RU2155068C1 - Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes - Google Patents
Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes Download PDFInfo
- Publication number
- RU2155068C1 RU2155068C1 RU99111330A RU99111330A RU2155068C1 RU 2155068 C1 RU2155068 C1 RU 2155068C1 RU 99111330 A RU99111330 A RU 99111330A RU 99111330 A RU99111330 A RU 99111330A RU 2155068 C1 RU2155068 C1 RU 2155068C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lymphocytes
- substance
- differentiation
- extraction
- acetone
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности и касается получения биологически активных веществ из сырья животного происхождения, стимулирующих антигеннезависимую дифференцировку В-лимфоцитов. The invention relates to medicine and the medical industry and relates to the production of biologically active substances from raw materials of animal origin, stimulating antigen-independent differentiation of B-lymphocytes.
Известен способ получения гемолимфопоэтических ростковых факторов из супернатанта культуры клеток костного мозга (патент США N 5264418, МКИ5 C 07 K 3/20, 1993), включающий ионообменную хроматографию на DEAE-целлюлозе, Con-A аффинную хроматографию, гель-фильтрацию на Sephacryl S-300, ионообменную хроматографию на mono-Q колонке, гель-фильтрацию на Superose 12. Получаемое вещество (HLGF-1) обладает способностью стимулировать дифференцировку пре-В клеток. Однако, данный способ является сложным многостадийным процессом, требующим большого количества реактивов и специального оборудования, процесс требует длительного времени, а препарат активен лишь в концентрации от 5 до 10 мг/мл. Конечный продукт имеет белковую природу с ММ 110-140 кД, что придает веществу дополнительные аллергогенные свойства.A known method for producing hemolymphopoietic germ factors from a supernatant of bone marrow cell culture (US Pat. No. 5,264,418, MKI 5 C 07 K 3/20, 1993), including ion exchange chromatography on DEAE cellulose, Con-A affinity chromatography, gel filtration on Sephacryl S -300, ion-exchange chromatography on a mono-Q column, gel filtration on
Известен способ получения вещества, стимулирующего созревание B-лимфоцитов, из ткани сумки Фабрициуса птиц (авторское свидетельство СССР N 1438044, МКИ5 A 61 K 39/00, 1985), который по технической сущности и достигаемому эффекту является наиболее близким к предлагаемому решению и является его прототипом.There is a method of obtaining a substance that stimulates the maturation of B-lymphocytes from the fabric of the bag of Fabricius birds (USSR author's certificate N 1438044, MKI 5 A 61 K 39/00, 1985), which is the closest to the proposed solution by technical nature and the achieved effect and is its prototype.
Согласно известному способу сумки Фабрициуса птиц замораживают при -40oC, гомогенизируют и загружают в реактор с охлаждением и мешалкой в 3%-ный раствор уксусной кислоты (1 часть сырья к 5 частям раствора уксусной кислоты) и добавляют хлорид цинка из расчета 1 г на 1 л 3% уксусной кислоты (pH 3,5-4,0). Экстракцию проводят в течение 72 ч при 4-10oC. Экстракт отфильтровывают, центрифугируют (5000 об/мин в течение 20 мин) и приливают в охлажденный ацетон в соотношении 1:5 (1 часть экстракта к 5 частям ацетона). Формирование осадка продолжается 24 ч при (-5)-(-8)oC. Осадок отфильтровывают под вакуумом и отмывают чистым ацетоном. Раствор препарата стерилизуют фильтрацией, разливают в стерильные флаконы и лиофилизируют. Получают вещество, стимулирующее созревание B-лимфоцитов.According to the known method, Fabricius bags of birds are frozen at -40 ° C, homogenized and loaded into a reactor with cooling and stirrer in a 3% solution of acetic acid (1 part of the feed to 5 parts of acetic acid solution) and zinc chloride is added at a rate of 1 g per 1 liter of 3% acetic acid (pH 3.5-4.0). The extraction is carried out for 72 hours at 4-10 o C. The extract is filtered off, centrifuged (5000 rpm for 20 minutes) and poured into chilled acetone in a ratio of 1: 5 (1 part of the extract to 5 parts of acetone). The formation of a precipitate lasts 24 hours at (-5) - (- 8) o C. The precipitate is filtered off under suction and washed with pure acetone. The drug solution is sterilized by filtration, poured into sterile vials and lyophilized. Get a substance that stimulates the maturation of B-lymphocytes.
