RU2250260C1 - ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК - Google Patents
ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК Download PDFInfo
- Publication number
- RU2250260C1 RU2250260C1 RU2003128898/13A RU2003128898A RU2250260C1 RU 2250260 C1 RU2250260 C1 RU 2250260C1 RU 2003128898/13 A RU2003128898/13 A RU 2003128898/13A RU 2003128898 A RU2003128898 A RU 2003128898A RU 2250260 C1 RU2250260 C1 RU 2250260C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- feline
- strain
- coronavirus
- cats
- infective
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. Штамм feline coronavirus депонирован в коллекцию микроорганизмов ФГУ “Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов в 2003 году и имеет регистрационный номер “Багира”. Штамм обладает стабильной инфекционной и антигенной активностью и пригоден для контроля иммуногенной активности вакцин против инфекционного перитонита кошек, а также для изготовления гипериммунных сывороток и глобулинов, используемых при диагностике данной болезни.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к новому штамму feline coronavirus, используемому для контроля иммуногенной активности вакцин и изготовления диагностических сывороток и глобулинов и в качестве антигена для обнаружения антител к коронавирусу кошек.
Установлено, что коронавирус кошек может встречаться в двух серологически неразличимых вариантах, которые именуют FECV (кишечный вирус) и FIРV(вирус, вызывающий инфекционный перитонит). Взаимосвязь этих вариантов вируса не вполне ясна [2].
По литературным данным упоминания о болезни с характерными симптомами появились в начале 1960-х годов. Впервые инфекционный перитонит был описан в 1966 г. Wolfe и Griesemer. Исследователи предположили вирусную этиологию болезни. В 1968 г. Zook и коллеги наблюдали наличие вирионов в тканях экспериментально инфицированных кошек, но не смогли охарактеризовать возбудителя. В 1970 г. Ward определил, что вирус относится к семейству Coronaviridae (в то время недавно установленному). В 1972 г. Montali и Strandberg показали, что болезнь, вызванная коронавирусом кошек, может иметь две формы клинического проявления, названные влажной и сухой. В настоящее время инфекционный перитонит кошек встречается в большинстве стран мира.
Подробной характеристики и областей использования ни одного из выделенных штаммов коронавируса не приводится [1, 2]. В нашей стране мы не нашли сообщений о выделении от кошек штаммов feline coronavirus или закупке импортных штаммов вируса.
Целью изобретения является получение тканевого штамма коронавируса кошек, обладающего стабильной инфекционной и антигенной активностью, который может быть использован для контроля иммуногенной активности вакцин, получения специфических диагностических сывороток и глобулинов и в качестве антигена для обнаружения антител к коронавирусу кошек.
Штамм инфекционного перитонита кошек выделен в 2002 г. от больного котенка с признаками инфекционного перитонита. Штамм депонирован во Всероссийскую коллекцию штаммов микроорганизмов Федерального государственного учреждения “Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. Центр качества ветеринарных препаратов и кормов”. И имеет регистрационный номер - “Багира ДЕП”.
Новый штамм feline coronavirus ВГНКИ “Багира” относится к сем. Coronaviridae, первой антигенной группе рода Coronavirus, объединяющей серологически родственные вирусы: трансмиссивного гастроэнтерита и эпизоотической диареи свиней, коронавирусы человека (229Е), собак и кошек. Представлен видом Felinae Coronavirus.
Штамм feline coronavirus ВГНКИ “Багира ДЕП” характеризуется следующими признаками и свойствами:
Морфологические свойства.
Вирионы - сферические или плеоморфные частицы диаметром 60-200 нм. Состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки с булавовидными выступами длиной 12-24 нм, образующими подобие солнечной короны.
Культуральные свойства.
Вирус размножается в перевиваемой культуре клеток CrFk (почки кошки), первично полученных альвеолярных и перитонеальных макрофагах кошки и некоторых других клетках кошачьего происхождения. В монослойных культурах клеток вызывает цитопатическое действие (ЦПД) и достигает титра 5,5 lg ТЦД 50/см3.
Антигенные свойства.
Штамм коронавируса кошек "Багира" при парентеральном введении кроликам индуцирует образование антител в титрах 7-10 log2 (PHГA).
