RU2200324C2 - Method for immune serum sorption - Google Patents
Method for immune serum sorption Download PDFInfo
- Publication number
- RU2200324C2 RU2200324C2 RU2000120649A RU2000120649A RU2200324C2 RU 2200324 C2 RU2200324 C2 RU 2200324C2 RU 2000120649 A RU2000120649 A RU 2000120649A RU 2000120649 A RU2000120649 A RU 2000120649A RU 2200324 C2 RU2200324 C2 RU 2200324C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sorption
- serum
- immunosorption
- carried out
- specific
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве специфических, высокоактивных диагностических сывороток. The invention relates to biotechnology and can be used in the production of specific, highly active diagnostic sera.
Сыворотки крови, полученные иммунизацией животных, как правило, недостаточно специфичны, поэтому необходима сорбция неспецифических антител, дающих перекрестные реакции с гетерологичными антигенами. Blood serum obtained by immunization of animals, as a rule, is not specific enough, therefore, sorption of nonspecific antibodies that give cross-reactions with heterologous antigens is necessary.
Известно использование в качестве адсорбентов корпускулярных антигенов [Производство бактериальных препаратов и диагностика особо опасных инфекций (Сб. науч. раб. противочумных учреждений). Саратов, 1966, с. 143-169]. It is known to use corpuscular antigens as adsorbents [Production of bacterial preparations and diagnosis of especially dangerous infections (Collection of scientific works. Anti-plague institutions). Saratov, 1966, p. 143-169].
Для получения специфической сыворотки против V-, W-антигенов чумного микроба используют γ-глобулиновую фракцию лошадиной чумной агглютинирующей сыворотки, адсорбированной ацетонвысушенными клетками штамма Оттена 556 и фракцией 1. Чувствительность полученной сыворотки при выявлении V- и W-антигенов методом преципитации составляет 1,5-3•109 м.к./мл.To obtain specific serum against plague microbe V-, W-antigens, the γ-globulin fraction of horse plague agglutinating serum adsorbed by acetone-dried cells of Otten strain 556 and fraction 1 is used. The sensitivity of the obtained serum when detecting V- and W-antigens by the precipitation method is 1.5 -3 • 10 9 mk / ml.
Противочумные агглютинируюшие сыворотки от лошадей, иммунизированных штаммом ЕВ, имеют титры к Y.pestis EV 1:320 -1:640, к микробам псевдотуберкулеза грызунов - 1:5120, к штаммам семейства Enterobacteriacea 1:80 - 1: 1280. Для получения противочумных люминесцирующих антител проводят адсорбцию исходной сыворотки. В качестве адсорбентов используют высушенные ацетоном микробы шероховатых штаммов дизентерии Зонне и псевдотуберкулеза грызунов, выращенные при 28oС.Anti-plague agglutinating sera from horses immunized with the EB strain have titers to Y. pestis EV 1: 320 -1: 640, to rodent pseudotuberculosis microbes - 1: 5120, to Enterobacteriacea strains 1:80 - 1: 1280. To obtain anti-plague luminescent antibodies carry out the adsorption of the original serum. As adsorbents, acetone-dried microbes of rough strains of Sonne dysentery and rodent pseudotuberculosis, grown at 28 o C., are used.
Адсорбцию нативной сыворотки проводят последовательно под контролем реакции агглютинации. Проводят 1-2 насыщения 5-10 мл сухих микробных тел на 1 мл сыворотки. После первой адсорбции титр сыворотки, агглютинировавшей микробы дизентерии Зонне, снижается с 1:1280 до 1:320, после второй - до 1:40. Титр сыворотки к штамму ЕВ почти не изменяется. The adsorption of native serum is carried out sequentially under the control of the agglutination reaction. Spend 1-2 saturation of 5-10 ml of dry microbial bodies per 1 ml of serum. After the first adsorption, the titer of the serum agglutinating microbes of Sonne dysentery decreases from 1: 1280 to 1: 320, after the second - to 1:40. The titer of serum to strain EB is almost unchanged.
