RU2290899C1 - Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology - Google Patents

Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology Download PDF

Info

Publication number
RU2290899C1
RU2290899C1 RU2005113911/15A RU2005113911A RU2290899C1 RU 2290899 C1 RU2290899 C1 RU 2290899C1 RU 2005113911/15 A RU2005113911/15 A RU 2005113911/15A RU 2005113911 A RU2005113911 A RU 2005113911A RU 2290899 C1 RU2290899 C1 RU 2290899C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
biomaterial
solution
treatment
sterilized
sodium
Prior art date
Application number
RU2005113911/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2005113911A (en
Inventor
Ирина Александровна Маклакова (RU)
Ирина Александровна Маклакова
Тать на Марковна Гаврилова (RU)
Татьяна Марковна Гаврилова
Original Assignee
Ирина Александровна Маклакова
Татьяна Марковна Гаврилова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ирина Александровна Маклакова, Татьяна Марковна Гаврилова filed Critical Ирина Александровна Маклакова
Priority to RU2005113911/15A priority Critical patent/RU2290899C1/en
Publication of RU2005113911A publication Critical patent/RU2005113911A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2290899C1 publication Critical patent/RU2290899C1/en

Links

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: method involves mechanically cleaning biological connective tissue and treating animal or human connective tissue with solutions. After mechanical cleaning, the animal or human connective tissue is hold in 3-6% hydrogen peroxide solution 2-4 h long, frozen at temperature below 0°C in wet state, thawed and treated with alkaline detergent solution of pH 7.0-14.0. Then, it is treated with 3-6% hydrogen peroxide solution 2-4 h long , heat treated at 40-90°C, shaped as required and sterilized.
EFFECT: improved quality of allergen-free biomaterial.
14 cl

Description

Изобретение относится к медицине, а более конкретно к офтальмологии, и может быть использовано при изготовлении материалов для оперативного лечения миопии, для пластики дефектов соединительной ткани; при изготовлении дренажей для оперативного лечения глаукомы; для получения растворов коллагена и изготовления глазных коллагеновых покрытий, протектора роговицы, композиционных материалов для интраокулярных и контактных линз, для укрепления склеры.The invention relates to medicine, and more particularly to ophthalmology, and can be used in the manufacture of materials for surgical treatment of myopia, for plastic repair of defects of connective tissue; in the manufacture of drains for the surgical treatment of glaucoma; to obtain collagen solutions and the manufacture of ocular collagen coatings, cornea protector, composite materials for intraocular and contact lenses, to strengthen the sclera.

Известен способ получения биоматериала для использования в офтальмологии путем обработки соединительной ткани животных или человека, которую сначала механически очищают, а затем последовательно обрабатывают растворами перекиси водорода, мочевины, хлорида натрия, смеси хлороформа и этилового спирта, отмывают водой очищенной, высушивают, лиофилизируют и стерилизуют дозой от 1,7 до 2,5 Мрад (Пат. РФ №2234289 от 20.08.2004 г.).A known method of producing biomaterial for use in ophthalmology by treating the connective tissue of animals or humans, which is first mechanically cleaned and then sequentially treated with solutions of hydrogen peroxide, urea, sodium chloride, a mixture of chloroform and ethyl alcohol, washed with purified water, dried, lyophilized and sterilized with a dose from 1.7 to 2.5 Mrad (Pat. RF No. 2234289 of 08.20.2004).

Недостатками данного способа является то, что мочевина, используемая для обработки соединительной ткани по описанному способу, является хорошим растворителем коллагена и частично разрушает структуру ткани, что ухудшает ее механические свойства. Кроме этого в описанном способе используют обработку хлороформом, который является сильным аллергеном.The disadvantages of this method is that the urea used to treat connective tissue according to the described method is a good collagen solvent and partially destroys the structure of the tissue, which impairs its mechanical properties. In addition, the described method uses chloroform treatment, which is a strong allergen.

Задачей изобретения является создание простого, эффективного и безопасного способа получения биоматериала для использования в офтальмологии, обладающего высокой биосовместимостью.The objective of the invention is to provide a simple, effective and safe way to obtain biomaterial for use in ophthalmology with high biocompatibility.

Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является получение биосовместимого материала, максимально освобожденного от аллергенов, который может быть использован для изготовления медицинских изделий. И что также немаловажно, упрощение технологии изготовления биоматериала.The technical result achieved by using the invention is to obtain a biocompatible material, the maximum free from allergens, which can be used for the manufacture of medical devices. And what is also important, the simplification of the technology of manufacturing biomaterial.

Технический результат достигается тем, что после механической обработки соединительную ткань животных или человека выдерживают в 3-6% растворе перекиси водорода, замораживают при температуре ниже 0°С, обрабатывают щелочным раствором детергента с рН 7,0-14,0, а затем 3-6% раствором перекиси водорода или борной кислоты, отмывают водой очищенной, подвергают тепловой обработке при 40-90°С, придают необходимую форму и стерилизуют.The technical result is achieved by the fact that after mechanical treatment, the connective tissue of animals or humans is kept in a 3-6% hydrogen peroxide solution, frozen at a temperature below 0 ° C, treated with an alkaline detergent solution with a pH of 7.0-14.0, and then 3- 6% solution of hydrogen peroxide or boric acid, washed with purified water, subjected to heat treatment at 40-90 ° C, give the necessary shape and sterilized.

