RU2477470C1 - Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства - Google Patents
Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства Download PDFInfo
- Publication number
- RU2477470C1 RU2477470C1 RU2012110098/15A RU2012110098A RU2477470C1 RU 2477470 C1 RU2477470 C1 RU 2477470C1 RU 2012110098/15 A RU2012110098/15 A RU 2012110098/15A RU 2012110098 A RU2012110098 A RU 2012110098A RU 2477470 C1 RU2477470 C1 RU 2477470C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hydrogen peroxide
- honey
- product
- products
- natural honey
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
Изобретение относится к анализу пищевых продуктов и может быть использовано в пищевой промышленности для оценки качества меда, а также в практике научно-исследовательских работ при изучении биологических свойств продуктов пчеловодства. Способ включает взаимодействие ПВ с окисляющимся соединением, образующим при окислении окрашенный продукт. В качестве окисляющегося соединения используют йодид анион, количество образовавшегося йода в виде комплексного аниона
Description
Изобретение относится к способам анализа пищевых продуктов, а именно к способу количественного определения в натуральном меде и других продуктах пчеловодства пероксида водорода (ПВ), и может быть использовано в пищевой промышленности для оценки качества меда, а также в практике научно-исследовательских работ при изучении биологических свойств продуктов пчеловодства.
ПВ является высокоэффективным дезинфектантом, так как пероксиды быстро уничтожают различные микроорганизмы. ПВ в очень слабых концентрациях (~5-10 мг/кг) содержится в натуральном меде и других природных продуктах пчеловодства и является важнейшей составляющей естественной антибактериальной системы таких продуктов. ПВ образуется в меде и продуктах пчеловодства под воздействием глюкооксидазы - фермента, вырабатываемого глоточными железами пчел. В результате катализируемого глюкооксидазой окисления глюкозы образуются ПВ и глюконовая кислота (Аганин А.В. Мед и его исследование. Изд-во Саратовского ун-та, 1985 г., с.53).
Первые данные о содержании в меде ПВ относятся к 1962 году (White J.W., Subers М.Н., Schepartz A.I., The Identification of Inhibine, American Bee Journal, Vol.102, November 1962, pp.459-431). Исследований о содержании ПВ в других продуктах пчеловодства до настоящего времени не проводилось.
Известен способ количественного определения ПВ в меде, заключающийся в окислении ПВ 3,3'-диметоксибензидина (o-дианизидина) в присутствии пероксидазы. (Пероксидаза - фермент, катализирующий окисление различных полифенолов, алифатических и ароматических аминов и других соединений с помощью ПВ или органических перекисей). ПВ выступает в роли акцептора водорода и в ходе реакции превращается в воду. 3,3'-Диметоксибензидин при окислении превращается в окрашенную хиноидную структуру, поглощающую при длине волны 450 нм, что позволяет судить о количестве ПВ. Данный способ требует предварительной калибровки (White J.W., Subers М.Н. Studies on Honey Inhibine. 2. A Chemical Assay. Journal of Apicultural Research, 2(2), 1963, p.93-100 - прототип).
Главным недостатком способа-прототипа является его сложность и высокая трудоемкость, кроме того, он требует использования дорогостоящих реактивов: фермент пероксидаза и 3,3'-диметоксибензидин. Данный способ применялся в научных исследованиях при изучении биологических свойств меда, но для количественного анализа он не может быть рекомендован.
Задачей предлагаемого изобретения является разработка такого способа количественного определения ПВ в натуральных медах и других продуктах пчеловодства, который будет значительно менее сложным и трудоемким, позволит отказаться от использования дорогостоящих реагентов и будет отличаться высокой чувствительностью.
Решение поставленной задачи достигается предлагаемым способом количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства, включающим взаимодействие пероксида водорода с окисляющимся соединением, образующим при окислении окрашенный продукт, в котором в качестве окисляющегося соединения используют йодид анион, количество образовавшегося йода в виде комплексного аниона регистрируют методом электронной абсорбционной спектроскопии и рассчитывают содержание пероксида водорода в анализируемом продукте в мг на кг продукта.
При определении пероксида водорода в прополисе, или перге, или пыльце указанные продукты пчеловодства предварительно экстрагируют диметилсульфоксидом.
Полученный при экстрагировании раствор отфильтровывают.
