RU2196593C2 - ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ - Google Patents
ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2196593C2 RU2196593C2 RU2000102228A RU2000102228A RU2196593C2 RU 2196593 C2 RU2196593 C2 RU 2196593C2 RU 2000102228 A RU2000102228 A RU 2000102228A RU 2000102228 A RU2000102228 A RU 2000102228A RU 2196593 C2 RU2196593 C2 RU 2196593C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cancer
- tumor
- pharmaceutical composition
- arsenic
- patient
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 77
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 50
- 229910052785 arsenic Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 39
- RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N arsenic atom Chemical compound [As] RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 39
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 16
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 12
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 12
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 39
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 32
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 26
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 abstract description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 abstract 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 68
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 36
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 22
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 21
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 21
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 21
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 15
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 15
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 13
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 13
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 13
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 12
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 12
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 11
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 10
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 10
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 10
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 10
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 9
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 9
- 150000001495 arsenic compounds Chemical class 0.000 description 8
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 8
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- WBNQDOYYEUMPFS-UHFFFAOYSA-N N-nitrosodiethylamine Chemical compound CCN(CC)N=O WBNQDOYYEUMPFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 7
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 7
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 6
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 6
- 210000000244 kidney pelvis Anatomy 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 229940124595 oriental medicine Drugs 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000002001 anti-metastasis Effects 0.000 description 5
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 5
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 5
- 229940093920 gynecological arsenic compound Drugs 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 5
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 5
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 5
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 4
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 4
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 4
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 210000003281 pleural cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 4
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 3
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 3
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000004086 maxillary sinus Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 1,5-bis(chloromethyl)naphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(CCl)=CC=CC2=C1CCl HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000230 African Trypanosomiasis Diseases 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010060891 General symptom Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 description 2
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N arsenic trioxide Inorganic materials O1[As]2O[As]1O2 GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 208000029080 human African trypanosomiasis Diseases 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 210000001370 mediastinum Anatomy 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000013059 nephrectomy Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 201000002612 sleeping sickness Diseases 0.000 description 2
- 231100000456 subacute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002562 urinalysis Methods 0.000 description 2
- OBHRVMZSZIDDEK-UHFFFAOYSA-N urobilinogen Chemical compound CCC1=C(C)C(=O)NC1CC1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(CC3C(=C(CC)C(=O)N3)C)N2)CCC(O)=O)N1 OBHRVMZSZIDDEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 2
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000321096 Adenoides Species 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010002641 Anorchism Diseases 0.000 description 1
- 201000003126 Anuria Diseases 0.000 description 1
- 241000209524 Araceae Species 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 241001033453 Boswellia neglecta Species 0.000 description 1
- 235000004325 Boswellia neglecta Nutrition 0.000 description 1
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000208229 Burseraceae Species 0.000 description 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 240000007311 Commiphora myrrha Species 0.000 description 1
- 235000006965 Commiphora myrrha Nutrition 0.000 description 1
- 241000548230 Crassostrea angulata Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005171 Cystadenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 240000005636 Dryobalanops aromatica Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108010017480 Hemosiderin Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 208000007093 Leukemia L1210 Diseases 0.000 description 1
- 208000008342 Leukemia P388 Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000218377 Magnoliaceae Species 0.000 description 1
- 241000283967 Manidae Species 0.000 description 1
- 241001282397 Manis pentadactyla Species 0.000 description 1
- JCYZMTMYPZHVBF-UHFFFAOYSA-N Melarsoprol Chemical compound NC1=NC(N)=NC(NC=2C=CC(=CC=2)[As]2SC(CO)CS2)=N1 JCYZMTMYPZHVBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000218231 Moraceae Species 0.000 description 1
- 241001416180 Moschidae Species 0.000 description 1
- 241000972170 Moschus moschiferus Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229910004844 Na2B4O7.10H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 206010058667 Oral toxicity Diseases 0.000 description 1
- 241000208343 Panax Species 0.000 description 1
- 235000002791 Panax Nutrition 0.000 description 1
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 241001278112 Populus euphratica Species 0.000 description 1
- 244000197580 Poria cocos Species 0.000 description 1
- 235000008599 Poria cocos Nutrition 0.000 description 1
- 244000234609 Portulaca oleracea Species 0.000 description 1
- 235000001855 Portulaca oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 241000219304 Portulacaceae Species 0.000 description 1
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 244000046146 Pueraria lobata Species 0.000 description 1
- 235000010575 Pueraria lobata Nutrition 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010062237 Renal impairment Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- 208000031737 Tissue Adhesions Diseases 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 241000223105 Trypanosoma brucei Species 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046810 Uterine perforation Diseases 0.000 description 1
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000460 acute oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000002534 adenoid Anatomy 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 229910052925 anhydrite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000004712 cancer cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 1
- 238000011254 conventional chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 201000003146 cystitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 206010013990 dysuria Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000001909 effect on DNA Effects 0.000 description 1
- 239000002375 environmental carcinogen Substances 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000005977 kidney dysfunction Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005976 liver dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 229960001728 melarsoprol Drugs 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000001700 moschus moschiferus Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000418 oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229910052573 porcelain Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000010666 regulation of catalytic activity Effects 0.000 description 1
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 1
- 208000026451 salivation Diseases 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000015096 spirit Nutrition 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 230000009747 swallowing Effects 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001875 tumorinhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- YEFOAORQXAOVJQ-UHFFFAOYSA-N wuweizischun A Natural products C1C(C)C(C)(O)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2OC YEFOAORQXAOVJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины. Гексоксид мышьяка (As4O6) предлагается использовать в качестве противоракового лекарственного средства. Предлагается также фармацевтическая композиция на его основе. Гексоксид мышьяка (As4O6), природное химическое вещество, полученное из Sinsuk, более эффективен, поскольку после элиминации токсического свойства оказывает прямой цитотоксичный эффект на опухолевые клетки и ингибирует образование новых кровеносных сосудов опухолевых образований, что приводит к полному излечиванию злокачественных (раковых) опухолей. 2 с. и 5 з.п. ф-лы, 62 ил., 9 табл.
Description
Область изобретения
Изобретение относится к идентификации HD-2, природного химического вещества, которое было выделено и очищено из природного продукта, Sinsuk, как гексоксида мышьяка (Аs4O6), и к его терапевтической эффективности в качестве противоракового лекарственного средства и фармацевтической композиции и, более конкретно, к способам очистки природного химического вещества (гексоксида мышьяка, As4O6) из Sinsuk, с элиминацией токсичности, и новому противораковому действию As4O6 и его фармацевтической композиции посредством их прямой цитотоксичности и ингибирования нового развития кровеносных сосудов (ангиогенеза) в участках и вокруг участков опухоли.
Изобретение относится к идентификации HD-2, природного химического вещества, которое было выделено и очищено из природного продукта, Sinsuk, как гексоксида мышьяка (Аs4O6), и к его терапевтической эффективности в качестве противоракового лекарственного средства и фармацевтической композиции и, более конкретно, к способам очистки природного химического вещества (гексоксида мышьяка, As4O6) из Sinsuk, с элиминацией токсичности, и новому противораковому действию As4O6 и его фармацевтической композиции посредством их прямой цитотоксичности и ингибирования нового развития кровеносных сосудов (ангиогенеза) в участках и вокруг участков опухоли.
Предпосылки изобретения
В общем, в настоящее время доступны различные лекарственные средства для противораковой химиотерапии. Алкилирующие агенты, такие как цисплатин и циклофосфамид, проявляют их противораковое действие путем образования ковалентных связей с атомами азота нуклеотидов ДНК вследствие высокой электрофильной способности их активного сайта. Антиметаболиты, такие как 5-фторурацил, действуют посредством ингибирования ферментов, участвующих в биосинтезе нуклеиновых кислот, или посредством встраивания их самих в структуры ДНК или РНК. Некоторые антибиотики, такие как адриамицин, оказывают сильное действие на ДНК, ингибируя нормальную функцию ДНК, что приводит к ингибированию роста опухоли. Но все эти противораковые агенты воздействуют не только на патологические опухолевые клетки, но также на нормальные здоровые клетки, в частности на клетки костного мозга или эпителий кишечника, с высокой интенсивностью круговорота, что вызывает серьезные осложнения и токсичность, такие как миелосупрессия, алопеция, почечная недостаточность, тошнота и рвота, нейротоксичность и т.д.
В общем, в настоящее время доступны различные лекарственные средства для противораковой химиотерапии. Алкилирующие агенты, такие как цисплатин и циклофосфамид, проявляют их противораковое действие путем образования ковалентных связей с атомами азота нуклеотидов ДНК вследствие высокой электрофильной способности их активного сайта. Антиметаболиты, такие как 5-фторурацил, действуют посредством ингибирования ферментов, участвующих в биосинтезе нуклеиновых кислот, или посредством встраивания их самих в структуры ДНК или РНК. Некоторые антибиотики, такие как адриамицин, оказывают сильное действие на ДНК, ингибируя нормальную функцию ДНК, что приводит к ингибированию роста опухоли. Но все эти противораковые агенты воздействуют не только на патологические опухолевые клетки, но также на нормальные здоровые клетки, в частности на клетки костного мозга или эпителий кишечника, с высокой интенсивностью круговорота, что вызывает серьезные осложнения и токсичность, такие как миелосупрессия, алопеция, почечная недостаточность, тошнота и рвота, нейротоксичность и т.д.
С другой стороны, мышьяк был известен как сильнодействующий канцероген окружающей среды, часто поражающий кожу и легкие. Сообщается, что мышьяк связывается с сульфгидрильной структурой ферментов, инактивируя ферменты-мишени, с ингибированием реакций фосфорилирования и дефосфорилирования, которые являются жизненно важными для регуляции активностей ферментов, и индуцированием дефектов в хромосомах. Поэтому мышьяк исследовали до сих пор главным образом в токсикологическом аспекте в связи с этими сообщениями.
Однако в прошлом мышьяк использовали в качестве терапевтического агента как в Восточной, так и в Западной медицине. В частности, в традиционной Китайской медицине, в том числе Корейской медицине, соединения мышьяка прописывали в течение длительного времени для лечения некоторых смертельных болезней, например для уничтожения злой энергии. В старой медицинской литературе Кореи и Китая описывается, что мышьяк прописывали в качестве лекарственного средства под названием Eungwhang, на странице 1234 или под названием Bisang на странице 1237 TonEuiBoGam (NamSaDang), или Энциклопедии Восточной Медицины, где описано, что мышьяк прописывали только после снижения его токсичности вследствие его чрезвычайно высокой токсичности. Известно также, что мышьяк обладает обезвреживающей активностью против нескольких токсических веществ. Например, мышьяк использовали в преодолении choongak, или рвоты, и в уничтожении духов и энергии зла. В старой литературе Китайской медицины (BonChoKangMok (Энциклопедии лекарственных растений Китайской медицины), страницы 12-16 тома 9) описаны показания и фармакологические действия мышьяка (под названием whangoong), где сообщается, что мышьяк обладает действием очистки крови. Таким образом, мышьяк признавали в качестве активного лекарственного средства и использовали в течение длительного времени, но в Корее мышьяк считается потенциально вредным химикалием со свойствами тяжелых металлов и вследствие этого его применение является крайне ограниченным. Мышьяк обладает некоторыми свойствами тяжелых металлов, хотя он не принадлежит к группе тяжелых металлов и, следовательно, его избегали в приготовлении лекарственного средства. Контактирование с мышьяком приводит к анемии, лейкопении и дисфункции почки и печени, а хроническое экспонирование может иметь канцерогенный эффект.
