RU2326125C2 - Новые пептиды и их применение в терапии - Google Patents
Новые пептиды и их применение в терапии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2326125C2 RU2326125C2 RU2004132871/13A RU2004132871A RU2326125C2 RU 2326125 C2 RU2326125 C2 RU 2326125C2 RU 2004132871/13 A RU2004132871/13 A RU 2004132871/13A RU 2004132871 A RU2004132871 A RU 2004132871A RU 2326125 C2 RU2326125 C2 RU 2326125C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- peptide
- cytokine
- peptides
- amino acids
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 108
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 37
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 115
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 103
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 46
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims abstract description 5
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 40
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 24
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 11
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 11
- -1 IL1β Proteins 0.000 claims description 10
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 10
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 10
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 8
- 101100372758 Danio rerio vegfaa gene Proteins 0.000 claims description 7
- 101150030763 Vegfa gene Proteins 0.000 claims description 7
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 claims description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 6
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims description 5
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims description 5
- 108700012434 CCL3 Proteins 0.000 claims description 4
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 claims description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 claims description 4
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 229940043274 prophylactic drug Drugs 0.000 claims description 3
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 claims description 3
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000001327 Chemokine CCL5 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710091439 Major capsid protein 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 3
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 abstract description 28
- 238000002649 immunization Methods 0.000 abstract description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 abstract description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 abstract 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 34
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 32
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 22
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 22
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 20
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 19
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 16
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 15
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 14
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 14
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 101001033233 Homo sapiens Interleukin-10 Proteins 0.000 description 5
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 5
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 5
- 102000052620 human IL10 Human genes 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 4
- 101000960954 Homo sapiens Interleukin-18 Proteins 0.000 description 4
- 101001002709 Homo sapiens Interleukin-4 Proteins 0.000 description 4
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 4
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 4
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 4
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 102000043959 human IL18 Human genes 0.000 description 4
- 102000055229 human IL4 Human genes 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 4
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 4
- YUJSWFZLUCHGFO-UHFFFAOYSA-N 4-(4-azidophenyl)aniline Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YUJSWFZLUCHGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000960969 Homo sapiens Interleukin-5 Proteins 0.000 description 3
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 3
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 3
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 3
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 3
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 241000071092 Candelabrum Species 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 2
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 2
- 101001076430 Homo sapiens Interleukin-13 Proteins 0.000 description 2
- 101001055157 Homo sapiens Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 2
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 102000009571 Macrophage Inflammatory Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010009474 Macrophage Inflammatory Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 2
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 102000056003 human IL15 Human genes 0.000 description 2
- 102000019207 human interleukin-13 Human genes 0.000 description 2
- 229940116886 human interleukin-6 Drugs 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 2
- HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 4-(4-diazoniophenyl)benzenediazonium Chemical compound C1=CC([N+]#N)=CC=C1C1=CC=C([N+]#N)C=C1 HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100035875 C-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710149870 C-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000011238 DNA vaccination Methods 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 101500025624 Homo sapiens Transforming growth factor beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100020881 Interleukin-1 alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 1
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 241000223960 Plasmodium falciparum Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 235000012709 brilliant black BN Nutrition 0.000 description 1
- 108010092552 carbodiimide binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001889 chemoattractive effect Effects 0.000 description 1
- 230000027326 copulation Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000055228 human IL5 Human genes 0.000 description 1
- 102000052611 human IL6 Human genes 0.000 description 1
- 229940040731 human interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940124829 interleukin-23 Drugs 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/57—IFN-gamma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/485—Epidermal growth factor [EGF], i.e. urogastrone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/495—Transforming growth factor [TGF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/521—Chemokines
- C07K14/523—Beta-chemokines, e.g. RANTES, I-309/TCA-3, MIP-1alpha, MIP-1beta/ACT-2/LD78/SCIF, MCP-1/MCAF, MCP-2, MCP-3, LDCF-1, LDCF-2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/525—Tumour necrosis factor [TNF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5406—IL-4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5409—IL-5
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5412—IL-6
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5428—IL-10
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5434—IL-12
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5437—IL-13
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5443—IL-15
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/545—IL-1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/56—IFN-alpha
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2299/00—Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению новых пептидов, и может быть использовано в лечении и профилактике цитокинзависимых нарушений. Пептиды размером от 5 до 40 аминокислот, происходящие от цитокинов, используют в вакцине для лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний, рассеянного склероза, ревматоидного полиартрита, псориаза, аутоиммунных диабетов, волчанки, аллергии, астмы, рака и СПИДа. Изобретение позволяет эффективно проводить иммунизацию пациентов против указанных заболеваний с минимизацией побочных эффектов. 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 17 табл.
Description
Настоящее изобретение относится к новым пептидам и к их применению в терапии.
Активная антицитокиновая иммунизация представляет собой стратегию активной иммунотерапии, разрабатываемую с 1990 года Zagury et al., и которая описана, например, в заявке на патент WO 92/22577.
Эту идею взяли на вооружение несколько научных групп, опубликовавших в международных научных журналах сведения по активной иммунизации против целого белка IFNα, мультимеризованного обработкой глутаральдегидом (Gringeri et al., JAIDS 1999; 20:358-70), химерного белка TNFα, полученного копулированием нативного белка TNFα с эпитопом Т овальбумина (Dalum et al., Nature Biotechnology, 1999; 17:666-69), против целого IL9, копулированного с KLH (Richard et al., PNAS, 2000; 97:762-72) или целого IL5, химерного с эпитопом Т столбнячного токсина (Hertz et al., J. Immunol., 2001; 167:3792-99).
Эти подходы подтвердили осуществимость аутологичной антицитокиновой иммунизации, однако, за этими несколькими случаями успеха скрываются бесплодные попытки, описанные рядом авторов: некоторые цитокины не позволяют получить антитела, которые в достаточной степени оказывали бы защитный клинический эффект, а один и тот же цитокин, полученный в эффективном виде одним способом, не оказывался эффективным, будучи полученным другим (Richard et al., PNAS, 2000; 97:767-72).
В попытке объяснить это явление заявитель обнаружил, что до настоящего времени все авторы использовали целые цитокины (иногда слегка модифицированные), что влечет трудности, в частности, следующего плана:
ослабление иммуногенного воздействия целевых антигенных детерминант (для ответов В и Т);
возможный генезис облегчающих антител in vivo (ответ В).
Таким образом, желательно найти антигены, которые позволили бы получить антитела, проявляющие достаточный защитный эффект по отношению к цитокинам и ограничивающие их активность.
В WO-A-98/51705 описаны пептиды h RANTES, MIP1α и MIP1β, находящиеся между вторым и третьим цистеином хемокинов, связывающихся с ко-рецептором CCR5.
В WO-A-98/34631 описаны пептиды, полученные из γ-цепей рецепторов цитокинов, используемые для блокировки фиксации цитокина или активации рецептора.
В WO-A-94/01457 описаны пептиды IFNα, используемые в качестве носителей фармацевтических соединений.
В ЕР-А-0218531 описаны пептиды IL1, используемые для получения антител.
Таким образом, объектом настоящей заявки являются пептиды размером от 5 до 40 аминокислот, происходящие от цитокина, отличающиеся тем, что по меньшей мере в одной из этих аминокислот и, предпочтительно, по меньшей мере в двух последовательных аминокислотах из этих аминокислот по меньшей мере один атом расположен на расстоянии d менее 5 ангстрем от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину, причем расстояние d оценивают на основании структурных данных (например, кристаллографии или ЯМР), и, предпочтительно, тем, что они индуцируют антитела, взаимодействующие с указанным цитокином, за исключением
пептидов, расположенных между 2-м и 3-м цистеином h RANTES, MIP1α и MIP1β; и
пептидов, расположенных между аминокислотами 123 и 140 IFNα.
