RU2307126C2 - Конъюгаты g-csf - Google Patents

Конъюгаты g-csf Download PDF

Info

Publication number
RU2307126C2
RU2307126C2 RU2004103866/13A RU2004103866A RU2307126C2 RU 2307126 C2 RU2307126 C2 RU 2307126C2 RU 2004103866/13 A RU2004103866/13 A RU 2004103866/13A RU 2004103866 A RU2004103866 A RU 2004103866A RU 2307126 C2 RU2307126 C2 RU 2307126C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
polypeptide
conjugate according
polypeptide conjugate
amino acid
residues
Prior art date
Application number
RU2004103866/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2004103866A (ru
Inventor
Торбен Лауесгор НИССЕН (US)
Торбен Лауесгор НИССЕН
Ким Вилбоур АНДЕРСЕН (DK)
Ким Вилбоур АНДЕРСЕН
Христиан Карстен ХАНСЕН (DK)
Христиан Карстен ХАНСЕН
Ян Моллер МИККЕЛСЕН (DK)
Ян Моллер МИККЕЛСЕН
Ханс Талсгор ШАМБЮЕ (DK)
Ханс Талсгор ШАМБЮЕ
Original Assignee
Максиджен Холдингз Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US09/904,196 external-priority patent/US6555660B2/en
Application filed by Максиджен Холдингз Лтд. filed Critical Максиджен Холдингз Лтд.
Publication of RU2004103866A publication Critical patent/RU2004103866A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2307126C2 publication Critical patent/RU2307126C2/ru

Links

Images

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой полипептидный конъюгат с активностью G-CSF, включающий полипептид с аминокислотной последовательностью, которая отличается от последовательности hG-CSF человека вплоть до 15 аминокислотных остатков, который конъюгирован с 2-6 остатками полиэтиленгликоля. Конъюгаты имеют низкую биоактивность in vitro, продолжительное время полужизни in vivo, пониженный рецептор-опосредованный клиренс. Изобретение позволяет обеспечивать более быструю стимуляцию образования лейкоцитов и нейтрофилов, чем неконъюгированный рекомбинантный G-CSF человека. 15 з.п. ф-лы, 11 ил., 4 табл.

Description

Текст описания представлен в факсимильном виде.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030
Figure 00000031
Figure 00000032
Figure 00000033
Figure 00000034
Figure 00000035
Figure 00000036
Figure 00000037
Figure 00000038
Figure 00000039
Figure 00000040
Figure 00000041
Figure 00000042
Figure 00000043
Figure 00000044
Figure 00000045
Figure 00000046
Figure 00000047
Figure 00000048
Figure 00000049
Figure 00000050
Figure 00000051
Figure 00000052
Figure 00000053
Figure 00000054
Figure 00000055
Figure 00000056
Figure 00000057
Figure 00000058
Figure 00000059
Figure 00000060
Figure 00000061
Figure 00000062
Figure 00000063
Figure 00000064
Figure 00000065
Figure 00000066
Figure 00000067
Figure 00000068
Figure 00000069
Figure 00000070
Figure 00000071
Figure 00000072
Figure 00000073
Figure 00000074
Figure 00000075
Figure 00000076
Figure 00000077
Figure 00000078
Figure 00000079
Figure 00000080
Figure 00000081
Figure 00000082
Figure 00000083
Figure 00000084
Figure 00000085
Figure 00000086
Figure 00000087

Claims (20)

