RU2197953C1 - Agent normalizing skin tissue cell function - Google Patents

Agent normalizing skin tissue cell function Download PDF

Info

Publication number
RU2197953C1
RU2197953C1 RU2001134287A RU2001134287A RU2197953C1 RU 2197953 C1 RU2197953 C1 RU 2197953C1 RU 2001134287 A RU2001134287 A RU 2001134287A RU 2001134287 A RU2001134287 A RU 2001134287A RU 2197953 C1 RU2197953 C1 RU 2197953C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
lactic acid
acid bacteria
skin
skin tissue
hydrolysis
Prior art date
Application number
RU2001134287A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Р.В. Корнеева
Т.П. Клюшник
М.В. Безруков
Original Assignee
Открытое акционерное общество "Русская линия"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Открытое акционерное общество "Русская линия" filed Critical Открытое акционерное общество "Русская линия"
Priority to RU2001134287A priority Critical patent/RU2197953C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2197953C1 publication Critical patent/RU2197953C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, cosmetology, dermatology. SUBSTANCE: invention relates to curative agent exhibiting beneficial effect on functions of skin cells. Agent comprises combination of lactic acid bacteria cellular wall product obtained by hydrolysis with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans excreted by growing lactic acid bacteria in cultural medium as active component influencing on biosynthetic and proliferative activity of skin tissue fibroblasts. Agent normalizes biosynthetic and proliferative activity of skin tissue fibroblasts and it is effective for normal and dry skin care, especially, in symptoms of skin ageing and wilting. EFFECT: enhanced effectiveness and valuable properties of agent. 1 tbl, 2 dwg

Description

Изобретение относится к области косметологии и дерматологии и касается лечебных средств, благотворно влияющих на функционирование клеток ткани кожи. The invention relates to the field of cosmetology and dermatology and relates to therapeutic agents that have a beneficial effect on the functioning of skin tissue cells.

Кожа представляет собой наружный защитный покров тела, выполняющий многообразные физиологические функции. Она защищает тело от вредных внешних влияний, регулирует температуру тела, препятствует проникновению микробов и вырабатывает защитные вещества против инфекционных агентов, выполняет роль выделительного органа, участвует в процессе дыхания и в общем обмене веществ и пр. The skin is the outer protective cover of the body, performing a variety of physiological functions. It protects the body from harmful external influences, regulates body temperature, prevents the penetration of microbes and produces protective substances against infectious agents, acts as an excretory organ, participates in the breathing process and in the general metabolism, etc.

В результате неблагоприятных внешних воздействий, заболеваний, старения функциональная активность клеток кожи может снижаться, что влечет за собою и нежелательные изменения внешнего вида кожных покровов, проявляющиеся в возникновении косметических дефектов. As a result of adverse external influences, diseases, aging, the functional activity of skin cells may decrease, which entails undesirable changes in the appearance of the skin, manifested in the appearance of cosmetic defects.

Для устранения косметических недостатков кожи и для их профилактики используют разнообразные методы - водные и тепловые процедуры, массаж, физиотерапию, хирургические методы, применение косметических средств разного механизма и различной направленности действия, предпочтительно на основе природных продуктов растительного, животного иди минерального происхождения [Д.Ласс. Уход за кожей лица. - М.: Аквариум - 1994, - 288 с.]. A variety of methods are used to eliminate cosmetic skin imperfections and to prevent them - water and thermal procedures, massage, physiotherapy, surgical methods, the use of cosmetics of different mechanisms and different directions of action, preferably based on natural products of plant, animal or mineral origin [D. Lass . Facial skin care. - M .: Aquarium - 1994, - 288 p.].

Состав конкретных рецептур косметических средств прямо зависит от характера косметического дефекта, его выраженности, состояния кожных покровов, индивидуальных особенностей организма пациента, от других обстоятельств. The composition of specific formulations of cosmetics directly depends on the nature of the cosmetic defect, its severity, condition of the skin, the individual characteristics of the patient’s body, and other circumstances.