Из-за своей длины пептиды цитокинов по изобретению соответствуют ограниченному числу эпитопов цитокина, обычно одному или двум эпитопам цитокина, и, следовательно, лишены многих других эпитопов, содержащихся в цитокинах.
Под «цитокином» понимают как истинные цитокины, так и хемо-аттрактивные цитокины, также называемые хемокинами. Предпочтительны цитокины человека. Под «взаимодействующими» подразумевается, что эти антитела, например, либо распознавая нативный белок, как это может быть показано в иммунологическом тесте (ELISA, Western Blot), либо блокируя связывание цитокина с его рецептором, как это может быть показано в тесте на биологическую активность или в тесте на биохимическую конкуренцию, проявляют благоприятный клинический эффект in vivo.
Из цитокинов можно назвать, например, TGFβ, IL1α, IL1β, vEGF, TNFα, IFNα и γ, IL4, 5, 6, 10, 12, 13, 15, 18, 23, IP10, MIP1α и 1β, MCP1 и Rantes. Из вышеперечисленных цитокинов предпочтительны TGFβ, IL1β, vEGF, TNFα, IFNα и γ, IL4, 5, 6, 10, 12, 13, 15, 23 или любая комбинация некоторых из этих цитокинов, в частности, IL1β, vEGF, TNFα, IL23 и IFNα или любая комбинация некоторых из этих цитокинов.
Пептиды цитокинов по изобретению происходят от или являются производными одного цитокина. Под «происходят» подразумевается, что их аминокислотная последовательность идентична аминокислотной последовательности цитокина. Под «являются производными» подразумевается, что их аминокислотная последовательность в основном идентична аминокислотной последовательности цитокина, но имеет некоторые отличия, как будет показано далее.
По меньшей мере в одной аминокислоте пептидов цитокина по изобретению и, предпочтительно, в двух последовательных аминокислотах один из атомов находится на расстоянии менее 5 ангстрем от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину. Предпочтительно, он находится на расстоянии менее 4,5 ангстрем, в частности, менее 4 ангстрем и особенно предпочтительно менее 3,5 ангстрем от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину.
Обычно такой атом аминокислоты находится в боковой цепи указанной аминокислоты.
В предпочтительных условиях осуществления изобретения 2, в частности, 3 и, предпочтительно, 4 последовательные аминокислоты пептида цитокина отвечают этому критерию расстояния.
Это расстояние оценивают на основании структурных данных, например, кристаллографии, или на основании ЯМР, который дает результаты, сходные с результатами кристаллографического измерения.
Указанные пептиды цитокинов предпочтительно содержат более 8, в частности, более 10, более предпочтительно, более 12 и, особенно предпочтительно, более 15 аминокислот.
В других предпочтительных условиях осуществления изобретения указанные пептиды цитокинов содержат менее 35, предпочтительно, менее 30, в частности, менее 25, и, наиболее предпочтительно, менее 20 аминокислот. Обычно наиболее короткие последовательности соответствуют пептидам, содержащим только одну группу по меньшей мере двух последовательных аминокислот, в которых по меньшей мере один атом находится на расстоянии менее 5 ангстрем от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину, в то время как наиболее длинные последовательности обычно соответствуют пептидам по изобретению, содержащим две или даже три и более групп таких последовательных аминокислот. Эти группы могут находиться на расстоянии нескольких, например, 10 аминокислот друг от друга, как в случае IL1β.
Из вышеуказанных пептидов цитокинов можно, в частности, назвать один или более пептидов, выбранных из или происходящих от пептидов, названия которых приведены ниже:
| hIL1β (Человеческий Интерлейкин 1 бета) 1-APVRSLNCTL-10 (ID SEQ №1) 29-LHLQGQDMEQQ-39 (ID SEQ №2) 123-STSQAENMPV-132 (ID SEQ №3) |
|
| hvEGF (Человеческий сосудистый Эндотелиальный Фактор Роста) 73-IMRIKPHQGQHIGEMS-88 (ID SEQ №4) |
|
| hTNFα (Человеческий Фактор Некроза Опухоли альфа) 20-PQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEG-54 (ID SEQ №5) 80-ISRIAVSYQTKVNLLS-95 (ID SEQ №6) 124-FQLEKGDRLSAEINR-138 (ID SEQ №7) |
|
| hIFNγ (Человеческий гамма-Интерферон) 1-MQDPYVKEAENLKKYFNAGHSDVADNGTLFLGILKN-36 (ID SEQ №8) 118-MAELSPAAKTGKRKRS-133 (ID SEQ №9) |
|
| hIL10 (Человеческий Интерлейкин 10) 20-PNMLRDLRDAFSRVKTFFQMKDQLDNLLLKE-50 (ID SEQ №10) |
|
| hIL4 (Человеческий Интерлейкин 4) 5-ITLQEIIKTLNSL-17 (ID SEQ №11) 70-AQQFHRHKQLIRFLKRLDRNLWGLAG-95 (ID SEQ №12) |
|
| hIL12p40 (субъединица р40 Человеческого Интерлейкина 12) 80-LLLHKKEDGIWSTDILKDQKEPKNKTFLRCE-110 (ID SEQ №13) 135-KSSRGSSDPQG-145 (ID SEQ №14) |
|
| hIL18 (Человеческий Интерлейкин 18) 1-YFGKLESKLSVIRNLNDQVLFIDQGNRPLFEDMTD-35 (ID SEQ №15) 68-CEKISTLSCEN-78 (ID SEQ №16) 141-EDELGDRSIMFTVQNED-157 (ID SEQ №17) |
|
| hIP10 (Человеческий гамма-интерферониндуцируемый белок) 39-VEIIATMKKKGEKRCLNPESKA-60 (ID SEQ №18) |
|
| hIL5 (Человеческий Интерлейкин 5) 1-IPTSALVKETLALLSTHRTLLIANET-26 (ID SEQ №19) 96-LQEFLGVMNTEWI-108 (ID SEQ №20) |
|
| hTGFβ2 (Человеческий Трансформирующий Фактор Роста бета типа 2) 25-KRDLGWKWIHE-35 (ID SEQ №21) 87-TILYYIGKTPKIEQ-100 (ID SEQ №22) |
|
| hIL15 (Человеческий Интерлейкин 15) 1-ANWVNVISDLKKI-13 (ID SEQ №23) 74-SSNGNVTESGCKECEELEKKNIKEFLQSFVHIVQMF-111 (ID SEQ №24) |
|
| hIL6 (Человеческий Интерлейкин 6) 28-KQIRYILDGISA-39 (ID SEQ №25) 114-RAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLL-149 (ID SEQ №26) |
|
| hMIP1α (Человеческий Макрофаговый Воспалительный Белок альфа) 51-ADPSEEWVQKYVSDLELSA-69 (ID SEQ №27) |
|
| hMIP1β (Человеческий Макрофаговый Воспалительный Белок бета) 52-ADPSESWVQEYVYDLELN-69 (ID SEQ №28) |
|
| hIL13 (Человеческий Интерлейкин 13) 8-TALRELIEEL-17 (ID SEQ №29) 57-CSAIEKTQRMLSGFCPHKVSAGQFSS-82 (ID SEQ №30) |
|
| hIL23 (Человеческий Интерлейкин 23) 52-GHMDLREEGDEETT-65 (ID SEQ №31) 115-LLPDSPVGQLHASLLGLSQ-133 (ID SEQ №32) 160-LLRFKILRSLQAFVAVAARV-179 (ID SEQ №33) |
|
| hRANTES (Human Regulated upon Activation Normal T-cell expressed) 51-ANPEKKWVREYINSLEMS-68 (ID SEQ №34) |
|
| hIFNα (Человеческий альфа-Интерферон) 12-RRTLMLLAQMRK-23 (ID SEQ №35) 95-LEACVIQGVGVTETPLMKEDSILAVRK-121 (ID SEQ №36) |
Вышеприведенные последовательности были выбраны в составе цитокинов, участвующих в развитии заболеваний человека в силу своей роли в воспалительной реакции или в специфическом иммунном ответе.