Культурой псевдотуберкулеза сыворотку адсорбируют 2-3 раза в количестве 100 мг/мл для одного насыщения. Смесь выдерживают 2 ч при 37oС и центрифугируют при 5000 об/мин в течение 45 мин. После адсорбции противочумная сыворотка агглютинирует культуру EV, выращенную при 37oС в прежнем титре 1:320, в то время как титр к микробам EV, выращенным при 28oС, снижается до 1:80-1: 160, а к микробам псевдотуберкулеза грызунов - до 1:40.A pseudotuberculosis culture adsorbs serum 2-3 times in an amount of 100 mg / ml for one saturation. The mixture was incubated for 2 hours at 37 ° C. and centrifuged at 5000 rpm for 45 minutes. After adsorption, anti-plague serum agglutinates the EV culture grown at 37 ° C in the previous titer of 1: 320, while the titer for EV microbes grown at 28 ° C decreases to 1: 80-1: 160, and to rodent pseudotuberculosis microbes - until 1:40.
Процесс адсорбции нативной сыворотки корпускулярными гетерологичными антигенами очень трудоемок, требует приготовления культуры микробов и приводит к потере активности истощенной сыворотки. The process of adsorption of native serum by particulate heterologous antigens is very time-consuming, requires the preparation of a microbial culture and leads to a loss of depleted serum activity.
Известен способ сорбции диагностических поливалентных сывороток для идентификации жгутикового антигена Escherichia coli [А.с. СССР N 1338153, А 61 К 39/02, от 23.09.91, БИ 35]. A known method of sorption of diagnostic polyvalent sera to identify the flagellar antigen of Escherichia coli [A.S. USSR N 1338153, A 61 K 39/02, dated 23.09.91, BI 35].
По этому способу сыворотки освобождают адсорбцией от гетерологичных антител с помощью штаммов той же серогруппы, которую использовали для иммунизации животных. In this method, serum is freed by adsorption from heterologous antibodies using strains of the same serogroup that was used to immunize animals.
Преимуществом способа является получение адсорбента для одновременного удаления соматических и гетерологичных Н-антител. An advantage of the method is the production of an adsorbent for the simultaneous removal of somatic and heterologous H antibodies.
Тем не менее, способ трудоемок, не исключается и процесс адсорбции гомологичных антител. However, the method is time-consuming, the process of adsorption of homologous antibodies is not excluded.
Наиболее близким к заявляемому является способ иммуносорбции сибиреязвенных сывороток [Профилактика чумы и других природно-очаговых инфекций (тезисы докладов Всесоюзной научной конференции) т.2, Ставрополь, 1983, с. 81-82]. Closest to the claimed is a method of immunosorption of anthrax serum [Prevention of plague and other natural focal infections (abstract of the reports of the All-Union Scientific Conference) v.2, Stavropol, 1983, p. 81-82].
Согласно этому способу повышение специфичности антиспоровых сибиреязвенных сывороток осуществляют иммуносорбцией неспецифических антител водорастворимыми гетерологичными антигенами, иммобилизованными на твердофазном носителе. According to this method, the increase in the specificity of antispore anthrax serums is carried out by immunosorption of nonspecific antibodies with water-soluble heterologous antigens immobilized on a solid-phase carrier.
В качестве иммуносорбента используют полиакриламидный гель с иммобилизованными термостабильными споровыми антигенами аэробных спорообразующих сапрофитов. Иммобилизацию осуществляют полимеризацией концентрированного раствора антигена в полиакриламидном геле, с последующим измельчением и отмывкой. As an immunosorbent, a polyacrylamide gel with immobilized thermostable spore antigens of aerobic spore-forming saprophytes is used. Immobilization is carried out by polymerization of a concentrated solution of antigen in a polyacrylamide gel, followed by grinding and washing.
В эксперименте по иммуносорбции используют иммуноглобулины с концентрацией белка 25 мг/мл. Иммуносорбцию проводят дважды. Специфичность адсорбированных иммуноглобулинов проверяют иммунофлуоресцентным методом. An immunosorption experiment uses immunoglobulins with a protein concentration of 25 mg / ml. Immunosorption is carried out twice. The specificity of adsorbed immunoglobulins is checked by the immunofluorescence method.
