RU2441016C1 - Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 - Google Patents
Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2441016C1 RU2441016C1 RU2010121533/04A RU2010121533A RU2441016C1 RU 2441016 C1 RU2441016 C1 RU 2441016C1 RU 2010121533/04 A RU2010121533/04 A RU 2010121533/04A RU 2010121533 A RU2010121533 A RU 2010121533A RU 2441016 C1 RU2441016 C1 RU 2441016C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- azido
- deoxythymidine
- aminocarbonylphosphonate
- solution
- salts
- Prior art date
Links
- 0 CC(C(N1)=O)=CN([C@@]2OC(COP(C(N)=O)(O*)=O)=C(*)C2)C1=O Chemical compound CC(C(N1)=O)=CN([C@@]2OC(COP(C(N)=O)(O*)=O)=C(*)C2)C1=O 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к солям 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина с активностью против вируса ВИЧ-1 общей формулы
где R - ион щелочного или щелочно-земельного металла или ион аммония с различными заместителями. Технический результат - получение новых соединений, которые обладают способностью селективно ингибировать продукцию вируса иммунодефицита человека и являются стабильными веществами, что облегчает создание лекарственных форм на их основе. 1 табл.
Description
Изобретение относится к области молекулярной биологии, вирусологии и медицины и касается новых биологически активных соединений, а именно солей 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина. Новые соединения обладают способностью селективно ингибировать продукцию вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), что позволяет предполагать возможность их использования в медицине для лечения СПИДа.
Модифицированные нуклеозиды широко применяются для лечения и профилактики многих вирусных заболеваний. Примером такого соединения является первый российский оригинальный анти-ВИЧ препарат - 5'-Н-фосфонат 3'-азидо-3'-дезокситимидина (Никавир®). Будучи латентной формой 3'-азидо-3'-дезокситимидина, Никавир® обладает рядом преимуществ над ним: он менее токсичен для пациентов и обладает более узким спектром побочных действий, его время выведения из организма вдвое больше, что позволяет снизить частоту приема, и, наконец, резистентность к нему вырабатывается гораздо медленнее и на значительно более низком уровне.
5'-Аминокарбонилфосфонат 3'-азидо-3'-дезокситимидина, как и Никавир®, является депо-формой 3'-азидо-3'-дезокситимидина [RU 2322450 C2. Модифицированные 5'-фосфонаты АЗТ в качестве активных компонентов для потенциальных противовирусных препаратов; Ясько М.В., Шипицын А.В., Хандажинская А.Л. и др. // Новые производные алкил- и аминокарбонилфосфоновых кислот, содержащие 3'-азидо-3'-дезокситимидин. // Биоорганическая химия, 2006, 32(6), 603-608; Khandazhinskaya A.L, Yanvarev D.V., Jasko M.V. et al. // 5'-Amino-carbonyl phosphonates as new zidovudine depot forms: antiviral properties, intracellular transformations, and pharmacokinetic parameters. // Drug Metabolism and Disposition, 2009, 37(3), 494-501], однако создание лекарственной формы на его основе крайне затруднено из-за его нестабильности.
Заявляемые соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина описываются общей формулой:
где R - ион щелочного или щелочно-земельного металла или ион аммония с различными заместителями, которые одинаковы или различны и представляют собой: водород; природные α-аминокислоты и их эфиры; первичные, вторичные и третичные аминокислоты и их эфиры алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов; первичные, вторичные и третичные аминоспирты алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов; первичные, вторичные и третичные амины и полиамины алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов.
Заявляемые соли по активности и токсичности не уступают кислотной форме 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, но в то же время превосходят ее по способности к кристаллизации и стабильности. Кроме того, новые соли расширяют круг соединений, обладающих ингибирующей активностью в отношении ВИЧ-1.
Новые вещества представляют собой белые кристаллические вещества, хорошо растворимые в воде, ограниченно растворимые в спиртах, практически не растворимые в хлороформе.
