RU2224796C2 - Способ получения гетерологичного секреторного белка - Google Patents
Способ получения гетерологичного секреторного белка Download PDFInfo
- Publication number
- RU2224796C2 RU2224796C2 RU2002108118/13A RU2002108118A RU2224796C2 RU 2224796 C2 RU2224796 C2 RU 2224796C2 RU 2002108118/13 A RU2002108118/13 A RU 2002108118/13A RU 2002108118 A RU2002108118 A RU 2002108118A RU 2224796 C2 RU2224796 C2 RU 2224796C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- transglutaminase
- seq
- signal peptide
- amino acid
- secretory protein
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ секреторного продуцирования чужеродного белка, в частности трансглутаминазы, при помощи коринеформной бактерии. Гетерологичный секреторный белок, в частности трансглутаминазу, продуцируют способом, включающим использование конструкции для экспрессии гена, в которой последовательность гена целевого чужеродного белка, содержащего проструктурную часть, а именно последовательность гена протрансглутаминазы, лигирована ниже последовательности, кодирующей область сигнального пептида из коринеформной бактерии, введение указанной конструкции для экспрессии гена в коринеформную бактерию, культивирование трансформированной таким образом коринеформной бактерии и обработку секретированного из клетки белка протеазой или подобным ферментом для расщепления и удаления прочасти. Предлагаемое изобретение позволяет получить гетерологичный секреторный белок, в частности трансглутаминазу, используемую в пищевой промышленности, при изготовлении фармацевтических препаратов и в других областях. 23 з.п.ф-лы, 6 табл.
Description
Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)н
Claims (24)
1. Способ продуцирования гетерологичного секреторного белка, который включает культивирование коринеформной бактерии, содержащей генную экспрессирующую конструкцию, в которой нуклеотидная последовательность, кодирующая домен сигнального пептида, выделенный из коринеформной бактерии, присоединена ниже последовательности промотора, функционирующей в коринеформной бактерии, и нуклеотидная последовательность, кодирующая гетерологичный секреторный белок, содержащий проструктурную часть, присоединена ниже нуклеотидной последовательности, кодирующей указанный домен сигнального пептида, благодаря чему данная коринеформная бактерия продуцирует и секретирует указанный гетерологичный секреторный белок, а также последующее расщепление и удаление проструктурной части из указанного гетерологичного секреторного белка.
2. Способ по п.1, в котором гетерологичный секреторный белок является трансглутаминазой.
3. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из коринеформной бактерии.
4. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из Corynebacterium glutamicum.
5. Способ по п.4, в котором сигнальный пептид имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:29.
6. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из Corynebacterium ammoniagenes.
7. Способ по п.6, в котором сигнальный пептид имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:2.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором проструктурная часть соответствует проструктурной части трансглутаминазы из актиномицета.
9. Способ по п.8, в котором проструктурная часть имеет последовательность, соответствующую SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4.
10. Способ по п.8, в котором проструктурная часть включает замену, делецию, вставку или добавление, по крайней мере, одной аминокислоты или их комбинацию в аминокислотной последовательности, соответствующей SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4.
11. Способ по п.10, в котором аминокислотная последовательность проструктурной части является одной из аминокислотных последовательностей, соответствующих SEQ ID NO:30-SEQ ID NO:38.
12. Способ по п.1 или 2, в котором расщепление и удаление проструктурной части выполняют при помощи протеазы.
13. Способ по п.12, в котором коринеформная бактерия, продуцирующая и секретирующая гетерологичный секреторный белок, также продуцирует протеазу.
14. Способ по п.13, в котором расщепление и удаление проструктурной части выполняют при помощи протеазы и пептидазы.
15. Способ по п.14, в котором коринеформная бактерия, продуцирующая и секретирующая гетерологичный секреторный белок, также продуцирует протеазу и пептидазу.
16. Способ по п.12 или 14, в котором протеаза происходит из актиномицета.
