RU2449277C2 - Method of predicting infection of newborn babies and puerperants - Google Patents

Method of predicting infection of newborn babies and puerperants Download PDF

Info

Publication number
RU2449277C2
RU2449277C2 RU2010133012/15A RU2010133012A RU2449277C2 RU 2449277 C2 RU2449277 C2 RU 2449277C2 RU 2010133012/15 A RU2010133012/15 A RU 2010133012/15A RU 2010133012 A RU2010133012 A RU 2010133012A RU 2449277 C2 RU2449277 C2 RU 2449277C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
spp
infection
amniotic fluid
infectious agents
luer
Prior art date
Application number
RU2010133012/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2010133012A (en
Inventor
Юрий Иванович Набережнев (RU)
Юрий Иванович Набережнев
Валентина Семеновна Орлова (RU)
Валентина Семеновна Орлова
Олег Васильевич Головченко (RU)
Олег Васильевич Головченко
Ирина Владимировна Калашникова (RU)
Ирина Владимировна Калашникова
Original Assignee
Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") filed Critical Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации
Priority to RU2010133012/15A priority Critical patent/RU2449277C2/en
Publication of RU2010133012A publication Critical patent/RU2010133012A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2449277C2 publication Critical patent/RU2449277C2/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: amniotic fluid is sampled after preterm rupture of membranes in case of incomplete pregnancy at term 22-36 weeks of pregnancy. For this purpose into uterine cavity under US-ray control introduced is catheter, made from elastic materials and consisting of two parts: external - introducer, which serves for facilitation of catheter penetration through cervix and internal - the capillary itself in form of transparent tube, ending with Luer-connector for fixation of Luer-type syringe, used to create negative pressure for sampling. Infectious agents are identified in samples: bacteria Streptococcus spp.; Peptostreptococcus spp.; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp.; Capnocytophaga spp.; Stomatococcus spp.; Bacterioides spp.; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp.; Clostridium spp., as well as viruses - adenovirus; parvovirus; cytomegalovirus; Epstein-Barr vims; herpes simplex virus; influenza A. After that, infection of newborn babies and puerperants by identified infectious agents is predicted.
EFFECT: method is low invasive, which eliminates development of complications during and after sampling, on the basis of obtained results it is possible to take measures against infection realisation in due time and rational way.
3 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и перинатологии, и найдет применение как метод обследования беременных женщин с высоким перинатальным риском, обусловленным преждевременным разрывом околоплодных оболочек на сроке гестации 22-36 недель беременности, для прогнозирования риска инфицирования новорожденных и родильниц.The invention relates to medicine, in particular to obstetrics and perinatology, and will find application as a method for examining pregnant women with high perinatal risk due to premature rupture of the amniotic membranes at a gestational age of 22-36 weeks of pregnancy, to predict the risk of infection of newborns and puerperas.

Значимость проблемы преждевременных родов обусловлена высоким уровнем перинатальной заболеваемости и смертности. По данным Л.П.Сухановой (2008 г.), в разрезе отдельных Федеральных округов РФ показатель перинатальной смертности в 2005 году колебался от 8,4% до 11,7%, составляя по Центральному Федеральному округу 10,2%, превышая в значительной степени потери детей от 7 суток до 9 лет жизни включительно. Несмотря на научно-технические достижения современной медицины, частота преждевременных родов в последние годы не имеет тенденции к снижению, а напротив, увеличивается, особенно в развитых странах. К настоящему времени стали более понятны многие причины преждевременных родов, среди которых хорионамниониты инфекционного генеза провоцируют около 30-40% преждевременных излитий околоплодных вод при недоношенной беременности. При этом более чем у 20% женщин инфекционный агент не обнаруживается (Marjorie K., 2001; Yiorgos A., 2006). Различают несколько путей попадания инфекционного агента в плодово-плацентарный комплекс, среди которых наиболее изучен восходящий - из нижних отделов урогенитального тракта. Другой путь инфицирования - гематогенный (трансплацентарный) - предполагает попадание инфекционного агента в плодово-плацентарный комплекс из миометрия и экстрагенитально локализованных очагов материнского организма и в настоящее время продолжает оставаться недостаточно освещенным, что во многом обусловлено бессимптомным течением заболеваний. Тем не менее, вне зависимости от варианта попадания в околоплодные структуры бактерий и вирусов, возникает высокая вероятность инфицирования матки и плода с последующим развитием соответственно эндометрита и разнообразной соматической и неврологической патологии. В связи с этим выявление полного спектра инфекционных агентов в околоплодных водах позволит определить риск инфицирования плода и матери, а значит, своевременно и рационально принять меры по борьбе с реализацией инфекции.The significance of the preterm birth problem is due to the high level of perinatal morbidity and mortality. According to L.P. Sukhanova (2008), in the context of individual Federal Districts of the Russian Federation, the perinatal mortality rate in 2005 ranged from 8.4% to 11.7%, amounting to 10.2% in the Central Federal District, exceeding a significant the degree of loss of children from 7 days to 9 years of life, inclusive. Despite the scientific and technological achievements of modern medicine, the frequency of preterm births in recent years has not tended to decrease, but, on the contrary, is increasing, especially in developed countries. To date, many causes of preterm birth have become more clear, among which chorionamnionitis of infectious origin provoke about 30-40% of premature amniotic fluid outflows during premature pregnancy. Moreover, in more than 20% of women, an infectious agent is not detected (Marjorie K., 2001; Yiorgos A., 2006). There are several ways in which the infectious agent enters the fetal-placental complex, among which the ascendant is the most studied - from the lower parts of the urogenital tract. Another pathway of infection - hematogenous (transplacental) - involves the infectious agent entering the fetal-placental complex from the myometrium and extragenitalized localized foci of the mother's body and currently continues to be poorly illuminated, which is largely due to the asymptomatic course of the disease. Nevertheless, regardless of the option of getting into the amniotic structures of bacteria and viruses, there is a high probability of infection of the uterus and fetus with the subsequent development of endometritis and various somatic and neurological pathologies, respectively. In this regard, the identification of the full spectrum of infectious agents in the amniotic fluid will determine the risk of infection of the fetus and mother, and therefore, take timely and rational measures to combat the implementation of the infection.