Их получение проводят добавлением к кислотной форме 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина эквимолярного количества аммиака, соответствующего амино-соединения или гидроксида щелочного или щелочно-земельного металла. Образующиеся растворы солей упаривают до малых объемов, из которых начинается самопроизвольная кристаллизация, и оставляют при 4°C до окончания кристаллизации, выпавшие осадки отфильтровывают и сушат в вакууме. Выход целевых соединений составляет 95-98%.
Чистота и структура новых соединений подтверждены данными ВЭЖХ, УФ- и ЯМР-спектроскопии.
Был проведен анализ стабильности полученных соединений в виде 1% водных растворов при комнатной температуре. Кислая форма 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина деградирует за месяц на 40%, аммонийная соль - на 2%, для остальных солей в течение месяца продуктов деструкции детектировано не было.
Новые соединения подавляют репродукцию вируса иммунодефицита человека 1-го типа в культуре перевиваемых лимфоцитов МТ-4, обеспечивая защиту клеток от цитопатогенного действия вируса, и не проявляют токсичности в отношении хозяйских клеток, вплоть до крайне высоких концентраций (таблица). Из полученных экспериментальных данных видно, что исследуемые соединения, не оказывая токсического действия на клетки в эффективных концентрациях (50% токсические дозы на 2-4 порядка превышают 50% ингибирующие дозы), в высокой степени подавляют репродукцию вируса иммунодефицита 1-го типа в культуре клеток МТ-4. Терапевтические индексы исследуемых соединений (IS), определяемые как отношение токсической дозы препарата к его эффективной дозе, сравнимы с таковыми для кислотной формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина. Вирусологические тесты проведены в соответствии с описанными ранее протоколами.
Ниже приведены примеры, раскрывающие сущность изобретения.
Пример 1.
Синтез натриевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 Н раствора гидроксида натрия. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 191,2 г (96,5%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,5 нм (ε 9800).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,56 (1Н, с, Н6), 6,12 (1H, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,38 (1Н, м, H3'), 4,17 (3H, м, Н4', Н5'), 2,38 (2Н, т, J 6,2 Гц, Н2'), 1,79 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,42 (c).
Пример 2.
Синтез калиевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 H раствора гидроксида калия. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 200,6 г (97,3%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 267,0 нм (ε 9600).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,67 (1Н, c, Н6), 6,21 (1Н, т, J 6,6 Гц, H1'), 4,50 (1Н, м, H3'), 4,19 (3H, м, Н4', Н5'), 2,49 (2Н, т, J 6,6 Гц, Н2'), 1,91 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: - 1,59 (c).
Пример 3.
Синтез кальциевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина. К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 1000 мл (0,25 моль) 0,5 Н предварительно отфильтрованного раствора гидроксида кальция. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 200 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 192,9 г (98,1%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,8 нм (ε 9400).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,59 (1Н, с, Н6), 6,15 (1H, т, J 6,6 Гц, H1'), 4,41 (1H, м, H3'), 4,10 (3H, м, Н4', Н5'), 2,41 (2Н, т, J 5,9 Гц, Н2'), 1,82 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,59 (c).
Пример 4.
Синтез бариевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 1000 мл (0,25 моль) 0,5 Н предварительно отфильтрованного раствора гидроксида бария. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 300 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 216,3 г (97,9%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,7 нм (ε 9400).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,65 (1Н, с, Н6), 6,20 (1H, т, J 6,6 Гц, H1'), 4,47 (1Н, м, H3'), 4,16 (3H, м, Н4', Н5'), 2,46 (2Н, т, J 6,5 Гц, Н2'), 1,87 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,56 (c).
Пример 5.