17. Способ по п.12 или 14, в котором протеаза происходит из Strepromyces albogriseolus.
18. Способ по п.14, в котором пептидаза происходит из актиномицета.
19. Способ по п.14, в котором пептидаза происходит из Streptoverticillium mobaraense.
20. Способ по любому из пп.2-11, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой актиномицета.
21. Способ по п.20, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой Streptoverticillium mobaraense.
22. Способ по п.21, в котором трансглутаминаза имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:5.
23. Способ по п.20, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой Streptoverticillium cinnamoneum.
24. Способ по п.23, в котором трансглутаминаза имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:43.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28009899 | 1999-09-30 | ||
| JP11/280098 | 1999-09-30 | ||
| JP2000/194043 | 2000-06-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2224796C2 true RU2224796C2 (ru) | 2004-02-27 |
| RU2002108118A RU2002108118A (ru) | 2004-06-20 |
Family
ID=32170808
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002108118/13A RU2224796C2 (ru) | 1999-09-30 | 2000-09-29 | Способ получения гетерологичного секреторного белка |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2224796C2 (ru) |
-
2000
- 2000-09-29 RU RU2002108118/13A patent/RU2224796C2/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10941390B2 (en) | Protein deamidase | |
| RU2206611C2 (ru) | ФРАГМЕНТ ДНК, ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДА И ПОЛИПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ IL-1β ПРОТЕАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ | |
| Bordusa | Proteases in organic synthesis | |
| RU2264463C2 (ru) | Способ секреторной продукции белка | |
| Geiger et al. | Isolation of the Rhizobium leguminosarum NodF nodulation protein: NodF carries a 4'-phosphopantetheine prosthetic group | |
| KR20020038787A (ko) | 트랜스글루타미나제의 제조방법 | |
| BR1100634A (pt) | Processo para produzir toxina difteria ou proteìna crm, plasmìdeo ppx 3511, e, microorganismo das espécies corynebacterium diphteriae grupo c7 | |
| RU2396336C2 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia | |
| ID29136A (id) | Suatu proses untuk pembuatan asam karboksilat kiral dari nitril dengan menggunakan suatu nitrilase atau mikroorganisme yang terdiri dari suatu gen untuk nitrilase | |
| AU2017347016B2 (en) | Secretory production method for protein | |
| EP0857789A3 (en) | Ferulic acid decarboxylase | |
| RU2224796C2 (ru) | Способ получения гетерологичного секреторного белка | |
| BR0108883A (pt) | Sequência de ácido nucleico isolado, construção de ácido nucleico, vetor, microorganismo recombinante, e, processo para a preparação de ácidos carboxìlicos quirais ou aquirais | |
| DE60142206D1 (de) | Polyhydroxyalkanoat-Synthase und dieses Enzym kodierendes Gen | |
| AU2019256065A1 (en) | Method for secretory production of protein | |
| JP2018514231A (ja) | 増殖とタンパク質生成との分離 | |
| EP1138770A3 (en) | Polyhydroxyalkanoate synthase and gene encoding the same enzyme | |
| DE60142203D1 (de) | Polyhydroxyalkanoat-Synthase und dieses Enzym kodierendes Gen | |
| KR850005497A (ko) | Dna 및 그의 이용 | |
| CA2384122A1 (en) | Cyclic depsipeptide synthetase and gene thereof, and mass production system for cyclic depsipeptide | |
| Kanda et al. | Sense codon-dependent introduction of unnatural amino acids into multiple sites of a protein | |
| ATE469226T1 (de) | Polyhydroxyalkanoat-synthase und dieses enzym kodierendes gen | |
| KR960704058A (ko) | 복합 고정화 효소 조제물을 이용한 d-아미노산의 생산방법(process for producing d-amino acid by using composite immobilized enzyme preparation) | |
| KR850004275A (ko) | 프로모터 및 그의 이용 | |
| RU2002108118A (ru) | Способ получения гетерологичного секреторного белка |