RU2233121C1 - Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects - Google Patents

Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects Download PDF

Info

Publication number
RU2233121C1
RU2233121C1 RU2003100415/14A RU2003100415A RU2233121C1 RU 2233121 C1 RU2233121 C1 RU 2233121C1 RU 2003100415/14 A RU2003100415/14 A RU 2003100415/14A RU 2003100415 A RU2003100415 A RU 2003100415A RU 2233121 C1 RU2233121 C1 RU 2233121C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
group
serum
limits
deviations
beyond
Prior art date
Application number
RU2003100415/14A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2003100415A (en
Inventor
С.Г. Морозов (RU)
С.Г. Морозов
Б.Б. Гнеденко (RU)
Б.Б. Гнеденко
В.А. Соболев (RU)
В.А. Соболев
кин А.А. Сид (RU)
А.А. Сидякин
А.Н. Проценко (RU)
А.Н. Проценко
М.П. Усанова (RU)
М.П. Усанова
И.Е. Грибова (RU)
И.Е. Грибова
Е.И. Щекаева (RU)
Е.И. Щекаева
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Биофарм-тест"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Биофарм-тест" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Биофарм-тест"
Priority to RU2003100415/14A priority Critical patent/RU2233121C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2233121C1 publication Critical patent/RU2233121C1/en
Publication of RU2003100415A publication Critical patent/RU2003100415A/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, diagnostics, obstetrics.
SUBSTANCE: one should apply a test system for IEA containing plots with sorbed fractions of nonhistonic anionic proteins of cerebral tissue chromatin (FACBP-C) and/or membranous cerebral proteins (FMP-C). One should detect immunoreactivity of serumal autoantibodies to FACBP-C and FMP-C. If reaction intensity (RI) of tested serum (TS) is not beyond the limits: -15 : +40% against reaction of serum taken as a standard one should conclude that TS belongs to group K1 - norm; if RI is beyond the limits of K1 but is not less than -25% and not higher than 65% - it should be referred to group K2 - weak deviations; if it is beyond limits of K1 and K2 but is not below -45% and not higher than 100% - to the third group K3 - moderate deviations; if it lies beyond the limits of K1, K2 and K3 but it id not less than -65% and not higher than 150% - to group K4 - considerable deviations; if it is beyond K4 limits, by negative values it is below -65% and by positive values ranges within 150% up to 200% - it should be referred to K5 group - acute deviations, and if it is beyond the limits of K1, K2, K3, K4 and K5 - it should be referred to group K6 -very sharp, exquisite deviations and it is possible to predict the risk for failed development of fetus/embryo at increasing the group from K1 to K6.
EFFECT: higher reliability of the present predictions.
2 cl, 9 ex, 2 tbl

Description

К настоящему времени накоплен обширный материал, свидетельствующий об участии иммунной системы в регуляции течения беременности и развитии эмбриона. Так, по мнению Gleicher (1994), без учета состояния иммунной системы женщины невозможно дать реальную оценку состояния ее репродуктивной функции. М.В. Федорова и соавт. (1997) особо отмечают, что иммунологические нарушения являются наиболее ранними признаками неблагоприятных изменений в организме под влиянием неблагополучной внешней среды. В то же время конкретные механизмы участия иммунной системы в процессах гестации и закладки органов и тканей эмбриона и плода во многом остаются неясными.To date, extensive material has been accumulated indicating the participation of the immune system in the regulation of pregnancy and the development of the embryo. So, according to Gleicher (1994), without taking into account the state of the immune system of a woman, it is impossible to give a real assessment of the state of her reproductive function. M.V. Fedorova et al. (1997) emphasize that immunological disorders are the earliest signs of adverse changes in the body under the influence of a dysfunctional environment. At the same time, the specific mechanisms of the participation of the immune system in the processes of gestation and laying of organs and tissues of the embryo and fetus remain largely unclear.

В норме иммунная система человека продуцирует антитела не только к чужеродным, но и практически ко всем собственным антигенам, т.е. аутоантитела (а-АТ), которые участвуют практически во всех процессах, происходящих в организме. В условиях нормы сывороточное содержание аутоантител поддерживается в определенных границах. А патологическое повышение или снижение их уровней может вести к различным патологическим состояниям. Изменения продукции а-АТ различной специфичности могут быть следствием влияния как различных внешних, так и внутренних факторов (экологические факторы, стрессы, инфекции, эндокринно-метаболические нарушения и др.). Причем эти изменения могут касаться и тех а-АТ, поддержание физиологических концентраций которых критически важно для физиологического течения беременности и нормального эмбриогенеза. Известно, что антифосфолипидные антитела могут нарушать обмен мембранных фосфолипидов и повреждать сосуды плаценты во время гестации (Серова О.Ф. Прегравидарная подготовка женщин с невынашиванием беременности (патогенетическое обоснование, критерии эффективности). Дисс. докт. мед. наук., М., 2000).Normally, the human immune system produces antibodies not only to foreign, but also to almost all of its own antigens, i.e. autoantibodies (a-AT), which are involved in almost all processes occurring in the body. Under normal conditions, the serum content of autoantibodies is maintained within certain limits. A pathological increase or decrease in their levels can lead to various pathological conditions. Changes in the production of a-antibodies of various specificity can be a consequence of the influence of both various external and internal factors (environmental factors, stresses, infections, endocrine-metabolic disorders, etc.). Moreover, these changes can also affect those a-antibodies, the maintenance of physiological concentrations of which is critical for the physiological course of pregnancy and normal embryogenesis. It is known that antiphospholipid antibodies can disrupt the exchange of membrane phospholipids and damage the blood vessels of the placenta during gestation (Serova, OF Pregravid preparation of women with miscarriage (pathogenetic rationale, performance criteria). Diss. Doct. Medical sciences., M., 2000 )