Известен способ диагностики внутриутробного инфицирования (ВУИ) плода по патенту №2158927, опубл. 10.11.2000, включающий извлечение амниотической жидкости у беременных женщин путем прокола передней брюшной стенки и матки, приготовление и биохимическое исследование препаратов из нее и отличающийся тем, что в препарате подсчитывают количество клеточных элементов макрофагов, лимфоцитов и сегментоядерных лейкоцитов в 10 полях зрения и при показателях макрофагов 5,49±1,01, лимфоцитов 6,65±1,06, сегментоядерных лейкоцитов 7,42±1,16 диагностируют внутриутробную инфекцию плода.A known method for the diagnosis of intrauterine infection (IUI) of the fetus according to patent No. 2158927, publ. 10.11.2000, including the extraction of amniotic fluid in pregnant women by puncture of the anterior abdominal wall and uterus, preparation and biochemical examination of preparations from it, and characterized in that the number of macrophage, lymphocytes and segmented leukocyte cellular elements in 10 fields of vision and at indicators are calculated in the preparation macrophages 5.49 ± 1.01, lymphocytes 6.65 ± 1.06, segmented white blood cells 7.42 ± 1.16 diagnose intrauterine infection of the fetus.

Недостатками метода являются его косвенное подтверждение внутриутробного инфицирования без идентификации типа возбудителя и инвазивность способа взятия амниотической жидкости, что считается дополнительным фактором развития преждевременных родов.The disadvantages of the method are its indirect confirmation of intrauterine infection without identifying the type of pathogen and the invasiveness of the method of taking amniotic fluid, which is considered an additional factor in the development of premature birth.

Известен способ диагностики внутриутробного инфицирования плода генерализованной формы, патент №2205406, публ. 27.05.2003, включающий исследование клеточного состава амниотической жидкости, отличающийся тем, что в амниотической жидкости определяют абсолютное содержание в десяти полях зрения макрофагов, лимфоцитов и нейтрофильных сегментоядерных лейкоцитов и эпителиальных клеток кожи плода, рассчитывают показатель развития у плода генерализованной формы внутриутробного инфицирования по уравнению:A known method for the detection of intrauterine infection of the fetus is patented, publ. 05/27/2003, including the study of the cellular composition of amniotic fluid, characterized in that the absolute content of macrophages, lymphocytes and neutrophilic segmented leukocytes and epithelial cells of the skin of the fetus is determined in the amniotic fluid, the rate of development of the generalized form of intrauterine infection in the fetus is calculated by the equation:

-1,007×М-0,723×N - 0.826×Л+0.005×Э, где М - число клеток макрофагов, N - число клеток нейтрофильных сегментоядерных лейкоцитов, Л - число клеток лимфоцитов, Э - число эпителиальных клеток кожи плода.-1.007 × M-0.723 × N - 0.826 × L + 0.005 × E, where M is the number of macrophage cells, N is the number of cells of neutrophilic segmented white blood cells, L is the number of lymphocyte cells, E is the number of fetal skin epithelial cells.

При получении показателя ниже порогового значения, равного минус 12,51, диагностируют генерализованную форму внутриутробного инфицирования плода.Upon receipt of an indicator below a threshold value of minus 12.51, a generalized form of intrauterine infection of the fetus is diagnosed.

Подобно предыдущему аналогу, данный способ способен только косвенно констатировать внутриутробное инфицирование без определения типа инфекционного агента в амниотической жидкости, взятие которой для исследования также происходит путем применения инвазивного метода - амниоцентеза.Like the previous analogue, this method is only able to indirectly ascertain intrauterine infection without determining the type of infectious agent in the amniotic fluid, which is also taken for research by applying the invasive method - amniocentesis.

Известен способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода вирусом Эпштейна-Барра (англ. Epstein-Barr virus), патент №2276363, публ. 10.05.2006, основанный на определении иммуноглобулинов класса IgG к вирусу Эпштейна-Барра в амниотической жидкости в сроки 16-40 нед методом иммуноферментного анализа. Недостатком метода является его возможность определять только один вирус, ответственный за развитие преждевременных родов и инфицирование плода. Также недостатком метода следует считать его инвазивность за счет использования трансабдоминального амниоцентеза при получении околоплодных вод как материала для исследования.A known method for predicting intrauterine infection of the fetus with the Epstein-Barr virus (Eng. Epstein-Barr virus), patent No. 2276363, publ. 05/10/2006, based on the determination of immunoglobulins of the IgG class against Epstein-Barr virus in amniotic fluid in terms of 16-40 weeks by enzyme-linked immunosorbent assay. The disadvantage of this method is its ability to determine only one virus, responsible for the development of preterm birth and infection of the fetus. Also, the invasiveness of the method due to the use of transabdominal amniocentesis in obtaining amniotic fluid as a material for research should be considered a drawback of the method.

