RU2422152C1 - Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием - Google Patents
Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием Download PDFInfo
- Publication number
- RU2422152C1 RU2422152C1 RU2010112756/15A RU2010112756A RU2422152C1 RU 2422152 C1 RU2422152 C1 RU 2422152C1 RU 2010112756/15 A RU2010112756/15 A RU 2010112756/15A RU 2010112756 A RU2010112756 A RU 2010112756A RU 2422152 C1 RU2422152 C1 RU 2422152C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cyclophilin
- action
- heparine
- activity
- cyclophiline
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к средствам, обладающим гепариноподобным действием. Циклофилин А - белок с молекулярной массой 18 кД в дозе 10 мкг/мл обладает гепариноподобным действием. Изобретение обеспечивает расширение спектра веществ с гепариноподобным действием. 4 ил.
Description
Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к средствам, обладающим гепариноподобным действием.
Известно, что для профилактики и лечения тромбофилий в качестве лекарственных средств используют вещества, обладающие ингибирующим действием на активированный фактор X. К таким веществам относятся низкомолекулярные гепарины, гепариноиды [Чарная М.А., Морозов Ю.А. Тромбозы в клинической практике. // М., ГЭОТАР-Медиа. - 2009. - С.39-92; Hirsh J., Raschke R. Heparin and low-molecular-weight heparin: the Seventh ACCP Conference on antithrombotic and thrombolytic therapy. // Chest. - 2004. - Vol.126 (3 suppl.). - P.188S-203S; Rutherford R. Vascular surgery, sixth edition. Prevention and medical treatment of acute deep venous thrombosis. // Philadelphia, Pa. - WB Saunders C, 2005. - 780 p.].
Циклофилин A - белок с молекулярной массой 18 кД, участвующий в процессах внутриклеточного транспорта белков и обладающий цис-транс-изомеразной активностью [Fisher G., Bang С., Mech С.Determination of enzymatic catalysis for the cis-trans-isomerization of peptide binding in proline-containing peptides. // Biomed. Biochem. Acta. - 1984. - Vol.43. - P.1101-1111]. Циклофилин А секретируется клетками тимуса и регулирует миграцию клеток-предшественников из костного мозга в кровь [Khromykh L.M., Kulikova N.L., Anfalova T.V., Muranova Т.А., Abramov V.M., Vasiliev A.M., Khlebnikov V.S., Kazansky D.B. Cyclophilin A produced by thymocytes regulates the migration of murine bone marrow cells. // Cell Immunol. 2007 Sep; 249(1):46-53], а также миграцию зрелых моноцитов, нейтрофилов, эозинофилов и Т-лимфоцитов к месту воспаления [Q.Xu, M.C.Leiva, S.A.Fischkoff, R.E.Handschumacher, C.R.Lyttle. Leukocyte chemotactic activity of cyclophilin. J Biol. Chem. 267. 1992. P.1168-71]. При повреждении сосудистой стенки активированные тромбоциты также способны секретировать циклофилин A [Coppinger J.A., Cagney G., Toomey S. et al. Characterization of the proteins released from activated platelets leads to localization of novel platelet proteins in human atherosclerotic lesions. // Blood. - 2004. - Vol.103, №6. - P.2094-2104].
При оксидативном стрессе циклофилин A секретируется гладкомышечными клетками сосудистой стенки и стимулирует пролиферацию эндотелиоцитов [Lay A., Jiang Х.М., Kisker О., et al. Phosphoglycerate kinase acts in tumour angiogenesis as a disulphide reductase. // Nature. - 2000. - Vol.408. - P.869-873].
Задачей изобретения является расширение спектра биологической активности циклофилина A как средства, обладающего гепариноподобным действием.
Для выполнения поставленной задачи использовали рекомбинантный циклофилин A человека и проводили оценку его влияния на показатели свертывающей системы крови in vitro.
Рекомбинантный циклофилин A человека получали из трансфецированных геном циклофилина A человека клеток E-coli с дальнейшей очисткой. Чистота используемого белка ~98%.