В качестве исходного сырья используют соединительную ткань животных или человека, например, перикард, твердая мозговая оболочка, перитонеальная оболочка, кожа, интерстициальная оболочка тонкого кишечника, базальные мембраны (капсула почек, плацента), склеральная оболочка глаза, роговица глаза и др.The raw materials used are the connective tissue of animals or humans, for example, pericardium, dura mater, peritoneal membrane, skin, interstitial membrane of the small intestine, basement membranes (kidney capsule, placenta), scleral membrane of the eye, cornea of the eye, etc.

Обработку 3-6% раствором перекиси водорода осуществляют с целью разрушения тканевых пигментов, липидных структур и обеззараживания. Замораживание во влажном виде приводит к разрушению клеточных элементов, в результате чего они становятся доступными для удаления на последующих стадиях обработки.Treatment with a 3-6% hydrogen peroxide solution is carried out in order to destroy tissue pigments, lipid structures and disinfection. Freezing in a wet form leads to the destruction of cellular elements, as a result of which they become available for removal at subsequent stages of processing.

В качестве щелочного раствора детергента может быть использован 0,01-5,0% раствор этилендиаминтетраацетата натрия и/или додецилсульфата натрия в 0,1-10,0% растворе бикарбоната натрия, и/или тетрабората натрия, и/или аммиака, и/или едкого натрия, и/или спирта этилового. Щелочной раствор детергента обладает двойным действием. Щелочная среда способствует разрыхлению ткани, омылению липидных компонентов, а детергент, являясь поверхностно-активным веществом, способствует переходу в раствор и удалению неструктурообразующих компонентов соединительной ткани белковой и липидной природы. Обработка ткани при температуре 25-40°С ускоряет процесс отмывки.As an alkaline solution of the detergent, a 0.01-5.0% solution of sodium ethylene diamine tetraacetate and / or sodium dodecyl sulfate in a 0.1-10.0% solution of sodium bicarbonate and / or sodium tetraborate and / or ammonia, and / or sodium hydroxide and / or ethyl alcohol. Alkaline detergent solution has a double effect. The alkaline medium promotes loosening of the tissue, saponification of lipid components, and the detergent, being a surface-active substance, promotes the transition into solution and the removal of non-structure-forming components of connective tissue of protein and lipid nature. Processing the fabric at a temperature of 25-40 ° C speeds up the washing process.

Последующую обработку 3-6% раствором перекиси водорода или борной кислоты проводят для полной нейтрализации остатков щелочи, а также для обеззараживания.Subsequent treatment with a 3-6% solution of hydrogen peroxide or boric acid is carried out to completely neutralize alkali residues, as well as for disinfection.

Все стадии обработки соединительной ткани растворами могут быть ускорены путем постоянного перемешивания, а также путем одновременного воздействия ультразвуком в кавитационном режиме, что особенно важно при обработке более плотной соединительной ткани, такой, как твердая мозговая оболочки.All stages of treatment of connective tissue with solutions can be accelerated by constant mixing, as well as by simultaneous exposure to ultrasound in the cavitation mode, which is especially important when treating a denser connective tissue, such as dura mater.

Последующую тепловую обработку соединительной ткани проводят при 40-90°С. При этом коллагеновые волокна сокращаются и ткань уплотняется, что улучшает ее физико-механические свойства. Это улучшает каркасные свойства имплантатов из такой ткани, а также облегчает хирургу введение имплантата в сформированную полость при оперативном вмешательстве, например при операции склеропластики. Температура ниже 40°С не дает эффекта сокращения и уплотнения ткани. При температуре выше 90°С соединительная ткань элементарно сваривается, превращаясь в бесформенный конгломерат.Subsequent heat treatment of the connective tissue is carried out at 40-90 ° C. In this case, collagen fibers are reduced and the tissue becomes denser, which improves its physical and mechanical properties. This improves the skeleton properties of implants made of such tissue, and also facilitates the surgeon's introduction of the implant into the formed cavity during surgery, for example, during scleroplasty surgery. A temperature below 40 ° C does not give the effect of contraction and densification of the fabric. At temperatures above 90 ° C, the connective tissue is elementarily welded, turning into a shapeless conglomerate.