В предлагаемом способе для количественного определения содержания ПВ был выбран йодометрический метод. При взаимодействии йодида калия с ПВ в кислой среде выделяется молекулярный йод, который с избытком иодид-аниона образует комплексный анион , который регистрируют методом электронной абсорбционной спектроскопии (длина волны регистрации λmax=351 нм, коэффициент молярного погашения растворов ), что позволяет достичь высокой чувствительности определения ПВ - до значения 0.1 мг ПВ на 1 кг меда, что соответствует 10-5% ПВ.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
К навеске образца меда массой 1 г (mнав) добавляют дистиллированную воду до объема 2 мл (для быстрого растворения можно дополнительно использовать перемешивающие устройства).
Навеску образца прополиса, или перги, или пыльцы массой 1 г (mнав) экстрагируют при встряхивании 2 мл диметилсульфоксида в течение 20-30 мин. Полученные при экстрагировании растворы отфильтровывают.
Полученные 2 мл раствора продукта пчеловодства делят на два образца раствора, каждый объемом 1 мл, и используют для параллельного определения. К 1 мл указанного раствора приливают 1 мл раствора серной кислоты (0.2 моль/л), продувают углекислым газом или иным тяжелым инертным газом с целью вытеснения кислорода и смешивают с 2 мл также обескислороженного 5%-ного (масс.) водного раствора иодида калия, после чего проводят повторное продувание углекислым газом. Два полученных аналитических раствора (объемом 4 мл, содержащие ½ mнав) оставляют при температуре 20-22°C в темноте на сутки (для гарантии полного завершения реакции выделившегося йода с избытком йодид-аниона с образованием комплексного аниона ). Затем с использованием типового спектрофотометра, настроенного на диапазон длин волн 300-800 нм записывают электронные спектры каждого из образцов и проводят определение оптической плотности аналитических растворов (D) при значении длины волны 351 нм. Из найденного значения D необходимо вычесть собственное поглощение раствора соответствующего образца меда, или прополиса, или перги, или пыльцы (Dм), аналогичным образом разбавленного дистиллированной водой, в том же спектральном диапазоне (либо использовать такой раствор в качестве сравнительной кюветы). (Измерение D позволяет определять концентрацию ПВ (СПВ) в аналитическом растворе в моль/л: СПВ=(D-Dм)/ε·l). В качестве «холостого опыта» для анализа вместо 1 мл раствора продукта пчеловодства берут 1 мл дистиллированной воды и далее аналогично описанному подкисляют, обескислороживают, добавляют раствор иодида калия и выдерживают в темноте (в сравнительную кювету наливают дистиллированную воду).
Содержание ПВ в меде в мг на кг (ω) рассчитывают по формуле:
ω=[(D-Dм)/ε·l]·M/mнав·V·1000,
где
D - показание спектрофотометра для аналитического раствора меда на длине волны 351 нм;
Dм - показание спектрофотометра на длине волны 351 нм для контрольного раствора меда (без добавления реагентов);
l - ширина кюветы, см;
M - молярная масса ПВ, г/моль (34 г/моль);
mнав - навеска меда, г;
V - объем раствора, содержащего навеску меда mнав, мл (V=8 мл);
1000 - коэффициент для пересчета содержания ПВ в меде в мг на кг.
Предлагаемый способ был испытан при исследовании большого количества образцов натурального пчелиного меда различного ботанического и территориального происхождения. Объектами исследования служили образцы натурального меда и других продуктов пчеловодства из лаборатории ветеринарной санитарии в пчеловодстве ГНУ ВНИИВСГЭ, отобранные для экспертизы и сертификации с целью дальнейшей реализации на Московской весенней ярмарке 2011 года. Пробы меда отбирали согласно ГОСТ 19792-2001 «Мед натуральный. Технические условия». Определение количественного содержания ПВ проводили в ИХФ РАН. В таблицах 1-3 приведены полученные результаты количественного определения ПВ в различных медах. В таблице 4 приведены полученные результаты количественного определения ПВ в других продуктах пчеловодства.