В Западной медицине соединения мышьяка прописывали для лечения некоторых болезней, в том числе ревматизма, сифилиса, псориаза и т.д., и известно, что низкая доза соединения мышьяка оказывает благоприятное действие на физиологические функции организма человека, в том числе стимулирует гематопоэз, что согласуется с описаниями в старых литературных источниках Восточной медицины. Однако в современной медицине показания для соединения мышьяка стали очень ограниченными. С конца 19-го столетия до начала 20-го столетия соединение мышьяка испытывали для лечения лейкоза, а после 1950-х годов меларсопрол, органическое соединение мышьяка, которое прописывали для Африканского трипаносомоза (сонной болезни), является единственным применяемым соединением в настоящее время.
На основании этих фармакологических свойств мышьяка недавно были предприняты попытки разработки нового противоракового лекарственного средства, и в настоящее время некоторые исследования обнаруживают быстрый прогресс в этой области. После культурной революции Китай прилагал значительные усилия для исследования традиционной медицины с использованием научных инструментов Западной медицины. Они опубликовали сообщение в 1996 году, в сотрудничестве с французской исследовательской группой, что триоксид мышьяка (Аs2O3) обладал превосходным действием в лечении острого промиелоцитарного лейкоза. Исследователи Западной медицины были восхищены этим результатом, поскольку триоксид мышьяка был особенно эффективным в лечении пациентов с лейкозом, которые были резистентными к общепринятой химиотерапии, и с момента опубликования этой статьи большее число медицинских научных работников Западного полушария стали проявлять интерес к возможному противораковому действию соединений мышьяка. Под воздействием этих результатов были предприняты значительные попытки для интеграции традиционной Восточной медицины и современной молекулярной медицины посредством интерпретации результатов Восточной медицины, исходя из основного направления современной противораковой химиотерапии. Крайне важной является разработка новых химикалиев для получения эффективной противораковой активности без каких-либо серьезных побочных эффектов. Изобретение, описанное здесь, преуспело в выделении и очистке активного ингредиента путем обработки природного исходного содержащего мышьяк материала, который использовали в Восточной медицине, с использованием множественных процессов. Кроме того, клиническое исследование показало, что фармацевтическая композиция гексоксида мышьяка обнаруживает сильную противораковую эффективность без каких-либо видимых побочных эффектов.
Существо изобретения
Таким образом, данное изобретение обеспечивает новое природное химическое вещество, гексоксид мышьяка (As4O6), полученное из Sinsuk, с элиминацией токсичности.
Таким образом, данное изобретение обеспечивает новое природное химическое вещество, гексоксид мышьяка (As4O6), полученное из Sinsuk, с элиминацией токсичности.
Другой задачей данного изобретения является выяснение механизма действия противораковой эффективности нового природного химического вещества, полученного из Sinsuk.
Другой задачей данного изобретения является описание применимости нового природного химического вещества для противораковой терапии и его фармацевтической композиции.
Для достижения приведенных выше целей данного изобретения фармацевтическая композиция для лечения рака содержит фармацевтически эффективное количество Аs4O6 в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель.
Предпочтительно фармацевтическую композицию данного изобретения готовят в виде фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли (рака) матки.
Альтернативно фармацевтическую композицию данного изобретения готовят в виде фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли (рака) легкого.
Альтернативно фармацевтическую композицию данного изобретения готовят в виде фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли (рака) верхнечелюстной (гайморовой) пазухи.
Альтернативно фармацевтическую композицию данного изобретения готовят в виде фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли (рака) почки.
Альтернативно фармацевтическую композицию данного изобретения готовят в виде фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли (рака) мочевого пузыря.
Для достижения этих преимуществ в соответствии с задачей данного изобретения, осуществленного в виде вариантов и широко описанного, сначала мы выделили и очистили природное химическое вещество, HD-2, повторяемым нагреванием Sinsuk, содержащим мышьяк, для элиминации токсичности, с последующим структурным анализом. Белое вещество, полученное согласно этой процедуре, испытывали на клонированных опухолевых клетках мышей и человека для оценки противораковой эффективности этого вещества и для выяснения, обусловлены ли противораковые эффекты некрозом опухолевых клеток по механизму апоптоза. Токсичность HD-2 после "острого" введения оценивали наблюдением клинических симптомов крыс после однократного перорального введения большой дозы, а токсичность HD-2 после "подострого" введения оценивали наблюдением клинических симптомов крыс после медленного перорального введения. Клональные опухолевые клетки, нацеленные на легкие, инъецировали внутривенно в мышей и HD-2 вводили перорально или внутривенным путем. После этого подсчитывали число метастатических опухолевых образований в легких для оценки ингибирующего действия этого вещества на метастазирование рака.
Подобным образом, клетки меланомы инокулировали интрадермально в мышей с последующим пероральным введением HD-2, после чего противораковый механизм HD-2 исследовали счетом числа новых кровеносных сосудов, образованных в опухолевых образованиях или около опухолевых образований. Рак индуцировали инъекцией канцерогена в мышей и ингибирующую опухоль эффективность измеряли в этих мышах после перорального введения HD-2. Мы также испытывали фармакологическую композицию, приготовленную смешиванием различных лекарственных растений Китайской медицины с гексоксидом мышьяка, которую вводили перорально раковым пациентам в терминальной стадии для оценки противораковой эффективности.
В соответствии с одним аспектом данное изобретение обеспечивает противораковый агент гексоксида мышьяка (Аs4O6) природного химического вещества и его фармацевтическую композицию, причем:
1) Мы выделили и очистили природное химическое вещество белого цвета, HD-2, повторяемым нагреванием Sinsuk, содержащего мышьяк, и вещество мышьяка с чистотой реактива, которые были затем подвергнуты структурному анализу, чтобы показать, что это вещество соответствует гексоксиду мышьяка, As4O6.
1) Мы выделили и очистили природное химическое вещество белого цвета, HD-2, повторяемым нагреванием Sinsuk, содержащего мышьяк, и вещество мышьяка с чистотой реактива, которые были затем подвергнуты структурному анализу, чтобы показать, что это вещество соответствует гексоксиду мышьяка, As4O6.
2) Природное химическое вещество, Аs4O6, полученное при помощи этой процедуры, добавляли в культуральные среды для выращивания клонированных опухолевых клеток мышей и человека для оценки противораковой эффективности этого вещества.
3) Противораковый механизм Аs4O6 исследовали для выяснения, обусловлена ли противораковая эффективность некрозом опухолевых клеток по механизму апоптоза.
4) Различные количества природного химического вещества, As4O6, вводили "острым" введением (в большом количестве) самцам и самкам крыс для испытания острой токсичности гексоксида путем наблюдения проявляющихся осложнений.
5) То же самое количество природного химического вещества, Аs4O6, вводили медленно перорально самцам и самкам крыс для испытания подострой токсичности этого изобретения путем наблюдения проявляющихся осложнений.
6) Клональные опухолевые клетки, нацеленные на легкие, инъецировали внутривенно в мышей и природное химическое вещество (Аs4O6) вводили перорально или внутривенно. После этого считали число метастатических опухолевых образований, появляющихся в легких, для оценки ингибирующего действия этого вещества на метастазирование рака.
7) Подобным образом, клетки злокачественной меланомы инокулировали интрадермально в мышей с последующим пероральным введением природного противоракового агента, Аs4О6. После этого механизм противоракового действия исследовали путем измерения размера опухолевых масс и счета числа вновь образованных кровеносных сосудов в опухолевых массах и вокруг опухолевых масс.
8) Канцероген инъецировали в мышей для индукции злокачественных опухолей и противораковые действия природного противоракового агента, Аs4O6, исследовали путем измерения частоты встречаемости опухолей и размера опухолей в печени и легком.
9) Мы приготовили также фармацевтическую композицию путем добавления различных лекарственных растений Восточной медицины к природному противораковому агенту, Аs4O6, в нескольких формах (таблетки, капсулы и раствора).
10) Таблетки, приготовленные, как описано выше, вводили перорально раковым пациентам в терминальной стадии, имеющим злокачественную опухоль (рак) матки, легкого, верхнечелюстной (гайморовой) пазухи, почки или мочевого пузыря, для оценки терапевтической эффективности Аs4O6. Размер опухолей и клинические течения болезни подвергали мониторингу с использованием компьютерной томографии (КТ) и диагностики с применением ядерного магнитного резонанса (ЯМР).
Должно быть понятно, что как предшествующее общее описание, так и последующее подробное описание являются примерными и приводимыми для объяснения и предназначены для обеспечения дополнительного объяснения заявленного изобретения.
Краткое описание прилагаемых чертежей
Сопутствующие чертежи, которые включены для обеспечения дополнительного понимания изобретения, входят в это описание и составляют часть этого описания, иллюстрируют изобретение и вместе с описанием служат для объяснения принципов этих чертежей:
Фиг. 1 показывает схематизированные процедуры выделения и химической очистки Sinsuk.
Сопутствующие чертежи, которые включены для обеспечения дополнительного понимания изобретения, входят в это описание и составляют часть этого описания, иллюстрируют изобретение и вместе с описанием служат для объяснения принципов этих чертежей:
Фиг. 1 показывает схематизированные процедуры выделения и химической очистки Sinsuk.
Фиг. 2 показывает 3-мерную модель структуры Sinsuk, определенную структурным анализом.
Фиг. 3 показывает временной ход противораковой эффективности Sinsuk (гексоксида мышьяка, Аs4O6) in vitro.
Фиг. 4 показывает результат электрофореза в агарозном геле, показывающий, что противораковое действие природного химического вещества, Аs4O6, обусловлено эффектом апоптоза.
Фиг. 5 показывает ингибирующее действие Аs4O6 на реваскуляризацию в опухолевом образовании.
Фиг. 6 показывает, что Аs4O6 уменьшает частоту появления гепатом, индуцированных канцерогеном (NDEA).
Фиг. 7 показывает, что Аs4O6 уменьшает частоту появления рака легкого, индуцированного канцерогеном (NDEA).
Фиг. 8 - скан КТ (компьютерной томографии), показывающий множественные опухолевые образования в матке.
Фиг. 9 - подобный скан КТ, что и на фиг. 8, показывающий множественный опухолевый рост в матке.
Фиг. 10 - скан КТ увеличенной матки вследствие инвазии опухолевых клеток в терминальной стадии карциномы матки.
Фиг. 11 - другой скан КТ того же самого пациента, взятый под другим углом.
Фиг. 12 - скан КТ матки в терминальной стадии карциномы матки, который показывает несколько воздушных затенений, отражающих перфорации на стенке матки. Это указывает на исчезновение опухолевого образования после введения Аs4O6.