Биоматериалу может быть придана форма диска, или эллипса, или многоугольника с закругленными углами, например прямоугольника или вытянутой трапеции, напоминающей лепесток. В биоматериале могут быть сформированы сквозные отверстия диаметром 0,3-3,0 мм, а также по периметру могут быть сформированы насечки. Сквозные отверстия и насечки по периметру имплантата облегчают проникновение фибробластов ткани реципиента в имплантированный биоматериал и тем самым ускоряют процесс сращения имплантата с собственной тканью реципиента.A biomaterial can be shaped like a disk, or an ellipse, or a rounded polygon, such as a rectangle or an elongated trapezoid that resembles a petal. Through-holes with a diameter of 0.3-3.0 mm can be formed in the biomaterial, and notches can also be formed around the perimeter. Through holes and notches along the perimeter of the implant facilitate the penetration of fibroblasts of the recipient tissue into the implanted biomaterial and thereby accelerate the process of implant fusion with the recipient's own tissue.

Биоматериал перед стерилизацией может быть дополнительно насыщен гликозаминогликанами и/или биологически активными веществами и/или лекарственными средствами. Гликозаминогликаны дополнительно структурируют коллагеновый каркас стромы соединительной ткани, улучшая ее физико-механические свойства. К классу гликозаминогликанов относятся гиалуроновая кислота и ее соли, хондроитин- и кератансульфат, дерматансульфат, гепарин и гепарансульфат. В качестве биологически активных веществ могут быть использованы антиоксиданты, стероиды, гормоны, витамины, пептиды и полипептиды, влияющие на нормализацию обменных и регенеративных процессов в зоне вмешательства. В качестве лекарственных средств может быть использован широкий спектр препаратов, например антибиотики, анестетики и др.Before sterilization, the biomaterial may be further saturated with glycosaminoglycans and / or biologically active substances and / or drugs. Glycosaminoglycans additionally structure the collagen framework of the stroma of the connective tissue, improving its physical and mechanical properties. The class of glycosaminoglycans includes hyaluronic acid and its salts, chondroitin and keratan sulfate, dermatan sulfate, heparin and heparan sulfate. As biologically active substances can be used antioxidants, steroids, hormones, vitamins, peptides and polypeptides that affect the normalization of metabolic and regenerative processes in the intervention zone. As medicines, a wide range of drugs can be used, for example, antibiotics, anesthetics, etc.

Стерилизация может быть осуществлена с помощью ионизирующего излучения.Sterilization can be carried out using ionizing radiation.

Другим вариантом стерилизации является обезвоживание в этиловом спирте. При этом конечная концентрация этилового спирта не может быть менее 70°, так как раствор меньшей концентрации не обладает стерилизующим действием.Another sterilization option is dehydration in ethanol. In this case, the final concentration of ethyl alcohol cannot be less than 70 °, since a solution of a lower concentration does not have a sterilizing effect.

Следующим вариантом стерилизации является обезвоживание биоматериала с последующим облучением ионизирующим излучением.The next sterilization option is dehydration of the biomaterial followed by irradiation with ionizing radiation.

Биоматериал получают следующим образом.The biomaterial is prepared as follows.

Исходное сырье тщательно механически очищают от остатков окружающих тканей, крови и промывают под проточной водой.The feedstock is thoroughly mechanically cleaned of the remnants of surrounding tissues, blood and washed under running water.

Затем ткань помещают в 3-6% раствор перекиси водорода на 2-4 часа для разрушения тканевых пигментов и обеззараживания, после чего промывают под проточной водой и замораживают во влажном виде при температуре ниже 0°С. При этом клеточные элементы разрушаются и становятся доступными для удаления на последующих стадиях обработки.Then the tissue is placed in a 3-6% hydrogen peroxide solution for 2-4 hours to destroy tissue pigments and disinfection, after which it is washed under running water and frozen in wet form at a temperature below 0 ° C. In this case, the cellular elements are destroyed and become available for removal at subsequent stages of processing.

Ткань оттаивают, промывая проточной водой при температуре не выше 40°С. Затем помещают в щелочной раствор детергента с рН 7,0-14,0 и выдержывают в течение 8-24 часов, периодически встряхивая. При этом происходит разрыхление ткани, липидные и неструктурные белковые компоненты взаимодействуют со щелочью и удаляются с помощью детергента.The fabric is thawed, washing with running water at a temperature not exceeding 40 ° C. Then placed in an alkaline solution of detergent with a pH of 7.0-14.0 and incubated for 8-24 hours, periodically shaking. In this case, tissue loosening occurs, lipid and non-structural protein components interact with alkali and are removed using a detergent.

Затем ткань промывают водой от щелочного раствора, контролируя значение рН промывных вод, и заливают 3-6% раствором перекиси водорода или борной кислоты на 2-4 часа для полной нейтрализации остатков щелочи, а также для обеззараживания. После этого ткань отмывают водой очищенной и подвергают тепловой обработке при 40-90°С.Then the fabric is washed with water from an alkaline solution, controlling the pH value of the wash water, and pour 3-6% solution of hydrogen peroxide or boric acid for 2-4 hours to completely neutralize the alkali residues, as well as for disinfection. After that, the fabric is washed with purified water and subjected to heat treatment at 40-90 ° C.

Из обработанной ткани формируют имплантаты требуемой формы, упаковывают и стерилизуют одним из указанных способов, например с помощью ионизирующего излучения.Implants of the required shape are formed from the treated tissue, packaged and sterilized in one of these ways, for example using ionizing radiation.

