RU219092U1

RU219092U1 - Чашка Петри с миллиметровой линейкой

Info

Publication number: RU219092U1
Application number: RU2022117480U
Authority: RU
Inventors: Николай Владимирович Сахно; Сергей Александрович Скребнев; Анастасия Викторовна Шадская; Владимир Иванович Савкин; Инна Григорьевна Паршутина; Анастасия Владимировна Амелина; Наталья Леонидовна Грибанова; Александр Игоревна Солодовник
Filing date: 2022-06-27
Publication date: 2023-06-28

Abstract

Полезная модель относится к биотехнологии. Предложена Чашка Петри для установления степени задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам, состоящая из двух идентичных по форме, но разных по размерам, стеклянных емкости с дном и крышки. Чашка Петри снабжена миллиметровой линейкой в виде параллельных черточек-делений, расположенных на одной линии через каждый миллиметр друг от друга на крышке с наружной ее стороны и по всей длине ее диаметра, а на наружной стороне боковых поверхностей емкости с дном и крышки на всю их высоту нанесено по одной маркировочной матовой вертикальной ограничительной полосе. Устройство обеспечивает точное раннее и поэтапное исследование задержки роста микроорганизмов при определении их антибиотикочувствительности еще на стадии их культивирования. 1 табл., 1 ил.

Description

Полезная модель относится к ветеринарной микробиологии, а именно к лабораторному оборудованию для культивирования колоний микроорганизмов. Наиболее эффективно применение чашки Петри с миллиметровой линейкой для установления степени задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам.

Известна чашка Петри стандартных размеров, состоящая из двух идентичных по форме, но разных по размерам частей - половинок (меньшего размера емкости с дном для питательных сред и большего размера - крышки), выполненных из стекла [Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии / Т.С. Костенко, Е.И. Скаршевская, С.С. Гительсон.: Агроиромиздат, 1989. С. 88].

Известны также контактные чашки Петри, которые используются для подсчета колоний микроорганизмов. Изготовлены они из оптического полистирола. Эти чашки Петри вентилируемые и имеют счетную сетку по всей площади крышки чашки Петри. По горизонтали столбцы ячеек данной крупноячеистой сетки пронумерованы арабскими цифрами от 1 до 6. По вертикали ряды ячеек сетки обозначены заглавными буквами латинского алфавита - А, В, С, D, Е, F [Чашки Петри стерильные, диам. 55 мм, контактная, с сетчетой сеткой, 10 шт./уп. - купить в Орле | Интернет-магазин (5drops.ru) [Электронный ресурс] (дата обращения 29.04.2022) - прототип].

Выпускают также наклейки для чашек Петри PetriStickers, у которых сетка содержит 50 квадратов. Квадраты этой крупноячеистой сетки нанесены по всей площади наклейки, которая соответствует площади дна чашки Петри. Эти наклейки позволяют быстро и точно помечать чашки Петри. Изготовлены с использованием чернил, основы и клея, устойчивых к воде. Выдерживают температуры от 4°С до 42°С. Для использования наклейки достаточно снять с нее защитный слой и поместить ее на дно чашки Петри (снаружи). Чашку с наклейкой можно удерживать в удобном положении (например, для переноса колоний), хранить в инкубаторе или холодильнике, а также фотографировать [Наклейки для чашек Петри PetriStickers, сетка, 50 квадратов, 36 шт. - купить в разделе подсчет колоний интернет-магазина Стайлаб (stylab-shop.com) [Электронный ресурс] (дата обращения 29.04.2022)].

Однако эти крупноячеистые счетные сетки предназначены только для подсчета количества колоний микроорганизмов внутри их ячеек, а не для получения размеров зоны задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам, выраженных в миллиметрах. При работе с известными счетными сетками, не предназначенными для установления размеров зоны задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам, нельзя получить достоверных результатов. Это недопустимо при анализе чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, проводимым с целью назначения животным своевременной, оправданной и эффективной антибиотикотерапии.

Задачей предлагаемого решения является исключение указанных недостатков и выполнение точных лабораторных исследований по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам в различные временные отрезки (часы, сутки) еще на стадии их культивирования.

Технический результат заключается в проведении точного раннего и поэтапного исследования задержки роста микроорганизмов при определении их антибиотикочувствительности еще на стадии их культивирования.

Поставленная задача и технический результат достигаются благодаря тому, что известная чашка Петри для установления степени задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам, состоящая из двух идентичных по форме, но разных по размерам, стеклянных емкости с дном и крышки, согласно полезной модели, чашка Петри снабжена миллиметровой линейкой в виде параллельных черточек-делений, расположенных на одной линии через каждый миллиметр друг от друга на крышке с наружной ее стороны и по всей длине ее диаметра, а на наружной стороне боковых поверхностей емкости с дном и крышки на всю их высоту нанесено по одной маркировочной матовой вертикальной ограничительной полосе.