Известен способ диагностики внутриутробного инфицирования (ВУИ) плода локальной формы по патенту РФ №2171990 (10.08.2001), согласно которому путем амниоцентеза извлекают амниотическую жидкость, в которой исследуют ее клеточный состав. В амниотической жидкости определяют абсолютное содержание в 10 полях зрения макрофагов (М), лимфоцитов (Л), нейтрофильных сегментоядерных лейкоцитов (N) и эпителиальных клеток кожи плода (Э), рассчитывают показатель развития локальной формы внутриутробного инфицирования плода по уравнению:A known method for the diagnosis of intrauterine infection (IUI) of a local form fetus according to the patent of the Russian Federation No. 2171990 (08/10/2001), according to which amniotic fluid is extracted by amniocentesis, in which its cellular composition is examined. In the amniotic fluid, the absolute content in 10 fields of view of macrophages (M), lymphocytes (L), neutrophilic segmented leukocytes (N) and epithelial cells of the fetal skin (E) is determined, the development rate of the local form of intrauterine infection of the fetus is calculated by the equation:

-1,329×М-1,646×N-0,229×Л+0,013×Э,-1.329 × M-1.666 × N-0.229 × L + 0.013 × E,

и в случае, если полученный показатель ниже порогового значения, равного минус 13,05, диагностируют локальную форму внутриутробного инфицирования плода.and if the obtained indicator is below the threshold value of minus 13.05, a local form of intrauterine infection of the fetus is diagnosed.

Недостаток данного способа состоит в том, что он позволяет диагностировать только локальную форму ВУИ непосредственно после рождения.The disadvantage of this method is that it allows you to diagnose only the local form of IUI immediately after birth.

Прототипом заявляемого изобретения выбран способ пренатальной диагностики внутриутробных заражений плода, описанный в практическом руководстве / Под редакцией профессора В.К.Чайки. - Донецк: ООО «Альматео», 2006. - 640 с. Сущность прототипа: у беременной женщины не ранее 21-22 недель гестации с помощью пункционных или биопсийных игл, под контролем УЗ-луча выполняют амниоцентез (вхождение иглой в амниотическую полость) с целью получения околоплодных вод, которые исследуют по стандартизированным методикам на выявление бактериальной и вирусной инфекции. Следует отметить, что определение риска развития инфицирования плода осуществляется только при соблюдении следующих условий: наличие подозрительных серологических данных в ранних сроках беременности (сероконверсия или повышенное содержание IgG, а также наличие IgM-антител), особенно в тех случаях, когда появляются симптомы в виде гриппозной инфекции; наличие повышенных концентраций специфических IgG и появление IgM у женщин, у которых до беременности не определялись серологические признаки перенесенной инфекции; наличие у плода УЗ-признаков внутриутробного заражения; наличие информированного согласия семьи на проведение внутриматочного вмешательства.The prototype of the claimed invention selected a method of prenatal diagnosis of intrauterine infections of the fetus, described in a practical guide / Edited by Professor V.K. Chaika. - Donetsk: LLC Almeteo, 2006. - 640 p. The essence of the prototype: in a pregnant woman not earlier than 21-22 weeks of gestation using puncture or biopsy needles, under the control of an ultrasound beam, amniocentesis (entering the needle into the amniotic cavity) is performed in order to obtain amniotic fluid, which is examined by standardized methods for the detection of bacterial and viral infection. It should be noted that the risk of developing fetal infection is determined only if the following conditions are met: the presence of suspicious serological data in early pregnancy (seroconversion or an increased IgG content, as well as the presence of IgM antibodies), especially in cases when flu-like symptoms appear infections the presence of elevated concentrations of specific IgG and the appearance of IgM in women who did not detect serological signs of infection before pregnancy; the fetus has ultrasound signs of intrauterine infection; family informed consent for intrauterine intervention.

К недостаткам прототипа следует отнести инвазивность способа, при котором встречаются такие грозные осложнения, как хорионамнионит, прерывание беременности, повреждение и остановка сердца плода. Также следует отметить, что наличие серопозитивного результата в отношении инфекционных агентов не всегда свидетельствует об инфицированности околоплодных структур и приводит к преждевременному разрыву амниотических оболочек. В связи с этим использование способа по прототипу не позволяет прогнозировать внутриутробное инфицирование плода конкретным этиологическим фактором.The disadvantages of the prototype include the invasiveness of the method, in which there are formidable complications such as chorionamnionitis, abortion, damage and cardiac arrest of the fetus. It should also be noted that the presence of a seropositive result with respect to infectious agents does not always indicate infection of the amniotic structures and leads to premature rupture of the amniotic membranes. In this regard, the use of the prototype method does not allow to predict intrauterine infection of the fetus with a specific etiological factor.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа прогнозирования инфицирования новорожденных и родильниц конкретным этиологическим фактором на сроке 22-36 недель беременности при преждевременном излитии околоплодных вод.The objective of the invention is to develop a method for predicting infection of newborns and puerperas with a specific etiological factor for a period of 22-36 weeks of pregnancy with premature discharge of amniotic fluid.

