RU2350625C2 - Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью - Google Patents
Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2350625C2 RU2350625C2 RU2007112594/04A RU2007112594A RU2350625C2 RU 2350625 C2 RU2350625 C2 RU 2350625C2 RU 2007112594/04 A RU2007112594/04 A RU 2007112594/04A RU 2007112594 A RU2007112594 A RU 2007112594A RU 2350625 C2 RU2350625 C2 RU 2350625C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biodegradability
- hyaluronic acid
- conjugates
- acid derivatives
- lowered
- Prior art date
Links
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N Nc(cc1C(O)=O)ccc1O Chemical compound Nc(cc1C(O)=O)ccc1O KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QICABJKBSHCINA-UHFFFAOYSA-N CC(C1=O)=C(C)N(C)N1c1ccccc1 Chemical compound CC(C1=O)=C(C)N(C)N1c1ccccc1 QICABJKBSHCINA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к новым производным гиалуроновой кислоты, которые могут быть использованы в медицине и фармакологии. Описываются производные гиалуроновой кислоты общей формулы
обладающие пониженной биодеградируемостью по сравнению с природной гиалуроновой кислотой. 3 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к новым химическим веществам, а именно к производным гиалуроновой кислоты, которые могут быть использованы в медицине, фармакологии.
Гиалуроновая кислота (ГК) относится к классу гликозаминогликанов - гетерополисахаридов линейного строения, является основным веществом внеклеточного матрикса, выполняет важные функции в живых организмах и состоит из повторяющихся звеньев D-глюкуроновой кислоты и N-ацетил-D-глюкозамина:
Высокомолекулярная ГК (М~106 Да) входит в состав вискоэластичных гелей "Provisk" (Швеция) и "Healon" (Канада), применяющихся в офтальмохирургии при операциях экстракции катаракты, является действующим веществом в пленках "Seprafilm" для предупреждения спаечной болезни брюшины. Гидрогель на основе комплексной соли ГК с хлоридом железа (III) (0.5% FeCl3) предложен в качестве барьерного материала (фирма "Этикон") и предназначается для профилактики спаечной болезни в абдоминальной хирургии. Низкомолекулярной ГК пропитывают салфетки "Гиаплюс" (г. Тула), используемые для лечения ожоговой болезни. Лекарственное средство "Куриозин" (Гедеон Рихтер, Венгрия), представляющее собой цинковую соль ГК, используется для лечения трофических язв и угрей, препарат "Цистистат" восстанавливает функции слизистой оболочки мочевого пузыря при интерстициальном цистите, препараты "Sinvisc", "Viscorneal-Ortho" и др. предназначаются для внутрисуставного введения и применяются для лечения артритов различной этиологии. ГК является также компонентом косметических кремов и тоников для стимуляции роста волос.
В последние годы проявляется большой интерес к получению и исследованию биологических свойств химически модифицированной ГК. Химическая модификация может придать ГК дополнительные медикаментозные свойства, можно также ожидать значительного изменения физико-химических и биологических свойств модифицированной ГК (биодоступность, биодеградируемость), существенного расширения областей применения производных ГК как самостоятельных лекарственных препаратов, так и в качестве адъювантов (в качестве систем доставки лекарственных средств).
Пониженная биодеградируемость может быть полезной функцией производных ГК, поскольку целью химической модификации полимеров чаще всего является пролонгирование терапевтического действия ковалентно связанных с полимерной матрицей лекарств. Известны некоторые производные ГК, биодеградируемость которых под действием субстратспецифичного фермента гиалуронидазы является значительно более низкой, чем природной ГК. Низкая биодеградируемость достигалась кросс-сшивкой молекул ГК дигидразидами или тригидразидами различного строения в присутствии 1-этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимида (КДИ) [Vercruysse K.P., Marecak D.M., Marecak J.F., Prestwich G.D. // Bioconj. Chem. 1997. V. 8(5). P. 686-694; Prestwich G.D., Marecak D.M., Marecak J.F., Vercruysse K.P., Ziebell M.R. // J.Controll. Rel. 1998. V.53. P.99]. Реакцией с триметилсилилдиазометаном получена ГК, в которой карбоксильные группы полностью метилированы. Такая этерифицированная ГК не деполимеризуется под действием гиалуронидазы или гиалуронангидролазы, но является субстратом для хондротин-ACI лиазы из Flavobacterium heparinium и хондротин-ACII лиазы из Arthrobacter aurescens [К. Hirano, S. Sakai, T. Ishikawa, F.Y. Avci, R.J. Linhardt, T.Toida // Carbohydr. Res. 2005. V.430 (14), 2297-2304].