По данным Полетаева А.Б. и Селифановой О.П. повышение уровней материнских аутоантител к белку ткани мозга S100 приводит к различной патологии патологии со стороны нервной системы у плода (Poletaev А.В., Selifanova О.Р., Transfer of elevated anti-S100 autoimmunity from mother to their offsprings in rats. Life Sci., 1994. V. 54, № 18, 1377-1381).According to Poletaev A.B. and Selifanova O.P. increased levels of maternal autoantibodies to the brain tissue protein S100 lead to various pathology of the fetal nervous system (Poletaev A.V., Selifanova O.R., Transfer of elevated anti-S100 autoimmunity from mother to their offsprings in rats. Life Sci ., 1994. V. 54, No. 18, 1377-1381).

Что касается генетически обусловленных пороков развития, то частота их встречаемости не превышает 3-6% от всех врожденных пороков. Остальные 94-97% врожденной патологии обусловлены различными изменениями в организме матери.As for genetically determined malformations, the frequency of their occurrence does not exceed 3-6% of all congenital malformations. The remaining 94-97% of congenital pathologies are due to various changes in the mother's body.

Изложенное выше послужило основанием для создания тест-систем для определения содержания а-АТ к различным белковым фракциям, изменения сывороточного уровня, аффинности которых коррелируют с нарушениями развития эмбриона/плода.The foregoing has served as the basis for the creation of test systems for determining the content of a-AT for various protein fractions, changes in serum levels, affinities of which correlate with impaired development of the embryo / fetus.

Аналогом заявленного изобретения является способ скринингового обследования женщин детородного возраста для прогноза развития эмбриона/плода и рождения здорового либо аномального ребенка с помощью тест-системы ELI-P (патент РФ №2107913, МПК 7 G 01 N, 27 марта 1998 г.). В основе данного метода лежит определение сывороточного уровня а-АТ к ОБМ, белкам S100, АСВР-14/18 и МР-65. По наибольшей степени отклонения одного или нескольких определяемых показателей судят о прогнозе развития эмбриона/плода и рождения здорового либо аномального ребенка в соответствии с приведенной таблицей прогноза.An analogue of the claimed invention is a method for screening women of childbearing age to predict the development of the embryo / fetus and the birth of a healthy or abnormal child using the ELI-P test system (RF patent No. 2107913, IPC 7 G 01 N, March 27, 1998). The basis of this method is the determination of the serum level of a-AT to MBP, proteins S100, ASVP-14/18 and MP-65. According to the greatest degree of deviation of one or several determined indicators, the prognosis of the development of the embryo / fetus and the birth of a healthy or abnormal child is judged in accordance with the forecast table.

В то же время индивидуальные изменения иммунореактивности к данным отдельным белкам могут не отражать глобальных изменений в системе гуморального аутоиммунитета в организме женщины. Поэтому рассмотренный способ является недостаточно точным.At the same time, individual changes in immunoreactivity to these individual proteins may not reflect global changes in the system of humoral autoimmunity in a woman's body. Therefore, the considered method is not accurate enough.

В отличие от известного способа скринингового обследования, предлагаемый нами способ, заключающийся в определении содержания а-АТ к различным фракциям белковых антигенов позволяет существенно повысить точность прогнозирования развития эмбриона/плода.In contrast to the known method of screening examination, our proposed method, which consists in determining the content of a-AT to various fractions of protein antigens, can significantly improve the accuracy of predicting the development of the embryo / fetus.

Целью заявляемого способа является повышение надежности прогноза нормального или аномального развития эмбриона и плода на основе оценки сывороточных уровней а-АТ к фракциям белковых антигенов (до беременности или во время беременности), возможности прогнозирования течения гестационного процесса, оценка эффективности проводимой терапии и оптимизация прегравидарной подготовки.The aim of the proposed method is to increase the reliability of the forecast of normal or abnormal development of the embryo and fetus based on the assessment of serum levels of a-AT to fractions of protein antigens (before pregnancy or during pregnancy), the possibility of predicting the course of the gestational process, evaluating the effectiveness of the therapy and optimizing pregravid preparation.