Фиг. 13 - скан КТ пациента с карциномой матки в терминальной стадии, показывающий данные, сходные с данными на фиг. 12.
Фиг. 14 - скан КТ пациента с карциномой матки в терминальной стадии, показывающий данные, сходные с данными на фиг. 13.
Фиг. 15 - скан КТ пациента с карциномой матки в терминальной стадии, показывающий данные, сходные с данными на фиг. 14.
Фиг. 16 - скан ЯМР (ядерно-магнитной диагностики) матки, заполненной фекальным материалом, просачивающимся из прямой кишки через отверстие перфорации матки, которое образовалось после исчезновения ракового образования.
Фиг. 17 - изображение ЯМР, показывающее данные, подобные данным фиг. 16.
Фиг. 18 - изображение ЯМР матки после излечивания опухолевого образования.
Фиг. 19 - изображение ЯМР пациента с карциномой матки в терминальной стадии, показывающее данные, подобные данным на фиг. 18.
Фиг. 20 - изображение ЯМР пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающее заполнение плевральными жидкостями правой плевральной полости, вызванное раком правого легкого.
Фиг. 21 - скан КТ пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающий несимметричное опухолевое образование в правом легком.
Фиг. 22 - скан КТ пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающий увеличенные лимфатические узлы в средостении.
Фиг. 23 - скан КТ того же самого пациента, что и на фиг. 22.
Фиг. 24 - скан КТ того же самого пациента, что и на фиг. 23.
Фиг. 25 - скан КТ пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающий, что плевральная жидкость в правой плевральной полости начинает сокращаться в объеме после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 26 - скан КТ пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающий, что плевральная жидкость в правой плевральной полости была полностью абсорбирована после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 27 - скан КТ пациента с раком легкого в терминальной стадии, показывающий сокращение лимфатического узла до нормального размера после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 28 - скан КТ, показывающий такие же данные, что и на фиг. 27.
Фиг. 29 - скан КТ, показывающий такие же данные, что и на фиг. 28.
Фиг. 30 - скан КТ, показывающий такие же данные, что и на фиг. 29.
Фиг. 31 - скан КТ пациента с раком, включающим в себя верхнечелюстную (гайморову) пазуху, в терминальной стадии, показывающий, что правая верхнечелюстная полость заполнена опухолевыми массами.
Фиг. 32 - скан КТ того же самого пациента, что и на фиг. 31, взятый при другом угле.
Фиг. 33 - скан КТ пациента с раком, включающим в себя верхнечелюстную (гайморову) пазуху, который был подвергнут лечению этого рака в больнице;
Фиг. 34 - скан КТ того же самого пациента, что и на фиг. 33.
Фиг. 34 - скан КТ того же самого пациента, что и на фиг. 33.
Фиг. 35 - скан КТ пациента с раком, включающим в себя верхнечелюстную (гайморову) пазуху, в терминальной стадии, показывающий, что раковые массы в правой носовой полости и верхнечелюстной пазухе были излечены после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 36 - скан КТ, показывающий те же самые данные, что и на фиг. 35.
Фиг. 37 - скан КТ, показывающий те же самые данные, что и на фиг. 36.
Фиг. 38 - скан КТ, показывающий те же самые данные, что и на фиг. 37.
Фиг. 39 - IVP (внутривенная пиелограмма) пациента с раком почки в терминальной стадии, показывающая опухолевое образование, расположенное в левой почечной лоханке.
Фиг. 40 - IVP того же самого пациента, что и на фиг. 39.
Фиг. 41 - IVP пациента с раком почки в терминальной стадии, показывающая опухолевое образование, расположенное в левой почечной лоханке, растущее в направлении почечной артерии.
Фиг. 42 - сканы КТ, взятые при различных углах, обеих почек пациента с раком почек в терминальной стадии.
Фиг. 43 - сканы КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, демонстрирующие те же самые данные, что и на фиг. 42.
Фиг. 44 - сканы КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, демонстрирующие те же самые данные, что и на фиг. 43.
Фиг. 45 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, показывающий сокращение ракового образования после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 46 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, демонстрирующий те же данные, что и на фиг. 45.
Фиг. 47 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, демонстрирующий те же данные, что и на фиг. 46.
Фиг. 48 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, демонстрирующий те же данные, что и на фиг. 47.
Фиг. 49 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, показывающий заметное сокращение опухолевого образования в левой почке после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 50 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, показывающий дополнительное сокращение опухолевой массы, в сравнении с фиг. 49.
Фиг. 51 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, показывающий, что белый затененный контрастный материал заполнил пространство, занимаемое прежде опухолевой массой в левой почке.
Фиг. 52 - скан КТ пациента с карциномой почек в терминальной стадии, показывающий крошечные опухолевые массы, оставшиеся в левой почке и в левой почечной лоханке.
Фиг. 53 - скан КТ пациента с раком мочевого пузыря в терминальной стадии, демонстрирующий опухолевые массы в темном затенении, расположенные в правом углу и на левой стенке мочевого пузыря.
Фиг. 54 - скан КТ, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 53.
Фиг. 55 - скан КТ пациента с раком мочевого пузыря в терминальной стадии, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 54, показывающий опухолевую массу в белом затенении на левой стенке мочевого пузыря.
Фиг. 56 - скан КТ, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 55.
Фиг. 57 - скан КТ пациента с раком мочевого пузыря в терминальной стадии, показывающий исчезновение опухолевых масс после введения фармацевтической композиции Аs4O6.
Фиг. 58 - скан КТ пациента с раком мочевого пузыря в терминальной стадии, обнаруживающий те же самые данные, что и на фиг. 57.
Фиг. 59 - скан КТ пациента с раком мочевого пузыря в терминальной стадии, показывающий, что после лечения мочевой пузырь имеет нормальный вид.
Фиг. 60 - скан КТ, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 59.
Фиг. 61 - скан КТ, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 60.
Фиг. 62 - скан КТ, демонстрирующий те же самые данные, что и на фиг. 61.
Подробное описание предпочтительного варианта
Определения
Данное изобретение обеспечивает противораковые композиции для лечения раковых заболеваний или опухолей млекопитающих, в частности человека, содержащие эффективное количество противоракового соединения, гексоксида мышьяка (Аs4O6), и фармацевтически приемлемый носитель.
Определения
Данное изобретение обеспечивает противораковые композиции для лечения раковых заболеваний или опухолей млекопитающих, в частности человека, содержащие эффективное количество противоракового соединения, гексоксида мышьяка (Аs4O6), и фармацевтически приемлемый носитель.
В применении здесь "противораковое соединение" представляет собой гексоксид мышьяка (Аs4O6). Гексоксид мышьяка выделен и очищен из Sinsuk. Противораковый агент обычно смешан с фармацевтически приемлемым носителем. Этот носитель может быть в виде твердого вещества или в виде жидкости и этот тип обычно выбирают на основе используемого типа введения. Аs4O6 подробно описан ниже.
В применении здесь "рак" обозначает все типы раковых заболеваний или неоплазмы или опухолей, обнаруженных в млекопитающих.
В применении здесь термин "содержащий" обозначает различные компоненты, которые могут быть вместе использованы в фармацевтической композиции этого изобретения.
В применении здесь "фармацевтически приемлемый компонент" является компонентом, который пригоден для использования для людей без неуместных неблагоприятных побочных эффектов (таких как токсичность, раздражение и аллергическая реакция).
В применении здесь "фармацевтический носитель" обозначает фармацевтически приемлемый носитель, суспендирующий агент или наполнитель для доставки противоракового соединения в животное или человека. Этот носитель может быть жидким или твердым и его выбирают с учетом планируемого способа введения.
В одном предпочтительном варианте данного изобретения эта композиция содержит смесь гексоксида мышьяка и ингредиентов восточной медицины в качестве фармацевтически приемлемого носителя. Предпочтительным способом обработки композиций данного изобретения для глотания является смешивание и размалывание всех ингредиентов в виде сухих порошков. Индивидуальные ингредиенты получают из источников, указанных ниже. Затем сухую порошкообразную смесь обрабатывают далее в форму пилюль или прессованных таблеток и т.д. Желательный порошок получают размалыванием всех ингредиентов в подходящем количестве в подходящей мельнице до тонкоизмельченного порошка.
Ингредиенты восточной медицины в соответствии с данным изобретением описаны в Восточной Медицинской Священной книге (Doneibogam). В применении в этом описании (и в формуле изобретения) "ингредиенты восточной медицины" в соответствии с данным изобретением определены далее следующим образом:
Sinsuk, известный также как Beesang в восточной медицине, является природным минералом, токсичным для человека, главным компонентом которого является Аs4O6.
Sinsuk, известный также как Beesang в восточной медицине, является природным минералом, токсичным для человека, главным компонентом которого является Аs4O6.
Hodongroo (Hodongjoo) является затвердевшей смолой дерева Populus diversifolia Schrenk. Она образуется при нахождении смолы вышеуказанного дерева в земле в течение продолжительного времени.
Chunsangap является скутумом (щитом) животного Manis pentadactyla L., принадлежащего к роду Manidae.
Baekchool является корневым побегом растения Atractyloades macrocephale Koidz.
Woowhang является камнем в желчном пузыре или желчном протоке желтой коровы, Bos taurus domesticus Gmelin, принадлежащей к семейству Bovidae.
Sahyang является экскрецией, секретируемой самцом кабарги, Moschus moschiferus L., принадлежащей к семейству Cervidae.
Shingok, известный также как Shingook в восточной медицине, является медицинскими дрожжами, которые ферментируют твердое вещество, изготовленное из смесей порошкообразных зерен пшеницы и некоторых лекарственных растений.
Моrуо является оболочкой Ostrea gigas Thunberg, принадлежащего к семейству Ostrediae. Его основными компонентами являются СаСО3, СаРO4, СаSO4 и кератин.
Yongnyehyang является высушенной смолой, полученной из дерева Dryobalanops aromatica Gaertn.
Yoohyang является высушенной смолой, полученной из дерева Boswellia neglecta M.
Molryak является высушенной смолой, полученной из дерева Commiphora myrrha, принадлежащего к семейству Burseraceae.
Backbongryung является плодовым телом Poria cocos (Schw.) Wolf., принадлежащим к семейству Ployporaceae.
Sangbaekpi, известный также как корень или кора шелковицы, является корнями или корой (поверхность которых необязательно удалена) Morus alba L. или других близкородственных деревьев, принадлежащих к семейству Moraceae. Их сушат и измельчают в порошок.
Galgeun является высушенным препаратом корней Pueraria thunbergiana.
Macheehyun является высушенным препаратом лекарственного растения Portulaca oleracea L., принадлежащим к семейству Portulacaceae.
Omeeja является плодом, полученным от Schizandra chinensis (Turcz.) Baill., принадлежащего к семейству Magnoliaceae.
Hyulgal, известный также как Kiringal в восточной медицине, является высушенной смолой, полученной из дерева Epipremnum pinnatum, принадлежащего к семейству Аrасеае.
Seokko является CaSO4.H2O, который известен также как гипс.
Boongsa является боратом натрия (Na2B4O7.10Н2O) и должен быть очищен до фармацевтически приемлемой формы для использования.