Синтез аммониевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 H раствора аммиака. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 186,2 г (95,2%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,8 нм (ε 9650).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,65 (1H, с, Н6), 6,20 (1H, т, J 6,5 Гц, H1'), 4,46 (1H, м, H3'), 4,16 (3H, м, Н4', Н5'), 2,46 (2Н, т, J 5,9 Гц, Н2'), 1,87 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,59 (c).
Пример 6.
Синтез соли L-аланина и 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 200 мл (0,5 моль) 2,5 Н раствора L-аланина. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 221,5 г (95,8%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,8 нм (ε 9600).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,63 (1H, с, Н6), 6,21 (1Н, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,43 (1H, м, H3'), 4,25 (1Н, кв, J 6,5 Гц, СН (аланин)), 4,10 (3H, м, Н4', Н5'), 2,45 (2Н, т, J 6,0 Гц, Н2'), 1,84 (3H, с, 5-СН3), 1,33 (3H, д, J 6,5 Гц, СН3 (аланин)).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,57 (c).
Пример 7.
Синтез этаноламмониевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 Н раствора этаноламина. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 208,3 г (95,9%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,8 нм (ε 9900).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,61 (1H, с, Н6), 6,17 (1Н, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,48 (1H, м, H3'), 4,18 (3H, м, Н4', Н5'), 3,61 (2Н, т, J 5,0 Гц, CH2O (этаноламин)), 3,19 (2Н, т, J 5,0 Гц, CH2N (этаноламин)), 2,45 (2Н, т, J 6,1 Гц, Н2'), 1,86 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,55 (c).
Пример 8.
Синтез триэтаноламмониевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 Н раствора триэтаноламина. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 255,5 г (97,8%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,9 нм (ε 9700).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,58 (1Н, с, Н6), 6,15 (1Н, т, J 6,5 Гц, H1'), 4,39 (1H, м, H3'), 4,09 (3H, м, Н4', Н5'), 3,88 (6Н, т, J 5,0 Гц, 3CH2O (триэтаноламин)), 3,22 (6Н, т, J 5,0 Гц, 3CH2N (триэтаноламин)), 2,41 (2Н, т, J 6,0 Гц, Н2'), 1,80 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,53 (c).
Пример 9.
Синтез соли 6-аминокапроновой кислоты и 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 200 мл (0,5 моль) 2,5 H раствора 6-аминокапроновой кислоты. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 232,7 г (94,9%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,6 нм (ε 9900).
1H-ЯМР (D20), м.д.: 7,64 (1Н, с, Н6), 6,20 (1Н, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,46 (1H, м, H3'), 4,46 (3H, м, Н4', Н5'), 3,02 (2Н, т, J 7,1 Гц, CH2N (аминокапроновая кислота)), 2,45 (2Н, т, J 6,1 Гц, Н2'), 2,34 (2Н, т, J 7,1 Гц, CH 2COOH (аминокапроновая кислота)), 1,87 (3H, с, 5-СН3), 1,52 (6Н, м, 3CH2 (аминокапроновая кислота)).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,57 (c).
Пример 10.
Синтез пиридоксиламмониевой соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 250 мл (0,5 моль) 2 Н раствора пиридоксиламина. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 261,2 г (96,5%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 261 нм (ε 14100).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 8,08 (1Н, с, Ar (пиридоксиламин)), 7,65 (1Н, c, Н6), 6,20 (1Н, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,84 (2Н, с, CH 2OH (пиридоксиламин)), 4,48 (1H, м, H3'), 4,21 (2Н, с, CH 2NH2 (пиридоксиламин)), 4,09 (3H, м, Н4', Н5'), 2,77 (3H, с, СН3 (пиридоксиламин)), 2,47 (2Н, т, J 6,1 Гц, Н2'), 1,89 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,51 (c).
Пример 11.