Полученный указанным способом биоматериал был изучен in vitro и in vivo. Экстракт из биоматериала не вызывал изменения в морфологии и количестве клеток в культуре фибробластов мышей. Токсического действия выявлено не было.The biomaterial obtained by this method was studied in vitro and in vivo. The extract from the biomaterial did not cause changes in the morphology and number of cells in the mouse fibroblast culture. No toxic effects have been identified.

Сенсибилизирующего действия на 5 белых крысах не было выявлено. При подкожном введении биоматериала, полученного по предложенному способу, и провокационной кожной пробе экстракта из биоматериала реакция была отрицательная, дегрануляции тучных клеток не наблюдалось.Sensitizing effects on 5 white rats were not detected. With subcutaneous administration of the biomaterial obtained by the proposed method and a provocative skin test of the extract from the biomaterial, the reaction was negative, mast cell degranulation was not observed.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать биоматериал, обладающий высокой биосовместимостью и максимально освобожденный от аллергенов.Thus, the proposed method allows to obtain biomaterial with high biocompatibility and the maximum free from allergens.

Изобретение поясняется примерами.The invention is illustrated by examples.

Пример 1. Больная А. Диагноз: миопия высокой степени. Проведена операция меридиональной склеропластики с использованием биоматериала из перикарда крупного рогатого скота, обработанного по предложенному способу с использованием щелочного раствора детергента с рН 14 следующего состава, мас.%: едкий натрий - 0,1%, спирт этиловый - 5%, додецилсульфат натрия - 3%. Затем перикард отмывали водой проточной, обрабатывали 3% раствором борной кислоты до полной нейтрализации остатков щелочи, отмывали водой очищенной, подвергали тепловой обработке при температуре 45°С и формировали имплантаты в форме прямоугольников с закругленными углами длиной 2 см и шириной 1 см. После этого имплантаты обезвоживали в растворе этилового спирта восходящей концентрации до 50°. Стерилизацию проводили с помощью ионизирующего излучения.Example 1. Patient A. Diagnosis: high myopia. The operation of meridional scleroplasty using biomaterial from cattle pericardium, processed according to the proposed method using an alkaline detergent solution with a pH of 14 of the following composition, wt.%: Sodium hydroxide - 0.1%, ethyl alcohol - 5%, sodium dodecyl sulfate - 3 % Then, the pericardium was washed with running water, treated with a 3% solution of boric acid until the alkali residues were completely neutralized, washed with purified water, subjected to heat treatment at a temperature of 45 ° C and the implants were formed in the form of rectangles with rounded corners 2 cm long and 1 cm wide. After that, the implants dehydrated in a solution of ethyl alcohol of an ascending concentration up to 50 °. Sterilization was carried out using ionizing radiation.

В ходе операции в сформированные каналы между склерой и теноновой оболочкой было имплантировано по 4 имплантата в каждый глаз. Ранний послеоперационный период без осложнений. Аллергической реакции не наблюдалось, что свидетельствует о высокой биосовместимости биоматериала. Срок наблюдения 6 месяцев. Увеличение величины передне-заднего отрезка глаза не выявлено.During the operation, 4 implants were implanted into the formed channels between the sclera and the tenon membrane in each eye. An early postoperative period without complications. An allergic reaction was not observed, which indicates a high biocompatibility of the biomaterial. The observation period is 6 months. An increase in the size of the anteroposterior segment of the eye was not detected.

Пример 2. Больной К. Диагноз: миопия средней степени, осложненная центральной хориоретинальной дистрофией. Проведена операция склеропластики с использованием имплантатов из перикарда крупного рогатого скота, полученного по предложенному способу, в виде дисков диаметром 14 мм. В качестве щелочного раствора детергента использовали раствор с рН 7,0 следующего состава, в мас.%: натрия бикарбонат - 10%, этилендиаминтетраацетат натрия - 5%. Перед стерилизацией имплантат насыщен 1% раствором карнозина. Способ стерилизации - с помощью ионизирующего излучения. В ходе операции с помощью шпателя-распатора у заднего полюса глаза формировали карман между теноновой оболочкой и склерой, в который помещали имплантат, покрывая им задний полюс глазного яблока в проекции макулярной и парамакулярной области. В раннем послерперационном периоде осложнений и аллергических реакций не наблюдалось. Острота зрения с оптимальной коррекцией не снижена по сравнению с дооперационным уровнем. Срок наблюдения 8 месяцев.Example 2. Patient K. Diagnosis: moderate myopia, complicated by central chorioretinal dystrophy. The operation of scleroplasty using implants from cattle pericardium obtained by the proposed method in the form of disks with a diameter of 14 mm As an alkaline detergent solution, a solution with a pH of 7.0 of the following composition was used, in wt.%: Sodium bicarbonate - 10%, sodium ethylene diamine tetraacetate - 5%. Before sterilization, the implant is saturated with 1% carnosine solution. Sterilization method - using ionizing radiation. During the operation, using a spatula-raspator at the posterior pole of the eye, a pocket was formed between the tenon membrane and the sclera, in which the implant was placed, covering the posterior pole of the eyeball with them in the projection of the macular and paramacular region. In the early post-operative period, complications and allergic reactions were not observed. Visual acuity with optimal correction is not reduced compared with the preoperative level. The observation period is 8 months.