Поставленные цели достигаются путем реализации существенных признаков предлагаемого способа, а именно: проведение иммуноферментного анализа для определения уровней а-АТ с направленностью к фракциям белковых антигенов со сравнением интенсивности реакции в лунках, содержащих тестируемые образцы сыворотки с лунками, содержащими образцы референс-сыворотки, с последующем определением соотношения между уровнями (выраженность дисперсии в уровнях определяемых антител относительно дисперсии их средних показателей в популяции) данных а-АТ. Определение содержания исследуемых а-АТ может быть проведено также другими способами, например, с помощью оптического биосенсора.The goals are achieved by implementing the essential features of the proposed method, namely: conducting an enzyme-linked immunosorbent assay to determine the levels of a-AT with a focus on fractions of protein antigens with a comparison of the reaction intensity in the wells containing the tested serum samples with the wells containing reference serum samples, followed by determining the relationship between the levels (the severity of the variance in the levels of the determined antibodies relative to the variance of their average values in the population) of a-AT data. The determination of the content of the studied a-antibodies can also be carried out by other methods, for example, using an optical biosensor.

Для проведения предлагаемого анализа требуется 0,01-0,02 мл сыворотки крови женщины (например, из подушечки пальца).To carry out the proposed analysis, 0.01-0.02 ml of a woman's blood serum is required (for example, from a fingertip).

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION

ПОЛУЧЕНИЕ ФРАКЦИЙ, КОТОРЫЕ МОГУТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАНЫ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗАGETTING FRACTIONS THAT MAY BE USED FOR ANALYSIS

1. Получение фракции негистоновых анионных белков хроматина (АСВР-С).1. Obtaining a fraction of non-histone anionic chromatin proteins (ASBP-C).

Из свежего мозга крупного рогатого скота любым способом получают фракцию клеточных ядер. Полученные ядра гомогенизируют, центрифугируют и для дальнейшей работы отбирают осадок, который отмывают, гомогенизируют с добавлением 2 М мочевины и 0.1% тритона Х-100. Полученный препарат центрифугируют, собирают супернатант, диализуют и наносят на колонку с анионообменником. Затем проводят ступенчатую элюцию белков, используя градиенты NaCl 0.3-0.7 М NaCl. Полученный материал используется в работе.From a fresh cattle brain, a fraction of cell nuclei is obtained in any way. The resulting nuclei are homogenized, centrifuged, and for further work, a precipitate is taken, which is washed, homogenized with 2 M urea and 0.1% X-100 triton. The resulting preparation is centrifuged, the supernatant is collected, dialyzed and applied to an anion exchanger column. Then carry out stepwise elution of proteins using NaCl gradients of 0.3-0.7 M NaCl. The resulting material is used in the work.

2. Получение фракции мембранных белков мозга (МР-С).2. Obtaining fractions of membrane proteins of the brain (MR-C).

Из свежего мозга крупного рогатого скота любым методом выделяют фракцию клеточных мембран. Полученные мембраны гомогенизируют, центрифугируют, собирают осадок, который отмывают, гомогенизируют с добавлением 0.1% тритона Х-100 и 2 М мочевиной. После центрифугирования супернатант наносят на колонку анионообменника. Затем проводят ступенчатую элюцию белков, используя градиенты NaCl на том же буфере. Отбирают фракцию, элюируемую в диапазоне 0.15-0.3 М NaCl.From the fresh brain of cattle by any method, a fraction of cell membranes is isolated. The resulting membranes are homogenized, centrifuged, a precipitate is collected, which is washed, homogenized with the addition of 0.1% Triton X-100 and 2 M urea. After centrifugation, the supernatant is applied to the anion exchanger column. Then stepwise elution of the proteins is carried out using NaCl gradients on the same buffer. A fraction eluted in the range of 0.15-0.3 M NaCl was selected.

МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗАMETHOD OF IMMUNO-ENZYMAL ANALYSIS

1. Для сорбции на стандартные 96-луночные плоскодонные планшеты для иммуноферментного анализа готовят растворы полученных фракций белковых антигенов на карбонатном буфере. Приготовленные растворы вносят в отдельные лунки планшета. Накрытые крышками планшеты инкубируют ночь при 2-4°С.1. For sorption on standard 96-well flat-bottomed plates for enzyme immunoassay, solutions of the obtained fractions of protein antigens are prepared on carbonate buffer. The prepared solutions are added to individual wells of the tablet. Coated plates incubate overnight at 2-4 ° C.

2. Удаляют из лунок растворы белков и заливают в них блокирующий буфер (например, 0.5% раствор желатина на 0.15 М NaCl). Инкубируют 1 час при 37°С.2. Remove protein solutions from the wells and fill in blocking buffer (for example, 0.5% gelatin solution with 0.15 M NaCl). Incubated for 1 hour at 37 ° C.

3. Отмывают планшеты отмывочным буфером (0.15 М NaCl с 0.05% твин-20).3. Wash the plates with wash buffer (0.15 M NaCl with 0.05% Tween-20).

4. Внесение тестируемых сывороток:4. Application of test sera:

а) готовят разведения сывороток 1:200 на отмывочном буфере;a) prepare a dilution of serum 1: 200 in washing buffer;

б) вносят разведенные сыворотки в лунки;b) add diluted serum to the wells;

в) планшеты инкубируют ночь при 2-4°С.c) the plates are incubated overnight at 2-4 ° C.

