RU2472517C1 - Method for preparing peptide complex of cod liver - Google Patents

Method for preparing peptide complex of cod liver Download PDF

Info

Publication number
RU2472517C1
RU2472517C1 RU2012103411/15A RU2012103411A RU2472517C1 RU 2472517 C1 RU2472517 C1 RU 2472517C1 RU 2012103411/15 A RU2012103411/15 A RU 2012103411/15A RU 2012103411 A RU2012103411 A RU 2012103411A RU 2472517 C1 RU2472517 C1 RU 2472517C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
liver
water
raw material
peptide complex
fish
Prior art date
Application number
RU2012103411/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Дмитрий Валентинович Демченко
Ольга Николаевна Пожарицкая
Александр Николаевич ШИКОВ
Валерий Геннадьевич Макаров
Юрий Сергеевич Фомичев
Original Assignee
Закрытое акционерное общество "Санкт-Петербургский институт фармации"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Закрытое акционерное общество "Санкт-Петербургский институт фармации" filed Critical Закрытое акционерное общество "Санкт-Петербургский институт фармации"
Priority to RU2012103411/15A priority Critical patent/RU2472517C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2472517C1 publication Critical patent/RU2472517C1/en

Links

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to medicine and veterinary science, namely a method for preparing a biologically active peptide complex of Gadidae fam. liver. The method involves grinding a raw material, extracting in mixed oil and water in proportions of raw material: extractant 1:5-1:30 at room temperature for 2-4 hours with agitation. Further, the end product is purified by treating in an organic solvent in relation of 1:0.5-2 followed by separation and drying of an aqueous residue. The raw material is presented by cod liver either fresh, frozen or dry, while the organic solvent is specified in a number of diethyl ester, ethyl acetate, butanol, chloroform.
EFFECT: invention provides preparing the peptide complex of cod liver possessing the balanced amino acid composition, the high content of peptides and high antioxidant activity.
3 cl, 4 ex

Description

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к способам получения биологически активных веществ из субпродуктов животного происхождения, в частности к получению биологически активных комплексов на основе водорастворимых белков печени рыб семейства Gadidae, обладающих сбалансированным аминокислотным составом, повышенным содержанием пептидов и высокой антиоксидантной активностью.The invention relates to the field of medicine and veterinary medicine, and in particular to methods for producing biologically active substances from offal of animal origin, in particular to producing biologically active complexes based on water-soluble proteins of the liver of fish of the Gadidae family, having a balanced amino acid composition, high peptide content and high antioxidant activity.

