RU2281503C1 - Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита - Google Patents

Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита Download PDF

Info

Publication number
RU2281503C1
RU2281503C1 RU2004138196/15A RU2004138196A RU2281503C1 RU 2281503 C1 RU2281503 C1 RU 2281503C1 RU 2004138196/15 A RU2004138196/15 A RU 2004138196/15A RU 2004138196 A RU2004138196 A RU 2004138196A RU 2281503 C1 RU2281503 C1 RU 2281503C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
acute
course
blood serum
chlamydial
chronic
Prior art date
Application number
RU2004138196/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2004138196A (ru
Inventor
Марат Талгатович Азнабаев (RU)
Марат Талгатович Азнабаев
Николай Александрович Никитин (RU)
Николай Александрович Никитин
Владимир Борисович Мальханов (RU)
Владимир Борисович Мальханов
Эльмира Анваровна Латыпова (RU)
Эльмира Анваровна Латыпова
Original Assignee
Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней filed Critical Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней
Priority to RU2004138196/15A priority Critical patent/RU2281503C1/ru
Publication of RU2004138196A publication Critical patent/RU2004138196A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2281503C1 publication Critical patent/RU2281503C1/ru

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии Определяют суммарный уровень конечных метаболитов оксида азота (NO2-/NO3-) в сыворотке крови больных хламидийным конъюнктивитом. При концентрации NO2-/NO3- выше 50 мкмоль/л диагностируют острую форму хламидийного конъюнктивита. Способ обеспечивает хорошую воспроизводимость.

