RU2401827C1 - Способ получения розмариновой кислоты - Google Patents
Способ получения розмариновой кислоты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2401827C1 RU2401827C1 RU2009105341/04A RU2009105341A RU2401827C1 RU 2401827 C1 RU2401827 C1 RU 2401827C1 RU 2009105341/04 A RU2009105341/04 A RU 2009105341/04A RU 2009105341 A RU2009105341 A RU 2009105341A RU 2401827 C1 RU2401827 C1 RU 2401827C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rosmarinic acid
- water
- acid
- grass
- filtered
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтическому производству и касается способа получения розмариновой кислоты. Способ получения розмариновой кислоты из растительного сырья включает экстракцию водой и очистку, морскую траву семейства Zosteraceae экстрагируют водой в течение 6-8 час при комнатной температуре при добавлении пищевой кислоты до рН 2,5-3,0, после экстракции полученный раствор фильтруют, траву прессуют, получая дополнительный экстракт, экстракты объединяют, их очистку осуществляют на мембранном микрофильтре, затем на хроматографической колонке с полихромом-1, целевой продукт элюируют 5-7% водным раствором этилового спирта, концентрируют и лиофилизуют. Способ обеспечивает повышение выхода, чистоты розмариновой кислоты, упрощение способа. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.
Description
Изобретение относится к фармацевтическому производству и касается способа получения розмариновой кислоты.
Розмариновая кислота, т.е. ([[3-(3,4-Дигидроксифенил)-1-оксо-2E-пропенил]окси]-3,4-дигидроксибензопропионовая кислота), является субстанцией, широко используемой в фармакологии и парафармацевтике для производства лекарственных средств и биологически активных добавок к пище. Она имеет низкую токсичность, быстро выводится из кровотока [Phytochemistry, 62, р.121-125, 2003]. Розмариновая кислота проявляет седативный эффект [RU 2275931 С1, 2006.05.10; JP 2002275061, 2002.09.25], антиоксидантную, противовоспалительную активность [JP 2005272362, 2005.10.06], антимутагенную, антибактериальную [RU 2006108863, 27.09.2007] и противовирусную активность [RU 2001192257, 2002.11.27], в частности, используется в терапии Herpes simplex.
Розмариновая кислота входит в состав композиций, используемых для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе при хронической устойчивой стенокардии [RU 2328300 С2, 2008.07.10; CN 1923803, 2007.03.07; JP 4243822, 1992.08.31], кардиоваскулярных и цереброваскулярных заболеваниях [RU 2006136529, 2008.04.27; JP 4243822, 1992.08.31]; в качестве антиаллергического средства [JP 2004097108, 2004.04.02; US 2006134236, 2006.06.22]; для защиты суставов в качестве противовоспалительного и анальгетического средства [KR 2002008211, 2002.11.27]; для лечения язвы желудка [CN 1153778, 1997.07.09], острой и хронической почечной недостаточности [CN 1977834, 2007.06.13], фиброза печени и почек [CN 101095668, 2008.01.02].
Розмариновая кислота применяется в косметическом производстве [Petersen M., Simmonds M-S.J.//Phytochemistry, 62, р.121-125, 2003; RU 2003138141, 2005.06.10].
Традиционными источниками получения розмариновой кислоты и ее производных являются растения видов Boraginaceae и Lamiaceae, в частности мелисса (Melissa officinalis) и розмарины Rosmarinus officinalis [Petersen M., Simmonds M-S.J.//Phytochemistry, 62, р.121-125, 2003]. Известны также технологические способы получения розмариновой кислоты из культуры клеток тканей растений, например Coleus blumei и Salvia officinalis [Petersen M., Simmonds M-S.J.//Phytochemistry, 62, p.121-125, 2003], Lavanda vera [Georgiev M. et all//Food Chemistry, 94(1), p.111-114, 2006].
