RU2392320C2 - Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата - Google Patents
Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата Download PDFInfo
- Publication number
- RU2392320C2 RU2392320C2 RU2008117733/13A RU2008117733A RU2392320C2 RU 2392320 C2 RU2392320 C2 RU 2392320C2 RU 2008117733/13 A RU2008117733/13 A RU 2008117733/13A RU 2008117733 A RU2008117733 A RU 2008117733A RU 2392320 C2 RU2392320 C2 RU 2392320C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- milk
- clotting enzyme
- liquid phase
- extract
- clotting
- Prior art date
Links
Landscapes
- Dairy Products (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве ферментных препаратов. Способ предусматривает подготовку исходного сырья. Подготовленное сырье гомогенизируют и экстрагируют. В полученный экстракт вносят сульфат аммония из расчета 0,055-0,110 кг/л экстракта. Полученную смесь отстаивают до разделения этой смеси на жидкую фазу и осадок. Из полученной жидкой фазы выделяют молокосвертывающий фермент путем пропускания жидкой фазы смеси через колонку с гидрофобным сорбентом с последующим удалением примесей промыванием колонки, десорбированием молокосвертывающего фермента и сушкой с получением целевого продукта. Изобретение позволяет повысить чистоту получаемого ферментного препарата и снизить его потери.
Description
Изобретение относится к способам производства ферментных препаратов, главным образом из сырья животного происхождения, и может быть использовано на предприятиях по переработке животного сырья, например, для приготовления применяемых в сыроделии молокосвертывающих ферментных препаратов.
Известен способ производства молокосвертывающего ферментного препарата, включающий подготовку, гомогенизацию и экстракцию исходного сырья, внесение в экстракт сульфата аммония, отстаивание полученной смеси до разделения ее на жидкую фазу и осадок с последующим выделением молокосвертывающего фермента (см. книгу М.Теплы, Я.Машек, Я.Гавлова «Молокосвертывающие ферменты животного и микробного происхождения». М.: Пищевая промышленность, 1980, стр.92).
Известный способ позволяет получать молокосвертывающий ферментный препарат удовлетворительного качества, но только в жидкой форме, что затрудняет его хранение и транспортировку.
Известен также способ производства молокосвертывающего ферментного препарата, предусматривающий подготовку, гомогенизацию и экстракцию исходного сырья, внесение в полученный экстракт сульфата аммония, отстаивание полученной смеси до разделения ее на жидкую фазу и осадок, выделение молокосвертывающего фермента, его сушку и последующую обработку (см. книгу М.Теплы, Я.Машек, Я.Гавлова «Молокосвертывающие ферменты животного и микробного происхождения». М.: Пищевая промышленность, 1980, стр.135-136).
Это техническое решение является наиболее близким к заявляемому по совокупности существенных признаков (прототип).
Согласно прототипу способ производства молокосвертывающего ферментного препарата предусматривает сушку полученного продукта, что делает его более удобным при хранении и транспортировке.
Вместе с тем в данном способе молокосвертывающий фермент выделяют из экстракта путем перевода в осадок внесением в экстракт сульфата аммония из расчета 0,5 кг/л экстракта. При этом кроме молокосвертывающего фермента в осадок попадает значительное количество примесей, в том числе балластные белки, которые загрязняют конечный продукт. Отделить молокосвертывающий фермент от примесей из осадка практически невозможно.
Кроме того, соль (сульфат аммония) никогда не осаждает молокосвертывающий фермент полностью, а только снижает его растворимость. Это приводит к существенным потерям молокосвертывающего фермента в условиях промышленного производства, поскольку часть его остается в жидкой фазе и вместе с ней удаляется в отход (утилизируется).
Техническим результатом настоящего изобретения является создание такого способа производства молокосвертывающего ферментного препарата, который позволил бы повысить его чистоту и снизить его потери в условиях промышленного производства.
Технический результат достигается тем, что в способе производства молокосвертывающего ферментного препарата, предусматривающем подготовку, гомогенизацию и экстракцию исходного сырья, внесение в полученный экстракт сульфата аммония, отстаивание полученной смеси до разделения ее на жидкую фазу и осадок, выделение молокосвертывающего фермента, его сушку и последующую обработку, согласно изобретению сульфат аммония вносят в экстракт из расчета 0,055-0,110 кг/л экстракта, а выделение молокосвертывающего фермента осуществляют путем пропускания жидкой фазы смеси через колонку с гидрофобным сорбентом с последующим удалением примесей промыванием колонки и десорбированием молокосвертывающего фермента.