В эксперименте было исследовано 18 штаммов сапрофитов. Результаты исследования показали, что нативные иммуноглобулины проявляли неспецифические свойства с 12 штаммами сапрофитов. После первой иммуносорбции неспецифические результаты выявлялись в 3-4 случаях. Повторная иммуносорбция позволила полностью избавиться от неспецифических результатов. In the experiment, 18 strains of saprophytes were studied. The results of the study showed that native immunoglobulins showed nonspecific properties with 12 strains of saprophytes. After the first immunosorption, nonspecific results were detected in 3-4 cases. Repeated immunosorption allowed to completely get rid of non-specific results.
После каждой иммуносорбции исследуемого препарата иммуносорбент регенерируют отмывкой 10-кратным объемом 3 М роданида калия и 0,9% раствором хлористого натрия. Регенерированный иммуносорбент используют в экспериментах не менее 10-12 раз без существенного снижения сорбционной емкости. After each immunosorption of the test drug, the immunosorbent is regenerated by washing with a 10-fold volume of 3 M potassium rhodanide and a 0.9% sodium chloride solution. The regenerated immunosorbent is used in experiments at least 10-12 times without a significant decrease in sorption capacity.
Достоинства способа-прототипа заключаются в возможности регенерации и повторного использования иммуносорбентов. The advantages of the prototype method are the possibility of regeneration and reuse of immunosorbents.
Недостатками способа-прототипа является сложность подготовки иммуносорбентов, использование дорогостоящих импортных, канцерогенных реактивов, недостаточная сорбционная емкость, что вызывает необходимость 2-кратной сорбции препарата. The disadvantages of the prototype method is the difficulty of preparing immunosorbents, the use of expensive imported, carcinogenic reagents, insufficient sorption capacity, which necessitates a 2-fold sorption of the drug.
Технический результат изобретения заключается в упрощении процесса сорбции иммунных сывороток за счет подготовки иммуносорбента: сокращение этапов сорбции и процесса выделения жидкой фазы при сохранении активности нативной сыворотки. The technical result of the invention is to simplify the process of sorption of immune sera due to the preparation of an immunosorbent: reducing the stages of sorption and the process of isolating the liquid phase while maintaining the activity of native serum.
Технический результат изобретения достигается тем, что иммуносорбцию неспецифических антител осуществляют водорастворимыми гетерологичными антигенами, иммобилизованными на твердофазных носителях, в качестве которых используют алюмосиликат с магнитными свойствами, модифицированный полиглюкином, активированный вторичным алкилсульфатом натрия, процесс сорбции проводят однократно. The technical result of the invention is achieved by the fact that the immunosorption of non-specific antibodies is carried out by water-soluble heterologous antigens immobilized on solid-phase carriers, which are aluminosilicate with magnetic properties, modified with polyglucin, activated with sodium secondary alkyl sulfate, the sorption process is carried out once.
Существенными отличительными признаками заявляемого способа по отношению к прототипу являются использование в качестве твердофазного носителя алюмосиликата с магнитными свойствами, модифицированного полиглюкином, активированного вторичным алкилсульфатом натрия, однократное проведение иммуносорбции. Salient features of the proposed method in relation to the prototype are the use as a solid-phase carrier of aluminosilicate with magnetic properties, modified by polyglucin, activated by secondary sodium alkyl sulfate, a single immunosorption.
Известен способ получения иммуносорбента на основе смеси алюмосиликата с магнитным порошком, модифицированной полиглюкином, активированной вторичным алкилсульфатом натрия с иммобилизованными лигандами [Патент РФ 2138813, G 01 N 33/543, А 61 К 39/385 // G 01 N 33/531, 33/551, 33/569, С 12 N 11/14, от 27.09.99, БИ 27]. A known method of producing an immunosorbent based on a mixture of aluminosilicate with magnetic powder modified with polyglucin, activated with sodium alkyl alkyl sulfate with immobilized ligands [RF Patent 2138813, G 01 N 33/543, A 61 K 39/385 // G 01 N 33/531, 33 / 551, 33/569, C 12 N 11/14, dated 09.27.99, BI 27].