Поставленная задача решается тем, что у беременных женщин с преждевременным разрывом околоплодных оболочек на недоношенном сроке беременности (22-36 недель) под контролем ультразвукового исследования путем трансцервикальной вакуумной аспирации отбирают околоплодные воды, в которых бактериологическими и вирусологическими методами выявляют качественный и количественный состав наиболее часто встречаемых и этиологически значимых в инфицировании плодного яйца микроорганизмов, в число которых входят Streptococcus spp.; Peptostreptococcus spp.; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp.; Capnocytophaga spp.; Stomatococcus spp.; Bacterioides spp.; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp.; Clostridium spp., грамотрицательных неспорообразующих анаэробных бактерий и кокков, а также наиболее значимых вирусов: adenovirus; parvovirus; cytomegalovirus; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza A.The problem is solved in that in pregnant women with premature rupture of the amniotic membranes in the premature pregnancy (22-36 weeks) under the control of ultrasound, amniotic fluid is removed by transcervical vacuum aspiration, in which the qualitative and quantitative composition of the most common and etiologically significant microorganisms infection of the ovum, including Streptococcus spp .; Peptostreptococcus spp .; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp .; Capnocytophaga spp .; Stomatococcus spp .; Bacterioides spp .; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp .; Clostridium spp., Gram-negative, non-spore-forming anaerobic bacteria and cocci, as well as the most significant viruses: adenovirus; parvovirus; cytomegalovirus; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza A.

Обнаружение в околоплодных водах вышеуказанных бактерий и (или) вирусов свидетельствует об инфицировании микроорганизмов плода и матки именно этими типами.Detection of the above bacteria and (or) viruses in the amniotic fluid indicates infection of the microorganisms of the fetus and uterus with these types.

Новизна предложенного способа заключается в том, что околоплодные воды отбирают на сроке 22-36 недель беременности при преждевременном излитии околоплодных вод путем трансцервикальной вакуумной аспирации при помощи катетера, выполненного из эластичных материалов и состоящего из двух частей: наружная - интродьюсер, который служит для облегчения проникновения катетера через шейку матки, и внутренняя - сам капилляр - прозрачная трубка, заканчивающаяся Luer-коннектором для прикрепления шприца типа Luer.The novelty of the proposed method lies in the fact that amniotic fluid is withdrawn for a period of 22-36 weeks of pregnancy with premature discharge of amniotic fluid by transcervical vacuum aspiration using a catheter made of elastic materials and consisting of two parts: external - introducer sheath, which serves to facilitate penetration a catheter through the cervix, and the inner capillary itself is a transparent tube ending with a Luer connector for attaching a Luer syringe.

Предлагаемый способ является малоинвазивным, так как его применение не приводит к нарушению целостности органов и полостей, что достигается благодаря трансцервикальному введению эластичных материалов при уже самопроизвольно вскрывшемся околоплодном пузыре, и исключает развитие осложнений во время и после взятия материала. Кроме того, способ строго специфичен, так как позволяет выявить основные бактериальные и вирусные агенты, ответственные за преждевременный разрыв амниотических оболочек. На основании полученных результатов можно достоверно определить риск инфицирования плода и матки и конкретизировать этот инфекционный агент.The proposed method is minimally invasive, since its use does not violate the integrity of organs and cavities, which is achieved due to the transcervical introduction of elastic materials with an already opened amniotic fluid, and eliminates the development of complications during and after taking the material. In addition, the method is strictly specific, as it allows you to identify the main bacterial and viral agents responsible for the premature rupture of amniotic membranes. Based on the results obtained, it is possible to reliably determine the risk of infection of the fetus and uterus and specify this infectious agent.

Подробное описание предлагаемого способаDetailed description of the proposed method