Hansooseok является минералом, называемым ангидритом. В восточной медицине его называют "Eungsooseok" или "Jakseok".
Красный обработанный паром панакс (женьшень) является корнем Panax ginseng, обработанным проведением через горячую воду.
Далее будут описаны подробно предпочтительные варианты данного изобретения, примеры которых иллюстрируются сопутствующими чертежами.
ПРИМЕР 1: Выделение и очистка природного химического вещества HD-2
Смесь 10 г Sinsuk и 10 мл этанола (С2Н5OН) нагревали в течение 1 часа и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 1 часа. Добавляли другой объем 10 мл этанола к охлажденному Sinsuk и последовательное нагревание и охлаждение повторяли несколько раз. Продукт этой процедуры промывали в 20 мл дистиллированной воды с 10-минутным перемешиванием и качанием в течение 10 минут и к нему добавляли 2 мл дистиллированной воды. Спустя 1 минуту осадки собирали декантированием. Этот процесс собирания повторяли три раза. После хранения промытых осадков при -40oС в течение 24 часов осадки размораживали и выливали на фильтровальную бумагу и сушили при комнатной температуре. 9 г белого вещества получали в качестве очищенного конечного продукта.
Смесь 10 г Sinsuk и 10 мл этанола (С2Н5OН) нагревали в течение 1 часа и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 1 часа. Добавляли другой объем 10 мл этанола к охлажденному Sinsuk и последовательное нагревание и охлаждение повторяли несколько раз. Продукт этой процедуры промывали в 20 мл дистиллированной воды с 10-минутным перемешиванием и качанием в течение 10 минут и к нему добавляли 2 мл дистиллированной воды. Спустя 1 минуту осадки собирали декантированием. Этот процесс собирания повторяли три раза. После хранения промытых осадков при -40oС в течение 24 часов осадки размораживали и выливали на фильтровальную бумагу и сушили при комнатной температуре. 9 г белого вещества получали в качестве очищенного конечного продукта.
Это белое вещество дополнительно очищали для детоксикации. Соль помещали в фарфоровую чашку, сделанную из каолина, и нагревали для удаления водного компонента. После охлаждения при комнатной температуре это белое вещество помещали на поверхность соли и плотно накрывали фильтровальной бумагой и нагревали на протяжении 1 часа. После охлаждения при комнатной температуре белое вещество собирали. Этот процесс повторяли более 2 раз. В конце концов получали 2 г белого вещества, которое было названо HD-2 (см. фиг. 1).
ПРИМЕР 2: Структурный анализ природного химического вещества HD-2
Белое вещество, полученное в ПРИМЕРЕ 1, было отослано в Корейский институт науки и технологии для структурного анализа, где его идентифицировали как вещество с эмпирической формулой As4O6 с 3-мерной структурой, показанной на фиг. 2. Физические и химические параметры As4O6 суммированы в табл. 1. Атомные координаты (•104) и параметры эквивалентного изотропного смещения (А2•103) представлены в табл. 2, длины связей (А) и углы между связями (градусы) - в табл. 3 и параметры анизотропного смещения - в табл. 4.
Белое вещество, полученное в ПРИМЕРЕ 1, было отослано в Корейский институт науки и технологии для структурного анализа, где его идентифицировали как вещество с эмпирической формулой As4O6 с 3-мерной структурой, показанной на фиг. 2. Физические и химические параметры As4O6 суммированы в табл. 1. Атомные координаты (•104) и параметры эквивалентного изотропного смещения (А2•103) представлены в табл. 2, длины связей (А) и углы между связями (градусы) - в табл. 3 и параметры анизотропного смещения - в табл. 4.
ПРИМЕР 3: Противораковое действие HP-2 на клонированных опухолевых клетках in vitro
Природное химическое вещество, полученное в ПРИМЕРЕ 1, оценивали на противораковую эффективность испытанием прямой цитотоксичности на клонированных опухолевых клетках in vitro. Цисплатин использовали в качестве контрольного лекарственного средства.
Природное химическое вещество, полученное в ПРИМЕРЕ 1, оценивали на противораковую эффективность испытанием прямой цитотоксичности на клонированных опухолевых клетках in vitro. Цисплатин использовали в качестве контрольного лекарственного средства.
Эксперимент 1: Противораковое действие HD-2 на клонированных опухолевых клетках мышей и человека
Клонированные опухолевые клетки лейкоза Р388, лейкоза L1210, лимфомы L5178Y, карциномы ободочной кишки Соlоn26-М3.1 и меланомы B16-BL6, из мышей, и лейкоза К562, рака печени HEP-G2, рака молочной железы Hs578T, аденокарциномы AN-3-CA, карциномы ободочной кишки DLD и эпителиоидной карциномы HeLa, из человека, культивировали в культуральных средах EMM, DMEM или RPMI-1640, содержащих 7,5% фетальную телячью сыворотку (ФТС), как описано в руководстве АТСС. После высевания клонированных опухолевых клеток в тест-лунки при плотности 1•104/100 мкл различные концентрации HD-2 и цисплатина добавляли для испытания цитотоксичности двух веществ. Опухолевые клетки в тест-лунках инкубировали в термостате с 5% СO2 при 37oС в течение 2 дней. Противораковая эффективность двух веществ выражена в виде концентрации тест-вещества, требующейся для ингибирования роста опухолевых клеток на 50% (ED50, 50% эффективная доза), в сравнении с ростом контрольных опухолевых клеток, где не добавляли ни HD-2, ни цисплатин. Результаты (суммированные в табл. 5) показывают, что прямая цитотоксичность HD-2, измеренная при 48 часах инкубирования, была в 50±30 (среднее ± стандартное отклонение) раз выше, чем цитотоксичность цисплатина.
Клонированные опухолевые клетки лейкоза Р388, лейкоза L1210, лимфомы L5178Y, карциномы ободочной кишки Соlоn26-М3.1 и меланомы B16-BL6, из мышей, и лейкоза К562, рака печени HEP-G2, рака молочной железы Hs578T, аденокарциномы AN-3-CA, карциномы ободочной кишки DLD и эпителиоидной карциномы HeLa, из человека, культивировали в культуральных средах EMM, DMEM или RPMI-1640, содержащих 7,5% фетальную телячью сыворотку (ФТС), как описано в руководстве АТСС. После высевания клонированных опухолевых клеток в тест-лунки при плотности 1•104/100 мкл различные концентрации HD-2 и цисплатина добавляли для испытания цитотоксичности двух веществ. Опухолевые клетки в тест-лунках инкубировали в термостате с 5% СO2 при 37oС в течение 2 дней. Противораковая эффективность двух веществ выражена в виде концентрации тест-вещества, требующейся для ингибирования роста опухолевых клеток на 50% (ED50, 50% эффективная доза), в сравнении с ростом контрольных опухолевых клеток, где не добавляли ни HD-2, ни цисплатин. Результаты (суммированные в табл. 5) показывают, что прямая цитотоксичность HD-2, измеренная при 48 часах инкубирования, была в 50±30 (среднее ± стандартное отклонение) раз выше, чем цитотоксичность цисплатина.
Эксперимент 2: Противораковое действие HD-2 в фибробластных клетках 3Т3
Для дополнительного исследования цитотоксичности каждого вещества на клонированных опухолевых клетках фибробластные клетки ЗТЗ культивировали в тест-лунках, как описано в эксперименте 1. После высевания фибробластных клеток ЗТЗ в тест-лунки при плотности 1•104/100 мкл различные концентрации HD-2 и цисплатина добавляли для испытания временного хода (2, 4 и 6 часов после добавления) цитотоксичности, которую измеряли по способу ХТТ. Как показано на фиг. 3, цисплатин не обнаруживал какого-либо цитотоксического действия вплоть до 24 часов после добавления, но HD-2 продемонстрировал цитотоксическое действие, начиная с 4 часов после добавления. ED50 HD-2 были 1,10 мкг/мл и 0,21 мкг/мл при 4 и 6 часах после добавления, соответственно, что предполагает, что HD-2 обнаруживал ингибирующее действие на рост опухолей от начала этой фазы. При стадии 34 часа обработки наблюдали также действие на морфологию. В группе цисплатина в это время наблюдали частичный некроз опухолевых клеток или замедление роста опухолей. В противоположность этому, в группе HD-2 наблюдали полный некроз опухолевых клеток, вызывающий очевидные изменения в морфологии опухолей (такие как разрыв клеточных стенок), которые приводят к потере адгезивности раковых клеток. Это показывает, что прямое убивающее действие HD-2 проявляется в пределах короткого периода времени введения, в сравнении с действием общепринятых химиотерапевтических агентов, таких как цисплатин. ED50 HD-2 после 34 часов введения была 60 нг/мл, но ED50 цисплатина не могла быть определена, хотя частичное ингибирование роста опухолей наблюдали после 24 часов введения. В конце этого эксперимента (48 часов после введения) ED50 были 30 нг/мл и 8 мкг/мл для HD-2 и цисплатина соответственно. Таким образом, цитотоксичность HD-2 приблизительно в 270 раз выше цитотоксичности цисплатина.
Для дополнительного исследования цитотоксичности каждого вещества на клонированных опухолевых клетках фибробластные клетки ЗТЗ культивировали в тест-лунках, как описано в эксперименте 1. После высевания фибробластных клеток ЗТЗ в тест-лунки при плотности 1•104/100 мкл различные концентрации HD-2 и цисплатина добавляли для испытания временного хода (2, 4 и 6 часов после добавления) цитотоксичности, которую измеряли по способу ХТТ. Как показано на фиг. 3, цисплатин не обнаруживал какого-либо цитотоксического действия вплоть до 24 часов после добавления, но HD-2 продемонстрировал цитотоксическое действие, начиная с 4 часов после добавления. ED50 HD-2 были 1,10 мкг/мл и 0,21 мкг/мл при 4 и 6 часах после добавления, соответственно, что предполагает, что HD-2 обнаруживал ингибирующее действие на рост опухолей от начала этой фазы. При стадии 34 часа обработки наблюдали также действие на морфологию. В группе цисплатина в это время наблюдали частичный некроз опухолевых клеток или замедление роста опухолей. В противоположность этому, в группе HD-2 наблюдали полный некроз опухолевых клеток, вызывающий очевидные изменения в морфологии опухолей (такие как разрыв клеточных стенок), которые приводят к потере адгезивности раковых клеток. Это показывает, что прямое убивающее действие HD-2 проявляется в пределах короткого периода времени введения, в сравнении с действием общепринятых химиотерапевтических агентов, таких как цисплатин. ED50 HD-2 после 34 часов введения была 60 нг/мл, но ED50 цисплатина не могла быть определена, хотя частичное ингибирование роста опухолей наблюдали после 24 часов введения. В конце этого эксперимента (48 часов после введения) ED50 были 30 нг/мл и 8 мкг/мл для HD-2 и цисплатина соответственно. Таким образом, цитотоксичность HD-2 приблизительно в 270 раз выше цитотоксичности цисплатина.
ПРИМЕР 4: Механизм цитотоксического действия HD-2
Цитотоксичность HD-2 исследовали дополнительно для выяснения, связано ли это действие с некрозом опухолевых клеток по механизму апоптоза.