Одним из основных компонентов системы внутренних органов, богатых высококачественными протеинами, является печень. Содержание протеинов в печени, в зависимости от вида рыб, может достигать 20% (Bechtel et al. Chemical characterization of liver lipid and protein from cold-water fish species. J. Food Sci. 2006. 71(6): 480-485). Наиболее изученными пептидами из внутренних органов являются пептиды, выделенные из гидролизатов кишечника и печени рыбы бонито Gymnosarda unicolor (Ahn et al. Enzymatic production of bioactive protein hydrolysates from tuna liver: effects of enzymes and molecular weight on bioactivity. Int. J. Food Sci. Technol. 2010. 45: 562-568; Karaki et al. Oral administration of peptides derived from bonito bowels decreases blood pressure in spontaneously hypertensive rats by inhibiting angiotensin converting enzyme. Comp. Biochem. Physiol. C. 1993. 104(2): 351-353). В печени и других органах японской камбалы Paralichtys olivaceus был обнаружен богатый цистеином пептид гепсидин, проявляющий высокую антимикробную активность (Hirono et al. Two different types of hepcidins from the Japanese flounder Paralichthys olivaceus. FEBS J. 2005. 272(20): 5257-5264). В печени атлантического лосося Salmo salar найдены и локализованы клетки, вырабатывающие эстроген и ксеноэстроген (Arukwe et al. Fish model for assessing the in vivo estrogenic potency of the mycotoxin zearalenone and its metabolites. Sci. Total Environ. 1999. 236(1-3): 153-161), из этого же объекта был выделен белок, обладающий антимикробным действием (Richards et al. Histone H1: an antimicrobial protein of Atlantic salmon (Salmo salar). Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. 284(3): 549-555). Таким образом, печень различных рыб может служить источником большого количества как низкомолекулярных веществ, так и целого набора пептидов, которые можно применять для приготовления лекарственных средств.One of the main components of the system of internal organs, rich in high-quality proteins, is the liver. The protein content in the liver, depending on the species of fish, can reach 20% (Bechtel et al. Chemical characterization of liver lipid and protein from cold-water fish species. J. Food Sci. 2006. 71 (6): 480-485) . The most studied peptides from internal organs are peptides isolated from intestinal and liver hydrolysates of fish bonito Gymnosarda unicolor (Ahn et al. Enzymatic production of bioactive protein hydrolysates from tuna liver: effects of enzymes and molecular weight on bioactivity. Int. J. Food Sci. Technol. 2010. 45: 562-568; Karaki et al. Oral administration of peptides derived from bonito bowels decreases blood pressure in spontaneously hypertensive rats by inhibiting angiotensin converting enzyme. Comp. Biochem. Physiol. C. 1993. 104 (2): 351-353). In the liver and other organs of the Japanese flounder Paralichtys olivaceus, a cysteine-rich peptide hepsidin was found to exhibit high antimicrobial activity (Hirono et al. Two different types of hepcidins from the Japanese flounder Paralichthys olivaceus. FEBS J. 2005.272 (20): 5257-5264 ) Cells producing estrogen and xenoestrogen (Arukwe et al. Fish model for assessing the in vivo estrogenic potency of the mycotoxin zearalenone and its metabolites. Sci. Total Environ. 1999. 236 (1-3) were found and localized in the liver of Atlantic salmon Salmo salar. : 153-161), an antimicrobial protein was isolated from the same object (Richards et al. Histone H1: an antimicrobial protein of Atlantic salmon (Salmo salar). Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001.284 (3) : 549-555). Thus, the liver of various fish can serve as a source of a large number of both low molecular weight substances, and a whole set of peptides that can be used for the preparation of medicines.

Описан способ получения водорастворимого комплекса полипептидов из печени рыб, а именно из печени акулы, применяемого в качестве иммуностимулятора, включающий охлаждение печени акулы до 0°С; распыление охлажденной печени акулы для получения тщательно измельченного материала; смешивание тщательно измельченного материала с равным количеством воды при условии поддерживания в смеси температуры 0°С в течение 20 мин; центрифугирование смеси при 0-4°С в течение 4-6 ч для разделения смеси на три различных слоя, представляющих собой клеточный слой, водный слой и масляный слой; отделение водного слоя от других слоев; фильтрование водного слоя с целью получения профильтрованного раствора; и распыление профильтрованного раствора в вакуумной камере при 0-4°С с целью получения сухого порошкообразного вещества (Pat. US 5840342 (A), опубл. 24.11.1998).A method for producing a water-soluble complex of polypeptides from the liver of fish, namely from shark liver, used as an immunostimulant, comprising cooling the shark liver to 0 ° C; spraying chilled shark liver to produce finely ground material; mixing thoroughly ground material with an equal amount of water, provided that the mixture is kept at 0 ° C for 20 minutes; centrifuging the mixture at 0-4 ° C for 4-6 hours to separate the mixture into three different layers, which are the cell layer, the aqueous layer and the oil layer; separation of the water layer from other layers; filtering the aqueous layer to obtain a filtered solution; and spraying the filtered solution in a vacuum chamber at 0-4 ° C in order to obtain a dry powder substance (Pat. US 5840342 (A), publ. 11.24.1998).

Применение оборудования для распыления охлажденной печени, а также низкотемпературного высокоскоростного центрифугирования в течение нескольких часов является дорогостоящим. Его использование для производства продукции в промышленных масштабах ведет к высоким материальным затратам и удорожанию продукции.The use of equipment for spraying a chilled liver, as well as low-temperature high-speed centrifugation for several hours is expensive. Its use for the production of products on an industrial scale leads to high material costs and cost of production.