5. Отмывают планшеты отмывочным буфером.5. Wash the plates with wash buffer.

6. Проявление реакции:6. Manifestation of the reaction:

а) исходный раствор конъюгата пероксидазы хрена (или иного фермента) с антителами к иммуноглобулинам IgG человека разводят в необходимое число раз (в зависимости от его активности) отмывочным буфером;a) the initial solution of horseradish peroxidase conjugate (or another enzyme) with antibodies to human IgG immunoglobulins is diluted to the required number of times (depending on its activity) with washing buffer;

б) раствор конъюгата вносят во все лунки планшета;b) the conjugate solution is added to all wells of the plate;

в) планшеты инкубируют 60-90 мин при 37°С, либо 12-16 час при 2-4°С; коньюгат удаляют, а планшеты отмывают отмывочным буфером;c) the plates are incubated for 60-90 minutes at 37 ° C, or 12-16 hours at 2-4 ° C; the conjugate is removed and the plates are washed with washing buffer;

г) сразу после этого в лунки вносят раствор субстрата (например, 0.01% тетраметилбензидина с 0.01% перекиси водорода на 0.05 М цитрат-фосфатном буфере рН 4.5-5 в случае применения пероксидазных конъюгатов). Инкубируют планшеты в темноте 10-15 мин при комнатной температуре.d) immediately after this, a substrate solution is introduced into the wells (for example, 0.01% tetramethylbenzidine with 0.01% hydrogen peroxide in 0.05 M citrate-phosphate buffer pH 4.5-5 in the case of peroxidase conjugates). Incubate the tablets in the dark for 10-15 minutes at room temperature.

9. По достижении оптимального уровня окрашивания (через 10-15 мин инкубации в темноте) реакцию останавливают добавлением 0.2-0.4 М серной кислоты.9. Upon reaching the optimal level of staining (after 10-15 minutes of incubation in the dark), the reaction is stopped by the addition of 0.2-0.4 M sulfuric acid.

10. Интенсивность окрашивания оценивают с помощью ИФА-ридера любой модели.10. The intensity of staining is evaluated using an ELISA reader of any model.

11. Обработка полученных данных11. Processing of received data

По полученным значениям оптической плотности содержимого лунок, рассчитывают относительную интенсивность реакции тестировавшихся сывороток с фракциями белковых антигенов по отношению к эталону (в процентах). В качестве эталона использовали образец сыворотки со средними значениями иммунореактивности с используемыми в работе системами антигенов.Based on the obtained values of the optical density of the contents of the wells, calculate the relative intensity of the reaction of the tested sera with fractions of protein antigens in relation to the standard (in percent). A serum sample with average immunoreactivity values with antigen systems used in the work was used as a reference.

12. Интерпретация полученных данных12. Interpretation of data

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов не выходит за пределы от -15% до +40% по отношению к реакции референс-сыворотки (эталона), данную сыворотку относят к классификационной группе К1 (норма).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens does not go beyond -15% to + 40% with respect to the reaction of the reference serum (reference), this serum is assigned to the classification group K1 (normal).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов выходит за пределы группы К1, но составляет не менее -25% и не более +65% по отношению к реакции сыворотки-эталона, данную сыворотку относят к классификационной группе К2 (слабые отклонения).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens goes beyond the group K1, but is not less than -25% and not more than + 65% with respect to the reaction of the standard serum, this serum is assigned to the classification group K2 (weak deviations).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов выходит за пределы групп К1 и К2, но составляет не менее -45% и не более +100% по отношению к реакции сыворотки-эталона, данную сыворотку относят к классификационной группе КЗ (умеренные отклонения).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens goes beyond the groups K1 and K2, but is not less than -45% and not more than + 100% with respect to the reaction of the standard serum, this serum is assigned to the classification group KZ (moderate deviations).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов выходит за пределы групп K1, K2 и К3, но составляет не менее -65% и не более +150% по отношению к реакции сыворотки-эталона, данную сыворотку относят к классификационной группе К4 (значительные отклонения).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens goes beyond the groups K1, K2 and K3, but is not less than -65% and not more than + 150% with respect to the reaction of the reference serum, this serum is classified group K4 (significant deviations).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов выходит за пределы группы К4 по отрицательным значениям ниже -65%, а по положительным значениям находится в диапазоне от +150% до +200% по отношению к реакции сыворотки-эталона, данную сыворотку относят к классификационной группе К5 (резкие отклонения).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens goes beyond the K4 group by negative values below -65%, and by positive values it is in the range from + 150% to + 200% with respect to the reaction of the reference serum, this serum belongs to the classification group K5 (sharp deviations).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из фракций белковых антигенов выходит за пределы групп K1, K2, К3, К4 и К5, данную сыворотку относят к классификационной группе К6 (очень резкие, эксквизитные отклонения).If the intensity of the reaction of the test serum with any of the fractions of protein antigens goes beyond the groups K1, K2, K3, K4 and K5, this serum is assigned to the classification group K6 (very sharp, excision deviations).