По предложенному способу было получено 60 имплантатов, которые были использованы в клинической практике при выполнении операций меридиональной склеропластики для лечения прогрессирующей миопии у взрослых и детей, а также при выполнении операций по поводу лечения хориоретинальных макулодистрофий различного генеза. Во всех случаях осложнений в послеоперационном периоде, связанных с аллергическими реакциями, не отмечалось. Таким образом, предложен эффективный способ получения биоматериала для офтальмологии, обладающего высокой биосовместимостью и низкой аллергенностью.According to the proposed method, 60 implants were obtained, which were used in clinical practice when performing operations of meridional scleroplasty for the treatment of progressive myopia in adults and children, as well as when performing operations for the treatment of chorioretinal macular degeneration of various origins. In all cases of complications in the postoperative period associated with allergic reactions, was not noted. Thus, an effective method for producing biomaterial for ophthalmology with high biocompatibility and low allergenicity has been proposed.

Пример 3. Хрящ трахеи крупного рогатого скота механически очищали, нарезали на фрагменты длиной не более 5 см, выдерживали в 3% растворе перекиси водорода 3 часа, промывали водой, замораживали во влажном виде, оттаивали под проточной водой и обрабатывали щелочным раствором детергента при температуре 40°С следующего состава, мас.%: этилендиаминтетраацетат натрия - 0,01%, едкий натрий - 1,0%, бикарбонат натрия - 3%, тетраборат натрия - 5%. От раствора детергента хрящ промывали водой, а затем обрабатывали 6% раствором перекиси водорода в течение 4 часов при постоянном перемешивании. Далее соединительную ткань промывали водой и подвергали тепловой обработке при температуре 60°С. Из обработанных фрагментов хряща формировали полоски длиной 5-6 мм, шириной 2-3 мм, толщиной 0,5-1,0 мм и помещали в 2% раствор гликозаминогликанов до насыщения. Затем полоски хряща лиофильно высушивали и облучали ионизирующим излучением. Имплантаты из биоматериала, полученного по данному способу, используют в качестве дренажей при выполнении антиглаукоматозных операций.Example 3. The cartilage of the trachea of cattle was mechanically cleaned, cut into fragments no more than 5 cm long, kept in a 3% hydrogen peroxide solution for 3 hours, washed with water, frozen in wet form, thawed under running water and treated with an alkaline detergent solution at a temperature of 40 ° C of the following composition, wt.%: Sodium ethylenediaminetetraacetate - 0.01%, sodium hydroxide - 1.0%, sodium bicarbonate - 3%, sodium tetraborate - 5%. The cartilage was washed with water from the detergent solution and then treated with a 6% hydrogen peroxide solution for 4 hours with constant stirring. Next, the connective tissue was washed with water and subjected to heat treatment at a temperature of 60 ° C. Strips of 5-6 mm long, 2-3 mm wide, 0.5-1.0 mm thick were formed from the processed cartilage fragments and placed in a 2% glycosaminoglycan solution to saturation. Then the cartilage strips were freeze-dried and irradiated with ionizing radiation. Implants from biomaterial obtained by this method are used as drains when performing anti-glaucomatous operations.

Пример 4. Твердую мозговую оболочку человека очищали механически, нарезали на фрагменты площадью приблизительно 30-60 см2, выдерживали в 6% растворе перекиси водорода в течение 4 часов, промывали водой и замораживали во влажном виде при температуре - 18°С. Для оттаивания фрагменты соединительной ткани промывали теплой проточной водой и обрабатывали щелочным раствором детергента следующего состава, мас.%: додецилсульфат натрия - 5%, едкий натрий - 6%, спирт этиловый - 4%. Затем ткань промывали водой с последующей обработкой 6% раствором борной кислоты в течение 4 часов. Тепловую обработку ткани проводили при температуре 40°С. Из фрагментов обработанной ткани формировали имплантаты и помещали для насыщения последовательно в раствор анестетика лидокаина терапевтической концентрации и в раствор анаболического стероида. Затем имплантаты из биоматериала помещали в герметичную упаковку и стерилизовали с помощью ионизирующего излучения. Полученные имплантаты используют для проведения склеропластических операций и эписклерального пломбирования.Example 4. The dura of the person was mechanically cleaned, cut into fragments with an area of approximately 30-60 cm 2 , kept in a 6% hydrogen peroxide solution for 4 hours, washed with water and frozen in wet form at a temperature of -18 ° C. For thawing, connective tissue fragments were washed with warm running water and treated with an alkaline detergent solution of the following composition, wt.%: Sodium dodecyl sulfate - 5%, sodium hydroxide - 6%, ethyl alcohol - 4%. Then the fabric was washed with water, followed by treatment with a 6% solution of boric acid for 4 hours. The heat treatment of the tissue was carried out at a temperature of 40 ° C. Implants were formed from fragments of the treated tissue and placed for saturation in succession in a lidocaine anesthetic solution of therapeutic concentration and in an anabolic steroid solution. Then the biomaterial implants were placed in a sealed package and sterilized using ionizing radiation. The obtained implants are used for scleroplastic surgery and episcleral filling.