Алюмосиликат является мелкодисперсным наполнителем, представляющим собой комплексные анионы алюминия и кремния с избыточным отрицательным зарядом, который компенсирован щелочноземельными металлами. Носитель обладает повышенными адгезионными свойствами по сравнению с полиакриламидом и силохромами, что позволяет смешивать его с магнитным порошком без предварительной подготовки последнего. Aluminosilicate is a finely divided filler, which is a complex anion of aluminum and silicon with an excess negative charge, which is compensated by alkaline earth metals. The carrier has improved adhesive properties compared to polyacrylamide and silochrome, which allows it to be mixed with magnetic powder without first preparing the latter.
Модифицирование носителя полиглюкином обеспечивает повышение интенсивности последующей активации носителя вторичным алкилсульфатом натрия, увеличение специфической емкости сорбента и его чувствительности. Modification of the carrier with polyglucin provides an increase in the intensity of subsequent activation of the carrier with sodium secondary alkyl sulfate, an increase in the specific capacity of the sorbent and its sensitivity.
В процессе сорбции иммунной сыворотки использование этого иммуносорбента позволяет не только освободить препарат от неспецифических антител на одном этапе, но и сохранить первоначальную активность нативной сыворотки. In the process of sorption of immune serum, the use of this immunosorbent allows not only to release the drug from non-specific antibodies at one stage, but also to preserve the original activity of native serum.
Магнитные свойства иммуносорбента позволяют упростить процесс отделения его от жидкой фазы в магнитном поле и исключить процесс длительного центрифугирования. The magnetic properties of the immunosorbent make it possible to simplify the process of separating it from the liquid phase in a magnetic field and to exclude the process of prolonged centrifugation.
Используемые иммуносорбенты, так же как и в прототипе, возможно регенерировать и использовать 10-12 раз. Used immunosorbents, as well as in the prototype, it is possible to regenerate and use 10-12 times.
Таким образом, использование доступных отечественных материалов, простота технологии, сохранение активности иммунных сывороток обуславливают возможность использования заявляемого способа в массовым производстве высокоспецифичных, активных диагностических сывороток. Thus, the use of available domestic materials, the simplicity of the technology, the preservation of the activity of immune sera determine the possibility of using the proposed method in the mass production of highly specific, active diagnostic sera.
Возможность практического использования заявляемого способа иллюстрируется примерами его конкретного выполнения. The possibility of practical use of the proposed method is illustrated by examples of its specific implementation.
Пример 1. Исследовали иммунную сыворотку от кроликов, иммунизированных комплексным водорастворимым антигеном возбудителя бруцеллеза. В иммунофлуоресцентном анализе нативные иммуноглобулины при активности 1:800 проявляли неспецифическую активность со штаммом Fr.tularensis Schu. Были подготовлены магноиммунносорбенты: к 2,5 г алюмосиликатного носителя добавляли 25 мл дистиллированной воды, 15 мл 6%-ного раствора полиглюкина и 0,5 г магнитного порошка. Перемешивали и проводили гелеобразование в течение 1 ч при температуре 22-26oС. Прокаливали в течение 20-30 мин при температуре 110-130oС, измельчали и методом рассева выделяли фракции с размером частиц 80-120 микрон.Example 1. Investigated the immune serum from rabbits immunized with a complex water-soluble antigen of the causative agent of brucellosis. In an immunofluorescence assay, native immunoglobulins at an activity of 1: 800 showed non-specific activity with the Fr.tularensis Schu strain. Magnoimmunosorbents were prepared: 25 ml of distilled water, 15 ml of a 6% polyglucin solution and 0.5 g of magnetic powder were added to 2.5 g of aluminosilicate support. They were mixed and gelation was carried out for 1 h at a temperature of 22-26 o C. Annealed for 20-30 minutes at a temperature of 110-130 o C, crushed and fractions with a particle size of 80-120 microns were isolated by sieving.