Однако данный способ позволяет получить вещество, обладающее низкой биологической активностью. Так, вещество, полученное по способу-прототипу, стимулировало созревание B-лимфоцитов в культуре клеток лишь в концентрации 100 мкг/мл. Кроме того, молекулярная масса данного вещества колеблется от 2000 до 12000 Д, что указывает на присутствие большого количества примесных соединений, не несущих специфической активности. However, this method allows to obtain a substance with low biological activity. So, the substance obtained by the prototype method, stimulated the maturation of B-lymphocytes in cell culture only at a concentration of 100 μg / ml. In addition, the molecular weight of this substance varies from 2000 to 12000 D, which indicates the presence of a large number of impurity compounds that do not carry specific activity.
Данное изобретение направлено на повышение активности препарата. Решение поставленной задачи достигается тем, что экстракцию сырья проводят 0,1 н. раствором гидроксида натрия при pH 9,0-9,5 в течение 24 - 36 часов, а целевой продукт дополнительно очищают ультрафильтрацией с пределом молекулярного удержания 5 кД. This invention is directed to increasing the activity of the drug. The solution to this problem is achieved by the fact that the extraction of raw materials is carried out 0.1 N. sodium hydroxide solution at a pH of 9.0-9.5 for 24 to 36 hours, and the target product is further purified by ultrafiltration with a molecular retention limit of 5 kD.
Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.
Используемые в качестве сырья сумки Фабрициуса птиц получают на птицефабрике при разделке цыплят-бройлеров, причем забор сырья вписывается в технологическую цепочку забоя. Полученное сырье подвергают трехкратному замораживанию при температуре -40oC, чередующимся с оттаиванием. Свежезамороженное сырье гомогенизируют в гомогенизаторе. Гомогенат заливают 0,1 н. раствором NaOH в объемном соотношении 1:5 (1 часть сырья и 5 частей раствора) и доводят pH смеси до 9,0 - 9,5. Экстракцию проводят при температуре 4 - 8oC в течение 24 - 36 часов при постоянном перемешивании. По окончании экстракции смесь нейтрализуют добавлением 0,1 н. раствора соляной кислоты. Экстракт фильтруют через бязевую ткань, центрифугируют при 5000 об/мин в течение 20 мин. К фильтрату добавляют охлажденный ацетон в соотношении 1:5 (1 часть супернатанта и 5 частей ацетона). Формирование осадка продолжается в течение 24 часов при температуре (-5)-(-8) С. Осадок фильтруют под вакуумом, отмывают чистым ацетоном и высушивают на воронке Бюхнера. Порошок растворяют в дистиллированной воде и подвергают ультрафильтрации через фильтр с пределом молекулярного удержания 5 кД. Фильтрат разливают в стерильные флаконы и лиофилизируют. Полученное вещество стимулирует антигеннезависимую дифференцировку B-лимфоцитов.Bags of the Fabricius birds used as raw materials are obtained at the poultry farm when cutting broiler chickens, and the intake of raw materials fits into the technological chain of the slaughter. The resulting raw material is subjected to three freezing at a temperature of -40 o C, alternating with thawing. Freshly frozen raw materials are homogenized in a homogenizer. The homogenate is poured into 0.1 N. NaOH solution in a volume ratio of 1: 5 (1 part of the feed and 5 parts of the solution) and adjust the pH of the mixture to 9.0 - 9.5. The extraction is carried out at a temperature of 4 to 8 o C for 24 to 36 hours with constant stirring. At the end of the extraction, the mixture is neutralized by adding 0.1 N. hydrochloric acid solution. The extract is filtered through calico, centrifuged at 5000 rpm for 20 minutes. Chilled acetone was added to the filtrate in a ratio of 1: 5 (1 part supernatant and 5 parts acetone). The formation of a precipitate continues for 24 hours at a temperature of (-5) - (- 8) С. The precipitate is filtered under vacuum, washed with pure acetone and dried on a Buchner funnel. The powder is dissolved in distilled water and ultrafiltered through a filter with a molecular retention limit of 5 kD. The filtrate is poured into sterile vials and lyophilized. The resulting substance stimulates the antigen-independent differentiation of B-lymphocytes.
