RU2155227C1 - Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum - Google Patents
Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum Download PDFInfo
- Publication number
- RU2155227C1 RU2155227C1 RU99112400/13A RU99112400A RU2155227C1 RU 2155227 C1 RU2155227 C1 RU 2155227C1 RU 99112400/13 A RU99112400/13 A RU 99112400/13A RU 99112400 A RU99112400 A RU 99112400A RU 2155227 C1 RU2155227 C1 RU 2155227C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- ogava
- cholerae
- serum
- choleraic
- Prior art date
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области микробиологии, в частности к лабораторной диагностике холеры и к штаммам-продуцентам диагностических сывороток, может быть использовано в иммунологических, генетических исследованиях и для получения холерной агглютинирующей Огава сыворотки. The invention relates to the field of microbiology, in particular to the laboratory diagnosis of cholera and to strains producing diagnostic sera, can be used in immunological, genetic studies and for the production of cholera agglutinating Ogawa serum.
При получении холерной сыворотки Огава, согласно регламенту производства N 144-97, используют для иммунизации животных штаммы V.cholerae O-1 группы серовара Огава. Штаммы холерных вибрионов должны обладать типичными для S-формы морфологическими, культуральными, биохимическими и серологическими свойствами. Upon receipt of Ogawa cholera serum, according to production regulations N 144-97, V. cholerae O-1 strains of the Ogawa serovar group are used for immunization of animals. Strains of cholera vibrios should possess typical morphological, cultural, biochemical and serological properties typical for the S-form.
Холерные штаммы O-1 группы, используемые в качестве антигенов для иммунизации, необходимо подбирать из числа наиболее агглютина-бельных. Культуры этих штаммов должны агглютинироваться до титра гомологичными национальными отраслевыми стандартными образцами (ОСО). Cholera strains of the O-1 group, used as antigens for immunization, must be selected from among the most agglutinable. Cultures of these strains should be agglutinated to titer with homologous national industry standard samples (CCA).
Известен штамм серовара Огава, используемый для получения кроличьей холерной Огава сыворотки. Использовали корпускулярный O-антиген, приготовленный из штамма серовара Огава Vibrio cholerae cholerae 41. Штамм ранее использовался в качестве антигена для иммунизации животных - продуцентов Огава сыворотки, характеризуется как иммуногенный. Недостатки: при иммунизации животных антигеном этого штамма получают достаточно высокий процент неспецифических антител, что требует проведения 6-8 адсорбций (Отчет НИР (закл. ): Иркут. НИПЧИ. Рук. Тюменцев С.Н., Инв. N 0280063297, Иркутск, 1983). A known Ogawa strain of serovar is used to produce Ogawa rabbit cholera serum. A corpuscular O-antigen prepared from the Ogawa serovar strain Vibrio cholerae cholerae 41 was used. The strain was previously used as an antigen for immunization of serum-producing Ogawa animals, which is characterized as immunogenic. Disadvantages: when animals are immunized with an antigen of this strain, a sufficiently high percentage of non-specific antibodies is obtained, which requires 6-8 adsorption (Report of research work (closed): Irkutsk, NIPCH. Hand. Tyumentsev SN, Inv. N 0280063297, Irkutsk, 1983 )
Цель изобретения - штамм бактерий Vibrio cholerae cholerae 5 серовара Огава, позволяющий повысить активность и специфичность холерной Огава сыворотки. The purpose of the invention is a strain of bacteria Vibrio cholerae cholerae 5 of Serovar Ogawa, which allows to increase the activity and specificity of cholera Ogawa serum.
Сущностью изобретения является использование штамма Vibrio cholerae cholerae 5 серовара Огава в качестве продуцента антител для получения холерной сыворотки Огава. The essence of the invention is the use of a strain of Vibrio cholerae cholerae 5 of Serovar Ogawa as an antibody producer for the production of Ogawa cholera serum.