Эмпирические данные, полученные при анализе результатов родов женщин, предварительно обследовавшихся с применением данного метода, позволили выявить следующие закономерности:The empirical data obtained in the analysis of the results of childbirth of women previously examined using this method revealed the following patterns:

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

В целом, риск неблагоприятного течения беременности и рождения детей с различными отклонениями повышался с увеличением классификационной группы (от К1 до К6). Однако внутри каждой группы часто наблюдались достоверные различия в прогнозе в зависимости от снижения или повышения уровней а-АТ.In general, the risk of an unfavorable course of pregnancy and the birth of children with various deviations increased with an increase in the classification group (from K1 to K6). However, within each group, significant differences in prognosis were often observed depending on a decrease or increase in a-AT levels.

Изменения уровня а-АТ к АСВР-С и МР-С могут вести к остановкам развития эмбриона и плода, бесплодию, различным изменениям со стороны внутренних органов новорожденных (врожденные пороки сердца, гипоплазии внутренних органов, гидронефроз почек и др.), различным анатомическим уродствам.Changes in the level of a-AT to ASBP-C and MR-C can lead to arrests in the development of the embryo and fetus, infertility, various changes in the internal organs of newborns (congenital heart defects, internal organ hypoplasia, renal hydronephrosis, etc.), various anatomical malformations .

Предложенный метод может применяться как независимо от других, так и в комплексе с другими известными методами обследования, в результате чего возможен более точный прогноз течения и исхода беременности.The proposed method can be used both independently of others and in combination with other known examination methods, as a result of which a more accurate prognosis of the course and outcome of pregnancy is possible.

Наиболее эффективно применение данного метода в динамике для более эффективного мониторинга течения беременности и контроля эффективности проводимой терапии. Если после проведенной терапии как в период предгравидарной подготовки, так и во время беременности наблюдается тенденция к нормализации показателей предложенного теста, можно сделать вывод о ее эффективности.The most effective application of this method in dynamics is to more effectively monitor the course of pregnancy and control the effectiveness of the therapy. If after the therapy both during pregravid preparation and during pregnancy there is a tendency to normalize the indicators of the proposed test, we can conclude its effectiveness.

При проведении данного анализа возможно определение а-АТ к одной или нескольким фракциям белковых антигенов, а также в комплексе с определением содержания а-АТ к различным очищенным антигенам, например, к основному белку миелина (ОБМ), белку S100. Наиболее оптимально, когда диагностическая система состоит из 3-5 тест-антигенов (фракции белковых антигенов, возможно, в сочетании с очищенными антигенами).When conducting this analysis, it is possible to determine a-AT to one or more fractions of protein antigens, as well as in combination with determining the content of a-AT to various purified antigens, for example, to the main myelin protein (MBP), protein S100. It is most optimal when the diagnostic system consists of 3-5 test antigens (fractions of protein antigens, possibly in combination with purified antigens).

Если при проведении анализа с использованием фракций белковых антигенов или в комплексе с различными очищенными антигенами наблюдаются нескоординированные или разнонаправленные изменения иммунореактивности по отношению к разным тест-антигенам (в качестве тест-антигена может выступать фракция белковых антигенов), то у пациента, как правило, наблюдаются различные эндокринно-метаболические расстройства. Повышение содержания исследуемых а-АТ, как правило, свидетельствует о наличии инфекционного, воспалительного или аллергического процесса. Снижение исследуемых показателей обычно указывает на наличие активной вирусной или вирусоподобной инфекции; также наблюдается при длительных контактах с различными вредными веществами при длительном приеме некоторых фармпрепаратов.If during the analysis using fractions of protein antigens or in combination with various purified antigens, uncoordinated or multidirectional changes in immunoreactivity are observed in relation to different test antigens (a fraction of protein antigens can act as a test antigen), then the patient usually has various endocrine and metabolic disorders. The increase in the content of the studied a-antibodies, as a rule, indicates the presence of an infectious, inflammatory or allergic process. A decrease in the studied parameters usually indicates the presence of an active viral or virus-like infection; also observed with prolonged contact with various harmful substances with prolonged use of certain pharmaceuticals.

Гипореактивность исследуемых эффективно коррегируется с помощью иммуномодулирующих средств в 82% случаев. Гиперреактивность данных а-АТ поддается коррегирующей терапии значительно хуже (р<0,01) и, как видно из таблиц прогноза, достоверно чаще приводит к рождению детей с пороками развития.Hyporeactivity of the studied is effectively corrected using immunomodulating agents in 82% of cases. The hyperreactivity of a-AT data lends itself to corrective therapy much worse (p <0.01) and, as can be seen from the prognosis tables, significantly more often leads to the birth of children with developmental defects.

ПРИМЕРЫEXAMPLES

Пример 1Example 1

Обследуемая Е.И., 22 года. Детей нет. Первая беременность 7 нед. Наследственность не отягощена.Examined E.I., 22 years old. No children. First pregnancy 7 weeks. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000003
Figure 00000003

Течение беременности и результаты родов: Беременность протекала без осложнений. Срочные роды, родился мальчик в удовлетворительном состоянии, рост 51 см, вес 3700 г, балльность по шкале Апгар - 9.The course of pregnancy and the results of childbirth: Pregnancy proceeded without complications. Urgent delivery, a boy was born in a satisfactory condition, height 51 cm, weight 3700 g, Apgar score - 9.