Способ иллюстрируется следующими примерами. The method is illustrated by the following examples.
Пример 1. Берут 300 г свежезамороженных сумок Фабрициуса птиц, гомогенизируют в гомогенизаторе с добавлением физиологического раствора хлористого натрия. Гомогенат заливают 5 объемами 0,1 н. раствора NaOH, доводят pH смеси до 9,0. Экстракцию проводят в течение 24 часов при температуре 4oC при постоянном перемешивании. Затем экстракт фильтруют через бязевую ткань, центрифугируют при 5000 об/мин в течение 20 минут. К полученному экстракту добавляют охлажденный до -6oC ацетон в соотношении 1:5 (1 часть экстракта и 5 частей ацетона), осадок формируют в течение 24 часов при температуре -6oC. Полученный осадок отфильтровывают под вакуумом, тщательно промывают чистым ацетоном и высушивают. Порошок растворяют в 10 объемах дистиллированной воды, перемешивая в течение 1 часа, и подвергают ультрафильтрации на мембране Millipore (США) с пределом молекулярного удержания 5 кД. Выход активного вещества составил 2,4 г. При инкубации с лимфоцитами полученное вещество в концентрации 2 мкг/мл повышало количество B-лимфоцитов с lg-рецепторами до 34±0,9% (контроль 22,7 ± 1,1%).Example 1. Take 300 g of freshly frozen bags of Fabricius birds, homogenized in a homogenizer with the addition of physiological solution of sodium chloride. The homogenate is poured with 5 volumes of 0.1 N. NaOH solution, adjust the pH of the mixture to 9.0. The extraction is carried out for 24 hours at a temperature of 4 o C with constant stirring. Then the extract is filtered through calico, centrifuged at 5000 rpm for 20 minutes. To the obtained extract was added acetone cooled to -6 ° C in a ratio of 1: 5 (1 part of extract and 5 parts of acetone), a precipitate was formed at -6 ° C for 24 hours. The resulting precipitate was filtered off with suction, washed thoroughly with pure acetone and are dried. The powder was dissolved in 10 volumes of distilled water, stirring for 1 hour, and subjected to ultrafiltration on a Millipore membrane (USA) with a molecular retention limit of 5 kD. The yield of active substance was 2.4 g. During incubation with lymphocytes, the obtained substance at a concentration of 2 μg / ml increased the number of B-lymphocytes with lg receptors to 34 ± 0.9% (control 22.7 ± 1.1%).