Синтез соли диметиламиноэтанола и 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
К раствору 187 г (0,5 моль) кислой формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина в 350 мл дистиллированной воды при температуре 4°C и перемешивании в течение 20 мин приливают 100 мл (0,5 моль) 5 Н раствора диметиламиноэтанола. Образовавшийся раствор упаривают на роторном испарителе (температура бани 40°C) до объема 100-150 мл и оставляют при температуре 4°C до окончания кристаллизации. Выпавший мелкокристаллический осадок отделяют на стеклянном фильтре, промывают 20 мл охлажденной до 4°C воды и сушат в вакууме. Выход: 221,2 г (95,7%).
Время удерживания на колонке Luna 100 C18(2) 150×4,6 мм - 2,4 мин (подвижная фаза: 0,05 М раствор ацетата аммония - ацетонитрил в объемном соотношении 8:1, температура колонки 40°C, скорость потока 1 мл/мин).
УФ-спектр (вода): λmax 266,7 нм (ε 9800).
1H-ЯМР (D2O), м.д.: 7,67 (1Н, с, Н6), 6,24 (1Н, т, J 6,7 Гц, H1'), 4,49 (1H, м, H3'), 4,18 (3H, м, Н4', Н5'), 3,93 (2Н, т, J 5,0 Гц, CH2O (диметиламиноэтанол)), 3,21 (2Н, т, J 5,0 Гц, CH2N (диметиламиноэтанол)), 2,51 (6Н, с, СН3 (диметиламиноэтанол)), 2,41 (2Н, м, Н2'), 1,89 (3H, с, 5-СН3).
31Р-ЯМР (D2O), м.д.: -1,50 (c).
Пример 12.
Исследования ингибирования репродукции ВИЧ включает культивирование первично инфицированных лимфоидных клеток линии МТ-4 в присутствии исследуемых соединений, конечные концентрации которых в культуральной среде составляют 0,001-100 мкг/мл, на протяжении одного пассажа - в течение 4 суток.
Ингибирование репродукции ВИЧ в культуре чувствительных клеток определяют по снижению накопления вирусспецифического белка р24 (по данным иммуноферментного анализа), а также по увеличению жизнеспособности клеток в присутствии препарата по сравнению с контролем, определяемому на 4-е сутки культивирования при окрашивании бромидом 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил-)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ).
Оценка цитотоксичности соединений.
Цитотоксичность препарата оценивают путем добавления его разведения в бессывороточной среде RPMI-1640 к клеточной суспензии МТ-4, помещенной в лунки 96-луночного планшета (Cel-Cult, England), до конечных концентраций 0,001-100 мкг/мл (по три лунки на каждую дозу) с последующим культивированием при 37°C в течение 4 суток. Посевная концентрация составляет 0,5×106 клеточных частиц в миллиметре. Контролем служат клетки без добавления препарата, вместо которого вносят такое же количество бессывороточной среды. Жизнеспособность клеток подсчитывают на 4-е сутки культивирования, пользуясь формазановым методом (прижизненным окрашиванием клеток МТТ). Токсичность различных доз препарата определяют по жизнеспособности клеток относительно контроля, по полученным данным строят дозозависимую кривую и определяют концентрацию, на 50% снижающую жизнеспособность клеток (CD50). Исследуемые соединения не оказывают токсического действия на клетки МТ-4 в эффективных концентрациях. Следует также отметить, что 50% токсичные дозы на 2-4 порядка превышают эффективные в отношении ВИЧ-1 дозы (таблица 1).
Влияние исследуемых соединений на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4 исследовано по известной методике.
Терапевтический индекс, или индекс селективности (IS), считают как отношение 50%-ной токсической концентрации соединения к его 50%-ной эффективной дозе (результаты представлены в таблице). На основании этих количественных показателей ингибирования можно судить об эффективности противовирусного действия заявляемых соединений, заключающейся в высокой степени подавления репликации ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4, сравнимой с эффективностью кислотной формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина.