Наиболее близкими к предлагаемому изобретению являются структурные аналоги ГК, полученные взаимодействием ГК с фармакозначимыми аминами в присутствии КДИ в качестве конденсирующего реагента [Понеделькина И.Ю., Одиноков В.Н., Вахрушева Е.С. и др. // Биоорг. химия. 2005. Т.31. №1. С.90-95; Лукина Е.С. Автореф. дисс. на соиск. степ. канд. наук. 2007. 110 С. (www.anrb.ru/ink, диссер. совет)]. Практически все полученные этим способом конъюгаты ГК наряду с амидными группами содержат звенья с изоуреидокарбонильными группами, образовавшимися в результате присоединения КДИ к карбоксигруппам ГК, и растворимость конъюгатов в воде сильно зависит от содержания этих звеньев. Ферментативная биодеградируемость конъюгатов ГК под действием гиалуронидазы зависит как от природы, так и от содержания модифицированных звеньев. Биодеградируемость конъюгатов ГК с содержанием остатков фармакозначимых аминов до 30% сохраняется на уровне природной ГК, с дальнейшим увеличением конверсии карбоксигрупп биодеградируемость снижается. Значительное снижение биодеградируемости наблюдается только для конъюгатов, содержащих значительное количество уреидных звеньев и обладающих, вследствие этого, ограниченной растворимостью в воде (например, конъюгаты ГК с таурином, ГК со стрептоцидом).
Задачей предлагаемого изобретения является получение обладающих пониженной биодеградируемостью производных гиалуроновой кислоты (ГК). Это достигается следующим образом. ГК селективно окисляют по первичным гидроксигруппам в системе 2,2,6,6-тетраметилпиперидиний-1-оксил радикал (TEMPO)-NaBr-NaClO-H2O (pH 10.2, 0°С), получая в составе окисленной ГК (ГКох) звенья N-ацетил-D-глюкозаминуроновой кислоты [Jiang В., Drouet E., Milas M., Rinaudo М. // Carbohydr. Res. 2000. V.327. P.455-461]. Затем в присутствии 1-этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимида (КДИ) конъюгацией собственных и введенных в результате окисления карбоксигрупп ГК с фармакозначимыми первичными аминами получают целевые конъюгаты с варьируемым (в зависимости от соотношения реагентов) содержанием соответствующего фармакофора (схема). Следует отметить, что при использовании ГКох удается увеличить фармакологическую нагрузку на молекулу полисахарида - вплоть до ~100% конверсии карбоксигрупп в амидные (в расчете на моносахаридное звено), причем во всех конъюгатах практически отсутствуют продукты присоединения КДИ по карбоксигруппам ГКох, то есть звенья с уреидокарбонильными группами. Растворимость в воде хорошая.