Штамм Vibrio cholerae cholerae 5 серовара Огава, особое название - "форма 30", инвентарный N4, родословная штамма - получен из фагового отдела ЦГНКИ в 1949 году. Депонирован нами в Государственной коллекции бактериальных возбудителей 1-2 групп патогенности при Российском научно-исследовательском противочумном институте "Микроб" под N 01 KM 193. Штамм характеризуется следующими культурально-морфологическими и физико-биологическими признаками. The strain Vibrio cholerae cholerae 5 of Serovar Ogawa, the special name is "form 30", inventory N4, the pedigree of the strain, was obtained from the phage department of TsGNKI in 1949. We deposited in the State collection of bacterial pathogens of 1-2 groups of pathogenicity at the Russian research anti-plague institute "Microbe" under N 01 KM 193. The strain is characterized by the following cultural, morphological and physico-biological characteristics.
Культурально-морфологические признаки. На агаре Мартена или казеиново-дрожжевом агаре (pH 7,6) образует выпуклые колонии правильной округлой формы с ровными краями, гладкой поверхностью. Колонии при падающем свете голубоватые до 2 мм в диаметре; в бульоне Мартена или 1% пептонной воде (pH 7,6) при 37oC через 24 часа - стойкое равномерное помутнение, на поверхности - нежная голубоватая пленка. При окраске по Граму - грамотрицательные тонкие с небольшой изогнутостью палочки, иногда встречаются короткие цепочки. Спор и капсул не образует.Cultural and morphological characters. On Marten agar or casein-yeast agar (pH 7.6) forms convex colonies of regular round shape with smooth edges, a smooth surface. Colonies under incident light are bluish up to 2 mm in diameter; in Marten broth or 1% peptone water (pH 7.6) at 37 o C after 24 hours - persistent uniform turbidity, on the surface - a gentle bluish film. When stained by Gram - gram-negative thin with a slight curvature of the sticks, sometimes there are short chains. Spore and capsules do not form.
Штамм Vibrio cholerae cholerae 5 растет на питательных средах, приготовленных из гидролизатов (мяса, казеина, дрожжей). Оптимальное значение pH 7,6-8,2. Оптимальная температура выращивания микроба - 37oC. Аэроб. Штамм ферментирует с образованием кислоты глюкозу, левулезу, галактозу, сахарозу, маннит, мальтозу, не ферментирует лактозу, арабинозу, дульцит, сорбит. Молоко свертывает, не образует сероводород, выделяет индол, разжижает желатин. Проба на гемолиз отрицательная. Проба с холерным бактериофагом C-4 на твердой среде - положительная. Не лизируется фагами эльтор.The strain Vibrio cholerae cholerae 5 grows on nutrient media prepared from hydrolysates (meat, casein, yeast). The optimum pH value is 7.6-8.2. The optimal temperature for growing the microbe is 37 o C. Aerob. The strain ferments with the formation of acid glucose, levulose, galactose, sucrose, mannitol, maltose, does not ferment lactose, arabinose, dulcite, sorbitol. Milk coagulates, does not form hydrogen sulfide, releases indole, liquefies gelatin. The hemolysis test is negative. A sample with a cholera bacteriophage C-4 on a solid medium is positive. Not lysed by phages eltor.
Генетические особенности: штамм Vibrio cholerae cholerae 5 обладает хорошо амплифицируемыми последовательностями оперона гена, детерминирующего синтез А и В субъединиц холерного энтеротоксина. Результат полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет идентифицировать штамм как потенциально холерогенный. Уровень свечения амплифицированного фрагмента после окраски геля бромистым этидиумом наибольший у штамма Vibrio cholerae cholerae 5. Genetic features: Vibrio cholerae cholerae 5 strain has well-amplified sequences of the operon of a gene that determines the synthesis of A and B subunits of cholera enterotoxin. The result of the polymerase chain reaction (PCR) allows the strain to be identified as potentially cholerogenic. The luminescence level of the amplified fragment after staining the gel with ethidium bromide is highest in the Vibrio cholerae cholerae 5 strain.
