RU2480237C1 - Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals - Google Patents
Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2480237C1 RU2480237C1 RU2011146107/10A RU2011146107A RU2480237C1 RU 2480237 C1 RU2480237 C1 RU 2480237C1 RU 2011146107/10 A RU2011146107/10 A RU 2011146107/10A RU 2011146107 A RU2011146107 A RU 2011146107A RU 2480237 C1 RU2480237 C1 RU 2480237C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- anthrax
- strain
- exotoxin
- vaccine
- formalin
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарии и биотехнологии и касается получения ассоциированной вакцины для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных.The invention relates to the field of veterinary medicine and biotechnology and for the preparation of an associated vaccine for the prevention of anthrax and animal necrobacteriosis.
Известна вакцина для профилактики некробактериоза рогатого скота, содержащая в равных объемных соотношениях инактивированные формалином эндотоксин и экзотоксин, полученные из местных эпизоотических культур возбудителя некробактериоза, и адъювант на основе минерального масла и ланолина (Патент RU 1816348, МПК A61K 39/00, 1995).A vaccine for the prevention of cattle necrobacteriosis is known, containing in equal volume proportions formalin-inactivated endotoxin and exotoxin obtained from local epizootic cultures of the causative agent of necrobacteriosis, and an adjuvant based on mineral oil and lanolin (Patent RU 1816348, IPC A61K 39/00, 1995).
Однако известная вакцина недостаточно иммуногенна, так как требует двукратного введения и обеспечивает иммунитет только против некробактериоза в течение 3,5-4 мес. Кроме того, при получении вакцины осуществляют предварительный подбор местных штаммов для каждого конкретного хозяйства, что невозможно при промышленном производстве.However, the known vaccine is not sufficiently immunogenic, since it requires two-time administration and provides immunity only against necrobacteriosis for 3.5-4 months. In addition, upon receipt of the vaccine, a preliminary selection of local strains for each particular farm is carried out, which is not possible in industrial production.
Известна вакцина против сибирской язвы животных, содержащая суспензию живых спор бескапсульного, авирулентного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ возбудителя сибирской язвы (ТУ 9388-004-00008064-99). Известна также инактивированная вакцина против некробактериоза животных, содержащая инактивированные формалином эндотоксин и экзотоксин, полученные из производственного штамма "0-1" ВИЭВ возбудителя некробактериоза, и адъювант на основе минерального масла и ланолина (Патент RU 2109519, МПК A61K 39/02, A61K 39/114, 1998).Known vaccine against anthrax in animals, containing a suspension of live spores of capsule-free, avirulent vaccine strain 55-VNIIVViM of the causative agent of anthrax (TU 9388-004-00008064-99). Also known is an inactivated vaccine against animal necrobacteriosis containing formalin inactivated endotoxin and exotoxin obtained from the production strain “0-1” of the WIEV of the pathogen of necrobacteriosis, and an adjuvant based on mineral oil and lanolin (Patent RU 2109519, IPC A61K 39/02, A61K 39/02 114, 1998).
Существующие моновакцины применяют независимо друг от друга и не создают иммунитет у животных одновременно против сибирской язвы и некробактериоза. Использование этих вакцин в отдельности требует удвоенного количества трудозатрат и оказывает более сильное стрессовое состояние животных.Existing mono-vaccines are used independently of each other and do not create immunity in animals at the same time against anthrax and necrobacteriosis. The use of these vaccines separately requires twice the amount of labor and exerts a more stressful state of the animals.
Известна ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза, содержащая инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляющий собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа и адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе, и адъювант (Патент RU №2191599, 2002).An associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis is known, containing formalin inactivated leukocidin-exotoxin obtained from the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV, which is a highly purified protein with a molecular weight of 18-20 kDa and adsorbed onto aluminum hydroxide, as well as a suspension of living spores of anthrax vaccine strain 55-VNIIVViM in physiological saline, and adjuvant (Patent RU No. 2191599, 2002).