Пример 2Example 2

Обследуемая А.А., 22 года. Детей нет. Первая беременность 6 нед. Наследственность не отягощена.Examined A.A., 22 years old. No children. First pregnancy 6 weeks. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000004
Figure 00000004

Течение беременности и результаты родов: Беременность протекала без осложнений. Срочные роды, родился мальчик в удовлетворительном состоянии, рост 52 см, вес 3 400 г, по шкале Апгар - 9 баллов.The course of pregnancy and the results of childbirth: Pregnancy proceeded without complications. Urgent delivery, a boy was born in satisfactory condition, height 52 cm, weight 3 400 g, on the Apgar scale - 9 points.

Пример 3Example 3

Обследуемая М.А., 35 лет. Четвертая беременность, 12 нед. Двое детей, здоровы. Наследственность не отягощена.Examined M.A., 35 years old. Fourth pregnancy, 12 weeks. Two children are healthy. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000005
Figure 00000005

Течение беременности и результаты родов: Беременность осложнилась водянкой. Срочные роды, признаки гипотрофии и внутриутробного инфицирования, девочка рост 50 см, вес 2000 г, по шкале Апгар - 6-7 баллов.The course of pregnancy and the results of childbirth: Pregnancy was complicated by dropsy. An urgent delivery, signs of malnutrition and intrauterine infection, a girl 50 cm tall, weight 2000 g, on the Apgar scale - 6-7 points.

Пример 4Example 4

Обследуемая В.В., 28 лет. Вторая беременность, 6 нед. Есть ребенок, 6 лет, здоров. Наследственность не отягощена.Examined V.V., 28 years old. Second pregnancy, 6 weeks. There is a child, 6 years old, healthy. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000006
Figure 00000006

Течение беременности: прекратившаяся в развитии беременность на сроке 9-10 нед.The course of pregnancy: pregnancy terminated in development at a period of 9-10 weeks.

Пример 5Example 5

Обследуемая М.Е., 32 года. Третья беременность, 11 нед. Детей нет. Наследственность не отягощена.Examined M.E., 32 years old. Third pregnancy, 11 weeks. No children. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000007
Figure 00000007

Течение беременности, роды и катамнез. Беременность осложнилась нефропатией I степени. Срочные роды, девочка рост 50 см, вес 3100 г, по шкале Апгар - 7-8 баллов. Неврологическая симптоматика. В возрасте 1 года диагностирован детский церебральный паралич.The course of pregnancy, childbirth and follow-up. Pregnancy was complicated by nephropathy of the first degree. Urgent delivery, a girl 50 cm tall, weight 3100 g, on the Apgar scale - 7-8 points. Neurological symptoms. At the age of 1 year, cerebral palsy was diagnosed.

Пример 6Example 6

Обследуемая А.Л., 37 лет. Вторая беременность 8 нед., в анамнезе выкидыш. Наследственность не отягощена.Examined A.L., 37 years old. The second pregnancy is 8 weeks., A history of miscarriage. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста:Diagnostic Test Results:

Figure 00000008
Figure 00000008

Течение беременности. Результаты родов: Беременность осложнилась нефропатией II степени. Фетоплацентарная недостаточность. Преждевременные роды на сроке 32 нед. Вес 1200 г. Признаки гипотрофии, морфофункциональной незрелости, внутриутробного инфицирования.The course of pregnancy. Results of childbirth: Pregnancy was complicated by nephropathy of the II degree. Fetoplacental insufficiency. Preterm birth for a period of 32 weeks. Weight 1200 g. Signs of malnutrition, morphofunctional immaturity, intrauterine infection.

Пример 7Example 7

Обследуемая Т.С., 34 года. Один ребенок 2 лет с диагнозом: задержка моторного развития. Планирует беременность.Surveyed T.S., 34 years old. One 2-year-old child with a diagnosis of motor development retardation. She is planning a pregnancy.

Результаты диагностического теста ELI-P:ELI-P Diagnostic Test Results:

Figure 00000009
Figure 00000009

Течение беременности и результаты родов: Беременность осложнилась нефропатией III степени. Преждевременные искусственные роды на сроке 21 нед.; множественные пороки развития, несовместимые с жизнью.The course of pregnancy and the results of childbirth: Pregnancy was complicated by nephropathy of the III degree. Premature artificial birth for a period of 21 weeks; multiple malformations incompatible with life.

Пример 8Example 8

Обследуемая К.И., 30 лет. Первая беременность. Наследственность не отягощена.Examined K.I., 30 years old. First pregnancy. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста на 7 нед.:Diagnostic test results for 7 weeks:

Figure 00000010
Figure 00000010

Течение беременности, роды и катамнез. Беременность осложнилась нефропатией II степени. Срочные роды, мальчик рост 51 см, вес 3200 г. Диагносцирован врожденный порок - атрезия слухового прохода.The course of pregnancy, childbirth and follow-up. Pregnancy was complicated by nephropathy II degree. Urgent delivery, boy 51 cm tall, weight 3200 g. Congenital malformation - atresia of the ear canal was diagnosed.