Пример 5. Амнеотическую мембрану человека выдерживали в 3% растворе перекиси водорода в течение 2 часов, промывали водой и обрабатывали щелочным раствором детергента следующего состава, мас.%: додецилсульфат натрия - 0,01%, аммиак - 0,05%, спирт этиловый - 0,05%. От раствора детергента соединительную ткань промывали водой и заливали 3% раствором перекиси водорода на 2 часа. Тепловую обработку ткани проводили при 40°С. Обработанную ткань насыщали в растворе гликозаминогликанов и гентамицина следующего состава, мас.%: гликозаминогликаны - 2%, гентамицин - 0,1%. После этого выкраивали фрагменты в форме эллипса и стерилизовали с помощью ионизирующего излучения. Полученный биоматериал используют для пластики конъюнктивы век.Example 5. The human amneotic membrane was kept in a 3% hydrogen peroxide solution for 2 hours, washed with water and treated with an alkaline solution of detergent of the following composition, wt.%: Sodium dodecyl sulfate - 0.01%, ammonia - 0.05%, ethyl alcohol - 0.05%. From the detergent solution, the connective tissue was washed with water and poured with a 3% hydrogen peroxide solution for 2 hours. The heat treatment of the tissue was carried out at 40 ° C. The treated tissue was saturated in a solution of glycosaminoglycans and gentamicin of the following composition, wt.%: Glycosaminoglycans - 2%, gentamicin - 0.1%. After that, fragments in the form of an ellipse were cut out and sterilized using ionizing radiation. The resulting biomaterial is used for plasty of the conjunctiva of the eyelids.

Пример 6. Склеральную оболочку глаза крупного рогатого скота после механической очистки выдерживали в 3% растворе перекиси водорода 2 часа, промывали водой и замораживали во влажном виде, затем оттаивали, промывая проточной водой и обрабатывали при комнатной температуре щелочным раствором детергента следующего состава: этилендиаминтетраацетат натрия - 0,005%, додецилсульфат натрия - 0,005%, бикарбонат натрия - 3%, тетраборат натрия - 5%, аммиак - 0,5%, едкий натрий - 0,5%, спирт этиловый - 1%. После этого ткань промывали водой и обрабатывали 6% раствором борной кислоты 4 часа при постоянном перемешивании. Обработанную ткань подвергали нагреву при 55°С и помещали в 2% раствор гликозаминогликанов, содержащий 0,1% биологически активного вещества - антиоксиданта карнозина. Затем формировали имплантаты, лиофильно высушивали и облучали ионизирующим излучением. Имплантаты из биоматериала, полученного по данному способу, используют для операции склеропластики при хориоретинальной макулодистрофии.Example 6. The scleral membrane of the eye of cattle after mechanical cleaning was kept in a 3% hydrogen peroxide solution for 2 hours, washed with water and frozen in wet form, then thawed, washed with running water and treated at room temperature with an alkaline solution of a detergent of the following composition: sodium ethylene diamine tetraacetate - 0.005%, sodium dodecyl sulfate - 0.005%, sodium bicarbonate - 3%, sodium tetraborate - 5%, ammonia - 0.5%, sodium hydroxide - 0.5%, ethyl alcohol - 1%. After that, the fabric was washed with water and treated with a 6% solution of boric acid for 4 hours with constant stirring. The treated tissue was heated at 55 ° C and placed in a 2% glycosaminoglycan solution containing 0.1% biologically active substance - carnosine antioxidant. Then implants were formed, freeze-dried and irradiated with ionizing radiation. Implants from biomaterial obtained by this method are used for scleroplasty surgery for chorioretinal macular degeneration.