Цитотоксичность HD-2 исследовали дополнительно для выяснения, связано ли это действие с некрозом опухолевых клеток по механизму апоптоза.
Клетки HL-60 высевали при плотности 2•104 клеток/мл и адекватную концентрацию HD-2 растворяли в культуральной среде, после чего цисплатин добавляли к позитивной контрольной группе и культуральную среду без цисплатина добавляли к негативной контрольной группе. Клетки центрифугировали после 24-часовой инкубации и осажденные клетки промывали физиологическим буферным раствором (ЗФР) и опять инкубировали в буферном растворе (500 мМ Трис-Сl (рН 9,0), 20 мМ ЭДТА, 10 мМ NaCl, 1% ДСН и 500 мг/мл протеиназы К) при 50oС в течение 24 часов. Общую ДНК выделяли с использованием фенольной экстракции клеточного лизата, полученного этой обработкой, и наносили на пластинку с агарозным гелем для электрофореза. Как показано на фиг. 4, ДНК-сегментацию наблюдали при ~ 180 п.н., что является типичным результатом апоптоза, при концентрациях 2,5-25 мкг/мл HD-2.
ПРИМЕР 5: Острая токсичность HD-2
Острую токсичность перорального введения HD-2 оценивали в соответствии с критериями оценки токсичности, описанными в Article 96-8 of Notice on Food and Drug Safety (April 16, 1994). Для экспериментов с животными использовали крыс (Sprague-Dawley). Доза однократного перорального введения была в диапазоне от 0,4 до 1,25 г/кг веса тела для самцов крыс и от 0,4 до 0,625 г/кг веса тела для самок крыс. Общее состояние животных, токсические симптомы и смертность измеряли каждый час в течение начальных 6 часов после однократного введения и один раз в день после этого в течение 14 дней. Вес тела измеряли перед началом исследования, через 7 дней после введения и при аутопсии. Погибших крыс исследовали для нахождения причины смерти при аутопсии. В конце исследования всех живых крыс убивали передозировкой эфирной анестезии и основные органы исследовали на патологию невооруженным глазом. С максимальной дозой у самцов крыс (1,25 г/кг веса тела) смертность достигала 100% во время периода исследования. С высокой дозой у самцов крыс (0,85 г/кг веса тела) смертность была 60% и со средней дозой (0,8 г/кг веса тела) смертность была 10%. В случае самок крыс смертность была 100% в группе с максимальной дозой (0,625 г/кг веса тела), 80% в группе с высокой дозой (0,62 г/кг веса тела) и 40% в группе со средней дозой (0,58 г/кг веса тела). Клинические симптомы в пределах 3 дней перорального введения находились в диапазоне от зависимой от дозы депрессии до одышки. Некоторые крысы, проявляющие эти клинические симптомы, погибали, но другие восстанавливались до нормального состояния в пределах 2-3 дней клинических симптомов. Изменения в весе не обнаружили какого-либо значимого различия между группами исследования и контрольной группой во всех подгруппах с различными дозами. Аутопсия крыс, погибших во время этого периода исследования, обнаружила факты увеличенного объема желудка и наполненной жидкостью печени. Значимые результаты, связанные с введением HD-2, не наблюдались при аутопсии убитых крыс в конце этого исследования.
Острую токсичность перорального введения HD-2 оценивали в соответствии с критериями оценки токсичности, описанными в Article 96-8 of Notice on Food and Drug Safety (April 16, 1994). Для экспериментов с животными использовали крыс (Sprague-Dawley). Доза однократного перорального введения была в диапазоне от 0,4 до 1,25 г/кг веса тела для самцов крыс и от 0,4 до 0,625 г/кг веса тела для самок крыс. Общее состояние животных, токсические симптомы и смертность измеряли каждый час в течение начальных 6 часов после однократного введения и один раз в день после этого в течение 14 дней. Вес тела измеряли перед началом исследования, через 7 дней после введения и при аутопсии. Погибших крыс исследовали для нахождения причины смерти при аутопсии. В конце исследования всех живых крыс убивали передозировкой эфирной анестезии и основные органы исследовали на патологию невооруженным глазом. С максимальной дозой у самцов крыс (1,25 г/кг веса тела) смертность достигала 100% во время периода исследования. С высокой дозой у самцов крыс (0,85 г/кг веса тела) смертность была 60% и со средней дозой (0,8 г/кг веса тела) смертность была 10%. В случае самок крыс смертность была 100% в группе с максимальной дозой (0,625 г/кг веса тела), 80% в группе с высокой дозой (0,62 г/кг веса тела) и 40% в группе со средней дозой (0,58 г/кг веса тела). Клинические симптомы в пределах 3 дней перорального введения находились в диапазоне от зависимой от дозы депрессии до одышки. Некоторые крысы, проявляющие эти клинические симптомы, погибали, но другие восстанавливались до нормального состояния в пределах 2-3 дней клинических симптомов. Изменения в весе не обнаружили какого-либо значимого различия между группами исследования и контрольной группой во всех подгруппах с различными дозами. Аутопсия крыс, погибших во время этого периода исследования, обнаружила факты увеличенного объема желудка и наполненной жидкостью печени. Значимые результаты, связанные с введением HD-2, не наблюдались при аутопсии убитых крыс в конце этого исследования.
При пероральном введении HD-2 крысам Sprague-Dawley LD50 (50% летальная доза) была 0,81 г/кг веса тела у самцов крыс и 0,58 г/кг веса тела у самок крыс. Результаты суммированы в табл. 6.
ПРИМЕР 6: Подострая токсичность HD-2
Подострую токсичность перорального введения HD-2 оценивали в соответствии с критериями оценки токсичности, описанными в Article 96-8 of Notice on Food and Drug Safety (April 16, 1994). Для экспериментов использовали крыс (штамма Sprague-Dawley), как и в случае экспериментов по острой токсичности. Доза для пероральных введений была 100 (высокая доза), 10 (средняя доза) и 1 мг (низкая доза) на кг веса тела, которые вводили один раз в день в течение 4 недель (всего 28 введений).
Подострую токсичность перорального введения HD-2 оценивали в соответствии с критериями оценки токсичности, описанными в Article 96-8 of Notice on Food and Drug Safety (April 16, 1994). Для экспериментов использовали крыс (штамма Sprague-Dawley), как и в случае экспериментов по острой токсичности. Доза для пероральных введений была 100 (высокая доза), 10 (средняя доза) и 1 мг (низкая доза) на кг веса тела, которые вводили один раз в день в течение 4 недель (всего 28 введений).
Следующие показатели наблюдали во время периода исследования:
1) Общие симптомы: общие симптомы, такие как анорхизм, саливация, диарея, рвота, полиурия, анурия и изменение фекалий, и тяжесть этих симптомов оценивали один раз в день во время периода исследования.
1) Общие симптомы: общие симптомы, такие как анорхизм, саливация, диарея, рвота, полиурия, анурия и изменение фекалий, и тяжесть этих симптомов оценивали один раз в день во время периода исследования.
2) Потребление пищи: дважды в неделю контролировали количество потребленной пищи и оставшееся количество на клетку.
3) Потребление воды: дважды в неделю контролировали количество потребленной воды и оставшееся количество на клетку.
4) Вес: веса измеряли дважды в неделю до конца этого исследования.
5) Анализ мочи: пробы мочи брали во время периода исследования из 5 случайно выбранных крыс на подгруппу исследования и регистрировали вид, объем и цвет. При помощи наборов для анализа мочи (N-multistix of Amersham) измеряли
рН, вес, лейкоциты, белок, кетоновое тело, уробилиноген, глюкозу и азот мочевины в крови.
рН, вес, лейкоциты, белок, кетоновое тело, уробилиноген, глюкозу и азот мочевины в крови.
6) Обследование глаз: офтальмоскопическое обследование 5 случайно выбранных крыс на подгруппу исследования выполняли для оценки внешнего вида, роговицы и глазного дна.
7) Гематологический и биохимический анализ: рутинный анализ крови выполняли для измерения числа эритроцитов, числа лейкоцитов, концентрации гемоглобина, числа моноцитов и лимфоцитов и времени свертывания крови. Биохимический анализ сыворотки выполняли для измерения активности альбуминтрансферазы, аспартаттрансаминазы, щелочной фосфатазы и альбумина.
8) Размер и вес органов: для каждого исследуемого животного измеряли вес и размер основных органов относительно веса тела. Измеренные органы включали в себя печень, почку, селезенку, сердце, надпочечник, мозг, щитовидную железу, яичник и семенник.
9) Патологическое обследование: органы фиксировали в формалине после измерения веса и размера и фиксированные ткани нарезали на срезы 5 мм при помощи микротома (АО Rotate Microtome) и окрашивали гематоксилином и эозином для микроскопического исследования.
Во время этого исследования смертных случаев не наблюдали и не наблюдали характерного клинического симптома, в том числе изменений в весе и потреблении корма и воды. Не наблюдали также какого-либо значимого отклонения при анализе мочи и обследовании глаз. Гематологическое и биохимическое исследование не выявило какого-либо значимого различия между группами исследования и контрольными группами. При обследовании на патологию при аутопсии гемосидерин, локализованный в цитоплазме проксимального тубулярного эпителия, и атрофию проксимального тубулярного эпителия почки наблюдали в небольшой степени в группе высокой дозы (100 мг/кг веса тела), но не в группах средней дозы, низкой дозы и в контрольной группе. Кроме этого, не наблюдали никаких патологических результатов, обладающих зависимыми от дозы свойствами или связанных с введением HD-2. Эти результаты суммированы в табл. 7.
Таким образом, пероральное введение HD-2, длящееся в течение 4 недель, не вызвало никакого значимого гематологического отклонения от нормы в группе высокой дозы (100 мг/кг веса тела), но наблюдали слабый патологический результат, предполагающий небольшое почечное отклонение от нормы. Однако в группе средней дозы такой патологии не наблюдали.
ПРИМЕР 7: Действие HD-2 на метастазирование рака
Эксперимент I: Ингибирующее действие перорально введенного HD-2 на метастазирование рака
С использованием мышиной модели оценивали ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака с применением клонированных опухолевых клеток и в сравнении с цисплатином. Так как однократное введение 500 мг/кг веса тела в день не давало никакого побочного эффекта в крысах (см. ПРИМЕР 5), ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака исследовали с использованием дозы ниже 500 мг/кг веса тела. Клетки меланомы B16-BL6 или клетки карциномы соlоn26-М3.1 инокулировали в мышей и считали метастатические опухолевые образования, появляющиеся в легких. После инокуляции опухолевых клеток различные дозы HD-2 или цисплатина вводили один раз в день после инокуляции для определения оптимальной концентрации для антиметастатической эффективности. Через образования, появляющиеся в легких. После инокуляции опухолевых клеток различные дозы HD-2 или цисплатина вводили один раз в день после инокуляции для определения оптимальной концентрации для антиметастатической эффективности. Через семь дней после инокуляции HD-2 или цисплатин вводили для измерения терапевтической эффективности на выросшем опухолевом образовании. Как показано в табл. 8, пероральное введение HD-2 (0,1-10 мг) оказывало значимое антиметастатическое действие в сравнении с контрольной группой (группой цисплатина). Максимальную активность наблюдали при дозе 1 мг с очень высокой противораковой эффективностью (86%). На 7-й день, когда инокулированные опухолевые клетки полностью оседали в органах-мишенях, пероральное введение HD-2 показало антиметастатическую эффективность 70%. Это свидетельствовало о том, что пероральное введение HD-2 было вполне эффективным для лечения установленного рака.