У беременных на сроке гестации 22-36 недель при преждевременном разрыве амниотических оболочек под контролем ультразвукового сканирования трансцервикально в полость матки вводят катетер, выполненный из эластичных материалов и состоящий из двух частей: наружная - интродьюсер, который служит для облегчения проникновения катетера через шейку матки, и внутренняя - сам капилляр -прозрачная трубка, заканчивающаяся Luer-коннектором, обеспечивающий прикрепление шприца типа Luer. После введения катетера в полость матки путем создания в системе отрицательного давления производят эвакуацию околоплодных вод, первые 7 мл которых отбрасывают для снижения риска контаминации пробы микрофлорой нижних отделов половых путей. Для проведения бактериологического и вирусологического исследования отбирают по 1,0 мл околоплодных вод и вносят соответственно в стерильную пробирку и в пробирку типа «Эппендорф» с лизирующим буфером для проведения ПЦР-диагностики. Пробирку для бактериологического исследования не позднее 1 часа отправляют в микробиологическую лабораторию в анаэростате Becton. Затем из 1 мл околоплодных вод готовят серийные разведения в концентрации до 10, которые по 0,1 мл высевают на селективные питательные среды. Аналогичную пробирку с 1,0 мл околоплодных вод, отправляют для проведения вирусологического исследования. Бактериологическое обследование с целью выявления наиболее часто встречаемых и этиологически значимых в инфицировании плодного яйца микроорганизмов, в число которых входят Streptococcus spp.; Peptostreptococcus spp.; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp.; Capnocytophaga spp.; Stomatococcus spp.; Bacterioides spp.; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp.; Clostridium spp, проводят в соответствии с действующим приказом МЗ СССР №535 от 22.04.1985. Для выделения грамотрицательных неспорообразующих анаэробных бактерий и кокков используют кровяной агар, посевы выдерживают в термостате в течение 5-7 дней. Родовую идентификацию проводят на основании микроскопии, наличия пигмента, гемолитических свойств и роста колоний в присутствии желчи (диски 5 мг, Biomerieux), бриллиантового зеленого (диски 100 мкг, Biomerieux), канамицина (диски 1000 мкг, Becton Dickinson) и ферментации глюкозы. Для выявления Neisseria gonorrhea используют гонококковый агар. Культивирование энтеробактерий проводят на агаре Эндо в течение 24-48 часов с последующей микроскопической идентификацией и верификацией на основании определения оксидазной, каталазной, лецитиназной активности. Лактобактерии культивируют на среде MRS. Для обнаружения грамположительных спорообразующих клостридий материал сеют на среду Columbia agare base с добавлением 5% крови и 24-часовой анаэробной инкубацией. Вирусологическое обследование проводят молекулярно-биологическим методом (ПЦР-диагностика) в реальном времени в амплификаторе Biorad IQ5 с использованием наборов реагентов АмплиСенс для амплификации ДНК с целью выявления наиболее значимых вирусов: adenovirus; parvovirus; cytomegalovims; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza А. При обнаружении в околоплодных водах, считающихся стерильной средой, инфекционных агентов следует новорожденного и родильницу рассматривать как инфицированных типами микроорганизмов, обнаруженных в околоплодных водах.In pregnant women at a gestational age of 22-36 weeks with premature rupture of the amniotic membranes under the control of ultrasound scanning, a catheter made of elastic materials and consisting of two parts is inserted transcervically into the uterine cavity, the external one is an introducer, which serves to facilitate the penetration of the catheter through the cervix, and internal - the capillary itself - a transparent tube ending with a Luer connector, which secures the Luer type syringe. After the catheter is inserted into the uterine cavity by creating a negative pressure in the system, amniotic fluid is evacuated, the first 7 ml of which is discarded to reduce the risk of contamination of the sample with microflora of the lower genital tract. For bacteriological and virological studies, 1.0 ml of amniotic fluid is taken and added to a sterile tube and an Eppendorf tube with a lysis buffer, respectively, for PCR diagnostics. A tube for bacteriological examination no later than 1 hour sent to the microbiological laboratory in a Becton anaerostat. Then serial dilutions of up to 10 are prepared from 1 ml of amniotic fluid, which are sown in 0.1 ml of selective nutrient medium. A similar tube with 1.0 ml of amniotic fluid is sent for virological research. A bacteriological examination to identify the most common and etiologically significant microorganisms in the infection of the ovum, including Streptococcus spp .; Peptostreptococcus spp .; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp .; Capnocytophaga spp .; Stomatococcus spp .; Bacterioides spp .; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp .; Clostridium spp, is carried out in accordance with the current order of the Ministry of Health of the USSR No. 535 of 04/22/1985. To isolate gram-negative non-spore-forming anaerobic bacteria and cocci, blood agar is used, the crops are kept in an incubator for 5-7 days. Generic identification is carried out on the basis of microscopy, the presence of pigment, hemolytic properties and colony growth in the presence of bile (5 mg discs, Biomerieux), brilliant green (100 μg discs, Biomerieux), kanamycin (1000 μg discs, Becton Dickinson) and glucose fermentation. Gonococcal agar is used to identify Neisseria gonorrhea. The cultivation of enterobacteria is carried out on Endo agar for 24-48 hours, followed by microscopic identification and verification based on the determination of oxidase, catalase, lecithinase activity. Lactobacilli are cultured on MRS medium. To detect gram-positive spore-forming clostridia, the material is sown on Columbia agare base medium with the addition of 5% blood and 24-hour anaerobic incubation. Virological examination is carried out by the molecular biological method (PCR diagnostics) in real time in a Biorad IQ5 amplifier using AmpliSens reagent kits for DNA amplification in order to identify the most significant viruses: adenovirus; parvovirus; cytomegalovims; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza A. When detected in the amniotic fluid, considered to be a sterile environment, infectious agents should be considered by the newborn and the puerpera as infected with the types of microorganisms found in the amniotic fluid.

Предложенный способ прогнозирования инфицирования новорожденных и родильниц после антенатального преждевременного разрыва околоплодных оболочек при недоношенной беременности (22-36 недель) отличается более низкой степенью инвазивности манипуляций и вызываемых ими осложнений, специфичностью, спектром определяемых инфекционных агентов и достоверностью полученных результатов.The proposed method for predicting infection of newborns and puerperas after antenatal premature rupture of the amniotic membranes during premature pregnancy (22-36 weeks) is characterized by a lower degree of invasiveness of manipulations and the complications caused by them, specificity, spectrum of determined infectious agents and reliability of the results.

Предлагаемый способ является малоинвазивным, так как его применение не приводит к нарушению целостности органов и полостей, что достигается благодаря трансцервикальному введению эластичных материалов при уже самопроизвольно вскрывшемся околоплодном пузыре и исключает развитие осложнений во время и после взятия материала. Кроме того, способ строго специфичен, так как позволяет выявить основные бактериальные и вирусные агенты, ответственные за преждевременный разрыв амниотических оболочек. На основании полученных результатов можно достоверно определить риск инфицирования плода и матки и конкретизировать этот инфекционный агент.The proposed method is minimally invasive, since its use does not violate the integrity of organs and cavities, which is achieved due to the transcervical introduction of elastic materials with an already opened amniotic fluid and eliminates the development of complications during and after taking the material. In addition, the method is strictly specific, as it allows you to identify the main bacterial and viral agents responsible for the premature rupture of amniotic membranes. Based on the results obtained, it is possible to reliably determine the risk of infection of the fetus and uterus and specify this infectious agent.