Поскольку состояние кожных покровов определяется общим состоянием организма, наряду с чисто косметическими процедурами рекомендуются обычно и процедуры общеукрепляющего характера, а иногда даже прием лекарственных препаратов. Since the condition of the skin is determined by the general condition of the body, along with purely cosmetic procedures, generally restorative procedures, and sometimes even taking medications, are usually recommended.

Одни косметические средства предназначены для устранения видимых проявлений дефектов кожи, например высушивающие или шелушащие маски для борьбы с угревой сыпью, другие используют для воздействия на промежуточные звенья патологического процесса, в том числе для нормализации обменных процессов в ткани кожи. Some cosmetics are designed to eliminate visible manifestations of skin defects, for example, drying or peeling masks to combat acne, others are used to influence the intermediate parts of the pathological process, including normalization of metabolic processes in skin tissue.

Известны многочисленные косметические средства, улучшающие обмен веществ в ткани кожи и включающие комплексы витаминов ["Косметика. Потребитель", 1998 г. , 3, стр. 8], регулирующие водный обмен в ткани кожи и обладающие гидратирующим действием, содержащие растительные масла, экстракты алоэ и ромашки ["Косметика и парфюмерия", 2001 г., 15, стp. 6l-63, 57], стимулирующие регенеративные процессы при повреждениях клеток кожи за счет присутствия масла зародышей пшеницы ["Косметика. Потребитель", 1998 г., 3, стр. 6]. Numerous cosmetics are known that improve the metabolism in the skin tissue and include vitamin complexes ["Cosmetics. Consumer", 1998, 3, p. 8], which regulate water metabolism in the skin tissue and have a hydrating effect, containing vegetable oils, aloe extracts and chamomiles ["Cosmetics and Perfumes", 2001, 15, p. 6l-63, 57], stimulating regenerative processes in case of damage to skin cells due to the presence of wheat germ oil ["Cosmetics. Consumer", 1998, 3, p. 6].

По большей части активными началами этих косметических препаратов, позитивно влияющих на состояние кожных покровов, являются вещества природного происхождения. For the most part, the active ingredients of these cosmetic preparations that positively affect the condition of the skin are substances of natural origin.

Используются в косметологии и соединения, ранее применяемые в медицинских целях, которые проявляют при этом зачастую весьма специфические свойства. Compounds previously used for medical purposes, which often exhibit very specific properties, are also used in cosmetology.

В частности, было установлено, что ранее известные как переносчики кислорода перфторуглероды способны существенным образом влиять на протекание метаболических процессов в ткани кожи и изменять их таким образом, что соотношение метаболитов становится близким к таковому, характерному для ткани более молодого возраста. In particular, it was found that perfluorocarbons, previously known as oxygen carriers, are able to significantly affect the course of metabolic processes in skin tissue and change them in such a way that the ratio of metabolites becomes close to that characteristic of tissue of a younger age.

Целью настоящего изобретения является изыскание средств, способных специфически нормализовывать функции клеток ткани кожи, чтобы использовать эти соединения в интересах косметологии и дерматологии. The aim of the present invention is to find means capable of specifically normalizing the functions of skin tissue cells in order to use these compounds in the interests of cosmetology and dermatology.

Эта цель была достигнута в результате установления того нового факта, что комбинация продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом и внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, оказалась способной позитивным образом влиять на пролиферативную и на биосинтетическую активность фибробластов ткани кожи. This goal was achieved as a result of the establishment of the new fact that the combination of the hydrolysis product of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium was able to positively influence the proliferative and biosynthetic activity of skin tissue fibroblasts.