Таблица 1 | ||
№ п/п | Исследуемые образцы меда | Количество ПВ, мг/кг |
1 | Подсолнечниковый (Ростовская область) | 4.9 |
2 | Подсолнечниковый (Краснодарский край) | 4.3 |
3 | Подсолнечниковый (Краснодарский край) | 4.8 |
4 | Подсолнечниковый (Краснодарский край) | 4.5 |
Таблица 2 | ||
№ п/п | Исследуемые образцы меда | Количество ПВ, мг/кг |
1 | Липовый (Саратовская область) | 10.9 |
2 | Липовый (Краснодарский край) | 11.0 |
3 | Липовый (Республика Марий Эл) | 9.4 |
4 | Липовый (Вятка) | 9.0 |
5 | Липовый (Саратовская область) | 10.2 |
Таблица 3 | ||
№ п/п | Исследуемые образцы меда | Количество ПВ, мг/кг |
1 | Гречишный (Курская область) | 8.5 |
2 | Гречишный (Курская область) | 9.8 |
3 | Гречишный (Курская область) | 8.7 |
4 | Гречишный (Воронежская область) | 8.0 |
5 | Гречишный (Воронежская область) | 9.9 |
6 | Гречишный (Воронежская область) | 9.3 |
7 | Гречишный (Воронежская область) | 9.6 |
Таблица 4 | ||
№ п/п | Продукт пчеловодства | Количество ПВ, мг/кг |
1 | Пыльца (Волгоградская область) | 14.5 |
2 | Перга (Воронежская область) | 6.1 |
3 | Прополис (Курская область) | 5.3 |
Таким образом, предлагаемый способ является более простым, менее трудоемким и не требует использования дорогостоящих реагентов. Благодаря применению комбинации методов иодометрического титрования и чувствительной электронной абсорбционной спектроскопии в способе достигается высокая чувствительность определения - 10-5% ПВ.
Claims (3)
1. Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства, включающий взаимодействие пероксида водорода с окисляющимся соединением, образующим при окислении окрашенный продукт, отличающийся тем, что в качестве окисляющегося соединения используют йодид анион, количество образовавшегося йода в виде комплексного аниона регистрируют методом электронной абсорбционной спектроскопии и рассчитывают содержание пероксида водорода в анализируемом продукте в мг на кг продукта.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при определении пероксида водорода в прополисе, или перге, или пыльце указанные продукты пчеловодства предварительно экстрагируют диметилсульфоксидом.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что полученный при экстрагировании раствор отфильтровывают.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012110098/15A RU2477470C1 (ru) | 2012-03-16 | 2012-03-16 | Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012110098/15A RU2477470C1 (ru) | 2012-03-16 | 2012-03-16 | Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2477470C1 true RU2477470C1 (ru) | 2013-03-10 |
Family
ID=49124268
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012110098/15A RU2477470C1 (ru) | 2012-03-16 | 2012-03-16 | Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2477470C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107884526A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-04-06 | 雅安蒋氏蜜蜂园有限公司 | 一种基于深度学习的蜂蜜参数检测方法及系统 |
RU2706659C1 (ru) * | 2018-10-25 | 2019-11-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр химической физики им. Н.Н. Семенова Российской академии наук (ФИЦ ХФ РАН) | Способ получения раствора пероксида водорода с требуемой концентрацией для стимулирования роста семян растений |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1224744A (en) * | 1967-03-10 | 1971-03-10 | Merck Patent Gmbh | Reagent for the determination of hydrogen peroxide |
SU1338787A3 (ru) * | 1980-02-05 | 1987-09-15 | Берингер Маннхайм Гмбх (Фирма) | Способ определени перекиси водорода при ферментативной реакции |
SU1457819A3 (ru) * | 1977-04-09 | 1989-02-07 | Берингер Маннхайм,Гмбх (Фирма) | Средство дл определени перекиси водорода в биологических жидкост х |
SU1636772A1 (ru) * | 1988-01-13 | 1991-03-23 | Львовское Отделение Института Биохимии Им.А.В.Палладина | Способ определени перекиси водорода в биологических объектах |
JPH1137991A (ja) * | 1997-07-16 | 1999-02-12 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 過酸化水素の分析用発色剤及び簡易定量法 |
CN2881614Y (zh) * | 2005-06-17 | 2007-03-21 | 长春吉大小天鹅仪器有限公司 | 多参数组合食品安全快速检测试剂盒 |
-
2012
- 2012-03-16 RU RU2012110098/15A patent/RU2477470C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1224744A (en) * | 1967-03-10 | 1971-03-10 | Merck Patent Gmbh | Reagent for the determination of hydrogen peroxide |