Пример 2. 1 кг сумок Фабрициуса птиц подвергают трехкратной заморозке при -40oC, затем измельчают в гомогенизаторе с добавлением физиологического раствора хлористого натрия. Гомогенат заливают 5 объемами 0,1 н. раствора NaOH, доводят pH смеси 0,1 н. раствором соляной кислоты до 9,5. Экстракцию проводят в течение 36 часов при температуре 6oC при постоянном перемешивании. Затем экстракт фильтруют через бязевую ткань, центрифугируют при 5000 об/мин в течение 20 минут. К полученному экстракту добавляют охлажденный до -8oC ацетон в соотношении 1:6(1 часть экстракта и 6 частей ацетона), осадок формируют в течение 24 часов при температуре -8oC. Полученный осадок отфильтровывают под вакуумом, тщательно промывают трехкратным объемом чистого ацетона и высушивают. Порошок растворяют в 10 объемах дистиллированной воды при перемешивании в течение 1 часа и подвергают ультрафильтрации на мембране Millipore (США) с пределом молекулярного удержания 5 кД. Выход активного вещества составил 8,5 г. При инкубации с лимфоцитами полученное вещество в концентрации 2 мкг/мл повышало количество B-лимфоцитов с lg-рецепторами до 31 ± 1,2% (контроль 22,7 ± 1,1%).Example 2. 1 kg of bags of Fabricius birds are subjected to three times freezing at -40 o C, then crushed in a homogenizer with the addition of physiological solution of sodium chloride. The homogenate is poured with 5 volumes of 0.1 N. NaOH solution, adjust the pH of the mixture to 0.1 N. hydrochloric acid solution to 9.5. The extraction is carried out for 36 hours at a temperature of 6 o C with constant stirring. Then the extract is filtered through calico, centrifuged at 5000 rpm for 20 minutes. To the obtained extract was added acetone cooled to -8 ° C in a ratio of 1: 6 (1 part of the extract and 6 parts of acetone), a precipitate was formed for 24 hours at a temperature of -8 o C. The resulting precipitate was filtered off with suction, washed thoroughly with a three-fold volume of pure acetone and dried. The powder was dissolved in 10 volumes of distilled water with stirring for 1 hour and subjected to ultrafiltration on a Millipore membrane (USA) with a molecular retention limit of 5 kD. The yield of active substance was 8.5 g. During incubation with lymphocytes, the obtained substance at a concentration of 2 μg / ml increased the number of B-lymphocytes with lg-receptors to 31 ± 1.2% (control 22.7 ± 1.1%).
Полученное вещество представляет собой комплекс пептидов с молекулярной массой до 5000 Д. Пептидная природа вещества, полученного по предлагаемому способу, подтверждается следующими данными:
1) Дает цветную реакцию с биуретовым реактивом;
2) Молекулярная масса компонентов, определенная с помощью гель-хроматографии, составляет 600-5000 Д;
3) Аминокислотный анализ вещества показал, что в состав полученного продукта входит 20 аминокислот в определенном соотношении;
4) Основной спектр (пик) поглощения в ультрафиолетовом свете колеблется в пределах 220-230 нм (спектрофотометрически).The resulting substance is a complex of peptides with a molecular weight of up to 5000 D. The peptide nature of the substance obtained by the proposed method is confirmed by the following data:
1) Gives a color reaction with a biuret reagent;
2) The molecular weight of the components, determined using gel chromatography, is 600-5000 D;
3) Amino acid analysis of the substance showed that the composition of the resulting product includes 20 amino acids in a certain ratio;
4) The main absorption spectrum (peak) in ultraviolet light ranges from 220-230 nm (spectrophotometrically).
Вышеуказанное позволяет достаточно точно провести идентификацию полученного вещества. The above allows you to accurately identify the resulting substance.
При сопоставительном анализе заявляемого способа и способа-прототипа выявлены следующие сходные признаки:
1) Оба способа предназначены для получения вещества, стимулирующего антигеннезависимую дифференцировку B-лимфоцитов;
2) В качестве исходного сырья используют сумки Фабрициуса птиц;
3) Сырье предварительно замораживают;
4) Сырье гомогенизируют;
5) Гомогенат подвергают экстракции;
6) Экстракт фильтруют и центрифугируют;
7) Осаждение целевого продукта производят охлажденным ацетоном в течение 24 часов при (-5)-(-8)oC;
8) Осадок отфильтровывают под вакуумом;
9) Полученное вещество лиофильно высушивают.A comparative analysis of the proposed method and the prototype method revealed the following similar signs:
1) Both methods are intended to obtain a substance that stimulates antigen-independent differentiation of B-lymphocytes;
2) Bags of Fabricius birds are used as feedstock;
3) Raw materials are pre-frozen;
4) Raw materials are homogenized;
5) The homogenate is subjected to extraction;
6) The extract is filtered and centrifuged;
7) Precipitation of the target product is carried out with chilled acetone for 24 hours at (-5) - (- 8) o C;
8) The precipitate is filtered off under vacuum;
9) The resulting substance is freeze-dried.