Технический результат, достигаемый от практического использования изобретения, состоит в том, что косметические и/или дерматологические средства, приготовленные на основе комбинации продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом и внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, оказалась эффективным и новым средством для нормализации нарушенных по разным причинам функций клеток ткани кожи, пригодным для лечения и профилактики широкого круга заболеваний и повреждений кожи. The technical result achieved from the practical use of the invention is that cosmetic and / or dermatological preparations prepared on the basis of a combination of the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium turned out to be an effective and new tool to normalize disturbed for various reasons, the functions of skin tissue cells suitable for the treatment and prevention of a wide range of and diseases and skin lesions.

Сущность настоящего изобретения состоит в следующем. The essence of the present invention is as follows.

Предварительными исследованиями было установлено, что продукт гидролиза клеточной стенки молочнокислых бактерий лизоцимом обладает выраженной способностью стимулировать in vitro функциональную активность фибробластов ткани кожи. Preliminary studies have found that the product of hydrolysis of the cell wall of lactic acid bacteria by lysozyme has a pronounced ability to stimulate the in vitro functional activity of skin tissue fibroblasts.

Продукт гидролиза клеточной стенки молочнокислых бактерий лизоцимом как таковой ранее был известен и описан. Его получали, например, путем инкубирования культуры молочнокислых бактерий Lactobacillus bulgaricus с лизоцимом в течение 1-48 часов при температуре 15-37 градусов и при значении рН 4-8 с последующим отделением от суспензии взвешенных частиц. Полученный таким образом фильтрат содержал N-ацетил-мурамил-пептиды, являющиеся продуктом гидролиза пептидогликанов клеточной стенки молочнокислых бактерий, и при энтеральном применении проявлял иммуностимулирующую активность [патент США 5185321, А 61 К 037/18, 1990 г.]. The product of hydrolysis of the cell wall of lactic acid bacteria by lysozyme as such was previously known and described. It was obtained, for example, by incubating a culture of lactic acid bacteria Lactobacillus bulgaricus with lysozyme for 1-48 hours at a temperature of 15-37 degrees and at a pH value of 4-8, followed by separation of suspended particles from the suspension. The filtrate thus obtained contained N-acetyl-muramyl peptides, which are the product of the hydrolysis of peptidoglycans of the cell wall of lactic acid bacteria, and showed an immunostimulating activity upon enteral administration [US Patent 5185321, A 61 K 037/18, 1990].

Полученный этим известным методом продукт гидролиза клеточной стенки Lactobacillus bulgaricus лизоцимом испытывался на культуре изолированных фибробластов кожи человека. The product of the hydrolysis of the cell wall of Lactobacillus bulgaricus lysozyme obtained by this known method was tested on a culture of isolated human skin fibroblasts.

На фиг. 1 показано влияние испытуемого продукта на пролиферативную активность фибробластов ткани кожи человека. In FIG. Figure 1 shows the effect of the test product on the proliferative activity of fibroblasts in human skin tissue.

Для проведения подобных исследований суспензию фибробластов в среде Игла с 10% эмбриональной телячьей сыворотки вносили в лунки 24-луночного плоскодонного планшета из расчета 2•105 клеток/мл. Эти клетки инкубировали 72 часа при температурю 37oС в атмосфере 3-5% углекислого газа, после чего производили замену среды на среду Игла, содержащую 0,5% сыворотки. Через 48 часов инкубации стимулировали синтез ДНК внесением свежей питательной среды с 0,5% сыворотки, содержащей продукт гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом.For such studies, a suspension of fibroblasts in Eagle's medium with 10% fetal calf serum was introduced into the wells of a 24-well flat-bottom plate at a rate of 2 × 105 cells / ml. These cells were incubated for 72 hours at a temperature of 37 ° C. in an atmosphere of 3-5% carbon dioxide, after which the medium was replaced with Eagle’s medium containing 0.5% serum. After 48 hours of incubation, DNA synthesis was stimulated by introducing fresh nutrient medium with 0.5% serum containing the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria by lysozyme.