1. Полипептидный конъюгат, проявляющий активность G-CSF, включающий полипептид с аминокислотной последовательностью, которая отличается на вплоть до 15 аминокислотных остатков от аминокислотной последовательности hG-CSF, приведенной в SEQ ID NO: 1, причем полипептид содержит, по меньшей мере, две замены, выбранные из группы, состоящей из K16R/Q, K34R/Q и K40R/Q, и по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из Т105К и S159K, относительно SEQ ID NO: 1, причем конъюгат содержит 2-6 остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 1000-10000 Да, присоединенных к связующим группам полипептида.
2. Полипептидный конъюгат по п.1, включающий четыре или пять указанных замен.
3. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замену Н170К, H170Q или H170R.
4. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замены, выбранные из группы, состоящей из Q70K+S159K, Q70K+H170K, Q90K+S159K, Q90K+H170K, T105K+S159K, Т105К+Н170К, Q120K+S159K, Q120K+H170K, T133K+S159K, Т133К+Н170К, S159K+H170K, Q70K+Q90K+S159K, Q70K+Q90K+H170K, Q70K+T105K+S159K, Q70K+T105K+H170K, Q70K+Q120K+S159K, Q70K+Q120K+H170K, Q70K+T133K+S159K, Q70K+T133K+H170K, Q70K+S159K+H170K, Q90K+T105K+S159K, Q90K+T105K+H170K, Q90K+Q120K+S159K, Q90K+Q120K+H170K, Q90K+T133K+S159К, Q90K+T133K+H170K, Q90K+S159K+H170K, T105K+Q120K+S159K, T105K+Q120K+H170K, T105K+T133K+S159K, Т105К+Т133К+Н170К, T105K+S159K+H170K, Q120K+T133K+S159K, Q120K+T133K+H170K, Q120K+S159K+H170K, T133K+S159K+H170K, Q70K+Q90K+T105K+S159К, Q70K+Q90K+T105К+Н170К, Q70K+Q90K+Q120K+S159K, Q70K+Q90K+Q120K+H170K, Q70K+Q90K+T133K+S159К, Q70K+Q90K+T133К+Н170К, Q70K+Q90K+S159К+Н170К, Q70K+T105K+Q120K+S159К, Q70K+T105K+Q120K+H170K, Q70K+T105K+T133K+S159К, Q70K+T105К+Т133К+Н170К, Q70K+T105K+S159К+Н170К, Q70K+Q120K+T133K+S159K, Q70K+Q120K+T133K+H170K, Q70K+T133K+S159K+H170K, Q90K+T105K+Q120K+S159K, Q90K+T105K+Q120K+H170K, Q90K+T105K+T133K+S159К, Q90K+T105K+T133K+H170K, Q90K+T105K+S159К+Н170К, Q90K+Q120K+T133K+S159K, Q90K+Q120K+T133K+H170K, Q90K+Q120K+S159K+H170K, Q90K+T133K+S159К+Н170К, T105K+Q120K+T133K+S159K, T105K+Q120K+T133K+H170K, T105K+Q120K+S159K+H170K, T105K+T133K+S159K+H170K и Q120K+T133K+S159K+H170K.
5. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замены, выбранные из группы, состоящей из K16R+K34R, K16R+K40R, K34R+K40R, и K16R+K34R+K40R.
6. Полипептидный конъюгат по п.5, включающий замены K16R+K34R+K40R и включающий остаток лизина в положении 23.
7. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, в котором аминокислотная последовательность полипептида отличается на вплоть до 10 аминокислотных остатков от SEQ ID NO:1.
8. Полипептидный конъюгат по п.7, в котором аминокислотная последовательность полипептида отличается на вплоть до 8 аминокислотных остатков от SEQ ID NO: I.
9. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, в котором остатки полиэтиленгликоля присоединены к, по меньшей мере, одному остатку лизина и к N-концевой аминогруппе.
10. Полипептидный конъюгат по п.1, в котором полипептид содержит замены K16R, K34R, K40R, Т105К и S159K относительно аминокислотной последовательности hG-CSF, приведенной в SEQ ID NO: 1, и который содержит 2-6 остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 1000-10000 Да, присоединенных к связующим группам полипептида.
11. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, который гликозилирован по Т 133.
12. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, содержащий 3-5, 4-6,
3-4, 4-5 или 5-6 присоединенных остатков полиэтиленгликоля.
13. Полипептидный конъюгат по п.12, содержащий 3-6 присоединенных остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 5000-6000 Да.
14. Полипептидный конъюгат по п.13, содержащий 4-5 присоединенных остатков полиэтиленгликоля примерно в 5 кДа.
15. Полипептидный конъюгат по п.13, содержащий 3 присоединенных остатка полиэтиленгликоля примерно в 5 кДа.
16. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, обладающий биоактивностью in vitro в диапазоне около 2-30% от биоактивности неконъюгированного hG-CSF при определении методом определения активности G-CSF in vitro, описанным в настоящем изобретении.
Приоритет по пунктам:
11.07.2001 - пп.5-9, 11 и 16;
22.03.2002 - пп.13-14;
08.05.2002 - пп.1, 10, 12 и 15;
10.07.2002 - пп.2-4.
RU2004103866/13A 2001-07-11 2002-07-10 Конъюгаты g-csf RU2307126C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/904,196 US6555660B2 (en) 2000-01-10 2001-07-11 G-CSF conjugates
US09/904,196 2001-07-11
DKPA200200447 2002-03-22
DKPA200200447 2002-03-22
DKPA200200708 2002-05-08

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2004103866A RU2004103866A (ru) 2005-06-20
RU2307126C2 true RU2307126C2 (ru) 2007-09-27

Family

ID=35835635

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004103866/13A RU2307126C2 (ru) 2001-07-11 2002-07-10 Конъюгаты g-csf

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2307126C2 (ru)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DE HAAN G et. al. Efficient mobilization of haematopoietic progenitors after a single injection of pegylated recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in mouse strains with distinct marrow-cell pool sizes. Br J Haematol. 2000 Sep; 110(3):638-46.. *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2004103866A (ru) 2005-06-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0401384B1 (en) Chemically modified granulocyte colony stimulating factor
AU634343B2 (en) Modified hil-6
EP1284987B1 (en) Methods for refolding proteins containing free cysteine residues
CN101257926A (zh) G-csf部分与聚合物的轭合物
JP2010500390A (ja) Ｇ−ｃｓｆ部位特異的モノコンジュゲート
EP2399930A1 (en) N-terminally monopegylated polypeptides and process for their preparation
EP1270642A1 (en) Branched polyalkylene glycols
CA2460489A1 (en) Pegylated and diglycosylated erythropoietin
CA2395713A1 (en) G-csf conjugates
AU2001274853A1 (en) Methods for refolding proteins containing free cysteine residues
WO2009019314A1 (en) Transferrin variants and conjugates
KR100694994B1 (ko) 사람 과립구 콜로니 형성인자 동종체
JP2008506704A (ja) Ｇｍ−ｃｓｆ成分およびポリマーの複合体
JP4782834B2 (ja) 顆粒球コロニー刺激因子（ｇ−ｃｓｆ）の変異型およびその化学的に抱合されたポリペプチド
US20060247422A1 (en) Chemically modified G-CSF
RU2307126C2 (ru) Конъюгаты g-csf
AU2021327861A1 (en) Modified il-18 polypeptides and uses thereof
ATE443079T1 (de) Immunogene glycopeptide. screening- und herstellungsverfahren sowie verwendungen
Molineux Pegfilgrastim—designing an improved form of rmetHuG-CSF
CA2311684C (en) Chemically-modified g-csf
AU2004235682B2 (en) N-Terminally chemically modified protein compositions and methods
AU741659B2 (en) N-terminally chemically modified protein compositions and methods
JPWO2020158690A1 (ja) 肝細胞増殖因子又はその活性断片のポリエチレングリコール修飾体

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20100711

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20110620

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140711