Схема
где R=OH и R1 в конъюгатах, и содержащие R1 сооставляет 8-100% мольн. в расчете на моносахаридное зерно, n=100-150
Реакцию ГКох с аминами проводят в присутствии КДИ при различных соотношениях реагентов в водной среде (рН 4.7-4.8) при комнатной температуре в течение 20-30 мин. В качестве соединений, содержащих аминогруппу, используют n- (1) и о-аминофенолы (2), n-аминобензойную (3), антраниловую (4), 4- (5) и 5-аминосалициловые (6) кислоты, этиловый эфир n-аминобензойной кислоты (анестезин) (7), β-диэтиламиноэтиловый эфир n-аминобензойной кислоты (новокаин) (8), гидразид изоникотиновой кислоты (изониазид) (9), 2-аминоэтансульфоновую кислоту (таурин) (10), 1-фенил-2,3-диметил-4-аминопиразолон-5 (4-аминоантипирин) (11), а также сульфаниламидные препараты, содержащие свободную аминогруппу, такие как n-аминобензолсульфамид (стрептоцид) (12), n-аминобензолсульфацетамид-натрий (сульфацил-натрий) (13) и др. Для модификации ГКох можно применять α-аминокислоты (глицин, лизин и др.) или их эфиры, различные диамины (гидразин, этилендиамин, гексаметилендиамин) и дигидразиды, например дигидразид адипиновой кислоты. В зависимости от соотношения реагентов (от ГКох:амин:КДИ=1:0.12:0.25 до ГКох:амин:КДИ=1:1.5:1.5, в расчете на моносахаридное звено ГКох) получают конъюгаты с различным содержанием остатков амина R1 - от 8 до ~100% мольн. в расчете на моносахаридное звено ГКох.
Содержание остатков амина R1 (т.е. конверсию карбоксильных групп ГКох в амидные) определяют по данным 1Н-ЯМР-спектроскопии, используя интегральные интенсивности характеристических сигналов протонов остатков конъюгированных с ГКох соответствующих аминов по отношению к интенсивности сигнала метильных протонов ацетамидной группы в области 2 м.д. как внутреннему стандарту.
Спектры 1Н-ЯМР и 13С-ЯМР регистрируют для растворов в D2O на спектрометре Bruker АМХ-300 (рабочая частота для 1Н-ЯМР-300.13 МГц), в качестве внутреннего стандарта используют натриевую соль 3-(триметилсилил)-1-пропансульфоновой кислоты. УФ-спектры получают на спектрофотометре Specord M-40. Контроль рН растворов проводят с помощью рН-метра «рН-340».
ГКох и ее конъюгаты, как определено после инкубации с ферментом гиалуронидазой, проявляют более низкую биодеградируемость по сравнению с немодифицированной ГК.
Биодеградируемость ГКох и ее производных (в сравнении с природной ГК) оценивают по разработанной авторами методике, которая заключается в следующем: 0.01 ммоль соответствующего образца помещают в центрифужную пробирку V=10 мл, растворяют в 1 мл буфера (30 мМ лимонная кислота/150 мМ Na2HPO4/150 мМ NaCl; pH 6.3), затем добавляют 3 ед. гиалуронидазы (препарат Лидаза) в 0.1 мл того же буфера, инкубируют при 37°С в течение 20 ч. По окончании ферментативной реакции в каждую пробирку добавляют 4 мл охлажденной до 0°С смеси метанол/диэтиловый эфир (3:1) и выдерживают при 0°С в течение 1 ч для полноты осаждения полимера, не подвергшегося ферментативному расщеплению. Выпавшие осадки отделяют центрифугированием, супернатанты, содержащие не осаждающиеся смесью MeOH/Et2O (3:1) низкомолекулярные продукты ферментативной деградации, помещают в стеклянные стаканы и упаривают досуха. Каждый высушенный образец растворяют в аликвоте воды V=5 мл, отбирают пробу и спектрофотометрически анализируют содержание уроновых кислот карбазоловым методом по Дише, λ=530 нм [Методы химии углеводов: Пер. с англ. М.: Мир, 1967. Под редакцией Н.А. Кочеткова]. За показатель биодеградируемости принимают величину оптической плотности раствора хромофора (при λ=530 нм) испытуемого образца, рассчитанную в % от оптической плотности раствора хромофора природной ГК, которую принимают за 100%. Результаты оформляют в виде диаграмм (рис.1а-в), на которых биодеградируемость природной ГК принимают 100%-ной.
Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Конъюгат ГКох с n-аминофенолом, R1=8%.