Противовирусная активность солей 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина против ВИЧ-1 ГВК4046 | |||
Соединение | CD50, µM | ID50, µM | IS |
R=Na | 2,7 | 1,2 | 2250 |
R=K | 2,5 | 0,9 | 2778 |
R=Ca | 1,9 | 1 | 1900 |
R=Ва | 3,5 | 1,3 | 2692 |
R=NH4 | 2,7 | 0,8 | 3375 |
R=NH2CH(CH3)COOH | 2,9 | 0,9 | 3222 |
R=NH2CH2CH2OH | 2,8 | 1,1 | 2545 |
R=N(CH2CH2OH)3 | 3 | 0,9 | 3333 |
R=NH2(CH2)5COOH | 3,2 | 0,8 | 4000 |
R=пиридоксиламин | 2,1 | 1 | 2100 |
R=N(CH3)2CH2CH2OH | 2,7 | 0,9 | 3000 |
Кислая форма (контроль) | 2,6 | 0,8 | 3250 |
Таким образом, новые вещества - соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина - ингибируют размножение ВИЧ-1 в культурах клеток лимфоцитов, причем примерно с той же активностью, с которой это наблюдалось и для кислотной формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина. Токсичность заявляемых солей 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина также находится в пределах токсичности кислотной формы 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина. В то же время новые соединения являются более стабильными, что облегчает создание лекарственных форм на их основе.
Claims (1)
- Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина общей формулы:
,
где R - ион щелочного или щелочно-земельного металла или ион аммония с различными заместителями, которые одинаковы или различны и представляют собой: водород; природные α-аминокислоты и их эфиры; первичные, вторичные и третичные аминокислоты и их эфиры алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов; первичные, вторичные и третичные аминоспирты алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов; первичные, вторичные и третичные амины и полиамины алифатического, ароматического, карбоциклического и гетероциклического рядов, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека ВИЧ-1.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010121533/04A RU2441016C1 (ru) | 2010-05-28 | 2010-05-28 | Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010121533/04A RU2441016C1 (ru) | 2010-05-28 | 2010-05-28 | Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2441016C1 true RU2441016C1 (ru) | 2012-01-27 |
Family
ID=45786456
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010121533/04A RU2441016C1 (ru) | 2010-05-28 | 2010-05-28 | Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2441016C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014092604A1 (ru) * | 2012-12-11 | 2014-06-19 | Petrov Sergei Yurievich | Способ получения моноэтаноламиновых солей фосфоновых кислот |
RU2726210C2 (ru) * | 2018-12-27 | 2020-07-09 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Пролонгированные Лекарства" | Комбинация противовирусных средств, набор и способ лечения на ее основе |
RU2753518C1 (ru) * | 2020-12-24 | 2021-08-17 | Богдан Витальевич Бровченко | Состав, обладающий антиретровирусной активностью, фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
RU2806172C1 (ru) * | 2020-12-24 | 2023-10-27 | Общество с ограниченной ответственностью "АЗТ Фарма К.Б." | Состав, обладающий антиретровирусной активностью, фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
-
2010
- 2010-05-28 RU RU2010121533/04A patent/RU2441016C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ЯСЬКО М.В. и др. Биоорганическая химия, 2006, 32(6), 603-608. KHANDAZHINSKAYA A.L. ET AL, Drug Metabolism and Disposition, 2009, 37(3), 494-501. * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014092604A1 (ru) * | 2012-12-11 | 2014-06-19 | Petrov Sergei Yurievich | Способ получения моноэтаноламиновых солей фосфоновых кислот |
RU2529194C2 (ru) * | 2012-12-11 | 2014-09-27 | Сергей Юрьевич Петров | Способ получения моноэтаноламиновых солей фосфоновых кислот |