Конкретные примеры выполнения предлагаемого способаSpecific examples of the proposed method

Пример 1Example 1

Больная П-ая В.А., 21 год. Наблюдалась в перинатальном центре Белгородской областной клинической больницы.Sick P-th V.A., 21 years old. It was observed in the perinatal center of the Belgorod Regional Clinical Hospital.

В анамнезе: истмико-цервикальная недостаточность; в 19 лет - медицинский аборт. Половая жизнь с 18 лет без применения методов контрацепции. Число половых партнеров - 2.History: isthmic-cervical insufficiency; at age 19 - medical abortion. Sexual life since 18 years without the use of contraception. The number of sexual partners is 2.

Эктрагенитальные заболевания: нет.Ectragenital diseases: no.

Последняя беременность протекала на фоне угрозы преждевременных родов, что на сроке 27-28 недель потребовало госпитализации.The last pregnancy proceeded against the backdrop of the threat of premature birth, which at a period of 27-28 weeks required hospitalization.

В динамическом наблюдении в соответствии со стандартами обследования беременной проведено полное клинико-лабораторное обследование.In dynamic observation, in accordance with the standards of examination of a pregnant woman, a complete clinical and laboratory examination was performed.

При ультразвуковом обследовании патологических изменений не выявлено. При обследовании на урогенитальную инфекцию инфекционных агентов не выявлено.An ultrasound examination revealed no pathological changes. When examined for urogenital infection, no infectious agents were detected.

Преждевременное излитие околоплодных вод: на сроке 33-34 недели.Premature discharge of amniotic fluid: for a period of 33-34 weeks.

Длительность безводного промежутка - 12 ч.The duration of the anhydrous period is 12 hours.

В обследовании предложенным способом околоплодных вод выделен: Staphylococcus epid. - 103 КОЕ/мл; Bacterioides spp.- 103 КОЕ/мл; Enterococcus faecalis - 103 КОЕ/мл, что свидетельствует о риске инфицирования плода выделенными инфекционными агентами. При обследовании новорожденного на наличие внутриутробной инфекции уставлено содержание в ротовой полости, ушных раковинах и внутренней поверхности век: Staphylococcus epid. - 102 КОЕ/мл; Bacterioides spp. - 102 КОЕ/мл; Enterococcus faecalis - 102 КОЕ/мл.In the examination of the proposed method, amniotic fluid isolated: Staphylococcus epid. - 10 3 CFU / ml; Bacterioides spp. - 10 3 CFU / ml; Enterococcus faecalis - 10 3 CFU / ml, which indicates a risk of infection of the fetus with selected infectious agents. When examining a newborn for the presence of intrauterine infection, the content in the oral cavity, auricles and inner surface of the eyelids is prescribed: Staphylococcus epid. - 10 2 CFU / ml; Bacterioides spp. - 10 2 CFU / ml; Enterococcus faecalis - 10 2 CFU / ml.

Осложнение течения раннего неонатального периода: внутриутробная пневмония.Complications of the course of the early neonatal period: intrauterine pneumonia.

Пример 2Example 2

Больная П-ва Е.А., 25 лет. Наблюдалась в перинатальном центре Белгородской областной клинической больницы.Patient Peninsula E.A., 25 years old. It was observed in the perinatal center of the Belgorod Regional Clinical Hospital.

В анамнезе: трихомониаз; в 17 лет - медицинский аборт. Половая жизнь с 16 лет без применения методов контрацепции. Число половых партнеров - 2. Эктрагенитальные заболевания: нет. Последняя беременность протекала без осложнений. В динамическом наблюдении в соответствии со стандартами обследования беременной проведено полное клинико-лабораторное обследование.In the anamnesis: trichomoniasis; at the age of 17 - medical abortion. Sexual life from 16 years without the use of contraception. The number of sexual partners is 2. Ectragenital diseases: none. The last pregnancy was uneventful. In dynamic observation, in accordance with the standards of examination of a pregnant woman, a complete clinical and laboratory examination was performed.

При ультразвуковом обследовании выявлено выраженное маловодие. При обследовании на урогенитальную инфекцию инфекционных агентов не выявлено.An ultrasound examination revealed severe water shortage. When examined for urogenital infection, no infectious agents were detected.

Преждевременное излитие околоплодных вод: на сроке 25-26 недель.Premature discharge of amniotic fluid: for a period of 25-26 weeks.

Длительность безводного промежутка - 41 ч.The duration of the anhydrous period is 41 hours.

В обследовании предложенным способом околоплодных вод выделен: Staphylococcus spp. - 102 КОЕ/мл, что свидетельствует о риске инфицирования плода выделенным инфекционным агентом. При обследовании новорожденного на внутриутробную инфекции уставлено содержание в ротовой полости, ушных раковинах и внутренней поверхности век: Staphylococcus spp. - 102 КОЕ/мл.In the examination of the proposed method of amniotic fluid, Staphylococcus spp. - 10 2 CFU / ml, which indicates a risk of fetal infection with an isolated infectious agent. When examining a newborn for intrauterine infection, the content in the oral cavity, auricles and inner surface of the eyelids is prescribed: Staphylococcus spp. - 10 2 CFU / ml.