а) ГК селективно окисляют по первичным гидроксигруппам в системе 2,2,6,6-тетраметилпиперидиний-1 -оксил радикал (TEMPO)-NaBr-NaClO-H2O (рН 10.2) [Jiang В., Drouet E., Milas M., Rinaudo M. // Carbohydr. Res. 2000. V.327. P.455-461]. Условия реакции окисления ГК: рН 10.2, 0°С, TEMPO = 0.027 ммоль, NaBr = 0.5 ммоль, ГК = 2.5 ммоль в 200 мл воды, и 4 мл 13%-го водного раствора гипохлорита натрия (NaClO). Окисленный продукт из водного раствора выделяют осаждением в метанол. Осадок отделяют центрифугированием, промывают метанолом, диэтиловым эфиром и высушивают при пониженном давлении и температуре не выше 60°С. Получают водорастворимый порошок белого цвета. Количественное определение уроновых кислот в ГКох по стандартной методике реакции Дише показывает, что хромофор, поглощающий при 530 нм, образует только D-глюкуроновая кислота. Содержание D-глюкуроновой кислоты составляет 45.2% масс. (теоретически рассчитано - 44.4% масс.),
13С NMR ГКох (D2О): δ 177.5, 177.2, 176.4 (С=O), 105.3, 102.8, 83.7, 82.8, 78.7, 78.2, 75.9, 74.7, 69.9, 56.6, 24.9 (СН3CONH). Как видно из спектра 13С ЯМР, вместо двух синглетов атомов углерода СООН-группы D-глюкуроновой кислоты и СН3CONH-группы, в области 176-178 м.д. наблюдается третий синглет, отвечающий атому углерода вновь образовавшейся СООН-группы. При этом сигнал атома углерода CH2OH-групп в области 62-63 м.д. отсутствует, что свидетельствует о полной трансформации первичных гидроксигрупп ГК в карбоксильные (схема). Как видно из рис.1.а, при используемых условиях ферментативной обработки ГКох не является субстратом для гиалуронидазы.
б) К смеси 60 мг (~0.3 ммоль СООН-групп) ГКох и 3.7 мг (0.036 ммоль) n-аминофенола (1) в 15 мл Н2О добавляют 0.1 н. NaOH до рН 4.7-4.8, затем при интенсивном перемешивании и температуре 20-22°С вносят 10.8 мг (0.056 ммоль) карбодиимида (соотношение реагентов ГКох:n-аминофенол:КДИ=1:0.12:0.25 в расчете на одну карбоксигруппу ГКох), поддерживая рН 4.7-4.8 титрованием 0.1 н. HCl. Через 0.5 ч к охлажденной до 0°С реакционной смеси последовательно добавляют 0.1 н. NaOH (до рН 7-8), 2-3 мл насыщенного раствора NaCl и 45 мл охлажденного метанола. Выпавший осадок отделяют центрифугированием, растворяют в 10 мл 6% NaCl, добавляют 30 мл метанола. Вновь выпавший осадок центрифугируют, промывают метанолом (10×3 мл), затем эфиром (10×3 мл) и сушат при температуре ≤60°С и пониженном давлении. Получают ~60 мг конъюгата в виде белого порошка, растворимого в воде. Содержание остатков R1 (или конверсия карбоксигрупп ГКох в амидные) в конъюгате ГКох с n-аминофенолом составляет 8% в расчете на моносахаридное звено ГКох. Аналогично ГКох этот конъюгат не является субстратом для гиалуронидазы.
Пример 2. Конъюгаты ГКох с n-аминофенолом, R1=25-100%.
Конъюгаты ГКох с содержанием остатков n-аминофенола 25% (табл.), 27%, 30%, 37%, 46% и 100% получают аналогично примеру 1, при этом используют другие соотношения реагентов. При соотношении ГКох:n-аминофенол:КДИ=1:0.5:0.38 получают конъюгат с содержанием R1=25%, 1:0.5:0.45 - R1=27%, 1:0.5:0.5 - R1=30%, 1:0.6:0.75 - R1=37%, 1:1:0.75 -Rl=46% и при 1:1.5:1.5 - Rl~100%.