Концентрация испытуемого продукта гидролиза составляла 250 мкг/мл, 5 мкг/мл и 0,1 мкг/мл, а контролем служила среда Игла без продукта гидролиза. The concentration of the test hydrolysis product was 250 μg / ml, 5 μg / ml and 0.1 μg / ml, and the Eagle medium without the hydrolysis product served as a control.

В каждую из проб вносили 1 мкКи/мл 3Н-тимидина и продолжали инкубирование еще 48 часов, после чего монослой клеток тщательно промывали, клетки фиксировали 5%-ной охлажденной трихлоруксусной кислотой и лизировали добавлением в лунки 0,1 н раствора NаOH. 1 μCi / ml 3H-thymidine was added to each sample and incubation continued for 48 hours, after which the cell monolayer was thoroughly washed, the cells were fixed with 5% chilled trichloroacetic acid and lysed by adding 0.1 N NaOH solution to the wells.

Клетки выдерживали 30 минут при температуре 37oС, а затем лизат в объеме 100 мкл вносили в 2 мл сцинтилляционной жидкости, выдерживали в холодильнике 30 минут и определяли радиоактивность включившегося в ДНК тимидина на жидкостно-сцинтилляционном счетчике.The cells were kept for 30 minutes at a temperature of 37 o C, and then a lysate in a volume of 100 μl was added to 2 ml of scintillation fluid, kept in a refrigerator for 30 minutes and the radioactivity of thymidine incorporated into the DNA was determined on a liquid scintillation counter.

Из полученных результатов следует, что продукт гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом оказывает выраженный дозозависимый эффект на пролиферативную активность фибробластов и в концентрации 250 мкг/мл увеличивает пролиферацию фибробластов в 2 раза. From the obtained results it follows that the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme has a pronounced dose-dependent effect on the proliferative activity of fibroblasts and at a concentration of 250 μg / ml increases the proliferation of fibroblasts by 2 times.

На фиг. 2 показано влияние испытуемого продукта на биосинтетическую активность фибробластов ткани кожи человека. In FIG. Figure 2 shows the effect of the test product on the biosynthetic activity of fibroblasts in human skin tissue.

Как частный пример проявления биосинтетической активности был выбран тест на белоксинтезирующую активность фибробластов. As a particular example of the manifestation of biosynthetic activity, a test for the protein synthesizing activity of fibroblasts was chosen.

Для проведения этого опыта суспензию фибробластов в среде Игла с 10% эмбриональной телячьей сыворотки вносили в лунки 24-луночного плоскодонного планшета из расчета 2•105 клеток/мл. Клетки инкубировали 48 часов при температуре 37oС в атмосфере 3-5% углекислого газа до образования сплошного монослоя, после чего производили замену среды на среду Игла, не содержащую сыворотки. Через 24 часа вносили продукт гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом в концентрации 5 мкг/мл, растворенный в свежей питательной среде Игла без сыворотки.To conduct this experiment, a suspension of fibroblasts in Eagle's medium with 10% fetal calf serum was introduced into the wells of a 24-well flat-bottom plate at a rate of 2 × 105 cells / ml. Cells were incubated for 48 hours at a temperature of 37 o C in an atmosphere of 3-5% carbon dioxide until a continuous monolayer was formed, after which the medium was replaced with a serum-free Eagle medium. After 24 hours, a product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme at a concentration of 5 μg / ml, dissolved in fresh nutrient medium Eagle without serum, was introduced.

В качестве контроля фибробласты помещали в среду Игла, не содержащую испытуемого продукта. As a control, fibroblasts were placed in an Eagle medium containing no test product.

Клетки инкубировали 48 часов при температуре 37oС в атмосфере 3-5% углекислого газа, после чего монослой тщательно промывали и лизировали клетки добавлением в лунки 0,1 н NаOH.Cells were incubated for 48 hours at a temperature of 37 ° C in an atmosphere of 3-5% carbon dioxide, after which the monolayer was thoroughly washed and the cells were lysed by adding 0.1 n NaOH to the wells.