Известен способ получения лекарственного препарата «Скваакан» - комплекса полипептидов из печени рыб, а именно из печени акулы, заключающийся в том, что печень акулы катран гомогенизируют, обезжиривают путем холодного отстоя при 1 - +5°С в течение 20-24 часов, затем обезжиренный гомогенат направляют на термическую и химическую коагуляцию белков при рН 1,0-6,0, оттаивают при комнатной температуре в течение 5-6 ч с получением стабилизированного экстракта, который после центрифугирования и мембранной фильтрации ампулируют и автоклавируют (Pat. RU 2211700 (C2), опубл. 10.09.2003).A known method of obtaining the drug "Squaacan" - a complex of polypeptides from the liver of fish, namely from shark liver, which consists in the fact that the catran shark liver is homogenized, degreased by cold sedimentation at 1 - + 5 ° C for 20-24 hours, then fat-free homogenate is sent for thermal and chemical coagulation of proteins at pH 1.0-6.0, thawed at room temperature for 5-6 hours to obtain a stabilized extract, which after centrifugation and membrane filtration is amplified and autoclaved (Pat. RU 2211700 (C2), publ. 09/10/2003).

Недостатком данного метода является большая длительность процесса и использование для осветления конечного экстракта центрифуг и мембранного оборудования, не позволяющего обрабатывать большие объемы экстракта. Процесс ведется при низком рН, что требует очистки сточных вод от кислот.The disadvantage of this method is the long duration of the process and the use of centrifuges and membrane equipment to clarify the final extract, which does not allow to process large volumes of the extract. The process is carried out at low pH, which requires the treatment of wastewater from acids.

Известен способ получения водорастворимого полипептидного комплекса из печени рыб лососевых пород, включающий измельчение исходного сырья, экстракцию дистиллированной водой при соотношении сырье:экстрагент 1:5-1:30 с последующим подщелачиванием суспензии до рН 8-9 и настаиванием ее при комнатной температуре в течение 2-4 часов с перемешиванием, очистку целевого продукта путем обработки жидкой фракции 0.3% раствором хитозана в 3% растворе пищевой органической кислоты при рН 2,5-3,0 в соотношении 1:20 с перемешиванием в течение 1 часа и последующим инкубированием смеси в течение 2-3 часов и двойным разделением путем сепарирования на твердую и жидкую фракции с последующим соединением жидких фракций (Pat. RU 2409291 (C1), опубл. 20.01.2011).A known method of producing a water-soluble polypeptide complex from the liver of fish of salmon species, including grinding the feedstock, extraction with distilled water at a ratio of raw materials: extractant 1: 5-1: 30, followed by alkalization of the suspension to pH 8-9 and insisting it at room temperature for 2 -4 hours with stirring, purification of the target product by processing the liquid fraction with a 0.3% solution of chitosan in a 3% solution of edible organic acid at a pH of 2.5-3.0 in a ratio of 1:20 with stirring for 1 hour and then nkubirovaniem mixture for 2-3 hours and double separation by separation into solid and liquid fractions, followed by a compound liquid fractions (Pat. RU 2409291 (C1), publ. 20.01.2011).