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, и может быть использовано с целью дифференциальной диагностики острой и хронической формы течения хламидийного конъюнктивита.
Хламидийные конъюнктивиты (ХК) составляют значительную долю всех конъюнктивитов, и, как правило, характеризуются длительным рецидивирующим течением и устойчивостью к проводимой терапии. Учитывая, что распространенность хламидийных поражений глаз в последнее время имеет тенденцию к росту, проблема поиска эффективного метода диагностики с целью уточнения стадии заболевания имеет большое значение в отношении выбора тактики лечения.
Известен способ диагностики хронического урогенитального хламидиоза, включающий изучение реакции лейкоцитов макроорганизма на присутствие инфекционного агента путем исследования спонтанной и стимулированной зимозаном хемилюминесценции лейкоцитов, где в качестве индуктора используют лизат элементарных телец хламидий. При индексе хемилюминесценции по зимозану (ИХЛ-з) 21,35≅ИХЛ-з≅31,41 и специфическому антигену (ИХЛ-аг) 0,53≅ИХЛ-аг≅1,00 диагностируют хроническую хламидийную инфекцию, а при ИХЛ-з<21,35 и ИХЛ-аг>1,00 диагностируют острую стадию заболевания (Прохоренков В.И., Шапран М.В., Тюкавкин В.В. Патент РФ №2000109432, 2002). Недостатком способа является трудоемкость методики и использование дорогостоящего оборудования (хемилюминометр).
Наиболее близким к заявленному изобретению является способ определения клинической формы хламидийного заболевания, основанный на серологическом методе исследования крови (IgG, IgA, IgM) посредством иммуноферментного анализа (ИФА). При титре IgG>100-6400, IgA>50-1600 и IgM>50-3200 выставляют острую стадию заболевания, а при титре IgG>50-200, a IgA>100-1600 - хроническую (Мальханов В.Б., Гумерова Е.И., Шевчук Н.Е., Значение диагностических лабораторных исследований при офтальмоинфекциях и паразитарных заболеваниях глаз, Уфа, 2001). Однако, как отмечают сами авторы, чувствительность метода колеблется от 65 до 70%.
Технический результат - назначение патогенетически обоснованной терапии, оптимизирующий прием антибактериальных средств по дозе, длительности и виду, с целью предупреждения перехода ХК в антибиотикорезистентную форму непрерывно рецидивирующего характера и развития осложнений со стороны глазного яблока.
Технический результат достигается способом дифференциальной диагностики острой и хронической формы течения хламидийного конъюнктивита путем исследования сыворотки крови пациентов, отличающийся тем, что определяют суммарный уровень конечных метаболитов оксида азота (NO2-/NO3-) и при концентрации NO2-/NO3- в сыворотке крови выше 50 мкмоль/л течение заболевания оценивают как острое, а при концентрации NO2-/NO3- в сыворотке крови ниже 50 мкмоль/л - как хроническое.
Содержание NO2-/NO3- в сыворотке крови определяют по модифицированной методике Schmidt H.H.H.W., Kelm M. (Methods in Nitric Oxide Research. Ed. by M.Feelisch and J.S.Stamler. 1996, John Wiley and Sons Ltd. P.491-497).
Способ осуществляют следующим образом.
Для определения общего содержания NO2-/NO3- в крови получают сыворотку путем центрифугирования образца в пробирке при 200g (1500 об/мин, центрифуга ОПН-3) в течение 10 мин. Отбирают 1 мл сыворотки в другую пробирку и депротеинизируют путем двухэтапного осаждения белков центрифугированием при ~6000g (8000 об/мин, центрифуга ОПН-8) при добавлении к ней на первом этапе 1,8 мл 96% спирта, а на втором - 0,2 мл 15% сульфата цинка. После этого 1 мл супернатата переносят в следующую пробирку, добавляют 2 мл дистиллированной воды, 1 мл глицинового буфера (рН=9,7), всыпают 8 г кадмиевых гранул, активированных в 5 mM сульфате меди в течение 5 мин, и инкубируют при t=20-22°C в течение 60 мин. Затем переносят 3 мл смеси в другую пробирку и добавляют 0,6 мл 17,5 mM сульфаниламида в 6 М соляной кислоте и инкубируют при t=0-4°C (на ледяной подушке) 25 мин. После этого добавляют 0,2 мл 20,0 mM N-(1-нафтил)-этилендиамина и инкубируют при t=22°C в течение 20 мин. На завершающем этапе определяют оптическую плотность на спектрофотометре (фотоэлектроколориметре) в кюветах с длиной оптического пути 1 см при длине волны 540 нм против кюветы, содержащей 3,6 мл дистиллированной воды и 0,2 мл 20,0 mM N-(1-нафтил)-этилендиамина. Расчет концентрации проводят по калибровочному графику для нитрата калия и умножают на коэффициент разведения (k=3). Полученную концентрацию NO2-/NO3- выражают в мкмоль/л.
Нормальные значения NO2-/NO3- сыворотки крови, установленные у 10 клинически здоровых доноров в возрасте от 24 до 56 лет вышеописанным методом, составляют 41,5±5,9 мкмоль/л.
Проведенные клинико-лабораторные исследования позволили установить диапазоны концентрации NO2-/NO3- в сыворотке, соответствующие острой и хронической формам ХК.
Так, концентрация NO2-/NO3- сыворотки крови, превышающая 50 мкмоль/л, соответствует острой форме течения ХК (длительность заболевания менее 1 мес.). При концентрации NO2-/NO3- меньше 50 мкмоль/л выставляют хроническую форму ХК (длительность заболевания больше 1 мес.).
Приводим подробные клинические примеры для каждой формы течения ХК.