Лизат выдерживали 30 минут при 37oС и затем определяли в лизате содержание суммарного белка методом Лоури.The lysate was held for 30 minutes at 37 ° C. and then the total protein content in the lysate was determined by the Lowry method.

Полученные результаты показывают, что даже такая относительно малая концентрация продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом как 5 мкг/мл обеспечивает прирост синтеза белка культурой фибробластов на 22,5%. The results show that even such a relatively low concentration of the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme as 5 μg / ml provides an increase in protein synthesis by fibroblast culture by 22.5%.

Нет оснований полагать, что достигаемые биологические эффекты присущи исключительно гидролизату клеточных стенок Lactobacillus bulgaricus и аналогичные результаты следует ожидать при использовании гидролизатов клеточных стенок и других молочнокислых бактерий, чувствительных к лизоциму. There is no reason to believe that the achieved biological effects are inherent exclusively in the hydrolyzate of the cell walls of Lactobacillus bulgaricus and similar results should be expected when hydrolysates of cell walls and other lactic acid bacteria sensitive to lysozyme are used.

Было известно, что помимо пептидогликанов, формирующих клеточную стенку, молочнокислые бактерии биосинтезируют и внеклеточные водорастворимые пептидогликаны, выделяемые растущими бактериями в культуральную среду. It was known that in addition to peptidoglycans that form the cell wall, lactic acid bacteria biosynthesize and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing bacteria into the culture medium.

Обоснованным казалось предположение, что совместное применение продукта гидролиза пептидогликанов клеточной стенки и внеклеточных пептидогликанов может оказаться более эффективным, чем использование каждого из них порознь. It seemed reasonable that the combined use of the product of hydrolysis of cell wall peptidoglycans and extracellular peptidoglycans may be more effective than using each of them separately.

В дальнейшем это предположение подтвердилось и было установлено, что при комбинировании продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом с внеклеточными водорастворимыми пептидогликанами, выделяемыми растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, отмечалось усиление пролиферативной и биосинтетической активности фибробластов примерно на 10% по сравнению с результатами, достигаемыми при испытании только продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий. Further, this assumption was confirmed and it was found that when combining the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium, the proliferative and biosynthetic activity of fibroblasts was increased by approximately 10% compared with the results compared to testing only the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria.

Внеклеточные водорастворимые пептидогликаны, выделяемые растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, при желании и необходимости могут быть извлечены из культуральной среды известными методами и средствами. Однако в простейшем случае препаратом внеклеточных пептидогликанов мог служить концентрированный фильтрат культуральной жидкости молочнокислых бактерий. Extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium, if desired and necessary, can be extracted from the culture medium by known methods and means. However, in the simplest case, a concentrated filtrate of the culture fluid of lactic acid bacteria could serve as a preparation of extracellular peptidoglycans.

Поскольку фибробласты составляют основу ткани кожи, было высказано обоснованное предположение, что косметические и дерматологические средства на основе комбинации описанных продуктов окажутся эффективными при лечении заболеваний и состояний, связанных с нарушениями нормального функционирования кожной ткани. Since fibroblasts form the basis of skin tissue, a reasonable assumption has been made that cosmetic and dermatological products based on a combination of the described products will be effective in treating diseases and conditions associated with impaired normal functioning of skin tissue.

Исследования, проведенные в Научно-исследовательском институте медицины труда РАН на практически здоровых добровольцах, не имеющих каких-либо патологических кожных изменений, показали, в частности, что при использовании косметического крема с комбинацией продуктов гидролиза лизоцимом клеточных стенок молочнокислых бактерий и внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, практически у половины добровольцев с сухой кожей наблюдалась тенденция к нормализации уровня липидов и гидрантности в поверхностных слоях кожи. Studies conducted at the Research Institute of Occupational Medicine of the Russian Academy of Sciences on healthy volunteers who do not have any pathological skin changes showed, in particular, that when using a cosmetic cream with a combination of lysozyme hydrolysis products of the cell walls of lactic acid bacteria and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted growing lactic acid bacteria into the culture medium, almost half of the volunteers with dry skin showed a tendency to normalize hearing lipids and hydration in the surface layers of the skin.