Однако известный способ-прототип и предлагаемый способ имеют следующие отличия:
1) В прототипе экстракцию проводят в 3% растворе уксусной кислоты при pH 3,0-3,5 с добавлением хлористого цинка в концентрации 1 г/л, а в предлагаемом способе экстракцию осуществляют 0,1 н. раствором NaOH при pH 9,0-9,5, что ведет к преимущественному выделению пептидов кислой природы;
2) В способе-прототипе время экстракции составляет 48 - 72 часа, а в предлагаемом способе экстракцию осуществляют в течение 24-36 часов;
3) В предлагаемом способе с целью дополнительной очистки целевого продукта осадок подвергают ультрафильтрации с пределом молекулярного удержания 5 кД;
4) В способе-прототипе целевой продукт представлен щелочными полипептидами с молекулярной массой от 2 до 12 кД, а в предлагаемом способе выделяют пептиды преимущественно кислой природы с ММ от 600 до 5000 Д.However, the known prototype method and the proposed method have the following differences:
1) In the prototype, the extraction is carried out in a 3% solution of acetic acid at a pH of 3.0-3.5 with the addition of zinc chloride at a concentration of 1 g / l, and in the proposed method, the extraction is carried out 0.1 N. NaOH solution at pH 9.0-9.5, which leads to the preferential allocation of peptides of an acidic nature;
2) In the prototype method, the extraction time is 48 - 72 hours, and in the proposed method, the extraction is carried out within 24-36 hours;
3) In the proposed method, in order to further purify the target product, the precipitate is subjected to ultrafiltration with a molecular retention limit of 5 kD;
4) In the prototype method, the target product is alkaline polypeptides with a molecular weight of from 2 to 12 kD, and in the proposed method, peptides are predominantly acidic in nature with MM from 600 to 5000 D.
Доказательство правильности выбранных в предлагаемом способе параметров экстракции и ультрафильтрации приведены в таблицах 2-4. Количество B-лимфоцитов, несущих lg-рецепторы, определяли методом прямой антиглобулиновой розеточной реакции с антисыворотками к иммуноглобулинам человека (Кудрявцева Е.Р., 1983). Концентрация пептидов в опыте составляла 2 мкг/мл. The proof of the correctness of the extraction and ultrafiltration parameters selected in the proposed method are shown in tables 2-4. The number of B-lymphocytes carrying lg receptors was determined by the direct antiglobulin rosette reaction with antisera to human immunoglobulins (Kudryavtseva E.R., 1983). The concentration of peptides in the experiment was 2 μg / ml.
Из таблицы 2 видно, что для получения вещества, стимулирующего антигеннезависимую дифференцировку B-лимфоцитов, необходимо проводить экстракцию при pH 9,0 - 9,5. Более высокие или более низкие значения pH приводят к снижению специфической активности получаемого вещества. From table 2 it is seen that in order to obtain a substance that stimulates antigen-independent differentiation of B-lymphocytes, it is necessary to carry out extraction at a pH of 9.0 - 9.5. Higher or lower pH values lead to a decrease in the specific activity of the resulting substance.
Из таблицы 3 видно, что оптимальное время экстракции составляет 24 - 36 часов. Уменьшение или увеличение времени экстракции приводит к снижению активности целевого продукта. From table 3 it is seen that the optimal extraction time is 24 to 36 hours. Reducing or increasing the time of extraction leads to a decrease in the activity of the target product.
Из таблицы 4 видно, что максимальной специфической активностью обладает фракция с молекулярной массой до 5000 Д. From table 4 it is seen that the fraction with a molecular weight of up to 5000 D has the maximum specific activity.