Для исследования использовали кровь пациентов с ишемической болезнью сердца (25 человек) или ревматическим пороком сердца (25 человек), которую получали из центрального венозного катетера, установленного в подключичную или яремную вену. Полученную кровь стабилизировали раствором 3,8% цитрата натрия в соотношении кровь/цитрат = 9/1. Кровь центрифугировали при скорости 3000 об/мин в течение 15 минут, отбирали бедную тромбоцитами плазму, которую использовали в экспериментах.
Циклофилин A добавляли к исследуемой плазме до конечной концентрации 10 мкг/мл и инкубировали при температуре 37°C. Для проведения анализа от основного объема отбирали аликвоты плазмы через 10, 30 и 60 минут инкубации, в которых определяли протромбиновое время (ПТВ, с), тромбиновое время (ТВ, с), активированное частичное.
Для определения ПТВ 0,1 мл плазмы нагревали при температуре 37°C в течение 2 минут, добавляли 0,2 мл раствора тромбопластина (Ренампластин, фирма «Ренам», Москва) и регистрировали время образования сгустка.
Для определения ТВ 0,1 мл плазмы нагревали при температуре 37°C в течение 1 минуты, затем добавляли 0,1 мл раствора тромбина с активностью 6 NIH (Тромбо-тест, фирма «Технология-Стандарт», Россия) и регистрировали время образования сгустка.
Для определения АЧТВ к 0,1 мл плазмы добавляли 0,1 мл АЧТВ-реагента (фирма «Технология-Стандарт», Россия), инкубировали в течение 2 минут, затем добавляли 0,1 мл 0,025М раствора хлорида кальция (фирма «Технология-Стандарт», Россия) и регистрировали время образования сгустка.
Для определения анти-Ха-активности к 0,1 мл субстратной (донорской) плазмы добавляли 0,025 мл плазмы пациента, нагревали в течение 1 минуты и добавляли 0,05 мл раствора фосфолипидов (фирма «Ренам», Москва), инкубировали 2 минуты, добавляли 0,035% раствор хлорида кальция и регистрировали время образования сгустка. По контрольному графику находили анти-Ха-активность, соответствующую данному времени свертывания.
Влияние циклофилина A на протромбиновое время.
ПТВ характеризует оценку внешнего пути свертывания крови, отражает активность факторов VII, V, II, I. Влияние циклофилина A в дозе 10 мкг/мл на ПТВ показано на Фиг.1. Из представленных данных следует, что циклофилин A не влияет на величину ПТВ.
Влияние циклофилина A на тромбиновое время.
ТВ отражает общий (конечный) путь свертывания крови. Влияние циклофилина A в дозе 10 мкг/мл на ТВ показано на Фиг.2. Из представленных данных следует, что циклофилин A не влияет на величину ТВ.
Влияние циклофилина A на активированное частичное тромбопластиновое время.
АЧТВ отражает внутренний путь свертывания крови и активность факторов XII, XI, X, VIII. Влияние циклофилина A в дозе 10 мкг/мл на АЧТВ представлено на Фиг.3. Показано, что через 10 минут инкубации АЧТВ удлинялось в среднем на 18,4% и это удлинение сохранялось вплоть до 60 минуты инкубации.
Влияние циклофилина A на анти-Ха-активность плазмы.
Влияние циклофилина А в дозе 10 мкг/мл на анти-Ха-активность плазмы представлено на Фиг.4. Установлено, что при действии циклофилина A через 10 минут инкубации анти-Ха-активность плазмы увеличивалась с 0,03 до 0,24 анти-Ха ЕД/мл (800%), а через 30 и 60 минут инкубации анти-Ха-активность снижалась до 0,11 и 0,10 анти-Ха ЕД/мл, соответственно.
Технический результат изобретения.
Циклофилин A - средство, обладающее гепариноподобным действием.