Пример 1. Больной К., 28 лет (и.б. №30-0533 за 2004 г.) поступил на стационарное лечение в УфНИИГБ на 5 сутки с начала клинических проявлений ХК с жалобами на слезотечение и покраснение левого глаза. При объективном осмотре: OD - Конъюнктива бледно-розовая, оптические среды прозрачные. С глазного дна розовый рефлекс. Острота зрения 1,0; OS - глазная щель несколько сужена, веки слегка отечны, из конъюнктивальной полости слизисто-гнойное отделяемое в умеренном количестве, конъюнктива век гиперемирована, на нижнем своде множественные сосочки, небольшой отек роговицы в поверхностных слоях, глубжележащие отделы глаза без патологических изменений. Острота зрения 1,0. Методом флуоресцирующих антител определялось свечение антигена C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OS в значительном количестве клеток. ПЦР анализ подтвердил наличие C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OS. Содержание NO2-/NO3- сыворотки крови на 7 день заболевания составило 50,89 мкмоль/л. Выставлен клинический диагноз: OS: Острый ХК, папиллярная форма, эпителиальный кератит. В данном случае острая форма клинического течения ХК установлена на основании значения NO2-/NO3- больше 50 мкмоль/л. Последующий характер клинического течения - выздоровление на 21 день, отсутствие рецидивов, а также данные ИФА сыворотки крови на антитела к C.trachomatis это подтвердили. Титр антител, выявляемый иммуноферментным анализом, соответствовал для IgG 50, IgA 200; IgM 800.
Пример 2. Больной С., 29 лет (амб. карта №0173-04, 2004 г.) поступил на амбулаторное лечение в УфНИИГБ на 7 сутки с начала клинических проявлений ХК с жалобами на слезотечение, чувство инородного тела и покраснение правого глаза. При объективном осмотре: OD - глазная щель умеренно сужена, веки отечные, из конъюнктивальной полости слизисто-гнойное отделяемое в значительном количестве, конъюнктива век гиперемирована (больше нижнее), на нижнем своде множественные сосочки, небольшой отек роговицы в поверхностных слоях, глубжележащие отделы глаза без патологических изменений. Острота зрения 0,8 (не корригирует). OS - Конъюнктива бледно-розовая, оптические среды прозрачные. С глазного дна розовый рефлекс. Острота зрения 1,0. Методом флуоресцирующих антител определялось свечение антигена C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OS в значительном количестве клеток. ПЦР анализ подтвердил наличие C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OS. Содержание NO2-/NO3- сыворотки крови на 8 день заболевания составило 85,10 мкмоль/л. Титр антител, выявляемый иммуноферментным анализом, соответствовал для IgG 25, IgA 50; IgM 50. Выставлен клинический диагноз: OD: Острый ХК, папиллярная форма, эпителиальный кератит. Острая форма течения ХК установлена на основании значения NO2-/NO3- более 50 мкмоль/л. Данные иммуноферментного анализа сыворотки крови, установившиеся концентрации иммуноглобулинов трех классов А, М и G к C.trachomatis, не позволили дифференцировать у больного острую или хроническую форму ХК.
Пример 3. Больная С., 47 лет (и.б. №30-6392 за 2003 г.) поступила на стационарное лечение в УфНИИГБ с жалобами на периодически возникающее чувство жжения в обоих глазах в последние 5 лет. При объективном осмотре: OU - Конъюнктива век умеренно гиперемирована, слегка отечна, инфильтрирована, переходные складки век валикообразно утолщены, в конъюнктивальной полости слизисто-гнойное отделяемое в небольшом количестве, оптические среды прозрачные. С глазного дна розовый рефлекс. Острота зрения OU: 0,7 с корр. +1,5Д=1,0. Методом флуоресцирующих антител определялось свечение антигена C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OS в небольшом количестве клеток, OD - не определялось. ПЦР анализ подтвердил наличие C.trachomatis в соскобе с конъюнктивы OU. Содержание NO2-/NO3- сыворотки крови на 2 день стационарного обследования составило 37,77 мкмоль/л. Выставлен клинический диагноз: OU: Хронический ХК, инфильтративная форма. В данном случае хроническое течение заболевания установлено на основе небольших значений (менее 50 мкмоль/л) содержания NO2-/NO3-, что совпало с рецидивирующим характером течения заболевания и данными ИФА титра специфических антител против хламидий (IgG 100, IgA 200).
Заявленным способом обследовано 19 больных ХК, у которых острое или хроническое течение ХК установлено на основании концентрации NO2-/NO3- в сыворотке крови. При этом у 5 больных ХК носил острое, а у 14 - хроническое течение. У 15 больных ХК заявленная концентрация NO2-/NO3- в сыворотке крови совпадала с клиническим течением (4 - с острым ХК, 11 - с хроническим ХК), что составило 79%. У 4 больных концентрация NO2-/NO3- в сыворотке крови не соответствовала клиническому течению ХК (1 - с острым ХК, 3 - с хроническим ХК), что составило 21%. Следовательно, клиническая форма течения ХК на основании показателей содержания NO2-/NO3- в сыворотке крови, может быть определена с точностью 79%.
Таким образом, использование данного способа диагностики клинической формы течения ХК дает возможность обоснованно назначить патогенетически ориентированную терапию. Предложенный способ отличается более высокой информативностью результатов (79%), чем ИФА (65-70%), а с учетом его относительной простоты и хорошей воспроизводимости может быть применен в лечебных учреждениях, имеющих биохимическую лабораторию, поэтому способ является доступным, а следовательно, "практически применимым".