Недостатком этого способа является большое количество рабочих стадий, применение кислот и щелочей, что ведет к большому количеству стоков, требующих очистки, использование дорогостоящего хитозана, обладающего собственной биологической активность.The disadvantage of this method is the large number of working stages, the use of acids and alkalis, which leads to a large number of effluents requiring treatment, the use of expensive chitosan, which has its own biological activity.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является способ комплексной переработки печени рыб семейства тресковых и получения липидного комплекса, гидрофильного комплекса и кормового продукта (Pat. RU 2420213 (C1), опубл. 10.06.2011), выбранный авторами за прототип. Печень рыб семейства тресковых измельчают, массу переносят в реактор с мешалкой и добавляют небольшими порциями при перемешивании растительное масло при соотношении измельченной печени и масла 1:0,2÷5,0. После этого в реактор при перемешивании небольшими порциями вносят воду при соотношении измельченной печени и воды 1:0,2÷5,0. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1-15 мин. Процесс ведут до появления границы раздела фаз, определяемой визуально. Образовавшуюся суспензию центрифугируют для выделения отдельных фракций, различающихся по плотности: гидрофильной, липофильной и плотного остатка. Гидрофильную фракцию, представляющую собой водный раствор биологически активных соединений, содержащую в том числе пептиды, и липофильную фракцию направляют на сепарирование. Плотный остаток используют в качестве кормового продукта. Гидрофильную фракцию после сепарирования направляют на коагуляцию. Полученную липофильную фракцию очищают от примесей нежирового характера. После этого очищают липофильную фракцию от стеринов и восков выдерживанием при температуре от -15 до +5°С (6) в течение 1-24 часов до осаждения балластных веществ и последующим фильтрованием липофильной фракции. Содержание пептидов в гидрофильной фракции составляет около 1-1,15%.The closest in technical essence and the achieved effect is the method of complex processing of the liver of the cod fish family and obtain a lipid complex, hydrophilic complex and feed product (Pat. RU 2420213 (C1), published on 10.06.2011), selected by the authors for the prototype. The liver of the codfish family is crushed, the mass is transferred to a reactor with a stirrer, and vegetable oil is added in small portions with stirring at a ratio of crushed liver and oil of 1: 0.2 ÷ 5.0. After that, with stirring in small portions, water is introduced into the reactor with a ratio of crushed liver and water 1: 0.2 ÷ 5.0. The resulting mixture was stirred at room temperature for 1-15 minutes. The process is conducted until the appearance of a phase boundary, determined visually. The resulting suspension is centrifuged to separate fractions that differ in density: hydrophilic, lipophilic and dense residue. The hydrophilic fraction, which is an aqueous solution of biologically active compounds, including peptides, and the lipophilic fraction are sent for separation. Dense residue is used as a feed product. The hydrophilic fraction after separation is directed to coagulation. The resulting lipophilic fraction is purified from impurities of non-fat nature. After that, the lipophilic fraction is cleaned of sterols and waxes by keeping it at a temperature of from -15 to + 5 ° С (6) for 1-24 hours until the ballast substances precipitate and then filter the lipophilic fraction. The content of peptides in the hydrophilic fraction is about 1-1.15%.

Недостатком данной технологии является затрудненное разделение фракций и необходимости использования центрифугирования, низкое содержание пептидов в гидрофильной фракции, присутствие значительного количества липидов. Данное обстоятельство ограничивает растворимость целевого продукта, что может приводить к снижению активности, более быстрой его порче. Кроме того, данный комплекс не растворим в воде, что ограничивает его биодоступность.The disadvantage of this technology is the difficult separation of fractions and the need for centrifugation, the low content of peptides in the hydrophilic fraction, the presence of a significant amount of lipids. This circumstance limits the solubility of the target product, which can lead to a decrease in activity, faster spoilage. In addition, this complex is insoluble in water, which limits its bioavailability.

Задачей изобретения является промышленная переработка печени рыб тресковых пород с получением водорастворимого комплекса пептидов, обладающего сбалансированным аминокислотным составом, повышенным содержанием пептидов и высокой антиоксидантной активностью.The objective of the invention is the industrial processing of the liver of fish of cod species with obtaining a water-soluble complex of peptides with a balanced amino acid composition, a high content of peptides and high antioxidant activity.

Задача изобретения решается тем, что в известном способе, включающем измельчение печени, смешивание с маслом при соотношении печени и масла 1:0,2÷5,0 и водой при соотношении печени и воды 1:0,2÷5,0, расслаивание при комнатной температуре в течение 1-15 мин, центрифугирование, сепарирование, выдерживание липидного комплекса при температуре от -15 до +5°С в течение 1-24 ч и фильтрование, согласно изобретению экстракцию проводят смесью масла и воды при соотношении сырье: экстрагент 1:5-1:30 при комнатной температуре в течение 2-4 часов с перемешиванием, целевой продукт очищают путем обработки органическим растворителем в соотношении 1:0,5÷2 с последующим разделением и высушиванием водного остатка.The objective of the invention is solved in that in the known method, including grinding the liver, mixing with oil at a ratio of liver and oil 1: 0.2 ÷ 5.0 and water at a ratio of liver and water 1: 0.2 ÷ 5.0, delamination at room temperature for 1-15 minutes, centrifugation, separation, maintaining the lipid complex at a temperature of from -15 to + 5 ° C for 1-24 hours and filtering, according to the invention, the extraction is carried out with a mixture of oil and water at a ratio of raw material: extractant 1: 5-1: 30 at room temperature for 2-4 hours with stirring, target th product was purified by treatment with an organic solvent in the ratio 1: 0,5 ÷ 2 followed by separation and drying of an aqueous residue.