Однако известная ассоциированная вакцина не обеспечивает создание достаточного иммунитета против сибирской язвы и некробактериоза.However, the known associated vaccine does not provide sufficient immunity against anthrax and necrobacteriosis.
Задачей изобретения является повышение качества целевого продукта за счет получения высокоиммуногенной вакцины, обеспечивающей формирование более длительного и напряженного иммунитета против сибирской язвы и некробактериоза.The objective of the invention is to improve the quality of the target product by obtaining a highly immunogenic vaccine that provides the formation of a longer and more intense immunity against anthrax and necrobacteriosis.
Технический результат изобретения достигается в ассоциированной вакцине против сибирской язвы и некробактериоза, содержащей инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляющий собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа и адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе, и адъювант тем, что инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин адсорбирован 12-15% гидроокисью алюминия в гликоколевом буфере с pH 8,4-8,6, взятой в конечной концентрации 1,8-2,0%, суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ используют с исходной концентрацией (5-5,2)×107 в 1 см3 физиологического раствора, а в качестве адъюванта содержит сапонин при следующем соотношении компонентов, мас.%:The technical result of the invention is achieved in an associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis containing formalin inactivated leukocidin-exotoxin obtained from the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV, which is a highly purified protein with a molecular weight of 18-20 kDa and adsorbed on aluminum hydroxide, as well as a suspension of live spores of the anthrax vaccine strain 55-VNIIVViM in physiological saline, and an adjuvant in that the formalin inactivated leukocidin-exotoxin adsorbiro van 12-15% aluminum hydroxide in a glycol-buffered buffer with a pH of 8.4-8.6, taken in a final concentration of 1.8-2.0%, a suspension of live spores of the anthrax vaccine strain 55-VNIIVViM is used with an initial concentration (5-5 , 2) × 10 7 in 1 cm 3 of physiological saline, and as an adjuvant it contains saponin in the following ratio of components, wt.%:
Ассоциированную вакцину вводят однократно крупному рогатому скоту, овцам, козам, свиньям и северным оленям внутрикожно при помощи безыгольного инъектора в объеме 0,2 см3.The associated vaccine is administered once to cattle, sheep, goats, pigs and reindeer intradermally using a needleless injector in a volume of 0.2 cm 3 .
Сапонин-глюкозид, обусловливающий специфические свойства так наз. мыльного корня. Химический состав его, по Рохледеру, C32H54O18; /Л.Физер, М.Физер. Органическая химия. Том II. М. Химия, 1970. - с.558/.Saponin-glucoside, which determines the specific properties of the so-called. soap root. Its chemical composition, according to Rohleder, is C 32 H 54 O 18 ; / L. Fizer, M. Fizer. Organic chemistry. Volume II M. Chemistry, 1970 .-- p.558 /.
Предложена ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза, создающая длительный иммунитет у привитых животных одновременно против двух заболеваний, при этом по иммуногенности она превосходит известную вакцину против сибирской язвы и некробактериоза за счет использования не только в качестве адъюванта сапонина, а также найденного оптимального соотношения адсорбента лейкоцидин-экзотоксина - гидроокиси алюминия, взятой в определенных технологических условиях. Также уменьшение концентрации живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма в сотни раз по сравнению с известным техническим решением снижает реактогенность целевого продукта.An associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis has been proposed, which creates long-term immunity in vaccinated animals simultaneously against two diseases, while in terms of immunogenicity it surpasses the known vaccine against anthrax and necrobacteriosis due to the use of not only saponin as an adjuvant, but also the found optimal ratio of leukocidin adsorbent -exotoxin - aluminum hydroxide taken under certain technological conditions. Also, a decrease in the concentration of live spores of the anthrax vaccine strain by hundreds of times compared with the known technical solution reduces the reactogenicity of the target product.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Ассоциированную вакцину против сибирской язвы и некробактериоза готовят следующим образом.Example 1. The associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis is prepared as follows.