В частности, можно назвать следующие пептиды:
123-STSQAENMPV-132 hIL1β;
73-IMRIKPHQGQHIGEMS hvEGF;
20-PQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEG-54 hαTNF;
1-MQDPYVKEAENLKKYFNAGHSDVADNGTLFLGILKN-36 hIFNγ;
20-PNMLRDLRDAFSRVKTFFQMKDQLDNLLLKE-50 hIL10;
70-AQQFHRHKQLIRFLKRLDRNLWGLAG-95 hIL4;
1-YFGKLESKLSVIRNLNDQVLFIDQGNRPLFEDMTD-35 hIL18;
52-GHMDLREEGDEETT-65, 115-LLPDSPVGQLHASLLGLSQ-133 или 160-LLRFKILRSLQAFVAVAARV-179 hIL23.
Как известно специалисту в области иммунологии, возможно изменить последовательность природных пептидов в цепи без изменения природы иммунологических свойств иммуногенных пептидов. Следовательно, можно также указать производные пептидов цитокинов, в значительной степени гомологичные этим природным последовательностям, например, имеющие более 50% гомологии, в частности, более 70% гомологии и предпочтительно более 80% гомологии или даже более 90% гомологии с соответствующим нативным пептидом, которые сохраняют иммунологические свойства этого эпитопного участка нативного пептида. Их область гомологии может составлять от 5 до 40 остатков, например, от 8 до 40 остатков или от 8 до 35 остатков, предпочтительно, от 10 до 35 остатков, а также от 12 до 35 остатков, в частности, от 12 до 30 остатков, более конкретно, от 15 до 30 остатков и, наиболее предпочтительно, от 15 до 25 остатков.
Производные пептидов цитокинов могут содержать модифицированные остатки при условии, что такие модификации не снижают существенным образом иммуногенность, причем модификации представляют собой либо присоединение химических радикалов (метил, ацетил и т.д.), либо стереохимическую модификацию (использование аминокислот серии D). Пептидные производные цитокинов, как и пептиды цитокинов, индуцировать антитела, взаимодействующие с цитокином.
Пептидные производные цитокинов по изобретению могут включать в аминокислотах, из которых они состоят, одну или более модификаций, таких как делеции, замены, вставки или присоединения функциональных групп (например, ацилирование), одной или более аминокислот, при условии, что эти модификации не выходят за определенные выше рамки (иммунологический характер). Например, обычно замена лейцина на изолейцин не меняет таких свойств; модификации должны затрагивать, как правило, менее 40% аминокислот, в частности, менее 30%, предпочтительно, менее 20% и наиболее предпочтительно, менее 10% аминокислот природного пептида. Важно, чтобы антитела, индуцируемые модифицированными пептидами, были активны в отношении нативного цитокина.
Эти модификации доступны специалисту, который может отследить влияние этих модификаций с помощью простых тестов. Иммуногенность таких модифицированных производных может быть оценена методом ELISA после иммунизации мышей, причем антигеном, тестируемым в ELISA, является целый цитокин или иммунизирующий пептид цитокина, или с помощью тестов на блокировку связывания цитокин-рецептор. Возможные модификации затрагивают предпочтительно менее 8 аминокислот, более предпочтительно, менее 6 аминокислот, в частности, менее 4 аминокислот, особенно предпочтительно, 3 или менее аминокислоты, например 2 или 1 аминокислоту.
Также объектом изобретения является соединение, отличающееся тем, что оно содержит по меньшей мере один описанный выше пептид цитокина или производное пептида цитокина. Такое соединение может включать повторы одинаковых пептидов/производных или комбинации разных пептидов/производных как в линейной форме, так и в форме структур в виде канделябра или смешанных соединений с белками-носителями. Такое соединение также может находиться в циклизованной форме. Таким образом, пептиды цитокинов или пептидные производные цитокинов по изобретению могут, например, быть встроены в более длинные аминокислотные последовательности, обеспечивающие, например, лучшую конформацию, или могут быть скомбинированы с экзогенными Т-эпитопами (для иммунизации с помощью как белков, так и ДНК).
Они могут быть, предпочтительно, ковалентно ассоциированы с белками-носителями, такими как, например, KLH.
Как было показано, пептиды цитокинов по изобретению обычно соответствуют небольшому числу эпитопов цитокина. В случае, в частности, их встраивания, комбинации или ассоциации, вышеназванные соединения не содержат других эпитопов указанного цитокина.
Эти пептиды цитокинов или производные цитокинов могут быть включены в любую белковую последовательность, не содержащую гомологии с другими эпитопами природного цитокина. Например, они могут являться сайтами связывания с рецептором, к окончаниям которых просто добавляют цистеин для придания пептиду циклической структуры. Другим примером является пептид, окруженный последовательностями Т-эпитопов столбнячного токсина. Еще одним примером может являться пептид, соответствующий последовательности сайта связывания с рецептором, но в которой некоторые аминокислоты заменены их изомерами серии D во избежание проявления их агонистического эффекта. Действительно, может оказаться предпочтительным использование пептидных производных, не обладающих агонистической активностью в отношении рецептора, чтобы действие иммуногена не накладывалось на иммунный ответ.
Для усиления иммунного ответа эти пептиды цитокинов или производные цитокинов могут быть копулированы с белками-носителями. Методы копулирования и используемые белки-носители могут различаться в зависимости от выбранного пептида: можно, например, использовать белок Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH) и Tetanus Toxoid (TT), конъюгированные с пептидами с помощью известных специалисту химических методов, таких как связывание с помощью карбодиимида, или с помощью глутаральдегида, или с помощью бис-диазотированного бензидина. Осуществление такого связывания может быть упрощено добавлением или встраиванием в последовательность аминокислот, таких, например, как лизин, гистидин, тирозин или цистеин. Такие пептидные соединения, химически или генетически связанные с экзогенным Т-эпитопом (происходящим от plasmodium falciparum, KLH и т.д.), также составляют часть изобретения.
Связывание в сетчатые структуры типа канделябра или связывание с такими молекулами, как трансферин или ферритин, может быть также осуществлено для стимуляции эффективности иммунного ответа.
Пептиды по изобретению могут быть, в частности, получены химическим синтезом или методами генной инженерии, или любым другим подходящим методом. Синтез циклических пептидов при необходимости путем прививки одной или более аминокислот к концу цепи, например, путем прививки цистеинов для создания дисульфидного мостика, позволяет частично воссоздать вторичную структуру, которую эти пептидные фрагменты имеют в составе трехмерной структуры протеина.
Пептиды цитокинов, производные цитокинов и их соединения по изобретению обладают очень интересными фармакологическими свойствами. В частности, они обладают замечательными антицитокиновыми свойствами. Действительно, они являются иммуногенами и способны генерировать в организме пациента антитела, распознающие нативный цитокин. Эти пептиды не содержат другие многочисленные эпитопы, происходящие от цитокина, которому они соответствуют.