Причем в качестве сырья используют печень рыб тресковых пород в свежем, мороженом или сухом виде.Moreover, as a raw material, the liver of cod fish is used fresh, ice-cream or dry.

Органический растворитель выбирают из ряда диэтиловый эфир, этилацетат, бутанол, хлороформ.The organic solvent is selected from the series diethyl ether, ethyl acetate, butanol, chloroform.

Сущность способа заключается в следующем. Свежую или замороженную печень рыб тресковых пород (сем. Gadidae) (треска, пикша, минтай, путассу и т.п.) измельчают на куттере или электромясорубке. Как показали предварительные опыты, более тщательное измельчение с разрушением клеток не требуется. Высушенную печень измельчать нет необходимости, поскольку она измельчается перед сушкой. Фарш свежей или замороженной печени или раздробленные кусочки сушеной печени заливают смесью масла и воды при соотношении сырье:экстрагент 1:5-1:20 для свежей или замороженной печени и 1:30 в случае сублимированной печени.The essence of the method is as follows. Fresh or frozen liver of cod fish (family Gadidae) (cod, haddock, pollock, blue whiting, etc.) is ground in a meat chopper or grinder. As shown by preliminary experiments, more thorough grinding with cell destruction is not required. It is not necessary to grind the dried liver, since it is crushed before drying. Stuffing fresh or frozen liver or crushed pieces of dried liver is poured with a mixture of oil and water at a ratio of raw materials: extractant 1: 5-1: 20 for fresh or frozen liver and 1:30 in the case of sublimated liver.

Суспензию инкубируют при комнатной температуре с перемешиванием в течение 2-4 часов, затем отделяют осадок, что целесообразно проводить на промышленном сепараторе или проточной центрифуге непрерывного действия. Жидкую фракцию разделяют, высушивают водный остаток тем или иным способом, за исключением высокотемпературного выпаривания. Далее проводят очистку целевого продукта путем обработки бутанолом в соотношении 1:1 с последующим разделением и высушиванием.The suspension is incubated at room temperature with stirring for 2-4 hours, then the precipitate is separated, which is advisable to carry out on an industrial separator or continuous flow centrifuge. The liquid fraction is separated, the aqueous residue is dried in one way or another, with the exception of high-temperature evaporation. Next, the target product is purified by treatment with butanol in a ratio of 1: 1, followed by separation and drying.

Конечный продукт представляет собой субстанцию коричневого цвета, не гигроскопичный, с солоноватым привкусом и не обладающий неприятным запахом, не содержит токсичных элементов в количествах, превышающих ПДК, и патогенную микрофлору, т.е. является безопасным.The final product is a brown substance, not hygroscopic, with a brackish taste and without an unpleasant odor, does not contain toxic elements in amounts exceeding the MPC, and pathogenic microflora, i.e. is safe.

