositions for topical use in treatment of skin or mucous injuries | |
| CN112891615B (en) | Liquid adhesive bandage and preparation method thereof | |
| RU2481121C2 (en) | Anti-burn gel | |
| Kumari et al. | Spider web ointment: A traditional based approach in cutaneous wound healing | |
| CN111420023B (en) | Complex containing type I collagen and hyaluronic acid, preparation and application | |
| CN109820945B (en) | Composite medicine for promoting skin wound healing and hair growth and preparation method thereof | |
| RU2611400C2 (en) | Wound healing gel for external application | |
| RU2468814C1 (en) | Wound healing gel | |
| KR102457562B1 (en) | Wound healing composition comprising metal-organic framework | |
| Zhou et al. | Promoting the healing of diabetic wounds with an antimicrobial gel containing AgNPs with anti-infective and anti-inflammatory properties | |
| CN101837068B (en) | Preparation process of zanthoxylum oil spray and application thereof | |
| CN100408091C (en) | Recombination human granul ocyte-macrophage colong stimulating factor ges and its preparation method | |
| RU2521209C1 (en) | Water-soluble bactericidal reparative composition | |
| May et al. | Inflammation: a clinical perspective | |
| KR20100111061A (en) | Composition for wound healing | |
| Krasnov et al. | Burn-healing effects of a composition containing chitosan gel and a blood serum bioregulator | |
| RU2709102C2 (en) | Composition and technology for producing powders of wound healing action |