Биологическую активность полученного вещества, как и в способе-прототипе, изучали методом прямой антиглобулиновой розеточной реакции с антисыворотками к иммуноглобулинам человека (Кудрявцева Е.Р., 1983). Известно, что lg-рецепторы являются маркером дифференцировки B-клеток и экспрессируются на зрелых B-лимфоцитах. Лимфоциты периферической крови больных с ожогами IIIб - IV степени 15 - 30% поверхности тела инкубировали в течение 2 часов при температуре 37oC в полной питательной среде с полученными пептидами в концентрации от 0,1 до 100 мкг/мл. Исследование проводили на лимфоцитах ожоговых больных, поскольку известно, что при ожоговой болезни нарушается антигеннезависимая дифференцировка B-лимфоцитов и в периферической крови появляется большое количество незрелых или "нулевых" клеток (Эберт Л.Я., 1980). В качестве контроля использовали лимфоциты, инкубированные с добавлением аналогичного объема физиологического раствора.The biological activity of the obtained substance, as in the prototype method, was studied by the direct antiglobulin rosette reaction with antisera to human immunoglobulins (Kudryavtseva E.R., 1983). It is known that lg receptors are a marker of B-cell differentiation and are expressed on mature B-lymphocytes. The peripheral blood lymphocytes of patients with burns IIIb - IV degree 15-30% of the body surface were incubated for 2 hours at a temperature of 37 o C in a complete nutrient medium with the obtained peptides in a concentration of from 0.1 to 100 μg / ml. The study was performed on the lymphocytes of burn patients, since it is known that with a burn disease the antigen-independent differentiation of B-lymphocytes is disrupted and a large number of immature or “null” cells appear in the peripheral blood (Ebert L.Ya., 1980). As a control, lymphocytes incubated with the addition of a similar volume of saline were used.
Кроме того, изучали влияние полученного вещества на экспрессию дифференцировочных антигенов CD21 и CD22, являющихся маркером зрелой B-клеткн - завершающего этапа антигеннезависимой дифференцировки B-лимфоцитов, методом непрямой поверхностной иммунофлуоресценции. In addition, we studied the effect of the obtained substance on the expression of differentiating antigens CD21 and CD22, which are a marker of mature B-cells, the final stage of antigen-independent differentiation of B-lymphocytes, by indirect surface immunofluorescence.
Таким образом, по предлагаемому способу получают вещество, обладающее стимулирующим действием на антигеннезависимую дифференцировку B-лимфоцитов. По сравнению со способом-прототипом предлагаемый способ позволяет достигнуть повышения активности целевого продукта, что выражается в снижении активной концентрации препарата. Так вещество, полученное по предлагаемому способу, обладает специфической активностью в концентрации от 0,5 до 10 мкг/мл, в то время как по способу-прототипу - 100 мкг/мл. Более того, полученные пептиды повышают количество B-лимфоцитов, несущих на своей мембране рецептор к C3d-компоненту комплементу (CD21). Подобным действием вещество, получаемое по способу-прототипу, не обладает. Thus, by the proposed method receive a substance that has a stimulating effect on antigen-independent differentiation of B-lymphocytes. Compared with the prototype method, the proposed method allows to increase the activity of the target product, which is expressed in a decrease in the active concentration of the drug. So the substance obtained by the proposed method has a specific activity in a concentration of from 0.5 to 10 μg / ml, while the prototype method has 100 μg / ml. Moreover, the resulting peptides increase the number of B-lymphocytes carrying on their membrane a receptor for the C3d component of complement (CD21). The substance obtained by the prototype method does not have a similar effect.