Продукт на 30 или более процентов состоит из пептидов. При проведении электрофореза в полиакриламидном геле выяснилось, что из большого спектра белков и полипептидов, присутствующих в водном экстракте печени рыб семейства Gadidae, в конечном продукте после обработки бутанолом остаются пептидные фракции с молекулярной массой 20-15 кДа, 15-3,5 кДа и низкомолекулярная фракция менее 3,5 кДа, куда входят олигопептиды, свободные аминокислоты и глицерофосфат. В пептидной субстанции отсутствуют высокомолекулярные белковые соединения (по качественной реакции на белок методом осаждения трихлоруксусной кислотой). Содержание свободных аминокислот составило 20-55%, среди которых основными являются: глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, пролин, серии, треонин, лизин, глутамин, валин, тирозин, лейцин и метионин.A product of 30 percent or more consists of peptides. When conducting polyacrylamide gel electrophoresis, it was found that peptide fractions with a molecular weight of 20-15 kDa, 15-3.5 kDa and low molecular weight remain in the final product from a wide range of proteins and polypeptides present in the aqueous extract of the liver of fish of the Gadidae family fraction less than 3.5 kDa, which includes oligopeptides, free amino acids and glycerophosphate. In the peptide substance there are no high molecular weight protein compounds (according to the qualitative reaction to the protein by the precipitation method with trichloroacetic acid). The content of free amino acids was 20-55%, among which the main ones are: glutamic acid, aspartic acid, proline, series, threonine, lysine, glutamine, valine, tyrosine, leucine and methionine.

Пример 1Example 1

2 кг свежей печени трески (Gadus morrhua L.) измельчают с помощью электромясорубки, после чего фарш помещают в аппарат с мешалкой и заливают 20 л смеси растительного масла и воды в соотношении 1:1, перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную суспензию разделяют на сепараторе. Твердую фракцию направляют на изготовление кормовой муки, жидкую фракцию - на дальнейшую очистку от жировых примесей и высокомолекулярных белковых примесей. Полученную водную фракцию лиофильно высушивают и полученный остаток диспергируют в воде и очищают от водонерастворимых примесей экстракцией диэтиловым эфиром в соотношении 1:1. Водную фракцию декантируют и высушивают. В результате получают 18 г сухого пептидного комплекса.2 kg of fresh cod liver (Gadus morrhua L.) is ground using an electric meat grinder, after which the minced meat is placed in an apparatus with a stirrer and 20 l of a mixture of vegetable oil and water are poured in a ratio of 1: 1, stirred at room temperature for 2 hours. The resulting suspension shared on a separator. The solid fraction is sent to the manufacture of feed flour, the liquid fraction is sent to further purification from fatty impurities and high molecular weight protein impurities. The resulting aqueous fraction was freeze-dried and the resulting residue was dispersed in water and purified from water-insoluble impurities by extraction with diethyl ether in a ratio of 1: 1. The aqueous fraction is decanted and dried. The result is 18 g of dry peptide complex.

Конечный продукт представляет собой порошок светло-коричневого цвета, не гигроскопичный, с солоноватым привкусом и не обладающий неприятным запахом, не содержит токсичных элементов в количествах, превышающих ПДК, и патогенную микрофлору, т.е. соответствует показателям безопасности.The final product is a light brown powder, non-hygroscopic, with a brackish taste and no unpleasant odor, does not contain toxic elements in quantities exceeding the MPC, and pathogenic microflora, i.e. complies with safety indicators.

Пример 2Example 2

0,5 кг сублимированной печени пикши (Melanogrammus aeglefinus L.) загружают в реактор с мешалкой и заливают 25 л смеси растительного масла и воды в соотношении 1:1, перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Далее поступают аналогично примеру 1, но очищают от водонерастворимых примесей экстракцией бутанолом в соотношении 1:0,5.0.5 kg of sublimated haddock liver (Melanogrammus aeglefinus L.) is loaded into a reactor with a stirrer and pour 25 l of a mixture of vegetable oil and water in a ratio of 1: 1, stirred at room temperature for 4 hours. Then proceed analogously to example 1, but clean from water-insoluble impurities by extraction with butanol in a ratio of 1: 0.5.

Выход пептидного комплекса 5,3 г.The yield of the peptide complex is 5.3 g.

Пример 3Example 3

5 кг замороженной печени путассу (Micromesistius poutassou) измельчают, помещают в аппарат с мешалкой и заливают 3,5 л смеси растительного масла и воды в соотношении 1:1, перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Далее поступают аналогично примеру 1, но очищают от водонерастворимых примесей экстракцией этилацетатом в соотношении 1:2.5 kg of frozen blue whiting liver (Micromesistius poutassou) is crushed, placed in an apparatus with a stirrer and pour 3.5 l of a mixture of vegetable oil and water in a ratio of 1: 1, stirred at room temperature for 3 hours. Then proceed analogously to example 1, but clean from water-insoluble impurities by extraction with ethyl acetate in a ratio of 1: 2.