Внесение в экстракт сульфата аммония из расчета 0,055 - 0,110 кг/л экстракта дает возможность в процессе отстаивания перевести в осадок практически все механические примеси и большую часть высокомолекулярных (балластных) белков и оставить в жидкой фазе экстракта практически весь молокосвертывающий фермент.
Выделение молокосвертывающего фермента путем пропускания жидкой фазы смеси через колонку с гидрофобным сорбентом с последующим удалением примесей промыванием колонки и десорбированием молокосвертывающего фермента позволяет практически устранить его потери и получить фермент с высокой степенью чистоты.
Способ осуществляется следующим образом.
Исходное сырье - замороженные сычуги телят, ягнят или козлят - гомогенизируют и экстрагируют подкисленным водным раствором. Для этого их размораживают, промывают проточной холодной водой и измельчают на мясорубке. Полученный фарш заливают 2-4 объемами дистиллированной воды и перемешивают в течение 30-60 мин. В полученную смесь вносят 2,0 М соляную кислоту до pH 2,0-2,5, перемешивают в течение 30-60 мин, контролируют pH и оставляют на 12 часов для экстрагирования молокосвертывающего фермента. Процесс экстракции на первой стадии ведут при температуре 18-22°С.
Затем в полученный экстракт вносят сульфат аммония из расчета 0,055-0,110 кг/л экстракта и полученную смесь отстаивают в течение 12-14 часов при температуре 18-22°С.
В процессе отстаивания полученной смеси механические примеси и высокомолекулярные (балластные) белки, обладающие большей молекулярной массой, выпадают в осадок. Молокосвертывающий фермент, обладающий значительно меньшей молекулярной массой, при указанном количестве сульфата аммония в растворе не осаждается, а остается в жидкой фазе экстракта.
Внесение в экстракт сульфата аммония менее чем 0, 055 кг/л экстракта не приводит к полному осаждению балластных белков, а более чем 0,110 кг/л экстракта - к выпадению в осадок части молокосвертывающего фермента и его потере.
После разделения смеси на жидкую фазу и осадок осадок одним из известных способов (фильтрация, центрифугирование) удаляют (утилизируют), а из жидкой фазы выделяют молокосвертывающий фермент. Для этого жидкую фазу пропускают через колонку с гидрофобным сорбентом. В качестве последнего используют хроматографические носители на основе гидрофильной (агарозной) матрицы с присоединенными к ней гидрофобными фенил-, октил-, гексил-, бутил-, аминогексил-группами, например Butyl Sepharose, Octyl Sepharose, Phenyl Sepharose.
После прохождения жидкой фазы колонку промывают для удаления примесей понижающимся (линейным или ступенчатым) градиентом нейтральной соли. Например, используются ступенчатые понижающиеся градиенты растворов нейтральной соли с концентрацией 0,11→0,055→0,0275→0,01375 кг/л, или линейный понижающийся градиент с концентрацией нейтральной соли от 0,11 до 0,01375 кг/л.
Связанный с колонкой молокосвертывающий фермент десорбируют понижающимся линейным градиентом концентрации нейтральной соли, например, от 0,01 до 0,00 кг/л, или дистиллированной водой.
Далее десорбированный молокосвертывающий фермент сушат и проводят дальнейшую обработку до стадии товарной продукции (молокосвертывающего ферментного препарата).
Чистоту полученного молокосвертывающего фермента определяют по удельной молокосвертывающей активности - соотношению между молокосвертывающей активностью (МА), выражаемой в условных единицах, и содержанием общего белка в препарате. Содержание общего белка определяют спектрофотометрически, по поглощению при длине волны 280 нм (А280). Чем больше значение МА (усл.ед.) / А280 - тем выше чистота молокоовертывающего ферментного препарата (МФП).
Удельная МА МФП по прототипу составляет 140-210 усл.ед. МА/A280.
Удельная МА МФП, полученных в соответствии с заявляемым способом, составляет 380-450 усл. ед. МА/A280.
Повышение выхода ферментного препарата определяют, высчитывая, сколько условных единиц молокосвертывающей активности (МА) получено при переработке 1 кг сырья.
Средний выход МА в соответствии со способом-прототипом составляет ~4,0×106 усл.ед. МА/кг.
Средний выход МА в соответствии с заявляемым способом составляет 4,8-5,9×106 усл.ед. МА/кг.
Таким образом, предлагаемый способ производства молокосвертывающего ферментного препарата позволяет повысить его чистоту и снизить его потери в условиях промышленного производства.