Для получения некробактериозного антигена - лейкоцидин-экзотоксина берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, инактивируют формалином в конечной концентрации 0,4%, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин, подвергают его высокой очистке ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-17 кДа и концентрируют до содержания белка (по Лоури) 5,5 мг% с молекулярной массой 18-20 кДа. Далее полученный антиген - лейкоцидин-экзотоксин сорбируют на 12% гидроокиси алюминия, взятой в конечной концентрации 1,8%, предварительно суспендированной в гликоколевом буфере с pH 8,4. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина.To obtain a necrobacteriotic antigen - leukocidin-exotoxin, a production strain of Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV is taken, cultivated, inactivated with formalin at a final concentration of 0.4%, the backbone is separated from the culture fluid by centrifugation, exotoxin is isolated from the culture fluid, and it is subjected to high purification by ultrafiltration. on hollow fibers with a pore size of 13-17 kDa and concentrated to a protein content (according to Lowry) of 5.5 mg% with a molecular weight of 18-20 kDa. Next, the resulting antigen, leukocidin-exotoxin, is sorbed on 12% aluminum hydroxide, taken at a final concentration of 1.8%, previously suspended in a glycol-buffered buffer with a pH of 8.4. After sorption of the antigen on alumina hydrate, the neutralization of the residual formalin is checked.
К 97,5 г инактивированному формалином лейкоцидин-экзотоксину с м.м. 18-20 кДа из штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием белка 5,5 мг%, адсорбированному 12% гидроокисью алюминия, взятой в конечной концентрации 1,8%, предварительно суспендированной в гликоколевом буфере с pH 8,4, добавляют 1,0 г суспензии живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией 5,0×107 в 1 см3 физиологического раствора и 1,5 г сапонина, получая состав 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:To 97.5 g of leukocidin-exotoxin inactivated with formalin with m.m. 18-20 kDa from the strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV with a protein content of 5.5 mg% adsorbed with 12% aluminum hydroxide, taken in a final concentration of 1.8%, previously suspended in a glycocol buffer with a pH of 8.4, add 1.0 g of a suspension of live spores of anthrax vaccine strain 55-VNIIVViM with an initial concentration of 5.0 × 10 7 in 1 cm 3 of physiological saline and 1.5 g of saponin, obtaining composition 1 in the following ratio of components, wt.%:
Вакцину тщательно перемешивают до получения однородной взвеси.The vaccine is thoroughly mixed until a uniform suspension is obtained.
Пример 2. Ассоциированную вакцину против сибирской язвы и некробактериоза готовят следующим образом.Example 2. The associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis is prepared as follows.
Для получения некробактериозного антигена - лейкоцидин-экзотоксина берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, инактивируют формалином в конечной концентрации 0,5%, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин, подвергают его высокой очистке ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-17 кДа и концентрируют до содержания белка (по Лоури) 6,0 мг% с молекулярной массой 18-20 кДа. Далее полученный антиген - лейкоцидин-экзотоксин сорбируют на 15% гидроокисью алюминия, взятой в конечной концентрации 2,0%, предварительно суспендированной в гликоколевом буфере с pH 8,6. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина.To obtain a necrobacteriotic antigen - leukocidin-exotoxin, the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV is taken, cultivated, inactivated with formalin at a final concentration of 0.5%, the backbone is separated from the culture fluid by centrifugation, exotoxin is isolated from the culture fluid, and it is subjected to high ultrafiltration purification. on hollow fibers with a pore size of 13-17 kDa and concentrated to a protein content (according to Lowry) of 6.0 mg% with a molecular weight of 18-20 kDa. Next, the obtained antigen - leukocidin-exotoxin is sorbed on 15% aluminum hydroxide, taken in a final concentration of 2.0%, previously suspended in a glycol-buffered buffer with a pH of 8.6. After sorption of the antigen on alumina hydrate, the neutralization of the residual formalin is checked.