Пример 7. Перикард крупного рогатого скота после механической очистки помещали в 6% раствор перекиси водорода на 2 часа, промывали водой и замораживали во влажном виде, затем оттаивали, промывая теплой проточной водой и обрабатывали при комнатной температуре щелочным раствором детергента следующего состава: этилендиаминтетраацетат натрия - 0,5%, додецилсульфат натрия - 0,5%, бикарбонат натрия - 3%, едкий натрий - 0,5%, спирт этиловый - 5%. После этого ткань промывали водой и обрабатывали 6% раствором перекиси водорода 4 часа при постоянном перемешивании, отмывали водой очищенной, подвергали тепловой обработке при 45°С и придавали форму квадратов со стороной от 1,5 до 2,5 см с закругленными углами. Затем фрагменты обработанной ткани обезвоживали в растворах этилового спирта восходящей концентрации от 30° до 70°, помещали в стерильные флаконы с 70° этиловым спиртом и укупоривали. Биоматериал, полученный по данному способу, применяется для пластики склеральных дефектов.Example 7. The cattle pericardium after mechanical cleaning was placed in a 6% hydrogen peroxide solution for 2 hours, washed with water and frozen in wet form, then thawed, washed with warm running water and treated at room temperature with an alkaline detergent solution of the following composition: sodium ethylene diamine tetraacetate - 0.5%, sodium dodecyl sulfate - 0.5%, sodium bicarbonate - 3%, sodium hydroxide - 0.5%, ethyl alcohol - 5%. After that, the fabric was washed with water and treated with a 6% hydrogen peroxide solution for 4 hours with constant stirring, washed with purified water, subjected to heat treatment at 45 ° C and shaped into squares with sides from 1.5 to 2.5 cm with rounded corners. Then, fragments of the treated tissue were dehydrated in solutions of ethyl alcohol of an ascending concentration from 30 ° to 70 °, placed in sterile bottles with 70 ° ethyl alcohol, and sealed. The biomaterial obtained by this method is used for plastic scleral defects.

Claims (14)

1. Способ получения биоматериала для использования в офтальмологии, включающий механическую обработку соединительной ткани животных или человека, обработку раствором перекиси водорода, водой очищенной, и стерилизацию, отличающийся тем, что после механической обработки соединительную ткань животных или человека выдерживают в 3-6%-ном растворе перекиси водорода 2-4 ч, промывают водой и замораживают во влажном виде при температуре ниже 0°С, затем оттаивают, промывая проточной водой не выше 40°С, обрабатывают щелочным раствором детергента с рН 7,0-14,0, а затем 3-6%-ным раствором перекиси водорода или борной кислоты в течение 2-4 ч, отмывают водой очищенной, подвергают тепловой обработке при 40-90°С, придают необходимую форму и стерилизуют.1. A method of obtaining biomaterial for use in ophthalmology, including mechanical treatment of connective tissue of animals or humans, treatment with a solution of hydrogen peroxide, purified water, and sterilization, characterized in that after mechanical processing, the connective tissue of animals or humans is kept in 3-6% a solution of hydrogen peroxide for 2-4 hours, washed with water and frozen in a wet form at a temperature below 0 ° C, then thawed, washing with running water not higher than 40 ° C, treated with an alkaline solution of detergent with pH 7.0-14.0, and then with a 3-6% solution of hydrogen peroxide or boric acid for 2-4 hours, washed with purified water, subjected to heat treatment at 40-90 ° C, give the necessary shape and sterilized. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве щелочного раствора детергента используют 0,01-5,0%-ный раствор этилендиаминтетраацетата натрия и/или додецилсульфата натрия в 0,1-10,0%-ном растворе бикарбоната натрия, и/или тетрабората натрия, и/или аммиака, и/или едкого натрия, и/или спирта этилового.2. The method according to claim 1, characterized in that a 0.01-5.0% solution of sodium ethylene diamine tetraacetate and / or sodium dodecyl sulfate in a 0.1-10.0% sodium bicarbonate solution is used as an alkaline detergent solution and / or sodium tetraborate and / or ammonia and / or sodium hydroxide and / or ethyl alcohol. 3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что обработку щелочным раствором детергента проводят при температуре 25-40°С.3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that the treatment with an alkaline solution of detergent is carried out at a temperature of 25-40 ° C. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработку растворами проводят при постоянном перемешивании.4. The method according to claim 1, characterized in that the treatment with solutions is carried out with constant stirring. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработку растворами проводят при воздействии ультразвука в кавитационном режиме.5. The method according to claim 1, characterized in that the treatment with solutions is carried out under the influence of ultrasound in the cavitation mode. 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что биоматериалу придают форму диска, или эллипса, или многоугольника с закругленными углами.6. The method according to claim 1, characterized in that the biomaterial is shaped like a disk, or an ellipse, or a polygon with rounded corners. 7. Способ по п.1 или 6, отличающийся тем, что в биоматериале формируют сквозные отверстия диаметром 0,3-3,0 мм.7. The method according to claim 1 or 6, characterized in that through holes with a diameter of 0.3-3.0 mm are formed in the biomaterial. 8. Способ по любому из п.1, или 6, или 7, отличающийся тем, что по периметру биоматериала формируют насечки.8. The method according to any one of claim 1, or 6, or 7, characterized in that notches are formed along the perimeter of the biomaterial. 9. Способ по п.1, отличающийся тем, что перед стерилизацией биоматериал дополнительно насыщают гликозаминогликанами, и/или биологически активными веществами, и/или лекарственными средствами.9. The method according to claim 1, characterized in that before sterilization the biomaterial is additionally saturated with glycosaminoglycans, and / or biologically active substances, and / or drugs. 10. Способ по п.1, отличающийся тем, что стерилизацию осуществляют с помощью ионизирующего излучения.10. The method according to claim 1, characterized in that the sterilization is carried out using ionizing radiation. 11. Способ по п.1 или 10, отличающийся тем, что биоматериал стерилизуют в растворе солей натрия ионизирующим излучением.11. The method according to claim 1 or 10, characterized in that the biomaterial is sterilized in a solution of sodium salts by ionizing radiation. 12. Способ по п.1, отличающийся тем, что биоматериал стерилизуют путем лиофильного высушивания с последующим облучением ионизирующим излучением.12. The method according to claim 1, characterized in that the biomaterial is sterilized by freeze drying, followed by irradiation with ionizing radiation. 13. Способ по п.1, отличающийся тем, что биоматериал стерилизуют путем обезвоживания в растворах этилового спирта восходящей концентрации, при этом конечная концентрация этилового спирта должна быть не ниже 70°.13. The method according to claim 1, characterized in that the biomaterial is sterilized by dehydration in solutions of ethyl alcohol of an ascending concentration, while the final concentration of ethyl alcohol must be at least 70 °. 14. Способ по п.1, отличающийся тем, что биоматериал стерилизуют путем обезвоживания в растворах этилового спирта с последующим облучением ионизирующим излучением.14. The method according to claim 1, characterized in that the biomaterial is sterilized by dehydration in ethanol solutions, followed by irradiation with ionizing radiation.
RU2005113911/15A 2005-05-06 2005-05-06 Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology RU2290899C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005113911/15A RU2290899C1 (en) 2005-05-06 2005-05-06 Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005113911/15A RU2290899C1 (en) 2005-05-06 2005-05-06 Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005113911A RU2005113911A (en) 2006-11-20
RU2290899C1 true RU2290899C1 (en) 2007-01-10