Было отмечено также, что наличие в косметических кремах комбинации упомянутых продуктов придает кремам способность оптимизировать свободнорадикальные процессы в ткани кожи и осуществлять их антиоксидантную защиту. It was also noted that the presence of a combination of these products in cosmetic creams gives creams the ability to optimize free radical processes in skin tissue and to provide their antioxidant protection.

Цитохимическое обследование показателей метаболической активности иммунокомпетентных клеток показало, что известная иммуностимулирующая способность продукта гидролиза лизоцимом клеточных стенок молочнокислых бактерий сохраняется и при применении этого соединения наружно в составе косметических средств, что вытекает из результатов, представленных в таблице. A cytochemical examination of the metabolic activity of immunocompetent cells showed that the known immunostimulating ability of the product of lysozyme hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria also remains when using this compound externally as a part of cosmetics, which follows from the results presented in the table.

Из представленных результатов следует, в частности, что даже в условиях кратковременного опыта (длительность 3 недели) отмечается тенденция повышения активности ферментов энергетического обмена у здоровых людей при местном воздействии на кожу продукта гидролиза лизоцимом клеточных стенок молочнокислых бактерий. From the presented results it follows, in particular, that even under short-term experience (duration 3 weeks), there is a tendency to increase the activity of energy metabolism enzymes in healthy people with local effects on the skin of the hydrolysis product of lysozyme cell walls of lactic acid bacteria.

Прирост активности исследованных ферментов при дополнительном включении в состав испытуемого косметического средства внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, составлял 3-5%. При этом следует иметь в виду, что исследования проводились на здоровых добровольцах, не имеющих иммунных нарушений, и оснований ожидать более высоких результатов не имелось. The increase in the activity of the studied enzymes with the additional inclusion of extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium in the composition of the test cosmetic was 3-5%. It should be borne in mind that the studies were conducted on healthy volunteers who did not have immune disorders, and there was no reason to expect higher results.

Таким образом, показано, что комбинация продукта гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий лизоцимом и внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущей культурой молочнокислых бактерий в культуральную среду, способна нормализовывать функции клеток ткани кожи путем различных биохимических механизмов и включение этой комбинации продуктов в состав косметических и дерматологических препаратов придает дополнительные полезные свойства как профилактическим, так и лечебным препаратам. Thus, it has been shown that the combination of the product of hydrolysis of the cell walls of lactic acid bacteria with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by a growing culture of lactic acid bacteria in the culture medium is able to normalize the functions of skin tissue cells by various biochemical mechanisms and the inclusion of this combination of products in cosmetic and dermatological preparations gives additional useful properties of both prophylactic and therapeutic drugs.

Приводимый ниже пример только иллюстрирует сущность предложения и не должен носить ограничивающего характера. The following example only illustrates the essence of the proposal and should not be restrictive.

Пример. Для получения биомассы молочнокислых бактерий культуру Lactobacillus bulgaricus выращивают на обезжиренном молоке в течение 10 часов при температуре 45oС. Полученная таким образом культуральная жидкость содержит 7,5•1010 клеток/мл.Example. To obtain the biomass of lactic acid bacteria, the culture of Lactobacillus bulgaricus is grown in skim milk for 10 hours at a temperature of 45 o C. The culture fluid obtained in this way contains 7.5 • 1010 cells / ml.