Известен способ получения розмариновой кислоты из ароматических растений путем экстракции измельченного сырья спиртом, концентрирования экстракта, растворения остатка в воде, экстракции водной фазы толуолом при рН 4,5, затем метил-трет-бутил эфиром при рН 3,5-4 с добавлением соляной кислоты поэтапно, упаривания эфирного экстракта, растворения его в воде с активированным углем при нагревании, фильтрации, добавки кристаллов розмариновой кислоты в качестве затравки, охлаждения при 0-5°С в течение 6 часов, фильтрования и сушки в вакууме при 60°С в течение 24 час. Выход целевого продукта - 1,08% от веса сырья, чистота - 90,6% от стандарта [WO 03/066568 А1, 2003.08.14].
К недостаткам данного способа относятся длительность и трудоемкость, а также токсичность и пожароопасность.
Известен способ получения розмариновой кислоты путем экстракции сырья методом настаивания, ультразвуковой обработки, добавления антиоксиданта в экстракт, доведения рН экстракта до кислого значения, нагревания, фильтрации и хроматографии на полиамидной смоле, или ионообменной смоле, или крупно-пористой смоле на стандартных колонках [CN 1995007 А, 2007.07.11].
К недостаткам способа можно отнести недостаточно высокую степень очистки целевого продукта на ионообменных смолах, а также необходимость наличия высокотехнологичных ультразвуковых экстракторов.
В качестве прототипа выбран способ получения розмариновой кислоты из Melissa officinalis путем экстракции листьев водой при 80-100°С, подкисления экстракта неорганической кислотой рН 2-2,5, фильтрации раствора, дальнейшей экстракции кислого водного раствора органическим растворителем, выбранным из группы, состоящей из органических эфиров, высших спиртов, не смешивающихся с водой, и эфиров алифатических карбоновых кислот; упаривания экстракта, растворения остатка в воде при 40-80°С, отстаивания при 2-8°С в течение 4-14 часов, фильтрации, выпаривания в вакууме до трети объема, отстаивания в течение 2-8 часов с добавлением зародышевых кристаллов, фильтрации, промывки ледяной водой и повторной кристаллизации при 4°С в течение 2 суток, фильтрации, промывки и сушки. Выход целевого продукта - 1,15% от веса сырья (55% от теоретического). Возможна очистка эфирного экстракта на Сефадексе LH-20 в 70% водном метаноле с последующей кристаллизацией [US 4354035, 1982.10.12].
К недостаткам известного способа относятся его многостадийность (15 стадий), использование токсичных и пожароопасных органических растворителей (диэтиловый или диизопропиловый эфиры или н-бутиловый спирт или этилацетат), недостаточно высокий выход целевого продукта. Сырье - Melissa officinalis в России не культивируется для промышленной переработки.
Таким образом, широкое применение розмариновой кислоты лимитировано недостаточным ее выпуском в связи с ограниченностью сырьевой базы и сложностью технологических процессов ее производства. В основном выпуск лекарственных средств на ее основе ограничен галеновыми препаратами. В этой связи возникла необходимость в поиске распространенного, постоянно возобновляемого источника сырья и простого, воспроизводимого технологического способа получения розмариновой кислоты.
Поставленная задача решена способом получения розмариновой кислоты из растительного сырья, включающим экстракцию водой и очистку, в котором согласно изобретению морскую траву семейства Zosteraceae экстрагируют водой в течение 6-8 ч при комнатной температуре при добавлении пищевой кислоты до рН 2,5-3,0, после экстракции полученный раствор фильтруют, траву прессуют, получая дополнительный экстракт, экстракты объединяют, их очистку осуществляют на мембранном микрофильтре, затем на хроматографической колонке с полихромом-1, целевой продукт элюируют 5-7% водным раствором этилового спирта, концентрируют и лиофилизуют.
С целью дополнительной очистки целевого продукта лиофилизат растворяют в дистиллированной воде, фильтруют, затем кристаллизуют при температуре 4°С и высушивают.
Заявителем было обнаружено, что розмариновая кислота может быть получена простым способом, обеспечивающим более высокий выход и чистоту целевого продукта, из морской травы семейства Zosteraceae (Zostera asiatica (зостера азиатская), Z. marina (зостера морская) и Phyllospadix iwatensis (филлоспадикс иватенский)).