Эти свойства продемонстрированы далее в экспериментальной части. Они подтверждают возможность применения вышеописанных пептидов в качестве лекарственных средств.
Ограничение изобретения этими пептидами, близкими к сайту связывания с рецептором, и исключение других эпитопов цитокинов позволяет, в частности, ограничить образование антител, облегчающих или потенцирующих цитокиновую активность. Кроме того, они позволяют повысить качество антицитокиновой иммунизации, поскольку сокращается число целевых антигенных детерминант.
Поэтому еще одним объектом изобретения являются лекарственные средства, отличающиеся тем, что они состоят из вышеописанных пептидов цитокинов или производных цитокинов или соединений, т.е., из вышеописанных пептидов цитокинов или производных цитокинов или иммуногенных соединений, или находящихся между 2-м и 3-м цистеином h RANTES или между 123 и 140 аминокислотами IFNα, используемые в способе терапевтического лечения организма человека или животного, а также применение такого пептида цитокина или производного цитокина или иммуногенного соединения для получения лечебного или профилактического лекарственного средства, предназначенного для лечения или профилактики нарушений, связанных с избытком или присутствием цитокинов.
Лекарственные средства по изобретению могут использоваться, например, как в лечении, так и в профилактике заболеваний, связанных с нарушениями регуляции иммунной системы, при которых наблюдается избыточная продукция цитокинов, как, например, аутоиммунные заболевания (в том числе рассеянный склероз, ревматоидный полиартрит, псориаз, аутоиммунный диабет, волчанка), аллергия или астма, рак или СПИД. Также очевидно, что борьба с IL1β или TNFα может помочь в лечении ревматоидного полиартрита, борьба с IFNγ, IL18, IL23 или IL12 может помочь в лечении рассеянного склероза или аутоиммунного диабета, борьба с IL4, IL5 и IL13 может помочь в лечении аллергии или астмы, борьба с IL10 или vEGF может помочь в лечении некоторых видов рака. В целом, в случае нарушений регуляции Th1/Th2, которые управляют самим иммунным ответом и обычно подключают IL12, IL2, IL4, IL6, IL10, IL13, IFNγ, TNFα, активная иммунизация приводит к восстановлению равновесия. Это только несколько примеров, а объектом изобретения является также любое лечение организма человека, основанное на активной иммунизации (ДНК или пептид), в которой используют вышеприведенные пептидные последовательности, за исключением других эпитопов цитокинов. Эти последовательности могут быть модифицированы, как указано в настоящем описании, и иммунизация с помощью ДНК происходит за счет простой транскрипции генетического кода.
Гуморальный иммунный ответ может быть оценен с помощью тестов ELISA или тестов, показывающих ингибирование связывания нативного цитокина со своим рецептором. Клеточный ответ может быть оценен в присутствии тестов на пролиферацию клеток в присутствии используемого пептида.
Иммуногенные действующие начала по изобретению могут быть использованы следующим образом.
Пациенту вводят пептид цитокина или производное цитокина или иммуногенное соединение по изобретению, например, подкожным или внутримышечным путем, в количестве, достаточном для эффективности в терапевтическом плане. Вводимая доза может составлять, например, от 1 до 1000 мкг, в частности, от 10 до 500 мкг при введении подкожным путем один раз в месяц в течение трех месяцев и далее периодически в зависимости от уровня индуцированных антител в сыворотке, например, каждые 2-6 месяцев. В составе одного и того же препарата можно вводить две или более разных иммуногенных молекул для индукции антител, нейтрализующих все неблагоприятные функциональные сайты, в случае, когда одна единственная иммуногенная молекула не содержит всех активных сайтов суперпродуцируемого цитокина, который требуется нейтрализовать.
Также объектом изобретения являются фармацевтические композиции, в частности, вакцины, содержащие в качестве действующего начала по меньшей мере один определенный выше пептид цитокина или производное цитокина или иммуногенное соединение.
В качестве лекарственного средства пептид цитокина или производное цитокина или иммуногенное соединение по изобретению может быть введено в состав фармацевтических композиций, предназначенных для введения любым обычным путем введения, принятым для вакцин, в частности, подкожным путем, внутримышечным путем, внутривенным путем или пероральным путем. Введение может быть осуществлено в виде однократной дозы или быть повторено один или более раз после некоторого интервала времени.
Поэтому еще одним объектом настоящей заявки является лечебная или профилактическая фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она содержит в качестве действующего начала один или более пептидов цитокинов или производных цитокинов или иммуногенных соединений, являющихся новыми или находящихся между 123 и 140 аминокислотами IFNα, как они описаны выше.
Иммуногенный агент может находиться в индивидуальной форме или может быть смешан с фармацевтически приемлемым эксципиентом или смесью эксципиентов, таким как добавка. В частности, объектом настоящей заявки является вакцина, содержащая в качестве иммуногена вышеописанный пептид цитокина или производное цитокина или иммуногенное соединение.
Еще одним объектом настоящего изобретения является способ получения вышеописанной композиции, отличающийся тем, что смешивают с помощью известных методов, одно или более действующих начал с приемлемыми, в частности, фармацевтически приемлемыми, эксципиентами.
Введение пациенту пептида цитокина или производного цитокина или иммуногенного соединения по изобретению соответствует активной иммунотерапии. Также может представлять интерес проведение пассивной иммунотерапии, т.е. непосредственное введение пациенту нужных ему антител.
Вакцинные препараты могут быть приготовлены для интраназального введения в форме геля карбополом в качестве эксципиента, в форме носовых капель или спрея, а для перорального введения в форме гастрорезистентных капсул, драже или гастрорезистентных гранул.
В случае ДНК-содержащих вакцин, вводимых системно или через слизистую, галеновая форма плазмиды может представлять собой суспензию в физиологической жидкости, такой как физиологический PBS (фосфатный буфер=PBS). Плазмиды могут быть включены в микросферы из биоразлагаемых полимеров (PLG, PLA, PCL) и введены в виде гастрорезистентных капсул для переваривания (пероральный путь введения). ДНК также может экспрессироваться в живом бактериальном векторе типа сальмонеллы или в вирусном векторе типа аденовируса или поксвируса.
Еще одним объектом настоящей заявки является способ активной иммунизации пациентов, отличающийся тем, что в качестве иммуногена используют определенный выше пептид цитокина или производное цитокина, или иммуногенное соединение, предпочтительно, в комбинации с минеральной, масляной или синтетической иммунной добавкой.
Иммунизация может быть осуществлена обычными методами, в частности, с помощью пептидов или иммуногенных соединений, таких как конъюгаты, предпочтительно в присутствии добавки, например, ISA 51 или Alun. Иммунизация может быть осуществлена на основе ДНК (последовательности, гомологичные сайтам связывания, в комбинации с экзогенными Т-эпитопами) с использованием голых ДНК или вектора экспрессии, содержащего подходящий промотор, например, pCR3,1. Вводимые ДНК могут быть защищены от действия нуклеаз с помощью подходящих радикалов (CpG и т.д.). В частности, после первоначальной иммунизации с помощью ДНК могут следовать обычные повторы с помощью пептидных соединений.
Предпочтительные условия использования вышеописанных пептидов также справедливы для других вышеописанных объектов изобретения.
На фиг.1 и 2, представляющей собой увеличение фиг.1, представлена кристаллографическая структура пептида, происходящего от IL10, в контакте с рецептором. Различим цитокин IL10 (слева) в контакте с рецептором (справа).