Культуральную жидкость сепарируют, концентрируют путем упаривания и лиофильно высушивают, а отделенную биомассу молочнокислых бактерий подвергают трем циклам "замораживание-оттаивание" для разрушения клеток, после чего осадок отделяют центрифугированием при 3000 g. The culture fluid is separated, concentrated by evaporation and freeze-dried, and the separated biomass of lactic acid bacteria is subjected to three freeze-thaw cycles to destroy the cells, after which the precipitate is separated by centrifugation at 3000 g.

Осадок заливают ацетоном (из расчета 1 л ацетона на 1 кг осадка), смесь перемешивают на магнитной мешалке и затем ацетон удаляют декантацией, добиваясь в конечном счете освобождения продукта от липидов. The precipitate is poured with acetone (at the rate of 1 l of acetone per 1 kg of precipitate), the mixture is stirred on a magnetic stirrer and then acetone is removed by decantation, ultimately achieving the liberation of the product from lipids.

Полученный порошок суспендируют в воде и инкубируют с лизоцимом (из расчета 1 г лизоцима на 1 л раствора) при температуре 37oС в течение 10 часов для гидролиза клеточных стенок бактерий.The resulting powder is suspended in water and incubated with lysozyme (based on 1 g of lysozyme per 1 liter of solution) at a temperature of 37 o C for 10 hours to hydrolyze the bacterial cell walls.

После завершения гидролиза взвешенные частицы удаляют центрифугированием при 3000 g, а раствор, содержащий продукты гидролиза клеточных стенок молочнокислых бактерий, лиофильно высушивают. After hydrolysis is complete, the suspended particles are removed by centrifugation at 3000 g, and the solution containing the hydrolysis products of the cell walls of lactic acid bacteria is freeze-dried.

Полученный описанным образом продукт гидролиза лизоцимом клеточных стенок молочнокислых бактерий и концентрат внеклеточных пептидогликанов включают в состав косметического крема, содержащего 0,05 г продукта гидролиза лизоцимом клеточных стенок молочнокислых бактерий, 1,0 г концентрата внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, 0,4 г карбопола, 2 г глицерина, 1 г гермабена, 2,5 г пропиленгликоля, 2 г сорбитола, 0,35 г триэтаноламина, 0,1 г аквафтема и воду до 100 г. The product of hydrolysis of cell walls of lactic acid bacteria by lysozyme and the extracellular peptidoglycan concentrate obtained as described above are included in a cosmetic cream containing 0.05 g of product of hydrolysis of cell walls of lactic acid bacteria by lysozyme, 1.0 g of extracellular water-soluble peptidoglycans concentrate, 0.4 g of carbopol, 2 g glycerol, 1 g of germaben, 2.5 g of propylene glycol, 2 g of sorbitol, 0.35 g of triethanolamine, 0.1 g of aquaftem and water up to 100 g.

Приготовленный таким образом крем представляет собою однородную гелеобразную полупрозрачную массу. The cream prepared in this way is a homogeneous gel-like translucent mass.

Этот крем предназначен для ухода за нормальной и сухой кожей, в особенности при признаках старения и увядания кожи. This cream is designed to care for normal to dry skin, especially with signs of aging and aging of the skin.

В доступной патентной и научно-технической литературе заявитель не обнаружил сведений о стимулирующем влиянии продукта гидролиза клеточной стенки молочнокислых бактерий лизоцимом или его комбинации с внеклеточными водорастворимыми пептидогликанами, выделяемыми растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду, на функциональную активность фибробластов и об использовании такого или аналогичного продукта для нормализации нарушенных функций ткани кожи в косметологической и дерматологической практике. In the patent and scientific literature available, the applicant did not find information on the stimulating effect of the product of hydrolysis of the cell wall of lactic acid bacteria with lysozyme or its combination with extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria in the culture medium on the functional activity of fibroblasts and on the use of such or similar product normalization of impaired functions of skin tissue in cosmetology and dermatological practice.

На этом основании заявитель полагает, что его предложение соответствует требованиям, предъявляемым к изобретению. On this basis, the applicant believes that his proposal meets the requirements of the invention.