Для химического активирования данных магносорбентов нами разработано модифицирование твердофазных носителей вторичным алкилсульфатом натрия, для чего к 0,2 г магносорбента добавляли 1,5 мл 0,1 М ФСБ рН 7,2-7,4 и 0,1 мл вторичного алкилсульфата натрия, инкубировали 1 ч в термостате. Иммобилизацию антигенов на поверхности магносорбентов проводили следующим образом: к активированному сорбенту добавляли по 1 мл туляремийных водорастворимых антигенов с концентрацией белка 3,5 мг/мл, инкубировали в течение 1-2 ч, при температуре 37oС. Промывали 0,9%-ным раствором хлорида натрия до "0" экстинции на спектрофотометре и исследовали в иммуноферментном анализе (ИФА). Иммуносорбцию проводили, приливая 10 мл сыворотки бруцеллезной к 1 г соответствующего сорбента, инкубировали в термостате при температуре (37±1)oС в течение 16 ч и в холодильнике при температуре 4-5oС. После инкубации, придерживая постоянным магнитом, сливали сыворотку и исследовали в РНИФ. До сорбции бруцеллезная сыворотка давала перекрест со штаммом Fr.tulsrensis Schu, после сорбциии сыворотка была специфична без потери активности. Сорбент регенерировали 3 М раствором калия роданистого и отмывали 0,1 М раствором фосфатно-солевого буфера рН 7,4.For the chemical activation of these magnesorbents, we developed the modification of solid-phase supports with sodium secondary alkyl sulfate, for which 1.5 ml of 0.1 M FSB pH 7.2-7.4 and 0.1 ml of secondary sodium alkyl sulfate were added to 0.2 g of magnetosorbent, incubated 1 hour in the thermostat. The antigens were immobilized on the surface of the magnetic sorbents as follows: 1 ml of tularemia water-soluble antigens with a protein concentration of 3.5 mg / ml was added to the activated sorbent, incubated for 1-2 hours, at a temperature of 37 o C. Washed with 0.9% a solution of sodium chloride to "0" extinction on a spectrophotometer and examined in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunosorption was carried out by pouring 10 ml of brucellosis serum to 1 g of the corresponding sorbent, incubated in a thermostat at a temperature of (37 ± 1) o C for 16 hours and in a refrigerator at a temperature of 4-5 o C. After incubation, holding a permanent magnet, drained the serum and investigated at the RNIF. Before sorption, brucellosis serum cross-linked with the Fr.tulsrensis Schu strain; after sorption, serum was specific without loss of activity. The sorbent was regenerated with a 3 M solution of rhodanide potassium and washed with a 0.1 M solution of phosphate-saline buffer pH 7.4.
Пример 2. Выполняли аналогично примеру 1, за исключением того, что исследовали иммунную сыворотку от баранов, иммунизированных водорастворимым антигеном возбудителя сибирской язвы 34 F2 Sterne. Магноиммуносорбенты готовили с гетерологичными водорастворимыми антигенами B.cereus 8, 104, 111, 250. Было исследовано 20 штаммов-сапрофитов. Нативная сыворотка в рабочем разведении (1: 3200) проявляла неспецифические свойства с 6 штаммами B.cereus, с 3 штаммами B-subtilis и 3 штаммами В.mеgаtеrium. Иммуносорбция позволила избавиться от неспецифических компонентов при сохранении активности.Example 2. Carried out analogously to example 1, except that examined the immune serum from sheep, immunized with a water-soluble antigen of anthrax 34 F 2 Sterne. Magnoimmunosorbents were prepared with heterologous water-soluble B.cereus antigens 8, 104, 111, 250. 20 saprophytic strains were studied. Native serum in working dilution (1: 3200) showed nonspecific properties with 6 strains of B.cereus, with 3 strains of B-subtilis and 3 strains of B. megatrium. Immunosorption allowed to get rid of non-specific components while maintaining activity.
Пример 3. Выполняли аналогично примеру 1, за исключением того, что исследовали иммунную сыворотку от кроликов, иммунизированных водорастворимым антигеном возбудителя туляремии. В реакции непрямой геммаглютинации (РНГА) нативные иммуноглобулины при активности 1:320 проявляли неспецифическую активность со штаммом Bг.abortus 19. Example 3. Carried out analogously to example 1, except that investigated the immune serum from rabbits immunized with a water-soluble antigen of the tularemia pathogen. In the reaction of indirect hemmagglutination (RNGA), native immunoglobulins at an activity of 1: 320 showed nonspecific activity with strain B. abortus 19.
Магноиммуносорбенты готовили с комплексными гетерологичными водорастворимыми антигенами Br.abortus, адсорбировали аналогично вышеописанному, после сорбции сыворотка была специфична без потери активности. Magnoimmunosorbents were prepared with complex heterologous water-soluble Br.abortus antigens, adsorbed in the same way as described above, after sorption, the serum was specific without loss of activity.