Вирулентность.
При внутрибрюшинном заражении кошек суспензией ткани селезенки больной кошки, содержащей вирус активностью 10-3 ЛД 50/см3 в дозе 1 см3, клинические признаки инфекции проявляются у животных через 14-60 суток. Клинические признаки болезни могут отличаться у различных животных в зависимости от индивидуальной выраженности клеточного иммунитета. Чаще всего у животных наблюдают наиболее характерные для инфекционного перитонита кошек клинические признаки: увеличение объема живота, обусловленное скоплением асцитной жидкости, судороги, горизонтальный нистагм глазных яблок. В течение 2-6 месяцев все зараженные кошки погибают.
Стабильность основных свойств штамма.
Штамм коронавируса кошек "Багира" сохраняет стабильную инфекционную и антигенную активность на протяжении 10 пассажей на кошках.
Серологические свойства.
Активен в реакции нейтрализации со специфической сывороткой.
Гемагглютинирующие свойства.
Штамм коронавируса кошек "Багира" не агглютинирует эритроциты животных.
Безвредность для лабораторных животных.
Штамм коронавируса кошек "Багира" безвреден для белых мышей, морских свинок и кроликов при внутримышечном, подкожном и внутрибрюшинном введении.
Дополнительные сведения о штамме.
Штамм коронавируса кошек "Багира" свободен от бактериальных, микоплазменных, грибковых и вирусных контаминантов.
Способность штамма к распространению в естественных условиях.
Заражение животных в окружающей среде происходит аэрогенно и через контакт здоровых животных с выделениями больных. Инкубационный период при этом составляет от 2 недель до 6 месяцев. Возможен трансплацентарный путь заражения.
Основные условия хранения.
Штамм "Багира" коронавируса кошек лиофилизированный со стабилизирующими веществами сохраняет активность при минус 20°С 6 месяцев.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Штамм вируса инфекционного перитонита кошек "Багира" используют для изучения иммуногенной активности опытного образца вакцины. Для этого испытуемую вакцину против инфекционного перитонита кошек вводят 4 котятам 2,5-месячного возраста согласно наставлению по ее применению. Через месяц после иммунизации проводят внутрибрюшинное заражение этих, а также 4 невакцинированных котят вируссодержащей суспензией из штамма коронавируса “Багира”, содержащей вирус активностью 10-3 ЛД 50/см3 в дозе 1 см3. За всеми животными осуществляют наблюдение в течение 6 месяцев. Учет результатов показывает, что иммунизированные котята остаются здоровыми, у них в течение всего срока наблюдения не отмечают каких-либо отклонений от нормы. Невакцинированные котята заболевают с признаками, характерными для инфекционного перитонита (увеличение объема живота вследствие скопления в брюшной полости асцитной жидкости, угнетение, судороги, горизонтальный нистагм глазных яблок) и погибают в течение срока наблюдения (12 недель). Таким образом, испытуемая вакцина является иммуногенной, а штамм feline coronavirus “Багира” может служить для контроля иммуногенности вакцины против коронавирусного перитонита кошек.
Пример 2
Специфические гипериммунные сыворотки на штамм коронавируса кошек “Багира” получают на кроликах и козах. Используют 2 способа иммунизации: еженедельное 3-кратное введение антигена (активностью 10-3 ЛД 50/см3) в объеме 1 см3 кролику и 3 см3 козе и иммунизацию малыми дозами антигена. При втором способе антиген вводят внутримышечно в том же объеме и добавлении полного адъюванта Фрейнда (1:1), а затем через 2 месяца без адъюванта внутривенно в объеме 0,3 см3 и 0,5 см3 соответственно. Отбор крови для получения проб сывороток производят через 14, 21 и 28 дней после последнего введения антигена. Активность полученных сывороток устанавливают в РНГА. Специфичность полученных сывороток проверяют в РНГА с эритроцитами, сенсибилизированными данным вирусом и вирусом ПЛК.