На фиг.2 можно наблюдать, что аминокислоты, помеченные черным, находятся на расстоянии менее 4 ангстрем (d=пунктир между двумя черными округлыми пятнами). Они соответствуют (снизу вверх) парам:
192IL10R серин - 28IL10 аспарагиновая кислота (3,18Å), 100IL10R аспарагиновая кислота и 101IL10R глутаминовая кислота - 34IL10 лизин (3,83Å и 3,84Å), и 94IL10R аспарагин - 39IL10 метионин (3,70Å). Для каждой аминокислоты центральная точка определена как барицентр по отношению к альфа-углероду рассматриваемой аминокислоты, окончанию боковой цепи и третьей точке, выбранной на основании максимальной удаленности от двух предыдущих на боковой цепи. Измеряемое расстояние d представляет собой расстояние, разделяющее центральные точки аминокислот, соответственно, цитокина и его рецептора. Очевидно, эти расстояния можно определить, используя другие обычные методы.
Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.
Пример 1
Пептид KLHLQGQDMEQQ (ID SEQ №37) был синтезирован из последовательности IL1β человека, к природной последовательности был добавлен остаток К для обеспечения связывания с KLH с помощью глутаральдегида.
Пять мышей были иммунизированы в присутствии добавки ISA51. Для первой инъекции, осуществленной в Д0 (день 0), готовили эмульсию 40 мкг иммуногена в количестве ISA51, достаточном для получения 100 мкл эмульсии. Для повторных иммунизаций в Д21 и в Д40 готовят 100 мкл эмульсии, содержащей 20 мкг иммуногена. Пятерых мышей иммунизировали параллельно в качестве контроля, используя KLH в том же адъюванте.
В Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для определения присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,34 | 0,08 | 1,86 | 0,90 | 1,56 | 1,15 |
| Контроль | 0,05 | 0,11 | 0,08 | 0,12 | 0,06 | 0,08 |
Присутствие антител, нейтрализующих нативный цитокин, оценивали следующим образом: 20 единиц нативного цитокина IL1β предварительно инкубировали с сывороткой мыши (иммунизированной или контрольной) в разведениях от 1/100 до 1/2000 в течение 2 час при 37°C. Затем эти среды добавляли к клеткам EL4, помещенным в микроплашки в количестве 50000 клеток на лунку. Продукцию IL2 оценивали спустя 24 часа в супернатанте с помощью теста ELISA сэндвич (R&D diagnostics). Процент ингибирования продукции IL2 отражает процент нейтрализации IL1β. Как можно видеть, ответы наблюдаются для иммунизированных мышей и не наблюдаются для контрольных.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 52% | 25% | 93% | 86% | 8% | 52% |
| Контроль | 8% | -5% | 11% | 5% | 12% | 6% |
Пример 2
Иммунизировали 5 мышей с помощью синтетического пептида, происходящего от vEGF человека: KPHQGQHIGEMS (ID SEQ №38). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,50 | 1,00 | 0,86 | 0,98 | 1,63 | 1,19 |
| Контроль | 0,05 | 0,13 | 0,07 | 0,10 | 0,08 | 0,09 |
Пример 3
Иммунизировали 5 мышей с помощью синтетического пептида, происходящего от TNFα человека: KYQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQL (ID SEQ №39). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии диазобензидина. К природной последовательности были добавлены остатки К и Y для обеспечения связывания с KLH с помощью глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,64 | 1,14 | 1,96 | 1,02 | 0,78 | 1,31 |
| Контроль | 0,11 | 0,16 | 0,09 | 0,11 | 0,18 | 0,13 |
Присутствие антител, нейтрализующих нативный цитокин, оценивали следующим образом: 50 единиц нативного цитокина TNFα предварительно инкубировали с сывороткой мыши (иммунизированной или контрольной) в разведении 1/200 в течение 2 час при 37°C. Затем эти среды добавляли к клеткам L929, помещенным в микроплашки в количестве 25000 клеток на лунку. Лизис клеток оценивали спустя 24 часа по окрашиванию нафтолом черно-синим (Sigma). Процент ингибирования лизиса отражает процент нейтрализации TNFα, и как можно видеть, ответы наблюдаются для иммунизированных мышей и не наблюдаются для контрольных.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 88% | 12% | 93% | 36% | 79% | 61% |
| Контроль | 5% | 6% | 14% | 5% | 1% | 6% |
Пример 4
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, происходящего от IFNγ человека: KKYFNAGHSDVADNGTLFLGILKN (ID SEQ №40). Этот пептид был химически синтезирован в форме MAPS. Этот пептид MAPS был затем копулирован с белком-носителем Tetanus Toxoid путем реакции в присутствии глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,56 | 1,05 | 0,98 | 1,80 | 1,64 | 1,41 |
| Контроль | 0,10 | 0,12 | 0,23 | 0,08 | 0,09 | 0,12 |
Присутствие антител, нейтрализующих нативный цитокин, оценивали следующим образом: 100 единиц нативного цитокина предварительно инкубировали с сывороткой мыши (иммунизированной или контрольной) в разведении 1/250 в течение 2 час при 37°C. Затем эти среды добавляли к клеткам RAW 264,7, помещенным в микроплашки в количестве 300000 клеток на лунку емкостью 2 мл. Экспрессию главного комплекса гистосовместимости (МНС) класса II на клетках оценивали поточной цитометрией спустя 24 часа, используя маркировку антителами анти-МНС класса II, связанными с флуоресцеином. Процент ингибирования экспрессии МНС класса II отражает процент нейтрализации IFNγ, и, как можно видеть, ингибирование наблюдается для иммунизированных мышей и не наблюдается для контрольных. Порог значимости в этих экспериментах составляет 30%.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 40% | 89% | 67% | 38% | 83% | 63% |
| Контроль | 25% | 14% | -10% | 29% | 7% | 13% |
Пример 5
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, происходящего от IL10 человека: DECNMLRDLRDAFSRVKTFFQMKDQLDNC (ID SEQ №41). Этот пептид синтезировали химически и к каждому концу добавляли цистеин с получением циклического пептида. Этот пептид был затем копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии карбодиимида. К природной последовательности также добавляли остаток DE для обеспечения связывания с KLH путем реакции в присутствии карбодиимида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,94 | 0,96 | 1,85 | 0,97 | 1,5 | 1,44 |
| Контроль | 0,29 | 0,52 | 0,17 | 0,26 | 0,36 | 0,32 |
Пример 6
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, соответствующего IL4 человека: KQLIRFLKRLDRNLWGLAG (ID SEQ №42). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,06 | 1,25 | 0,95 | 0,87 | 1,24 | 1,07 |
| Контроль | 0,34 | 0,09 | 0,26 | 0,16 | 0,12 | 0,19 |
Пример 7
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, соответствующего IL12р40 человека: KKEDGIWSTDILKDQKEPKNKTFLRCE (ID SEQ №43). Этот пептид был копулирован с белком-носителем Tetanos Toxoide путем реакции в присутствии бис-диазотированного (диазо) бензидина. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 0,95 | 1,06 | 1,58 | 1,14 | 0,87 | 1,12 |
| Контроль | 0,06 | 0,12 | 0,09 | 0,05 | 0,09 | 0,08 |
Пример 8
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, происходящего от IL18 человека: KYFGKLESKLSVIRNLNDQVLFID (ID SEQ №44). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии глутаральдегида. К природной последовательности был добавлен остаток К для обеспечения связывания с KLH с помощью глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,85 | 1,13 | 0,99 | 1,24 | 1,54 | 1,35 |
| Контроль | 0,31 | 0,09 | 0,27 | 0,16 | 0,24 | 0,21 |
Пример 9
Иммунизировали 5 мышей с помощью синтетического пептида, происходящего от IL10 человека: KKKGEKRCLNPESKA (ID SEQ №45). Этот пептид был копулирован с белком-носителем Tetanos Toxoide путем реакции в присутствии глутаральдегида. Три остатка К, присутствующие в природной последовательности, обеспечивают связывание с KLH при помощи глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,16 | 0,98 | 1,24 | 1,09 | 0,88 | 1,07 |
| Контроль | 0,32 | 0,21 | 0,11 | 0,20 | 0,09 | 0,19 |
Пример 10
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, соответствующего IL5 человека: KLQEFLGVMNTEWI (ID SEQ №46). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии глутаральдегида. К природной последовательности был добавлен остаток К для обеспечения связывания с KLH при помощи глутаральдегида. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,25 | 1,21 | 1,87 | 1,10 | 0,88 | 1,26 |
| Контроль | 0,51 | 0,21 | 0,42 | 0,09 | 0,38 | 0,32 |
Пример 11
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, соответствующего TGFβ2 человека: DTILYYIGKTPKIE (ID SEQ №47). Этот пептид был копулирован с белком-носителем KLH путем реакции в присутствии карбодиимида. К природной последовательности был добавлен остаток D для обеспечения связывания. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 0,95 | 1,15 | 0,99 | 1,17 | 1,08 | 1,07 |
| Контроль | 0,40 | 0,09 | 0,35 | 0,26 | 0,29 | 0,28 |
Пример 12
Иммунизировали 5 мышей с помощью пептида, соответствующего IL6 человека: KQIRYILDGISA (ID SEQ №25). Этот пептид был копулирован с белком-носителем ТТ путем реакции в присутствии бис-диазотированного (диазо) бензидина. После иммунизации в тех же условиях, как и в примере 1, в Д60 отбирали сыворотку и проводили тесты ELISA с нативным цитокином для выявления присутствия антител.