Эти многолетние растения произрастают у открытых берегов на глубинах до 10 м, распространены на всем побережье Дальнего Востока. Запасы зостеры практически не ограничены. Ведется промысловая заготовка зостеры для производства пищевых пектинов - препаратов «Зостерин» и «Изостерит».
Заявителем разработана технология получения розмариновой кислоты из морского растительного сырья при сохранении возможности его использования для дальнейшей промышленной переработки.
Сущность предлагаемого способа состоит в следующем.
Морскую траву семейства Zosteraceae промывают питьевой водой, декантируют, измельчают и экстрагируют дистиллированной или деминерализованной водой с постепенным добавлением раствора пищевой кислоты до рН 2,5-3,0 при постоянном перемешивании в течение 6-8 ч при комнатной температуре. После экстракции полученный раствор фильтруют, траву прессуют, получая дополнительный экстракт. Прессованную траву направляют на дальнейшую переработку.
Экстракт фильтруют на мембранном микрофильтре (мембрана 6-15 кДа) и наносят на хроматографическую колонку с полихромом-1. Колонку отмывают дистиллированной водой. Полихром-1 (ТУ 6-09-10-1833-88) - продукт полимеризации тетрафторэтилена, часто используется в ГЖХ при анализе высокополярных соединений (воды, кислот, гликолей и т.п.), поскольку неполярная поверхность его лишена адсорбционных центров, и он не обладает каталитической активностью.
Розмариновую кислоту элюируют с колонки 5-7% водным раствором этилового спирта. Элюат концентрируют в вакууме до минимального объема и лиофилизуют. Получают продукт 80-82% степени чистоты в виде порошока светло-желтого цвета. Выход - 3% от веса сырья в пересчете на сухое сырье.
Для получения розмариновой кислоты с более высокой степенью чистоты полученный порошок растворяют в минимальном количестве дистиллированной воды, фильтруют и кристаллизуют при температуре 4°С. Образовавшиеся кристаллы розмариновой кислоты отфильтровывают и высушивают. Это позволяет получить препарат со степенью чистоты 92-94%. Выход - 2% в пересчете на кристаллизованный продукт (80-85% от теоретического).
Технический результат заключается в повышении выхода, степени чистоты розмариновой кислоты, в упрощении способа (процесс включает 7-8 стадий, способ-прототип - 15 стадий, в заявляемом способе в отличие от прототипа не используются токсичные органические растворители).
На фиг.1 представлено содержание розмариновой кислоты в экстракте Zostera asiatica (анализ методом ВЭЖХ)
(12,83 - пик, соответствующий времени удерживания розмариновой кислоты).
На фиг.2 приведена ВЭЖХ розмариновой кислоты (чистота 80-85%).
На фиг.3 приведена ВЭЖХ розмариновой кислоты в кристаллах (чистота 92-94%).
Для анализа использовали жидкостный хроматограф "LaChrom" (Merck Hitachi), снабженный насосом L-7100, УФ детектором L-7400, термостатом L-7300, интегратором D-7500 и колонкой Agilent Technologies Zorbax Eclipse XDB-C18, 3.5 µm (75 см х 4.6 мм) с защитной колонкой Hypersil ODS, 5 µm (4.0 см × 4.0 мм). Колонку термостатировали при 30°С. Разделение примесей проводили смесью растворителей: А (вода + 1% ледяной уксусной кислоты) и В (ацетонитрил + 1% ледяной уксусной кислоты) в следующем режиме: 0-5 мин - изократический, 90% А, 10% В; 5-35 мин градиентный, 90-10% А, 10-90% В. Скорость подачи растворителей 1 мл/мин. Детектирование проводили при 270 нм.
Осуществление изобретения иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Морскую траву Zostera asiatica в количестве 3 кг на сырой вес промывают питьевой водой. Воду сливают. Траву измельчают, загружают в реактор и экстрагируют 10 л дистиллированной воды с постепенным добавлением 5% раствора соляной кислоты до рН 2,5 при постоянном перемешивании в течение 6 ч при комнатной температуре; рН экстракта поддерживают добавлением 5% раствора соляной кислоты.
