RU2339948C1 - Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне - Google Patents
Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне Download PDFInfo
- Publication number
- RU2339948C1 RU2339948C1 RU2007124067/15A RU2007124067A RU2339948C1 RU 2339948 C1 RU2339948 C1 RU 2339948C1 RU 2007124067/15 A RU2007124067/15 A RU 2007124067/15A RU 2007124067 A RU2007124067 A RU 2007124067A RU 2339948 C1 RU2339948 C1 RU 2339948C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- solution
- aldoses
- volume
- methylene blue
- saliva
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии и медицине. Способ включает следующие стадии. Пробу ротовой жидкости объемом 2,0 мл после осаждения белков по стандартным методикам подщелачивают 2 N раствором КОН, добавляют 1 М раствор KNO3 для создания постоянной ионной силы и доводят объем смеси дистиллированной водой до 10 мл. Полученную смесь нагревают на водяной бане до t=80±2°C и оттитровывают 0,00025М раствором метиленовой сини. Содержание альдоз (в ммоль/л) рассчитывают по закону эквивалентов. Полученные заявленным способом результаты анализа смешанной слюны могут служить для диагностики состояния парадонта и в некоторых случаях - для диагностики патологий эндокринной системы.
Description
Изобретение относится к медицине и биоорганической химии. В организме человека наиболее доступным для биохимических анализов материалом является смешанная слюна (ротовая жидкость), использование которой для анализов имеет ряд преимуществ по сравнению с анализом крови.
Это простота, неинвазивность, безболезненность сбора материала для анализа и возможность многократного получения проб. Анализ крови «на сахар» широко используется при диагностике сахарного диабета и некоторых других патологических состояний организма. Большая часть присутствующих в крови сахаров (>96%) представлена глюкозой - от 3,2 до 5,5 ммоль/л. Содержание рибозы и дезоксирибозы в крови составляет 0,13-0,20 ммоль/л, фруктозы - от 0,027 до 2,75 мкмоль/л; галактоза, манноза и восстанавливающие дисахариды - в следовых количествах. При анализе крови «на сахар» определяют по сути суммарное количество восстанавливающих сахаров, представленных преимущественно альдогексозами и альдопентозами. В смешанной слюне человека содержится около 30 мг/л свободных моносахаридов (в т.ч. около 10 мг/л глюкозы).
Количественные методы определения сахаров многочисленны и делятся на редуктометрические и колориметрические.
В качестве прототипа авторы предлагают способ определения глюкозы Хагедорна-Йенсена // Практикум по биохимии. Под ред. С.Е.Северина, Г.А.Соловьевой, 2-е издание. М., МГУ, 1989 г., с.21-23//, в котором используют способность альдоз восстанавливать при нагревании в щелочной среде гексацианоферрат(III) калия (красную кровяную соль) в гексацианоферрат(II) калия (желтую кровяную соль). Избыток красной кровяной соли определяется йодометрическим титрованием. Свободный йод, выделившийся в количестве, эквивалентном избытку К3[Fe(CN)6], оттитровывают раствором Na2S2O3. Количество сахара в крови вычисляют по данным титрования с помощью эмпирически составленной авторами метода таблицы.
Ввиду того, что ряд соединений неуглеводного характера (мочевая кислота, глютатион и др.) обладают наряду с глюкозой способностью восстанавливать ионы тяжелых и переходных металлов, результаты анализа оказываются завышенными. Ошибка может достигать 10-20%.
Четырехэтапное определение глюкозы с предварительным осаждением белков крови и приготовлением достаточно большого количества титрованных растворов требуют от аналитика значительных затрат времени на подготовку и проведение анализа.
Заявителями предложен быстрый и несложный метод прямого определения альдоз в смешанной слюне, имеющий определенные преимущества по сравнению с описанным выше классическим методом определения глюкозы.