Пример 9Example 9

Обследуемая Н.А., 28 лет. Первая беременность. Наследственность не отягощена.Examined N.A., 28 years old. First pregnancy. Heredity is not burdened.

Результаты диагностического теста на 8 нед.:Diagnostic test results for 8 weeks:

Figure 00000011
Figure 00000011

Течение беременности, роды и катамнез. Осложнений беременности не наблюдалось.The course of pregnancy, childbirth and follow-up. No pregnancy complications were observed.

Срочные роды, мальчик рост 52 см, вес 3350 г. Оценка по шкале Апгар 8-9 баллов. Катамнестическое наблюдение за ребенком в течение 1,5 лет не выявило какой-либо патологии.Urgent delivery, the boy is 52 cm tall, weight is 3350 g. Apgar score is 8-9 points. Follow-up observation of the child for 1.5 years did not reveal any pathology.

ТЕХНИКО-ЭКОНОМИЧЕСКАЯ И СОЦИАЛЬНАЯ ЗНАЧИМОСТЬ МЕТОДАTECHNICAL-ECONOMIC AND SOCIAL SIGNIFICANCE OF THE METHOD

Применение описанного метода для прогнозирования течения беременности и ее исхода может значительно снизить процент женщин с осложненным течением беременности за счет своевременного выявления групп риска и проведения адекватных лечебно-профилактических мероприятий, а также снизить процент рождения детей с пороками развития. Выполнение исследования может производится на основе иммуноферментного анализа сыворотки крови и безопасно для женщины и будущего ребенка.The use of the described method to predict the course of pregnancy and its outcome can significantly reduce the percentage of women with complicated pregnancy due to the timely identification of risk groups and adequate treatment and preventive measures, as well as reduce the birth rate of children with developmental defects. The study can be performed on the basis of an enzyme-linked immunosorbent assay for blood serum and is safe for women and unborn children.

Claims (2)

1. Способ прогнозирования течения беременности и определения степени риска нарушений развития эмбриона/плода у женщин детородного возраста до или во время беременности, включающий забор крови, получение сыворотки и определение иммунореактивности сывороточных аутоантител организма женщины, отличающийся тем, что иммунореактивность сывороточных аутоантител определяют к фракциям негистоновых анионных белков хроматина и мембранных белков мозга, при этом если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любой из указанных фракций белковых антигенов не выходит за пределы -15: +40% по отношению к реакции сыворотки, взятой за эталон, то исследуемую сыворотку относят к классификационной группе К1 - норме; если интенсивность реакции выходит за пределы группы К1, но составляет не менее - 25% и не более 65% - относят к группе К2 - слабым отклонениям; если выходит за пределы групп К1 и К2, но составляет не менее -45% и не более 100% - относят к группе К3 - умеренным отклонениям; если выходит за пределы групп К1, К2 и К3, но составляет не менее -65% и не более 150% - относят к группе К4 - значительным отклонениям; если выходит за пределы группы К4, по отрицательным значениям ниже -65%, а по положительным значениям находится в диапазоне от 150 до 200% - относят к группе К5 - резким отклонениям, а если выходит за пределы групп К1, К2, К3, К4 и К5 - относят к группе К6 - очень резким, эксквизитным отклонениям и прогнозируют риск неблагоприятного течения беременности и нарушений развития эмбриона/плода с увеличением классификационной группы от К1 до К6.1. A method for predicting the course of pregnancy and determining the degree of risk of embryo / fetal development disorders in women of childbearing age before or during pregnancy, including blood sampling, obtaining serum and determining the immunoreactivity of a woman’s serum autoantibodies, characterized in that the immunoreactivity of serum autoantibodies is determined for non-histone anionic chromatin proteins and membrane proteins of the brain, while if the intensity of the reaction of the test serum with any of the indicated protein fractions new antigens does not go beyond -15: + 40% with respect to the reaction of the serum taken as a standard, then the studied serum is assigned to the classification group K1 - normal; if the intensity of the reaction goes beyond the limits of the K1 group, but is not less than 25% and not more than 65%, they are referred to the K2 group as weak deviations; if it goes beyond the limits of groups K1 and K2, but is not less than -45% and not more than 100%, it is referred to group K3 as moderate deviations; if it goes beyond the limits of groups K1, K2 and K3, but is not less than -65% and not more than 150%, it is referred to group K4 as significant deviations; if it goes beyond the limits of the K4 group, negative values are below -65%, and by positive values it is in the range from 150 to 200% - it belongs to the K5 group - sharp deviations, and if it goes beyond the limits of the K1, K2, K3, K4 and K5 - belong to the K6 group - very sharp, exclusive deviations and predict the risk of adverse pregnancy and developmental disorders of the embryo / fetus with an increase in the classification group from K1 to K6. 2. Тест-система для определения иммунореактивности сывороточных аутоантител, содержащая стандартные плоскодонные планшеты для иммуноферментного анализа, отмывочный буфер, сыворотку - этанол, раствор конъюгата пероксидазы хрена с антителами к иммуноглобулинам IgG человека, раствор субстрата и раствор 0,2-0,4 М серной кислоты для остановки реакции, отличающаяся тем, что планшеты содержат сорбированные фракции негистоновых анионных белков хроматина ткани мозга (АСВР-С) и/или мембранных белков мозга (МР-С).2. A test system for determining the immunoreactivity of serum autoantibodies, containing standard flat-bottomed plates for enzyme-linked immunosorbent assay, washing buffer, serum-ethanol, a solution of horseradish peroxidase conjugate with antibodies to human IgG immunoglobulins, a substrate solution and a solution of 0.2-0.4 M sulfuric acid to stop the reaction, characterized in that the tablets contain sorbed fractions of non-histone anionic proteins of the brain tissue chromatin (ASBP-C) and / or membrane membrane proteins of the brain (MP-C).
RU2003100415/14A 2003-01-10 2003-01-10 Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects RU2233121C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2003100415/14A RU2233121C1 (en) 2003-01-10 2003-01-10 Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2003100415/14A RU2233121C1 (en) 2003-01-10 2003-01-10 Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2233121C1 true RU2233121C1 (en) 2004-07-27
RU2003100415A RU2003100415A (en) 2004-07-27