К 96,7 г инактивированному формалином лейкоцидин-экзотоксину с м.м. 18-20 кДа из штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием белка 6 мг%, адсорбированному 15% гидроокисью алюминия, взятой в конечной концентрации 2,0%, предварительно суспендированной в гликоколевом буфере с pH 8,6, добавляют 1,2 г суспензии живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией 5,2×107 в 1 см3 физиологического раствора и 2,1 г сапонина, получая состав 2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:To 96.7 g of leukocidin-exotoxin inactivated with formalin with m.m. 18-20 kDa from the strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV with a protein content of 6 mg%, adsorbed with 15% aluminum hydroxide, taken in a final concentration of 2.0%, previously suspended in glycol-buffered pH 8.6, add 1, 2 g of a suspension of live spores of the anthrax vaccine strain 55-VNIIVViM with an initial concentration of 5.2 × 10 7 in 1 cm 3 of physiological saline and 2.1 g of saponin, obtaining composition 2 in the following ratio of components, wt.%:
Вакцину тщательно перемешивают до получения однородной взвеси.The vaccine is thoroughly mixed until a uniform suspension is obtained.
Пример 3. Полученную по примерам 1 и 2, а также по прототипу, ассоциированную вакцину против сибирской язвы и некробактериоза применяют для профилактических и вынужденных прививок клинически здоровых животных. Молодняк, не достигший 3-месячного возраста, прививать ассоциированной вакциной не разрешается. Вакцину вводят внутрикожно с помощью безыгольного инъектора в бесшерстный участок тела животным по 0,2 см3 (2 раза по 0,1 см3): морским свинкам, овцам и северным оленям.Example 3. Obtained in examples 1 and 2, as well as the prototype, the associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis is used for prophylactic and compulsory vaccinations of clinically healthy animals. Young animals under 3 months of age are not allowed to inoculate with the associated vaccine. The vaccine is administered intradermally with a needleless injector in a hairless area of the body of animals in 0.2 cm 3 (2 times in 0.1 cm 3 ): guinea pigs, sheep and reindeer.
Результаты испытания известной и предлагаемой ассоциированных вакцин против сибирской язвы и некробактериоза представлены в таблицах 1 и 2.The test results of the known and proposed associated vaccines against anthrax and necrobacteriosis are presented in tables 1 and 2.
Таким образом, ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза обладает более высокой иммуногенной активностью, способной защитить животных одновременно от сибирской язвы и некробактериоза /продлевает срок иммунитета с одного года до 1,5 лет для профилактики сибирской язвы и с полгода до 1,5 лет - для профилактики некробактериоза/.Thus, the associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis has a higher immunogenic activity that can protect animals from anthrax and necrobacteriosis at the same time / prolongs the immunity from one year to 1.5 years for the prevention of anthrax and from six months to 1.5 years - for the prevention of necrobacteriosis.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011146107/10A RU2480237C1 (en) | 2011-11-15 | 2011-11-15 | Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011146107/10A RU2480237C1 (en) | 2011-11-15 | 2011-11-15 | Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2480237C1 true RU2480237C1 (en) | 2013-04-27 |
Family
ID=49153058
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011146107/10A RU2480237C1 (en) | 2011-11-15 | 2011-11-15 | Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2480237C1 (en) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2524430C1 (en) * | 2013-05-07 | 2014-07-27 | Николай Васильевич Мельник | Vaccines for prevention of splenic fever and necrotic stomatitis in animals and method for its preparation |
RU2590596C1 (en) * | 2015-05-22 | 2016-07-10 | Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика") | Vaccine for animal necrobacteriosis prevention and its manufacturing method |