Claims (1)

  1. Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита путем исследования сыворотки крови пациентов, отличающийся тем, что определяют суммарный уровень конечных метаболитов оксида азота (NO2-/NO3-) и при концентрации его в сыворотке крови выше 50 мкмоль/л течение заболевания оценивают как острое.
RU2004138196/15A 2004-12-27 2004-12-27 Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита RU2281503C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004138196/15A RU2281503C1 (ru) 2004-12-27 2004-12-27 Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004138196/15A RU2281503C1 (ru) 2004-12-27 2004-12-27 Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2004138196A RU2004138196A (ru) 2006-06-10
RU2281503C1 true RU2281503C1 (ru) 2006-08-10

Family

ID=36712361

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004138196/15A RU2281503C1 (ru) 2004-12-27 2004-12-27 Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2281503C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2789984C1 (ru) * 2022-11-28 2023-02-14 федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ диагностики эпителиального и стромального цитомегаловирусного кератита

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2239193C1 (ru) * 2003-04-03 2004-10-27 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ диагностики воспалительного поражения глаз хламидийной этиологии
RU2003109244A (ru) * 2003-04-03 2004-11-27 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ диагностики воспалительного поражения глаз хламидийной этиологии
RU2241993C1 (ru) * 2003-07-11 2004-12-10 Ковалевская Мария Александровна Способ диагностики специфических воспалительных заболеваний органа зрения

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2239193C1 (ru) * 2003-04-03 2004-10-27 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ диагностики воспалительного поражения глаз хламидийной этиологии
RU2003109244A (ru) * 2003-04-03 2004-11-27 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ диагностики воспалительного поражения глаз хламидийной этиологии
RU2241993C1 (ru) * 2003-07-11 2004-12-10 Ковалевская Мария Александровна Способ диагностики специфических воспалительных заболеваний органа зрения

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МАЛЬХАНОВ В.Б. и др. Значение диагностических лабораторных исследований при офтальмоинфекциях и паразитарных заболеваниях глаз. Уфа. 2001, с.23-27. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2789984C1 (ru) * 2022-11-28 2023-02-14 федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ диагностики эпителиального и стромального цитомегаловирусного кератита

Also Published As

Publication number Publication date
RU2004138196A (ru) 2006-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vijayan et al. Procalcitonin: a promising diagnostic marker for sepsis and antibiotic therapy
JP4323744B2 (ja) 全血中の分析物の測定
EP2635702B1 (en) Lateral flow immunoassay for complement activation and methods of use for point-of-care assessment of complement-associated disorders
US8865164B2 (en) Detecting complement activation
CN108445232B (zh) Nf-l在神经梅毒脑脊液检测中的应用
JP2019060880A (ja) 移植拒絶反応、神経変性疾患又はうつ病と特に関連する潜在的炎症のインビトロ早期検出方法
Tamarozzi et al. Evaluation of microscopy, serology, circulating anodic antigen (CAA), and eosinophil counts for the follow-up of migrants with chronic schistosomiasis: a prospective cohort study
CN110488025A (zh) 一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白及其检测方法和其在肠道健康检测的用途
CN108490191B (zh) 神经丝蛋白轻链在梅毒血液检测中的应用
EP2845007B1 (en) Detecting complement activation
RU2281503C1 (ru) Способ диагностики острого течения хламидийного конъюнктивита
Martinez et al. Survey of cytokines in normal canine tears by multiplex analysis: A pilot study
Carroccio et al. Plasma calprotectin levels in patients suffering from acute pancreatitis
RU2289138C2 (ru) Способ аллергодиагностики по показателям хемилюминесцентного свечения нейтрофилов
RU2661610C1 (ru) Способ диагностики тяжелых форм псориаза у взрослых
CN115961014A (zh) Mnda在诊断尿路感染中的用途和诊断试剂盒
ES2774014T3 (es) Dispositivo médico, procedimiento de inmunoensayo y ensayo para la detección de la retinopatía diabética proliferativa
JP2008107154A (ja) スギ花粉症の診断方法
RU2415430C1 (ru) Способ определения циркулирующих иммунных комплексов
CN120405150B (zh) Itga6在制备脓毒症诊断及病情监测试剂或试剂盒中的应用
EP4266057A1 (en) Kynurenine: useful biomarker in acute covid-19 and long covid
CN117368481A (zh) HnRNPA2/B1的新用途及检测试剂盒
CN120314586A (zh) 一种用于诊断细菌性脑膜炎和评估病情严重程度、疗效的生物标记物组合及其应用
US20230253118A1 (en) Method for classifying a subject suspected to suffer from an acute event in a risk group
RU2247383C2 (ru) Способ серологической диагностики хламидийных конъюнктивитов

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20061228