RU2154821C2

RU2154821C2 - Method for diagnosing the cases of helicobacteriosis

Info

Publication number: RU2154821C2
Application number: RU98102728A
Authority: RU
Inventors: А.В. Сальников; И.В. Суходоло; Р.И. Плешко; Н.А. Кривова
Original assignee: Сибирский медицинский университет; Сальников Алексей Владимирович; Суходоло Ирина Владимировна; Плешко Раиса Ивановна; Кривова Наталья Андреевна
Priority date: 1998-02-16
Filing date: 1998-02-16
Publication date: 2000-08-20

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves using parietocavitary mucus taken from fundic and antral regions of the stomach in the amount of 0.4-0.5 ml as biological material. To do it, esophagogastroduodenoscopy is carried out to take samples of mucus from the fundic and antral regions of the stomach in the amount of 0.4-0.5 ml by means of rigid catheter. Cytological preparation is created, stained and examined with microscope. EFFECT: lower risk of traumatic complications.

Description

Изобретение относится к области медицины, гастроэнтерологии, конкретно, к способам диагностики хеликобактериоза. The invention relates to the field of medicine, gastroenterology, and specifically to methods for diagnosing helicobacteriosis.

Известны способы диагностики хеликобактериоза, позволяющие верифицировать Helicobacter pylori и заключающиеся в заборе биоптатов слизистой оболочки желудка с проведением следующих тестов: исследования гистологического и цитологического препаратов слизистой оболочки желудка, оценки уреазного теста, бактериологического изучения полученной чистой культуры Helicobacter pylori и выявления бактерий с помощью фазово-контрастной микроскопии. Однако данные способы обладают рядом недостатков, а именно: травматичность исследования, вызванная получением биоптатов слизистой оболочки, и длительность выполнения анализа в течение 7 дней, срок хранения образца для бактериологического исследования не более двух суток. Known methods for the diagnosis of Helicobacteriosis, allowing verification of Helicobacter pylori and consisting in sampling biopsy samples of the gastric mucosa with the following tests: studies of histological and cytological preparations of the gastric mucosa, urease test, bacteriological studies of the resulting pure Helicobacter pylori culture and detection of bacteria using phase-contrast microscopy. However, these methods have several disadvantages, namely: the morbidity of the study, caused by obtaining biopsy samples of the mucous membrane, and the duration of the analysis for 7 days, the shelf life of the sample for bacteriological studies is not more than two days.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ диагностики, основанный на приготовлении гистологического препарата из биоптата слизистой оболочки желудка и дальнейшем его исследовании. Его недостатки - травматичность, инвазивность и длительность выполнения способа. Closest to the proposed method is a diagnostic method based on the preparation of a histological preparation from a biopsy specimen of the gastric mucosa and its further investigation. Its disadvantages are invasiveness, invasiveness and the duration of the method.

Новый технический результат - снижение травматичности и сокращение времени исследования достигают новым способом диагностики хеликобактериоза, заключающийся в проведении эзофагогастродуоденоскопии, заборе биологического материала из антрального и фундального отделов желудка, приготовлении препаратов, последующей идентификации бактерий и выделении чистой культуры для определения чувствительности к антибиотикам, причем в качестве биологического материала используют пристеночно-полостную слизь желудка в объеме 0,4 - 0,5 мл. A new technical result - reducing trauma and reducing research time - achieves a new method for the diagnosis of Helicobacteriosis, which involves conducting esophagogastroduodenoscopy, collecting biological material from the antrum and fundus of the stomach, preparing drugs, identifying bacteria, and isolating a pure culture to determine antibiotic sensitivity, moreover, as biological material using parietal cavity mucus of the stomach in a volume of 0.4 - 0.5 ml.

Способ осуществляют следующим образом: при проведении эзофагогастродуоденоскопии производят аспирацию образцов пристеночно-полостной слизи фундального и антрального отделов желудка объемом 0,4-0,5 мл с помощью жесткого катетера в стерильный шприц с последующим приготовлением из слизи цитологического препарата. После фиксации мазка слизи 96% этиловым спиртом производят его окрашивание азур II-эозином в течение 20 минут, при этом Helicobacter pylori окрашивается в синий цвет. Далее микроскопируют под иммерсией. The method is as follows: when conducting esophagogastroduodenoscopy, samples of parietal cavity mucus of the fundus and antrum of the stomach are aspirated with a volume of 0.4-0.5 ml using a hard catheter into a sterile syringe, followed by preparation of a cytological preparation from the mucus. After fixing the smear smear with 96% ethyl alcohol, it is stained with azure II-eosin for 20 minutes, while Helicobacter pylori is colored blue. Next, microscope under immersion.

