RU2002108118A - Способ получения гетерологичного секреторного белка - Google Patents
Способ получения гетерологичного секреторного белкаInfo
- Publication number
- RU2002108118A RU2002108118A RU2002108118/13A RU2002108118A RU2002108118A RU 2002108118 A RU2002108118 A RU 2002108118A RU 2002108118/13 A RU2002108118/13 A RU 2002108118/13A RU 2002108118 A RU2002108118 A RU 2002108118A RU 2002108118 A RU2002108118 A RU 2002108118A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- transglutaminase
- amino acid
- signal peptide
- coryneform bacterium
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- 101700024603 ANNU Proteins 0.000 claims 12
- 101700034322 TGAS Proteins 0.000 claims 12
- 101700012968 tgl Proteins 0.000 claims 12
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims 11
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 claims 10
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 claims 10
- 230000003248 secreting Effects 0.000 claims 10
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 claims 9
- 241000186254 coryneform bacterium Species 0.000 claims 9
- 102000033147 ERVK-25 Human genes 0.000 claims 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims 6
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 claims 5
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 claims 4
- 108050005913 Proline-specific peptidase Proteins 0.000 claims 4
- 101700079760 EFCB Proteins 0.000 claims 3
- 101710005090 ERVFC1-1 Proteins 0.000 claims 3
- 101710013371 ERVS71-1 Proteins 0.000 claims 3
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 3
- 102400000368 Surface protein Human genes 0.000 claims 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 3
- 101700016463 pls Proteins 0.000 claims 3
- 102000037240 fusion proteins Human genes 0.000 claims 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims 2
- PZVMOEXKXXQZEE-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride;hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=CC=C1S(F)(=O)=O PZVMOEXKXXQZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000186145 Corynebacterium ammoniagenes Species 0.000 claims 1
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 claims 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N PMSF Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000520730 Streptomyces cinnamoneus Species 0.000 claims 1
- 241001495137 Streptomyces mobaraensis Species 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims 1
- 125000001235 proline group Chemical group [H]N1[C@@](C(=O)[*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims 1
Claims (30)
1. Способ продуцирования гетерологичного секреторного белка, который включает культивирование коринеформной бактерии, содержащей генную экспрессирующую конструкцию, в которой нуклеотидная последовательность, кодирующая домен сигнального пептида, выделенный из коринеформной бактерии, присоединена ниже последовательности промотора, функционирующей в коринеформной бактерии, и нуклеотидная последовательность, кодирующая гетерологичный секреторный белок, содержащий проструктурную часть, присоединена ниже нуклеотидной последовательности, кодирующей указанный домен сигнального пептида, благодаря чему данная коринеформная бактерия продуцирует и секретирует указанный гетерологичный секреторный белок, а также последующее расщепление и удаление проструктурной части из указанного гетерологичного секреторного белка.
2. Способ по п.1, в котором гетерологичный секреторный белок является трансглутаминазой.
3. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из коринеформной бактерии.
4. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из Corynebacterium glutamicum.
5. Способ по п.4, в котором сигнальный пептид имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:29.
6. Способ по п.1 или 2, в котором сигнальный пептид является сигнальным пептидом поверхностного белка из Corynebacterium ammoniagenes.
7. Способ по п.6, в котором сигнальный пептид имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:2.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором проструктурная часть соответствует проструктурной части трансглутаминазы из актиномицета.
9. Способ по п.8, в котором проструктурная часть имеет последовательность, соответствующую SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4.
10. Способ по п.8, в котором проструктурная часть включает замену, делецию, вставку или добавление, по крайней мере, одной аминокислоты или их комбинацию в аминокислотной последовательности, соответствующей SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4.
11. Способ по п.10, в котором аминокислотная последовательность проструктурной части является одной из аминокислотных последовательностей, соответствующих SEQ ID NO:30 - SEQ ID NO:38.
12. Способ по п.1 или 2, в котором расщепление и удаление проструктурной части выполняют при помощи протеазы.
13. Способ по п.12, в котором коринеформная бактерия, продуцирующая и секретирующая гетерологичный секреторный белок, также продуцирует протеазу.
14. Способ по п.13, в котором расщепление и удаление проструктурной части выполняют при помощи протеазы и пептидазы.
15. Способ по п.14, в котором коринеформная бактерия, продуцирующая и секретирующая гетерологичный секреторный белок, также продуцирует протеазу и пептидазу.
16. Способ по п.12 или 14, в котором протеаза происходит из актиномицета.
17. Способ по п.12 или 14, в котором протеаза происходит из Strepromyces albogriseolus.
18. Способ по п.14, в котором пептидаза происходит из актиномицета.
19. Способ по п.14, в котором пептидаза происходит из Streptomyces mobaraense.
20. Способ по любому из пп.2-11, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой актиномицета.
21. Способ по п.20, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой Streproverticillium mobaraense.
22. Способ по п.21, в котором трансглутаминаза имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:5.