При использовании различных методов гипериммунизации кроликов на всех животных получают активные в РНГА сыворотки крови. У кроликов и коз контрольной группы они являются негативными. Сыворотки крови кроликов, которым вводят антиген еженедельно, обладают активностью в РНГА 7-8 log2, коз - 6-8 log2. Более высокую активность в РНГА проявляют сыворотки крови, которые получают от кроликов и коз, иммунизированных малыми дозами антигена - 8-10 log2 и 8-10 log2 соответственно. Полученные сыворотки не проявляют активности в РНГА с вирусом панлейкопении кошек.
Гипериммунные сыворотки используют для получения глобулинов или используют в нативном виде для диагностики инфекционного перитонита кошек в серологических реакциях. Сыворотки хранят в лиофилизированном или нативном виде при температуре минус 10-18°С в течение 24 месяцев.
Пример 3
Получают глобулин из сыворотки крови гипериммунизированных коз с титром 8,0 log2 в РНГА и кошек - с титром 8,5 log2 в РНГА. Для этого используют общепринятый метод его высаливания насыщенным раствором натрия сульфата.
Осадок глобулина ресуспендируют фосфатным буферным раствором рН 7,2. Титр глобулина из сыворотки крови коз после ресуспендирования составляет 8,5 log2 в РН, кошек 9,25 log2.
Полученные глобулины используют для диагностики инфекционного перитонита кошек в серологических реакциях. В частности, они служат положительным контролем при постановке РНГА и используются в реакции нейтрализации.
Глобулины хранят в лиофилизированном или нативном состоянии при температуре минус 10-18°С в течение 24 месяцев.
Пример 4.
Сыворотки, полученные по примеру 3, или глобулины, полученные по примеру 4, используют для диагностики инфекционного перитонита кошек методом флуоресцирующих антител (МФА).
Для приготовления препарата используют мазки-отпечатки клинического материала (крови, асцитной жидкости) или патматериала (селезенки, слизистой оболочки мочевого пузыря, толстого отдела кишечника), полученные от больных кошек. Параллельно исследуют такие же пробы от благополучных по данной инфекции животных (отрицательный контроль). Мазки фиксируют на предметном стекле ацетоном в течение 20 мин (при 0°С). Затем отмывают фосфатным буферным раствором рН 7,2. На стекла наносят люминесцентную сыворотку (глобулин), приготовленную по стандартной методике. Окрашивание контрольных и зараженных клеток проводят во влажной камере, в течение 1 часа, при температуре 37°С. После этого тщательно отмывают препарат от свободного красителя фосфатным буферным раствором рН 7,2. Просматривают мазки с помощью люминесцентного микроскопа под иммерсией. Устанавливают в поле зрения характерные для данного органа (ткани) клетки с серовато-зеленоватой цитоплазмой и ядром со слабо светящимися ядрышками. В пораженных клетках отмечают яркое свечение отдельных мелких гранул в цитоплазме вокруг ядра. Клеточное ядро хорошо просматривается, но не флуоресцирует. В контрольном мазке-отпечатке из ткани или органа благополучного по инфекционному перитониту животного свечение отсутствует. Люминесцентный метод исследования позволяет установить наличие коронавируса в клетках тканей больных животных и поставить диагноз серологическим методом.
Использование в ветеринарной практике штамма feline coronavirus "Багира" ДЕП позволит с достаточной достоверностью судить о качестве изготавливаемых и используемых биопрепаратов против инфекционного перитонита кошек. Использовать антиген и полученную из него сыворотку в серологических реакциях для диагностики коронавирусной инфекции кошек.
Источники информации
1.Evermann, J.F., Baumgartner, L., Ott, R.L., Davis, E.V. and McKeirnan, A.J., Characteristics of feline infectious peritonitis virus isolate.//1981. Vet. Pathol, - 18. - P.256-265.
2. Pedersen, N.C. Feline infectious peritonitis and feline enteric coronavirus infections. //1983, - Feline Pract, - 13(4). - P 13-19.