Эксперимент I: Ингибирующее действие перорально введенного HD-2 на метастазирование рака
С использованием мышиной модели оценивали ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака с применением клонированных опухолевых клеток и в сравнении с цисплатином. Так как однократное введение 500 мг/кг веса тела в день не давало никакого побочного эффекта в крысах (см. ПРИМЕР 5), ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака исследовали с использованием дозы ниже 500 мг/кг веса тела. Клетки меланомы B16-BL6 или клетки карциномы соlоn26-М3.1 инокулировали в мышей и считали метастатические опухолевые образования, появляющиеся в легких. После инокуляции опухолевых клеток различные дозы HD-2 или цисплатина вводили один раз в день после инокуляции для определения оптимальной концентрации для антиметастатической эффективности. Через образования, появляющиеся в легких. После инокуляции опухолевых клеток различные дозы HD-2 или цисплатина вводили один раз в день после инокуляции для определения оптимальной концентрации для антиметастатической эффективности. Через семь дней после инокуляции HD-2 или цисплатин вводили для измерения терапевтической эффективности на выросшем опухолевом образовании. Как показано в табл. 8, пероральное введение HD-2 (0,1-10 мг) оказывало значимое антиметастатическое действие в сравнении с контрольной группой (группой цисплатина). Максимальную активность наблюдали при дозе 1 мг с очень высокой противораковой эффективностью (86%). На 7-й день, когда инокулированные опухолевые клетки полностью оседали в органах-мишенях, пероральное введение HD-2 показало антиметастатическую эффективность 70%. Это свидетельствовало о том, что пероральное введение HD-2 было вполне эффективным для лечения установленного рака.
Эксперимент II: Ингибирующее действие внутривенно введенного HD-2 на метастазирование рака
Подобно эксперименту I, ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака сравнивали с цисплатином с использованием клонированных опухолевых клеток, обладающих высокой метастатической способностью. В этом эксперименте HD-2 вводили внутривенно с дозой менее 500 мг/кг веса тела в день. Как суммировано в табл. 9, дозы 10-100 мкг HD-2 имели антиметастатическую эффективность более 90%, что предполагало, что HD-2 был более эффективным, чем цисплатин, при одной и той же дозе. Десять микрограммов HD-2 и цисплатина, что считается оптимальной дозой для ингибирования метастазирования рака при 7-м дне после инокуляции опухолевых клеток, имели противораковое действие 67,5% и 50,0% соответственно, при внутривенном введении. Это предполагает, что противораковая эффективность HD-2 является лучшей, чем эффективность общепринятых противораковых лекарственных средств, и HD-2 также эффективен в лечении полностью выросшей раковой опухоли в терминальной стадии.
Подобно эксперименту I, ингибирующее действие HD-2 на метастазирование рака сравнивали с цисплатином с использованием клонированных опухолевых клеток, обладающих высокой метастатической способностью. В этом эксперименте HD-2 вводили внутривенно с дозой менее 500 мг/кг веса тела в день. Как суммировано в табл. 9, дозы 10-100 мкг HD-2 имели антиметастатическую эффективность более 90%, что предполагало, что HD-2 был более эффективным, чем цисплатин, при одной и той же дозе. Десять микрограммов HD-2 и цисплатина, что считается оптимальной дозой для ингибирования метастазирования рака при 7-м дне после инокуляции опухолевых клеток, имели противораковое действие 67,5% и 50,0% соответственно, при внутривенном введении. Это предполагает, что противораковая эффективность HD-2 является лучшей, чем эффективность общепринятых противораковых лекарственных средств, и HD-2 также эффективен в лечении полностью выросшей раковой опухоли в терминальной стадии.
ПРИМЕР 8: Противораковый механизм действия HD-2 in vivo
In vivo механизм противоракового действия HD-2 исследовали на мышах. После суспендирования 4•105 клеток меланомы B16-BL6 в 50% ЗФР их инъецировали интрадермально в 2 места на спине 6-7-недельных мышей C57BL/6. Спустя три дня после инъекции опухоли один миллиграмм HD-2 вводили перорально и измеряли размер инокулированной меланомы и число кровеносных сосудов в участках опухоли и около опухоли. Контрольной группе предоставляли перорально ЗФР. Как показано на фиг. 5, число новых кровеносных сосудов, которые наблюдаются при пролиферации и метастазировании рака, имеет тенденцию к уменьшению после введения HD-2. Размер массы твердой опухоли также значимо уменьшался пропорционально уменьшению числа новых кровеносных сосудов. Это предполагает, что HD-2 ингибирует инвазию в ткани и адгезию на тканях, которая сопровождает образование новых кровеносных сосудов.
In vivo механизм противоракового действия HD-2 исследовали на мышах. После суспендирования 4•105 клеток меланомы B16-BL6 в 50% ЗФР их инъецировали интрадермально в 2 места на спине 6-7-недельных мышей C57BL/6. Спустя три дня после инъекции опухоли один миллиграмм HD-2 вводили перорально и измеряли размер инокулированной меланомы и число кровеносных сосудов в участках опухоли и около опухоли. Контрольной группе предоставляли перорально ЗФР. Как показано на фиг. 5, число новых кровеносных сосудов, которые наблюдаются при пролиферации и метастазировании рака, имеет тенденцию к уменьшению после введения HD-2. Размер массы твердой опухоли также значимо уменьшался пропорционально уменьшению числа новых кровеносных сосудов. Это предполагает, что HD-2 ингибирует инвазию в ткани и адгезию на тканях, которая сопровождает образование новых кровеносных сосудов.
ПРИМЕР 9: Ингибирующее действие HD-2 на индуцированный канцерогеном онкогенез
Для исследования ингибирующего действия HD-2 на индуцированный канцерогеном онкогенез N-нитрозодиэтиламин (NDEA) инъецировали в качестве канцерогена в брюшинную полость мыши (штамма B6C3F1) в концентрации 90 мг на кг веса тела для индукции рака. При 2, 4, 8, 16 и 32 неделях после инъекции канцерогена 100 г HD-2 вводили перорально и такое же количество дистиллированной воды инъецировали в мышей контрольной группы. Спустя сорок две недели после введения NDEA мышей умерщвляли для измерения частоты появления и размера опухолей, образованных в легком и печени. Как показано на фиг. 6, частота появления NDEA-индуцированной опухоли печени эффективно ингибировалась после перорального введения HD-2. Частота появления NDEA-индуцированной опухоли печени была 90%, но после введения HD-2 частота появления снижалась до 5-22%, несмотря на вариации в зависимости от периода введения HD-2. Таким образом, HD-2 ингибировал индуцированный канцерогеном онкогенез в печени на 78-95%. HD-2 ингибировал также полностью спонтанную гепатому, частота появления которой, как сообщалось, составляет приблизительно 20% без введения HD-2. В легком ингибирующее действие HD-2 в уменьшении индуцированного канцерогеном онкогенеза было не столь драматичным, как в печени. Однако при введении HD-2 при 4 неделях после инъекции NDEA индуцированный канцерогеном онкогенез ингибировался на 30%. Далее, спонтанные (самопроизвольные) раковые опухоли легкого полностью ингибировались HD-2, что указывает на то, что пероральное введение адекватной дозы HD-2 снижает частоту появления самопроизвольных раковых опухолей. Как показано на фиг. 7, число опухолевых образований в легком было ~2 в группе HD-2 в сравнении с 7 в контрольной группе, что свидетельствует об эффективности HD-2 в ингибировании индуцированного канцерогеном онкогенеза. Эти результаты предполагают, что HD-2 был очень эффективным не только в лечении, но и в профилактике злокачественных опухолей.
Для исследования ингибирующего действия HD-2 на индуцированный канцерогеном онкогенез N-нитрозодиэтиламин (NDEA) инъецировали в качестве канцерогена в брюшинную полость мыши (штамма B6C3F1) в концентрации 90 мг на кг веса тела для индукции рака. При 2, 4, 8, 16 и 32 неделях после инъекции канцерогена 100 г HD-2 вводили перорально и такое же количество дистиллированной воды инъецировали в мышей контрольной группы. Спустя сорок две недели после введения NDEA мышей умерщвляли для измерения частоты появления и размера опухолей, образованных в легком и печени. Как показано на фиг. 6, частота появления NDEA-индуцированной опухоли печени эффективно ингибировалась после перорального введения HD-2. Частота появления NDEA-индуцированной опухоли печени была 90%, но после введения HD-2 частота появления снижалась до 5-22%, несмотря на вариации в зависимости от периода введения HD-2. Таким образом, HD-2 ингибировал индуцированный канцерогеном онкогенез в печени на 78-95%. HD-2 ингибировал также полностью спонтанную гепатому, частота появления которой, как сообщалось, составляет приблизительно 20% без введения HD-2. В легком ингибирующее действие HD-2 в уменьшении индуцированного канцерогеном онкогенеза было не столь драматичным, как в печени. Однако при введении HD-2 при 4 неделях после инъекции NDEA индуцированный канцерогеном онкогенез ингибировался на 30%. Далее, спонтанные (самопроизвольные) раковые опухоли легкого полностью ингибировались HD-2, что указывает на то, что пероральное введение адекватной дозы HD-2 снижает частоту появления самопроизвольных раковых опухолей. Как показано на фиг. 7, число опухолевых образований в легком было ~2 в группе HD-2 в сравнении с 7 в контрольной группе, что свидетельствует об эффективности HD-2 в ингибировании индуцированного канцерогеном онкогенеза. Эти результаты предполагают, что HD-2 был очень эффективным не только в лечении, но и в профилактике злокачественных опухолей.
ПРИМЕР 10: Приготовление фармацевтической композиции для противораковой терапии
5 г HD-2 смешивали со следующими ингредиентами Китайской медицины и измельчали в порошкообразную форму: hodongjoo 7 г, chunsangap 7 г, baekchool 10 г, woowhang 3 г, sahyang 3 г, shingok 5 г, moryo 5 г, yongnyehyang 3 г, yoohyang 5 г, molryak 5 г, baekbongryung 10 г, sangbaekpi 10 г, galgeun 10 г, macheehyun 5 г, ohmeeja 5 г, hyulgal 5 г, seokko 5 г, boongsa 5 г, hansooseok 5 г и красный обработанный паром ginseng (женьшень) 7 г. К этому порошку добавляли дистиллированную воду для образования пилюль 1-1,5 г для перорального введения. Эти пилюли использовали для приготовления таблеток ~ 1,33 г, подходящих для разовой дозы, которые вводили раковым пациентам в терминальной стадии три раза в день, т.е. всего 4 г в день. Эффективная доза HD-2 может зависеть от доли лекарственных средств и возраста, пола и состояния здоровья пациента. В общем, обычная доза была 50 г на кг веса тела, с верхней границей 160-330 г на кг веса тела. Хотя использовали ингредиенты Восточной медицины для приготовления фармацевтической композиции для клинического испытания HD-2, для этой цели может быть использована любая фармацевтическая композиция. Химически синтезированный гексоксид мышьяка (Аs4O6) может быть использован вместо HD-2, который был получен выделением и очисткой Sinsuk в этом исследовании.