Среднее поглощение, полученное для каждой мыши, представлено в следующей таблице.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,11 | 1,27 | 1,02 | 1,34 | 0,32 | 1,01 |
| Контроль | 0,11 | 0,15 | 0,29 | 0,14 | 0,21 | 0,21 |
Пример 13
ДНК, соответствующие пептидам 1-APVRSLNCTL-10 (GCACCTGTACGATCACTGAACTGCACGCTC) (ID SEQ №48), 29-LHLQGQDMEQQ-39 (CTCCACCTCCAGGGACAGGATATGGAGCAACAA) (ID SEQ №49) и 123-STSQAENMPV-132 (AGCACCTCTCAAGCAGAAAACATGCCCGTC) (ID SEQ №50) IL1β, были синтезированы и отделены от Т-эпитопов столбнячного токсина: AQYIKANSKFIGITEL (ID SEQ №55) (CAGTACATCAAGGCTAACTCCAAGTTCATCGGTATCACTGAGCTG) (ID SEQ №51) и KLH:VDTWRKNVDSL (GTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTT) (ID SEQ №52), спейсерами GYG (GGCTACGGC)(ID SEQ №54).
Конечная нуклеотидная последовательность является следующей: GTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTTGGCTACGGCGCACCTGTACGATCACTGAACTGCACGCTCGGCTACGGCGTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTTGGCTACGGCCTCCACCTCCAGGGACAGGATATGGAGCAACAAGGCTACGGCCAGTACATCAAGGCTAACTCCAAGTTCATCGGTATCACTGAGCTGGGCTACGGCAGCACCTCTCAAGCAGAAAACATGCCCGTCGGCTACGGCGTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTT(ID SEQ №53).
Эта последовательность ДНК, клонированная в pRSET-A, кодирует полипептидное соединение, которое получают и очищают методами генной инженерии в форме слитого белка полигистидина. Этот полипептид используют в качестве иммуногена, как описано в примере 1.
Антительный ответ у мышей был измерен с использованием нативного IL1β с помощью ELISA; получили следующие значения.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 0,86 | 0,73 | 1,68 | 1,55 | 1,83 | 1,33 |
| Контроль | 0,23 | 0,11 | 0,21 | 0,29 | 0,17 | 0,20 |
Пример 14
кДНК, соответствующие пептидам 1-APVRSLNCTL-10 (GCACCTGTACGATCACTGAACTGCACGCTC) (ID SEQ №48), 29-LHLQGQDMEQQ-39 (CTCCACCTCCAGGGACAGGATATGGAGCAACAA) (ID SEQ №49) и 123-STSQAENMPV-132 (AGCACCTCTCAAGCAGAAAACATGCCCGTC) (ID SEQ №50) IL1β были синтезированы и отделены от Т-эпитопов столбнячного токсина: AQYIKANSKFIGITEL (CAGTACATCAAGGCTAACTCCAAGTTCATCGGTATCACTGAGCTG) (ID SEQ №51) и KLH: VDTWRKNVDSL (GTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTT) (ID SEQ №52) спейсерами GYG.
Конечная нуклеотидная последовательность является следующей: GTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTTGGCTACGGCGCACCTGTACGATCACTGAACTGCACGCTCGGCTACGGCGTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTTGGCTACGGCCTCCACCTCCAGGGACAGGATATGGAGCAACAAGGCTACGGCCAGTACATCAAGGCTAACTCCAAGTTCATCGGTATCACTGAGCTGGGCTACGGCAGCACCTCTCAAGCAGAAAACATGCCCGTCGGCTACGGCGTTGACACCACCAGAAAAAATGTTGACTCCCTT(ID SEQ №53).
Эта последовательность ДНК, клонированная в pCR3,1, кодирует полипептид IL1b под контролем промотора CMV.
Проводят первую внутримышечную инъекцию 100 мкг вектора в соляном растворе объемом 100 мкл. В Д21 и Д40 проводят повторы инъекций, используя пептид из примера 13 (иммунизация типа «prime-boost»). В Д60 антительный ответ оценивают в тесте ELISA с нативным цитокином на 5 иммунизированных мышах и 5 контрольных мышах.
Результаты являются следующими.
| Мышь | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Среднее |
| Пептид | 1,54 | 0,35 | 1,88 | 1,64 | 0,24 | 1,13 |
| Контроль | 0,13 | 0,11 | 0,18 | 0,08 | 0,23 | 0,14 |
Пример 15
Получают вакцину в виде эмульсии вода-в-масле, состоящей из 50% ISA 51 (Seppic, Париж) и 50% водного раствора пептида из примера 1 (50 мкг/доза).
Пример 16
Вакцина на основе плазмидного иммуногена для ДНК-вакцинации системного типа IL10.
Плазмиды, кодирующие пептиды APVRSLNCTL и LHLQGQDMEQQ IL1β (20 мкг/доза) суспендируют в 0,2 мл PBS для внутримышечного введения.
Пример 17
Получили вакцину в виде эмульсии вода-в-масле из 50% ISA 51 (Seppic, Париж) и 50% водного раствора синтетического пептида KYQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQL, происходящего от TNFα человека, связанного с KLH (100 мкг/доза).