В объемной реакции агглютинации (РА) агглютинируется ОСО следующим образом: холерной агглютинирующей O-сывороткой до титра (1:3200), холерной Огава - до титра (1:1600), холерной агглютинирующей Инаба и RO - не агглютинируется. Штамм Vibrio cholerae cholerae 5 высокоантигенен, при внутривенной иммунизации лошадей и кроликов корпускулярным O-антигеном стимулирует образование специфических антител в титрах 1:6400±120 - 1:4800±615, неспецифических антител в титрах 1:1600±120 - 1:2200±320. In the volumetric agglutination reaction (RA), the TOC agglutinates as follows: cholera agglutinating O-serum to a titer (1: 3200), cholera Ogawa - to a titer (1: 1600), cholera agglutinating Inaba and RO - not agglutinating. The strain Vibrio cholerae cholerae 5 is highly antigenic; upon intravenous immunization of horses and rabbits with a corpuscular O antigen, it stimulates the formation of specific antibodies in titers 1: 6400 ± 120 - 1: 4800 ± 615, non-specific antibodies in titers 1: 1600 ± 120 - 1: 2200 ± 320 .
Пример 1. Для получения кроличьей холерной агглютинирующей Огава сыворотки кроликов иммунизировали внутривенно корпускулярным О-антигеном с интервалом между инъекциями три дня в дозах 5, 9, 13 млрд. в 1 мл физ. раствора. На 7 день после последней инъекции антигена выполняли тотальное кровопускание. Полученную сыворотку проверяли в РА на наличие специфических и неспецифических антител. Выявлено, что иммунизация кроликов антигеном вышеназванного штамма вызывает образование специфических антител в сыворотке крови в титре 1:4800±615, неспецифических - 1:1600±120, т.е. видна разница в титрах специфических и неспецифических антител, что требует всего 2-3 адсорбции. Example 1. To obtain rabbit cholera agglutinating Ogawa, serum of rabbits was immunized with an intravenous corpuscular O-antigen with an interval between injections of three days at doses of 5, 9, 13 billion in 1 ml of physical. solution. On the 7th day after the last injection of antigen, total bloodletting was performed. The resulting serum was tested in RA for the presence of specific and nonspecific antibodies. It was revealed that immunization of rabbits with the antigen of the above strain causes the formation of specific antibodies in blood serum in a titer of 1: 4800 ± 615, non-specific - 1: 1600 ± 120, i.e. the difference in titers of specific and nonspecific antibodies is visible, which requires only 2-3 adsorption.
Пример 2. Для получения холерной лошадиной сыворотки продуцентов иммунизировали внутривенно корпускулярным O-антигеном в два цикла с интервалом между инъекциями в два дня в дозах согласно регламенту (Регламент производства N 144-97). На седьмой день после последней инъекции у лошадей производили забор крови в объеме 6 литров в первый день; через день проводили повторное кровопускание в том же объеме, что и первое. Сыворотку от двух кровопусканий объединяли. В полученной сыворотке проверяли в объемной РА наличие специфических и неспецифических антител, что составляло 1: 6400±120 и 1: 2200±320 соответственно, т.е. видна разница в титрах специфических и неспецифических антител, это требует так же, как и в кроличьих сыворотках две-три адсорбции. Example 2. To obtain horse cholera serum, producers were immunized intravenously with a corpuscular O-antigen in two cycles with an interval between injections of two days in doses according to the regulations (Production Regulation N 144-97). On the seventh day after the last injection, horses were sampled in a volume of 6 liters on the first day; every other day, repeated bloodletting was carried out in the same volume as the first. Serum from two bloodletches was combined. In the obtained serum, the presence of specific and nonspecific antibodies was checked in volumetric RA, which was 1: 6400 ± 120 and 1: 2200 ± 320, respectively, i.e. the difference in titers of specific and nonspecific antibodies is visible; this requires two or three adsorption in the same way as in rabbit sera.