Claims (1)
- Штамм Feline coronavirus ВГНКИ “Багира”-ДЕП, используемый для контроля иммуногенной активности вакцин и изготовления биопрепаратов для диагностики коронавирусного перитонита кошек.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003128898/13A RU2250260C1 (ru) | 2003-09-26 | 2003-09-26 | ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003128898/13A RU2250260C1 (ru) | 2003-09-26 | 2003-09-26 | ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2250260C1 true RU2250260C1 (ru) | 2005-04-20 |
Family
ID=35634858
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003128898/13A RU2250260C1 (ru) | 2003-09-26 | 2003-09-26 | ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2250260C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116042538A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-05-02 | 华中农业大学 | 一株猫冠状病毒及其应用 |
-
2003
- 2003-09-26 RU RU2003128898/13A patent/RU2250260C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
PEDERS EN N.C. Feline infectious peritonitis and feline enteric coronavirus infections. Feline Pract. 1983, 13(4), p.13-19. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116042538A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-05-02 | 华中农业大学 | 一株猫冠状病毒及其应用 |
CN116042538B (zh) * | 2022-11-24 | 2024-05-07 | 华中农业大学 | 一株猫冠状病毒及其应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2547589C2 (ru) | Новый птичий астровирус | |
McFerran et al. | Further studies on the classification of fowl adenoviruses | |
CN105198969B (zh) | 一种1型鸭甲肝病毒vp3蛋白的b细胞表位及其鉴定方法和应用 | |
JP4944643B2 (ja) | 魚類用のイリドウイルス感染症ワクチンと診断剤並びにこれ等の製法 | |
RU2250260C1 (ru) | ШТАММ Feline coronavirus, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН И ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА КОШЕК | |
CN103773736A (zh) | 分泌抗鸭源ndv分离株单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立 | |
CN101025420A (zh) | 一种禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒及应用 | |
Mahmood et al. | Trypsin-induced hemagglutination assay for the detection of infectious bronchitis virus | |
RU2184567C1 (ru) | Штамм feline calicivirus, используемый для контроля иммуногенной активности вакцин, изготовления специфических лечебно-профилактических и диагностических биопрепаратов | |
RU2563522C1 (ru) | ШТАММ О №2102/Забайкальский/2010 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА О ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА О | |
McKercher | A Comparison of the Viruses of Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR), Infectious Pustular Vulvovaginitis (IPV), and Rinderpest: Part I. Studies of Antigenic Relationships | |
RU2215031C1 (ru) | Штамм feline herpesvirus-1, используемый для контроля иммуногенной активности вакцин, изготовления специфических лечебно-профилактических и диагностических биопрепаратов | |
RU2603255C9 (ru) | ШТАММ А №2155/Забайкальский/2013 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
RU2817031C1 (ru) | Штамм "О N 2222/Тайвань/1/2012" вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
EVSTIFEEV et al. | Study of The Immunobiological Properties of a New Chlamydia Isolate Obtained from Goats During Chlamydia Abortion. | |
Tadese et al. | Development of a mixed antigen agar gel enzyme assay (AGEA) for the detection of antibodies to poxvirus in chicken and turkey sera | |
RU2348690C2 (ru) | Штамм "амурский" № 1987 вируса ящура типа азия-1 для контроля антигенной и иммуногенной активности вакцин и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа азия-1 | |
RU2100433C1 (ru) | Штамм coronavirus canine, используемый для контроля иммуногенной активности вакцин и получения сывороток для лечения и диагностики коронавирусной инфекции собак | |
RU2812350C1 (ru) | Способ получения диагностической сыворотки против бруцелл в R-форме | |
RU2772751C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки к аденовирусу bovine-10 крупного рогатого скота | |
RU2738900C1 (ru) | Диагностический набор для выявления антител к вирусу гриппа птиц подтипа Н9 в реакции торможения гемагглютинации | |
Rahman | Serological and bacteriological diagnosis of Brucella abortus biotype 1 infection in Sprague-Dawley rats | |
SU1604851A1 (ru) | Штамм ЕNтеRоVIRUSSUIS дл диагностики энтеровирусной пневмонии свиней | |
SU1328374A1 (ru) | Штамм ЕNтеRоVIRUS SUIS дл диагностики энтеровирусного гастроэнерита свиней | |
RU2252031C1 (ru) | Способ получения иммунной сыворотки к антигенам вирулентного штамма bacillus anthracis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TC4A | Altering the group of invention authors | ||
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100927 |