Claims (1)
- Циклофилин А - средство, обладающее гепариноподобным действием.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010112756/15A RU2422152C1 (ru) | 2010-04-02 | 2010-04-02 | Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010112756/15A RU2422152C1 (ru) | 2010-04-02 | 2010-04-02 | Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2422152C1 true RU2422152C1 (ru) | 2011-06-27 |
Family
ID=44739012
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010112756/15A RU2422152C1 (ru) | 2010-04-02 | 2010-04-02 | Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2422152C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2557305C2 (ru) * | 2013-11-20 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина" РАМН) | ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pETmin-CypA - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЦИКЛОФИЛИНА А ЧЕЛОВЕКА |
-
2010
- 2010-04-02 RU RU2010112756/15A patent/RU2422152C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Rosado A. et al. SERCA2b "Activity Is Regulated by Cyclophilins in Human Platelets" Arterioscler Thromb Vase Biol, March 1, 2010, 30(3):419-425, (abstract). Shawn M. et al. "Critical role for the mitochondrial permibility transition pore and cyclophilin D in platelet activation and thrombosis". Hemostasis, Thrombosis and Vascular Biology. Blood, 1 Februrary, 2008, vol.111, No3, pp.1257-1265 (abstract). * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2557305C2 (ru) * | 2013-11-20 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина" РАМН) | ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pETmin-CypA - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЦИКЛОФИЛИНА А ЧЕЛОВЕКА |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Patel et al. | Macrophage polarization in response to epigenetic modifiers during infection and inflammation | |
ES2230624T3 (es) | Composicion farmaceutica que comprende un compuesto que tiene actividad anti-xa y un compuesto antagonista de la agregacion plaquetaria. | |
KR100235782B1 (ko) | 병리학적 과정의 예방 또는 치료를 위한 성분물 | |
US20230129268A1 (en) | Platelet rich plasma formulations | |
Hashemi et al. | NETosis in ischemic/reperfusion injuries: An organ-based review | |
Spadarella et al. | From unfractionated heparin to pentasaccharide: Paradigm of rigorous science growing in the understanding of the in vivo thrombin generation | |
Desoky et al. | Cardioprotective effect of atorvastatin alone or in combination with remote ischemic preconditioning on the biochemical changes induced by ischemic/reperfusion injury in a mutual prospective study with a clinical and experimental animal arm | |
Chen et al. | A natural extracellular matrix hydrogel through selective nutrient restriction for hyperinflammatory starvation therapy | |
RU2422152C1 (ru) | Циклофилин а - средство, обладающее гепариноподобным действием | |
RU2359681C1 (ru) | Антитромботическая композиция на основе гепарина для перорального применения | |
TWI823085B (zh) | 嗜中性白血球活化調節劑 | |
L'acqua et al. | Thromboelastography-guided thrombolysis during ECMO: a case report | |
Kishimoto et al. | M118–A rationally engineered low-molecular-weight heparin designed specifically for the treatment of acute coronary syndromes | |
JP2004507562A (ja) | 抗血栓性組成物 | |
RU2328288C1 (ru) | Способ лечения трофических язв нижних конечностей при посттромботической болезни | |
RU2318521C1 (ru) | Способ проведения антикоагулянтной терапии у детей с термической травмой | |
RU2435607C1 (ru) | Циклофилин а - средство, усиливающее адгезивные свойства тромбоцитов | |
Hviid et al. | Postoperative accumulation of CYR61/CCN1 in surgical wound fluid precedes cytokine activation and is disparate from systemic alterations | |
Dehghani | Biological Band-Aids: Design and Application of a Glycosaminoglycan-Peptide Conjugate to Regulate Cell-Cell Interactions During Acute Inflammation | |
Sun et al. | Direct thrombin inhibiting coating for active coagulant management in extracorporeal circulation | |
Tun | Probing the toxicity of mesenteric lymph in critical illness | |
Murgo et al. | The use of activated protein C (drotrecogin alfa (activated)) in the treatment of severe sepsis | |
WO2014033551A2 (en) | The use of direct thrombin inhibitors in critically ill patients | |
CN109939110A (zh) | 药根碱在制备抗血栓药物中的应用 | |
Seth | Surgical stress promotes the development of cancer metastases by a coagulation-dependent mechanism in a murine model |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180403 |