Таким образом, штамм Vibrio cholerae cholerae 5 рекомендуется использовать в качестве продуцента для получения антител кроличьей холерной Огава сыворотки в промышленном производстве. Thus, the strain Vibrio cholerae cholerae 5 is recommended to be used as a producer for the production of rabbit cholera ogawa serum antibodies in industrial production.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99112400/13A RU2155227C1 (en) | 1999-06-07 | 1999-06-07 | Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99112400/13A RU2155227C1 (en) | 1999-06-07 | 1999-06-07 | Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2155227C1 true RU2155227C1 (en) | 2000-08-27 |
Family
ID=20221105
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99112400/13A RU2155227C1 (en) | 1999-06-07 | 1999-06-07 | Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2155227C1 (en) |
-
1999
- 1999-06-07 RU RU99112400/13A patent/RU2155227C1/en active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Courant et al. | Biochemical and immunological heterogeneity of Bacteroides melaninogenicus | |
Ullmann et al. | Immunochemistry of the cell walls of Listeria monocytogenes | |
Nolan et al. | Evaluation of a new assay for Vi antibody in chronic carriers of Salmonella typhi | |
Pier et al. | Serologic typing of Nocardia asteroides by immunodiffusion | |
RU2155227C1 (en) | Strain of bacterium vibrio cholerae cholerae 5 serovara ogava as producer of antibody to choleraic ogava serum | |
Cameron et al. | Immunization of mice against Corynebacterium pseudotuberculosis infection | |
US4332890A (en) | Detection of neisseria gonorrhoeae | |
RU2143280C1 (en) | Method of preparing purified choleraic 0-antigen | |
WATARAI et al. | Comparison of etiological and immunological characteristics of two attenuated Erysipelothrix rhusiopathiae strains of serotypes 1a and 2 | |
Fernández-Lago et al. | Class-specific immune response to Yersinia enterocolitica serotype O9 antigens as determined by enzyme-linked immunosorbent assay | |
RU2145353C1 (en) | Strain of bacterium moraxella bovis "g97-vnivi" used for preparing diagnostica and vaccines against infectious keratoconjunctivitis in cattle | |
SU638337A1 (en) | P-9504 serotype 5 vibrio phosphoresceus strain as producer of standard agglutinating serum | |
RU2668805C1 (en) | Strain vibrio parahaemolyticus, used as a producer of direct thermostable hemolysin (tdh) | |
SU1684333A1 (en) | Strain of bacteria vibrio cholerae eltor, used for preparation of diagnostic sera | |
SU595996A1 (en) | Method for detecting and identifying choleric bibrions | |
SU1684332A1 (en) | Strain of bacteria vibrio cholerae eltor, used for preparation of diagnostic sera | |
RU1277459C (en) | Method of obtaining agglutinating eschricia coli anti-k-88 serum | |
RU2236455C1 (en) | Strain of bacterium vibrio cholerae km-168 as base for construction of live vaccine against diarrhea disease caused by pathogenic strains of vibrio cholerae o139 | |
RU2425867C1 (en) | AVIRULENT STRAIN OF Vibrio cholerae KM 263 BACTERIA OF SEROVAR INABA OF BIOVAR ELTOR - PRODUCER OF PROTECTIVE O1 ANTIGEN | |
SU1412291A1 (en) | Strain of vibrio mag 68 serovara bacteria used for obtaining monoreceptor diagnostic serum | |
SU1668387A1 (en) | Strain of bacterium vibrio nag serovara, used for preparation of monovaric diagnostic serum | |
SU587158A1 (en) | Vibrio nag-9508 strain for identification of hayberg's group i vibrios | |
SU1400075A1 (en) | Strain of vibrio cholerae cholerae ogava bacteria used for producing cheloric toxin | |
SU770185A1 (en) | Vibrio albensis p-10034 strain - producer of monospecific agglutinating serum | |
RU2005781C1 (en) | Strain of bacterium brucella melitensis biovara i used for preparing of polyvalent hyperimmune serum to brucellas |