С увеличением содержания остатков n-аминофенола биодеградируемость конъюгатов возрастает по сравнению с ГКох, но уровня природной ГК не достигает (рис.1а). Биодеградируемость конъюгата с содержанием R1~100% не приводится, поскольку в цитратном буфере (рН 6.5) он не растворяется.
Пример 3. Конъюгаты ГКох с аминами 2-13 синтезируют аналогично примерам 1 и 2. В таблице приведены характеристики конъюгатов, полученных при соотношении ГКох:2-13:КДИ=1:0.5:0.38. Значения биодеградируемости соответствующих конъюгатов 2а-13а зависят от природы амина и значительно меньше биодеградируемости природной ПС (рис.1б).
Таблица | ||
Конъюгат | Содержание R1 (% в расчете на моносахаридное звено) в конъюгатах, полученных при соотношении ГКох:1-13:КДИ=1:0.5:0.38 | Характеристичекие сигналы остатков аминов в 1Н ЯМР-спектрах конъюгатов, δ, м.д. |
1а | 25 | 7.41, 7.39, 7.00, 6.98 |
2а | 35 | 7.59, 7.57, 7.28, 7.26, 7.09, 7.06 |
3а | 36 | 8.04, 7.70 |
4а | 19 | 8.31, 8.02, 8.00, 7.64, 7.58, 7.33 |
5а | 30 | 7.89, 7.86, 7.25, 7.16, 7.11, 7.08 |
6а | 23 | 7.98, 7.59, 7.56, 7.05, 7.02 |
7а | 31 | 8.12, 7.71 |
8а | 30 | 8.11, 7.74 |
9а | 35 | 8.80, 7.90 |
10а | 23* | - |
11а | 35 | 7.68, 7.52, 7.49 |
12а | 30 | 8.01, 7.98, 7.84, 7.81 |
13а | 20 | 8.01, 7.99, 7.83, 7.81 |
* Определено элементным анализом на S. |
Для конъюгатов ГКОХ с 4-аминоантипирином с содержанием R1=10-90% также приведена зависимость биодеградируемости от содержания остатков амина (рис. 1в).
Claims (1)
- Производные гиалуроновой кислоты общей формулы:
где R=OH и R1 в конъюгатах, n=100-150
, , , ,
, , ,
, , ,
, , ,
где содержание R1 составляет 8-100% в расчете на моносахаридное звено, полученные взаимодействием окисленной гиалуроновой кислоты с соответствующим фармакозначимым первичным амином, обладающие пониженной биодеградируемостью.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007112594/04A RU2350625C2 (ru) | 2007-04-04 | 2007-04-04 | Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007112594/04A RU2350625C2 (ru) | 2007-04-04 | 2007-04-04 | Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2007112594A RU2007112594A (ru) | 2008-10-10 |
RU2350625C2 true RU2350625C2 (ru) | 2009-03-27 |
Family
ID=39927528
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007112594/04A RU2350625C2 (ru) | 2007-04-04 | 2007-04-04 | Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2350625C2 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2473351C2 (ru) * | 2011-01-12 | 2013-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью Инновационный Центр Института Нефтехимии и Катализа "ИНКИ" | Конъюгат гиалуроновой кислоты с новокаином с амфотерными свойствами |
RU2550602C2 (ru) * | 2009-12-11 | 2015-05-10 | КОНТИПРО Фарма а.с. | Производное гиалуроновой кислоты, способ его получения и способ его модификации |
RU2559447C2 (ru) * | 2009-12-11 | 2015-08-10 | КОНТИПРО Фарма а.с. | Способ получения окисленного производного гиалуроновой кислоты и способ его модификации |
RU2660350C1 (ru) * | 2017-07-05 | 2018-07-05 | Общество с ограниченной ответственностью "НАТУРА СИБЕРИКА" (сокращенно ООО "НАТУРА СИБЕРИКА") | Косметическая композиция для увлажнения и заживления кожи |
-
2007