Claims (1)

Средство, нормализующее функции клеток ткани кожи, отличающееся тем, что содержит в качестве активного начала, влияющего на биосинтетическую и пролиферативную активность фибробластов ткани кожи, комбинацию продукта гидролиза клеточной стенки молочнокислых бактерий лизоцимом и внеклеточных водорастворимых пептидогликанов, выделяемых растущими молочнокислыми бактериями в культуральную среду. A tool that normalizes the function of skin tissue cells, characterized in that it contains as a active principle affecting the biosynthetic and proliferative activity of skin tissue fibroblasts, a combination of the product of hydrolysis of the cell wall of lactic acid bacteria with lysozyme and extracellular water-soluble peptidoglycans secreted by growing lactic acid bacteria into the culture medium.
RU2001134287A 2001-12-21 2001-12-21 Agent normalizing skin tissue cell function RU2197953C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001134287A RU2197953C1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 Agent normalizing skin tissue cell function

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001134287A RU2197953C1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 Agent normalizing skin tissue cell function

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2197953C1 true RU2197953C1 (en) 2003-02-10

Family

ID=20254777

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001134287A RU2197953C1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 Agent normalizing skin tissue cell function

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2197953C1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Косметика и потребитель, 1998, №3, с.8. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021104214A1 (en) Use of exosome derived from carcass in skin regulation product
EP3813859A1 (en) Lactobacillus plantarum for skin care
KR20180108504A (en) Fermented product of colostrum and a cosmetic composition using the same
KR20210066750A (en) Novel use of milk exosome
KR101911078B1 (en) Composition for improving acneform skin conditions Comprising Complex Extracts of Swallow's Nest as Active Ingredient
KR101263547B1 (en) Cosmetic composition comprising green tea seed coater extract having anti-oxidative or anti-inflammatory activity
KR101929657B1 (en) Skin external agent for improving skin wrinkle comprising an extract of fermented wheat germ
KR20130088997A (en) Cosmetic composition for hair growth and restoration from caviar extracts and its fermentation
KR101360760B1 (en) Fermented ear shell extract and its cosmetic usage
KR100773411B1 (en) Crude drug composition showing anti-oxidative, anti-tumor and anti-bacterial activity
KR102311097B1 (en) Aerobic fermented product of colostrum
KR101437997B1 (en) Fermented caviar extract and its cosmetic usage
AU2013319785A1 (en) Topical halobactria extract composition for treating radiation skin tissue damage
KR101293007B1 (en) Anti-oxidant and anti-wrinkle composition comprising a fermented juice of jujube fruit
KR101292944B1 (en) skin-whitening, anti-bacterial and anti-inflammatory composition comprising a fermented juice of grape
KR100583792B1 (en) Cosmetic composition for whitening, anti-inflammation and anti-dendruff containing yellow soil and medicine herbs extract
CN105073089B (en) Cosmetic use of Q-base
RU2197953C1 (en) Agent normalizing skin tissue cell function
JP2003012532A (en) Hyaluronidase inhibitor, hexosaminidase liberation inhibitor, cyclic amp phosphodiesterase inhibitor and cosmetic for ameliorating skin roughening
KR101806007B1 (en) Manufacturing method of cosmetic composition containing nano particle natural materials and cosmetic composition manufactured by the same
KR100723370B1 (en) Cosmetic composition comprising the extract of scutellaria baicalensis and coptis chinensis showing hydrating effect and antibacterial effect
RU2197225C1 (en) Preparation normalizing the functions of cutaneous tissue cells
KR100773406B1 (en) Crude drug composition showing anti-oxidative, anti-tumor and anti-bacterial activity
CN105142733B (en) Application of the irides cell of induction in therapeutic sensitivity skin
KR102661205B1 (en) Cosmetic compostion for improving skin immune system, and its preparation method

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20071222