Family

ID=33413734

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2003100415/14A RU2233121C1 (en) 2003-01-10 2003-01-10 Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2233121C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2808266C1 (en) * 2022-07-14 2023-11-28 Общество с ограниченной ответственностью "Биофарм-тест" Method of predicting the course of pregnancy and determining the degree of risk of embryo/fetal development disorders and the birth of a child with various non-genetic pathology

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ТАРЕЕВА Т.Г. и др. Иммунокоррегирующая терапия при аутоиммунных нарушениях у беременных со смешанной урогенитальной инфекцией. Иммунология и иммунопатология системы Мать-Плод-Новорожденный (научные и практические аспекты). - М., 2001, с.107-110. СЕРОВА О.Ф. и др. Влияние иммунореактивности организма женщины на исход беременности, инфекции в акушерстве, гинекологии и перинатологии. - Саратов, 1999, с.153-155. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2808266C1 (en) * 2022-07-14 2023-11-28 Общество с ограниченной ответственностью "Биофарм-тест" Method of predicting the course of pregnancy and determining the degree of risk of embryo/fetal development disorders and the birth of a child with various non-genetic pathology

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2750035C2 (en) Methods and sets for diagnostics and risk stratification of patients with ischemia
US20120149042A1 (en) Methods for predicting outcome in traumatic brain injury
Meng et al. Use of phospholipase C zeta analysis to identify candidates for artificial oocyte activation: a case series of clinical pregnancies and a proposed algorithm for patient management
US11726100B2 (en) Method of treating large vessel occlusion stroke
JP2019518225A (en) Method and composition for predicting preterm birth
EP1979749A1 (en) A method for determining the effectiveness of a treatment for preeclampsia
RU2483311C1 (en) Diagnostic technique of preeclampsia in pregnant women with chronic arterial hypertension
Shopulotova et al. CHARACTERISTICS OF THE COURSE OF COMPLICATED GESTATIONAL PYELONEPHRITIS IN PREGNANTS
Kumar et al. Dynamic alteration in the vaginal secretory proteome across the early and mid-trimesters of pregnancy
RU2233121C1 (en) Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child&#39;s birth at different defects
RU2304783C1 (en) Method for predicting the development of gestosis
Soydinç et al. Maternal plasma prolidase, matrix metalloproteinases 1 and 13, and oxidative stress levels in pregnancies complicated by preterm premature rupture of the membranes and chorioamnionitis
RU2431844C1 (en) Method for prediction of foetal condition in pregnancy complicated by hydramnion and presence of chlamydia trachomatis igg antibodies in blood
US7399596B2 (en) Method for predicting pregnancy-induced hypertension
RU2287823C1 (en) Method for predicting gestosis
WO2021167098A1 (en) Quantitative assessment index for fetal growth restriction
Shields et al. Serum CK-BB isoenzyme in preterm infants with periventricular hemorrhage
RU2190849C1 (en) Method for screening testing in women for predicting flow and results of pregnancy
Goldenberg et al. Plasma alkaline phosphatase and pregnancy outcome
RU2629395C1 (en) Method for forecasting neurologic disorders in newborns with delay of internal development of fruit
RU2808266C1 (en) Method of predicting the course of pregnancy and determining the degree of risk of embryo/fetal development disorders and the birth of a child with various non-genetic pathology
Najeeb et al. Laminin Is a Promising Predictive Biomarker for Acute and Chronic Toxoplasmosis
RU2414715C1 (en) Method for prediction of cerebral affections in newborns
RU2682175C1 (en) Method of differential diagnostics of post-traumatic and idiopathic epilepsy
Miller et al. Fetal oculocerebrorenal syndrome of Lowe associated with elevated maternal serum and amniotic fluid alpha-fetoprotein levels