- 2007-04-04 RU RU2007112594/04A patent/RU2350625C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ПОНЕДЕЛЬКИНА И.Ю. И ДР. Модификация гиалуроновой кислоты ароматическими аминокислотами. - Биоорганическая химия, 2005, т.31, № 1, с.90-95. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2550602C2 (ru) * | 2009-12-11 | 2015-05-10 | КОНТИПРО Фарма а.с. | Производное гиалуроновой кислоты, способ его получения и способ его модификации |
RU2559447C2 (ru) * | 2009-12-11 | 2015-08-10 | КОНТИПРО Фарма а.с. | Способ получения окисленного производного гиалуроновой кислоты и способ его модификации |
RU2473351C2 (ru) * | 2011-01-12 | 2013-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью Инновационный Центр Института Нефтехимии и Катализа "ИНКИ" | Конъюгат гиалуроновой кислоты с новокаином с амфотерными свойствами |
RU2660350C1 (ru) * | 2017-07-05 | 2018-07-05 | Общество с ограниченной ответственностью "НАТУРА СИБЕРИКА" (сокращенно ООО "НАТУРА СИБЕРИКА") | Косметическая композиция для увлажнения и заживления кожи |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2007112594A (ru) | 2008-10-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2559447C2 (ru) | Способ получения окисленного производного гиалуроновой кислоты и способ его модификации | |
RU2550602C2 (ru) | Производное гиалуроновой кислоты, способ его получения и способ его модификации | |
Buschmann et al. | Chitosans for delivery of nucleic acids | |
JP5123285B2 (ja) | アクリル化ヒアルロン酸 | |
Fan et al. | Preparation of carboxymethyl cellulose sulfates and its application as anticoagulant and wound dressing | |
RU2350625C2 (ru) | Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью | |
WO2002030990A1 (en) | Crosslinked amide derivatives of hyaluronic acid and manufacturing method thereof | |
RU2682509C2 (ru) | Конъюгаты олигомера гиалуроновой кислоты или ее соли, способ их получения и их применение | |
FR2967677A1 (fr) | Derives de polysaccharides comprenant un motif alcene et reaction de couplage par chimie thio-clic | |
Liu et al. | Synthesis, characterization and bioactivities of N, O-carbonylated chitosan | |
Zhu et al. | Preparation and biological activity of quaternized carboxymethyl chitosan conjugated with collagen peptide | |
Šedová et al. | The effect of hydrazide linkers on hyaluronan hydrazone hydrogels | |
EP3700940A1 (en) | Functionalized hyaluronic acid or a derivative thereof in the treatment of inflammatory states | |
RU2359975C2 (ru) | Способ получения модифицированных арабиногалактанов | |
JP4089841B2 (ja) | 易溶性アシル化ポリリジンからなる界面活性剤を含む洗浄剤 | |
RU2318830C2 (ru) | Способ получения модифицированного дерматансульфата | |
JP2687141B2 (ja) | 新規なキトサン化合物、該化合物の製造方法および該化合物を含む保湿剤 | |
RU2473351C2 (ru) | Конъюгат гиалуроновой кислоты с новокаином с амфотерными свойствами | |
Mudarisova et al. | Complexation of carboxyarabinogalactan of Siberian larch (Larix Sibirica L.) with Kanamycin | |
RU2298406C2 (ru) | Способ получения конъюгатов гепарина | |
Ješelnik et al. | N-functionalization of chitosan with bis-O-glycosylated derivative of 2, 2-bis (methylol) propionic acid | |
JP4207416B2 (ja) | 酸化ポリアミノ糖誘導体の製造方法 | |
Mudarisova et al. | The interaction of poly-and oligosaccharides based on arabinogalactan with 5-aminosalicylic acid | |
JPH1171407A (ja) | 親水性キチン誘導体及びその製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090405 |