Claims (9)
1. Вакцина для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, состоящей из аутоиммунных заболеваний, рассеянного склероза, ревматоидного полиартрита, псориаза, аутоиммунных диабетов, волчанки, аллергии, астмы, рака и СПИДа, содержащая по меньшей мере одно иммуногенное соединение, включающее пептид или его пептидное производное, причем указанный пептид имеет размер от 5 до 40 аминокислот, происходящий от цитокина, причем по меньшей мере в одной из его аминокислот по меньшей мере один атом находится на расстоянии d менее 5 Å от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину, причем расстояние d оценивают на основании структурных данных, за исключением пептидов, расположенных между 2-м и 3-м цистеином h RANTES, MIP1α и MIP1β; и причем указанное иммуногенное соединение не содержит других эпитопов указанного цитокина, и причем указанное иммуногенное соединение обладает способностью генерировать у пациента антитела, распознающие нативный цитокин, причем указанный пептид выбран или происходит из группы, состоящей из следующих пептидов:
1-APVRSLNCTL-10 (ID SEQ №1)
29-LHLQGQDMEQQ-39 (ID SEQ №2)
123-STSQAENMPV-132 (ID SEQ №3)
73-IMRIKPHQGQHIGEMS-88 (ID SEQ №4)
20-PQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEG-54 (ID SEQ №5)
80-ISRIAVSYQTKVNLLS-95 (ID SEQ №6)
124-FQLEKGDRLSAEINR-138 (ID SEQ №7)
l-MQDPYVKEAENLKKYFNAGHSDVADNGTLFLGILKN-36 (ID SEQ №8)
118-MAELSPAAKTGKRKRS-133 (ID SEQ №9)
20-PNMLRDLRDAFSRVKTFFQMKDQLDNLLLKE-50 (ID SEQ №10)
5-ITLQEIIKTLNSL-17 (ID SEQ №11)
70-AQQFHRHKQLIRFLKRLDRNLWGLAG-95 (ID SEQ №12)
80-LLLHKKEDGIWSTDILKDQKEPKNKTFLRCE-110 (ID SEQ №13)
135-KSSRGSSDPQG-145 (ID SEQ №14)
1-YFGKLESKLSVIRNLNDQVLFIDQGNRPLFEDMTD-35 (ID SEQ №15)
68-CEKISTLSCEN-78 (ID SEQ №16)
141-EDELGDRSIMFTVQNED-157 (ID SEQ №17)
39-VEIIATMKKKGEKRCLNPESKA-60 (ID SEQ №18)
1-IPTSALVKETLALLSTHRTLLIANET-26 (ID SEQ №19)
96-LQEFLGVMNTEWI-108 (ID SEQ №20)
25-KRDLGWKWIHE-35 (ID SEQ №21)
87-TILYYIGKTPKIEQ-100 (ID SEQ №22)
1-ANWVNVISDLKKI-13 (ID SEQ №23)
74-SSNGNVTESGCKECEELEKKNIKEFLQSFVHIVQMF-111 (ID SEQ №24)
28-KQIRYILDGISA-39 (ID SEQ №25)
114-RAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLL-149 (ID SEQ №26)
51-ADPSEEWVQKYVSDLELSA-69 (ID SEQ №27)
52-ADPSESWVQEYVYDLELN-69 (ID SEQ №28)
8-TALRELIEEL-17 (ID SEQ №29)
57-CSAIEKTQRMLSGFCPHKVSAGQFSS-82 (ID SEQ №30)
52-GHMDLREEGDEETT-65 (ID SEQ №31)
115-LLPDSPVGQLHASLLGLSQ-133 (ID SEQ №32)
160-LLRFKILRSLQAFVAVAARV-179 (ID SEQ №33)
51-ANPEKKWVREYINSLEMS-68 (ID SEQ №34)
12-RRTLMLLAQMRK-23 (ID SEQ №35)
95-LEACVIQGVGVTETPLMKEDSILAVRK-121 (ID SEQ №36) или функционального фрагмента этих пептидов, причем указанное производное пептида получено делецией, заменой, добавлением, циклизацией, стереохимической модификацией или добавлением функциональных групп одной или более аминокислот указанного пептида.
2. Вакцина по п.1, где в двух из последовательных аминокислот указанного пептида по меньшей мере один атом находится на расстоянии d менее 5 Å от атома рецептора, соответствующего указанному цитокину.
3. Вакцина по п.1, где указанный пептид выбирают из фрагментов следующих цитокинов: TGFβ, IL1β, vEGF, TNFα, IFNα и γ, IL 4, 5, 6, 10, 12, 13, 15, 18, 23, IP10, MIP 1α и 1β, MCP1 и Rantes.
4. Вакцина по п.1, где указанный пептид выбирают из фрагментов следующих цитокинов: TGFβ, IL1β, vEGF, TNFα, IFNα и γ, IL 4, 5, 6, 10, 12, 13, 15, 18, 23.
5. Вакцина по п.1, где d составляет менее 4 Å.
6. Вакцина по п.1, где 3 или 4 последовательные аминокислоты пептида цитокина отвечают указанному критерию расстояния.
7. Вакцина по п.1, где указанный пептид содержит менее 30 аминокислот.
8. Применение вакцины по одному из пп.1-7 для получения лечебного или профилактического лекарственного средства, предназначенного для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, состоящей из аутоиммунных заболеваний, рассеянного склероза, ревматоидного полиартрита, псориаза, аутоиммунных диабетов, волчанки, аллергии, астмы, рака и СПИДа.
9. Применение вакцины по одному из пп.1-7 для получения лечебного или профилактического лекарственного средства, предназначенного для лечения аутоиммунных заболеваний.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR0204464 | 2002-04-10 | ||
| FR0204464A FR2838444B1 (fr) | 2002-04-10 | 2002-04-10 | Nouveaux peptides et leur application en therapeutique |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004132871A RU2004132871A (ru) | 2005-09-20 |
| RU2326125C2 true RU2326125C2 (ru) | 2008-06-10 |
Family
ID=28459716
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004132871/13A RU2326125C2 (ru) | 2002-04-10 | 2003-04-09 | Новые пептиды и их применение в терапии |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (6) | US7393523B2 (ru) |
| EP (3) | EP2314312A3 (ru) |
| JP (1) | JP2005530723A (ru) |
| KR (1) | KR101101004B1 (ru) |
| CN (1) | CN1649898A (ru) |
| AT (1) | ATE526985T1 (ru) |
| AU (1) | AU2003260031B2 (ru) |
| CA (1) | CA2480996C (ru) |
| DK (1) | DK2314311T3 (ru) |
| ES (2) | ES2375053T3 (ru) |
| FR (1) | FR2838444B1 (ru) |
| IL (1) | IL164429A0 (ru) |
| MA (1) | MA27191A1 (ru) |
| MX (1) | MXPA04009841A (ru) |
| NZ (1) | NZ536351A (ru) |
| RU (1) | RU2326125C2 (ru) |
| SI (1) | SI2314311T1 (ru) |
| TN (1) | TNSN04200A1 (ru) |
| WO (1) | WO2003084979A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA200408451B (ru) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7422743B2 (en) * | 2000-05-10 | 2008-09-09 | Schering Corporation | Mammalian receptor protein DCRS5;methods of treatment |
| FR2859725B1 (fr) * | 2003-09-16 | 2006-03-10 | Neovacs | Procede a haut rendement pour l'obtention d'anticorps humains neutralisant l'activite biologique d'une cytokine humaine |
| WO2005084198A2 (en) | 2004-02-27 | 2005-09-15 | Vaxconsulting | Peptides of il1 beta and tnf alpha and method of treatment using same |
| EP1931383A1 (en) | 2005-09-28 | 2008-06-18 | Cytos Biotechnology AG | Interleukin-1 conjugates and uses thereof |
| US8546321B2 (en) | 2008-11-17 | 2013-10-01 | Kobenhavns Universitet | IL-4-derived peptides for modulation of the chronic inflammatory response and treatment of autoimmune diseases |
| US9301997B2 (en) | 2009-09-21 | 2016-04-05 | Peptinov Sas | Method of vaccination for limiting articular inflammation in rheumatoid arthritis and multiple sclerosis by administering IL-23 peptides |
| WO2011143280A2 (en) | 2010-05-11 | 2011-11-17 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Peptide-based inhibitor of interleukin-10 or interferon-gamma signaling |