Техническая сущность предлагаемой чашки Петри с миллиметровой линейкой представлена на чертеже, где на:

фиг. 1. - изображена предлагаемая чашка Петри с миллиметровой линейкой (в раскрытом виде).

Чашка Петри с миллиметровой линейкой содержит емкость 1 с дном, крышку 2, миллиметровую линейку 3 в виде параллельных черточек-делений, расположенных друг от друга через 1,0 мм, на крышке 2 с наружной ее стороны и по всей длине ее диаметра, и кроме того, одну маркировочную матовую вертикальную ограничительную полосу 4 на наружной стороне боковой поверхности емкости 1 с дном на всю ее высоту, а вторую маркировочную матовую вертикальную ограничительную полосу 4 на наружной стороне боковой поверхности крышки 2 на всю ее высоту.

Чашка Петри с миллиметровой линейкой 3 позволяет измерить зону задержки роста микроорганизмов в любой точке поля емкости 1 с дном, в том числе и в ее центре благодаря миллиметровой линейке 3 в виде параллельных черточек-делений, расположенных друг от друга через 1,0 мм, на крышке 2. Она предназначена для проведения раннего и поэтапного исследования задержки роста микроорганизмов при определении чувствительности микроорганизмов к антибиотикам еще на стадии их культивирования. Возможна наглядная документация результатов исследований путем фотографирования. При этом миллиметровая линейка 3 в виде параллельных черточек-делений не затрудняет визуализацию зоны задержки роста микроорганизмов.

Использование чашки Петри с миллиметровой линейкой 3 приведено на примере исследований чувствительности к антибиотикам (различных групп) микрофлоры, взятой посредством мазка из прямой кишки у телят в 10-дневном возрасте и проводится следующим образом. Емкость 1 с дном стерильной стеклянной чашки Петри с миллиметровой линейкой 3 на крышке 2 заполняют мясопептонным агаром (на рисунке не показан) по 20 мл. На поверхность уплотнившейся среды наливают 1 мл одномиллиардной взвеси (в 0,9%-ном растворе NaCl) агаровой культуры микроорганизма, полученного путем мазка из прямой кишки теленка. Легким покачиванием чашки Петри с миллиметровой линейкой 3 культуру равномерно распределяют по питательной среде, излишек жидкости отсасывают стерильной пастеровской пипеткой. Чашку Петри с миллиметровой линейкой 3 подсушивают в термостате 15 минут (37°С) или при комнатной температуре 30-40 минут. Затем на поверхность засеянной среды стерильным пинцетом накладывают (прижимают) стандартные бумажные диски с разными антибиотиками на расстоянии 2 см от края и друг от друга, и еще один диск в центре емкости 1 чашки Петри. После наложения каждого диска пинцет следует обжигать на пламени горелки. Далее емкость 1 с дном чашки Петри накрывают крышкой 2, оснащенной миллиметровой линейкой 3, таким образом, чтобы маркировочные матовые вертикальные ограничительные полосы 4 на емкости 1 с дном и крышке 2 совпали (наложились друг на друга). То есть соблюдается обычная позиция составных частей чашки Петри с миллиметровой линейкой 3 в сборе.

Сначала чашку Петри выдерживают при комнатной температуре (2 часа), затем, перевернув ее вверх дном, помещают в термостат на 16-18 часов (37°С). Оценку результатов проводят с учетом наличия или отсутствия зоны задержки роста, размера зоны вокруг диска с антибиотиком. Отсутствие зоны задержки роста бактерий свидетельствует о нечувствительности их к данному препарату. Если проявляется зона задержки роста, ее измеряют по диаметру (включая диаметр диска) с помощью миллиметровой линейки 3 в виде параллельных черточек-делений, подведя ее путем проворачивания крышки 2 (в каком-либо из направлений по часовой стрелке или против нее) к исследуемому участку (зоне задержки роста микроорганизма) на поверхности питательной среды в емкости 1 с дном. Зона задержки до 15 мм является показателем малой чувствительности, зона в 15-25 мм указывает на достаточную чувствительность испытуемой бактериальной культуры. Чем больше зона задержки роста бактерий, тем выше их чувствительность к данному препарату.

При этом маркировочной матовой вертикальной ограничительной полосой 4 на наружной стороне боковой поверхности емкости 1 с дном для питательных сред обозначено место начала и завершения осмотра задержки роста колоний микроорганизмов. Осмотр проводят, вращая крышку 1 (по часовой или против часовой стрелки), таким образом, приближая миллиметровую линейку 3 в виде параллельных черточек-делений к диску с антибиотиком. Визуализация места начала и завершения осмотра задержки роста колоний микроорганизмов дает возможность исследователю выполнять работу в необходимом режиме. Пройдя по кругу емкости 1 с дном исследователь (сотрудник ветеринарной лаборатории, преподаватель, студент специальности «Ветеринария» и др.) на уровне совмещения маркировочных матовых вертикальных ограничительных полос 4 завершает работу. Это мобилизует исследователя на исключение повторных исследований, при этом не изменяется режим работы (темп и техника привычно повторяющихся манипуляций), работа продолжается в заданном и отработанном режиме. Выполнение миллиметровой линейки 3 на крышке 2 чашки Петри не усложнило работу с ней и не повысило затраты времени на общепринятые манипуляции.