RU2590598C1 (en) * | 2015-05-22 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" /ФГБНУ ВНИТИБП/ | Vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals and method for production thereof |
RU2636454C2 (en) * | 2015-05-22 | 2017-11-23 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Vaccine for prevention necrobacteriosis in animals and method for obtaining thereof |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2286174C2 (en) * | 2002-10-16 | 2006-10-27 | Юрий Олегович Селянинов | Associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis in animals |
-
2011
- 2011-11-15 RU RU2011146107/10A patent/RU2480237C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2286174C2 (en) * | 2002-10-16 | 2006-10-27 | Юрий Олегович Селянинов | Associated vaccine against anthrax and necrobacteriosis in animals |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2524430C1 (en) * | 2013-05-07 | 2014-07-27 | Николай Васильевич Мельник | Vaccines for prevention of splenic fever and necrotic stomatitis in animals and method for its preparation |
RU2590596C1 (en) * | 2015-05-22 | 2016-07-10 | Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика") | Vaccine for animal necrobacteriosis prevention and its manufacturing method |
RU2590598C1 (en) * | 2015-05-22 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" /ФГБНУ ВНИТИБП/ | Vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals and method for production thereof |
RU2636454C2 (en) * | 2015-05-22 | 2017-11-23 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Vaccine for prevention necrobacteriosis in animals and method for obtaining thereof |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6449364B2 (en) | Mycoplasma vaccine production method | |
CN107537031B (en) | Vaccine composition for preventing porcine reproductive and respiratory syndrome, and preparation method and application thereof | |
JP6648138B2 (en) | Immediate use type PCV2 / M. Process for M. hyo combination vaccine | |
JP6456437B2 (en) | Immunogenic composition comprising mycoplasma antigen | |
RU2480237C1 (en) | Associated vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals | |
AU2013221479B2 (en) | Rotavirus subunit vaccines and methods of making and use thereof | |
EA031229B1 (en) | Method for vitrifying biological material | |
RU2403063C1 (en) | Inactivated combined vaccine against viral diarrhea, rota-, corona-virus diseases and escherichiosis of cattle | |
US9913896B2 (en) | Attenuated parvovirus vaccine for muscovy duck parvovirus and goose parvovirus (derzsy's disease) | |
RU2524430C1 (en) | Vaccines for prevention of splenic fever and necrotic stomatitis in animals and method for its preparation | |
CN106267176B (en) | Infectious coryza vaccine composition, preparation method and application thereof | |
RU2191599C1 (en) | Associated vaccine for prophylaxis of anthrax and necrobacteriosis in animals | |
RU2590596C1 (en) | Vaccine for animal necrobacteriosis prevention and its manufacturing method | |
RU2590598C1 (en) | Vaccine for prevention of anthrax and necrobacillosis in animals and method for production thereof | |
RU2636454C2 (en) | Vaccine for prevention necrobacteriosis in animals and method for obtaining thereof | |
RU2517733C1 (en) | Inactivated emulsion vaccine associated against adenoviral, herpes virus infection, parainfluenza-3 and viral diarrhea - mucosal disease of cattle | |
RU2504400C1 (en) | Inactivated emulsion associated vaccine for cattle parainfluenza-3, infectious rhinotracheitis and viral diarrhoea | |
US20220347286A1 (en) | Inactivated vaccine for chikungunya virus | |
RU2404802C1 (en) | Vaccine against colibacteriosis of rabbits | |
RU2644339C2 (en) | Sorbed inactive dry vaccine against infectious rhinotracheitis of cattle | |
RU2402348C1 (en) | Dry rabies vaccine for cattle and small cattle | |
RU2521513C1 (en) | Application of aethonium as adjuvant for production of sorbed foot-mouth disease vaccine | |
RU2403062C1 (en) | Vaccine against aujeszky's disease and swine erysipelas | |
RU2288004C1 (en) | Vaccine against colibacteriosis in nutrias | |
RU2288003C1 (en) | Vaccine against enterococcus infection in nutrias |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131116 |