Family

ID=37501629

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005113911/15A RU2290899C1 (en) 2005-05-06 2005-05-06 Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2290899C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2460497C1 (en) * 2010-12-27 2012-09-10 Общество с ограниченной ответственностью предприятие "Репер НН" Scleroplant for reconstructive scleroplasty in case of pathologic states of sclera
RU2642731C1 (en) * 2017-04-13 2018-01-25 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for surgical management of open-angle glaucoma in patients with pseudophakia

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2460497C1 (en) * 2010-12-27 2012-09-10 Общество с ограниченной ответственностью предприятие "Репер НН" Scleroplant for reconstructive scleroplasty in case of pathologic states of sclera
RU2642731C1 (en) * 2017-04-13 2018-01-25 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for surgical management of open-angle glaucoma in patients with pseudophakia

Also Published As

Publication number Publication date
RU2005113911A (en) 2006-11-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108478868B (en) Preparation method and application of injectable allogeneic adipose acellular matrix particles
US20230069580A1 (en) Chemically cross-linked hydrogel and its microspheres, preparation method and application
CN108261565B (en) Hernia patch, preparation method and application thereof in hernia repair
US20210393396A1 (en) Dermal layer for grafting having improved graft survival rate and method for producing same
JP2019508213A (en) Method for producing biocompatible porcine cartilage-derived extracellular matrix membrane capable of controlling biodegradation rate and physical properties, and composition for preventing adhesion comprising the porcine cartilage-derived extracellular matrix as an active ingredient
CN110353856B (en) Biological patch for posterior scleral reinforcement and preparation method thereof
CN104189956A (en) Injectable filling implant and preparation method thereof
RU2290899C1 (en) Method for obtaining scleroplant biomaterial usable in ophthalmology
WO2024032284A1 (en) Sclera reinforcement material, method for preparing same and use thereof
KR101005287B1 (en) Scleral buckling band and method for making the same
CN115463257B (en) Composite reinforced scleral patch and preparation method thereof
CN114904055B (en) Biological sclera repair material and preparation method thereof
CN104984410A (en) Controllable-degradation lacrimal passage suppository and preparation method thereof
RU2721604C1 (en) Method for producing osteoplastic biomaterials from bone tissue
RU2627453C1 (en) Method for homoscleral transplant manufacture
KR101650414B1 (en) Manufacturing method of dental-bone filler including crosslinked hyaluronic acid
CN108210987B (en) Adhesive for cataract operation incision and preparation method thereof
Xu et al. EFFICACY, SAFETY, AND BIODEGRADATION OF A DEGRADABLE SCLERAL BUCKLE OF CHITOSAN–GELATIN POLYMER IN RABBITS
RU2309749C1 (en) Method for treating optic nerve atrophy cases
CN116370698B (en) Hydrogel scleral plug and preparation method and application thereof
RU2290900C1 (en) Method for obtaining modified scleroplant m biomaterial usable in ophthalmology
RU2663283C1 (en) Method for obtaining material for bioplastic operations and material for bioplastic operations
RU2234289C2 (en) Method for preparing biomaterial for application in ophthalmology
RU2385739C1 (en) Method for preparing material for glaucoma surgery
TWI650143B (en) Application of cowhide purified collagen implant as glaucoma surgery aid