| CN110133295A (zh) * | 2012-03-18 | 2019-08-16 | 株式会社资生堂 | 疾病样品分析装置、分析系统及分析方法 |
| JOP20200308A1 (ar) | 2012-09-07 | 2017-06-16 | Novartis Ag | جزيئات إرتباط il-18 |
| EP3302536A1 (en) | 2015-06-03 | 2018-04-11 | Affiris AG | Il-23-p19 vaccines |
| KR102210543B1 (ko) * | 2017-10-13 | 2021-02-01 | 주식회사 나이벡 | 고효율 줄기세포 선별을 위한 grp78 유래 펩타이드 |
| CN114026114A (zh) * | 2019-05-10 | 2022-02-08 | 比姆约有限公司 | 用于治疗再灌注损伤的bnip3肽 |
| AU2023223603A1 (en) | 2022-02-28 | 2024-08-22 | Tridem Bioscience Gmbh & Co Kg | A CONJUGATE CONSISTING OF OR COMPRISING AT LEAST A ß-GLUCAN OR A MANNAN. |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4772685A (en) * | 1985-10-02 | 1988-09-20 | Merck & Co., Inc. | Immunogenic peptides of human interleukin-1 and the corresponding anti-peptide antibodies |
| US5013824A (en) * | 1985-11-19 | 1991-05-07 | Schering Corporation | Human interleukin-4 peptides and conjugates thereof |
| DE3841761A1 (de) * | 1988-12-12 | 1990-06-13 | Basf Ag | Neue tnf-peptide |
| PT96230B (pt) * | 1989-12-20 | 1998-06-30 | Schering Corp | Processo para a producao de um polipeptideo e anticorpos antagonistas da interleuquina-4 humana |
| EP0521918A4 (en) * | 1990-03-19 | 1993-05-05 | Peptide Technology Ltd | Anti-tumour peptides |
| FR2677654B1 (fr) | 1991-06-17 | 1995-11-17 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Composes a effet immunogene anti-cytokine, a effet immunogene anticytostatique ou a effet vaccinal anti-infection a hiv. |
| US6117974A (en) * | 1991-10-02 | 2000-09-12 | Peptor Limited | Libraries of backbone-cyclized peptidomimetics |
| US5494662A (en) * | 1992-04-27 | 1996-02-27 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Stimulator for bone formation |
| CA2139571C (en) * | 1992-07-07 | 2006-11-14 | Eleanor N. Fish | Interferon receptor binding peptides |
| US5770191A (en) * | 1995-05-24 | 1998-06-23 | University Of Florida | Active C-terminal peptides of interferon--gamma and their use |
| US5994292A (en) * | 1995-05-31 | 1999-11-30 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Interferon-inducible protein 10 is a potent inhibitor of angiogenesis |
| WO1998034631A1 (en) * | 1997-02-07 | 1998-08-13 | Thomas Jefferson University | Peptide mimetics of the cytokine receptor gamma chain |
| IT1291353B1 (it) * | 1997-05-12 | 1999-01-07 | San Raffaele Centro Fond | Peptidi con attivita' antivirale |
| AU5201399A (en) * | 1997-09-30 | 1999-10-18 | Pharmacia & Upjohn Company | Tnf-related death ligand |
| AU773029B2 (en) * | 1999-02-08 | 2004-05-13 | Medvet Science Pty. Ltd. | Cytokine-binding domain |
| KR20010102556A (ko) * | 1999-03-11 | 2001-11-15 | 추후제출 | 암 및 과증식성 장애의 치료 조성물 및 치료방법 |
| US7129072B1 (en) * | 1999-08-30 | 2006-10-31 | New York University | Crystal of fibroblast growth factor receptor 1 in complex with fibroblast growth factor |
| US6420346B1 (en) * | 2000-02-07 | 2002-07-16 | Rappaport Family Institute For Research In The Medical Sciences | Polynucleotides encoding MIP-1α, MCP-1, MIP-1β, Rantes and TNF-α, and methods for treating rheumatoid arthritis |
| WO2002044197A2 (en) * | 2000-12-01 | 2002-06-06 | Fish Eleanor N | Cytokine receptor binding peptides |
| US20030166589A1 (en) * | 2001-06-05 | 2003-09-04 | Nathan Karin | Method and pharmaceutical composition for the treatment of multiple sclerosis |
-
2002
- 2002-04-10 FR FR0204464A patent/FR2838444B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-04-09 NZ NZ536351A patent/NZ536351A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-04-09 EP EP10183961A patent/EP2314312A3/fr not_active Withdrawn
- 2003-04-09 CN CNA038100606A patent/CN1649898A/zh active Pending
- 2003-04-09 KR KR1020047016042A patent/KR101101004B1/ko active IP Right Grant
- 2003-04-09 RU RU2004132871/13A patent/RU2326125C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-04-09 AT AT03740584T patent/ATE526985T1/de not_active IP Right Cessation
- 2003-04-09 DK DK10183953.8T patent/DK2314311T3/en active
- 2003-04-09 CA CA2480996A patent/CA2480996C/fr not_active Expired - Fee Related
- 2003-04-09 EP EP03740584A patent/EP1492814B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-09 EP EP10183953.8A patent/EP2314311B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-09 JP JP2003582175A patent/JP2005530723A/ja active Pending
- 2003-04-09 ES ES03740584T patent/ES2375053T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-09 US US10/510,116 patent/US7393523B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-04-09 SI SI200332450T patent/SI2314311T1/sl unknown
- 2003-04-09 MX MXPA04009841A patent/MXPA04009841A/es not_active Application Discontinuation
- 2003-04-09 AU AU2003260031A patent/AU2003260031B2/en not_active Ceased
- 2003-04-09 WO PCT/FR2003/001120 patent/WO2003084979A2/fr active Application Filing
- 2003-04-09 ES ES10183953.8T patent/ES2550030T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-10-01 MA MA27884A patent/MA27191A1/fr unknown
- 2004-10-05 IL IL16442904A patent/IL164429A0/xx unknown
- 2004-10-08 TN TNP2004000200A patent/TNSN04200A1/fr unknown
- 2004-10-19 ZA ZA2004/08451A patent/ZA200408451B/en unknown
-
2008
- 2008-06-06 US US12/134,743 patent/US7641895B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2009
- 2009-12-01 US US12/628,826 patent/US7892529B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-01-11 US US13/004,588 patent/US8147819B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-01-31 US US13/362,234 patent/US8277792B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-08-24 US US13/593,823 patent/US8529881B2/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| FAIRBROTHER W.J. et al., Novel peptides selected to bind vascular endothelial growth factor target the receptor-binding site, Biochemistry, 1998, v.37, n.51, p.:17754-17764. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8529881B2 (en) | Peptides for active anti-cytokine immunization | |
| US20050186209A1 (en) | Vaccine | |
| US8632781B2 (en) | Immunogenic compounds comprising peptides of IL1β | |
| US20060182713A1 (en) | Vaccine composition comprising interleukin-15 (il-15) | |
| CN110300762B (zh) | 包含人白介素-15的突变体的疫苗组合物 | |
| JP2005529091A (ja) | エオタキシン伝達炎症状態の処置および予防方法および組成物 | |
| AU2011213784A1 (en) | Peptides of IL1 BETA and TNF and method of treatment using same | |
| KR20060010730A (ko) | 염증 상태를 치료하고 예방하기 위한 방법과 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190410 |