RU2726210C2 (ru) * | 2018-12-27 | 2020-07-09 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Пролонгированные Лекарства" | Комбинация противовирусных средств, набор и способ лечения на ее основе |
WO2020139163A3 (ru) * | 2018-12-27 | 2020-08-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Пролонгированные Лекарства" | Комбинация противовирусных средств |
CN113473994A (zh) * | 2018-12-27 | 2021-10-01 | 长效药物有限责任公司 | 抗病毒剂的组合、基于其治疗的试剂盒和方法 |
RU2753518C1 (ru) * | 2020-12-24 | 2021-08-17 | Богдан Витальевич Бровченко | Состав, обладающий антиретровирусной активностью, фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
RU2806172C1 (ru) * | 2020-12-24 | 2023-10-27 | Общество с ограниченной ответственностью "АЗТ Фарма К.Б." | Состав, обладающий антиретровирусной активностью, фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI593700B (zh) | 一種替諾福韋前藥及其在醫藥上的應用 | |
NO154751B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme hydroksykarbonylfosfonsyreestere. | |
US20150051387A1 (en) | Water soluble platinum complexes for tumor treatment and process of preparing same | |
RU2441016C1 (ru) | Соли 5'-аминокарбонилфосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 | |
CN103347849B (zh) | 富勒烯с60的均聚氨基酸和杂多氨基酸衍生物、其制备方法和基于该衍生物的药物组合物 | |
AU2017314148A1 (en) | Sofosbuvir derivatives for the treatment of Hepatitis C | |
WO2013055252A1 (ru) | Соли эфиров карбомоилфосфоновой кислоты, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 | |
McGuigan et al. | Novel nucleoside phosphoramidates as inhibitors of HIV: studies on the stereochemical requirements of the phosphoramidate amino acid | |
RU2106353C1 (ru) | Соли 5'-н-фосфоната 3'- азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся специфическими ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 и вич-2 | |
EP2851368B1 (en) | Complex compounds of germanium, methods for producing same, and drugs | |
EP0692475A4 (en) | N-METHYLE-N - / - g (a), - g (D) -GLUCOPYRANOZIL / AMMONIAC-2- / ACRIDON-9-ON-10-YLE / ACETATE / CYCLOPHERONE PROVIDED WITH INTERFERON PRODUCTION PROPERTIES, ANTIVIRALS ( (INCLUDING ANTI-HIV ACTIVITY), PEST CONTROL, ANTI-PROMOTER AND RADIATION PROTECTORS | |
RU2277908C1 (ru) | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения | |
AU2012212707B2 (en) | Homo- and hetero-polyamino-acid derivatives of fullerene C60, method for producing same, and pharmaceutical compositions based on said derivatives | |
CN101844811B (zh) | 抗肝炎病毒的铌钨酸盐化合物 | |
US10307424B2 (en) | Drug with hepatoprotective activity | |
RU2207343C2 (ru) | Замещенные аммониевые соли 5'-н-фосфоната 3'-азидо-3'-дезокситимидина, являющиеся селективными ингибиторами продукции вируса иммунодефицита человека вич-1 и вич-2 | |
RU2118532C1 (ru) | Противоинфекционное, противовоспалительное и противоопухолевое лекарственное средство | |
CN112225779B (zh) | Arg(NO2)-Gly-Asp-Val-吉西他滨,其合成,抗肿瘤活性和应用 | |
RU2570113C1 (ru) | N-(2-ацетамидопурин-6-ил)глицин, обладающий противотуберкулезной активностью | |
JPH01501478A (ja) | 9―置換グアニン | |
RU2692065C1 (ru) | Глутатионаммониевые соли o,o-диорганилдитиофосфорных кислот, обладающие антиоксидантной и противоопухолевой активностью | |
US7999099B2 (en) | Modified 5′-phosphonate azidothymidine—potential anti-viral preparations | |
JPH07504170A (ja) | 抗ウイルス性活性を有するヒペリシン化合物のイオン対 | |
RU2304145C1 (ru) | Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека | |
AU2538695A (en) | Use of a naphthalenesulfonic acid compound for inhibiting retroviral infection |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD4A | Correction of name of patent owner | ||
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20180426 |