5 г HD-2 смешивали со следующими ингредиентами Китайской медицины и измельчали в порошкообразную форму: hodongjoo 7 г, chunsangap 7 г, baekchool 10 г, woowhang 3 г, sahyang 3 г, shingok 5 г, moryo 5 г, yongnyehyang 3 г, yoohyang 5 г, molryak 5 г, baekbongryung 10 г, sangbaekpi 10 г, galgeun 10 г, macheehyun 5 г, ohmeeja 5 г, hyulgal 5 г, seokko 5 г, boongsa 5 г, hansooseok 5 г и красный обработанный паром ginseng (женьшень) 7 г. К этому порошку добавляли дистиллированную воду для образования пилюль 1-1,5 г для перорального введения. Эти пилюли использовали для приготовления таблеток ~ 1,33 г, подходящих для разовой дозы, которые вводили раковым пациентам в терминальной стадии три раза в день, т.е. всего 4 г в день. Эффективная доза HD-2 может зависеть от доли лекарственных средств и возраста, пола и состояния здоровья пациента. В общем, обычная доза была 50 г на кг веса тела, с верхней границей 160-330 г на кг веса тела. Хотя использовали ингредиенты Восточной медицины для приготовления фармацевтической композиции для клинического испытания HD-2, для этой цели может быть использована любая фармацевтическая композиция. Химически синтезированный гексоксид мышьяка (Аs4O6) может быть использован вместо HD-2, который был получен выделением и очисткой Sinsuk в этом исследовании.
ПРИМЕР 11: Клиническое испытание на различных формах злокачественных опухолей
Раковые пациенты с диагнозами рака матки, легкого, верхнечелюстной (гайморовой) полости, почки или мочевого пузыря, поставленными в больнице с использованием основательных клинических обследований, были отобраны для этого исследования и большинство из них находились в терминальной стадии заболевания с ожидаемым оставшимся временем жизни 6-12 месяцев. После получения согласия пациента или опекуна, таблетки, описанные в ПРИМЕРЕ 10, вводили 3 раза в день для испытания противораковой эффективности.
Раковые пациенты с диагнозами рака матки, легкого, верхнечелюстной (гайморовой) полости, почки или мочевого пузыря, поставленными в больнице с использованием основательных клинических обследований, были отобраны для этого исследования и большинство из них находились в терминальной стадии заболевания с ожидаемым оставшимся временем жизни 6-12 месяцев. После получения согласия пациента или опекуна, таблетки, описанные в ПРИМЕРЕ 10, вводили 3 раза в день для испытания противораковой эффективности.
Эксперимент 1: Клиническое испытание на пациенте с раком матки
Субъект исследования (EunSook Park) был диагностирован как имеющий рак шейки матки (окончательный диагноз: плоскоклеточная карцинома) в больнице при Сеульском государственном университете (Seoul National University) в октябре 1993 года. Даже после повторяемой противораковой терапии (8 раз) раковые клетки продолжали расти и охватывать лимфатические узлы, прямую кишку и мочевой пузырь. Поэтому мочу собирали через трубку, вставленную в правую почку, и больная была прикована к постели и не могла принимать пищу. Доктор информировал больную о предполагаемом оставшемся времени жизни менее 3 месяцев. Таблетки, описанные в ПРИМЕРЕ 10, вводили больной EunSook Park в течение 3 месяцев и ход болезни подвергали мониторингу с использованием компьютерной томографии (КТ) и ядерно-магнитной диагностики (ЯМР). Сканы КТ (фиг. 8-19) показали, что после исчезновения опухолевого образования образовались перфорации (отверстия) в стенках матки, мочевого пузыря и прямой кишки, и фекалии из прямой кишки просочились в матку через перфорированные стенки, вследствие чего была выполнена колостомия на больной в январе 1996 года.
Субъект исследования (EunSook Park) был диагностирован как имеющий рак шейки матки (окончательный диагноз: плоскоклеточная карцинома) в больнице при Сеульском государственном университете (Seoul National University) в октябре 1993 года. Даже после повторяемой противораковой терапии (8 раз) раковые клетки продолжали расти и охватывать лимфатические узлы, прямую кишку и мочевой пузырь. Поэтому мочу собирали через трубку, вставленную в правую почку, и больная была прикована к постели и не могла принимать пищу. Доктор информировал больную о предполагаемом оставшемся времени жизни менее 3 месяцев. Таблетки, описанные в ПРИМЕРЕ 10, вводили больной EunSook Park в течение 3 месяцев и ход болезни подвергали мониторингу с использованием компьютерной томографии (КТ) и ядерно-магнитной диагностики (ЯМР). Сканы КТ (фиг. 8-19) показали, что после исчезновения опухолевого образования образовались перфорации (отверстия) в стенках матки, мочевого пузыря и прямой кишки, и фекалии из прямой кишки просочились в матку через перфорированные стенки, вследствие чего была выполнена колостомия на больной в январе 1996 года.
Эксперимент 2: Клиническое испытание на пациенте с раком легкого
Субъект исследования (KyungJoo Lee) был мужчиной в возрасте 30 лет и лечился от лихорадки и озноба с диагнозом пневмония, поставленным 19 марта 1996 года, без какого-либо улучшения симптомов. Ему был поставлен диагноз 4-й стадии рака легкого (окончательный диагноз: недифференцированная аденокарцинома) в больнице SeongGa Hospital of Bucheon и этот диагноз был подтвержден в Samsung Medical Center при IlWonDong в Сеуле с использованием дополнительных основательных обследований. Доктора сообщили ему, что срок его жизни ограничен 6-12 месяцами. Сканы КТ (фиг. 21-24), взятые 21 марта 1996 года в больнице SeongGa, показали несимметричное опухолевое образование в правом легком, с плевральными жидкостями, заполнившими правую плевральную полость, и увеличенными лимфатическими узлами в средостении. KyungJoo Lee давали таблетки, приготовленные, как описано в ПРИМЕРЕ 10, в течение 8 месяцев при мониторинге течения заболевания с использованием КТ-сканирования. Как показано на фиг. 25-30, опухолевое образование постепенно сокращалось в размере до полного исчезновения после 8 месяцев лекарственной терапии.
Субъект исследования (KyungJoo Lee) был мужчиной в возрасте 30 лет и лечился от лихорадки и озноба с диагнозом пневмония, поставленным 19 марта 1996 года, без какого-либо улучшения симптомов. Ему был поставлен диагноз 4-й стадии рака легкого (окончательный диагноз: недифференцированная аденокарцинома) в больнице SeongGa Hospital of Bucheon и этот диагноз был подтвержден в Samsung Medical Center при IlWonDong в Сеуле с использованием дополнительных основательных обследований. Доктора сообщили ему, что срок его жизни ограничен 6-12 месяцами. Сканы КТ (фиг. 21-24), взятые 21 марта 1996 года в больнице SeongGa, показали несимметричное опухолевое образование в правом легком, с плевральными жидкостями, заполнившими правую плевральную полость, и увеличенными лимфатическими узлами в средостении. KyungJoo Lee давали таблетки, приготовленные, как описано в ПРИМЕРЕ 10, в течение 8 месяцев при мониторинге течения заболевания с использованием КТ-сканирования. Как показано на фиг. 25-30, опухолевое образование постепенно сокращалось в размере до полного исчезновения после 8 месяцев лекарственной терапии.
Эксперимент 3: Клиническое испытание на пациенте с раком верхнечелюстной (гайморовой) пазухи
Субъекту этого исследования (HeeGon Kim) был поставлен диагноз злокачественной опухоли, охватывающей правую носовую полость и верхнечелюстную пазуху (окончательный диагноз: аденоидная цистаденома), в 1981 году, которая была неоперабельной вследствие метастазирования в кость. Его лечили химиотерапией и лучевой терапией в больнице CheonJu Jesuit Hospital и в больнице при Сеульском государственном университете (Seoul National University), но болезнь ухудшалась. После КТ-сканирования 5 марта 1990 года пациенту было рекомендовано приготовиться к смерти. Как показано в сканах КТ, взятых 31 марта 1990 года (фиг. 31 и 32), правая верхнечелюстная пазуха была заполнена опухолевыми массами и опухолевая масса наблюдалась также в правой носовой полости. Специалисты по раку в больнице при Сеульском государственном университете предписали противораковую химиотерапию в течение 2 месяцев, но сканы КТ, взятые после завершения химиотерапии, показали дополнительный рост опухолевых образований, охвативших ближайшие районы мозга, правое глазное яблоко и правую и левую носовые полости. HeeGon Kim давали таблетки, приготовленные, как описано в ПРИМЕРЕ 10, в течение 3 месяцев и наблюдали течение болезни с использованием КТ-сканирования 27 февраля 1991 года в больнице Сеульского государственного университета. Сканы КТ (фиг. 35-38) показали, что большинство опухолевых образований исчезли и правая носовая полость и верхнечелюстная (гайморова) пазуха были заполнены обычным потоком воздуха.
Субъекту этого исследования (HeeGon Kim) был поставлен диагноз злокачественной опухоли, охватывающей правую носовую полость и верхнечелюстную пазуху (окончательный диагноз: аденоидная цистаденома), в 1981 году, которая была неоперабельной вследствие метастазирования в кость. Его лечили химиотерапией и лучевой терапией в больнице CheonJu Jesuit Hospital и в больнице при Сеульском государственном университете (Seoul National University), но болезнь ухудшалась. После КТ-сканирования 5 марта 1990 года пациенту было рекомендовано приготовиться к смерти. Как показано в сканах КТ, взятых 31 марта 1990 года (фиг. 31 и 32), правая верхнечелюстная пазуха была заполнена опухолевыми массами и опухолевая масса наблюдалась также в правой носовой полости. Специалисты по раку в больнице при Сеульском государственном университете предписали противораковую химиотерапию в течение 2 месяцев, но сканы КТ, взятые после завершения химиотерапии, показали дополнительный рост опухолевых образований, охвативших ближайшие районы мозга, правое глазное яблоко и правую и левую носовые полости. HeeGon Kim давали таблетки, приготовленные, как описано в ПРИМЕРЕ 10, в течение 3 месяцев и наблюдали течение болезни с использованием КТ-сканирования 27 февраля 1991 года в больнице Сеульского государственного университета. Сканы КТ (фиг. 35-38) показали, что большинство опухолевых образований исчезли и правая носовая полость и верхнечелюстная (гайморова) пазуха были заполнены обычным потоком воздуха.