Адсорбированные сыворотки были использованы для получения эритроцитарных, иммуноферментных и иммунофлуоресцентных диагностических препаратов. Adsorbed sera were used to obtain erythrocyte, enzyme immunoassay and immunofluorescence diagnostic drugs.
Таким образом, преимущества заявляемого способа, перед способом прототипа проявляются в значительном упрощении процесса иммуносорбции нативных иммунных сывороток при достижении необходимой специфичности и сохранении активности. Thus, the advantages of the proposed method over the prototype method are manifested in a significant simplification of the process of immunosorption of native immune sera while achieving the necessary specificity and maintaining activity.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000120649A RU2200324C2 (en) | 2000-08-01 | 2000-08-01 | Method for immune serum sorption |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000120649A RU2200324C2 (en) | 2000-08-01 | 2000-08-01 | Method for immune serum sorption |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2000120649A RU2000120649A (en) | 2002-07-20 |
| RU2200324C2 true RU2200324C2 (en) | 2003-03-10 |
Family
ID=20238751
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000120649A RU2200324C2 (en) | 2000-08-01 | 2000-08-01 | Method for immune serum sorption |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2200324C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114206214A (en) * | 2019-03-26 | 2022-03-18 | 禧尔公司 | Compositions, methods and systems for protein corona analysis of biological fluids and uses thereof |
-
2000
- 2000-08-01 RU RU2000120649A patent/RU2200324C2/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Профилактика чумы и других природно-очаговых инфекций. Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции. Ставрополь, 1983, т. 2, с. 81-82. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114206214A (en) * | 2019-03-26 | 2022-03-18 | 禧尔公司 | Compositions, methods and systems for protein corona analysis of biological fluids and uses thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kumar et al. | Affinity fractionation of lymphocytes using a monolithic cryogel | |
| EP0330688B1 (en) | Detection methods | |
| CA2060232A1 (en) | Assay for lyme disease | |
| EP2904394A1 (en) | Multi-analyte assay | |
| CA2076592A1 (en) | Method, test device and kit for assay of specific binding ligand using controlled flow through filtration membrane | |
| US5399484A (en) | Use of blocking protein with high pH extraction in method to determine a microorganism associated with periodontal disease and kit useful therefor | |
| RU2200324C2 (en) | Method for immune serum sorption | |
| Mattiasson | [60] Affinity immobilization | |
| JPH0658937A (en) | Immunochemical measuring method for specimen to be checked | |
| RU2290641C1 (en) | Method for carrying out immunoenzyme analysis | |
| JP2667447B2 (en) | Method for immobilizing cells on a solid surface | |
| JPH11133029A (en) | Method and reagent for analyzing colon bacillus o157 | |
| JPH06100603B2 (en) | Method for quantifying specific bacterial polypeptide and antibody thereto | |
| RU2478970C1 (en) | Method for immunofluorescent detection of protective antigen of anthrax agent | |
| JPS60186759A (en) | Chromogen carrier immunoassay | |
| JP4022005B2 (en) | Simple antibody test method and test kit | |
| JPWO2002065131A1 (en) | Methods and reagents for detecting Vibrio bacteria and antibodies used therefor | |
| RU2614960C1 (en) | Method for bifunctional affinity sorbent preparation for chromatographic purification of fluorescent immunoglobulins | |
| SU1125549A1 (en) | Immunosorbent producing method | |
| JP4280021B2 (en) | Simple assay for enterohemorrhagic Escherichia coli | |
| JP4107849B2 (en) | Anthrax detection reagent | |
| Viljoen et al. | Theoretical aspects of the enzyme-linked immunosorbent assay technique and its use in the detection of Cowdria ruminantium antigen and antibody in reacting animals | |
| RU2271540C2 (en) | Method for production of biomagnetic immunosorbent for bacterial antigen detection (variants) | |
| SU1642399A1 (en) | Method for determination of antibodies class igm for corantigen of hepatitis b virus | |
| RU2056057C1 (en) | Method of preparing immobilized immunoglobulin on the solid phase |