SU1457819A3 (ru) * | 1977-04-09 | 1989-02-07 | Берингер Маннхайм,Гмбх (Фирма) | Средство дл определени перекиси водорода в биологических жидкост х |
SU1338787A3 (ru) * | 1980-02-05 | 1987-09-15 | Берингер Маннхайм Гмбх (Фирма) | Способ определени перекиси водорода при ферментативной реакции |
SU1636772A1 (ru) * | 1988-01-13 | 1991-03-23 | Львовское Отделение Института Биохимии Им.А.В.Палладина | Способ определени перекиси водорода в биологических объектах |
JPH1137991A (ja) * | 1997-07-16 | 1999-02-12 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 過酸化水素の分析用発色剤及び簡易定量法 |
CN2881614Y (zh) * | 2005-06-17 | 2007-03-21 | 长春吉大小天鹅仪器有限公司 | 多参数组合食品安全快速检测试剂盒 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
WHITE J.W. et al. Journal of Apicultural Research, 2(2), 1963, p.93-100. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107884526A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-04-06 | 雅安蒋氏蜜蜂园有限公司 | 一种基于深度学习的蜂蜜参数检测方法及系统 |
RU2706659C1 (ru) * | 2018-10-25 | 2019-11-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр химической физики им. Н.Н. Семенова Российской академии наук (ФИЦ ХФ РАН) | Способ получения раствора пероксида водорода с требуемой концентрацией для стимулирования роста семян растений |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Moniruzzaman et al. | Physicochemical and antioxidant properties of Malaysian honeys produced by Apis cerana, Apis dorsata and Apis mellifera | |
Gorjanović et al. | Comparative analysis of antioxidant activity of honey of different floral sources using recently developed polarographic and various spectrophotometric assays | |
Zielonka et al. | Detection of 2-hydroxyethidium in cellular systems: a unique marker product of superoxide and hydroethidine | |
Ding et al. | A new amine moiety-based near-infrared fluorescence probe for detection of formaldehyde in real food samples and mice | |
CN108107039A (zh) | 一种过氧乙酸测定试纸及其测定方法 | |
Zhang et al. | Sensitive detection of ozone by a practical resorufin-based spectroscopic probe with extremely low background signal | |
Krzymiński et al. | On the use of acridinium indicators for the chemiluminescent determination of the total antioxidant capacity of dietary supplements | |
RU2477470C1 (ru) | Способ количественного определения пероксида водорода в натуральных медах и других продуктах пчеловодства | |
Masek et al. | Electrochemical and spectrophotometric characterization of the propolis antioxidants properties | |
Chen et al. | A new rhodamine probe with large stokes shift for Hg2+ detection and its application in real sample analysis | |
Zhang et al. | Visual inspection of acidic pH and bisulfite in white wine using a colorimetric and fluorescent probe | |
CN103149184A (zh) | 一种荧光检测次氯酸根的方法 | |
RU2477469C1 (ru) | Способ контроля качества меда | |
US20090047743A1 (en) | Method and system for determining residual chlorine or chloramine concentration in solution by colorimetey | |
Alonso et al. | Development of an electrochemical method for the determination of antioxidant activity. Application to grape-derived products | |
Saeed et al. | Sensitive spectrophotometric method for determination of vitamins (C and E) | |
Pigani et al. | Determination of polyphenol content and colour index in wines through PEDOT-modified electrodes | |
Lin et al. | A new resonance Rayleigh scattering method for the determination of trace O 3 in air using rhodamine 6G as probe | |
Mirza Alizadeh et al. | Polarographic determination of sodium hydrosulfite residue (Dithionite) in sugar and loaf sugar | |
McLamore et al. | Development and validation of an open source O2-sensitive gel for physiological profiling of soil microbial communities | |
Holmes | The spectrophotometric evaluation of mixtures of methylene blue and trimethyl thionin | |
RU2748298C1 (ru) | Способ спектрофотометрического дифференциального косвенного определения концентрации диоксида хлора в питьевой воде | |
Chand et al. | Aprotic and protic solvent for extraction of chlorophyll from various plants: Chemical characteristic and analysis | |
CN105928918B (zh) | 水杨基羟肟酸在检测次氯酸根中的应用 | |
Sun et al. | Changes in ATP levels in rabbit blood and its application for estimation of the postmortem interval |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170317 |