Выход сухого полипептидного продукта 43 г.The yield of dry polypeptide product 43 g.

Пример 4Example 4

Антиоксидантная активность в отношении радикала DPPH.Antioxidant activity against the radical DPPH.

Антиоксидантную активность композиции по примеру 1 исследовали в отношении радикала DPPH спектрофотометрическим методом. В качестве препарата сравнения использовали Алфлутоп - препарат, получаемый из мелких морских рыб.The antioxidant activity of the composition of example 1 was investigated in relation to the radical DPPH spectrophotometric method. Alflutop, a preparation obtained from small sea fish, was used as a comparison drug.

Установили, что IC50 для водорастворимых полипептидов, выделенных из печени рыб тресковых пород, составляет около 4,3 мг/мл, что сопоставимо с препаратом сравнения Алфлутоп, для которого IC50 было (4,6 мг/мл).It was found that the IC50 for water-soluble polypeptides isolated from the liver of codfish fish is about 4.3 mg / ml, which is comparable to the comparison drug Alflutop, for which there was an IC50 (4.6 mg / ml).

Claims (3)

1. Способ получения пептидного комплекса из печени рыб тресковых пород, включающий измельчение исходного сырья, экстракцию смесью масла и воды при соотношении сырье: экстрагент 1:5-1:30 при комнатной температуре в течение 2-4 ч с перемешиванием, очистку путем обработки органическим растворителем в соотношении 1:0,5-2 с последующим разделением и высушиванием водного остатка.1. A method of obtaining a peptide complex from the liver of codfish fish, including grinding the feedstock, extraction with a mixture of oil and water at a ratio of raw materials: extractant 1: 5-1: 30 at room temperature for 2-4 hours with stirring, purification by treatment with an organic solvent in a ratio of 1: 0.5-2, followed by separation and drying of the aqueous residue. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что печень рыб тресковых пород используют в качестве сырья в свежем, мороженом или сухом виде.2. The method according to claim 1, characterized in that the liver of the fish cod species is used as raw material in fresh, ice cream or dry form. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический растворитель выбирают из ряда диэтиловый эфир, этилацетат, бутанол, хлороформ. 3. The method according to claim 1, characterized in that the organic solvent is selected from the range of diethyl ether, ethyl acetate, butanol, chloroform.
RU2012103411/15A 2012-02-01 2012-02-01 Method for preparing peptide complex of cod liver RU2472517C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012103411/15A RU2472517C1 (en) 2012-02-01 2012-02-01 Method for preparing peptide complex of cod liver

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012103411/15A RU2472517C1 (en) 2012-02-01 2012-02-01 Method for preparing peptide complex of cod liver

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2472517C1 true RU2472517C1 (en) 2013-01-20

Family

ID=48806385

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012103411/15A RU2472517C1 (en) 2012-02-01 2012-02-01 Method for preparing peptide complex of cod liver

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2472517C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2635625C1 (en) * 2016-07-25 2017-11-14 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр" (ФГБНУ "ТИНРО-Центр") Method for obtaining of peptide immunity stimulator (versions) and baa based thereon
RU2809011C1 (en) * 2022-07-08 2023-12-05 Светлана Владимировна Чуйкова Method of obtaining complex of water-soluble peptides with antioxidant activity