Для оценки активности бактериальной уреазы образец слизи помещают в среду с мочевиной и инкубируют. To evaluate the activity of bacterial urease, a mucus sample is placed in urea medium and incubated.

При необходимости определения чувствительности Helicobacter pylori к антибиотикам и идентификации кокковой формы Helicobacter pylori можно выделять чистую культуру бактерий, проводя посев слизи на питательные среды. If it is necessary to determine the sensitivity of Helicobacter pylori to antibiotics and to identify the coccal form of Helicobacter pylori, a pure bacterial culture can be isolated by plating the mucus on culture media.

При выявлении Helicobacter pylori при язвенной болезни и хроническом поверхностном гастрите в случае обнаружения бактерий в виде палочек типичной С-образной формы можно проводить только цитологическое исследование. If Helicobacter pylori is detected in patients with peptic ulcer and chronic superficial gastritis, if bacteria are found in the form of sticks of a typical C-shape, only a cytological examination can be performed.

Пристеночно-полостная слизь желудка выбрана в качестве биологического материала, т.к. является основным местом обитания Helicobacter pylori и бактерии могут существовать в слизи в виде палочек или кокков в отличие от эпителия слизистой оболочки желудка, где бактерии представлены чаще всего в виде палочек. Указанный объем слизи достаточен для приготовления мазка и идентификации бактерий. The parietal cavity mucus of the stomach is selected as a biological material, because is the main habitat for Helicobacter pylori and bacteria can exist in the mucus in the form of sticks or cocci, in contrast to the epithelium of the gastric mucosa, where bacteria are most often presented in the form of sticks. The indicated volume of mucus is sufficient to prepare a smear and identify bacteria.

Исследование проведено на 23 больных с язвой двенадцатиперстной кишки и хроническим гастритом, произведено гистологическое исследование биоптатов слизистой оболочки желудка и анализ мазков слизи из антрального и фундального отделов желудка. Гистологическое исследование биоптатов выявило Helicobacter pylori у 15 больных (65%), цитологическое исследование мазков слизи выявило Helicobacter pylori у 13 больных. Время исследования составило одни сутки, а при цитологическом исследовании мазка с обнаружением бактерий типичной С-образной формы - один час. Отсутствие Helicobacter pylori в мазках слизи у двух обследованных больных может быть связано с проведением антибактериальной терапии трихополом и амоксициклином. Образцы слизи от трех больных с диагностированным хеликобактериозом использовались для получения чистой культуры бактерий для выявления чувствительности к антибиотикам. The study was conducted on 23 patients with duodenal ulcer and chronic gastritis, histological examination of biopsy samples of the gastric mucosa and analysis of smear smears from the antrum and fundus of the stomach were performed. A histological examination of biopsy samples revealed Helicobacter pylori in 15 patients (65%), a cytological examination of smear smears revealed Helicobacter pylori in 13 patients. The study time was one day, and with a cytological examination of a smear with detection of bacteria of a typical C-shaped form, one hour. The absence of Helicobacter pylori in mucus smears in the two examined patients may be associated with antibiotic therapy with trichopolum and amoxicycline. Mucus samples from three patients with diagnosed helicobacteriosis were used to obtain a pure bacterial culture to detect antibiotic susceptibility.

На основании клинических наблюдений и исследований можно сделать вывод, что предлагаемый способ обладает следующими преимуществами: уменьшение травматичности при взятии биологического материала и сокращение числа осложнений при сохранении достаточной информативности в случаях, когда язвенная болезнь и хронический гастрит вызваны персистенцией Helicobacter pylori. Кроме того, есть возможность более длительного хранения образцов биологического материала для бактериологического исследования более двух суток. Данный способ диагностики может применяться при скрининговых обследованиях населения (особенно у детей) ввиду быстроты получения результатов (экспресс-диагностика в течение одного часа) и неинвазивности исследования. Based on clinical observations and studies, it can be concluded that the proposed method has the following advantages: reduced trauma when taking biological material and reduced complications while maintaining sufficient information in cases where peptic ulcer and chronic gastritis are caused by persistence of Helicobacter pylori. In addition, there is the possibility of longer storage of samples of biological material for bacteriological studies for more than two days. This diagnostic method can be used for screening examinations of the population (especially in children) due to the speed of obtaining results (rapid diagnosis within one hour) and the non-invasiveness of the study.

Claims

A method for the diagnosis of helicobacteriosis, which consists in conducting esophagogastroduodenoscopy, collecting biological material from the antrum and fundus of the stomach, preparing preparations, subsequent identification of bacteria and isolating a pure culture to determine sensitivity to antibiotics, characterized in that parietal cavity mucus is used as biological material in a volume of 0.4 - 0.5 ml.