Claims (1)
- Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата, предусматривающий подготовку, гомогенизацию и экстракцию исходного сырья, внесение в полученный экстракт сульфата аммония, отстаивание полученной смеси до разделения ее на жидкую фазу и осадок, выделение молокосвертывающего фермента, его сушку и последующую обработку, отличающийся тем, что сульфат аммония вносят в экстракт из расчета 0,055-0,110 кг/л экстракта, а выделение молокосвертывающего фермента осуществляют путем пропускания жидкой фазы смеси через колонку с гидрофобным сорбентом с последующим удалением примесей промыванием колонки и десорбированием молокосвертывающего фермента.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008117733/13A RU2392320C2 (ru) | 2008-05-04 | 2008-05-04 | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008117733/13A RU2392320C2 (ru) | 2008-05-04 | 2008-05-04 | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008117733A RU2008117733A (ru) | 2009-11-10 |
| RU2392320C2 true RU2392320C2 (ru) | 2010-06-20 |
Family
ID=41354413
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008117733/13A RU2392320C2 (ru) | 2008-05-04 | 2008-05-04 | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2392320C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2467068C1 (ru) * | 2011-05-25 | 2012-11-20 | Государственное научное учреждение Сибирский научно-исследовательский институт сыроделия Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ СибНИИС Россельхозакадемии) | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата |
| RU2541639C1 (ru) * | 2013-12-31 | 2015-02-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт маслоделия и сыроделия" (ФГБНУ ВНИИМС) | Способ экстрагирования говяжьего пепсина |
-
2008
- 2008-05-04 RU RU2008117733/13A patent/RU2392320C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ТЕПЛЫ М., МАШЕК Я., ГАВЛОВА Я. Молокосвертывающие ферменты животного и микробного происхождения. - М.: Пищевая промышленность, 1980, с.135-136. ТЕПЛЫ М., МАШЕК Я., ГАВЛОВА Я. Молокосвертывающие ферменты животного и микробного происхождения. - М.: Пищевая промышленность, 1980, с.90-93. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2467068C1 (ru) * | 2011-05-25 | 2012-11-20 | Государственное научное учреждение Сибирский научно-исследовательский институт сыроделия Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ СибНИИС Россельхозакадемии) | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата |
| RU2541639C1 (ru) * | 2013-12-31 | 2015-02-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт маслоделия и сыроделия" (ФГБНУ ВНИИМС) | Способ экстрагирования говяжьего пепсина |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008117733A (ru) | 2009-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101899224B (zh) | 一种利用大孔树脂富集纯化紫甘薯色素的方法 | |
| CN102952187B (zh) | 一种高纯度牛血清白蛋白的制备方法 | |
| CN105601666B (zh) | 一种从鲢鱼鱼头中提取磷脂的方法及其产品 | |
| CN108017535A (zh) | 一种从发酵液中提取长链二元酸的方法 | |
| RU2392320C2 (ru) | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата | |
| CN111893156A (zh) | 一种精制牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法 | |
| CN101333245B (zh) | 一种人血白蛋白的分离方法 | |
| JPH07118555A (ja) | 天然赤色色素の製造法 | |
| JP4662846B2 (ja) | 酒類のオリ下げ剤 | |
| CN104404094A (zh) | 基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法 | |
| CN110183550A (zh) | 一种精品肝素钠的制备工艺 | |
| CN103804526B (zh) | 一种肝素钠粗品的提纯方法 | |
| CN110627848A (zh) | 一种去除唾液酸中杂质的方法及其应用 | |
| RU2457229C1 (ru) | Способ производства желатина | |
| RU2435597C1 (ru) | Способ получения цитохрома с | |
| EP3668885B1 (en) | Method of purifying phycocyanin | |
| JPH06145186A (ja) | α，α−トレハロースの製造法 | |
| KR20130086855A (ko) | 저융점 아가로스의 제조방법 | |
| RU2467068C1 (ru) | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата | |
| EP2451825A1 (fr) | Utilisation d'un coproduit issu d'un procede d'extraction du lysozyme a partir de blanc d'oeuf, pour l'obtention d'au moins une proteine basique de blanc d'oeuf | |
| JPH03998B2 (ru) | ||
| RU2696289C1 (ru) | Способ получения ингибитора трипсина из люцерны посевной | |
| CN102108349A (zh) | 一种木瓜蛋白酶的精制方法 | |
| CN109136052A (zh) | 一种食醋超滤所得膜浓缩液的处理方法 | |
| RU2295251C1 (ru) | Способ выделения белковых веществ из молочного сырья |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130505 |