Вещество, стимулирующее антигеннезависимую дифференцировку B-лимфоцитов, может найти применение в медицине для профилактики и лечения иммунодефицитных состоянии различной этиологии с преимущественным поражением гуморального звена иммунитета. A substance that stimulates the antigen-independent differentiation of B-lymphocytes can be used in medicine for the prevention and treatment of immunodeficiency states of various etiologies with a predominant lesion of the humoral immunity.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99111330A RU2155068C1 (en) | 1999-05-27 | 1999-05-27 | Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99111330A RU2155068C1 (en) | 1999-05-27 | 1999-05-27 | Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2155068C1 true RU2155068C1 (en) | 2000-08-27 |
Family
ID=20220530
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99111330A RU2155068C1 (en) | 1999-05-27 | 1999-05-27 | Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2155068C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103768234A (en) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 天津中敖生物科技有限公司 | Traditional Chinese medicine composition for treating chicken infectious bursa of fabricius and preparation method of traditional Chinese medicine composition |
| RU2521230C1 (en) * | 2012-12-20 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Забайкальский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ЗабГУ") | Method of obtaining substance, stimulating antigen-independent differentiation of b-lymphocytes |
-
1999
- 1999-05-27 RU RU99111330A patent/RU2155068C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 2. АРИОН В.Я. и др. Получение и свойства пептидов бурсы Фабрициуса цыплят. Тезисы 1 Всесоюзн. Иммунол. Съезда. Т.1. - М., 1989, с.12. 3. AUDHYA N. et al. Tripeptide structure of bursin a selective B-cell differentiating hormone of the Bursa of Fabricius. Science. 1986. v.231, p.997-999. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103768234A (en) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 天津中敖生物科技有限公司 | Traditional Chinese medicine composition for treating chicken infectious bursa of fabricius and preparation method of traditional Chinese medicine composition |
| RU2521230C1 (en) * | 2012-12-20 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Забайкальский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ЗабГУ") | Method of obtaining substance, stimulating antigen-independent differentiation of b-lymphocytes |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102188692B (en) | Bone peptide composition, preparation thereof, preparation method thereof and application | |
| CN106243239B (en) | It is a kind of for improving the soluble small molecule beta-1,3-dextran of hepatitis immunity | |
| US4054648A (en) | Process for preparing a therapeutic agent | |
| RU2155068C1 (en) | Method of preparing substance stimulating antigen-nondepending differentiation of b-lymphocytes | |
| KR20180028229A (en) | The Method of High-yield and High-purity Manufacturing of Allo-collagen Composition Extracted From Human origin | |
| JPH03503530A (en) | Human tumor therapeutic drug and its manufacturing method | |
| CA1324084C (en) | Method of extracting a physiological active substance from the husks of pine nuts and anti-contagion medicine made of said extract as principal raw material | |
| JPS6219525A (en) | Production of plant-originated bioactive substance and composition containing said substance | |
| CN101060851A (en) | Pharmaceuticals agents comprising blood components and/or kDa and their use for prophylaxis and treatment of defects of the immune system | |
| JP3054194B2 (en) | Immunosuppressive products | |
| RU2521230C1 (en) | Method of obtaining substance, stimulating antigen-independent differentiation of b-lymphocytes | |
| RU2177325C1 (en) | Method of preparing substance eliciting immunostimulating activity | |
| CN107349417A (en) | A kind of ECM compounds for treating esophageal squamous cell carcinoma and its purposes in the medicine for preparing treatment esophageal squamous cell carcinoma | |
| RU2560845C1 (en) | Method for producing low-molecular activated embryonic complex (nika-em) | |
| RU2041717C1 (en) | Biologically active remedy, method for its producing, preparation containing the mentioned remedy and its application method | |
| RU2673802C1 (en) | Method of manufacture of sterile pharmaceutical substance | |
| SU1158201A1 (en) | Method of obtaining stimulator from mammalia spleen | |
| RU2295963C1 (en) | Method for producing immunostimulator | |
| RU2089204C1 (en) | Method of preparing peptides recovering the prostate gland function | |
| RU2222337C1 (en) | Method for obtaining immunostimulant | |
| RU2151605C1 (en) | Agent "tserebral" for treatment of patient with insult and method of its preparing | |
| RU1522485C (en) | Method of immunostimulating agent preparing | |
| RU2563816C1 (en) | Method for producing immune stimulant | |
| RU2769508C2 (en) | Method for producing combined preparation of animal placenta and phyto-raw material | |
| US5241091A (en) | Method of extracting a physiological active substance from the husks of pine nuts and anti-contagion medicine made of said extract as principal raw material |