При существенном сокращении времени проведения анализа для его осуществления не требуется каких-либо редких реактивов и специальных приборов. Анализ основан на способности глюкозы при нагревании в щелочной среде обесцвечивать индикатор метиленовый синий (метиленовую синь).
Оборудование и реактивы:
водяная баня; лабораторный термометр на 100°С; микробюретка на 2 мл; пипетка на 2 мл; пипетка на 0,2 мл; градуированная пипетка на 1 мл; градуированная пипетка на 10 мл; 0,00025 М раствор метиленового синего; 2 N раствор КОН; 1 М раствор KNO3; 0,0025 М раствор глюкозы; дистиллированная вода.
Ход определения
После предварительного осаждения белков по стандартным методикам // Практикум по биохимии. Под ред. С.Е.Северина, Г.А.Соловьевой, 2-е издание. М., МГУ, 1989 г., с.21-23 // к пробе ротовой жидкости объемом 2,0 мл добавляют 0,2 мл 2 N раствора КОН, 0,6 мл 1 М раствора KNO3, 7,2 мл дистиллированной воды, доводя общий объем смеси до 10 мл, и нагревают на водяной бане до t=80°С±2,0°С.
Полученную смесь медленно по каплям, дожидаясь полного обесцвечивания, оттитровывают 0,00025 М раствором метиленовой сини до появления не исчезающего при 80°С(±2°С) бледно-голубого окрашивания титруемого раствора. Параллельно титруют 2 колбы с контрольными растворами, содержащими взамен 2 мл ротовой жидкости 2 мл стандартного 0,0025 М раствора глюкозы. Содержание суммы альдоз (глюкозы, рибозы, 2-дезоксирибозы) в ммоль/л рассчитывают по формуле:
См.с. - концентрация раствора метиленовой сини (моль/л);
Vм.с. - объем раствора метиленовой сини (мл);
Vсл. - исходный взятый для анализа объем смешанной слюны (мл).
Заявленным способом проанализировано 50 образцов смешанной слюны пациентов стоматологической поликлиники ТГМА. В 27 образцах содержание суммы альдоз не превышало нормы (0,19 ммоль/л). Среди пациентов этой группы не выявлено тяжелых патологий пародонта и эндокринной системы.
В 23 образцах ротовой жидкости содержание суммы альдоз определено в количестве от 0,2 до 2,1 ммоль/л. Среди пациентов этой группы у 13 человек диагностирован парадонтит и у 10 человек - патологии парадонта (парадонтоз и парадонтит) в сочетании с сахарным диабетом.
Пример 1. История болезни №27830. Пациент К., возраст 55 лет.
Обратился в стоматологическую поликлинику ТГМА в марте 2007 г. с жалобами на состояние парадонта. Содержание суммы альдоз в ротовой жидкости, определенное заявленным способом, составило 1.10 ммоль/л. Проведенный впоследствии анализ крови показал уровень сахара 17,3 ммоль/л. Диагноз после обследования состояния ротовой полости: парадонтит; после обследования у эндокринолога - сахарный диабет 2 типа.
Пример 2. История болезни №30719. Пациентка М., возраст 65 лет.
Обратилась в стоматологическую поликлинику ТГМА с жалобами на состояние парадонта. Содержание суммы альдоз в ротовой жидкости, определенное заявленным способом, составило 0,59 ммоль/л. Диагноз после обследования ротовой полости: парадонтит.
Проведенный анализ крови «на сахар» (4,65 ммоль/л) и обследование у эндокринолога не выявили патологий эндокринной системы.
Таким образом, разработанный авторами способ определения альдоз в смешанной слюне может служить для диагностики патологических состояний парадонта и в некоторых случаях - для диагностики патологий эндокринной системы, сопряженных с патологиями парадонта.