После окончания процесса экстракции полученный раствор отфильтровывают, траву прессуют, получая дополнительный экстракт, а прессованную траву отправляют на дальнейшую переработку.
Экстракты объединяют и фильтруют на мембранном микрофильтре (мембрана 6-15 кДа), затем наносят на хроматографическую колонку с полихромом-1 с размером частиц 0,5-1 мм (0,5 кг). Промывают колонку дистиллированной или деминерализованной водой (2-3 л). Элюируют розмариновую кислоту 5% водным раствором этилового спирта (1,5 л). Полученный элюат концентрируют упариванием в вакууме до объема 0,5 л и лиофильно высушивают. Получают 8 г розмариновой кислоты в виде порошка светло-желтого цвета. Чистота препарата 80-82% (по данным ВЭЖХ).
Пример 2. Морскую траву Phyllospadix ivantensis в количестве 30 кг на сырой вес промывают пресной питьевой водой. Воду сливают. Траву измельчают, загружают в реактор и экстрагируют 100 л деминерализованной воды с добавлением 7% раствора фосфорной кислоты до рН 3,0 при постоянном перемешивании в течение 8 ч при комнатной температуре; рН экстракта поддерживают добавлением 7% раствора фосфорной кислоты.
После окончания процесса экстракции полученный раствор отфильтровывают, траву прессуют, получая дополнительный экстракт, и отправляют на дальнейшую переработку.
Экстракты объединяют, затем фильтруют на мембранном микрофильтре (мембрана 6-15 кДа) и наносят на хроматографическую колонку с полихромом-1 с размером частиц 0,5-1 мм (5 кг). Промывают колонку дистиллированной или деминерализованной водой (20-30 л). Элюируют розмариновую кислоту 7% водным раствором этилового спирта (10 л). Затем элюат концентрируют упариванием в вакууме до объема 2 л и лиофильно высушивают.
Полученный порошок светло-желтого цвета растворяют в минимальном количестве дистиллированной воды, фильтруют и кристаллизуют при температуре 4°С. Образовавшиеся кристаллы розмариновой кислоты отфильтровывают и высушивают. Получают 60 г розмариновой кислоты. Чистота препарата 92-94% (по данным ВЭЖХ).
Пример 3.
Розмариновую кислоту получают, как описано в примере 1 или 2, но в качестве сырья используют Zostera marina.
Claims (2)
1. Способ получения розмариновой кислоты из растительного сырья, включающий экстракцию водой и очистку, отличающийся тем, что морскую траву семейства Zosteraceae экстрагируют водой в течение 6-8 ч при комнатной температуре при добавлении пищевой кислоты до рН 2,5-3,0, после экстракции полученный раствор фильтруют, траву прессуют, получая дополнительный экстракт, экстракты объединяют, их очистку осуществляют на мембранном микрофильтре, затем на хроматографической колонке с полихромом-1, целевой продукт элюируют 5-7% водным раствором этилового спирта, концентрируют и лиофилизуют.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что лиофилизат растворяют в дистиллированной воде, фильтруют, затем кристаллизуют при температуре 4°С и высушивают.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009105341/04A RU2401827C1 (ru) | 2009-02-16 | 2009-02-16 | Способ получения розмариновой кислоты |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009105341/04A RU2401827C1 (ru) | 2009-02-16 | 2009-02-16 | Способ получения розмариновой кислоты |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2401827C1 true RU2401827C1 (ru) | 2010-10-20 |
Family
ID=44023937
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009105341/04A RU2401827C1 (ru) | 2009-02-16 | 2009-02-16 | Способ получения розмариновой кислоты |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2401827C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102952018A (zh) * | 2011-08-17 | 2013-03-06 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用抗氧化剂迷迭香酸的纯化方法 |