Пример 1. Теленок, черно-пестрой породы в возрасте 10 дней, живой массой 28 кг, бычок. Клинические признаки - угнетение, вялый аппетит, понос, каловые массы жидкие со зловонным запахом. Для постановки диагноза тремя стерильными ватными тампонами, смоченными стерильным физраствором (0,85%-й раствор NaCl), поочередно взяли мазки из прямой кишки теленка. Тампоны, каждый в отдельности, поместили в стерильную воду (20 мл) и доставили для бактериологического исследования в ветеринарную лабораторию. В лаборатории пробы перед посевом развели до необходимой плотности микроорганизмов в 10-кратных последовательностях, так чтобы на чашку Петри с миллиметровой линейкой 3 со средой пришлось 50-200 микробных тел, формирующих колонии. В результате были выделены патогенные штаммы Escherichia coli. Диагноз - колибактериоз. Далее определяли чувствительность патогенного штамма Escherichia coli к антибиотикам.

Для этого емкость 1 с дном стерильной стеклянной чашки Петри заполнили мясопептонным агаром (на рисунке не показан) по 20 мл. На поверхность уплотнившейся среды налили 1 мл одномиллиардной взвеси (в 0,9%-ном растворе NaCl) агаровой культуры Escherichia coli, полученной из прямой кишки теленка. Легким покачиванием чашки Петри культуру равномерно распределили по питательной среде. Чашку Петри подсушили в термостате в течение 15 минут (37°С). Затем на поверхность засеянной среды стерильным пинцетом выложили стандартные бумажные диски с разными антибиотиками на расстоянии 2 см от края и друг от друга, и еще один диск в центре емкости 1 с дном чашки Петри. После наложения каждого диска пинцет обжигали на пламени горелки. Затем емкость 1 с дном чашки Петри накрыли крышкой 2, оснащенной миллиметровой линейкой 3.

Сначала чашку Петри выдержали при комнатной температуре (2 часа), затем, перевернув ее вверх дном, поместили в термостат на 16 часов (37°С). Оценку результатов провели с учетом наличия зоны задержки роста и размера зоны вокруг диска с антибиотиком. Когда проявилась зона задержки роста, ее измерили по диаметру с помощью миллиметровой линейки 3, которую вращением крышки 1 по часовой стрелке приблизили к диску с антибиотиком, давшим наибольшую задержку роста Escherichia coli. Зона задержки роста Escherichia coli, равная 27 мм, указала на наибольшую чувствительность микроорганизма, вызвавшего заболевание телят, к антибиотику тилозину. Результаты исследований задокументировали, в том числе фотографированием зоны задержки роста Escherichia coli на фоне миллиметровой линейки 3 в виде параллельных черточек-делений, расположенных друг от друга через 1,0 мм на крышке 2. Через 5 суток после применения тилозина (внутримышечно в дозе 5 мг/кг массы животного 1 раз в сутки) теленок выздоровел.

Применение предлагаемой чашки Петри с миллиметровой линейкой позволяет:

проводить раннее и поэтапное исследование задержки роста микроорганизмов при определении их антибиотикочувствительности еще на стадии их культивирования;

визуализировать место начала и завершения осмотра задержки роста колоний микроорганизмов в чашке Петри с миллиметровой линейкой;

снизить напряженность режима работы исследователя;

исключить необходимость проведения повторных исследований;

повысить точность результатов исследований;

назначить своевременную и эффективную антибиотикотерапию больным животным.

Это значительно повышает результативность проводимых исследований (см. таблицу).

Как видно из таблицы, использование предлагаемой чашки Петри с миллиметровой линейкой является более эффективным по сравнению с известной и позволяет избежать повторных исследований вследствие исключения получения недостоверных ранних результатов исследований, что важно для начала как можно более раннего лечения.

Предлагаемая чашка Петри с миллиметровой линейкой была успешно применена при проведении лабораторно-практических занятий и научных исследований на кафедре эпизоотологии и терапии ФГБОУ ВО «Орловский государственный аграрный университет имени Н.В. Парахина».

Claims

Чашка Петри для установления степени задержки роста микроорганизмов при определении их чувствительности к антибиотикам, состоящая из двух идентичных по форме, но разных по размерам, стеклянных емкости с дном и крышки, отличающаяся тем, что чашка Петри снабжена миллиметровой линейкой в виде параллельных черточек-делений, расположенных на одной линии через каждый миллиметр друг от друга на крышке с наружной ее стороны и по всей длине ее диаметра, а на наружной стороне боковых поверхностей емкости с дном и крышки на всю их высоту нанесено по одной маркировочной матовой вертикальной ограничительной полосе.