Осложнение течения раннего неонатального периода: внутриутробная пневмония.Complications of the course of the early neonatal period: intrauterine pneumonia.

Пример 3Example 3

Больная К-на Н.В., 32 лет. Наблюдалась в перинатальном центре Белгородской областной клинической больницы.Patient K. N.V., 32 years old. It was observed in the perinatal center of the Belgorod Regional Clinical Hospital.

В анамнезе: хронический сальпингоофорит, дисплазия шейки матки; в 22 и 23 года - медицинский аборт. Половая жизнь с 18 лет без применения методов контрацепции. Число половых партнеров - 3.History: chronic salpingoophoritis, cervical dysplasia; at 22 and 23 years - medical abortion. Sexual life since 18 years without the use of contraception. The number of sexual partners is 3.

Эктрагенитальные заболевания: нет.Ectragenital diseases: no.

Последняя беременность протекала без осложнений.The last pregnancy was uneventful.

В динамическом наблюдении в соответствии со стандартами обследования беременной проведено полное клинико-лабораторное обследование.In dynamic observation, in accordance with the standards of examination of a pregnant woman, a complete clinical and laboratory examination was performed.

При ультразвуковом обследовании патологических изменений не выявлено. При обследовании на урогенитальную инфекцию инфекционных агентов не выявлено.An ultrasound examination revealed no pathological changes. When examined for urogenital infection, no infectious agents were detected.

Преждевременное излитие околоплодных вод: на сроке 34-35 недель.Premature discharge of amniotic fluid: for a period of 34-35 weeks.

Длительность безводного промежутка - 140 ч.The duration of the anhydrous period is 140 hours.

В обследовании предложенным способом околоплодных вод выделен: Staphylococcus spp. - 102 КОЕ/мл; Escherichia coli - 102 КОЕ/мл, что свидетельствует о риске инфицирования плода выделенными инфекционными агентами. При обследовании новорожденного на наличие внутриутробной инфекции уставлено содержание в ротовой полости, ушных раковинах и внутренней поверхности век: Staphylococcus spp. - 102 КОЕ/мл; Escherichia coli - 102 КОЕ/мл.In the examination of the proposed method of amniotic fluid, Staphylococcus spp. - 10 2 CFU / ml; Escherichia coli - 10 2 CFU / ml, which indicates a risk of infection of the fetus with isolated infectious agents. When examining a newborn for the presence of intrauterine infection, the content in the oral cavity, auricles and inner surface of the eyelids is prescribed: Staphylococcus spp. - 10 2 CFU / ml; Escherichia coli - 10 2 CFU / ml.

Осложнение течения раннего неонатального периода: внутриутробная пневмония.Complications of the course of the early neonatal period: intrauterine pneumonia.

Таким образом, предлагаемый способ следует считать малоинвазивным, специфичным и достоверным. Использование предложенного способа позволит своевременно и рационально принять меры по борьбе с реализацией инфекции путем принятия мер по элиминации выявленных микроорганизмов, которые обуславливают развитие патологических заболеваний послеродового периода и периода новорожденности.Thus, the proposed method should be considered minimally invasive, specific and reliable. Using the proposed method will allow timely and rational to take measures to combat the implementation of infection by taking measures to eliminate identified microorganisms that cause the development of pathological diseases of the postpartum period and the neonatal period.

Claims (1)

Способ прогнозирования инфицирования новорожденных и родильниц, включающий отбор околоплодных вод под контролем УЗ-луча, исследование отобранных проб стандартизированными методиками на выявление качественного и количественного состава инфекционных агентов: бактерий - Streptococcus spp.; Peptostreptococcus spp.; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp.; Capnocytophaga spp.; Stomatococcus spp.; Bacterioides spp.; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp.; Clostridium spp., а также вирусов - adenovirus; parvovirus; cytomegalovirus; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza А, прогноз инфицирования новорожденных и родильниц выявленными инфекционными агентами, отличающийся тем, что околоплодные воды отбирают после преждевременного разрыва околоплодных оболочек при недоношенной беременности на сроке 22-36 нед. путем трансцервикальной вакуумной аспирации, для чего в полость матки вводят катетер, выполненный из эластичных материалов и состоящий из двух частей: наружная - интродьюсер, который служит для облегчения проникновения катетера через шейку матки, и внутренняя - сам капилляр в виде прозрачной трубки, заканчивающейся Luer-коннектором для прикрепление шприца типа Luer, при помощи которого создают отрицательное давление для отбора проб. A method for predicting infection of newborns and puerperas, including the selection of amniotic fluid under the control of an ultrasound beam, the study of selected samples using standardized methods to identify the qualitative and quantitative composition of infectious agents: bacteria - Streptococcus spp .; Peptostreptococcus spp .; Staphylococcus aureus; Gardenerella vaginalis; Peptococcus spp .; Capnocytophaga spp .; Stomatococcus spp .; Bacterioides spp .; Enterococcus faecalis; Neisseria gonorrhea; Escherichia coli; Lactobacillus spp .; Clostridium spp., As well as viruses - adenovirus; parvovirus; cytomegalovirus; Epstein-Barr virus; herpes simplex virus; influenza A, prognosis of infection of newborns and puerperas with identified infectious agents, characterized in that the amniotic fluid is withdrawn after premature rupture of the amniotic membranes during premature pregnancy for a period of 22-36 weeks. by transcervical vacuum aspiration, for which a catheter made of elastic materials and consisting of two parts is inserted into the uterine cavity: the external is an introducer, which serves to facilitate the penetration of the catheter through the cervix, and the internal is the capillary itself in the form of a transparent tube ending with Luer- a connector for attaching a Luer syringe, by means of which negative pressure is created for sampling.
RU2010133012/15A 2010-08-05 2010-08-05 Method of predicting infection of newborn babies and puerperants RU2449277C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010133012/15A RU2449277C2 (en) 2010-08-05 2010-08-05 Method of predicting infection of newborn babies and puerperants