| RU2541542C2 (ru) * | 2013-06-04 | 2015-02-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук | Способ получения розмариновой кислоты |
-
2009
- 2009-02-16 RU RU2009105341/04A patent/RU2401827C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| G.Janicsák and I.Máthé «Parallel determination of rosmarinic and caffeic acids by TLC-densitometry», Chromatographia, Volume 46, Numbers 5-6 / Сентябрь 1997 г. Adriana Vergés, Mikel A. Becerro, Teresa Alcoverro and Javier Romero "Variation in multiple traits of vegetative and reproductive seagrass tissues influences plant-herbivore interactions», Oecologia, Volume 151, Number 4 / Апрель 2007 г. Thomas M. Arnold and Nancy M. Targett "Marine Tannins: The Importance of a Mechanistic Framework for Predicting Ecological Roles» Journal of Chemical Ecology, Volume 28, Number 10 / Октябрь 2002 г. A.Pavlov, M.Ilieva and M.Mincheva "Release of rosmarinic acid by Lavandula vera MM cell suspension in two-phase culture systems» World Journal of Microbiology and Biotechnology, Volume 17, Number 4 / Июнь 2001 г. Sang Un Park et al. «Biotechnological applications for rosmarinic acid production in plant» African Journal of Biotechnology, v.7(25), p.49594965, 29.12.2008. T.Milkova et al. «Comparative St * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102952018A (zh) * | 2011-08-17 | 2013-03-06 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用抗氧化剂迷迭香酸的纯化方法 |
| CN102952018B (zh) * | 2011-08-17 | 2014-08-27 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用抗氧化剂迷迭香酸的纯化方法 |
| RU2541542C2 (ru) * | 2013-06-04 | 2015-02-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук | Способ получения розмариновой кислоты |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2021031622A1 (zh) | 一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法 | |
| KR101488208B1 (ko) | 악티게닌 고함유 우엉열매 엑기스 및 그 제조방법 | |
| KR101070846B1 (ko) | 갈조류로부터 푸코잔틴 추출물의 제조방법 | |
| CN110845328A (zh) | 一种以迷迭香油膏副产品制备高纯度鼠尾草酸的方法 | |
| CN100355766C (zh) | 膜技术分离纯化葛根素的方法 | |
| ES2211219T3 (es) | Productos que comprenden trihidroxiestilbenos y sus derivados, y procedimiento para su fabricacion y utilizacion. | |
| CN102816066A (zh) | 一种从金银花叶中提取绿原酸和金丝桃苷的方法 | |
| Zhang et al. | Enhanced hypericin extraction from Hypericum perforatum L. by coupling microwave with enzyme-assisted strategy | |
| CN110818585B (zh) | 一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法 | |
| CN104326912A (zh) | 一种烟叶有效成分的分离方法 | |
| CN101638425B (zh) | 一种自南蛇藤根皮中提取雷公藤红素的方法 | |
| RU2401827C1 (ru) | Способ получения розмариновой кислоты | |
| CN110964030A (zh) | 一种从叶下珠中分离制备鞣花酸的球磨辅助提取方法 | |
| CN111875482B (zh) | 一种从蒿属植物中提取白坚木皮醇的方法 | |
| CN101704749A (zh) | 葵花粕中绿原酸和蛋白质的提取方法 | |
| WO2018095224A1 (zh) | 一种美人蕉属植物的综合利用方法 | |
| CN110872337B (zh) | 一种从迷迭香中同时制备不同高纯度三萜酸的方法 | |
| CN113429452B (zh) | 一种作为抗炎剂的罗汉果酸酰化衍生物以及一种抗炎组合物 | |
| RU2411939C1 (ru) | Способ получения 2,3,6,7-тетрагидроксинафтазарина | |
| KR100901379B1 (ko) | 코로솔릭산 함유물질로부터 고순도의 코로솔릭산을 얻기위한 추출 정제 방법 | |
| KR20070060714A (ko) | 소목으로부터 브라질레인의 대량 제조 방법 | |
| CN114853593A (zh) | 一种从元宝枫油中提取高纯神经酸的方法 | |
| CN102618593B (zh) | 一种利用黑曲霉水解灯盏乙素制备野黄芩素的方法 | |
| CN102796154B (zh) | 一种从茄子皮中分离制备高纯度酰化的飞燕草素衍生物的方法 | |
| RU2697197C1 (ru) | Способ получения водорастворимой солевой формы эхинохрома А, пригодной для использования в фармакологической и пищевой промышленности |