Claims (1)
- Способ определения суммарного количества альдоз, отличающийся тем, что после предварительного осаждения белков в пробе ротовой жидкости объемом 2 мл к ней добавляют 0,2 мл 2N раствора КОН, 0,6 мл 1М раствора KNO3, 7,2 мл дистиллированной воды, доводя общий объем смеси до 10 мл, и нагревают на водяной бане до t=80±2°C, подогретую смесь медленно по каплям оттитровывают 0,00025М раствором метиленовой сини до появления не исчезающего при t=80±2°C бледно-голубого окрашивания и рассчитывают суммарное количество альдоз в ммоль/л по формулегде См.c. - t=80±2°C концентрация раствора метиленовой сини, моль/л;Vм.с. - объем раствора метиленовой сини, мл;Vсл. - исходный, взятый для анализа объем смешанной слюны, мл.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007124067/15A RU2339948C1 (ru) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007124067/15A RU2339948C1 (ru) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2339948C1 true RU2339948C1 (ru) | 2008-11-27 |
Family
ID=40193284
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007124067/15A RU2339948C1 (ru) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2339948C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2705363C1 (ru) * | 2019-03-26 | 2019-11-07 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава России) | Способ определения лекарственного препарата метформин в смешанной слюне пациента, страдающего сахарным диабетом |
-
2007
- 2007-06-26 RU RU2007124067/15A patent/RU2339948C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Практикум по биохимии. / Под. ред. С.Е.Северина, Г.А.Соловьевой, 2-е издание. - М.: МГУ, 1989, с.21-23. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2705363C1 (ru) * | 2019-03-26 | 2019-11-07 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава России) | Способ определения лекарственного препарата метформин в смешанной слюне пациента, страдающего сахарным диабетом |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Wada et al. | A simple method for the quantitative analysis of urinary delta-aminol evulinic acid to evaluate lead absorption | |
JP2015509361A (ja) | 酵素法を利用したヘモグロビンA1c定量分析のための溶血試薬組成物 | |
Low et al. | Ionic calcium determination in primary hyperparathyroidism | |
EP2628002B1 (en) | Analyte detection method | |
CN102703441A (zh) | 发夹型核酸荧光探针及其在检测铅离子的应用 | |
Burke | Determination of oxygen in water using a 10-ml. syringe | |
RU2339948C1 (ru) | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне | |
CN108896750B (zh) | 一种BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器的制备方法和用途 | |
Sasanelli et al. | Acute-phase proteins in dogs naturally infected with Leishmania infantum during and after long-term therapy with allopurinol | |
RU2314528C1 (ru) | Способ определения глюкозы в ротовой жидкости | |
CN113092459A (zh) | 一种尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查的方法 | |
Stanescu et al. | Salivary diagnosis-clinical uses in assessing oral inflammation | |
RU2548751C2 (ru) | Способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и меди в той же пробе | |
CN1281980A (zh) | 血清1,5-脱水葡萄糖醇测定试剂 | |
Alexiev et al. | A chemical catalytic method for determination of silver in human saliva | |
RU2174231C1 (ru) | Способ определения концентрации адреналина, норадреналина, дофамина и диоксифенилаланина в одной порции биологического материала | |
US3345138A (en) | Method for detecting pregnancy | |
RU2326387C2 (ru) | Способ ранней диагностики кариеса у подростков | |
Aguiar | Design and development of a microfluific paper-based analytical device (μPAD) for magnesium determination in saliva | |
Kynast et al. | Rapid specific determination of amniotic fluid lecithins as a test of fetal lung maturity | |
RU2315996C2 (ru) | Способ экспресс-диагностики гипероксипролинурии | |
RU2310205C2 (ru) | Способ полуколичественного определения фосфата в моче | |
US3404069A (en) | Method for measuring the glucose content of blood serum | |
RU2178170C1 (ru) | Способ диагностики гнездной алопеции | |
Jaipuriar et al. | Salivary and Serum Glucose in relation to HbA1c Levels in Type 2 Diabetes Mellitus. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090627 |