23. Способ по п.20, в котором трансглутаминаза является трансглутаминазой Streptoverticillium cinnamoneum.
24. Способ по п.23, в котором трансглутаминаза имеет аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:43.
25. Способ секреторного получения зрелой трансглутаминазы, который включает продуцирование и секрецию слитого белка в коринеформной бактерии, причем указанный слитый белок представляет собой зрелую трансглутаминазу, присоединенную ниже сигнального пептида, выделенного из коринеформной бактерии.
26. Пролинспецифическая пептидаза, имеющая следующие свойства: (1) способность взаимодействовать, по крайней мере, с одним из нижеследующих пролинсодержащих пептидов и расщеплять его со стороны карбоксильного конца остатка пролина Ala-Ala-Pro-pNA, Ala-Phe-Pro-pNA, Phe-Arg-Ala-Pro-pNA (где pNA означает п-нитроанилид), (2) оптимальное значение рН 6,0-6,5, (3) устойчивость при рН 4-9, (4) оптимальная температура 25-30°С, (5) устойчивость при температуре ниже 20°С, (6) ингибирование активности фенилметилсульфонилфторидом и гидрохлоридом аминоэтилбензолсульфонилфторида, (7) изоэлектрическая точка, равная 10,2, (8) молекулярная масса около 50000 Да.
27. Пролинспецифическая пептидаза по п.26, которая происходит из актиномицета.
28. Пролинспецифическая пептидаза по п.26, который включает аминокислотную последовательность, соответствующую SEQ ID NO:40.
29. Пролинспецифическая пептидаза по п.26, который включает замену, делецию, вставку или добавление, по крайней мере, одной аминокислоты или их комбинацию в аминокислотной последовательности, соответствующей SEQ ID NO:40.
30. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид по п.28 или 29.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28009899 | 1999-09-30 | ||
| JP11/280098 | 1999-09-30 | ||
| JP2000/194043 | 2000-06-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2224796C2 RU2224796C2 (ru) | 2004-02-27 |
| RU2002108118A true RU2002108118A (ru) | 2004-06-20 |
Family
ID=32170808
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002108118/13A RU2224796C2 (ru) | 1999-09-30 | 2000-09-29 | Способ получения гетерологичного секреторного белка |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2224796C2 (ru) |
-
2000
- 2000-09-29 RU RU2002108118/13A patent/RU2224796C2/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7972829B2 (en) | Process for producing transglutaminase | |
| RU2206611C2 (ru) | ФРАГМЕНТ ДНК, ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДА И ПОЛИПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ IL-1β ПРОТЕАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ | |
| CA2337967A1 (en) | Recombinant uricase protein | |
| IL155245A (en) | Genes for serine protease close to DPPIV | |
| RU2001103131A (ru) | Уратоксидаза | |
| EP0889133A3 (en) | Process for producing microbial transglutaminase | |
| DK0870833T3 (da) | Gener for ultrathermostabile proteaser | |
| EP0857789A3 (en) | Ferulic acid decarboxylase | |
| BR0108883A (pt) | Sequência de ácido nucleico isolado, construção de ácido nucleico, vetor, microorganismo recombinante, e, processo para a preparação de ácidos carboxìlicos quirais ou aquirais | |
| Nuijens et al. | Fully enzymatic N→ C‐directed peptide synthesis using C‐terminal peptide α‐carboxamide to ester interconversion | |
| US8883444B2 (en) | Peptide synthesis using enzymatic activation and coupling | |
| RU2002108118A (ru) | Способ получения гетерологичного секреторного белка | |
| DE60142206D1 (de) | Polyhydroxyalkanoat-Synthase und dieses Enzym kodierendes Gen | |
| RU2224796C2 (ru) | Способ получения гетерологичного секреторного белка | |
| Uwe Klein et al. | The applicability of subtilisin Carlsberg in peptide synthesis | |
| KR850005497A (ko) | Dna 및 그의 이용 | |
| Shui-Tein et al. | Stable industrial protease catalyzed peptide bond formation in organic solvent. | |
| čeřovský et al. | Enzymatic semisynthesis of dicarba analogs of calcitonin | |
| CA2384122A1 (en) | Cyclic depsipeptide synthetase and gene thereof, and mass production system for cyclic depsipeptide | |
| WO2002010384A1 (fr) | Genes codant des proteines capables de regenerer la luciferine, adn recombine et methode de production de proteines capables de regenerer la luciferine | |
| MX9306021A (es) | Nueva dipeptidil amino peptidasa aislada del moho del limo celular dictyostelium discoideum y metodopara su aislamiento. | |
| EP1154021A3 (en) | Polyhidroxyalkanoate synthase and gene encoding the same enzyme | |
| Shimokata et al. | Substrate recognition by mitochondrial processing peptidase toward the malate dehydrogenase precursor | |
| MY125880A (en) | Temperature-sensitive dtsr gene | |
| Miyazawa et al. | Utilization of proteases from Aspergillus species for peptide synthesis via the kinetically controlled approach |