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090092737A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 Advance International, Inc Method for deriving a high-protein powder/ omega 3 oil and double distilled water from any kind of fish or animal ( protein)
RU2409291C1 (en) * 2009-08-17 2011-01-20 Федеральное государственное унитарное предприятие Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр (ФГУП "ТИНРО-Центр") Method for production of water-soluble polypeptide complex of salmon fishes liver
US20110039768A1 (en) * 2008-02-12 2011-02-17 Hubert Drieu La Rochelle Fish protein hydrolysate having a satietogenic activity, nutraceutical and pharmacological compositions comprising such a hydrolysate and method for obtaining same,
US20110124570A1 (en) * 2008-02-12 2011-05-26 Compagnie Des Peches Saint Malo Sante Fish protein hydrolysate having a bone-stimulating and maintaining activity, nutraceutical and pharmacological compositions comprising such a hydrolysate and method for obtaining same
RU2420213C1 (en) * 2009-11-16 2011-06-10 Закрытое акционерное общество "Санкт-Петербургский институт фармации" Complex processing of gadidae fishes liver

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090092737A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 Advance International, Inc Method for deriving a high-protein powder/ omega 3 oil and double distilled water from any kind of fish or animal ( protein)
US20110039768A1 (en) * 2008-02-12 2011-02-17 Hubert Drieu La Rochelle Fish protein hydrolysate having a satietogenic activity, nutraceutical and pharmacological compositions comprising such a hydrolysate and method for obtaining same,
US20110124570A1 (en) * 2008-02-12 2011-05-26 Compagnie Des Peches Saint Malo Sante Fish protein hydrolysate having a bone-stimulating and maintaining activity, nutraceutical and pharmacological compositions comprising such a hydrolysate and method for obtaining same
RU2409291C1 (en) * 2009-08-17 2011-01-20 Федеральное государственное унитарное предприятие Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр (ФГУП "ТИНРО-Центр") Method for production of water-soluble polypeptide complex of salmon fishes liver
RU2420213C1 (en) * 2009-11-16 2011-06-10 Закрытое акционерное общество "Санкт-Петербургский институт фармации" Complex processing of gadidae fishes liver

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2635625C1 (en) * 2016-07-25 2017-11-14 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр" (ФГБНУ "ТИНРО-Центр") Method for obtaining of peptide immunity stimulator (versions) and baa based thereon
RU2809011C1 (en) * 2022-07-08 2023-12-05 Светлана Владимировна Чуйкова Method of obtaining complex of water-soluble peptides with antioxidant activity

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6346276B1 (en) Composition containing useful substances originating in fishes and shellfishes and process for the preparation of the substances
US10827767B2 (en) Process to improve enzyme hydrolysis and resultant protein flavor and bio-activity of fish offcuts
KR20090009862A (en) Peptide
RU2409291C1 (en) Method for production of water-soluble polypeptide complex of salmon fishes liver
RU2431411C1 (en) Method for production of protein product of manchurian walnut cake
US3970614A (en) Nutrient protein from keratinaceous material solubilized with N,N,-dimethylformamide
RU2472517C1 (en) Method for preparing peptide complex of cod liver
RU2420213C1 (en) Complex processing of gadidae fishes liver
RU2099076C1 (en) Method of complex processing the milk thistle fruits
RU2054292C1 (en) Method of preparing biologically active substances from velvet antlers
RU2171066C1 (en) Product enriched with free amino acids and method for preparation thereof
RU2310335C1 (en) Method for production of food protein concentrate from sunflower seeds
JP2010001262A (en) Functional composition and health maintenance food
RU2279885C2 (en) Method for simultaneous production of lecithin, cholesterol, kephalin, and biological solvent cake
RU2681352C1 (en) Method of obtaining food additives from secondary fish raw materials using hydrolysis
RU2283006C1 (en) Method for non-waste reprocessing of sea hedgehog roe
RU2059411C1 (en) Method of preparing bioactive substances from the velvet antlers
RU2346457C1 (en) Method for production of feed supplement from drone larvae and dead bees
RU2563816C1 (en) Method for producing immune stimulant
RU2658844C1 (en) Method of producing sea star fodder additive
RU2481119C1 (en) Peptide, amino acid and phospholipid rich agent
RU2075944C1 (en) Method of protein food addition preparing
RU2495672C1 (en) Method for preparing complex of biologically active substances of cod liver
RU2705572C1 (en) Method for producing a concentrate of biologically active substances from antlers
RU2562595C2 (en) Production of product with biologically active properties from holothurians

Legal Events

Date Code Title Description
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20130802

HE4A Change of address of a patent owner
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20190202