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010133012/15A RU2449277C2 (en) 2010-08-05 2010-08-05 Method of predicting infection of newborn babies and puerperants

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2010133012A RU2010133012A (en) 2012-02-10
RU2449277C2 true RU2449277C2 (en) 2012-04-27

Family

ID=45853306

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010133012/15A RU2449277C2 (en) 2010-08-05 2010-08-05 Method of predicting infection of newborn babies and puerperants

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2449277C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2495429C1 (en) * 2012-07-04 2013-10-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН Method for prediction of intrauterine a(h3n2) influenza infection in females in second trimester of gestation with threatening miscarriage

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Инфекции в акушерстве и гинекологии: Практическое руководство. / Под ред. проф. Чайки В.К. - Донецк: ООО «Альматео», 2006, с.640. Чешик С.Г. и др. Внутриутробная цитомегаловирусная инфекция. Методические рекомендации. №12. - М., 2001. ШИЛОВА С.Д. Хориоамнионит. Медицинская панорама. №8, сентябрь, 2004. найдено из БД Интернет: http://www.plaintest.com/obstetrics/chorioamnionitis. СТРЕЛЬСКАЯ О.В. Прогнозирование перинатальных исходов на основе особенностей течения беременности, родов и инфицированных родовых путей, плаценты, амниотической жидкости и новорожденного: Автореф. - Барнаул, 2007. ЗУБКОВ М.Н. Сбор биологического материала на бак. Исследования. Лабораторная диагностика. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2004, т.6, №2, с.151. Медицинские изделия и лабораторное оборудование. Vogt Medical. Каталог. 2005-2005, с.17, 29. Аборты. Способы их совершения. Последствия. Статистика. 05.01.2006. Медицина и статистика. Найдено из БД Интернет: http://www.noabort.net/node/ *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2495429C1 (en) * 2012-07-04 2013-10-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН Method for prediction of intrauterine a(h3n2) influenza infection in females in second trimester of gestation with threatening miscarriage

Also Published As

Publication number Publication date
RU2010133012A (en) 2012-02-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Nielsen Endometritis in the mare: a diagnostic study comparing cultures from swab and biopsy
BRPI0615678A2 (en) method to diagnose infections
Hollander Diagnosis of chorioamnionitis
Maxwell et al. Transabdominal chorionic villus sampling
Folgosa et al. A case control study of chorioamniotic infection and histological chorioamnionitis in stillbirth
Dietrich et al. Urogenital tract infections in pregnancy at King Edward VIII Hospital, Durban, South Africa.
Adu-Addai et al. Importance of infectious bovine reproductive diseases: an example from Ghana
RU2449277C2 (en) Method of predicting infection of newborn babies and puerperants
Teixeira-Soares et al. Comparison between gynecological examination methods and sample collection techniques for the diagnosis of endometritis in subfertile mares
RU2739123C1 (en) Method for prediction of risk of prenatal outflow of amniotic fluid in term of full-term pregnancy
Horger III et al. Diagnostic use of amniotic fluid
Kruip et al. Lack of association of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis with oocytes and embryos from moderate shedders of the pathogen
RU2110800C1 (en) Method for earlier diagnostics of intrauterine infection
Eckert et al. Histologic endometritis in asymptomatic human immunodeficiency virus–infected women: characterization and effect of antimicrobial therapy
LeBlanc How to perform and interpret findings from a low-volume uterine flush.
EP1395670B1 (en) Determining endometrial status by testing menstruation tissue
Cavaliere et al. Cervico-vaginal Chlamydia trachomatis infection in pregnant adolescent and adult women: A morphologic and immunofluorescent study
Atacag et al. Asymptomatic bacteriuria screened by catheterized samples at pregnancy term in women undergoing cesarean delivery
Ali et al. Molecular detection of cytomegalovirus (CMV) and presence of bacterial infection in aborted women
Hawel et al. Immunological Diagnosis for Trichomonasis in Women in Al-Muthanna Province
RU2636623C1 (en) Tongue root microbiome as prognostic model of disbiotic state of genital tract in pregnant women
CN204142733U (en) Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum and mycoplasma hominis combined detection kit
UA16184U (en) Method for diagnosing tuberculous lesions of female genitalia
Khotivari et al. SINGLE HOSPITAL STUDY FOR DETERMINE PREVALENCE OF ASYMPTOMATIC BACTERIURIA IN PREGNANT WOMEN IN TSMU OB/GYN DEPARTMENT DURING
Mukherjee et al. Genital Tuberculosis and Infertility

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20161108

PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20171122

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180806