Эксперимент 4: Клиническое испытание на пациенте с раком почки
Субъекту этого исследования (YongHa Lee) был поставлен диагноз рака почки в терминальной стадии в отделе урологии больницы Pusan Merinol Hospital после основательных обследований, в том числе с использованием КТ-сканирования. Пациент отказался от хирургического вмешательства после того, как ему сообщили о низком коэффициенте выживания 20%, даже с радикальной нефрэктомией (удалением почки). Сканы КТ, взятые при выписке (фиг. 39-44), показали, что левая почка была увеличенной по сравнению с правой почкой и левая почечная лоханка не заполнялась контрастным веществом, что указывало на присутствие опухолевого образования в этой области. Внутривенные пиелограммы получали после введения таблеток, приготовленных, как описано в ПРИМЕРЕ 10. Внутривенные пиелограммы (фиг. 45 и 46) показали заметное уменьшение опухолевой массы после 6 месяцев лекарственной терапии, а сканы КТ (фиг. 47-50) показали 80% уменьшение опухолевой массы. Левая нефрэктомия была сделана в больнице Pusan Baek Hospital и было подтверждено наличие почечно-клеточного рака при патологическом исследовании. При дополнительном введении таблеток, описанных в ПРИМЕРЕ 10, в течение 3 месяцев сканы КТ (фиг. 51 и 52) показали только крохотную опухолевую массу в левой почке и почечной лоханке, свидетельствуя о том, что заболевание было почти вылеченным.
Субъекту этого исследования (YongHa Lee) был поставлен диагноз рака почки в терминальной стадии в отделе урологии больницы Pusan Merinol Hospital после основательных обследований, в том числе с использованием КТ-сканирования. Пациент отказался от хирургического вмешательства после того, как ему сообщили о низком коэффициенте выживания 20%, даже с радикальной нефрэктомией (удалением почки). Сканы КТ, взятые при выписке (фиг. 39-44), показали, что левая почка была увеличенной по сравнению с правой почкой и левая почечная лоханка не заполнялась контрастным веществом, что указывало на присутствие опухолевого образования в этой области. Внутривенные пиелограммы получали после введения таблеток, приготовленных, как описано в ПРИМЕРЕ 10. Внутривенные пиелограммы (фиг. 45 и 46) показали заметное уменьшение опухолевой массы после 6 месяцев лекарственной терапии, а сканы КТ (фиг. 47-50) показали 80% уменьшение опухолевой массы. Левая нефрэктомия была сделана в больнице Pusan Baek Hospital и было подтверждено наличие почечно-клеточного рака при патологическом исследовании. При дополнительном введении таблеток, описанных в ПРИМЕРЕ 10, в течение 3 месяцев сканы КТ (фиг. 51 и 52) показали только крохотную опухолевую массу в левой почке и почечной лоханке, свидетельствуя о том, что заболевание было почти вылеченным.
Эксперимент 5: Клиническое испытание на пациенте с раком мочевого пузыря
Субъект этого исследования (DaeJoong Kim) испытывал дизурию (расстройство мочеиспускания) с июня 1995 года и его лечили по поводу цистита без какого-либо улучшения. Ему был поставлен диагноз рака мочевого пузыря в Samsung Medical Center при основательном обследовании, в том числе с использованием КТ-сканирования. При дополнительном обследовании в больнице Seoul JoongAng Hospital сканы КТ (фиг. 53-56) показали опухолевые образования в темной тени в правом углу и левой стенке мочевого пузыря и был определен коэффициент выживания приблизительно 20% в пределах одного года. Пациента лечили таблетками, приготовленными, как описано в ПРИМЕРЕ 10, на протяжении 1 года. Сканы КТ (фиг. 57 и 58), полученные в больнице DongIn Hospital of KangNeung в июле 1996 года, не показали наличия ракового образования, а сканы КТ (фиг. 59-62), полученные в больнице HyunDae Hospital 18 марта 1997 года, показали полное излечивание от этого заболевания без какого-либо затенения, указывающего на опухолевое образование.
Субъект этого исследования (DaeJoong Kim) испытывал дизурию (расстройство мочеиспускания) с июня 1995 года и его лечили по поводу цистита без какого-либо улучшения. Ему был поставлен диагноз рака мочевого пузыря в Samsung Medical Center при основательном обследовании, в том числе с использованием КТ-сканирования. При дополнительном обследовании в больнице Seoul JoongAng Hospital сканы КТ (фиг. 53-56) показали опухолевые образования в темной тени в правом углу и левой стенке мочевого пузыря и был определен коэффициент выживания приблизительно 20% в пределах одного года. Пациента лечили таблетками, приготовленными, как описано в ПРИМЕРЕ 10, на протяжении 1 года. Сканы КТ (фиг. 57 и 58), полученные в больнице DongIn Hospital of KangNeung в июле 1996 года, не показали наличия ракового образования, а сканы КТ (фиг. 59-62), полученные в больнице HyunDae Hospital 18 марта 1997 года, показали полное излечивание от этого заболевания без какого-либо затенения, указывающего на опухолевое образование.
Как показано в ПРИМЕРАХ и описанных выше экспериментах, гексоксид мышьяка (Аs4O6), который был получен выделением и очисткой из природного материала, Sinsuk, обладал сильнодействующей противораковой эффективностью в экспериментах как in vivo, так и in vitro и ингибировал эффективно метастазирование рака в экспериментах с животными. Кроме того, природное соединение мышьяка (Аs4O6) было смешано с другими ингредиентами Восточной медицины для приготовления таблеток для перорального введения. Клиническое испытание на раковых пациентах, имеющих рак матки, легкого, верхнечелюстной (гайморовой) пазухи, почки или мочевого пузыря, показало заметное ингибирование пролиферации и метастазирования раковых клеток после введения таблеток, приготовленных из Аs4O6. Это предполагает, что данное изобретение могло бы быть использовано в качестве эффективного противоракового лекарственного средства, которое может оказать большое влияние на прогресс биомедицины.
Специалистам в данной области должно быть понятно, что разнообразные модификации и вариации могут быть произведены в агенте противораковой терапии, приготовленном из гексоксида мышьяка (Аs4O6) природного химического вещества, и его фармацевтической композиции без отхода от идеи или объема этого изобретения. Таким образом, подразумевается, что данное изобретение включает в себя модификации и вариации этого изобретения при условии, что они находятся в объеме пунктов прилагаемой формулы изобретения и их эквивалентов.
Claims (7)
1. Применение гексоксида мышьяка (As4O6) для приготовления фармацевтической композиции для лечения рака.
2. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая фармацевтически эффективное количество гексоксида мышьяка (As4O6) в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель.
3. Фармацевтическая композиция по п. 2, пригодная для лечения злокачественной опухоли матки.
4. Фармацевтическая композиция по п. 2, пригодная для лечения злокачественной опухоли легкого.
5. Фармацевтическая композиция по п. 2, пригодная для лечения злокачественной опухоли верхнечелюстной (гайморовой) пазухи.
6. Фармацевтическая композиция по п. 2, пригодная для лечения злокачественной опухоли почки.
7. Фармацевтическая композиция по п. 2, пригодная для лечения злокачественной опухоли мочевого пузыря.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000102228A RU2196593C2 (ru) | 2000-02-01 | 2000-02-01 | ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000102228A RU2196593C2 (ru) | 2000-02-01 | 2000-02-01 | ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2000102228A RU2000102228A (ru) | 2001-11-10 |
| RU2196593C2 true RU2196593C2 (ru) | 2003-01-20 |
Family
ID=20229956
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000102228A RU2196593C2 (ru) | 2000-02-01 | 2000-02-01 | ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2196593C2 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2539993A1 (fr) * | 1983-01-28 | 1984-08-03 | Darcheux Mario | Baume agissant sur les plaies cancereuses |
| US4808221A (en) * | 1987-08-25 | 1989-02-28 | Asarco Incorporated | Process for the recovery and separation of arsenic from antimony |
| CN1061908A (zh) * | 1991-12-21 | 1992-06-17 | 江西省妇产医院 | 一种治癌药物的制造方法 |
-
2000
- 2000-02-01 RU RU2000102228A patent/RU2196593C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2539993A1 (fr) * | 1983-01-28 | 1984-08-03 | Darcheux Mario | Baume agissant sur les plaies cancereuses |
| US4808221A (en) * | 1987-08-25 | 1989-02-28 | Asarco Incorporated | Process for the recovery and separation of arsenic from antimony |
| CN1061908A (zh) * | 1991-12-21 | 1992-06-17 | 江西省妇产医院 | 一种治癌药物的制造方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МАШКОВСКИЙ М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1985, ч.2, с.136-137. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2298093C (en) | An anti-cancer therapy agent of arsenic hexoxide (as4o6) of a natural chemical substance and its pharmaceutical composition | |
| EP1374880B1 (en) | An antineoplastic drug | |
| US9901602B2 (en) | Ejaculum of animals as medicinal material and uses thereof in medicaments for treatment of diseases such as tumors, depression, etc | |
| JP2012514031A (ja) | 卵胆礬を含む癌予防及び治療用組成物 | |
| US7261906B2 (en) | Anti-cancer therapy agent of arsenic hexoxide (As4O6) of a natural chemical substance and its pharmaceutical composition | |
| RU2196593C2 (ru) | ПРИМЕНЕНИЕ ГЕКСОКСИДА МЫШЬЯКА (As4O6) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ | |
| JPH05509309A (ja) | ２―フェニル―１，２―ベンズイソセレナゾール―３（２ｈ）―オンの利用法 | |
| CN110946948A (zh) | 化风丹在制备抗乳腺癌药物中的应用 | |
| CN113662987A (zh) | 一种用于肝癌的食蟾虫脂质体的制备方法 | |
| MXPA00001237A (en) | Anti-cancer therapy agent of arsenic hexoxide (as4o6) of a natural chemical substance and its pharmaceutical composition | |
| Al-Alawachi | Treatment of tumor with an extract from the shell of an aquatic animal | |
| CN100336552C (zh) | 一种治疗肺癌的药物 | |
| CN116492423B (zh) | 一种用于预防和治疗肺癌的中药组合物 | |
| CN110507751A (zh) | 一种控癌丸及其制备方法 | |
| CN103191268B (zh) | 一种治疗肺癌的中药组合物 | |
| KR100492940B1 (ko) | 항종양활성 증진용 조성물 | |
| Semalatha | Scientific Validation of Anti-cancer, Anti tumour and Anti-oxidant activities of Siddha Herbo-mineral Formulation Bhramasthiram in Various cell lines studies | |
| CN108567941B (zh) | 土茯苓提取物在制备用于预防和/或治疗顺铂肾损伤的药物中的用途 | |
| KR20240146240A (ko) | 멜리틴의 비소세포폐암에 대한 방사선 증감제 용도 | |
| CN120093845A (zh) | 一种中药组合物在制备治疗肝癌药物中的应用 | |
| CN111419931A (zh) | 复方黄柏组合物在制备用于预防、治疗结直肠癌药物中的应用 | |
| CN118873677A (zh) | 病原体相关分子模式表面修饰的抗肿瘤脂质体纳米载药系统及其制备方法与应用 | |
| CN1628828B (zh) | 一种具有防癌抗癌作用的中药 | |
| CN113633732A (zh) | 一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法和应用 | |
| KR20120037925A (ko) | 봉독 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 관련 질환，폐암 또는 통증의 예방 및 치료용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150202 |